本发明涉及禽畜添加剂技术领域，特别是涉及一种用于提高动物机体免疫力的添加剂及其制备方法和应用。
背景技术：
母猪免疫力对提高母猪生产效率至关重要，提高途径有两种，一是通过控制母猪本身的病原增殖来减少对仔猪的垂直感染，从而降低胚胎或胎儿的死亡率，二是通过提高母乳的抗体水平，进而提高仔猪断奶前的成活率。
母乳是哺乳仔猪生存和生长发育的重要因素，直接影响仔猪生存、生长、发育和机体的组成。乳成分质量的好坏直接影响到仔猪出生后一系列的生长发育状况，对仔猪的健康发育、育成率及养殖业的快速稳步增长具有重要作用。母乳是仔猪出生后获得营养途径的唯一来源，通过改善母猪营养，提高母乳产量和质量是减少哺乳仔猪死亡、维护哺乳仔猪健康状况、改善哺乳仔猪性能以及提高母猪繁殖效率的重要途径。
母猪营养在猪的营养上有着非常重要的地位，日粮中各种营养成分的水平直接影响母猪的生产性能。为了充分发挥母猪的生产潜力，提高生产效率以及达到最佳生产效益，在供给母猪充足养分、平衡日粮的同时，添加剂的应用是进一步提高母猪效能与经济效益的关键因素，能够预防和增加机体抵抗能力。大量研究显示，通过增强母猪的免疫功能，并通过母乳可以提高仔猪的被动免疫功能，增强仔猪健康，提高仔猪成活率。
技术实现要素：
基于此，有必要提供一种添加剂，能够提高动物的机体免疫力。
一种用于提高动物机体免疫力的添加剂，按重量百分比计，包括：两仪散7％～13％、枸杞子5％～12％、铁皮石斛2％～12％、五味子6％～16％、黄芪多糖10％～20％和余量辅料；
所述两仪散主要由以下重量份的原料经发酵制备得到的：党参1～2份和熟地黄2～4份。
上述用于提高动物机体免疫力的添加剂，通过将两仪散、枸杞子、铁皮石斛、五味子和黄芪多糖进行科学配伍后作为饲料添加剂添加于动物饲料中，各成分相辅相成，可协同提高动物的非特异性免疫功能、特异性细胞免疫以及体液免疫功能，还能改善动物肠道微生态环境，其效果稳定并明显优于只添加一种成分时所产生的效果。其次，上述添加剂所选原料安全无毒，添加于动物饲料中，能够明显增强动物的综合免疫功能，还能够提高雌性动物母乳的质量。
两仪散，由党参和熟地黄经发酵制备而成，富含生物碱、黄酮类、环烯醚萜类、单萜、活性寡糖和多肽类等活性成分，具有补益气血、增强巨噬细胞吞噬能力、促进淋巴细胞的转化，增强抗体产生细胞的功能，提高抗体滴度和提高机体对有害刺激的抵抗能力等作用。
枸杞子，为茄科植物枸杞的成熟果实，含有多种氨基酸和阿拉伯糖、葡萄糖、半乳糖、甘露糖、木糖、鼠李糖等枸杞多糖，并含有甜菜碱、玉蜀黍黄素、酸浆果红素等特殊营养成分，能够增强非特异性免疫功能，促进巨噬细胞的吞噬能力，增强血清溶菌酶的作用，提高抗病能力，抑制肿瘤生长和细胞突变；同时对机体具有改善新陈代谢、调节内分泌、促进蛋白合成、加速肝脏解毒和受损肝细胞的修复，抑制胆固醇和甘油三酯的功能，并且对肝脏的脂质过氧化损伤有明显的保护和修复作用。
铁皮石斛，又名黑节草、云南铁皮、铁皮斗，是兰科草本植物，含有石斛活性多糖、石斛碱、多种氨基酸和钙、铁、锌、硒、镁、锰、铜、铬、镍等多种微量元素，能够促进巨噬细胞的吞噬功能，增强t淋巴细胞的增殖和分化及nk细胞(naturalkillercell，自然杀伤细胞)的活性，并能明显提高血清溶血素值。
五味子，为木兰科植物五味子或华中五味子的干燥成熟果实，是最早列于神农本草经上的中药，具滋补强壮之力，药用价值极高，有强身健体之效。其能降低谷丙转氨酶升高，具抗肝损伤作用；有广泛的中枢抑制作用，并且有安定作用；有强心、降压作用；抗菌作用；能增强机体对非特异性刺激的防御能力。
黄芪多糖，是豆科植物蒙古黄芪或膜荚黄芪的干燥根经提取、浓缩、纯化而成的水溶性杂多糖，由己糖醛酸、葡萄糖、果糖、鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖醛酸和葡萄糖醛酸等组成，可显著增强非特异性免疫功能和体液免疫功能。对正常机体的抗体生成功能有明显促进作用，刺激巨噬细胞和t细胞的功能，使e环形成细胞数增加，诱生细胞因子，促进白细胞介素诱生，而使动物机体产生内源性干扰素，从而达到抗病毒的目的；对细菌及其毒性产物的直接抑杀和解毒作用，通过调动机体免疫防御功能而发挥扶正祛邪抑菌，杀菌作用；还可增加肠道乳酸杆菌和双歧杆菌的数量，显著降低大肠杆菌的数量，可有效促进肠道有益微生物的增殖，并对肠道有害菌有抑制作用。
在其中一个实施例中，按重量百分比计，所述添加剂包括：两仪散8％～10％、枸杞子10％～12％、铁皮石斛5％～8％、五味子10％～15％、黄芪多糖15％～20％和余量辅料。
可以理解，上述添加剂中还可以包括除两仪散、枸杞子、铁皮石斛、五味子和黄芪多糖以外的其他中药组分及营养成分。
在其中一个实施例中，所述辅料包括助流剂和稀释剂，所述助流剂占所述添加剂总重量的0.5％～3％。
在其中一个实施例中，所述助流剂选自二氧化硅、硬脂酸镁和滑石粉中的至少一种。如此，添加0.5％～3％的助流剂，能保持添加剂原料的流散，能够畅通均匀进入搅拌机，从而保证混合后添加剂的质量。
在其中一个实施例中，所述稀释剂选自淀粉、脱脂米糠、豆粕粉、葡萄糖中的至少一种。如此，选用动物可食用且无害物质、营养价值较高的淀粉、脱脂米糠、豆粕粉等作为稀释剂，加入到添加剂中，能够将两仪散、黄芪多糖等组分的浓度降低，并将多种活性组分的颗粒分开，有效保证添加剂的混合均匀性及后续与饲料预混的质量。
在其中一个实施例中，为了提高产品的适口性，所述辅料还包括香料。
可以理解，上述添加剂由于含有黄芪多糖和枸杞子，使得产品气味芳香，适品性好。但是为了使添加剂的适口性更佳，可以添加适量的香料。
本发明另一目的在于提供上述用于提高动物机体免疫力的添加剂的制备方法，包括以下步骤：
按照所述添加剂的配方，称取各组分，将所述各组分混合均匀，得到所述添加剂。
上述制备方法操作简单，制备条件可控性好，可批量化大规模生产。
在其中一个实施例中，在称取各组分的步骤之前，将所述添加剂中的各组分原料进行粉碎和过筛处理，所述过筛处理中筛孔的孔径为10～80目。
在其中一个实施例中，还包括制备所述两仪散的步骤：
将活化的益生菌接种至液体培养基中，静止培养24h～48h，得到益生菌扩培菌液；
将所述两仪散的原料和豆粕粉碎、过筛，得到混合粉料；
将所述混合粉料和发酵培养基混匀，接种所述益生菌扩培菌液后，培养24h～48h，得到发酵混合物；
将所述发酵混合物过滤，分别收集滤液和滤渣；
将所述滤液于50℃～65℃进行喷雾干燥处理，然后与经过烘干、粉碎处理后的所述滤渣混合均匀，得到所述两仪散。
如此，由于熟地黄在粉碎过程中易粘黏，不易粉碎，因此将两仪散的原料党参和熟地黄与豆粕一起粉碎，可以提高粉碎效果和效率，而且豆粕可以为后续发酵提供充足的氮源，促进发酵过程的进行；然后通过将发酵混合物过滤，滤渣和滤液单独干燥处理后再混合，其中滤液于50℃～65℃进行喷雾干燥处理，既能保持活性成分的活性，又能保持益生菌嗜酸乳杆菌的活性，提高两仪散的功效。
具体地，所述两仪散的制备步骤包括：
将活化的益生菌接种至液体培养基中，于36℃～38℃、静止培养24h～48h，得到益生菌扩培菌液；
将所述两仪散的原料和豆粕粉碎、过30目～80目筛，得到混合粉料；
将所述混合粉料和发酵培养基混匀，接种所述益生菌扩培菌液后，于ph值为6.0～7.0、温度为36℃～38℃、压强为0.02kpa～0.1kpa，搅拌转速为10r/min～30r/min的条件下培养24h～48h，得到发酵混合物；
将所述发酵混合物过滤，分别收集滤液和滤渣；
将所述滤液于50℃～65℃进行喷雾干燥处理，然后与经过烘干、粉碎处理后的所述滤渣混合均匀，得到所述两仪散。
在其中一个实施例中，所述两仪散的原料和所述豆粕的质量比为(2～5)：10。
在其中一个实施例中，所述混合粉料和所述发酵培养基的添加比为5g:(0.5～1)l，所述益生菌扩培菌液的接种量为2vol％～10vol％。值得说明的是，所述益生菌扩培菌液的接种量为2vol％～10vol％，是指所述益生菌扩培菌液的接种体积占所述混合粉料和所述发酵培养基混合后的体积的2％～10％。如此，通过控制原料和菌种接种量，可保证短时间内发酵完全，且有大量活菌存在发酵液中。
在其中一个实施例中，所述益生菌选自嗜酸乳杆菌、德氏乳酸杆、植物乳杆菌、粪链球菌和屎肠球菌中的至少一种。
较优的，所述益生菌为嗜酸乳杆菌。
在其中一个实施例中，1l所述液体培养基中包括：蛋白胨10g、牛肉粉5g、酵母粉4g、葡萄糖20g、吐温1ml、磷酸氢二钾2g、乙酸钠5g、柠檬酸三铵2g、硫酸镁0.2g、硫酸锰0.05g及水余量。
在其中一个实施例中，1l所述发酵培养基中包括：麦麸5g、蛋白胨8g、牛肉粉4g、酵母粉3g、葡萄糖15g、吐温1ml、磷酸氢二钾2g、乙酸钠5g、柠檬酸三铵2g、硫酸镁0.2g、硫酸锰0.05g及水余量。
在其中一个实施例中，还包括活化所述嗜酸乳杆菌的步骤：
将嗜酸乳杆菌接种于固体培养基中，于36℃～38℃培养24h～48h进行活化；
其中，所述固体培养基的配方为：蛋白胨10g，牛肉粉5g，酵母粉4g，葡萄糖20g，吐温801ml，磷酸氢二钾2g，乙酸钠5g，柠檬酸三铵2g，硫酸镁0.2g，硫酸锰0.05g，琼脂18g，水补齐至1000ml。
本发明又一目的在于提供上述添加剂在制备动物饲料中的应用。
在其中一个实施例中，将所述添加剂应用于母猪饲料的制备中。
在其中一个实施例中，所述添加剂按质量百分比0.1％～0.5％加入至所述母猪饲料中。
进一步地，所述添加剂按质量百分比0.1％～0.5％加入至所述母猪哺乳期饲料中，以提高母猪的免疫力和母乳质量。
将上述添加剂应用于母猪哺乳期的饲料中并饲喂哺乳中的母猪，能够明显提高母猪的免疫力和母乳质量，提高母乳中免疫球蛋白的含量，进而可以提高仔猪的被动免疫功能，增强仔猪健康，提高仔猪成活率。
具体实施方式
为了便于理解本发明，下面将对本发明进行更全面的描述，并给出了本发明的较佳实施例。但是，本发明可以以许多不同的形式来实现，并不限于本文所描述的实施例。相反地，提供这些实施例的目的是使对本发明的公开内容的理解更加透彻全面。
除非另有定义，本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本发明的技术领域的技术人员通常理解的含义相同。本文中在本发明的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的，不是旨在于限制本发明。本文所使用的术语“和/或”包括一个或多个相关的所列项目的任意的和所有的组合。
以下为具体实施方式。
本发明实施例所用原料均来源于市售。
实施例1～5的提高母猪免疫力的添加剂的配方，见下表1。
表1添加剂的配方
注：“-”表示不添加；表中助流剂采用二氧化硅，稀释剂采用葡萄糖；当然助流剂还可选用硬脂酸镁或滑石粉，稀释剂可选用脱脂米糠、豆粕粉或淀粉。
2、制备方法：
a、两仪散的制备步骤如下：
1)、按照1份党参、2份熟地黄、10份豆粕，准确称取各组分，混合后粉碎、过60目筛，得混合粉末，待用；
2)、挑取嗜酸乳杆菌于固体培养基中37℃培养36h进行活化；
固体培养基配方：蛋白胨10g，牛肉粉5g，酵母粉4g，葡萄糖20g，吐温801ml，磷酸氢二钾2g，乙酸钠5g，柠檬酸三铵2g，硫酸镁0.2g，硫酸锰0.05g，琼脂18g，纯水1000ml。
3)、挑取活化的嗜酸乳杆菌接种至液体培养基中，于36℃～38℃，静止培养12h～24h，作为一级种子液。
按接种量为8vol％吸取一级种子液，接种于液体培养基中。于培养箱中36℃～38℃，静止培养12h～24h，作为二级种子液。；
液体培养基：蛋白胨10g、牛肉粉5g、酵母粉4g、葡萄糖20g、1ml吐温80、磷酸氢二钾2g、乙酸钠5g、柠檬酸三铵2g、硫酸镁0.2g、硫酸锰0.05g和纯水1000ml。
4)、配制发酵培养基并倒入发酵罐中，按照1l发酵培养基加入10g步骤1)制备的混合粉末，加入步骤1)制备的混合粉末，发酵罐通蒸汽灭菌30min，接种步骤3)的嗜酸乳杆菌扩培菌液(即二级种子液)，接种量为8vol％，于ph6、37℃、10r/min～30r/min条件下培养36h。
发酵培养基：麦麸5g、蛋白胨8g、牛肉粉4g、酵母粉3g、葡萄糖15g、1ml吐温80、磷酸氢二钾2g、乙酸钠5g、柠檬酸三铵2g、硫酸镁0.2g、硫酸锰0.05g和纯水1000ml。
5)、发酵完毕放罐收集发酵液，往发酵液中加入絮凝剂并转移至板框过滤器中过滤，分别收集滤液与滤渣，滤液于喷嘴口径为0.5mm～1mm，温度为50℃～65℃的低温喷雾干燥机干燥，滤渣于鼓风烘箱中60℃～80℃烘4h～5h后粉碎，两者合并、混匀，即得两仪散。
b、提高母猪免疫力的添加剂的制备步骤如下：
分别将颗粒状和块状的原料粉碎、过药典2号筛(相当于筛孔24目)；
按照表1中的各实施例和对比例的配方准确称取各粉碎过筛后的原料组分；
将各原料组分混合均匀，过药典3号筛(相当于筛孔50目)，分装即可。
通过上述方法制备得到的添加剂为粉剂，气味芳香、适口性好，且便于后续添加混料。
效果证明性试验
1、试验材料
上述实施例1的添加剂。
2、试验动物与试验设计
采用单因素试验设计，将63头妊娠1d的母猪根据胎次、体况相近原则随机分成3个试验组，每组3个重复，每个重复7头母猪，单栏饲养。其中试验ⅰ组作为空白对照组，不添加任何添加剂；试验ⅱ组在饲料中按照1000g/t饲料的添加量添加实施例1的添加剂；试验ⅲ组在饲料中按照2000g/t饲料的添加量添加实施例1的添加剂。妊娠母猪饲料从母猪妊娠第1d开始饲喂，并一直持续到妊娠90d再换成哺乳母猪饲料至哺乳第21d(仔猪断奶)试验结束。
3、实验日粮与饲养管理
将空怀舍配种后的试验母猪转入妊娠舍的半漏缝地板限位栏中并开始试验，保持舍内清洁干燥、通风良好及舍内温度稳定(23-25℃)。每天饲喂2次，分别在08：00和17：30投料，妊娠前期(妊娠1-30d)饲喂量为2.0kg/d，妊娠中期(妊娠30-90d)饲喂量为2.5kg/d，妊娠后期(妊娠90d—分娩)饲喂量为3.0kg/d，母猪自由饮水；预产期前1周将试验母猪转入彻底消毒的产仔舍；哺乳母猪饲养于全漏缝地板限位栏中，同样保持舍内清洁干燥、通风良好及舍内温度稳定(23-25℃)。母猪自由饮水，临产前用0.1％的高锰酸钾水溶液将其外阴和乳房清洗消毒，并将每个乳头挤压疏通。分娩当天不喂料，分娩后第1d喂2.0kg，以后每天增加0.5kg，直到第5d后让其自由采食。自由采食阶段每天4次饲喂并保持食槽内饲料略有剩余。其他饲养管理和免疫程序均遵循猪场管理制度进行。每天记录温度、湿度，观察并记录母猪健康状况。
4、基础日粮组成及营养水平见下表2
表2
注：预混料为每千克饲料提供：维生素a9000iu，维生素d31800iu，维生素e45iu，维生素k1.5nag，维生素b10.75mg，维生素b24.5mg，维生素b62.25mg，维生素b120.015mg，泛酸11.25mg，烟酸22.5mg，生物素0.188mg，叶酸1.5mg，锌25mg，铁80mg，锰40mg，铜8.5mg，碘0.25mg，硒0.05mg。
5、测定项目
于母猪分娩当天12h内、第8天、第10天、第15天和第21天08：00分别从空腹母猪前、中、后乳头均等收集乳样30ml左右。采乳前，先用0.1％的高锰酸钾溶液清洗乳头，用干毛巾将其擦干后再进行乳样的采集，装于带盖离心管内，样品混匀后迅速在-20℃冰箱中保存待测。其中第10天和第21天收集的常乳用于测定母猪常乳成分；第1天、第8天和第15天收集的母乳用于测定母乳中免疫球蛋白iga、igg、igm浓度。
于母猪生产当天、产后第8天和第15天每头母猪耳缘静脉采血20ml，其中10ml用肝素抗凝，用于测定cd4+、cd8+淋巴细胞含量及其比例；另外10ml静置10-15min，采用离心机进行离心15min(3500r/min)，吸取上清液—血清分装于1.5mlep管中，于-20℃冰箱中冷冻保存，用于测定免疫球蛋白igg、igm浓度。
6、试验结果，各项指标见下表3～6。
表3对母猪常乳成分的影响(wt％)
注：不同组别间字母不同表示差异显著(p＜0.05)，相同表示差异不显著(p＞0.05)。
从上表3中可以看出，试验期内，试验ii组和试验ⅲ组的母猪常乳中，乳蛋白质、乳脂和乳糖含量较对照组(试验ⅰ组)均有显著提高(p＜0.05)，而灰分含量没有明显差异(p＞0.05)，表明通过饲喂本发明实施例的添加剂可显著提高母猪常乳的营养成分含量。
表4对母乳中免疫球蛋白浓度的影响(μg/ml)
注：不同组别间字母不同表示差异显著(p＜0.05)，相同表示差异不显著(p＞0.05)。
由表4可以看出，试验期内，试验ii组和试验ⅲ组母乳中免疫球蛋白iga、igg和igm较对照组(试验ⅰ组)均有显著提高(p＜0.05)，表明通过饲喂本发明实施例的添加剂可显著提高母猪母乳中免疫球蛋白的含量。
免疫球蛋白是具有抗体活性或化学结构与抗体相似的球蛋白，是由b细胞接受抗原刺激后增殖分化为浆细胞所产生的介导体液免疫的重要免疫分子。igg具有抗细菌、病毒、外毒素等多种活性作用，促进单核巨噬细胞的吞噬作用；iga具有抗菌、抗毒、抗病毒作用；igm具有杀菌、溶菌、促吞噬和凝集作用，具有强大的抗感染作用。
表5对母猪血清免疫球蛋白浓度的影响(μg/ml)
注：不同组别间字母不同表示差异显著(p＜0.05)，相同表示差异不显著(p＞0.05)。
由表5可以看出，试验期内，试验ii组和试验ⅲ组母猪血清中免疫球蛋白igg和igm较对照组(试验ⅰ组)均有显著提高(p＜0.05)，表明通过饲喂本发明实施例的添加剂可显著提高母猪母乳中免疫球蛋白的含量，母猪的免疫力得到显著提高。
表6对母猪血液中cd4+和cd8+淋巴细胞含量的影响(％)
注：不同组别间字母不同表示差异显著(p＜0.05)，相同表示差异不显著(p＞0.05)。
cd4+是一个传递信号的分子，促使t细胞激活。cd8+主要功能是清除被病毒感染的细胞，cd8+含量越高，表明被感染的细胞越多，说明机体本身的免疫能力降低。cd4+与cd8+比值的减小是免疫能力下降的重要指征。
由表6可以看出，试验期内，试验ii组和试验ⅲ组血液中cd4+含量较对照组(试验ⅰ组)明显升高，而cd8+含量较对照组明显下降，cd4+/cd8+的值较对照组(试验ⅰ组)均有显著提高，说明饲喂本发明实施例添加剂能够促进激活母猪的t细活，清除被病毒感染细胞的能力增强，可提高母猪的自身的抵抗力和免疫力。
参照上述效果证明性试验的方法，以不添加任何添加剂为空白对照组，并分别以实施例2～5和对比例1～2的添加剂为试验材料进行试验，结果显示：相较空白对照组，饲喂添加实施例2～5添加剂的母猪，其母乳中的营养成分、免疫球蛋白含量以及母猪血清中的免疫球蛋白均得到明显提高，母猪血液中cd4+含量明显升高，cd8+含量明显下降，cd4+/cd8+的值增大，表明饲喂本发明实施例2～5的添加剂均可提高母猪的免疫力；而饲喂添加对比例1～2添加剂的母猪，其母乳中的营养成分、免疫球蛋白含量以及母猪血清中的免疫球蛋白的含量虽然有所提高，但效果不明显，且母猪血液中cd4+含量升高不明显，cd8+含量有所下降，cd4+/cd8+的值增大不显著，说明对比例1～2的对提高母猪免疫力的效果不佳。
以上所述实施例的各技术特征可以进行任意的组合，为使描述简洁，未对上述实施例中的各个技术特征所有可能的组合都进行描述，然而，只要这些技术特征的组合不存在矛盾，都应当认为是本说明书记载的范围。
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。