本发明涉及食品生物技术领域，具体涉及一种利用红曲发酵麦胚红枣山药制备无桔霉素发酵液的方法。
背景技术：
红枣又名大枣、华枣，是鼠李科枣属植物枣树的果实。红枣是我国的特产，有极高的营养价值和很好的医疗保健作用，是祖国传统医药中“药食同源”的优良补品，也是被国内外医药界重视的滋补剂。红枣多糖是红枣中重要的天然活性成分，具有明显的抗补体活性和促进淋巴细胞的增殖作用，可明显减轻衰老模型小鼠免疫器官的萎缩及脑的老化，体外对各种活性氧均具有清除作用，是红枣具有保健功能的重要功能因子之一。
山药为薯蓣科薯蓣属多年生蔓性之根茎类植物，为可供食用、药用或保健用之重要作物之一，具高产及富含营养之特色。山药中富含薯蓣皂苷。薯蓣皂苷是甾体总皂苷的一种，在薯蓣科植物中含量最为丰富，国产的薯蓣属植物中，穿龙薯蓣、黄山药薯蓣、盾叶薯蓣等在医药研发上较为常用。中医学认为薯蓣科植物具有“活血舒筋，消食利水，祛痰，截疟”的功效，现代研究证实其具有抗肿瘤、改善心血管功能、调节免疫、抗血小板聚集、降血脂等多种药理作用。
麦胚是我国传统的药食同源食品。《本草纲目》记载：“麦胚可治心悸失眠、养心安神、养肝气、止泻、降压、健胃”。明代医书《免疫类方》描述其为“补虚，免除疫疠，强气力”。现在研究指出，麦胚富含维生素e、谷胱甘肽、谷胱甘肽过氧化酶、二十八烷醇、膳食纤维、功能蛋白和丰富的矿物质元素，能够改善肝功能、提高人体免疫力、促进血液循环、延缓衰老，是一种养生良品。麦胚中蛋白质含量在30%左右，主要以清蛋白和球蛋白为主，是一类优质的植物蛋白质资源。经研究表明：麦胚球蛋白和麦胚清蛋白具有免疫调节、抗氧化、微生物代谢调控等多种生物学功能。
在我国，红曲已有一千多年的历史，不仅可以应用于糕点、腐乳、酿酒等传统的食品产业，而且因其能产生多种具有降血脂、降胆固醇、降血压、降血糖等功能的代谢产物而被应用于生产具有特殊功能的保健食品。但红曲霉在发酵过程中还可产生桔霉素，研究发现桔霉素是红曲菌固有的次级代谢产物，具有生殖毒性、免疫毒性、致癌毒性。通过代谢调控以降低红曲菌产桔霉素是目前发酵工程研究的课题之一。
申请号为201210536354.9的发明专利通过在泡米水中添加桔霉素抑制剂、控制培养含水量、在补水添加金属螯合剂等措施以达到控制桔霉素合成的目的，并在发酵后期通过氧化剂进一步去除桔霉素，从而得到低桔霉素的红曲米产品；申请号为201410118527.4的发明专利是在红曲发酵后期加入2-三十碳酮以生产不含桔霉素的红曲粉；另外还有部分发明专利是通过去除或者提取等方法实现桔霉素的去除。
本专利在前期研究下发现高蛋白培养基可对桔霉素的产生起到明显的抑制作用，该方法简单方便，且不会造成产品的污染。
技术实现要素：
本发明所要解决的技术问题是通过高蛋白培养的方法，实现红曲霉发酵过程中不产生桔霉素的目的。经初步研究分析，其机理是（1）当培养基中蛋白质含量特别高时，红曲霉在生长繁殖时桔霉素的代谢酶表达受到抑制，同时研究发现当降低蛋白质含量后，桔霉素表达又回复到了正常的情况；（2）麦胚蛋白与桔霉素的产生有密切的关系。桔霉素的表达量随麦胚含量的升高而降低。
本发明所述的一种利用红曲发酵麦胚红枣山药制备无桔霉素发酵液的方法，包括如下步骤：
（1）菌种活化：对红曲霉菌株进行活化、复壮；
（2）种子液的制备：将复壮后的红曲霉菌株接种到液态种子培养基中进行培养，30℃培养56h得到种子液；
（3）发酵培养基的制备：发酵培养基各组分为：麦胚粉60-90g/l、红枣粉50-80g/l、山药粉30-50g/l、蛋白含量35-50g/l、磷酸氢二钠5g/l、磷酸二氢钾6g/l，各组分混合均匀后，完成发酵培养基的杀菌；
（4）发酵：将液态种子液按照1%-5%（体积比例）的比例接入到发酵培养基中进行发酵，发酵温度为30℃，发酵时间为72h-108h。
步骤（3）中所述的发酵培养基中还包括蛋白质，其含量为蛋白含量35-50g/l。
步骤（3）中所述的发酵培养基中的蛋白质原料，如：大豆蛋白粉、玉米蛋白粉、乳清蛋白粉，包括但不仅限于以上几种原料。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：通过高蛋白培养基，实现以红曲为发酵菌株，红枣山药为主要发酵原料制成的一种不含桔霉素的发酵液的制备方法，且发酵液中的洛伐他汀含量不会减少，方法简单便于操作，效果显著、成本低，制备的红枣山药发酵液具有显著的免疫调节效果，并可使血胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇水平降低。
具体实施方式
本发明以下将结合实施例作进一步描述：
实施例一：
（1）菌种活化：对红曲霉菌株进行活化、复壮；
（2）种子液的制备：将购买的红曲霉菌株接种到液态种子培养基中进行培养，30℃培养56h得到种子液；
（3）发酵培养基的制备：发酵培养基各组分为：麦胚粉、红枣粉、山药粉、蛋白、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、水，各组分混合均匀后，完成发酵培养基的杀菌；
（4）发酵：将液态种子液按照2%（体积比例）的比例接入到发酵培养基中进行发酵，发酵温度为30℃，发酵时间为84h。
步骤（3）中所述的发酵培养基组成为：麦胚粉60g/l、红枣粉50g/l、山药粉30g/l、蛋白含量35g/l、磷酸氢二钠5g/l、磷酸二氢钾6g/l。
步骤（3）中所述的发酵培养基中的蛋白质原料为大豆蛋白粉。
发酵结束后经检测发酵液中不含桔霉素。
实施例二：
（1）菌种活化：对红曲霉菌株进行活化、复壮；
（2）种子液的制备：将购买的红曲霉菌株接种到液态种子培养基中进行培养，30℃培养56h得到种子液；
（3）发酵培养基的制备：发酵培养基各组分为：麦胚粉、红枣粉、山药粉、蛋白、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、水，各组分混合均匀后，完成发酵培养基的杀菌；
（4）发酵：将液态种子液按照5%（体积比例）的比例接入到发酵培养基中进行发酵，发酵温度为30℃，发酵时间为108h。
步骤（3）中所述的发酵培养基组成为：麦胚粉80g/l、红枣粉80g/l、山药粉50g/l、蛋白含量50g/l、磷酸氢二钠5g/l、磷酸二氢钾6g/l。
步骤（3）中所述的发酵培养基中的蛋白质原料为玉米蛋白粉。
发酵结束后经检测发酵液中不含桔霉素。
实施例三：
（1）菌种活化：对红曲霉菌株进行活化、复壮；
（2）种子液的制备：将购买的红曲霉菌株接种到液态种子培养基中进行培养，30℃培养56h得到种子液；
（3）发酵培养基的制备：发酵培养基各组分为：麦胚粉、红枣粉、山药粉、蛋白、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、水，各组分混合均匀后，完成发酵培养基的杀菌；
（4）发酵：将液态种子液按照1%（体积比例）的比例接入到发酵培养基中进行发酵，发酵温度为30℃，发酵时间为72h。
步骤（3）中所述的发酵培养基组成为：麦胚粉90g/l、红枣粉70g/l、山药粉40g/l、蛋白含量40g/l、磷酸氢二钠5g/l、磷酸二氢钾6g/l。
步骤（3）中所述的发酵培养基中的蛋白质原料为乳清蛋白粉。
发酵结束后经检测发酵液中不含桔霉素。
发酵前后活性成分对比表