本发明属于蛋白乳液制备领域，主要涉及一种高含油蛋白乳液的制备方法。
背景技术：
紫苏是唇形科一年生的草本植物，在中国、日本、韩国等亚洲国家有着上千年的种植历史。紫苏籽中含有35-45%的油脂，90%为不饱和脂肪酸，其中α-亚麻酸的含量为52.58%-61.98%。同时，紫苏油中含有18种氨基酸，必需氨基酸的含量较高，其中赖氨酸和甲硫氨酸明显高于小麦、玉米等常见经济植物。有研究表明，紫苏油具有降血脂、抗氧化、抗衰老、提高免疫力、增强记忆力等功效。因此，紫苏油具有重要的保健价值和开发价值。但由于紫苏油几乎不溶于水，导致其生物利用率较低，而且紫苏油中的主要活性物质是不饱和脂肪酸，结构中含有双键，导致其不稳定极易发生氧化酸败，尤其环境因素（温度、光照、催化剂等）会加剧不饱和脂肪酸氧化的过程。目前主要通过添加人工抗氧化剂，或制备成软胶囊防止紫苏油氧化，增加其生物利用率，而人工抗氧化剂具有一定的毒副作用，软胶囊的粒径较大，吸收效率较低，并未达到人们所期望的效果。吴旭锦等人利用有机小分子表面活性剂（吐温80）制备紫苏油纳米乳，与传统的紫苏油相比可以提高紫苏油降低血脂的能力，但是有机小分子表面活性剂对人体健康有一定的影响，因此开发一种新的表面活性剂来稳定紫苏油乳液具有重要的意义。
传统制备乳液所用的表面活性剂主要有小分子的有机溶剂（吐温、丝盘）、大分子有机物，如淀粉、多糖、蛋白等。由于小分子的表面活性剂对人体健康有一定的影响，因此目前国内外主要以大分子的有机物作为表面活性剂，有研究表明利用超声、高压均质等技术，将大豆分离蛋白与磷脂复合制备乳液，可以降低乳液的粒径，提高乳液的稳定性，增强乳液的生物利用率。尽管油脂制备成乳液会防止油脂氧化，增强油脂的稳定性，提高油脂的生物利用率，但乳液中油脂的含量较低，增加油脂的含量会降低乳液的稳定性，这是现有技术存在的问题。
技术实现要素：
本发明所要解决的技术问题是克服上述现有技术的不足，提供一种高含油蛋白乳液的制备方法，达到紫苏油添加量高达90%，提高乳液含油量的同时增加乳液的稳定性。
本发明所要解决的技术问题是通过以下技术方案来实现的，该方法包括以下步骤：
步骤一：脱皮大豆用粉碎机研磨成大豆粉，大豆粉与正己烷按照1:3-5比例混合，在室温下搅拌20-60min，然后在3000-4500r/min下离心15-30min,去除上层液体，得到下层沉淀，如此重复3次，将下层沉淀物在50-70℃下放置1-2h，得到脱脂大豆粉；
步骤二：脱脂大豆粉与蒸馏水按照1:8-10的质量比混合得到混合液，用naoh调节混合液ph至7-9后在室温下搅拌2-3h，随后在3000-4000g下离心10min得到上清液，用h2so4调节上清液ph值至6-7并在50-60℃下加热15-30min，加入nacl，并用naoh调节ph至5-7，在3000g下离心10min得到沉淀，将所得的沉淀冷冻干燥得到高乳化蛋白；
步骤三：将高乳化蛋白溶于0.05m磷酸盐缓冲溶液（ph7.4）中，在室温下搅拌2-5h，加入磷脂酰胆碱和紫苏油，所述的高乳化蛋白添加量为：0.5-3g，磷脂酰胆碱添加量为0.05-0.1g，紫苏油添加量为70-90g，混合物在10000-15000rmp下粗均3-5min，然后在80-100mpa下进行高压均质，均质次数为2-4次，得到高含油蛋白乳液。
进一步限定，大豆粉与正己烷混合的最适质量比为1:3，混合物的搅拌时间为40min，在4500rmp/min下离心30min。
进一步限定，脱脂大豆粉与蒸馏水的质量为1:10，ph为8.5，混合物在室温下搅拌的时间为3h，离心的参数为3000g，10min，所得上清液的最适ph为6.8，在55℃下加热30min，加入nacl后调节ph至5.5。
进一步限定，高乳化蛋白的添加量为1g，磷脂酰胆碱添加量为0.06g，紫苏油添加量为90g，搅拌时间为3h，加入磷脂酰胆碱的参数为0.05%，粗均时间为3min，高压均质条件为80mpa，均质次数为3次。
本发明制备的高乳化蛋白与传统的大豆分离蛋白相比，高乳化蛋白是大豆油脂体表面的一种蛋白，主要用于稳定天然油脂体的稳定性，高乳化蛋白会在油滴的表面形成一层粗糙并富有弹性的薄膜，与磷脂相互作用，阻止油滴发生聚集，提高油滴的稳定性。利用高压均质技术，以亲脂性蛋白和磷脂作为表明活性剂，将紫苏油进行包裹制备成紫苏油乳液不仅可以提高乳液的稳定性，同时也可以提高乳液中紫苏油的含量，使其含量达到90%，提高紫苏油乳液的生物利用率。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明具体实施例进行详细描述。
具体实施方式一：
步骤一：脱皮大豆用粉碎机研磨成粉末，大豆粉与正己烷按照1:3质量比混合，在室温下搅拌40min，4500rmp/min下离心30min,去除上层液体，得到下层沉淀，如此重复3次，将下层沉淀物在60℃下放置2h，得到脱脂大豆粉；
步骤二：脱脂大豆粉与蒸馏水按照1:10的质量比混合，用2mnaoh调节ph至8.5，混合物在室温下搅拌3h，之后在3000g下离心10min，用3.5mh2so4调节上清液ph值6.8并在55℃下加热30min，加入50mm的nacl，并用2mnaoh调节ph至5.5，在3000g，室温下离心10min，将所得的沉淀冷冻干燥得到高乳化蛋白；
步骤三：1g的高乳化蛋白溶于0.05m的磷酸盐缓冲溶液（ph7.4）中，在室温下搅拌3h，加入0.06g的磷脂酰胆碱和90g的紫苏油，混合物在10000rmp下粗均3min，之后在40mpa下进行高压均质，均质次数为3次，得到紫苏油乳液。乳化活性为220m2/g，乳化稳定性可达240min。
具体实施方式二：本实施方法与具体实施方法一不同点在于：步骤三中，0.6g的高乳化蛋白溶于0.05m的磷酸盐缓冲溶液（ph7.4）中。其它步骤和参数与具体实施方法一相同。乳化活性为170m2/g，乳化稳定性可达220min。
具体实施方式三：本实施方法与具体实施方法一不同点在于：步骤三中，1.5g的高乳化蛋白溶于0.05m的磷酸盐缓冲溶液（ph7.4）中。其它步骤和参数与具体实施方法一相同。乳化活性为180m2/g，乳化稳定性可达210min。