专利名称：一种治疗鸡球虫病中草药制剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种兽用中草药制剂，特别涉及一种治疗鸡球虫病中草药制剂，属于兽药技术领域。
背景技术：
鸡球虫病是养鸡生产中较为常发的一种条件性疾病，其致病原主要为柔嫩艾美尔球虫、毒害艾美尔球虫卵感染，多发生在高温高湿季节和圈舍潮湿、场地污染较重的鸡场。 根据其寄生的部位不同，临床上可分为小肠球虫(毒害艾美尔球虫)和盲肠球虫(柔嫩艾美尔球虫)感染，在发病过程中，往往与大肠杆菌、沙门氏菌等肠道致病菌继发感染相并存，鸡群在不同的日龄段，不同生产环境条件下其发生的频率、时间以及临床病症表现均存在较大差异。盲肠球虫发生时，主要表现为鸡盲肠急性大量出血，拉鲜红色或酱红色稀便， 当继发大肠杆菌、沙门氏菌混合感染时，拉红黄或红白相间的稀便，如处理不及时，易造成鸡群急性大面积死亡；小肠球虫发生时，主要表现为鸡十二指肠、小肠发生急性、坏死性炎症，鸡群生长迟缓，出现渐进性消瘦和散发性死亡。长期以来，磺胺类、氨丙啉、马杜拉霉素等抗生素及化药是防治该病的常用药品，具有较强的耐药性和抗生素残留，给食品安全生产带来潜在的危害。近年来，我们运用中草药筛选方法对鸡球虫感染的防治进行了相应的防治研究，拟寻求毒副作用小、残毒低、不易产生耐药、具有较好疗效的兽用中草药制剂。
发明内容
本发明的目的在于提供一种对鸡大肠杆菌CVCC-245致病菌株有明显的抑制作用；鸡球虫卵人工感染防治实验有效率为94. 17 99. 17%，田间应用推广试验有效率为 95. 1%，其应用具有显著的防治效果及使用安全性的治疗鸡球虫病中草药制剂。本发明是这样实现的治疗鸡球虫病中草药制剂的配方组成青蒿40_80g、常山 30-70g、勾藤10-40g、使君子25-65g、仙鹤草30_70g、焦地榆30_70g、苍术15_35g、黄连 15-35g、黄柏20-40g、焦桅子20-40g、穿心连20_40g、紫花地丁 15_35g、陈皮20_40g、甘草 10_30g。优选的，优选后的治疗鸡球虫病中草药制剂的配方组成青蒿60g、常山50g、 勾藤30g、使君子45g、仙鹤草50g、焦地榆50g、苍术25g、黄连25g、黄柏30g、焦桅子30g、穿心连30g、紫花地丁 25g、陈皮30g、甘草20g。将以上原料药粉粹、80目过筛、混合均匀，封装密闭。用法及用量用法拌料自由采饲；治疗量500g拌料250kg ;预防量减半使用。本发明制剂主要用于鸡球虫卵感染引起以鸡盲肠急性大量出血，
拉鲜红色、酱红色或红黄相间的血色稀便，以及以小肠充气、肠壁变薄、拉西红柿样或食糜样稀便为主要临床病理特征的鸡球虫病。对同时继发的大肠杆菌肠道混合感染也有较好的防治作用。本实验研究经过鸡柔嫩艾美尔球虫卵感染发病治疗、体外抑菌，实验动物药物急性及慢性毒理、理化测定、田间应用推广防治试验等一系列实验研究表明对鸡大肠杆菌CVCC-245菌株有明显的抑制作用；鸡球虫卵人工感染防治实验有效率为94. 17 99. 17%，田间应用推广试验有效率为95. 1%。其组方药物筛选严格遵循中兽医医学“标本兼治”的防治理论，充分兼顾了养鸡生产中鸡球虫病的临床病理特性，其应用具有显著的防治效果及使用安全性。具有杀虫、止血、化湿健脾、涩肠止泻之功效。、试验材料
本发明制剂商品名称“球虫血痢散”。I. I实验药物及组方
“球虫血痢散”组方主要药物成分青蒿、常山、使君子、仙鹤草、焦地榆、苍术、黄连、黄柏、焦桅子、穿心连、紫花地丁、陈皮、甘草等。I. 2实验菌株鸡大肠杆菌CVCC-245菌株购自中国兽医药品监察所；柔嫩艾美尔球虫卵为贵州省畜牧兽医研究所原寄生虫研究室保存。I. 4实验动物35日龄杂交肉鸡480只，体重400g±25g
1.5急性、亚急性毒性实验动物昆明小白鼠40只(公、母各20只)，SD大鼠32只(公、 母各16只)，由贵阳医学院实验动物室提供。I. 6实验用培养基及试剂肉汤、伊红美蓝、麦康凯、饱和盐水、2. 5%重铬酸钾液。、实验内容及方法
2.I细菌培养用伊红美蓝、麦康凯选择性培养基经37°C 24h将CVCC245菌株进行培养复壮，再接种于肉汤培养基中扩大培养。2. 2体外抑菌实验将制剂煎熬浓缩成Ig生药/ml的药物浓度制剂作环形抑菌纸片(直径3mm)，在普通平板上进行抑菌培养24h，观察CVCC-245菌株的生长情况，如抑菌圈直径大于5 6mm判为有效。2. 3实验动物分组设实验组4个，即方剂预防组I个、方剂治疗组I个、化药治疗组I个、观察对照组I个；每组实验鸡只数量为120只。2. 4感染发病实验
2.4. I卵囊孵育取柔嫩艾美尔球虫卵用2. 5%重铬酸钾液，28°C恒温培养，每日搅拌 3 5次，当有80 85%以上的卵囊发育为孢子化卵囊时，收集卵囊保存备用。2. 4. 2温湿度调控将实验鸡群舍内温度控制保持在25-28. 5°C ;垫料人工喷湿， 将实验鸡群舍内湿度控制保持在75-80%。2. 4. 3感染发病判断标准将孵育后的孢子化卵囊液500ml按I :30加入到各实验组鸡群饮水中2 3小时一次性饮用，经饲养观察，待鸡群出现拉鲜红色或红白色稀便，临床发病率达12-15%时为实验标准。2. 4. 4鸡粪便球虫卵检测计数运用群体采样法分别从各实验组采集50-60只鸡粪，将每组鸡粪分别混合，置冰箱4°C保存备用。各组取15g鸡粪，分别加入80 ml水搅拌均匀后60目铜筛过滤，移入IOml离心管，3000r/min离心沉淀；在沉淀物中加满饱和盐水， 在离心管口覆盖盖玻片，静置漂浮20min后，取下盖玻片放在载玻片上，置显微镜下100倍观察虫卵并计数。随机计数各组粪样的6个视野，取卵囊总数的平均值作为感染强度，无卵囊者为“ 一，，，I 3个卵囊者为“ +，，，4 6个卵囊者为“ + + ”，8 12个以上卵囊者为 “ + + + ”，13个以上卵囊者为“ + + + + ”。各实验组分别在感染发病前、防治前、防治后检测计数一次。
2. 5防治实验
2.5. I治疗用药剂量及方法待实验鸡群发病后，对第一、第二实验组用制备的“球虫血痢散”中草药粉剂(80目过筛)按每日每公斤体重2g拌料自由采饲，连续使用6d;对第三实验组用10%磺胺喹噁啉钠(河南安邦药业有限公司生产)按每日IOOg兑水125 kg自由饮用，连用6d ;第四实验组不用药，为观察对照组。2. 4急性、亚急性毒性药理试验根据国家《中药天然药物长期毒性研究指导原则》，用II级实验动物昆明小白鼠、大鼠(SD品系)制定急性毒性试验(MTD)和反复给药毒性试验，以最大程度暴露其药物毒性，对其凝血系统指标、血液生化指标以及各主要器脏病理组织学变化等检查。2. 5理化测定实验将“球虫血痢散”中草药制剂委托贵州师范大学分析测试中心依据5337-2008\JY/T023-1996进行铅、镉、汞、砷、铜等主要重金属元素的测定。2. 6田间应用推广试验在贵州省贵阳、遵义、黔南、黔东南、安顺、六盘水等地区的部分养鸡场进行鸡大球虫病的生产预防和临床治疗应用推广试验。、实验结果
3.I抑菌实验抑菌圈直径均在4. 8 6. 6mm之间。3. 2药物防治实验结果见表I。附表I :
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注方剂预防组为先用实验方剂预防处理7d后进行人工感染实验。3. 3急性、亚急性毒性药理试验
3. 4理化测定分析见表2。附表2
权利要求
1.一种治疗鸡球虫病中草药制剂，其特征在于它是由以下原料药组成的青蒿 40-80g、常山30-70g、勾藤10-40g、使君子25-65g、仙鹤草30-70g、焦地榆30-70g、苍术 15-35g、黄连15-35g、黄柏20_40g、焦桅子20_40g、穿心连20_40g、紫花地丁 15_35g、陈皮 20-40g、甘草 10-30g。
2.根据权利要求I所述的一种治疗鸡球虫病中草药制剂，其特征在于它是由以下原料药组成的青蒿60g、常山50g、勾藤30g、使君子45g、仙鹤草50g、焦地榆50g、苍术25g、 黄连25g、黄柏30g、焦桅子30g、穿心连30g、紫花地丁 25g、陈皮30g、甘草20g。
全文摘要
本发明公开了一种治疗鸡球虫病中草药制剂，它是由青蒿、常山、勾藤、使君子、仙鹤草、焦地榆、苍术、黄连、黄柏、焦栀子、穿心连、紫花地丁、陈皮、甘草配制而得，本发明制剂对鸡大肠杆菌CVCC-245菌株有明显的抑制作用；鸡球虫卵人工感染防治实验有效率为94.17～99.17%，田间应用推广试验有效率为95.1%，其应用具有显著的防治效果及使用安全性。具有杀虫、止血、化湿健脾、涩肠止泻之功效。
文档编号A61P31/04GK102579697SQ20121008298
公开日2012年7月18日 申请日期2012年3月27日 优先权日2012年3月27日
发明者任荣清, 文正常, 杨粤黔, 潘淑惠, 高明琴 申请人:贵州省畜牧兽医研究所