一种球虫疫苗的吸附拌料免疫方法与流程

本发明涉及动物的免疫技术领域，特别涉及一种球虫疫苗的吸附拌料免疫方法。

背景技术：

鸡球虫病是威胁养鸡业发展的一种重要疾病，其主要危害3月龄以内的雏鸡，对养育成鸡的危害十分严重，死亡率高，病愈鸡生长缓慢，发育不良，增重、产蛋受到严重影响，且易引起其它疾病的发生，给养鸡业带来很大的经济损失，已经成为阻碍养鸡场发展的重要疾病之一。

目前鸡球虫病的预防仍然以抗球虫药物为主，然而，随着长期不规范使用抗球虫药物，球虫产生耐药性以及食品药物残留等问题日益凸出，新药研发进展缓慢。目前已有鸡球虫病疫苗研制成功上市，因其使用方法快捷且保护效果优良而深受市场欢迎。随着绿色畜牧业的到来，使用鸡球虫病疫苗免疫预防鸡球虫病是大势所趋。疫苗免疫方法包括喷羽毛、滴眼睛、胚蛋注射、拌（喷）料、混饮和滴口等方法。其中拌料免疫和混饮免疫具有操作简单、对鸡群应激小、劳动强度低等优点，而喷羽毛免疫法浪费疫苗且需要特定喷雾设备，滴眼睛、胚蛋注射和滴口的免疫方法需逐羽进行，劳动强度大，人工成本高。然而，目前只有混饮免疫方法广泛应用于鸡球虫病免疫预防，拌料免疫存在免疫均匀性差的问题，一方面是由于疫苗是水溶液，喷到饲料时马上被吸附，没有流动性，要搅拌均匀不容易；另一方面由于饲料要维持其颗粒性状，水分含量极低，而球虫卵囊的存活需要适宜的湿度，若长时间附着在缺水的饲料上，容易造成疫苗部分失活，难以保证免疫效果。因此，拌料免疫尚未得到很好地推广应用。

可见，现有技术还有待改进和提高。

技术实现要素：

鉴于上述现有技术的不足之处，本发明的目的在于提供一种球虫疫苗的吸附拌料免疫方法，旨在解决现有技术中鸡球虫病免疫预防中拌料免疫的免疫均匀性差，得不到广泛应用的问题。

为了达到上述目的，本发明采取了以下技术方案：

一种球虫疫苗的吸附拌料免疫方法,包括以下步骤：

a.称料：根据免疫羽鸡的数量，按照饲料∶吸附剂∶疫苗稀释液=（10～40）∶（1～4）∶（1.5～6）的重量比称料；

b.疫苗的稀释：取1000羽份/瓶的球虫疫苗,1瓶疫苗用0.2～0.6l的疫苗稀释液稀释，将所述球虫疫苗摇匀后倒入步骤a中称量好的疫苗稀释液中，反复搅拌至均匀；

c.混料：将步骤b中稀释好的疫苗液缓慢倒入装有步骤a中称量好的吸附剂的桶中，一边倒一边搅拌桶中的物料，直至吸附剂与疫苗液完全混合均匀；

d.拌料：将步骤a中称取的饲料和步骤c中的疫苗液与吸附剂的混合物搅拌均匀，直至肉眼未见团块；

e.免疫：将步骤d中混合均匀的饲料混合物投喂鸡群。

所述的球虫疫苗的吸附拌料免疫方法，其中，所述的步骤a中的吸附剂包括木粉、锯末粉、木屑、秸秆、玉米芯。

所述的球虫疫苗的吸附拌料免疫方法，其中，所述的步骤a中的吸附剂中还包括食用色素、维生素、助悬剂或矿物质的一种或多种。

所述的球虫疫苗的吸附拌料免疫方法，其中，所述的步骤a中的疫苗稀释液为饮用水。

所述的球虫疫苗的吸附拌料免疫方法，其中，所述的步骤d中的拌料为手工拌料或机械拌料。

所述的球虫疫苗的吸附拌料免疫方法，其中，所述的手工拌料为将步骤a中称取的饲料和步骤c中的疫苗液与吸附剂的混合物徒手或用铲子反复翻动与搅拌至肉眼未见团块。

所述的球虫疫苗的吸附拌料免疫方法，其中，所述的机械拌料为将步骤a中称取的饲料和步骤c中的疫苗液与吸附剂的混合物倒入搅拌机中，搅拌至肉眼未见团块。

所述的球虫疫苗的吸附拌料免疫方法，其中，所述的步骤e为将步骤d中混合均匀的饲料混合物按照每100～300羽鸡一个料盘或料槽分装，放置鸡舍投喂鸡群。

有益效果：

本发明提供了一种球虫疫苗的吸附拌料免疫方法，通过将具有可食性、空隙大、吸水能力强且容易分散的吸附剂与球虫疫苗混合，使卵囊有效地吸附在吸附剂上，附着卵囊的吸附剂与饲料搅拌均匀后供鸡食用而得以免疫，能很好地解决拌料免疫均匀性差的问题，该方法操作简单，对鸡群的应激小，劳动强度低，适合广泛地应用在球虫疫苗的免疫上。

附图说明

图1为本发明提供的一种球虫疫苗的吸附拌料免疫方法的流程图。

具体实施方式

本发明提供一种球虫疫苗的吸附拌料免疫方法，为使本发明的目的、技术方案及效果更加清楚、明确，以下参照附图并举实施例对本发明进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。

请参阅图1，本发明提供一种球虫疫苗的吸附拌料免疫方法,包括以下步骤：

a.称料：根据免疫羽鸡的数量，按照饲料∶吸附剂∶疫苗稀释液=（10～40）∶（1～4）∶（1.5～6）的重量比称料；

b.疫苗的稀释：取1000羽份/瓶的球虫疫苗,1瓶疫苗用0.2～0.6l的疫苗稀释液稀释，将所述球虫疫苗摇匀后倒入步骤a中称量好的疫苗稀释液中，反复搅拌至均匀；

c.混料：将步骤b中稀释好的疫苗液缓慢倒入装有步骤a中称量好的吸附剂的桶中，一边倒一边搅拌桶中的物料，直至吸附剂与疫苗液完全混合均匀；混合前的疫苗稀释液必须要搅拌均匀，避免卵囊在疫苗稀释液中沉淀造成与吸附剂混合不均匀，影响免疫的均匀性；

d.拌料：将步骤a中称取的饲料和步骤c中的疫苗液与吸附剂的混合物搅拌均匀，直至肉眼未见团块；

e.免疫：将步骤d中混合均匀的饲料混合物投喂鸡群；在免疫前的阶段，鸡只正常地喂食和饮水，禁止控食控水影响免疫效果。

采用上述的吸附拌料免疫方法，通过先将疫苗液吸附在吸附剂上，再将疫苗液和吸附剂的混合物与饲料混合均匀之后进行免疫喂养；有效地解决了拌料免疫难以达到均匀免疫的问题。

具体地，所述的步骤a中的吸附剂包括木粉、锯末粉、木屑、秸秆、玉米芯；所述木粉包括松木、杨木、檀香等木材的粉末，本实施例中，采用上述吸附剂中的一种或几种，且不限于上述所列举出的；本实施例中所采用的吸附剂均具有可食性、空隙大、吸水能力强，能够快速均匀地吸附疫苗液，并保持一定的湿润性，保证了球虫卵囊的生存条件，并且所述吸附剂容易分散，能够很好地分散在饲料中，保证免疫的均匀性。

进一步地，所述的步骤a中的吸附剂中还包括食用色素、维生素、助悬剂或矿物质的一种或多种；本实施例中优选添加少量的胭脂红作为指示剂，能够更好地反应出吸附剂与饲料混合的均匀性，并且胭脂红适量的添加是符合食品卫生标准的要求，不会造成食源性污染。

具体地，所述的步骤a中的疫苗稀释液为饮用水；饮用水中的细菌含量比较少，防止水中微生物对免疫效果的不利影响。

进一步地，所述的步骤d中的拌料为手工拌料或机械拌料；手工拌料易于实施，不需要任何器械，适合小规模的养殖需求；机械拌料效率高，节约时间，均匀性好，适合大型农场的需求；在实施过程中，可根据需求选择不同的拌料方式。

具体地，所述的手工拌料为将步骤a中称取的饲料和步骤c中的疫苗液与吸附剂的混合物徒手或用铲子反复翻动与搅拌至肉眼未见团块。

具体地，所述的机械拌料为将步骤a中称取的饲料和步骤c中的疫苗液与吸附剂的混合物倒入搅拌机中，搅拌至肉眼未见团块。

优选地，所述的步骤e为将步骤d中混合均匀的饲料混合物按照每100～300羽鸡一个料盘或料槽分装，放置鸡舍投喂鸡群；保证了鸡群都能得到规定的采食量的同时又不浪费喂养空间；本实施例中优选每羽鸡采食1.25g的饲料与疫苗液、吸附剂的混合物，此采食量达到了最好的免疫效果。

本发明的具体试验过程为：

（1）试验分组及处理

取3日龄黄羽鸡60只，随机分成3组，每组20只，设置第1组为拌料免疫组（手工拌料），第2组为吸附拌料免疫组（手工拌料），第3组为吸附拌料免疫组（机械拌料），各组鸡于3日龄分别饲喂上述搅拌均匀的各组别的饲料进行免疫，1.25g/只，1羽份/只，各组免疫摄食所需时间分别为拌料免疫组（手工拌料）0.5小时，吸附拌料免疫组（手工拌料）1小时，吸附拌料免疫组（机械拌料）1小时，各组分别采用笼上饲养，具体见表1所示。

表1试验的分组与处理

（2）试验观察项目

免疫均匀性：随机分别取上述每组于免疫后6～7天5只鸡的粪便，单独检测每只鸡的小肠粪和盲肠粪的卵囊数，计数卵囊的检出率。

卵囊opg值（每克粪便含卵囊的个数）的计算：每组取盲肠粪和小肠粪，按1:4的比例混合后，用麦氏计数板法计粪便的卵囊opg值。

下面提供的实施例中所使用的球虫疫苗均选自佛山市正典生物技术有限公司的鸡球虫病三价活疫苗（1000羽份/瓶），许可证号：（2016）兽药生产证字19046号；值得说明的是本发明的方案适用于防治球虫病的所有疫苗，并不局限于本发明实施例中所使用的所述鸡球虫病三价活疫苗。

实施例1

根据拌料方法和饲料混合物的不同组成，分三组试验处理，所述三个试验组为：

①拌料免疫组（手工拌料）：取10瓶所述球虫疫苗稀释在1l的饮用水中，搅拌均匀后缓慢地倒入到11.5kg的饲料中，一边倒入球虫疫苗稀释液一边搅拌饲料混合物，反复翻动和搅拌，拌至肉眼未见团块。

②吸附拌料免疫组（手工拌料）：取10瓶所述球虫疫苗稀释在2l饮用水中，搅拌均匀，稀释好的疫苗液缓慢倒入装有1kg吸附剂的桶中，一边倒一边搅拌桶中的物料，直至吸附剂与疫苗液完全混合均匀，再称取9.5kg的饲料和疫苗液与吸附剂的混合物用铲子反复翻动与搅拌至肉眼未见团块。

③吸附拌料免疫组（机械拌料）：取10瓶所述球虫疫苗稀释在2l饮用水中，搅拌均匀，稀释好的疫苗液缓慢倒入装有1kg吸附剂的桶中，一边倒一边搅拌桶中的物料，直至吸附剂与疫苗液完全混合均匀，再称取9.5kg的饲料和疫苗液与吸附剂的混合物倒入搅拌机中，搅拌至肉眼未见团块。

将上述三组拌料方法的饲料混合物喂养鸡只，整个试验过程中鸡只精神状况良好，饮食正常，免疫后6～7天分别检测各组鸡的免疫原性，检测结果如表2～表8所示。

表2拌料免疫组（手工拌料）免疫后第6天的免疫原性检测结果

注：opg值为显微镜下麦氏计数板卵囊读数乘以100。

表3吸附拌料免疫组（手工拌料）免疫后第6天的免疫原性检测结果

表4吸附拌料免疫组（机械拌料）免疫后第6天的免疫原性检测结果

表5拌料免疫组（手工拌料）免疫后第7天的免疫原性检测结果

表6吸附拌料免疫组（手工拌料）免疫后第7天的免疫原性检测结果

表7吸附拌料免疫组（机械拌料）免疫后第7天的免疫原性检测结果

表8各组卵囊opg值及检出率

由表2～表8可知，拌料免疫组（手工拌料）、吸附拌料免疫组（手工拌料）、吸附拌料免疫组（机械拌料）三个组中鸡的小肠粪和盲肠粪的卵囊检出率均为100%，且排出的卵囊量都符合首次免疫后卵囊排出规律和数值范围，从上述各虫种卵囊检测数据看，免疫后6天为巨型的排卵囊高峰期，免疫后6～7天为柔嫩的排卵囊高峰期，这符合疫苗卵囊的循环规律。但是由于鸡个体存在差异，所示单只鸡的数据也会有相应的差异。吸附拌料免疫组（手工拌料）和吸附拌料免疫组（机械拌料）混合粪样卵囊排泄量相当，吸附拌料免疫的免疫均匀性良好，满足鸡球虫病活疫苗的应用。

实施例2

根据拌料方法和饲料混合物的不同组成，分三组试验处理，所述三个试验组为：

①拌料免疫组（手工拌料）：取10瓶所述球虫疫苗稀释在2l的饮用水中，搅拌均匀后缓慢地倒入到32kg的饲料中，一边倒入球虫疫苗稀释液一边搅拌饲料混合物，反复翻动和搅拌，拌至肉眼未见团块。

②吸附拌料免疫组（手工拌料）：取10瓶所述球虫疫苗稀释在4l饮用水中，搅拌均匀，稀释好的疫苗液缓慢倒入装有2kg吸附剂的桶中，一边倒一边搅拌桶中的物料，直至吸附剂与疫苗液完全混合均匀，再称取28kg的饲料和疫苗液与吸附剂的混合物用铲子反复翻动与搅拌至肉眼未见团块。

③吸附拌料免疫组（机械拌料）：取10瓶所述球虫疫苗稀释在4l饮用水中，搅拌均匀，稀释好的疫苗液缓慢倒入装有2kg吸附剂的桶中，一边倒一边搅拌桶中的物料，直至吸附剂与疫苗液完全混合均匀，再称取28kg的饲料和疫苗液与吸附剂的混合物倒入搅拌机中，拌至肉眼未见团块。

将上述三组拌料方法的饲料混合物喂养鸡只，整个试验过程中鸡只精神状况良好，饮食正常，免疫后6～7天分别检测各组鸡的免疫原性，三个组中鸡的小肠粪和盲肠粪的卵囊检出率均为100%，且排出的卵囊量都符合首次免疫后卵囊排出规律和数值范围，吸附拌料免疫组（手工拌料）和吸附拌料免疫组（机械拌料）混合粪样卵囊排泄量相当，吸附拌料免疫的免疫均匀性良好，满足鸡球虫病活疫苗的应用。

实施例3

根据拌料方法和饲料混合物的不同组成，分三组试验处理，所述三个试验组为：

①拌料免疫组（手工拌料）：取10瓶所述球虫疫苗稀释在2.3l的饮用水中，搅拌均匀后缓慢地倒入到38kg的饲料中，一边倒入球虫疫苗稀释液一边搅拌饲料混合物，反复翻动和搅拌，拌至肉眼未见团块。

②吸附拌料免疫组（手工拌料）：取10瓶所述球虫疫苗稀释在2.5l饮用水中，搅拌均匀，稀释好的疫苗液缓慢倒入装有2.8kg吸附剂的桶中，一边倒一边搅拌桶中的物料，直至吸附剂与疫苗液完全混合均匀，再称取35kg的饲料和疫苗液与吸附剂的混合物用铲子反复翻动与搅拌至肉眼未见团块。

③吸附拌料免疫组（机械拌料）：取10瓶所述球虫疫苗稀释在2.5l饮用水中，搅拌均匀，稀释好的疫苗液缓慢倒入装有2.8kg吸附剂的桶中，一边倒一边搅拌桶中的物料，直至吸附剂与疫苗液完全混合均匀，再称取35kg的饲料和疫苗液与吸附剂的混合物倒入搅拌机中，拌至肉眼未见团块。

将上述三组拌料方法的饲料混合物喂养鸡只，整个试验过程中鸡只精神状况良好，饮食正常，免疫后6～7天分别检测各组鸡的免疫原性，三个组中鸡的小肠粪和盲肠粪的卵囊检出率均为100%，且排出的卵囊量都符合首次免疫后卵囊排出规律和数值范围，吸附拌料免疫组（手工拌料）和吸附拌料免疫组（机械拌料）混合粪样卵囊排泄量相当，吸附拌料免疫的免疫均匀性良好，满足鸡球虫病活疫苗的应用。

实施例4

根据拌料方法和饲料混合物的不同组成，分三组试验处理，所述三个试验组为：

①拌料免疫组（手工拌料）：取10瓶所述球虫疫苗稀释在4.5l的饮用水中，搅拌均匀后缓慢地倒入到43.5kg的饲料中，一边倒入球虫疫苗稀释液一边搅拌饲料混合物，反复翻动和搅拌，拌至肉眼未见团块。

②吸附拌料免疫组（手工拌料）：取10瓶所述球虫疫苗稀释在6l饮用水中，搅拌均匀，稀释好的疫苗液缓慢倒入装有4kg吸附剂的桶中，一边倒一边搅拌桶中的物料，直至吸附剂与疫苗液完全混合均匀，再称取39kg的饲料和疫苗液与吸附剂的混合物用铲子反复翻动与搅拌至肉眼未见团块。

③吸附拌料免疫组（机械拌料）：取10瓶所述球虫疫苗稀释在6l饮用水中，搅拌均匀，稀释好的疫苗液缓慢倒入装有4kg吸附剂的桶中，一边倒一边搅拌桶中的物料，直至吸附剂与疫苗液完全混合均匀，再称取39kg的饲料和疫苗液与吸附剂的混合物倒入搅拌机中，拌至肉眼未见团块。

将上述三组拌料方法的饲料混合物喂养鸡只，整个试验过程中鸡只精神状况良好，饮食正常，免疫后6～7天分别检测各组鸡的免疫原性，三个组中鸡的小肠粪和盲肠粪的卵囊检出率均为100%，且排出的卵囊量都符合首次免疫后卵囊排出规律和数值范围，吸附拌料免疫组（手工拌料）和吸附拌料免疫组（机械拌料）混合粪样卵囊排泄量相当，吸附拌料免疫的免疫均匀性良好，满足鸡球虫病活疫苗的应用。

综上所述，本发明提供了一种球虫疫苗的吸附拌料免疫方法，通过将具有可食性、空隙大、吸水能力强且容易分散的吸附剂与球虫疫苗混合，使卵囊有效地吸附在吸附剂上，附着卵囊的吸附剂与饲料搅拌均匀后供鸡食用而得以免疫，能很好地解决拌料免疫均匀性差的问题，该方法操作简单，对鸡群的应激小，劳动强度低，适合广泛地应用在球虫疫苗的免疫上。

可以理解的是，对本领域普通技术人员来说，可以根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，而所有这些改变或替换都应属于本发明所附的权利要求的保护范围。