1.
技术领域：
：本发明总体上涉及包含疏水类黄酮和蛋白质的共沉淀物的产品。共沉淀物的性质使其尤其适合掺入食品和饮料中以增加其类黄酮含量。2.
背景技术：
：：类黄酮是许多植物作为次生代谢产物生产的多酚化合物。由通过c3连接头互连的两个苯环组成的结构(杂环吡喃环)的存在定义了它们。最常见的类黄酮包括以下：芦丁、柚皮素和橙皮素(黄烷酮类)；芹菜素(黄酮类)；异鼠李素、山奈酚和槲皮素(黄酮醇类)；金雀异黄素和大豆黄素(异黄酮类)；表没食子儿茶素、表儿茶素和没食子儿茶素(黄烷-3-酚/儿茶素类)和矢车菊素、飞燕草素、花葵素和锦葵色素(花青素类)。许多类黄酮具有与其抗氧化、抗菌和/或抗炎性质相关的治疗和药理特性。不幸的是，很少有人能够获得使他们能够充分享受这些化合物带来的好处的食物供应类型。例如，芦丁(槲皮素-3-鼠李糖基葡萄糖苷)是一种众所周知的类黄酮糖苷，大量存在于诸如荞麦种子和果实(尤其是柑橘及其果皮)等天然来源中。该分子包含黄酮醇槲皮素和二糖芸香糖。芦丁在分子水平上具有有效的抗氧化性能。由于芦丁具有显著的自由基清除特性，因此它具有治疗和药理作用，诸如抗炎、抗糖尿病、降血脂和抗癌作用。然而，在日常饮食中需要高剂量的这种类黄酮化合物以实现此类益处。市场上当前的补充剂(保健品)建议每天口服500mg。在典型的西方饮食中，类黄酮(诸如芦丁)的每日摄入量低得多——中位数摄入量为10mg/天。虽然以胶囊、片剂和小袋形式的营养补充剂具有益处，但由于类黄酮的稳定性问题，它们可能会失去功效，并且味道和/或气味难以下咽。因此，许多人不喜欢食用它们，和/或忘记定期服用它们以提供益处。因此，在食品中添加类黄酮将使更多的人受益于其治疗特性。像许多其他有益的类黄酮一样，芦丁也很疏水。其他疏水类黄酮包括姜黄素、橙皮素、柚皮素和儿茶素。不幸的是，很难用难溶于油和水二者的疏水类黄酮来强化食品。低溶解性意味着添加的黄酮类化合物在添加到液体食品(饮料)中时会沉降，并在半固体或固体食品中产生坚硬的质地。许多类黄酮还可以与食物成分(诸如蛋白质和脂肪)相互作用，改变食物的物理化学和感官特性。它们本身也可以经历化学和酶促降解。难溶性类黄酮的溶解速度非常低，而且释放属性也很有限；并且随后在人体中的生物利用度低。因此，对包封(encapsulate)/包封(entrap)疏水类黄酮的方法的关注日益增加，从而可以将它们成功地添加到食品体系中。已经开发了广泛的递送系统，包括由不同的天然聚合物(诸如多糖、蛋白质和磷脂)组成的乳液、脂质体、凝聚层和凝胶。然而，由于需要使用gras(通常被认为是安全的)材料，并且消费者强烈偏爱仅使用天然成分，因此选择受到一定限制。另外，许多类黄酮递送载体的制备涉及化学交联和/或有机溶剂，诸如乙醇和甲醇。这些在人类消费的产品中是不希望的，并且从食品中去除这些溶剂并非成本有效的。这些包封/递送方法通常还产生低的包封率和/或负载量。其他方法包括昂贵或技术上难以扩大规模的制造步骤。诸如酪蛋白、乳清蛋白、大豆蛋白的食品蛋白等已被广泛用作保健品的递送载体的组分。酪蛋白尤其形成许多利用其胶束结构的保健品递送系统的一部分。酪蛋白含有约40至300nm直径的胶束，可以包封某些化合物，如果解离，则在待包封的化合物存在下重新组装。离解可以物理上例如使用静水压力实现，或者化学上诸如通过在乙醇水溶液中加热来实现。酪蛋白胶束也可以在碱性条件下解离。例如，(pan，2014)描述了通过酪蛋白酸钠(nacas)的碱解离、然后添加酸达到中性ph，来制备约100nm的酪蛋白纳米颗粒。将姜黄素添加到nacas的碱性溶液中，然后中和，得到产品，其中姜黄素被包封在重新组装的酪蛋白胶束中。不幸的是，这没有提供可用于食品强化的产品。首先，胶束结构只会在稀溶液中于中性ph下重新组装。因此，该方法使用相对少量的姜黄素(1mg/ml)和nacas(2.0％)，在回收产物之前留下了不经济的大体积上清液。首先，增加姜黄素的浓度只会降低该方法的包封率(ee)，该包封率并不高；(在最长的孵育时间下，1mg/ml姜黄素仅产生约70％的ee)。而且，该产品具有低负载量(lc)，因此产品中的类黄酮比例很低。这意味着为了提供治疗益处，将需要将如此大量的产品掺入食物中，从而将损害食物的特性。因此，需要用于疏水类黄酮的递送系统，其至少部分地克服这些挑战，或者至少为公众提供有用的选择。3.技术实现要素：在一个方面，本发明提供了一种类黄酮递送系统，其包含疏水类黄酮和蛋白质的共沉淀物。在一个实施方案中，共沉淀物包含被包封在蛋白质基质中的疏水类黄酮的纳米晶体。在一个实施方案中，共沉淀物包含被包封在蛋白质基质中的疏水类黄酮。在一个实施方案中，选择疏水类黄酮和蛋白质，使得它们都在蛋白质的等电点处或大约在等电点处从水溶液中沉淀出来。在一个实施方案中，疏水类黄酮具有约2至约4的疏水性和/或可溶解在高ph、优选ph高于10的水溶液中。在一个实施方案中，疏水类黄酮选自芦丁、柚皮素、槲皮素、姜黄素、橙皮素、α-萘黄酮(anf)、β-萘黄酮(bnf)、儿茶素和儿茶素衍生物、白杨素、木犀草素、杨梅素和花青素。在一个实施方案中，疏水类黄酮选自芦丁、柚皮素、儿茶素、姜黄素和橙皮素。在一个实施方案中，蛋白质的等电点为约4至约6.5，优选约4至5.5，更优选约4.6或4.6。在一个实施方案中，该蛋白质选自酪蛋白酸钠(nacas)、大豆分离蛋白(spi)、豌豆分离蛋白、变性乳清分离蛋白(wpi)和乳分离蛋白(mpi)。在一个实施方案中，该蛋白质是酪蛋白酸钠(nacas)。在一个实施方案中，共沉淀物中蛋白质:类黄酮的质量比为约4:1至约0.5:1，优选约3:1至约0.9:1，更优选约2:1至约1:1，最优选约1:1。在一个实施方案中，共沉淀物包含消耗性低温保护剂，其优选选自海藻糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇、乳糖、果糖和甘油。在一个实施方案中，共沉淀物包含约1.0重量％至约5重量％的消耗性低温保护剂，优选约2重量％至约3重量％，更优选2.5重量％。在一个实施方案中，共沉淀物包含海藻糖，优选2.5重量％海藻糖。在一个实施方案中，类黄酮递送系统中的疏水类黄酮在水溶液中的溶解性是未加工类黄酮的至少两倍、三倍、五倍、10倍、15倍、20倍、25倍、30倍、35倍、40倍或至少45倍以上。在一个实施方案中，类黄酮递送系统是芦丁:nacas共沉淀物，其中芦丁在水溶液中的溶解性是游离芦丁的至少四倍。在一个实施方案中，类黄酮递送系统是芦丁:nacas共沉淀物，其中芦丁在水溶液中的溶解性是游离芦丁的至少九倍。在一个实施方案中，类黄酮递送系统是柚皮素:nacas共沉淀物，其中柚皮素在水溶液中的溶解性是游离柚皮素的至少20倍。在一个实施方案中，类黄酮递送系统是姜黄素:nacas共沉淀物，其中姜黄素在水溶液中的溶解性是游离姜黄素的至少12倍。在一个实施方案中，类黄酮递送系统是儿茶素:nacas共沉淀物，其中芦丁在水溶液中的溶解性是游离儿茶素的至少40倍。这些实施方案也可以比照适用于本发明的其他方面。在另一个方面，本发明提供了一种生产疏水类黄酮和蛋白质的共沉淀物的方法，该方法包含以下步骤：(a)在约9至约12的起始ph下制备疏水类黄酮和蛋白质的水溶液。(b)搅拌混合物直至疏水类黄酮溶解，同时将ph保持在约起始ph；(c)可选地将消耗性低温保护剂添加至溶液中并混合直至溶解；(d)将溶液酸化至蛋白质的等电点，使类黄酮和蛋白质共沉淀；(e)去除上清液以提供共沉淀物。在一个实施方案中，起始ph为约10至约11.5，优选约11。在一个实施方案中，将疏水类黄酮添加至蛋白质的水溶液中。在一个实施方案中，步骤(a)中蛋白质的浓度为约1％至约15％(w/v)，优选约5％至约12％(w/v)，更优选约10％(w/v)。在一个实施方案中，在添加疏水类黄酮之前，将蛋白质的水溶液在约起始ph下搅拌至少约15分钟，优选至少约30分钟。在一个实施方案中，在步骤(a)中添加至蛋白质水溶液中的疏水类黄酮的量是导致约1％至约15％(w/v)的疏水类黄酮的浓度的量，优选约5％至约12％(w/v)，更优选约10％(w/v)。在一个实施方案中，将蛋白质添加至疏水类黄酮的水溶液中。在一个实施方案中，将疏水类黄酮的水溶液与蛋白质的水溶液混合。在一个实施方案中，步骤(a)中制备的水溶液包含约1％至约15％(w/v)的疏水类黄酮，优选约5％至约12％(w/v)，更优选约10％(w/v)。在一个实施方案中，步骤(a)中制备的水溶液包含约1％至约15％(w/v)的蛋白质，优选约5％至约12％(w/v)，更优选约10％(w/v)。在一个实施方案中，蛋白质与疏水类黄酮的比例为约4:1至约0.5:1，优选约2:1至约1:1，更优选约1:1。在一个实施方案中，将疏水类黄酮添加至ph为约11的10％(w/v)的蛋白质水溶液中。在一个实施方案中，将溶液酸化至ph为6或更低。在另一个实施方案中，将溶液酸化至ph为5.5或更低，优选5.0或更低，更优选至4.6。在一个实施方案中，在步骤(c)中添加约1.0至约5w/v的消耗性低温保护剂，优选约2至约3w/v，更优选2.5w/w。在一个实施方案中，消耗性低温保护剂是海藻糖。在一个实施方案中，该方法的包封率大于80％，优选大于90％，更优选大于95％，最优选大于98％。在一个实施方案中，该方法的负载量(lc)为约25％至约49％，优选约35％至约49％，更优选约40％至约49％，最优选约48％。在一个实施方案中，将步骤(e)中生产的共沉淀物进一步干燥以提供粉末。在一个实施方案中，将步骤(e)中生产的共沉淀物分散在磷酸盐溶液中并喷雾干燥以提供粉末。在另一个方面，本发明提供了一种类黄酮递送系统，其包含疏水类黄酮和蛋白质的共沉淀物，其中该共沉淀物已经被分散在磷酸盐溶液中并喷雾干燥。在另一个方面，本发明提供了一种组合物，其包含(a)疏水类黄酮和蛋白质的共沉淀物，和(b)磷酸盐。在另一个方面，本发明提供了一种组合物，其包含被分散在磷酸盐溶液中的共沉淀物。在一个实施方案中，磷酸盐溶液是磷酸钠或磷酸钾的溶液。在一个实施方案中，磷酸盐是单磷酸盐。在一个实施方案中，磷酸盐是二磷酸盐。在一个实施方案中，磷酸盐是聚磷酸盐。在一个实施方案中，磷酸盐是磷酸一钠或磷酸一钾。在一个实施方案中，磷酸盐是磷酸氢二钠或磷酸氢二钾。在一个实施方案中，磷酸盐是磷酸三钠或磷酸三钾。在一个实施方案中，磷酸盐选自磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、磷酸氢二钾、磷酸二氢钾和三聚磷酸钠。在一个实施方案中，磷酸盐溶液包含0.1％至5％(w/v)的磷酸盐，优选0.5％(w/v)。在一个实施方案中，共沉淀物已经被分散在磷酸盐溶液中，磷酸盐溶液包含约5％至约15％(w/v)的共沉淀物，优选约7％至约13％(w/v)，更优选约10％(w/v)。在一个实施方案中，共沉淀物已经被分散在磷酸盐溶液中，磷酸盐溶液包含0.5％的磷酸盐和10％(w/v)的类黄酮:蛋白质共沉淀物。在一个实施方案中，共沉淀物已经被分散在磷酸盐溶液中，磷酸盐溶液包含0.8％的磷酸盐和15％(w/v)的类黄酮:蛋白质共沉淀物。这些实施方案也可以比照适用于本发明的其他方面。在一个方面，本发明提供了一种食品，其包括类黄酮递送系统，该类黄酮递送系统包含疏水类黄酮和蛋白质的共沉淀物。在一个实施方案中，共沉淀物包含被包封在蛋白质基质中的疏水类黄酮。在一个实施方案中，共沉淀物包含被包封在蛋白质基质中的疏水类黄酮的纳米晶体。在一个实施方案中，类黄酮递送系统包含疏水类黄酮和蛋白质的共沉淀物，其中该共沉淀物已经被分散在磷酸盐溶液中并喷雾干燥。在一个实施方案中，食品包含约0.1重量％至约3.5重量％的疏水类黄酮和蛋白质的共沉淀物，优选约0.2重量％至约1.2重量％，更优选0.4重量％至约0.7重量％，最优选约0.5重量％。在一个实施方案中，食品是乳制品，包括但不限于酸奶、乳制食品、奶酪、冰淇淋或果汁冰糕，优选酸奶。在一个实施方案中，乳制品包含约0.2重量％至约1.2重量％的疏水类黄酮和蛋白质的共沉淀物，优选约0.2重量％至约0.9重量％，更优选0.5重量％至约0.7重量％，最优选约0.6重量％。在一个实施方案中，食品是蛋白质饮料。在一个实施方案中，蛋白质饮料包含约0.1至约0.45(w/v)的疏水类黄酮和蛋白质的共沉淀物，优选约0.15至约0.4，更优选约0.4(w/v)。在一个实施方案中，食品是蛋白棒。在一个实施方案中，蛋白棒包含约0.5重量％至约3.5重量％的疏水类黄酮和蛋白质的共沉淀物，优选约0.7重量％至约2.5重量％，更优选约1.0重量％至约2重量％。在一个方面，本发明提供了一种食品，其包含大于约0.10重量％的疏水类黄酮，优选大于0.12重量％的疏水类黄酮。在一个实施方案中，食品是乳制品，优选酸奶。在一个实施方案中，食品是包含约0.1重量％至约0.6重量％的疏水类黄酮的酸奶。4.附图说明现在将仅通过举例的方式并参考附图来描述本发明，其中：图1显示了在实施例1中制备的芦丁-nacas共沉淀(c)的烘干(顶部)和冷冻干燥(底部)的照片，以及对照(nacas和芦丁；分别是a和b)的沉淀物，以及参考样品(未处理的芦丁；d)。图2显示了未处理的芦丁(a)、不含海藻糖的经处理的芦丁(b)、不含海藻糖的芦丁-nacas共沉淀(c)、初始配方中含有2.5％(w/v)海藻糖的经处理的芦丁(d)、初始配方中含有2.5％海藻糖的芦丁-nacas共沉淀物(e)的尺寸分布，如实施例3所述。经过120min将每种样品分散在磷酸盐缓冲液(ph7.0)中。图3显示了在磷酸盐缓冲液(ph7)中分散120min后，大于1μm的颗粒的体积％。此数据来自图2中所示的结果。图4提供了室温下在磷酸盐缓冲液(ph7.0)中经过120min(a)和12min(b)后的经处理的芦丁和芦丁-nacas共沉淀物(含或不含海藻糖)的遮蔽指数数据。rc：经处理的芦丁(不含海藻糖)，rctr2.5：初始配方中含有2.5％海藻糖的rc，rctr5：初始配方中含有5％海藻糖的rc，scr：芦丁-nacas共沉淀物(不含海藻糖)，scrtr2.5：初始配方中含有2.5％海藻糖的scr，scrtr5：初始配方中含有5％海藻糖的scr。图5提供了未处理的芦丁(a)、不含海藻糖的经处理的芦丁(b)、初始配方中含有5％(w/v)海藻糖的经处理的芦丁(c)、不含海藻糖的芦丁-nacas共沉淀物(d)、以及初始配方中分别含有2.5％和5％海藻糖的芦丁-nacas共沉淀物(分别为e和f)的扫描电子显微照片。比例尺可以在每幅显微照片的底部找到。比例尺代表5μm。图6提供了粉末的x射线衍射图，从下到上分别是未处理的nacas(a)、经处理的nacas(b)、芦丁和nacas的干混物(c)、不含海藻糖的芦丁-nacas共沉淀物(d)、初始配方中含有2.5％(w/v)海藻糖的经处理的芦丁(e)、初始配方中含有2.5％和5％海藻糖的芦丁-nacas共沉淀物(分别为f和g)。图7显示了未处理的nacas(a)和经处理的nacas(b)、芦丁和nacas的干混物(c)、不含海藻糖的芦丁-nacas共沉淀物(d)、初始配方中含有2.5％(w/v)海藻糖的芦丁-nacas共沉淀物(e)、初始配方中含有5％海藻糖的芦丁-nacas共沉淀物(f)、初始配方中含有2.5％海藻糖的经处理的芦丁(g)、初始配方中含有5％海藻糖的经处理的芦丁(h)的冻干粉末的固态核磁共振波谱。图8显示了ph处理对所选择的芦丁固态核磁共振波谱的影响。图9显示了被分散在磷酸盐缓冲液中的儿茶素产品随时间变化的颗粒体积％，比较了未加工的类黄酮(图9a)、经处理的(图9b)、含有海藻糖的经处理的(图9c)、与nacas混合的经处理的(图9d)以及含有海藻糖的共沉淀物(图9e)。图10显示了被分散在磷酸盐缓冲液中的姜黄素产品随时间变化的颗粒体积％，比较了未加工的类黄酮(图9a)、经处理的(图9b)、含有海藻糖的经处理的(图9c)、与nacas混合的经处理的(图9d)以及含有海藻糖的共沉淀物(图9e)。图11显示了被分散在磷酸盐缓冲液中的橙皮素产品随时间变化的颗粒体积％，比较了未加工的类黄酮(图9a)、经处理的(图9b)、含有海藻糖的经处理的(图9c)、与nacas混合的经处理的(图9d)以及含有海藻糖的共沉淀物(图9e)。图12显示了被分散在磷酸盐缓冲液中的柚皮素产品随时间变化的颗粒体积％，比较了未加工的类黄酮(图9a)、经处理的(图9b)、含有海藻糖的经处理的(图9c)、与nacas混合的经处理的(图9d)以及含有海藻糖的共沉淀物(图9e)。图13显示了儿茶素产品的xrd分析，包括未处理的和经处理的类黄酮以及与nacas的共沉淀物。图14显示了姜黄素产品的xrd分析，包括未处理的和经处理的类黄酮以及与nacas的共沉淀物。图15显示了橙皮素产品的xrd分析，包括未处理的和经处理的类黄酮以及与nacas的共沉淀物。图16显示了柚皮素产品的xrd分析，包括未处理的和经处理的类黄酮以及与nacas的共沉淀物。图17显示了未处理的儿茶素(a)、不含海藻糖的经处理的儿茶素(b)、初始配方中含有2.5％(w/v)海藻糖的经处理的儿茶素(c)、不含海藻糖的儿茶素-nacas共沉淀物(flavoplus)、以及初始配方中含有2.5％海藻糖的儿茶素-nacas共沉淀物(flavoplus)(e)的扫描电子显微照片。比例尺可以在每幅显微照片的底部找到。比例尺代表5μm。图17i和图17ii具有不同的比例。图18显示了未处理的姜黄素(a)、不含海藻糖的经处理的姜黄素(b)、初始配方中含有2.5％(w/v)海藻糖的经处理的姜黄素粉末(c)、不含海藻糖的姜黄素-nacas共沉淀物(flavoplus)(d)、以及初始配方中含有2.5％海藻糖的姜黄素-nacas共沉淀物(flavoplus)(e)的扫描电子显微照片。比例尺可以在每幅显微照片的底部找到。图18i和图18ii具有不同的比例。图18i的比例尺代表5μm。图18ii的比例尺代表20μm。图19显示了未处理的橙皮素(a)、不含海藻糖的经处理的橙皮素(b)、初始配方中含有2.5％(w/v)海藻糖的经处理的橙皮素(c)、不含海藻糖的橙皮素-nacas共沉淀物(flavoplus)(d)、以及初始配方中含有2.5％海藻糖的橙皮素-nacas共沉淀物(flavoplus)(e)的扫描电子显微镜照片。比例尺可以在每幅显微照片的底部找到。图19i和图19ii具有不同的比例。图19i和图19ii的比例尺代表20μm。图20显示了未处理的柚皮素(a)、不含海藻糖的经处理的柚皮素(b)、初始配方中含有2.5％(w/v)海藻糖的经处理的柚皮素(c)、不含海藻糖的柚皮素-nacas共沉淀物(flavoplus)(d)、以及初始配方中含有2.5％海藻糖的柚皮素-nacas共沉淀物(flavoplus)(e)的扫描电子显微照片。比例尺可以在每幅显微照片的底部找到。图20i和图20ii具有不同的比例。图21提供了用于制备包括本发明的flavoplus产品的酸奶的工业方法的示意图。图22显示了用不同浓度的芦丁强化的定型酸奶的稠度(a)和硬度(b)的变化；普通(不含芦丁)、游离(含未处理的芦丁)和包封(含芦丁-nacas共沉淀物)。确定了酸奶样品(185g)中的芦丁含量。图23显示了富含芦丁的酸奶的ph(a)和流变特性(b)随发酵时间的变化，普通(不含芦丁)、游离(含未处理的芦丁)和包封(含芦丁-nacas共沉淀物)。图24显示了在储存过程中强化酸奶中芦丁浓度的变化。对照(不含芦丁)、flavoplus(含芦丁-nacas共沉淀物)、游离芦丁(含未处理的芦丁)。图25显示了使用flavoplus(nacas-芦丁共沉淀物)用500mg芦丁强化的实验性香草味酸奶的感官特性(接受度)(n＝45名参与者)。图26提供了包括本发明的flavoplus产品的蛋白棒的台式制造的示意图。图27提供了包括本发明的flavoplus产品的蛋白质饮料的台式/中试工厂制造的示意图。图28显示了未处理的芦丁、不含海藻糖的经处理的芦丁、初始配方中含有2.5％海藻糖(w/v)的经处理的芦丁、以及含或不含海藻糖(初始配方中含2.5％海藻糖w/v)的芦丁与不同蛋白质(nacas(酪蛋白酸钠)、大豆蛋白分离物(spi)和乳清蛋白分离物(wpi))的共沉淀物(flavoplus)的水溶性。具有不同字母的列显著不同(p<0.05)。图29显示了未处理的柚皮素、不含海藻糖的经处理的柚皮素、初始配方中含有2.5％海藻糖(w/v)的柚皮素、以及含或不含海藻糖(初始配方中含2.5％海藻糖w/v)的柚皮素与不同蛋白质(nacas(酪蛋白酸钠)、大豆蛋白分离物(spi)和乳清蛋白分离物(wpi))的共沉淀物(flavoplus)的水溶性。具有不同字母的列显著不同(p<0.05)。图30显示了未处理的姜黄素、不含海藻糖的经处理的姜黄素、初始配方中含有2.5％海藻糖(w/v)的经处理的姜黄素、以及含或不含海藻糖(初始配方中含2.5％海藻糖w/v)的姜黄素与不同蛋白质(nacas(酪蛋白酸钠)、大豆蛋白分离物(spi)和乳清蛋白分离物(wpi))的共沉淀物(flavoplus)的水溶性。具有不同字母的列显著不同(p<0.05)。图31显示了未处理的儿茶素、不含海藻糖的经处理的儿茶素、初始配方中含有2.5％海藻糖(w/v)的经处理的儿茶素、以及含或不含海藻糖(初始配方中含2.5％海藻糖w/v)的姜黄素与不同蛋白质(nacas(酪蛋白酸钠)、大豆蛋白分离物(spi)和乳清蛋白分离物(wpi))的共沉淀物(flavoplus)的水溶性。具有不同字母的列显著不同(p<0.05)。图32显示了不同芦丁粉末的分散颗粒的d50颗粒尺寸测量结果，在室温下在磷酸盐缓冲液(ph7.0)中进行了120min的测量。具有不同字母的列显著不同(p<0.05)。图33显示了未处理的芦丁、flavoplus(含或不含海藻糖的芦丁-nacas)以及被分散在磷酸盐缓冲液(ph7)中的flavoplus的水溶性。具有不同字母的列显著不同(p<0.05)。5.具体实施方式发明人已经开发出令人惊讶的简单方法来生产类黄酮递送系统，该类黄酮递送系统促进在单份食物中摄入大量促进健康的类黄酮。该系统利用疏水类黄酮在不同ph值下的溶解和沉淀特性，产生类黄酮与合适蛋白质的共沉淀物。可以将共沉淀物直接添加到食品中(以湿或干形式)，也可以将其分散在磷酸盐溶液中并喷雾干燥，然后再掺入食品中。被分散在磷酸盐溶液中的共沉淀物也可以在喷雾干燥之前直接添加到食品中。5.1本发明的疏水类黄酮递送系统本发明提供了用于强化食品和饮料的类黄酮递送系统。它对于疏水类黄酮的递送特别有用。类黄酮是一类具有15个碳原子骨架的化合物，该15个碳原子骨架由两个苯环和一个连接的杂环组成。杂环连接头的不饱和度和氧化态的差异定义了不同的子类。如本文所用，术语“类黄酮”包括黄烷醇、黄酮醇、花黄素、黄烷酮、异黄酮、黄酮、黄烷和花青素，并且还包括异类黄酮和新类黄酮。如本文所用，术语“疏水类黄酮”是指疏水性大于约2的类黄酮。疏水性以logp测量，其中p为分配系数(化合物在1-辛醇中的溶解性除以其在水中的溶解性)。此类化合物在中性ph下在水溶液中的溶解性非常低。在一个方面，本发明提供了一种类黄酮递送系统，其包含疏水类黄酮和蛋白质的共沉淀物。在一个方面，本发明提供了一种类黄酮递送系统，其基本上由疏水类黄酮和蛋白质的共沉淀物组成。在一个实施方案中，选择疏水类黄酮和蛋白质，使得它们都在蛋白质的等电点处或在大约等电点处从水溶液中沉淀出来。在一个实施方案中，疏水类黄酮的疏水性为约2至约4。在一个实施方案中，疏水类黄酮可溶解在高ph、优选ph高于10的水溶液中。在一个实施方案中，疏水类黄酮选自芦丁、柚皮素、槲皮素、姜黄素、橙皮素、α-萘黄酮(anf)、β-萘黄酮(bnf)、儿茶素和儿茶素衍生物、白杨素、木犀草素、杨梅素和花青素。在一个实施方案中，疏水类黄酮选自芦丁、柚皮素、儿茶素、姜黄素和橙皮素。在一个实施方案中，类黄酮递送系统包含疏水类黄酮和蛋白质的共沉淀物，其中疏水类黄酮的纳米晶体被包封在蛋白质基质中。纳米晶体被蛋白质颗粒分开，这阻止了纳米晶体的尺寸增长和/或在很大程度上凝结在一起。这产生了一种产品，其中类黄酮晶体比未加工的干燥化合物中存在的微/宏观晶体小得多。不受理论的束缚，据信存在于共沉淀物中的疏水类黄酮和蛋白质在物理上相互作用而不在化学上相互作用。换言之，疏水类黄酮和蛋白质不是共价结合的，而是从溶液中共沉淀的，以提供一种结构，其中小的类黄酮晶体被沉淀的蛋白质包封/包封，伴随一定量的无定形疏水类黄酮。以纳米晶体形式存在的类黄酮的比例可能随共沉淀的实际类黄酮和蛋白质以及共沉淀产物的处理而变化。例如，被分散在磷酸盐溶液中并喷雾干燥的共沉淀物的类黄酮成分可能含有更高比例的被包封在蛋白质基质中的无定形类黄酮。在一个实施方案中，共沉淀物包含被包封在蛋白质基质中的疏水类黄酮。选择用于本发明的疏水类黄酮和蛋白质，使得类黄酮和蛋白质都在约等于蛋白质的等电点的ph下从水溶液中沉淀出来。等电点是蛋白质最不溶的ph。在一个实施方案中，在从蛋白质的等电点小于约2个单位的ph下形成共沉淀物，优选小于约1个单位。在一个实施方案中，蛋白质的等电点为约4至约6.5，优选约4至5.5，更优选约4.6。在一个实施方案中，该蛋白质选自酪蛋白酸钠、大豆蛋白分离物、豌豆蛋白分离物、变性乳清蛋白分离物和乳蛋白分离物。在一个实施方案中，该蛋白质是酪蛋白酸钠(nacas)。在一个实施方案中，共沉淀物中蛋白质:类黄酮的质量比为约4:1至约0.5:1。在另一个实施方案中，蛋白质:类黄酮的质量比为约3:1至约0.9:1。在另一个实施方案中，蛋白质:类黄酮的质量比为约2:1至约1:1。在另一个实施方案中，蛋白质:类黄酮的质量比为约1:1。在一个实施方案中，本发明的共沉淀物还包含一种或多种消耗性低温保护剂。低温保护剂可以以几种方式影响共沉淀物的特性。因为类黄酮是多羟基化合物，所以低温保护剂的存在会导致水溶液中形成低共熔物，从而改变冰的晶体。低温保护剂的添加还可以增加溶液/分散体的粘度，从而抑制冰的结晶。第三，低温保护剂可以在冷冻干燥过程中的升华过程中保持颗粒之间的空间取向和距离。这抑制了聚集。在一个实施方案中，消耗性低温保护剂是糖，优选二糖。在一个实施方案中，消耗性低温保护剂选自海藻糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇、乳糖、果糖和甘油。在一个实施方案中，共沉淀物包含约1.0重量％至约5重量％的消耗性低温保护剂，优选约2重量％至约3重量％，更优选2.5重量％。在一个实施方案中，产品包含海藻糖，优选2.5重量％海藻糖。本发明的疏水类黄酮递送系统具有许多特性，使其非常适合用于食品中。共沉淀物是稳定的干燥粉末材料，因此可以在使用前于室温下长时间保存。然而，与许多粉状产品不同，它可以轻松地掺入食品中。为了有效地用作食品成分，粉状材料必须能够在水性介质中再水化。分散性(产品在整个介质中分散成单个颗粒的能力)是再水化的重要步骤。同未与蛋白质共沉淀的等效疏水类黄酮相比，本发明的疏水类黄酮递送系统在水溶液中的分散性高得多。图1c显示了粉末形式的本发明的类黄酮递送系统。图2表明，当将本发明的冻干共沉淀物(图1c中所示)随时间放置在磷酸盐缓冲液(ph7)中时，其体积分布与未处理的芦丁有很大不同。图3量化并总结了图2中大于1μm的颗粒的结果。平均颗粒尺寸较小意味着在水性介质中，与未处理的芦丁相比，产品更容易分散。加入低温保护剂(诸如海藻糖)可增强效果，将共沉淀物分散在磷酸盐溶液中并喷雾干燥也是如此。在一个实施方案中，相对于包含相同量的未处理的类黄酮的产品，共沉淀物分散以在ph为7的磷酸盐缓冲液中分散120min后提供较低体积％的大于1μm的颗粒。在一个实施方案中，在ph为7的磷酸盐缓冲液中分散120min后，共沉淀物提供小于1mm的颗粒的体积％，其比包含相同量的未处理的类黄酮的产品高至少49％；与包含相同量的未处理的类黄酮的产品相比，优选高至少60％，更优选高约75％，最优选高约90％。在一个实施方案中，共沉淀物在ph为7的磷酸盐缓冲液中分散120min后具有颗粒分布，使得60％的颗粒的体积小于1μm。在一个实施方案中，共沉淀物在ph为7的磷酸盐缓冲液中分散120min钟后具有颗粒分布，使得75％的颗粒的体积小于1μm。在一个实施方案中，共沉淀物在ph为7的磷酸盐缓冲液中分散120min钟后具有颗粒分布，使得90％的颗粒的体积小于1μm。在一个实施方案中，共沉淀物在水性介质中的分散性大于0.5％，优选大于1％。如本文所用，1％的分散性是指当放置1小时或更长时间时，1％的粉末将分散在水性介质中。可以将相对大量的本发明的类黄酮递送系统添加到食品中，因为即使当它们以高浓度存在时也保持被完全分散。在一个实施方案中，当共沉淀物以1重量％至6重量％的浓度存在时，其被完全分散在水溶液中。在一个实施方案中，当共沉淀物以6重量％的浓度存在时，其被完全分散在水溶液中。5.2本发明的类黄酮递送系统的制备通过利用疏水类黄酮和蛋白质在不同ph下的特性来制备本发明的共沉淀物。本发明的优点之一是简单性，通过该简单性，仅使用消耗性成分就可以大规模制备这些共沉淀物。与许多公开的包封类黄酮的方法不同，本发明的共沉淀物可以在数小时内大规模制备。另一个优点是，它们的制备不需要也不产生大量的水，水需要被除去，从而使得该过程不经济。在一个方面，本发明提供了一种生产疏水类黄酮和蛋白质的共沉淀物的方法，该方法包含以下步骤：(a)在约9至约12的起始ph下制备疏水类黄酮和蛋白质的水溶液。(b)搅拌混合物直至疏水类黄酮溶解，同时将ph保持在约起始ph；(c)可选地将消耗性低温保护剂添加至溶液中并混合直至溶解；(d)将溶液酸化至蛋白质的等电点，使类黄酮和蛋白质共沉淀；(e)去除上清液以提供共沉淀物。本发明还提供通过上述方法生产的产品。在本发明的方法中，在降低ph以提供酸性溶液之前，将疏水类黄酮添加至碱性ph的蛋白质水溶液中。至关重要的是，溶液必须变成酸性，而不仅仅是中性，使得蛋白质和类黄酮不会形成微胞结构，而是一起共沉淀。由于类黄酮与蛋白质的比例非常低，因此基于胶束的产品递送系统较差。相反，在本发明的类黄酮递送系统中，疏水类黄酮优选地以纳米晶体的形式沉淀，该纳米晶体由于蛋白质的伴随沉淀而在尺寸上受到限制，蛋白质在纳米晶体周围形成基质，从而阻止了进一步的生长。在步骤(a)中，制备疏水类黄酮和蛋白质的水溶液，并加入足够的碱以达到约9至约12的ph。可以使用一种或多种疏水类黄酮和/或蛋白质。本领域技术人员将能够确定类黄酮和蛋白质的组合的理想起始ph。在一个实施方案中，起始ph为约9至约11.5，优选约10至约11.5，更优选约11。在一个实施方案中，疏水类黄酮的疏水性为约2至约4。在一个实施方案中，疏水类黄酮选自芦丁、柚皮素、α-萘黄酮(anf)、β-萘黄酮(bnf)、儿茶素和儿茶素衍生物、白杨素、槲皮素、花青素和橙皮素。在一个实施方案中，疏水类黄酮选自芦丁、柚皮素、儿茶素、姜黄素和橙皮素，并且优选芦丁。所使用的疏水类黄酮和蛋白质溶液的浓度取决于类黄酮和蛋白质在碱性ph值下的溶解性。如果两者均相对可溶，则可以使用更高的浓度。在一个实施方案中，将固体疏水类黄酮添加至蛋白质的水溶液中。水溶液中蛋白质的浓度为约1％至约15％(w/v)，优选约5％至约12％(w/v)，更优选约10％(w/v)。在一个实施方案中，在加入疏水类黄酮之前，将蛋白质水溶液在约起始ph下搅拌至少约15分钟，优选至少约30分钟。在一个实施方案中，在步骤(a)中添加到蛋白质水溶液中的疏水类黄酮的量是导致约1％至约15％(w/v)的疏水类黄酮的浓度的量，优选约5％至约12％(w/v)，更优选约10％(w/v)。可替代地，可以将固体蛋白质添加到疏水类黄酮的水溶液中。或者可以将疏水类黄酮的水溶液与蛋白质的水溶液混合。在一个实施方案中，步骤(a)中制备的水溶液包含约1％至约15％(w/v)的疏水类黄酮，优选约5％至约12％(w/v)，更优选约10％(w/v)。在一个实施方案中，步骤(a)中制备的水溶液包含约1％至约15％(w/v)的蛋白质，优选约5％至约12％(w/v)，更优选约10％(w/v)。添加的蛋白质的量通常约等于添加的疏水类黄酮的量，即小于一个数量级的差异。如果蛋白质与类黄酮的比例太低，则类黄酮可能会在低ph值下沉淀，从而不会被蛋白质基质包封，该方法的ee将非常低。在一个实施方案中，蛋白质与疏水类黄酮的比例为约4:1至约0.5:1，优选约2:1至约1:1，更优选约1:1。在步骤(c)中，将溶液酸化至大约蛋白质的等电点。如本文所用，术语“酸化”是指将酸添加至溶液直至ph低于7。如果仅中和溶液，则不会形成本发明的产物。应该通过添加足够的酸以一步将ph降至7以下来降低ph，而不是通过逐渐添加酸使溶液的ph在添加其他酸之前达到平衡。本领域技术人员将能够确定每批中将ph降低至蛋白质的pi点所需的酸的量。如上所述，如果使蛋白质和类黄酮的溶液在ph为7下静置任何可观的时间，则这两种组分可以自组装以形成包封有蛋白质的类黄酮的胶束。可替代地，溶解性较低的类黄酮可自沉淀，将溶解性较高的蛋白质留在溶液中。在一个实施方案中，将溶液酸化至ph为6或更低。在另一个实施方案中，将溶液酸化至ph为5.5或更低，优选5.0或更低，更优选4.6。在一个实施方案中，在步骤(c)中添加消耗性低温保护剂。在一个实施方案中，消耗性低温保护剂是糖，优选二糖。在一个实施方案中，消耗性低温保护剂选自海藻糖、蔗糖、甘露醇和果糖。在一个实施方案中，在步骤(c)中添加约1.0至约5w/v的消耗性低温保护剂，优选约2至约3w/v，更优选2.5w/w。在一个实施方案中，消耗性低温保护剂是海藻糖。对于产品中蛋白质与类黄酮的比例，制备本发明产品的方法具有高包封率(ee)。产生包含被包封试剂的材料的方法的ee反映了相对于最初在材料制备中使用的总试剂量被包封在材料中的物质的量。在制备本发明的共沉淀物中获得的高ee意味着在蛋白质基质中包封了更多的昂贵的类黄酮。在制备小分子类黄酮被大蛋白质壳包围的包封材料中，容易获得高ee。然而，在组分结构不同的情况下，蛋白质和类黄酮的含量更均等，因此，大于80％的ee既是非常理想的，也是出乎意料的。在一个实施方案中，本发明的方法产生了共沉淀物，其蛋白质:类黄酮的质量比为约4:1至约0.5:1，其ee大于80％，优选大于90％，更优选大于95％，最优选大于98％。在一个实施方案中，本发明的方法产生了共沉淀物，其蛋白质:类黄酮的质量比为约3:1至约0.8:1，其ee大于80％，优选大于90％，更优选大于95％，最优选大于98％。在一个实施方案中，本发明的方法产生了共沉淀物，其蛋白质:类黄酮的质量比为约2:1至约0.9:1，其ee大于80％，优选大于90％，更优选大于95％，最优选大于98％。在一个实施方案中，本发明的方法产生了共沉淀物，其蛋白质:类黄酮的质量比为约1:1，其ee大于80％，优选大于90％，更优选大于95％，最优选大于98％。本发明方法的负载量(lc)也很高。负载量是以初始类黄酮的重量计成为共沉淀物的类黄酮的比例。在一个实施方案中，该方法的lc为约25％至约49％。在一个实施方案中，该方法的lc为约35％至约49％。在一个实施方案中，该方法的lc为约40％至约49％。在一个实施方案中，该方法的lc为约48％。在制备本发明的类黄酮递送系统中实现的高ee和lc使得该共沉淀物非常经济地用作强化剂，因为仅需添加少量即可大大增加食品中类黄酮的含量。所需的量也较小，使得共沉淀物不太可能影响食物的感官特性。在类黄酮和蛋白质共沉淀之后，可以使用本领域已知的任何合适的技术或技术组合去除上清液。例如，离心将从产物中去除许多上清液，然后可通过冻干、烘干、喷雾干燥等将其进一步干燥。在一个实施方案中，将产物冻干。在另一个实施方案中，将产物烘干。一旦干燥，可以将产品研磨以提供粉末。该粉末是稳定的，并且可以在室温下储存，以备将来用于食品强化或其他应用。尽管根据上述方法制备的共沉淀物具有使其理想地用于食品强化的溶解性和分散性，但是另外的处理步骤进一步改善了该共沉淀物。在一个实施方案中，将步骤(e)中生产的共沉淀物分散在磷酸盐溶液中并喷雾干燥以提供粉末。去除上清液后，可将共沉淀物分散在磷酸盐溶液中并喷雾干燥。因此，在一个方面，本发明还提供了一种生产疏水类黄酮和蛋白质的共沉淀物的方法，该方法包含以下步骤：(a)在约9至约12的起始ph下将疏水类黄酮添加至蛋白质的水溶液；(b)搅拌混合物直至疏水类黄酮溶解，同时将ph保持在约起始ph；(c)可选地将消耗性低温保护剂添加至溶液中并混合直至溶解；(d)将溶液酸化至蛋白质的等电点，使类黄酮和蛋白质共沉淀；(e)去除上清液以提供共沉淀物；(f)将共沉淀物分散在磷酸盐溶液中；(g)将分散的共沉淀物喷雾干燥。本发明还包括上述方法的产物。在一个方面，本发明提供了一种类黄酮递送系统，其包含疏水类黄酮和蛋白质的共沉淀物，其中该共沉淀物已经被分散在磷酸盐溶液中并喷雾干燥。在另一个方面，本发明提供了一种组合物，其包含(a)疏水类黄酮和蛋白质的共沉淀物，和(b)磷酸盐。在另一个方面，本发明提供了一种组合物，其包含被分散在磷酸盐溶液中的共沉淀物。在一个实施方案中，磷酸盐溶液是磷酸钠或磷酸钾的溶液。在一个实施方案中，磷酸单磷酸盐。在一个实施方案中，磷酸盐是二磷酸盐。在一个实施方案中，磷酸盐是聚磷酸盐。在一个实施方案中，磷酸盐是磷酸一钠或磷酸一钾。在一个实施方案中，磷酸盐是磷酸氢二钠或磷酸氢二钾。在一个实施方案中，磷酸盐是磷酸三钠或磷酸三钾。在一个实施方案中，磷酸盐选自磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、磷酸氢二钾、磷酸二氢钾和三聚磷酸钠。磷酸盐溶液的最佳浓度取决于将要被分散在溶液中的类黄酮:蛋白质共沉淀物的浓度。在一个实施方案中，磷酸盐溶液包含0.1％至5％(w/v)的磷酸盐。在一个实施方案中，已添加至共沉淀物的磷酸盐溶液包含0.5％的磷酸盐和10％(w/v)的类黄酮:蛋白质共沉淀物。在一个实施方案中，已添加至共沉淀物的磷酸盐溶液包含0.8％的磷酸盐和15％(w/v)的类黄酮:蛋白质共沉淀物。在一个实施方案中，已添加至共沉淀物的磷酸盐溶液包含约5％至约15％(w/v)的共沉淀物，优选约7％至约13％(w/v)，更优选约10％(w/v)。如图32和图33所示，将共沉淀物分散在磷酸盐溶液中，然后进行喷雾干燥，可提供具有更高分散性和溶解性的共沉淀物。在一个实施方案中，类黄酮递送系统具有的分散性(在120分钟内测得的d50)比未处理的类黄酮的分散性大至少100倍、150倍或至少200倍。5.3包含本发明类黄酮递送系统的食品本发明的类黄酮递送系统可用于许多应用中。对于掺入食品和保健品特别有用。可以将递送系统共沉淀物掺入多种食品中(包括液体、固体和半固体食品)作为强化剂，以增加食品中促进健康的类黄酮的含量。在一个方面，本发明提供了一种食品，其包括类黄酮递送系统，该类黄酮递送系统包含疏水类黄酮和蛋白质的共沉淀物。在一个实施方案中，共沉淀物包含被包封在蛋白质基质中的疏水类黄酮的纳米晶体。在一个实施方案中，共沉淀物包含被包封在蛋白质基质中的疏水类黄酮。在一个实施方案中，类黄酮递送系统包含疏水类黄酮和蛋白质的共沉淀物，其中该共沉淀物已经被分散在磷酸盐溶液中并喷雾干燥。在一个实施方案中，类黄酮递送系统是一种组合物，其包含疏水类黄酮和蛋白质的共沉淀物以及磷酸盐。本发明的类黄酮递送系统特别适合掺入乳制品中，所述乳制品包括但不限于酸奶、乳制食品、奶酪、冰淇淋、果汁冰糕、果冻、一次性食用的丸制品、蜂蜜和基于蜂蜜的产品等；蛋白棒；粉末饮料、饮料、特别是半固体蛋白饮料，诸如冰沙和奶昔:谷物；以及涂抹物，例如花生酱。该共沉淀物不太适合用于清澈的饮料，因为添加时会产生不透明。但这是不透明食品的理想选择，包括饮料，特别是食品和已经含有蛋白质的饮料。可以将相对大量的本发明的共沉淀物掺入这些食品中，以改善它们的健康潜力，而不损害其感官特性。例如，可以使用图21中概述的方法将蛋白质:类黄酮共沉淀物掺入酸奶中。工业方法包括以下主要步骤：1)接收并储存巴氏杀菌脱脂牛奶。2)配料称重；精确的重量记录在称重表中。3)将脱脂牛奶在罐中加热至45℃。·将a部分中的成分预先混合。预混料被添加至牛奶中。将混合物加热至60℃。·将b部分中的成分预先混合。预混料被添加至牛奶中。4)将混合物在60℃下搅拌1h。在完成搅拌步骤前30min添加乳脂。5)混合物通过三重混合器再循环以整合脂肪小球。6)将混合物在200巴进行一级均质。7)将均质的混合物泵送到空罐中。8)测量混合物的ph，并用30％氢氧化钾调节至6.3。9)将混合物在85℃下巴氏杀菌30min。10)将混合物冷却至42℃。11)将发酵剂添加至混合物并搅拌15min。12)关闭搅拌器和加热系统，将混合物发酵7至8小时。13)7小时后，通过测量ph值直至达到目标ph值(4.6)来监测细菌的生长。14)在搅拌器开启的情况下将产品冷却至10℃。15)将产品泵送到灌装机中，在此向罐中添加190g酸奶。然后用蓝色盖将罐加热密封。16)编码日期：bb是从包装日期算起的35天。17)产品储存于1-4℃。本发明的疏水类黄酮:蛋白质共沉淀物允许在食品中包括更高浓度的类黄酮，而不会损害其感官或储存特性。例如，使用芦丁-nacas共沉淀物递送系统，每份酸奶(185克)中可以添加多达500mg芦丁来强化酸奶。未处理的芦丁不能以这种浓度使用，而不会引起酸奶的不良变化。如实施例10所示，与使用未处理的芦丁不同，共沉淀产物的加入不会损害酸奶的生产。在一个实施方案中，食品包含约0.1重量％至约3.5重量％的疏水类黄酮和蛋白质的共沉淀物，优选约0.2重量％至约1.2重量％，更优选0.5重量％至约0.7重量％，最优选约0.5重量％。在一个实施方案中，食品是乳制品，包括但不限于酸奶、乳制品，包括乳粉、奶酪、冰淇淋或果汁冰糕，优选酸奶。在一个实施方案中，乳制品包含约0.2重量％至约0.9重量％的疏水类黄酮和蛋白质的共沉淀物，优选约0.4重量％至约0.7重量％，更优选约0.6重量％。在一个实施方案中，乳制品是酸奶。在一个实施方案中，食品是蛋白质饮料。在一个实施方案中，蛋白质饮料包含约0.1至约0.45(w/v)的疏水类黄酮和蛋白质的共沉淀物，优选约0.15至约0.4，更优选约0.4(w/v)。在一个实施方案中，食品是蛋白棒。在一个实施方案中，蛋白棒包含约0.5重量％至约3.5重量％的疏水类黄酮和蛋白质的共沉淀物，优选约0.7重量％至约2.5重量％，更优选约1.0重量％至约2重量％。在一个方面，本发明提供了一种食品，其包含大于约0.10重量％的疏水类黄酮，优选大于0.12重量％的疏水类黄酮。在一个实施方案中，食品是乳制品，优选酸奶。图26概述了用芦丁-nacas共沉淀物强化的蛋白棒的制造。该方法包括以下主要步骤：1)将包括本发明的产品在内的干性成分称重到袋中。将湿性成分称重到平底锅中。葵花籽油和卵磷脂在单独的容器中称重。2)将干性成分添加到湿性成分中，并在60℃下持续混合。将葵花籽油和卵磷脂在60℃下添加到混合物中。3)在霍巴特型混合器中混合该混合物持续1分钟。4)在用烘烤纸衬垫的托盘内压糊状物，覆盖塑料膜或烘烤纸并滚压为平坦形状。5)将产品放置过夜。6)将蛋白棒切割成55g的条块。7)将棒进行真空包装。使用图27所示的方法，本发明的产品也适用于蛋白质饮料。主要步骤为：1)将湿性成分称重并加热到50℃。分别称重干性成分，包括本发明的产品。2)将干性成分逐渐添加到湿性成分中。3)将混合物在50℃下低速搅拌30分钟。将糖、水、羧甲基纤维素和卡拉胶预先混合，然后添加到混合物中。将油和卵磷脂预热并添加到主要混合物中。保持混合10分钟。4)将饮料加热/50巴进行两级均质。6)将均质的产品冷却至20-25℃。7)用30％氢氧化钾将ph调节至6.8。8)通过uht(140℃，9秒)或巴氏灭菌(85℃，15秒)将饮料进行热处理。9)将饮料泵送到灌装机中，并无菌包装在250ml塑料瓶中。10)根据所应用的热处理，产品可以在室温或4℃下存储。尽管本发明的递送系统产品特别适合于食品强化，它也可以用作膳食补充剂。膳食补充剂通常为丸剂、胶囊剂、片剂、袋剂、凝胶剂或液体剂的形式，单独服用或与食物一起服用以补充膳食。在一个方面，本发明提供了一种膳食补充剂，其包含本发明的类黄酮递送系统。如本文所用，术语“包含”是指“至少部分地由……组成”。当解释本说明书中包括术语“包含括”的每个陈述时，也可以存在除该术语或由术语开头的那些特征以外的特征。诸如“包含(comprise)”和“包含(comprises)”之类的相关术语将以相同的方式解释。如本文所用，术语“基本上由……组成”是指所指定的材料或步骤以及不会实质性地影响所要求保护的发明的基本和新颖特征的那些材料或步骤。在本说明书中，参考专利说明书、其他外部文件、或其他信息来源，这通常是为了提供用于讨论本发明特征的上下文。除非另有特别说明，否则对此类外部文件的引用不应被解释为承认此类文件或此类信息来源在任何管辖范围内都是现有技术，或构成本领域公知常识的一部分。对本文公开的数字范围的引用(例如1至10)旨在也包含对该范围内的所有有理数字的引用(例如1、1.1、2、3、3.9、4、5、6、6.5、7、8、9和10)以及该范围内的任何有理数范围(例如2至8、1.5至5.5、以及3.1至4.7)，因此，本文明确公开了所有范围的所有子范围特此被明确公开。这些仅是具体意图的示例，并且在所列举的最小值和最大值之间的数值的所有可能的组合应被认为在本申请中以类似的方式明确地陈述。每当在说明书中给定范围时，例如温度范围、时间范围或组成范围，所有中间范围和子范围、以及包括在给定范围内的所有单个值都旨在被包括在本公开中。在本公开和权利要求中，“和/或”是附加地或可替代地。此外，以单数形式使用的术语的任何使用也涵盖复数形式。如本文所用，术语“约”是指修饰术语的合理偏离量，使得最终结果不会显著改变。例如，当应用于某个值时，该术语应解释为包括该值的+/-5％的偏差。6.实施例6.1材料和方法化学品芦丁购自西格玛奥德里奇(sigma-aldrich)(澳大利亚新南威尔士州城堡山(castlehill))。根据制造商，该产品的纯度>97％w/w。酪蛋白酸钠来自恒天然(fonterra)合伙有限公司(新西兰奥克兰)。d-(+)-海藻糖二水合物(来自酿酒酵母(saccharomycescerevisiae)，≥99％)是来自西格玛奥德里奇(sigma-aldrich)(新西兰奥克兰)的产品。所用的所有其他化学品或试剂均为分析试剂级，从西格玛奥德里奇(sigma-aldrich)(新西兰奥克兰)或赛默飞科学公司(thermofisherscientific)(新西兰奥克兰)获得。包封率(ee)和负载量(lc)的测定为了测量被包封在nacas沉淀物中的类黄酮的量(包封率)，按照(dammak，2017)的方法通过高压液相色谱(hplc)测定上清液中类黄酮的浓度。hplc配备有紫外/可见二极管阵列检测器(安捷伦(agilent)技术，1200系列，美国加利福尼亚州圣克拉拉)。该柱为反相prevailtmc18，尺寸为4.6cm×150mm，粒径为5μm(格雷斯奥泰(gracealltech)，美国马里兰州哥伦比亚)。流动相由酸性milli-q水(ph3.50，1％乙酸v/v)和甲醇组成，体积比为50:50，流速为1ml/min，进样量为5μl。例如，在约4.8分钟的保留时间内在356nm处检测到了芦丁。为了校准hplc色谱柱和定量样品中的芦丁，使用流动相中纯芦丁(>97％)的标准溶液(0.01-1mg/ml)。为了释放剩余的芦丁的总级分，在注入hplc色谱柱之前，将上清液在加热的乙醇(70℃)中分散并过滤(0.45μm；赛默(thermo)科技，美国马萨诸塞州沃尔瑟姆)。芦丁可溶于乙醇，浓度为约4％w/v。最后，使用以下公式计算芦丁-nacas共沉淀物中芦丁的ee：ee(％)＝(c总-c上清液)/c总×100(1)其中，c总是系统中芦丁的总(初始)浓度，c上清液是上清液中的芦丁浓度。芦丁的lc根据ahmad等人(2016)的方法使用以下等式计算；lc(％)＝(总芦丁-游离芦丁)/共沉淀物的重量×100(2)类似地计算被包封在酪蛋白酸钠中的其他类黄酮的ee和lc。共沉淀物在中性ph条件下的分散性将每种类黄酮和蛋白质以及类黄酮-蛋白质共沉淀物的冻干沉淀物分散在磷酸盐缓冲液(ph7.0)中，并在2000rpm下搅拌120min，在此期间研究颗粒的尺寸特性(分散性)。如(fang，2011)所建议的那样，在将颗粒的表面材料释放到水性介质中后，随着时间的流逝，这些颗粒的分散过程可以模拟此类颗粒尺寸的减小。这意味着，在水性介质中的特定时间段(例如120分钟)内测量特定粉末的颗粒尺寸，表明该粉末在具有相同介质的食品中的分散行为。因此，在磷酸盐缓冲液中分布期间(ph7.0)和搅拌过程中，颗粒尺寸的变化可用作观察蛋白质和类黄酮共沉淀物或类黄酮沉淀物(对照)随时间的分散行为的适用技术，根据来自(ji，2016)的方法。使用配备有4mwhe-ne激光操作的malvernmastersizer3000(马尔文(malvern)仪器有限公司，英国伍斯特郡)。称量约30mg的每种粉末(以达到仪器中理想的遮蔽水平)，将其添加到分散装置中的磷酸盐缓冲液(ph7.0)中，并在整个分散时间(120min)中进行搅拌(2000rpm)。632.8nm的波长用于以2min的间隔连续测量颗粒尺寸特性。收集并分析每次测量的尺寸分布d50(μm)和遮蔽值。为了避免初始分散的伪影，丢弃第一次测量值(时间0)，并收集2至120min的数据。为了确保测量的有效性，在120min的时间段内对遮蔽进行监测。类黄酮与蛋白质共沉淀时的溶解性将已知量的每种粉末添加到10ml用于分散性实验的水性介质中，并搅拌24h。然后将样品离心(3000×g，20℃，10min)，收集上清液并过滤(0.45μm；赛默(thermo)科技，美国马萨诸塞州沃尔瑟姆)。然后按照(dammak，2017)的方法在乙醇中提取上清液中的可溶性类黄酮，并使用下文所述的高压液相色谱(hplc)方法进行定量。hplc机器配备有紫外/可见二极管阵列检测器(安捷伦(agilent)技术，1200系列，美国加利福尼亚州圣克拉拉)。该柱为反相prevailtmc18，尺寸为4.6cm×150mm，粒径为5μm(格雷斯奥泰(gracealltech)，美国马里兰州哥伦比亚)。流动相由酸性milli-q水(ph3.50，1％乙酸，v/v)和甲醇组成，体积比为50:50，流速为1ml/min，样品进样量为5μl。在特定的保留时间洗脱时，每种类黄酮都在其特定的波长下被检测到。为了校准hplc色谱柱并定量样品中的类黄酮，使用流动相中纯类黄酮(>97％)的标准溶液(0.01-1mg/ml)，并绘制标准曲线。通过将保留时间与标准品进行比较，并使用外标方法对峰积分进行比较，可获得分析物的色谱峰。为了释放剩余的类黄酮的总级分，在注入hplc色谱柱之前，将上清液在加热的乙醇(70℃)中分散并过滤(0.45μm；赛默(thermo)科技，美国马萨诸塞州沃尔瑟姆)。使用扫描电子显微镜(sem)的共沉淀物的形貌使用环境扫描电子显微镜(feiquanta200，荷兰)来研究冻干粉末的形态。使用双面胶带(粘贴到上面)将少量磨碎的冻干样品(除未处理的芦丁以外，这是一种商业样品)安装在铝棒上。剥下背衬后，将样品舀到裸露的胶带上，然后吹掉多余的样品。之后，用大约100nm的金(baltecscd149050溅射镀膜机)对样品进行溅射镀膜，然后在显微镜下以20kv的加速电压进行观察。冻干粉末的x射线衍射(xrd)xrd分析是在rigakurapid图像板检测器(日本理学(rigaku)，美国德克萨斯州伍德兰兹)在20.0℃下进行的，设置为127.40mm。使用由rigakumicromax007microfocus旋转阳极发生器(日本理学(rigaku)，美国)产生并由osmic-rigaku金属多层光学器件(日本理学(rigaku)，美国)聚焦的cukα辐射(λ＝)。将冻干的研磨样品与少量fomblin油一起装入hamptoncryoloops(汉普顿研究中心，美国加利福尼亚州)。在rapidii软件(2.4.2版，日本理学(rigaku)，美国)的控制下收集数据，其中数据经过了背景校正，并使用2dp程序(1.0.3.4版，日本理学(rigaku)，美国)转换为线轮廓，并使用crystaldiffract软件(6.5.5版，crystalmaker软件有限公司，英国牛津)进行了比较。由于冷冻循环中的样本大小是可变的，因此将数据缩放到由光束停止阴影引起的背景相同的上升。在5°至100°的2θ角度范围内分析了所有样品。为了突出x射线束中的晶体数量，使用了5°的窄振荡范围。固态核磁共振波谱(nmr)在brukerbiospec光谱仪(elektronik公司，德国莱茵施泰滕)上获得固态nmr波谱，其在50.39mhz的13c频率下操作。实验是在22℃下使用bruker7mm双共振h/xsb-mas(魔角旋转)探针进行的。将150mg冻干的研磨样品装入具有水密盖的7mm转子中。90°脉冲设置为5.54μs，在所有采集过程中均采用45khz偶极质子去耦。转子的自旋速度为4000hz±10hz。甘氨酸用作所有13c化学位移的外部参考。使用30hz洛伦兹线展宽和30hz高斯展宽处理波谱。统计分析一式三份地制备样品，所有测量重复3次(不管x射线和nmr数据)。使用excel2016(微软雷德蒙(microsoftredmond)，美国弗吉尼亚州)计算数据平均值和标准偏差，并使用spss20advancedstatistics(ibm，美国纽约州阿蒙克)以181p<0.05评估处理之间的显著差异。实施例1：芦丁-nacas共沉淀物(flavoplus)的制备制备一升10％(w/v)的酪蛋白酸钠(nacas)水溶液，并使其充分水合过夜。然后使用4mnaoh将溶液的ph调至11.0，并在室温下搅拌(300rpm)30min，以使nacas完全解离。将100g(10％，w/v)的食品级芦丁添加到该溶液中，随着芦丁使ph值急剧降低，再次将ph值提高至11.0。将混合物在室温搅拌直至所有加入的芦丁溶解为止，同时不断监测溶液的ph并在需要时将其调节至11.0。从所有芦丁都溶解在nacas溶液中开始，将混合溶液再搅拌30min，同时连续监测ph值。将海藻糖以2.5％w/v添加至溶液中，并搅拌10-20分钟以溶解。使用4mhcl将溶液(含有芦丁、nacas和海藻糖)迅速酸化至ph4.6(酪蛋白的pi)，使芦丁和nacas共沉淀。将得到的混合物在室温以3000g离心10min。收集上清液以定量剩余的(未包封的)芦丁。一些沉淀物被烘干(50℃持续8小时)，另一些沉淀物在-18℃冷冻后被冻干。使用咖啡研磨机将干燥的产品细磨。使用相同的方法制备芦丁和nacas的对照沉淀物，并且各自的浓度相同(即，10％w/v)。在各个溶液酸化之后，芦丁和nacas均形成沉淀物，将其也进行研磨过程。这些是“经处理的芦丁”和“经处理的nacas”。为了阐明沉淀过程如何影响微观结构，将芦丁、nacas和/或海藻糖的干燥粉末以与共沉淀物相同的比例混合在一起。图1显示了实施例1中制备的粉末的外观。虽然烘干产生深色的粒状粉末，但是冻干得到较轻的、较低密度的材料，其更易流动。实施例2：在flavoplus制造过程后测定芦丁的包封率(ee)和负载量(lc)实施例1中制备的芦丁-nacas共沉淀物的hplc分析得到平均质量比为1:1的芦丁-nacas。根据上述程序测量实施例1的方法的ee和lc。发现该方法的ee为98.1±1.2％，lc为48.6±1.2％。实施例3：芦丁-nacas共沉淀物的分散性根据上述提供的方法测量实施例1中制备的芦丁-nacas共沉淀物的分散性，并将其与(a)未处理的芦丁(从西格玛(sigma)获得的纯度>97％的未加工的商品芦丁)和(b)经处理的芦丁(芦丁在ph11.0溶解，然后在ph4.6沉淀)进行比较。在有或没有海藻糖的情况下检测经处理的芦丁和flavoplus共沉淀物(见图2)。未处理的芦丁(图2a)没有显示任何明显的分散性，并且在120min内颗粒尺寸变化很小。所有冻干粉末的初始颗粒尺寸均小于未处理的芦丁，并且在大多数情况下，颗粒尺寸分布是多分散的。对于经处理的芦丁(图2b和图2d)，尽管最初也发生了一些聚集，但颗粒尺寸在开始的60min内基本减小了。冻干的芦丁-nacas共沉淀物(图2c和图2e)的分散性提高更为明显，尤其是对于在海藻糖存在下冻干的样品(图2e)。如图3所示，与未加工的和经处理的芦丁相比，芦丁-nacas产品中大颗粒的百分比大大降低。这表明共沉淀物将具有更大的分散性。未处理的芦丁的遮蔽指数在120min内大致恒定(图4)，表明散射总量(即未溶解的粉末颗粒数)没有变化。对于所有冻干样品，在开始的10min内，遮蔽迅速降低，此后达到稳定状态。对于没有nacas的样品，其遮蔽稳定在约7％，而对于有nacas的冻干的样品，其遮蔽为1-3％，这与图2中所示的颗粒尺寸分布一致。如遮蔽指数中更早的下降所示，添加海藻糖显著加速溶解。实施例4：芦丁-nacas共沉淀物的sem在实施例1中制备的芦丁-nacas共沉淀物的sem证实了在实施例3中获得的分散性结果。如图5所示，在碱性ph下解离并在ph4.6下沉淀后，芦丁和nacas的形态均发生了变化。在芦丁-nacas共沉淀物的显微照片中看到的纤维/棒状晶体(图5d和图5e)表明芦丁在产品结构中得到了修饰。芦丁的晶体不同于未处理的芦丁的晶体(图5a)或未处理的芦丁和nacas的混合物(图5c)。实施例5：芦丁-nacas共沉淀物的x射线衍射(xrd)将经处理的和未处理的芦丁和nacas的x射线衍射图与本发明的芦丁-nacas共沉淀物进行比较，如图6所示。未处理的芦丁的xrd图谱显示出很高的结晶性，而经处理的芦丁的结晶度则低得多(但在2d衍射图中仍然有些斑点)。这意味着在处理后，未处理的芦丁中的一些大晶体已变为较小的晶体(例如，纳米晶体)和/或非晶态，这与图5中报道的形态学发现相符，其中sem显微照片表明，经处理的芦丁芦丁表现出与其未处理形式不同的微观结构。芦丁-nacas共沉淀物与未处理的芦丁的xrd图谱比较，进一步解释了为什么共沉淀物在磷酸盐缓冲液中具有更高的分散性。从图6中可以看出，未处理和经处理的nacas的xrd图样显示出无定形图样，证实了无论是否经处理，nacas都处于无定形状态。然而，观察到尖锐的峰，特别是在经处理的nacas的情况下，在约2θ＝31°和45°的衍射角处。这些峰与盐(nacl)晶体相关，如图6所示，并且预期是因为处理过程首先涉及在ph值为11的条件下用4mnaoh溶解，然后在ph4.6的条件下用4mhcl沉淀，然后冻干。如图6所示，在所有其他经处理的样品(包括经处理的芦丁或芦丁-nacas共沉淀物)的衍射图中也看到了此类峰，证实了它们与ph处理和沉淀过程中添加的离子有关。将未处理的芦丁和nacas干混物的xrd图谱与它们的共沉淀物进行比较(图6，分别为c和d)时，芦丁-nacas共沉淀物的峰更宽(最明显的表现是在约15°和26°处近距离峰的分辨率下降)，这意味着该处理导致共沉淀物中晶体芦丁的含量降低。这与商业和经处理的对照芦丁的xrd图谱一致。芦丁和nacas的xrd图谱可以在两者的干燥混合物图谱中看到(图6c)。然而，芦丁的较弱峰损失的部分原因是结晶度损失的扩大，部分是由于非晶态nacas散射的叠加。换言之，背景中存在nacas的xrd图谱，因为没有酪蛋白的样品(经处理的芦丁)显示出与芦丁-nacas共沉淀物不同的图谱(图6)。此外，nacas似乎通过在芦丁晶体之间形成屏障而限制了芦丁晶体在沉淀或冻干过程中的生长，使得它们不像在没有nacas的情况下那样彼此吸引。实施例6：芦丁-nacas共沉淀物的固态nmr固态nmr光谱峰的线形对化学位移各向异性(csa)的变化敏感，因为与溶液状态相比，分子和原子团的分子迁移率低得多。csa取决于核周围电子场的方向和形状。如果分子的平均方向或其离子态发生变化，则峰的线形将发生变化。在固态nmr波谱中，洛伦兹峰的峰形代表具有定义的一组或窄范围的磁场定向的核。这通常表示有序或晶体分子结构。另一方面，高斯峰表示相对于磁场具有随机和/或宽范围取向的核。在固体中，这表明具有构象障碍的分子的无定形排列。由于质子自旋与键合碳核的自旋强烈耦合，因此它们会影响13c峰的线形和化学位移。每个峰均符合劳伦兹和高斯混合函数，其中l/g值统一表示线形完全为洛伦兹，零为完全高斯。图7显示了未处理和经处理的样品以及含有海藻糖的样品的13cnmr谱图。此外，图8含有未处理的和经处理的芦丁的13cnmr谱图及其峰归属。这些数字表明酪蛋白和芦丁之间缺乏分子相互作用，以及ph处理对芦丁结晶度的影响。首先，未处理的和经处理的nacas的nmr谱图之间没有差异(图7)。同样，在芦丁-nacas共沉淀物中，芦丁和nacas之间似乎没有可检测到的位点(碳种)特异性相互作用，这表明分子迁移率没有变化，因此无法确认两个分子之间的相互作用。按照上述思路，已经报道了一些类黄酮与蛋白质之间的直接相互作用(例如阳离子-π相互作用)，并且通常将类黄酮的此类特性视为对其生物活性负责的关键功能(munusami，2014)。例如，酪蛋白中的赖氨酸和精氨酸在ph4.6(当前实验中芦丁和nacas的沉淀点)带正电，它们可能与芦丁的苯环相互作用。然而，通过nmr分析未发现这样的相互作用。此外，也已报道了类黄酮(例如姜黄素和槲皮素)与nacas、酪蛋白胶束和β-酪蛋白在水溶液中的疏水相互作用(mehranfar，2013)(pank.z.，2013)。但是，没有证据表明本发明的共沉淀物的各个分子之间存在任何紧密的联系或相互作用，因此nmr观察主要是由本体材料决定的，而不是芦丁、nacas和添加海藻糖的颗粒的表面-表面相互作用。这意味着芦丁没有分子/化学键合而是物理地被包封在蛋白质基质中。由于本发明的方法包括从碱性ph(其中蛋白质和类黄酮都被解离/溶解)到蛋白质等电点(其中蛋白质和类黄酮都完全沉淀)的快速酸化，因此两组分之间发生分子相互作用的机会很小。另外，初始ph(碱性)对于蛋白质与类黄酮之间可能的疏水性或其他相互作用并不是理想的条件。其次，如图8所示，在ph处理后，芦丁碳峰(例如，编号为2、16、21、22、23、24的峰)的线形、强度和化学位移发生变化。经处理的芦丁的洛仑兹含量降低表明构象异质性与结晶度降低和/或无定形物质增加一致。因此，这些发现表明芦丁分子中碳的分子顺序已经降低。芦丁的二糖组分在其不饱和环结构和糖苷连接方面在构象上都比芳族槲皮素组分灵活得多。糖环上羟基之间的质子共享通常负责与糖形成晶体结构。因此，伴随结晶性的降低或损失，替代性氢键排列的变化导致观察到的nmr光谱变化。这些发现与图13至图16中显示的xrd结果完全吻合。实施例7：其他类黄酮-nacas共沉淀物的制备根据实施例1的方法制备了四种另外的类黄酮-nacas共沉淀物和对照。在每个过程中，将芦丁替换为(a)儿茶素、(b)姜黄素、(c)橙皮素和(d)柚皮素。儿茶素、橙皮素和柚皮素的所有溶液的ph值均从11降至4.6，姜黄素的溶液则从11.5降至4.6。如上所述测量每种共沉淀物的分散性。结果如图9至图12所示。还对每种共沉淀物进行了xrd分析。结果如图13至图16所示。如图17至图20所示，使用sem确定了四种共沉淀物的形貌。四种新的类黄酮-nacas共沉淀物的结果与芦丁-nacas的数据一致。这些结果表明，本发明的产品是用于其他疏水类黄酮的合适的递送系统，并且通常可用于用疏水类黄酮来强化食品。实施例8：用flavoplus(nacas:芦丁共沉淀物)强化的搅拌型酸奶的工业制造在固定有搅拌器的不锈钢罐中将250升巴氏灭菌并均质的脱脂牛奶加热至45℃。将脱脂奶粉(4.6kg)、flavoplus(1.76kg)、果胶(0.43kg)、香草香料(0.72kg)、山梨酸钾(0.14kg)和酒石酸(0.06kg)预混合并添加到罐中，然后加入甜味调节剂(0.23kg)。然后将混合物加热至60℃。同时，将赤藓糖醇(9.94kg)、三氯蔗糖(0.014)和明胶(1.44kg)预混合，并在60℃加入罐中，然后加入乳脂(5.44kg)。将酸奶混合物搅拌60分钟。然后将混合物在200巴的压力下进行1级均质处理，然后泵送入空罐中。检查混合物的ph，并用30％氢氧化钾调节至6.3。将均质的混合物加热至85℃持续30分钟，然后冷却至42℃。无菌地打开一小袋冷冻干燥的发酵剂，并将其加入罐中，并将混合物搅拌15分钟。此后，关闭搅拌器加热系统，并在42℃发酵8小时，直至达到ph4.6-4.5。一旦发酵完成，将所得凝乳在搅拌下冷却至10℃。达到温度后，将酸奶从发酵罐泵送入料斗，在料斗中对罐进行灌装并热密封。酸奶罐存放在4℃或更低的温度。该方法如图21所示。实施例9：含有芦丁的酸奶的稠度和硬度使用具有5kg负荷传感器的ta.xtplus纹理分析仪(stablemicrosystems有限公司)进行实施例8中制备的酸奶的纹理分析。实验是在5℃使用单次压缩测试(距离：30mm，速度0.001ms-1)和反向挤压探针(直径：37mm)进行的。样品量为50g。分析的纹理参数是硬度和稠度。图22显示了flavoplus和未处理的芦丁(游离芦丁)形式的不同浓度芦丁强化的酸奶的稠度(a)和硬度(b)的变化。这些结果表明，低剂量(100mg)的芦丁强化作用不会改变酸奶的稠度或硬度，但使用高剂量的芦丁(500mg)则存在明显的差异。未处理的芦丁(游离芦丁)会导致酸奶的稠度和硬度下降到不可接受的程度，而flavoplus没有任何作用。这表明flavoplus允许将高剂量的芦丁掺入酸奶中，对质感的影响较小。实施例10：发酵过程中富含芦丁的酸奶的ph和流变特性的变化在发酵期间，在ph调节仪(tim856，radiometeranalytical，法国)中定期测量实施例8中生产的酸奶样品的ph值。将等分的60ml接种牛奶放入该设备的采样池中，然后将ph探针插入其中。每2分钟监测一次ph值变化。结果如图23所示。使用装有智能交换同心圆筒系统的流变仪(ar-g2，ta仪器，美国)监测流变性质。在发酵过程中，对酸奶进行低幅动态振荡测量，频率为1hz，施加的应变为1％，以避免凝胶破裂。将等份的12ml样品转移到流变仪中，并将矿物油涂在表面上以避免蒸发。温度为43℃。每7分钟收集一次数据。图24显示了酸奶发酵过程中ph(a)和流变特性(b)随时间的变化，其中使用的是含有flavoplus的配方和另一种未处理的芦丁(游离芦丁)，其含量为500mg(测试的最高芦丁剂量)。结果表明，与flavoplus相比，以该剂量添加未处理的芦丁可延缓发酵过程中的ph下降。实际上，虽然flavoplus酸奶配方仅需约500分钟即可达到ph4.6，而未处理的芦丁配方所需的时间却是600分钟。流变性质，特别是储能模量(g’)，也根据配方而有所不同。含有flavoplus的酸奶的g’增长速度比未处理的芦丁(游离芦丁)强化的酸奶的增长快，这表明含有flavoplus的酸奶的凝胶化过程要快得多。实施例11：酸奶储存过程中芦丁浓度和其他特性的变化测量在实施例8中生产的酸奶的芦丁浓度。图24显示了储存21天的酸奶中芦丁的浓度，以及从对照(不含芦丁)、flavoplus和未处理的芦丁(游离芦丁)酸奶配方中提取后回收的芦丁的百分比。在含有flavoplus或未处理的芦丁的任何配方中，芦丁的浓度在储存过程中均无显著变化。如表1所示，在含有flavoplus和未处理的芦丁的酸奶配方中，回收百分比也相似。这些结果表明，在储存过程中，芦丁在酸奶中保持化学稳定，而且用于制造flavoplus的包封程序也不会损害食品中芦丁的化学稳定性。表1：从强化酸奶中回收芦丁的百分比根据实施例8制备另一组酸奶，以评估产品的储存稳定性。在35天内测量了酸乳的ph值和可滴定酸度，发现其符合相关食品标准(标准2.5.3，fsanz和食品法典标准243-2003)。持续40天测量持水量(whc)。较高的whc表示较低的脱水收缩，这是高品质酸奶的特性。还使用标准技术测量强化酸奶在4℃时的粘度和储能模量。whc、粘度和储能模量均正常且可接受。实施例12：用flavoplus强化的酸奶的感官特性测试了实施例8中生产的酸奶的感官特性。所应用的感觉测试是在一个会话中执行的情感测试。实验在梅西(massey)大学的餐厅进行。有45名未经培训的小组成员参加了会议，其中大多数是大学生和工作人员。它们被指示要对产品的整体可接受性以及每份食物的大小对它们的反应进行评价。每三勺，小组成员对可接受性水平进行评定，直至完成一份(190g)为止。使用9cm的条形刻度，其中0cm表示“不可接受”，而9cm表示“高度可接受”。酸奶罐随机编码，感官测试后收集每个罐，以测量酸奶的剩余量。图25说明了对一勺flavoplus强化酸奶的消费者接受度，该酸奶含有最高测试剂量(500mg)。45人的消费者小组通过接受度测试对flavoplus配方进行了感官评估。消费者使用9分喜好等级表对每一定勺量的感官体验进行评分。获得的结果表明，用flavoplus强化的酸奶在可接受范围之内并且是可口的，并且这种感官知觉在整个食用过程中是稳定的。实施例13：用flavoplus强化的蛋白棒的台式制造为了制备100g的棒状材料，将乳清蛋白浓缩物(34.2g)、蛋白酥(10.3g)、可溶性膳食纤维(14.8g)、聚葡萄糖(6.8g)、flavoplus(1.8g)和盐(0.2g)称重并预混到塑料袋中。将甘油(11.4g)、山梨糖醇(11.4g)和水(1.9g)混合并在不锈钢容器中加热至60℃。将菜籽油(6.5g)和卵磷脂(0.6g)在另一个容器中混合，并加热至60℃。将塑料袋中的干性成分添加到混合碗中。将温热的甘油-山梨糖醇-水混合物添加至混合碗中，然后添加油性混合物。用霍巴特(hobart)型混合器将所有成分低速混合1分钟。用刮铲除去碗表面结块的粉末，然后将各成分混合1分钟。将得到的糊状物转移到预先用烘烤纸涂覆的托盘上，并用辊压平。将产品在室温下放置过夜。最后，用塑料切割机将产品切割成55g的条块。棒可以被真空密封并在室温下存储。该方法如图26所示。实施例14：用flavoplus强化的蛋白质饮料的台式/中试工厂制造为了制备1000ml的饮料，将水(531.2ml)、消泡剂(0.35g)和葡萄糖(94g)混合并加热至50℃。称重乳清蛋白浓缩物(57g)、乳蛋白浓缩物(57g)和flavoplus(4g)，并在低速搅拌下将其加入水-葡萄糖混合物中，以最大程度地减少泡沫。将饮料混合物在50℃混合60分钟。在单独的不锈钢容器中，将糖(94g)、水(132.8ml)、羧甲基纤维素(2g)和卡拉胶(0.1g)混合直至溶解，然后在50℃将该预混物添加到蛋白质混合物中。也将芥花籽油(52g)和卵磷脂(1.6g)混合，预热至50℃，然后添加到蛋白质混合物中。然后将饮料加热至60℃，在200/50巴进行两级均质，并冷却至20-25℃。使用10％的氢氧化钾将ph调节至6.8，并通过uht(140℃，60秒)或巴氏灭菌(85℃，15秒)对饮料进行热处理。饮料被泵送到灌装机中，并无菌包装在250ml塑料瓶中。该方法如图27所示。实施例15：一系列疏水类黄酮:蛋白质共沉淀物的制备根据实施例1，使用疏水类黄酮芦丁、柚皮素、橙皮素、姜黄素和儿茶素以及蛋白质nacas、wpi和spi、mpc和豌豆蛋白质分离物，制备一系列类黄酮:蛋白质共沉淀物。研究以下共沉淀物中类黄酮的水溶性：芦丁:nacas、芦丁:spi、芦丁:wpi、柚皮素:nacas、柚皮素:spi、柚皮素:wpi、姜黄素:nacas、姜黄素:spi、姜黄素:wpi、儿茶素:nacas、儿茶素:spi和儿茶素:wpi。比较本发明的共沉淀物中类黄酮(含和不含2.5％海藻糖)的水溶性与未处理的疏水类黄酮和经处理的类黄酮(其中类黄酮在高ph下溶解，然后通过降低ph至约4.6而沉淀)的水溶性。结果显示在图28至图31中。结果表明，源自本发明的共沉淀物的疏水类黄酮比等效的未处理或经处理的疏水类黄酮始终更可溶。还对每种共沉淀物进行xrd分析，其中wpi和spi共沉淀物与nacas共沉淀物xrd数据给出了一致的结果，如图13至图16所示。还研究在不含海藻糖和含2.5重量％或5重量％海藻糖的情况下共沉淀物的分散性。获得的分散性结果与图2和图9至图12中所示的类黄酮:nacas共沉淀物的分散性相似。实施例16：将分散在磷酸盐溶液中的nacas:芦丁共沉淀物进行喷雾干燥制备一升10％(w/v)的酪蛋白酸钠(nacas)水溶液，并使其充分水合过夜。然后使用4mnaoh将溶液的ph调至11.0，并在室温下搅拌(300rpm)30min，以使nacas完全解离。将100g(10％，w/v)的食品级芦丁添加到该溶液中，随着芦丁令ph值急剧降低，再次将ph值提高至11.0。将混合物在室温搅拌直至所有加入的芦丁溶解为止，同时不断监测溶液的ph并在需要时将其调节至11.0。从所有芦丁都溶解在nacas溶液中开始，将混合溶液再搅拌30min，同时连续监测ph值。使用4mhcl将溶液(其中添加了芦丁、nacas和海藻糖)迅速酸化至ph4.6(酪蛋白的pi)，使芦丁和nacas共沉淀。将得到的混合物在室温以3000g离心10min。然后将共沉淀的产物(10％干重/体积)分散在磷酸钾溶液中，并在以下条件下喷雾干燥：入口温度180℃，出口温度75℃，流速20ml/min。实施例17：分散在磷酸盐溶液中的nacas:芦丁共沉淀物(喷雾干燥粉末)的颗粒尺寸和溶解性根据实施例16制备nacas:芦丁共沉淀物。将共沉淀产物分散在一系列磷酸钾溶液中，得到10％wt/v的共沉淀物，然后将其喷雾干燥，如实施例16所述。所用的磷酸钾溶液具有各种浓度的磷酸钾(0.1至5％w/v)。使用与实施例16中所述相同的方法制备芦丁的对照沉淀物，其中省略了蛋白质组分。溶液中的芦丁浓度为10％w/v。溶液酸化后，芦丁形成沉淀，针对本发明的共沉淀物对其进行测试。使用上面提供的分散性和溶解性方案评估喷雾干燥粉末产品。结果显示在图32和图33中。这些结果表明，将分散在磷酸盐溶液中的共沉淀物进行喷雾干燥的附加步骤提供了类黄酮递送系统，其中类黄酮是特别可溶的和可分散的。实施例18：用flavoplus(喷雾干燥粉末)强化的乳制品的感官属性和消费者选择制备一套酸奶配方，添加和不添加各种形式的芦丁(不添加芦丁、未处理的芦丁、冷冻干燥的nacas:芦丁共沉淀物、溶于磷酸盐溶液中并喷雾干燥的nacas:芦丁共沉淀物)。这些酸奶是根据实施例8制备的。使用9分喜好等级表确定对这些酸奶的总体喜好。要求参与者从三种富含芦丁的产品中选择一种(未处理的芦丁、冷冻干燥的nacas:芦丁共沉淀物、以及溶于磷酸盐溶液中并喷雾干燥的nacas:芦丁共沉淀物)，然后带回家。发现有60％的参与者(n＝40)更喜欢用溶于磷酸盐中的nacas:芦丁共沉淀物强化的酸奶带回家。对于用不同芦丁成分强化的香草味牛奶也发现了类似的结果(未添加芦丁、未处理的芦丁、冻干的nacas:芦丁共沉淀物、以及溶于磷酸盐溶液中并喷雾干燥的nacas:芦丁共沉淀物)。与其他样品相比，参与者选择将溶于磷酸盐中并喷雾干燥的nacas:芦丁共沉淀物制成的制剂作为首选而非其他。7.参考文献dammak,i.&.(2017).负载芦丁的水包油乳液的配方与稳定性表征(formulationandstabilitycharacterizationofrutin-loadedoil-in-wateremulsions).《食品与生物工艺技术(foodandbioprocesstechnology)》,10(5),926-939.fang,y.s.(2011).关于量化乳蛋白浓缩物的溶解行为(onquantifyingthedissolutionbehaviourofmilkproteinconcentrate).《食品水胶体(foodhydrocolloids)》,25(3),503-510.ji,j.f.(2016).高蛋白奶粉的再水化行为：团聚对润湿性、分散性和溶解性的影响(rehydrationbehavioursofhighproteindairypowders:theinfluenceofagglomerationonwettability,dispersibilityandsolubility).《食品水胶体(foodhydrocolloids)》,58,194-203.mehranfar,f.b.(2013).槲皮素与β-酪蛋白纳米颗粒相互作用的光谱、分子对接和分子动力学模拟的组合研究(acombinedspectroscopic,moleculardockingandmoleculardynamicsimulationstudyontheinteractionofquercetinwithβ-caseinnanoparticles).《光化学与光生物学期刊b：生物学(journalofphotochemistryandphotobiologyb:biology)》,12.munusami,p.i.(2014).类黄酮化合物的分子对接研究：对芳香化酶抑制剂的见解(moleculardockingstudiesonflavonoidcompounds:aninsightintoaromataseinhibitors).《国际药学与药物科学期刊(internationaljournalofpharmacyandpharmaceuticalsciences)》,6(10),141-148.pan,k.l.(2014).姜黄素在自组装酪蛋白纳米颗粒中的ph驱动包封以提高分散性和生物活性(ph-drivenencapsulationofcurcumininself-assembledcaseinnanoparticlesforenhanceddispersibilityandbioactivity).《软物质(softmatter)》,10(35),6820-6830.pan,k.z.(2013).通过包封在酪蛋白纳米胶囊中而增强姜黄素的分散性和生物活性(enhanceddispersibilityandbioactivityofcurcuminbyencapsulationincaseinnanocapsules).《农业食品化学期刊(journalofagriculturefoodchemistry)》,61(25),6036-6043.当前第1页12当前第1页12