本发明属于饲料添加剂
技术领域：
，具体涉及一种产蛋家禽用复合发酵饲料添加剂、其制备方法及应用。
背景技术：
：蛋类食品例如鸡蛋、鸭蛋、鹅蛋、鹌鹑蛋、鸽子蛋是人们日常生活中最常见的饮食食物之一，其中鸡蛋是人们餐桌上的常见食品。蛋类食物的营养价值极高，其中，蛋黄含有丰富的蛋白质、脂肪、钙、卵磷脂和铁质等营养成分，不仅可以促进血管中胆固醇的排除，有预防动脉粥样化，还具有促进学习、记忆的能力，达到预防老人痴呆的功效；蛋白中含有一种叫白蛋白的蛋白，具有清除活性氧的作用，可增强人体免疫力，达到防癌的功效。为了提高家禽产蛋量和产蛋品质，以满足人们的需求，养殖领域的技术人员采用多种喂养方法；例如，通过光照等条件改善家禽的作息时间，从而提高其产蛋率和产蛋质量，却不能改善产蛋品质；针对这一问题，在饲料中添加营养补充剂成为热门手段，例如直接在饲料中加入碳酸钙、碘化钾、微量元素添加剂、氨基酸添加剂、维生素添加剂等各种微量元素和矿物盐，这种添加能够在短期内迅速提高产蛋营养成分，长此以往会使家禽对饲料中原有营养成分的吸收降低，家禽消化吸收能力减弱，继而导致多种疾病发生；此外，过多的添加营养补充剂不仅会使过多的成分随排泄物排出，降低利用率；还会对家禽产生毒害作用；近年来，养殖领域的技术人员将解决问题的方法转向中医药
技术领域：
，然而，家禽与人体的生理差异较大，在人体具有较好效果的中药组方不一定适用于家禽；目前对家禽机体的阴阳平衡和气液运化尚未有明确的解释，在中医辩证思想的指导下，某一中药组方并不具有普遍适用性，在家禽饲粮中添加中药成分有可能在短期内提高家禽的产蛋率和产蛋品质，也有可能不能取得期望效果；盲目中药组分的加入还可能导致家禽生理紊乱，进而出现家禽死亡和产蛋质量下降、产蛋时间不规律等问题，无法应用于大规模养殖业。目前来看，当务之急应当立足于家禽自身的消化吸收特性，从家禽的特性出发，搭配以合理天然的饲料或添加剂，顺应正常的生理过程，以提高产蛋量和产蛋品质。技术实现要素：针对现有技术中存在的问题，本发明的目的在于提供一种营养搭配合理、能够促进家禽消化吸收能力、提高免疫力、进而增加产蛋率和产蛋品质的饲料添加剂、其制备方法及应用。为了实现上述目的，本发明得不技术方案为：一种产蛋家禽用复合发酵饲料添加剂，由以下组分按重量份数制备而成：发酵葵花籽粕22～25份、发酵藻粉15～20份、牡蛎粉2～4份、黄粉虫粉1～3份、大豆异黄酮0.05～0.1份、羧甲基壳聚糖0.1～0.3份、紫苏油0.05～0.1份。在上述方案的基础上，所述产蛋家禽用复合发酵饲料添加剂，由以下组分按重量份数制备而成：发酵葵花籽粕22份、发酵藻粉18份、牡蛎粉3份、黄粉虫粉2份、大豆异黄酮0.06份、羧甲基壳聚糖0.18份、紫苏油0.06份。在上述方案的基础上，所述发酵葵花籽粕的制备方法为：(1)葵花籽粕除去杂物后，机械粉碎，过20目筛，高压蒸汽灭菌121℃30min，灭菌完成后，冷却至室温；(2)调节灭菌后葵花籽粕的水分含量为55～65％，向花生粕中接种7～10％米曲霉和5～8％间型脉孢菌的孢子悬液，充分混合后，进行固态发酵，28℃～32℃，发酵36h后，再于32～35℃发酵24h；(3)向上述发酵完成后的物料中加入1倍重量的去离子水，调节ph7.0，40℃，酶解2h；调节ph4.5，40℃，酶解4h；酶解完成后，100℃，处理10min，冷却至室温；(4)将上述酶解后的物料于55～60℃，干燥至水分含量10％。在上述方案的基础上，所述米曲霉发酵菌种的接种量为8％，所述间型脉孢菌孢子悬液的接种量为7％。在上述方案的基础上，所述发酵藻粉的制备方法为：(1)将巨藻晒干粉碎，过40目筛，高压蒸汽灭菌121℃、15min，冷却至室温，备用；(2)分别离心小球藻和金藻的培养液，获得小球藻和金藻的藻泥；将小球藻和金藻的藻泥按照1∶1的重量比混合，并加入占总重10％的灭菌后的巨藻粉，混合均匀，得藻类混合物；(3)向藻类混合物中加入1.5～2.0％的复合微生物菌剂，32℃，发酵24～36h；(4)发酵完成后，向发酵物中加入总重5％的甘露醇，混合均匀后，真空冷冻干燥成粉末，即得发酵藻粉。在上述方案的基础上，所述复合微生物菌剂为枯草芽孢杆菌、鼠李糖乳杆菌按1:2的质量比组成；在上述方案的基础上，所述产蛋家禽用复合发酵饲料添加剂的制备方法，步骤如下：(1)按量取发酵葵花籽粕、牡蛎粉和黄粉虫粉混合均匀，蒸汽爆破处理；(2)将上述蒸汽爆破处理后的物料依次与发酵藻粉、大豆异黄酮、羧甲基壳聚糖和紫苏油混合均匀，即得。在上述方案的基础上，所述蒸汽爆破为2.0mpa条件下蒸汽爆破160s。上述方法制备的产蛋家禽用复合发酵饲料添加剂在提高家禽产蛋性能、提高产蛋性能中的应用。一种提高家禽产蛋性能、提高产蛋性能的饲料，是在饲料中添加上述方法制备的复合发酵饲料添加剂，添加量为重量分数0.2％。黄粉虫粉购自青岛亿家康生物科技集团有限公司；牡蛎粉购自山东富田正大生物科技有限公司。本发明技术方案的优点：本发明的产蛋家禽用复合发酵饲料添加剂不仅能够提高家禽的产蛋率，增加产蛋性能，还能进一步改善产蛋品质；本发明的复合发酵饲料添加剂是通过调节家禽的肠道内环境，促进益生菌的生长繁殖，进而促进营养物质的消化吸收，提高免疫力。本发明的产蛋家禽用复合发酵饲料添加剂中的发酵葵花籽粕含有大量的亚油酸和亚麻酸，赖氨酸含量高，此外还含有大量的纤维质的壳，经过间型脉孢菌和米曲霉的发酵，能够降解其难以被机体消化的纤维质成分的同时，还能对其中的大分子蛋白质进行分解，形成易于被机体吸收的小分子肽，此外，间型脉孢菌和米曲霉的发酵过程还能产生大量的次级代谢物和新的生物活性成分。本发明的产蛋家禽用复合发酵饲料添加剂中的发酵藻粉是由小球藻、金藻和巨藻的发酵物，小球藻和金藻属于微藻，其本身含有大量的维生素、微量元素、蛋白质、海藻多糖等活性成分，金藻还含有较多的类胡萝卜素成分，能够提高机体免疫力；巨藻纤维质、果胶质和海藻多糖含量丰富，经枯草芽孢杆菌和鼠李糖乳杆菌发酵后能够促进纤维质分解成可溶性纤维，丰富其营养成分，降低抗营养因子的含量；此外，枯草芽孢杆菌能够消耗肠道中的氧气，提供厌氧环境，促进有益菌生长；鼠李糖乳杆菌能够促进机体对钙磷的吸收，它发酵产生乳酸，不仅提高饲料中有机酸的含量，还能改善肠道环境，抑制有害微生物的繁殖。枯草芽孢杆菌和鼠李糖乳杆菌发酵后活菌数增加，不仅能够增加藻粉的营养价值，还能作为一种微生态制剂，调整动物肠道菌群平衡，促进营养物质的消化吸收。本发明复合发酵饲料添加剂中的发酵葵花籽粕和发酵藻粉两者的营养互为补充，牡蛎粉可以提供钙、磷元素，黄粉虫粉除提供蛋白质成分外，还含有甲壳素、抗菌肽和防御素，大豆异黄酮能够调节雌激素的分泌，延缓衰老；羧甲基壳聚糖能够增加机体的营养物质代谢过程，提高机体的抗氧化性能，紫苏油是一种高不饱和度的天然油脂，所含主要成份为α-亚麻酸，含量高达50％-70％，α-亚麻酸是dha合成原料，紫苏油的添加能够增加产蛋的营养成分含量，提高产蛋品质。上述各组分相互配合，互为补充，共同用于提高家禽的产蛋性能和产蛋品质。具体实施方式在本发明中所使用的术语，除非有另外说明，一般具有本领域普通技术人员通常理解的含义。下面结合具体实施例，并参照数据进一步详细的描述本发明。以下实施例只是为了举例说明本发明，而非以任何方式限制本发明的范围。实施例1一种发酵藻粉的制备方法，步骤如下：(1)将巨藻晒干粉碎，过40目筛，高压蒸汽灭菌121℃、15min，冷却至室温，备用；(2)分别离心小球藻和金藻的培养液，获得小球藻和金藻的藻泥；将小球藻和金藻的藻泥按照1∶1的重量比混合，并加入占总重10％的灭菌后的巨藻粉，混合均匀，得藻类混合物；(3)向藻类混合物中加入1.8％的复合微生物菌剂，32℃，发酵24～36h；(4)发酵完成后，向发酵物中加入总重5％的甘露醇，混合均匀后，真空冷冻干燥成粉末，即得发酵藻粉。所述复合微生物菌剂为枯草芽孢杆菌、鼠李糖乳杆菌按1:2的质量比组成。枯草芽孢杆菌bacillussubtilisaccc11025，中国农业微生物菌种保藏管理中心；活化和发酵培养基：蛋白胨0.5-3g、葡萄糖1-3g、kh2po40.02-0.08g、mgso40.01-0.04g、nacl0.2-0.4g、蒸馏水100ml。将枯草芽孢杆菌accc11025菌种接种于固体平板上活化，活化后的菌种以1％的接种量接种于液体发酵培养基，37℃，200rpm培养24～36h，至菌含量≥109cfu/ml。鼠李糖乳杆菌为鼠李糖乳杆菌(lactobacillusrhamnosus)w27，保藏编号为cgmccno:11387。活化和发酵培养基：mrs培养基；将鼠李糖乳杆菌w27菌种接种于固体平板上活化，活化后的菌种以1％的接种量接种于液体发酵培养基，37℃，200rpm培养24～36h，至菌含量≥109cfu/ml。实施例2米曲霉和间型脉孢菌的活化与发酵菌种的制备米曲霉bncc195382，北纳创联生物技术有限公司；间型脉孢菌bncc149795，北纳创联生物技术有限公司；；米曲霉粉碎豆壳过10目筛，经121℃、15min灭菌；调节含水量50～65％，将经豆汁斜面培养基活化后的米曲霉种按1％的接种量分别接种于花生壳培养基，25-30℃培养48～60h，制得发酵菌种，菌种含量≥109cfu·g-1。间型脉孢菌活化和发酵培养基：pda培养基；将斜面培养基上的间型脉孢菌孢子用无菌水洗下，制备成孢子悬液，孢子悬液浓度为107个/ml；备用。实施例3一种发酵葵花籽粕的制备方法，步骤如下：(1)葵花籽粕除去杂物后，机械粉碎，过20目筛，高压蒸汽灭菌121℃30min，灭菌完成后，冷却至室温；(2)调节灭菌后葵花籽粕的水分含量为55～65％，向花生粕中接种8％米曲霉和7％间型脉孢菌的孢子悬液，充分混合后，进行固态发酵，28℃～32℃，发酵36h后，再于32～35℃发酵24h；(3)向上述发酵完成后的物料中加入1倍重量的去离子水，调节ph7.0，40℃，酶解2h；调节ph4.5，40℃，酶解4h；酶解完成后，100℃，处理10min，冷却至室温；(4)将上述酶解后的物料于55～60℃，干燥至水分含量10％。实施例4一种产蛋家禽用复合发酵饲料添加剂，由以下组分按重量份数制备而成：发酵葵花籽粕23份、发酵藻粉15份、牡蛎粉2份、黄粉虫粉1份、大豆异黄酮0.05份、羧甲基壳聚糖0.1份、紫苏油0.05份。所述产蛋家禽用复合发酵饲料添加剂的制备方法，步骤如下：(1)按量取发酵葵花籽粕、牡蛎粉和黄粉虫粉混合均匀，2.0mpa条件下蒸汽爆破160s；(2)将上述蒸汽爆破处理后的物料依次与发酵藻粉、大豆异黄酮、羧甲基壳聚糖和紫苏油混合均匀，即得。实施例5一种产蛋家禽用复合发酵饲料添加剂，由以下组分按重量份数制备而成：发酵葵花籽粕22份、发酵藻粉18份、牡蛎粉3份、黄粉虫粉2份、大豆异黄酮0.06份、羧甲基壳聚糖0.18份、紫苏油0.06份。制备方法同实施例4。实施例6一种产蛋家禽用复合发酵饲料添加剂，由以下组分按重量份数制备而成：发酵葵花籽粕25份、发酵藻粉20份、牡蛎粉4份、黄粉虫粉3份、大豆异黄酮0.1份、羧甲基壳聚糖0.3份、紫苏油0.1份。制备方法同实施例4。对比例1一种产蛋家禽用复合发酵饲料添加剂，由以下组分按重量份数制备而成：酶解葵花籽粕22份、发酵藻粉18份、牡蛎粉3份、黄粉虫粉2份、大豆异黄酮0.06份、羧甲基壳聚糖0.18份、紫苏油0.06份。制备方法同实施例4。其中未经发酵的葵花籽粕的处理方法为：葵花籽粕除去杂物后，机械粉碎，过40目筛，高压蒸汽灭菌121℃30min，灭菌完成后，冷却至室温；加入1倍量体积的无菌水，混合均匀，加入1％碱性蛋白酶(宁夏夏盛实业集团有限公司，酶活200000u/g)，调节温度40～55℃，ph7.5～9，反应时间为30～240min，然后升温至85～90℃，保持15～20min；加入0.5％酸性蛋白酶(宁夏夏盛实业集团有限公司，酶活10000u/g)，调节温度45～65℃，ph3.5～7，反应时间为30～240min，然后升温至85～90℃，保持15～20min，灭酶。将上述酶解后的物料于55～60℃，干燥至水分含量10％。对比例2一种产蛋家禽用复合发酵饲料添加剂，由以下组分按重量份数制备而成：发酵葵花籽粕22份、发酵藻粉18份、牡蛎粉3份、黄粉虫粉2份、大豆异黄酮0.06份、羧甲基壳聚糖0.18份。制备方法同实施例4。对比例3一种产蛋家禽用复合发酵饲料添加剂，由以下组分按重量份数制备而成：发酵葵花籽粕22份、发酵藻粉18份、牡蛎粉3份、黄粉虫粉2份、大豆异黄酮0.06份、紫苏油0.06份。制备方法同实施例4。对比例4一种产蛋家禽用复合发酵饲料添加剂，由以下组分按重量份数制备而成：发酵葵花籽粕22份、发酵藻粉18份、牡蛎粉3份、黄粉虫粉2份、大豆异黄酮0.06份、羧甲基壳聚糖0.18份、紫苏油0.06份。所述产蛋家禽用复合发酵饲料添加剂的制备方法，步骤如下：(1)按量取发酵葵花籽粕、牡蛎粉和黄粉虫粉混合均匀；(2)将混合均匀的物料依次与发酵藻粉、大豆异黄酮、羧甲基壳聚糖和紫苏油混合均匀，即得。一、本发明产蛋家禽用复合发酵饲料添加剂效果试验1.试验分组实施例4～6和对比例1～4的产蛋家禽用复合发酵饲料添加剂市售产蛋家禽饲料添加剂：健美(禽专用)，购自山东微尔生物工程有限公司；2.试验方法选择健康的、体重相近的190日龄海蓝褐壳蛋鸡270只，随机分成9个组，每个组30只；鸡。其中1～3组分别在基础日粮(表1)中添加实施例4～6的发酵饲料添加剂，添加量为重量分数0.2％；4～7组在基础日粮中添加对比例1～4的产蛋家禽用复合发酵饲料添加剂，添加量为重量分数0.2％；；第8组在基础日粮中添加市售产蛋家禽饲料添加剂，添加量为重量分数0.2％；第9组基础日粮不添加任何添加剂，作为空白对照组；采用3层阶梯式笼养，每天光照16h，5:00～21:00，早晚辅助人工光照。自由采食与饮水。按常规程序对蛋鸡进行防疫与鸡舍消毒。每日6:00与15:00进行饲喂，18:00采收鸡蛋，其他条件一致。试验周期60天。表1基础饲粮组成及营养水平(风干基础)原料含量％营养水平含量％玉米69.80粗蛋白质16.00豆粕14.45钙3.44石粉8.50磷0.59秘鲁鱼粉4.96可利用磷0.42磷酸氢钙1.00食盐0.33预混料1.00赖氨酸0.83食盐0.20蛋氨酸0.38蛋氨酸0.09蛋氨酸+半胱氨酸0.63合计100.00代谢能11.51预混料为每千克全价料提供：mn60.00mg，se0.30mg，cu8.00mg，fe60.00mg，i0.35mg，zn80.00mg，维生素a8000iu，维生素d1600iu，维生素e5iu，维生素k0.50mg，维生素b120.004mg，亚油酸1.00％，泛酸2.20mg，硫胺素0.80mg，核黄素2.50mg，烟酸20.00mg，吡哆醇3.00mg，生物素0.10mg，叶酸0.25mg，胆碱500.00mg。3.指标测定每日记录各组鸡的产蛋数与蛋重，计算产蛋率。每10d统计1次采食量，计算平均日采食量。在第45天每个重复选取4枚鸡蛋，测定鸡蛋蛋品质。3.1生产性能指标平均日采食量＝总采食量/试验天数；料蛋比＝采食量/蛋重；产蛋率＝实际产蛋数/鸡总只数。3.2鸡蛋品质哈氏单位、蛋黄颜色通过多功能蛋品分析仪测定；采用蛋壳强度计测定蛋壳强度；采用蛋壳厚度计测定蛋壳厚度。蛋形指数＝鸡蛋纵径/鸡蛋横径。3.3血清免疫指标在试验结束后第一天8:00，以重复为单位，每个重复随机选取10只鸡，翅下静脉采血，用促凝管收集5ml，静置30min后，于3000r/min离心10min，吸取上清液0.5～1.0ml，注入1.5ml离心管中，标记组别、日期，置于-20℃冷冻保存待测血清免疫指标。3.4表观消化率试验结束前4天，每组随机选择3个重复，采用内源指示剂法进行代谢试验，连续收集4天粪便，按重复混匀后每100g鲜粪加10％盐酸10ml，以避免粪中的氨氮损失，粪样在65％烘箱烘至恒重，粉碎机粉碎后保存待测。测定饲料及粪样中干物质、有机物、粗蛋白、总能、ca、p的含量。按照下面公式计算：某养分表观消化率＝100×[100－(饲料中aia含量/粪中aia含量)×(粪中某养分含量/饲料中某养分含量)]。3.5盲肠微生物测定试验结束前一天，每组随机选取3只鸡，剖杀后结扎盲肠两端，放入离心管中加生理盐水梯度稀释，采用平板涂布法测定盲肠中大肠杆菌、乳酸杆菌、双歧杆菌的数量。以此计算出每克盲肠内容物所含细菌数，以lgcfu/g为单位。4.试验结果4.1本发明产蛋家禽用复合发酵饲料添加剂对产蛋性能的影响表2本发明产蛋家禽用复合发酵饲料添加剂对产蛋性能的影响由表2可知，实施例4～6的平均日采食量与其他各组的相差不大，实施例4～6的产蛋率和蛋重显著高于对比例1～4组、市售添加剂组和空白对照组，实施例4～6的的料蛋比和破蛋率显著低于对比例1～4组、市售添加剂组和空白对照组，蛋壳相对质量实施例4～6有增高的趋势，但差异不大。由此可见，本发明产蛋家禽用复合发酵饲料添加剂能够显著提高家禽的产蛋性能。4.2本发明产蛋家禽用复合发酵饲料添加剂对产蛋品质的影响表3本发明产蛋家禽用复合发酵饲料添加剂对产蛋品质的影响由表3可知，实施例4～6的蛋形指数与其他各组相差不大，实施例4～6的蛋壳厚度略高于对比例1～4组、市售添加剂组和空白对照组，实施例4～6的蛋壳强度、蛋黄色泽、蛋黄指数和哈氏单位显著高于对比例1～4组、市售添加剂组和空白对照组，由此可知，添加本发明产蛋家禽用复合发酵饲料添加剂可以提高产蛋的营养成分，提高产蛋品质。4.3本发明产蛋家禽用复合发酵饲料添加剂对蛋鸡血清免疫指标的影响表4本发明添加剂对蛋鸡血清免疫指标的影响由表4可知，各组血清iga含量无显著性差异，实施例4～6的igm含量显著高于对比例1～4组、市售添加剂组和空白对照组，实施例4～6的igg的含量显著低于对比例1～4组、市售添加剂组和空白对照组，由此可知，本发明的复合发酵饲料添加剂可通过调节igm和igg的含量来调节家禽的免疫力。4.4本发明产蛋家禽用复合发酵饲料添加剂对蛋鸡表观消化率的影响表5本发明产蛋家禽用复合发酵饲料添加剂对蛋鸡表观消化率的影响(％)由表5可知，实施例4～6的干物质、能量、粗蛋白、有机物、ca和p消化率显著高于对比例1～4组、市售添加剂组和空白对照组，由此可知，本发明产蛋家禽用复合发酵饲料添加剂能够显著提高蛋鸡的表观消化率。4.5本发明产蛋家禽用复合发酵饲料添加剂对蛋鸡盲肠微生物的影响表6本发明产蛋家禽用复合发酵饲料添加剂对蛋鸡盲肠微生物的影响(lgcfu/g)由表6可知，实施例4～6组的蛋鸡盲肠中大肠杆菌的数量显著低于对比例1～4组、市售添加剂组和空白对照组，双歧杆菌和乳酸杆菌的数量显著高于对比例1～4组、市售添加剂组和空白对照组，这说明本发明的复合发酵饲料添加剂能够显著增加盲肠有益微生物的生长繁殖，抑制有害微生物的生长，以此来维持家禽肠道内环境稳定，增加营养物质的消化吸收。以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其进行限制；尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的普通技术人员来说，依然可以对前述实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明所要求保护的技术方案的精神和范围。当前第1页12