本发明涉及淡水鱼饲料添加剂
技术领域：
，尤其是涉及增强免疫力的淡水鱼饲料添加剂的制备方法。
背景技术：
我国淡水鱼类约有800余种。其中，鲤科属种最多，有400余种，约占全部淡水鱼的二分之一；鲶科和鳅科的属种也不少，两科共有200余种，约占全部淡水鱼的四分之一。在我国的淡水鱼中，有些种类分布很广，几乎到处可见。如以水草为主要食料的草鱼、鳊鱼、三角鲂、赤眼鳟等；以浮游生物为食的鲢、鳙等；杂食性的鲤、鲫等；其他如花、麦穗鱼、银鲴、棒花鱼、黄鳝、白鳝、花鳅、泥鳅、鲶鱼以及常见凶猛鱼类乌鳢、鳜鱼、鳡等；此外还有性情温和的肉食性鱼类翘嘴红鲌、蒙古红鲌和青鱼等。现在市场使用的饲料添加剂，除了氨基酸、维生素、微量元素等营养性添加剂外，大多还含有促生长剂、抗生素、其他化学合成类抗菌药物及合成防腐剂，他们配合饲料使用，对提高动物生产力水平、抗病能力及免疫力具有重要的作用。然而，目前市场上一些非营养性药物添加剂有其不足之处，如果长期使用，很容易使病原菌株产生抗药性，易导致药物残留量增加，会对饲养动物有一定的危害。研究开发无污染、无残留、绿色安全、不产生抗药性的饲料添加剂已经成为了研究的热点问题，也是未来饲料行业发展的趋势。因此开发一种天然、营养、毒副作用小的添加剂来提高淡水鱼的免疫力显得尤为的重要，不仅能减少抗生素的使用，保护人类健康，还能减少淡水鱼发病率，降低养殖风险，有利于促进饲料和海洋渔业健康有序的发展，对提高养殖效益，降低养殖风险具有重要意义。现有技术如授权公告号为cn101991026b的中国发明专利，公开了一种提高青鱼抗应激的免疫增强剂，以质量百分比计，包括党参多糖10～20％、板蓝根10～15％、黄芪多糖15～20％、芒果苷5～10％、刺梨多糖5～10％、维生素c0.5～5％、维生素e1～6％、次粉20～40％；该发明可作为饲料添加剂来弥补青鱼在应激状态所表现的不足，提高青鱼抗应激的能力，提高饲料利用率、降低饲料系数，减少应激所带来的伤害，增强青鱼机体免疫力、提高成活率；然而该发明饲料添加剂有效成分多为中草药，成本较高，不利于工业化生产的经济效益。技术实现要素：本发明的目的在于提供一种能够增强淡水鱼免疫力，提高淡水鱼养殖效益的淡水鱼饲料添加剂的制备方法；采用本发明制备得淡水鱼饲料添加剂具有绿色环保、成本低廉，提高淡水鱼机体酶活性增强抵抗力的优点。本发明针对上述技术中提到的问题，采取的技术方案为：增强免疫力的淡水鱼饲料添加剂，每100份由以下成分按重量份数组成：发酵芦荟8-15份、厚朴10-15份、凝结芽孢杆菌菌粉2-6份、乳酸片球菌菌粉3-5份、螺旋藻粉5-10份、松针粉2-5份、氨基酸1-3份、复合矿物质1-3份、复合维生素1-3份，其余为载体，载体为脱脂米糠，脱脂米糠预先粉碎过30-40目筛；芦荟、厚朴中的有效成分能够提高细胞免疫水平、杀菌抗病毒，帮助淡水鱼抵御病原菌的侵袭，绿色安全；乳酸菌能够调节并维持淡水鱼肠道内正常菌群，抑制肠道内腐败菌生长，提高机体免疫力，对水中的病原菌也有一定的抑制作用；螺旋藻粉蛋白含量高，易吸收，对动物各种疾病都具有显著调理功能，并且具有增强动物机体免疫力、抗疾病、促生长发育的作用；松针粉中氨基酸种类全面，能够改善饲料的蛋白质品质，还含有丰富的粗蛋白质、脂肪、微量元素和维生素等；添加的矿物质、氨基酸和维生素能够补充饲料中微量元素的不足；发酵芦荟的制备方法为：芦荟预处理：将新鲜的芦荟去杂烘干，粉碎过30-40目筛，得芦荟粉；将芦荟粉与复合酶按质量比20:1-1.3混匀，加入蒸馏水，蒸馏水的加入量为芦荟粉质量的3-5倍，蒸馏水中含占蒸馏水质量18-26％的4-甲基庚醇和3-5％的水杨酸苯酯，在50-55℃条件下回流提取1-2h，提取结束后直接烘干，得预处理芦荟粉，待用；复合酶由纤维素酶和淀粉酶按质量比4-6:1组成；4-甲基庚醇和水杨酸苯酯的特殊存在能够保持复合酶在反复加热、冷却回流过程中的活性稳定，从而有效提高芦荟多糖、维生素的提取率；同时能够作用于小部分的芦荟多糖细胞壁，使细胞壁疏松、破裂，减小传质阻力，利于被包裹在多糖细胞壁内的芦荟素的浸出，提高芦荟素的提取率；芦荟多糖、维生素以及芦荟素具有抗生素作用，且这种作用与西药抗生素不同，不会产生耐药性，对机体无毒副作用，因此可提高淡水鱼免疫力，增强抵抗力，提高淡水鱼机体中一些酶的活性，进而提高淡水鱼养殖效益；发酵菌种制备：将植物乳杆菌菌粉、纤维二糖乳杆菌菌粉和罗伊氏乳杆菌菌粉按质量比2-4:1-2:2-3混匀，得复合菌粉，其中植物乳杆菌菌粉中活菌数为1.5×108cfu/g、纤维二糖乳杆菌菌粉中活菌数为2.5×107cfu/g、罗伊氏乳杆菌菌粉中活菌数为1.5×107cfu/g；往复合菌粉中加入无菌水，无菌水的加入量为复合菌粉质量的8-10％，在35-40℃条件下培养12-24h，得发酵菌种；植物乳杆菌的活菌数较高，能大量的产酸，使水中的ph值稳定不升高，而且其产出的酸性物质能降解重金属，且在繁殖过程中能产出特有的乳酸杆菌素，乳酸杆菌素是一种生物型的防腐剂；罗伊氏乳杆菌常栖息于人和动物的肠道系统中，对人和动物无害，具有良好的生物相容性，它代谢甘油产生的罗伊氏素是一种重要的抑菌物质；发酵芦荟制备：将预处理芦荟粉和发酵菌种按质量比45:1-3混合，加入无菌水，无菌水的加入量为预处理芦荟粉质量的25-30％，无菌水含占无菌水质量0.05-0.08％的核黄素和0.3-0.6％的茶多酚，搅拌均匀，发酵24-36h，发酵温度为35-40℃，得发酵产物，将发酵产物烘干粉碎过50-60目筛，即得发酵芦荟；无菌水中微量的核黄素和茶多酚发挥协同作用，一方面对发酵菌种起着保护作用，能促进发酵菌种的生长和繁殖，同时抑制有害细菌的侵染；另一方面能够有效控制发酵菌种的代谢机制，促进微生物产生酶、酸、多糖等保健成分，改善淡水鱼调节其肠道菌群，有利于淡水鱼健康生长，同时促进芦荟纤维素、淀粉分解成小分子糖类，蛋白质分解成氨基酸等，提高淡水鱼对发酵过程中产生的营养成分的吸收，增强淡水鱼的免疫功能；增强免疫力的淡水鱼饲料添加剂的制备方法为：将发酵芦荟、厚朴、凝结芽孢杆菌菌粉、乳酸片球菌菌粉、螺旋藻粉、松针粉、氨基酸、复合矿物质、复合维生素混合粉碎过40-50目筛，再与载体混合即可。本发明的饲料添加剂可以显著提高淡水鱼的免疫力，安全绿色，将其按照1-3％的添加量添加到饲料中即能达到很好的效果。与现有技术相比，本发明的优点在于：本发明制备得到的增强免疫力的淡水鱼饲料添加剂，该添加剂主要成分为植物天然成分，营养价值高，配比科学，安全、营养、毒副作用小，且该添加剂能增强淡水鱼的免疫力，降低淡水鱼发病率，降低饲养成本，增加饲养效益，同时避免了使用化学合成添加剂；此外，本发明在制备增强免疫力的淡水鱼饲料添加剂过程中，通过现代发酵技术，有效提高芦荟的利用率，增强其利用价值，同时还能利用微生物所产生的酶、酸、多糖等保健成分，改善淡水鱼调节其肠道菌群，有利于淡水鱼健康生长。具体实施方式下面通过实施例对本发明方案作进一步说明：实施例1：增强免疫力的淡水鱼饲料添加剂，每100份由以下成分按重量份数组成：发酵芦荟8份、厚朴10份、凝结芽孢杆菌菌粉2份、乳酸片球菌菌粉3份、螺旋藻粉5份、松针粉2份、氨基酸1份、复合矿物质1份、复合维生素1份，其余为载体，载体为脱脂米糠，脱脂米糠预先粉碎过30目筛；芦荟、厚朴中的有效成分能够提高细胞免疫水平、杀菌抗病毒，帮助淡水鱼抵御病原菌的侵袭，绿色安全；乳酸菌能够调节并维持淡水鱼肠道内正常菌群，抑制肠道内腐败菌生长，提高机体免疫力，对水中的病原菌也有一定的抑制作用；螺旋藻粉蛋白含量高，易吸收，对动物各种疾病都具有显著调理功能，并且具有增强动物机体免疫力、抗疾病、促生长发育的作用；松针粉中氨基酸种类全面，能够改善饲料的蛋白质品质，还含有丰富的粗蛋白质、脂肪、微量元素和维生素等；添加的矿物质、氨基酸和维生素能够补充饲料中微量元素的不足；发酵芦荟的制备方法为：芦荟预处理：将新鲜的芦荟去杂烘干，粉碎过30目筛，得芦荟粉；将芦荟粉与复合酶按质量比20:1混匀，加入蒸馏水，蒸馏水的加入量为芦荟粉质量的3倍，蒸馏水中含占蒸馏水质量18％的4-甲基庚醇和3％的水杨酸苯酯，在50℃条件下回流提取1h，提取结束后直接烘干，得预处理芦荟粉，待用；复合酶由纤维素酶和淀粉酶按质量比4:1组成；4-甲基庚醇和水杨酸苯酯的特殊存在能够保持复合酶在反复加热、冷却回流过程中的活性稳定，从而有效提高芦荟多糖、维生素的提取率；同时能够作用于小部分的芦荟多糖细胞壁，使细胞壁疏松、破裂，减小传质阻力，利于被包裹在多糖细胞壁内的芦荟素的浸出，提高芦荟素的提取率；芦荟多糖、维生素以及芦荟素具有抗生素作用，且这种作用与西药抗生素不同，不会产生耐药性，对机体无毒副作用，因此可提高淡水鱼免疫力，增强抵抗力，提高淡水鱼机体中一些酶的活性，进而提高淡水鱼养殖效益；发酵菌种制备：将植物乳杆菌菌粉、纤维二糖乳杆菌菌粉和罗伊氏乳杆菌菌粉按质量比2:1:2混匀，得复合菌粉，其中植物乳杆菌菌粉中活菌数为1.5×108cfu/g、纤维二糖乳杆菌菌粉中活菌数为2.5×107cfu/g、罗伊氏乳杆菌菌粉中活菌数为1.5×107cfu/g；往复合菌粉中加入无菌水，无菌水的加入量为复合菌粉质量的8％，在35℃条件下培养12h，得发酵菌种；植物乳杆菌的活菌数较高，能大量的产酸，使水中的ph值稳定不升高，而且其产出的酸性物质能降解重金属，且在繁殖过程中能产出特有的乳酸杆菌素，乳酸杆菌素是一种生物型的防腐剂；罗伊氏乳杆菌常栖息于人和动物的肠道系统中，对人和动物无害，具有良好的生物相容性，它代谢甘油产生的罗伊氏素是一种重要的抑菌物质；发酵芦荟制备：将预处理芦荟粉和发酵菌种按质量比45:1混合，加入无菌水，无菌水的加入量为预处理芦荟粉质量的25％，无菌水含占无菌水质量0.05％的核黄素和0.3％的茶多酚，搅拌均匀，发酵24h，发酵温度为35℃，得发酵产物，将发酵产物烘干粉碎过50目筛，即得发酵芦荟；无菌水中微量的核黄素和茶多酚发挥协同作用，一方面对发酵菌种起着保护作用，能促进发酵菌种的生长和繁殖，同时抑制有害细菌的侵染；另一方面能够有效控制发酵菌种的代谢机制，促进微生物产生酶、酸、多糖等保健成分，改善淡水鱼调节其肠道菌群，有利于淡水鱼健康生长，同时促进芦荟纤维素、淀粉分解成小分子糖类，蛋白质分解成氨基酸等，提高淡水鱼对发酵过程中产生的营养成分的吸收，增强淡水鱼的免疫功能；增强免疫力的淡水鱼饲料添加剂的制备方法为：将发酵芦荟、厚朴、凝结芽孢杆菌菌粉、乳酸片球菌菌粉、螺旋藻粉、松针粉、氨基酸、复合矿物质、复合维生素混合粉碎过40目筛，再与载体混合即可。本发明的饲料添加剂可以显著提高淡水鱼的免疫力，安全绿色，将其按照1％的添加量添加到饲料中即能达到很好的效果。实施例2：增强免疫力的淡水鱼饲料添加剂，每100份由以下成分按重量份数组成：发酵芦荟10份、厚朴12份、凝结芽孢杆菌菌粉4份、乳酸片球菌菌粉4份、螺旋藻粉8份、松针粉3份、氨基酸2份、复合矿物质2份、复合维生素2份，其余为载体，载体为脱脂米糠，脱脂米糠预先粉碎过40目筛；芦荟、厚朴中的有效成分能够提高细胞免疫水平、杀菌抗病毒，帮助淡水鱼抵御病原菌的侵袭，绿色安全；乳酸菌能够调节并维持淡水鱼肠道内正常菌群，抑制肠道内腐败菌生长，提高机体免疫力，对水中的病原菌也有一定的抑制作用；螺旋藻粉蛋白含量高，易吸收，对动物各种疾病都具有显著调理功能，并且具有增强动物机体免疫力、抗疾病、促生长发育的作用；松针粉中氨基酸种类全面，能够改善饲料的蛋白质品质，还含有丰富的粗蛋白质、脂肪、微量元素和维生素等；添加的矿物质、氨基酸和维生素能够补充饲料中微量元素的不足；发酵芦荟的制备方法为：芦荟预处理：将新鲜的芦荟去杂烘干，粉碎过35目筛，得芦荟粉；将芦荟粉与复合酶按质量比20:1.2混匀，加入蒸馏水，蒸馏水的加入量为芦荟粉质量的4倍，蒸馏水中含占蒸馏水质量22％的4-甲基庚醇和4％的水杨酸苯酯，在52℃条件下回流提取2h，提取结束后直接烘干，得预处理芦荟粉，待用；复合酶由纤维素酶和淀粉酶按质量比5:1组成；发酵菌种制备：将植物乳杆菌菌粉、纤维二糖乳杆菌菌粉和罗伊氏乳杆菌菌粉按质量比3:1:3混匀，得复合菌粉，其中植物乳杆菌菌粉中活菌数为1.5×108cfu/g、纤维二糖乳杆菌菌粉中活菌数为2.5×107cfu/g、罗伊氏乳杆菌菌粉中活菌数为1.5×107cfu/g；往复合菌粉中加入无菌水，无菌水的加入量为复合菌粉质量的9％，在38℃条件下培养20h，得发酵菌种；植物乳杆菌的活菌数较高，能大量的产酸，使水中的ph值稳定不升高，而且其产出的酸性物质能降解重金属，且在繁殖过程中能产出特有的乳酸杆菌素，乳酸杆菌素是一种生物型的防腐剂；罗伊氏乳杆菌常栖息于人和动物的肠道系统中，对人和动物无害，具有良好的生物相容性，它代谢甘油产生的罗伊氏素是一种重要的抑菌物质；发酵芦荟制备：将预处理芦荟粉和发酵菌种按质量比45:2混合，加入无菌水，无菌水的加入量为预处理芦荟粉质量的28％，无菌水含占无菌水质量0.06％的核黄素和0.4％的茶多酚，搅拌均匀，发酵32h，发酵温度为38℃，得发酵产物，将发酵产物烘干粉碎过55目筛，即得发酵芦荟；增强免疫力的淡水鱼饲料添加剂的制备方法为：将发酵芦荟、厚朴、凝结芽孢杆菌菌粉、乳酸片球菌菌粉、螺旋藻粉、松针粉、氨基酸、复合矿物质、复合维生素混合粉碎过45目筛，再与载体混合即可。本发明的饲料添加剂可以显著提高淡水鱼的免疫力，安全绿色，将其按照2％的添加量添加到饲料中即能达到很好的效果。实施例3：增强免疫力的淡水鱼饲料添加剂，每100份由以下成分按重量份数组成：发酵芦荟15份、厚朴15份、凝结芽孢杆菌菌粉6份、乳酸片球菌菌粉5份、螺旋藻粉10份、松针粉5份、氨基酸3份、复合矿物质3份、复合维生素3份，其余为载体，载体为脱脂米糠，脱脂米糠预先粉碎过40目筛；芦荟、厚朴中的有效成分能够提高细胞免疫水平、杀菌抗病毒，帮助淡水鱼抵御病原菌的侵袭，绿色安全；乳酸菌能够调节并维持淡水鱼肠道内正常菌群，抑制肠道内腐败菌生长，提高机体免疫力，对水中的病原菌也有一定的抑制作用；螺旋藻粉蛋白含量高，易吸收，对动物各种疾病都具有显著调理功能，并且具有增强动物机体免疫力、抗疾病、促生长发育的作用；松针粉中氨基酸种类全面，能够改善饲料的蛋白质品质，还含有丰富的粗蛋白质、脂肪、微量元素和维生素等；添加的矿物质、氨基酸和维生素能够补充饲料中微量元素的不足；发酵芦荟的制备方法为：芦荟预处理：将新鲜的芦荟去杂烘干，粉碎过40目筛，得芦荟粉；将芦荟粉与复合酶按质量比20:1.3混匀，加入蒸馏水，蒸馏水的加入量为芦荟粉质量的5倍，蒸馏水中含占蒸馏水质量26％的4-甲基庚醇和5％的水杨酸苯酯，在55℃条件下回流提取2h，提取结束后直接烘干，得预处理芦荟粉，待用；复合酶由纤维素酶和淀粉酶按质量比6:1组成；发酵菌种制备：将植物乳杆菌菌粉、纤维二糖乳杆菌菌粉和罗伊氏乳杆菌菌粉按质量比4:2:3混匀，得复合菌粉，其中植物乳杆菌菌粉中活菌数为1.5×108cfu/g、纤维二糖乳杆菌菌粉中活菌数为2.5×107cfu/g、罗伊氏乳杆菌菌粉中活菌数为1.5×107cfu/g；往复合菌粉中加入无菌水，无菌水的加入量为复合菌粉质量的10％，在40℃条件下培养24h，得发酵菌种；植物乳杆菌的活菌数较高，能大量的产酸，使水中的ph值稳定不升高，而且其产出的酸性物质能降解重金属，且在繁殖过程中能产出特有的乳酸杆菌素，乳酸杆菌素是一种生物型的防腐剂；罗伊氏乳杆菌常栖息于人和动物的肠道系统中，对人和动物无害，具有良好的生物相容性，它代谢甘油产生的罗伊氏素是一种重要的抑菌物质；发酵芦荟制备：将预处理芦荟粉和发酵菌种按质量比45:3混合，加入无菌水，无菌水的加入量为预处理芦荟粉质量的30％，无菌水含占无菌水质量0.08％的核黄素和0.6％的茶多酚，搅拌均匀，发酵36h，发酵温度为40℃，得发酵产物，将发酵产物烘干粉碎过60目筛，即得发酵芦荟；增强免疫力的淡水鱼饲料添加剂的制备方法为：将发酵芦荟、厚朴、凝结芽孢杆菌菌粉、乳酸片球菌菌粉、螺旋藻粉、松针粉、氨基酸、复合矿物质、复合维生素混合粉碎过50目筛，再与载体混合即可。本发明的饲料添加剂可以显著提高淡水鱼的免疫力，安全绿色，将其按照3％的添加量添加到饲料中即能达到很好的效果。对比例1：芦荟预处理中，蒸馏水中不添加4-甲基庚醇和水杨酸苯酯，其余部分和实施例2完全一致。对比例2：发酵芦荟制备的无菌水中不添加核黄素和茶多酚，其余部分和实施例2完全一致。实施例4：在兰溪市普润斯水产养殖基地进行实验，实验设置为4个处理组，分别为对照组、实施例2、对比例1、对比例2。其中对照组采用没有添加本发明制备的饲料添加剂，实施例2、对比例1、对比例2分别在对照组的基础上添加了2％的本发明饲料添加剂，每组设置6个重复，每天按照饱食投喂3次，实验周期为60天，实验结束后，测定淡水鱼血清的iga、igg、igm，结果见表1。表1淡水鱼血清免疫指标项目对照组实施例2对比例1对比例2iga104.01138.61111.95109.35igg15.2921.3218.3617.73igm42.7364.2555.2353.12从淡水鱼血清免疫指标结果来看，使用了本发明产品后，淡水鱼的免疫指标较对照组有很大的提升，表明本发明产品能提高淡水鱼的免疫力；由实施例2和对比例1结果可知，4-甲基庚醇和水杨酸苯酯的特殊存在能够促进芦荟预处理中芦荟多糖、维生素以及芦荟素的提取，而这些芦荟成分能提高淡水鱼免疫力，增强抵抗力；由实施例2和对比例2结果可知，核黄素和茶多酚具有增益效果，能够促进发酵过程中微生物产生酶、酸、多糖等保健成分，改善淡水鱼调节其肠道菌群，有利于淡水鱼健康生长，同时促进芦荟纤维素、淀粉分解成小分子糖类，蛋白质分解成氨基酸等，提高淡水鱼对饲料添加剂中营养成分的吸收，增强淡水鱼的免疫功能。本发明的操作步骤中的常规操作为本领域技术人员所熟知，在此不进行赘述。以上所述的实施例对本发明的技术方案进行了详细说明，应理解的是以上所述仅为本发明的具体实施例，并不用于限制本发明，凡在本发明的原则范围内所做的任何修改、补充或类似方式替代等，均应包含在本发明的保护范围之内。当前第1页12