本发明涉及禽畜添加剂技术领域，特别是涉及一种用于提高幼畜机体免疫力的添加剂及其制备方法和应用。
背景技术：
随着现代养猪业的发展，生产上通常对仔猪实行早期断奶以提升养殖效率，仔猪早期断奶已成为国内外集约化养猪业提高经济效益、降低生产成本最重要的手段。然而由于仔猪早期阶段消化道尚未完善、消化液和消化酶分泌不足、胃肠道微生态区系不稳定和肠道免疫功能低下，且断奶过程中仔猪还需要经受环境、心理及营养应激等因素的影响，因此，仔猪在早期断奶阶段机体代谢会发生一定的变化，如常常出现食欲降低、消化不良、饲料利用率低、免疫力和抗病力下隆、腹泻等现象，最终表现为生长抑制，即所谓的“仔猪断奶综合症”。
产生这一系列症状的主要原因是仔猪遭受营养、环境以及心理的变化，以及病原微生物侵袭造成的仔猪肠道发育受阻，肠道功能紊乱，从而导致生产性能降低，腹泻及死亡率上升，严重威胁着仔猪的生命健康，继而给养猪生产带来巨大损失。肠道不仅是消化吸收营养物质的主要场所，也是机体抵御外源性和内源性致病菌的第一道防线，是机体最大的免疫器官。肠道健康水平决定动物整体健康和生产性能的发挥。由于仔猪肠道发育、免疫系统、酶系统、微生态系统等不健全，加上断奶应激造成的仔猪肠道屏障损伤，引起仔猪腹泻，生产性能降低，甚至死亡，严重制约养猪业的发展。因此，配制适合早期断奶仔猪的饲料或饲料添加剂是克服早期断奶综合症的最有效方法。
技术实现要素：
基于此，有必要提供一种添加剂，能够增强幼畜的机体免疫力。
一种用于提高幼畜机体免疫力的添加剂，按重量百分比计，包括：中药发酵物10％～12％、低聚异麦芽糖3％～10％、复合维生素2％～12％、有机微量元素0.1％～4％、复合氨基酸1％～8％和余量辅料；
所述中药发酵物主要由以下重量份的原料经发酵制备得到：甘草2～5份、杜仲8～12份、枸杞子3～6份、黄芪5～9份、茯苓5～8份、紫苏3～7份和益母草4～6份。
上述用于提高幼畜机体免疫力的添加剂，通过将中药发酵物、低聚异麦芽糖、复合维生素、有机微量元素和复合氨基酸进行科学配伍后作为饲料添加剂添加于幼畜饲料中，各成分相辅相成，可协同增强幼畜的机体免疫功能，还能改善幼畜肠道微生态环境，保障幼畜的肠道健康发育，其效果稳定并明显优于只添加一种成分时所产生的效果。其次，上述添加剂所选原料安全无毒，添加于仔猪饲料中，能够明显增强幼畜的综合免疫功能和肠道健康。
中药发酵物，由甘草、杜仲、枸杞子、黄芪、茯苓、紫苏和益母草经发酵制备而成，富含活性多糖、生物碱、黄酮、皂苷和绿原酸等活性成分，具有促进t淋巴细胞和b淋巴细胞的增殖，增强巨噬细胞和单核细胞的活性；增强造血功能；还能够加速肠道益生菌的生长，抑制肠道有害菌的生长，保护肠道健康发育。
低聚异麦芽糖，是淀粉糖的一种，主要成分为葡萄糖分子间以α-1，6糖苷键结合的异麦芽糖、潘糖、异麦芽三糖及四糖以上的低聚糖。低聚异麦芽糖不会被胃和小肠吸收，而是直接进入大肠，被双歧杆菌优先利用，助其增殖，而肠内其它有害菌则不能利用，从而能抑制有害菌生长，促使肠道内微生态向良性循环调整，所以，低聚异麦芽糖能够促进肠道内双歧杆菌增殖，抑制肠道有害菌及腐败物质形成，增加维生素含量，提高机体免疫力。
复合维生素，是多种维生素按照一定剂量比例合成的复合剂型维生素，一般包括脂溶性维生素(维生素a、维生素d、维生素e、维生素k)和水溶性维生素(b族维生素、维生素c)。可以为动物提供必须的营养成分，具有提高机体免疫力和抗自由基氧化，促进成长、帮助消化、改善精神状况，提升机体抗应激能力的作用。
有机微量元素，是指锰、铁、铜、锌、硒和碘等微量元素的无机盐与有机物及其分解产物形成的化合物。微量元素是动物机体必需的营养素，参与动物体内酶和激素的生成与激活，直接参与机体几乎所有的生理和生化功能，对幼畜的生长发育整个过程都有极其重要的影响。而有机微量元素生物学效价高，利用率高，少量添加即可代替高剂量的无机盐，还能够减少动物微量元素的排出量，减少对环境的污染。
复合氨基酸，由多种氨基酸组成。氨基酸是含有碱性氨基和酸性羧基的有机化合物，也是构成动物营养所需蛋白质的基本物质，氨基酸在机体中的存在，不仅提供了合成蛋白质的重要原料，而且对于促进生长，进行正常代谢、维持生命提供了物质基础。复合氨基酸能够提供仔猪生长发育所需要的多种氨基酸，还能用于合成抗体。
在其中一个实施例中，按重量百分比计，所述添加剂包括：中药发酵物12％～15％、低聚异麦芽糖5％～10％、复合维生素2％～12％、有机微量元素2％～3％、复合氨基酸1％～8％和余量辅料。
可以理解，上述添加剂中还可以包括除中药发酵物、低聚异麦芽糖、复合维生素、有机微量元素和复合氨基酸以外的其他中药组分及营养成分。
在其中一个实施例中，所述中药发酵物的原料包括：甘草4份、杜仲10份、枸杞子5份、黄芪7份、茯苓6份、紫苏5份和益母草5份。
在其中一个实施例中，所述有机微量元素为铁或亚铁的甘氨酸络合物。可以理解，铁能够参与合成血红蛋白和肌红蛋白，促进氧的运输，起来预防仔猪贫血，提高免疫率的作用，通过甘氨酸铁、甘氨酸亚铁和/或铁(亚铁)的甘氨酸络合物形式添加，可以借助甘氨酸吸收，来促进动物对铁元素的吸收和利用，从而促进血红蛋白和肌红蛋白的合成，预防缺铁性贫血症，促进仔猪的生长发育，使其皮肤红润，毛色发亮，并提高仔猪的免疫力。
在其中一个实施例中，所述复合维生素中包含维生素a、维生素d、维生素e、维生素k、b族维生素和维生素c中的至少两种。
在其中一个实施例中，所述复合氨基酸中包含赖氨酸、色氨酸、蛋氨酸、苏氨酸、缬氨酸和精氨酸。
在其中一个实施例中，所述辅料包括助流剂和稀释剂，所述助流剂占所述添加剂总重量的0.5％～3％。
在其中一个实施例中，所述助流剂选自二氧化硅、硬脂酸镁和滑石粉中的至少一种。如此，添加0.5％～3％的助流剂，能保持添加剂原料的流散，能够畅通均匀进入搅拌机，从而保证混合后添加剂的质量。
在其中一个实施例中，所述稀释剂选自淀粉、脱脂米糠、豆粕粉和葡萄糖中的至少一种。如此，选用动物可食用且无害物质、营养价值较高的淀粉、脱脂米糠、豆粕粉等作为稀释剂，加入到添加剂中，能够将中药发酵物、低聚异麦芽糖等组分的浓度降低，并将多种活性组分的颗粒分开，有效保证添加剂的混合均匀性及后续与饲料预混的质量。
在其中一个实施例中，为了提高产品的适口性，所述辅料还包括香料。
可以理解，上述添加剂由于由甘草、黄芪等发酵制备得到的中药发酵物具有香味，且低聚异麦芽糖使添加剂具有适当的甜味，因此，产品气味芳香，适口性好。但是为了使添加剂的适口性更佳，还可以添加适量的香料。
本发明另一目的在于提供上述用于提高幼畜机体免疫力的添加剂的制备方法，包括以下步骤：
按照所述添加剂的配方，称取各组分，将所述各组分混合均匀，得到所述添加剂。
上述制备方法操作简单，制备条件可控性好，可批量化大规模生产。
在其中一个实施例中，在称取各组分的步骤之前，将所述添加剂中的各组分原料进行粉碎和过筛处理，所述过筛处理中筛孔的孔径为40～80目。
在其中一个实施例中，还包括制备所述中药提取物的步骤：
将所述中药发酵物的原料粉碎并混合均匀，得到混合粉料；
按照所述混合粉料与水的质量比为1：(40～50)，将所述混合粉料和水混匀，灭菌、冷却后，接种活化的益生菌菌种，于温度为36℃～38℃、ph值为5.8～6.5、压强为0.02kpa～0.05kpa的条件下发酵40h～50h，得到发酵混合物；
将所述发酵混合物过滤，分别收集滤液和滤渣；
将所述滤液于50℃～65℃进行喷雾干燥处理，然后与经过烘干、粉碎处理后的所述滤渣混合均匀，得到所述中药发酵物。
如此，通过将发酵混合物过滤，滤渣和滤液单独干燥处理后再混合，其中滤液于50℃～65℃进行喷雾干燥处理，既能保持活性成分的活性，又能保持益生菌的活性，仔猪食用上述添加剂后，益生菌可以在仔猪胃内生长繁殖，在一定程度上弥补仔猪胃酸的不足，使仔猪胃内ph维持较低水平，抑制大肠杆菌、沙门氏菌、梭菌等细菌在胃内生长繁殖。
在其中一个实施例中，所述益生菌选自嗜酸乳杆菌、德氏乳酸杆、植物乳杆菌、粪链球菌和屎肠球菌中的至少一种。
较优的，所述益生菌为嗜酸乳杆菌。
本发明又一目的在于提供上述添加剂在制备幼畜饲料中的应用。
在其中一个实施例中，将所述添加剂应用于仔猪的饲料制备中。
在其中一个实施例中，所述添加剂按质量百分比0.1％～0.5％加入至所述仔猪饲料中。
进一步地，所述添加剂按质量百分比0.1％～0.5％加入至所述仔猪哺乳期饲料中，以提高仔猪的免疫力和肠道健康度。
将上述添加剂应用于断奶仔猪的饲料中并饲喂仔猪，能够明显提高仔猪的免疫力和改善仔猪胃肠道的微生态系统，增强仔猪肠道健康度，提高仔猪成活率。
具体实施方式
为了便于理解本发明，下面将对本发明进行更全面的描述，并给出了本发明的较佳实施例。但是，本发明可以以许多不同的形式来实现，并不限于本文所描述的实施例。相反地，提供这些实施例的目的是使对本发明的公开内容的理解更加透彻全面。
除非另有定义，本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本发明的技术领域的技术人员通常理解的含义相同。本文中在本发明的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的，不是旨在于限制本发明。本文所使用的术语“和/或”包括一个或多个相关的所列项目的任意的和所有的组合。
以下为具体实施方式。
本发明实施例所用原料均来源于市售。
其中，复合维生素包含维生素a、维生素d3、维生素e、维生素k3、维生素c、维生素b2、维生素b6和生素素b12；复合氨基酸包含赖氨酸、蛋氨酸、色氨酸、苏氨酸、精氨酸和缬氨酸。
实施例1～5的提高仔猪免疫力的添加剂的配方，见下表1。
表1添加剂的配方
注：“-”表示不添加；表中助流剂采用二氧化硅，稀释剂采用葡萄糖；当然助流剂还可选用硬脂酸镁或滑石粉，稀释剂可选用脱脂米糠、豆粕粉或淀粉。
2、制备方法：
a、中药提取物的制备步骤如下：
1)、准确称取4份甘草、10份杜仲、5份枸杞子、7份黄芪、6份茯苓、5份紫苏和5份益母草，混合搅拌后粉碎、过60目筛，得混合粉末，待用；
2)、挑取嗜酸乳杆菌于固体培养基中37℃培养36h进行活化；
固体培养基配方：蛋白胨10g、牛肉粉5g、酵母粉4g、葡萄糖20g、吐温801ml、磷酸氢二钾2g、乙酸钠5g、柠檬酸三铵2g、硫酸镁0.2g、硫酸锰0.05g、琼脂18g和纯水1000ml。
3)、挑取活化的嗜酸乳杆菌于液体培养基中，于培养箱中37℃静止培养36h进行扩培；
液体培养基：蛋白胨10g、牛肉粉5g、酵母粉4g、葡萄糖20g、1ml吐温80、磷酸氢二钾2g、乙酸钠5g、柠檬酸三铵2g、硫酸镁0.2g、硫酸锰0.05g和纯水1000ml。
4)、将步聚1)制备的混合粉末和水按照重量比1：50加入到发酵罐中，并加入发酵培养基，发酵罐通蒸汽灭菌30min，接种步骤3)的嗜酸乳杆菌扩培菌液，接种量为8vol％，于37℃、20r/min、0.03kpa培养48±2h。
发酵培养基：豆饼粉15g/l、乳清粉10g/l、牛肉膏12g/l、蛋白胨16g/l、玉米浆粉20g/l、葡萄糖20g/l、硫酸镁0.5g/l、硫酸锰0.25g/l、乙酸钠7g/l、磷酸氢二钾2g/l，ph6.2。
5)、发酵完毕，放罐收集发酵液，于板框过滤发酵液分别收集滤液与滤渣，滤液于喷嘴口径为0.5mm～1mm，温度为50℃～65℃的低温喷雾干燥机干燥，滤渣于鼓风烘箱中60℃～80℃烘4h～5h后粉碎，两者合并、混匀，即得中药提取物。
b、提高仔猪免疫力的添加剂的制备步骤如下：
分别将颗粒状和块状的原料粉碎、过药典2号筛(相当于筛孔24目)；
按照表1中的各实施例和对比例的配方准确称取各粉碎过筛后的原料组分；
将各原料组分混合均匀，过药典3号筛(相当于筛孔50目)，分装即可。
通过上述方法制备得到的添加剂均为粉剂，气味芳香、适口性好，且便于后续添加混料。
效果证明性试验
1、试验材料
上述实施例1的添加剂。
2、试验动物与试验设计
采用单因素试验设计，根据胎次、体况相近原则选择30头妊娠1d的母猪进行试验，单栏饲养。妊娠母猪饲料从母猪妊娠第1d开始饲喂，并一直持续到妊娠90d再换成哺乳母猪饲料至哺乳第21d(仔猪断奶)试验结束。按母猪所产仔猪7日龄窝质量一致的原则，将30窝仔猪分成3个试验组，每组10窝仔猪。
仔猪从开始7日龄添加教槽料时开始试验，其中试验ⅰ组作为对照组；试验ⅱ组在仔猪的教槽料中按照2000g/t饲料的比例添加实施例1的添加剂；试验ⅲ组在仔猪的教槽料中按照3000g/t饲料的比例添加实施例1的添加剂。
3、饲养管理
母猪分娩后，仔猪可根据体重大小在组内交叉寄养(在母猪分娩后12h之内完成)，保证每窝仔猪数量(10或11头)且体重分布均匀；哺乳仔猪分娩当天剪尾、去犬齿及补铁，分娩后7d开始仔猪阉割和教槽，采用250瓦的红外保温灯保暖。试验期7-21日龄，共饲喂14d。试验期仔猪每天早上07：00、上午10：00、中午12：00、下午15：00、晚上18：00和晚上21：00等6个时间点定时饲喂，少量多次原则。其他饲养管理和免疫程序均遵循猪场管理制度进行。每天记录温度、湿度，观察并记录母猪健康状况。
4、仔猪基础日粮组成及营养水平，见下表2。
表2
注：预混料为每千克饲料提供：维生素a12000iu，维生素d32500iu，维生素e30iu，维生素k3mg，维生素b11.52mg，维生素b24mg，维生素b63mg，维生素b120.012mg，泛酸15mg，烟酸40mg，氯化胆碱400mg，锌80mg，铁84mg，锰20mg，铜180mg，碘0.48mg，硒0.36mg和金霉素100mg。
5、测定项目
于仔猪14日龄和21日龄(断奶当天)每组选择健康程度相近的10头仔猪(每窝1头)，将仔猪面朝上固定，全身成一直线，前肢上抬，将针从胸前部两个小窝斜着向对侧肩关节顶端刺入，直接找前腔静脉窦采血20ml，其中10ml用肝素抗凝，用于测定cd4+、cd8+淋巴细胞含量及其比例；另外10ml静置10-15min，采用离心机进行离心15min(3500r/min)，吸取上清液—血清分装于1.5ml的ep管中，于-20℃冰箱中冷冻保存，用于测定免疫球蛋白igg、igm浓度。
于仔猪21日龄先称重再抽血，抽血完毕静脉放血致死、屠宰，完整取出胰腺组织，并精确称量胰腺重量。取十二指肠2cm、空肠2cm、回肠2cm，pbs缓冲液清洗后，置于4％的多聚甲醛溶液中固定以备组织学观察与分析。
6、试验数据采用spss软件进行处理，各项指标见下表3～6。
表3对仔猪血清中免疫球蛋白浓度的影响(μg/ml)
注：不同组别间字母不同表示差异显著(p＜0.05)，相同表示差异不显著(p＞0.05)。
免疫球蛋白是具有抗体活性或化学结构与抗体相似的球蛋白，是由b细胞接受抗原刺激后增殖分化为浆细胞所产生的介导体液免疫的重要免疫分子。igg具有抗细菌、病毒、外毒素等多种活性作用，促进单核巨噬细胞的吞噬作用；igm具有杀菌、溶菌、促吞噬和凝集作用，具有强大的抗感染作用。
由表3可以看出，试验期内，试验ii组和试验ⅲ组仔猪血清中免疫球蛋白igg和igm较对照组(试验ⅰ组)均有显著提高(p＜0.05)，表明通过饲喂本发明实施例的添加剂可显著提高仔猪血清中免疫球蛋白的含量，说明仔猪的免疫力得到显著提高。
表4对仔猪血液中cd4+和cd8+淋巴细胞含量的影响(％)
注：不同组别间字母不同表示差异显著(p＜0.05)，相同表示差异不显著(p＞0.05)。
cd4+是一个传递信号的分子，促使t细胞激活。cd8+主要功能是清除被病毒感染的细胞，cd8+含量越高，表明被感染的细胞越多，说明机体本身的免疫能力降低。cd4+与cd8+比值的减小是免疫能力下降的重要指征。
由表4可以看出，试验期内，试验ii组和试验ⅲ组仔猪血液中cd4+含量较对照组(试验ⅰ组)明显升高，而cd8+含量较对照组明显下降，cd4+/cd8+的值较对照组(试验ⅰ组)均有显著提高，说明饲喂本发明实施例添加剂能够促进激活仔猪的t细胞，清除被病毒感染细胞的能力增强，可提高仔猪的抵抗力和免疫力。
表5对断奶仔猪胰腺质量的影响
注：不同组别间字母不同表示差异显著(p＜0.05)，相同表示差异不显著(p＞0.05)。
由表5可以看出，饲喂21天，试验ii组和试验ⅲ组仔猪的胰腺重量和胰腺相对质量较试验i组(空白对照组)具有显著差异，胰腺重量和胰腺相对质量均显著高于试验i组，试验ii组和试验ⅲ组仔猪的活体重也高于试验i组，表明饲喂本发明实施例1添加剂的可以明显促进仔猪的胰腺组织生长，同时能够促进仔猪的生长发育；而胰腺的分泌液是小肠中蛋白分解酶、淀粉分解酶及脂肪分解主要来源，间接可以说明饲喂本发明实施例1添加剂可以增强仔猪的对饲料的消化能力。
表6对断奶仔猪肠道结构的影响
注：绒隐比为绒毛高度与隐窝深度的比值；不同组别间字母不同表示差异显著(p＜0.05)，相同表示差异不显著(p＞0.05)。
绒毛为小肠的功能单位，绒毛变高极大地增加了营养物质的吸收面积。而隐窝变浅，表明细胞的成熟率上升，分泌功能强。绒隐比可综合反映小肠的功能状态，比值下降表明消化吸收功能下降，常伴随腹泄病的发生；比值上升，消化吸收功能增强，腹泻率下降。
由表6可以看出，饲喂21天后，试验ii组和试验ⅲ组仔猪肠道(十二指肠、空肠和回肠)的绒毛高度、隐窝深度、绒隐比与试验i组(不使用任何添加剂)相比，均具有明显差异，饲喂本发明实施例1添加剂21天的试验ii组和试验ⅲ组仔猪肠道(十二指肠、空肠和回肠)的绒毛高度明显高于试验i组，而隐窝深度显著低于试验i组，绒隐比显著高于试验i组，表明饲喂本发明实施例1添加剂的可以提高小肠绒毛高度和绒隐比，能够明显改善断奶仔猪肠道的消化道形态，说明本发明实施例1的添加剂可以明显提高仔猪的肠道健康度。
参照上述效果证明性试验的方法，以不添加任何添加剂为空白对照组，并分别以实施例2～5和对比例1～2的添加剂为试验材料进行试验，实施例2～5的添加剂的添加量为3000g/t，结果显示：相较空白对照组，饲喂添加实施例2～5添加剂的仔猪，其血清中的免疫球蛋白igg和igm均得到明显提高，血液中cd4+含量明显升高，cd8+含量明显下降，cd4+/cd8+的值增大，表明饲喂本发明实施例2～5的添加剂均可提高断奶仔猪的免疫力；饲喂本发明实施例2～5添加剂21天，仔猪的活体重高于不饲喂任何添加剂的对照组，而仔猪的胰腺重和胰腺相对质量均显著高于对照组以及饲喂对比例1和对比例2添加剂的试验组，仔猪的肠道(十二指肠、空肠和回肠)的绒毛高度明显高于对照组和饲喂对比例1～2添加剂的试验组，隐窝深度则明显低于对照组和对比例1～2。
而饲喂添加对比例1～2添加剂的仔猪，较对照组，其血清中的免疫球蛋白含量虽然有所提高，但效果不明显，且仔猪血液中cd4+含量升高不明显，cd8+含量有所下降，cd4+/cd8+的值增大不显著，说明对比例1～2的对提高仔猪免疫力的效果不佳；饲喂21天，仔猪的胰腺重和胰腺相对质量较对照组的增高也不明显，同时仔猪肠道健康度改善效果也不明显。
以上所述实施例的各技术特征可以进行任意的组合，为使描述简洁，未对上述实施例中的各个技术特征所有可能的组合都进行描述，然而，只要这些技术特征的组合不存在矛盾，都应当认为是本说明书记载的范围。
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。