一种具有止咳与降血糖功效的金花橘红养生红茶的制作工艺

文档序号:25210419发布日期:2021-05-28 14:05阅读:309来源:国知局
一种具有止咳与降血糖功效的金花橘红养生红茶的制作工艺
本发明属于茶叶加工
技术领域
,具体涉及一种具有止咳与降血糖功效的金花橘红养生红茶的制作工艺。
背景技术
:咳嗽是呼吸系统疾病中最常见的症状之一,常由于气管、支气管黏膜或胸膜受炎症、异物、物理或化学性刺激而引起;是机体的防御反射,有利于清除呼吸道分泌物和有害因子。咳嗽可导致咽喉不适、气促、胸痛、咳痰等系列不舒服症状,对人们的工作、生活和社会活动等诸多方面造成严重的影响。同时,随着现代物质的丰富、生活方式以及饮食结构的变化,高血糖及糖尿病患者逐年增加,据统计,2019年中国糖尿病患病人数约为1.16亿人(100人中约有8.3人为糖尿病患者),中国已成为全球糖尿病患病人数最多的国家。目前咳嗽和糖尿病的治疗主要为化学药物和中成药,化学药物具有并发症等不良反应;中成药副作用小,但气味较大、口感不佳。如何能通过日常饮食来预防、延缓咳嗽与糖尿病的发生,改善咳嗽与糖尿病患者的症状,提高人民的幸福指数,是当今社会的重大需求与课题。茶之为饮,发乎神农氏,闻于鲁周公。茶集解渴、健体、怡情、修身、涤心于一体,是世界著名的三大无酒精饮料之一。它含有450多种对人体有益的成分,被誉为二十一世纪健康饮品。根据茶叶加工过程中茶多酚的氧化聚合程度不同可将其分为六大类,分别是绿茶、黄茶、白茶、青茶、黑茶和红茶。其中,红茶是世界上生产量、贸易量和消费量最大的茶类,其生产量、贸易量和消费量的全球占比皆达70%以上。研究结果表明,红茶具有一定的抗氧化、降低血脂、抑制动脉硬化、降低血糖等健康功效。通过不同加工工艺将茶树上采摘的茶青制作成毛茶,在合适的温湿度条件下进行后发酵,可在茶叶表面生长出大量冠突散囊菌(eurotiumcristatum)。冠突散囊菌呈金黄色,形状如球状蘑菇,俗称“金花菌”,简称“金花”,能改善茶叶的色、香、味,赋予茶叶独特的菌花香,能增加茶水口感的润滑度和回甘;且具有调节糖类代谢、促进肠胃蠕动、促消化、降血脂、减肥等功效。茶叶披上金花后,让茶的“解渴饮品作用”向“功能健康作用”转换,更能发挥茶叶的保健与健康作用。化橘红为“十大广药”之一,广东省地道药材,历史悠久,来源于芸香科植物化州柚未成熟或近成熟的干燥外层果皮,富含多糖、黄酮、香豆素、挥发油等多种活性成分。据明代《本草纲目》中记载:“橘红佳品,其瓤内有红白之分,利气、化痰、止咳功效倍于它药……其功效愈陈愈良”。现代药理学研究表明它具化痰止咳、润喉、抗炎、抗氧化、免疫调节等多种功效,但味苦、辛。茶有增强免疫力、抗病毒等功效,但对预防或治疗咳嗽的效果不太明显;化橘红的止咳平喘效果好,但味辛、苦,作为饮品,不能迎合大多数人的口味。金花菌具有改善茶叶品质,同时也具有很好的健康功效,但当前的金花茶大都是以茯砖茶(黑茶)发花为主,其他茶类(如红茶)的金花茶极少,且目前尚未有关于金花橘红红茶的报道。技术实现要素:为了克服上述现有技术的不足,本发明提出了一种具有止咳与降血糖功效的金花橘红养生红茶的制作工艺,采用该工艺制备得到的金花橘红养生红茶发花效果好,金花茂盛且分布均匀,橘红果香、茶香和菌花香融合充分且融洽,香气高长,滋味醇厚且滑口,回甘好,兼具止咳与降血糖的功效。为了实现上述目的,本发明所采用的技术方案是:本发明提供一种具有止咳与降血糖功效的金花橘红养生红茶的制作工艺,即将红条茶与橘红堆放在一起,经过汽蒸、渥堆、第二次渥堆、第二次汽蒸、四阶段发花、烘干和混配后制备得到。作为本发明的一个优选实施例,上述的一种具有止咳与降血糖功效的金花橘红养生红茶的制作工艺,包括以下步骤:s1、汽蒸:将红条茶与橘红堆放在一起进行汽蒸灭菌;s2、渥堆:将汽蒸后的红条茶与橘红的含水量调整为17%-18%,然后渥堆7-8h;s3、第二次渥堆:渥堆后对红条茶与橘红进行翻堆,然后再渥堆5-6h;s4、第二次汽蒸:第二次渥堆后将红条茶与橘红堆放在一起进行第二次汽蒸灭菌;s5、四阶段发花:对二次汽蒸后的红条茶与橘红进行四阶段发花:第一阶段的温度为28-29℃、湿度为70-75%,发花48h;第二阶段的温度为26-27℃、湿度为60-65%,发花48h;第三阶段的温度为34-35℃、湿度为55-65%,发花24h;第四阶段的温度为26-28℃、湿度为65-75%,发花240h-300h;在保证金花菌的生长环境前提下,通过升温、降温和湿度的调节,有效提高金花菌的生长效率,让每片茶叶和橘红都能生长金花菌,提高金花菌的数量和均匀性。s6、烘干:发花后将红条茶和橘红胚料烘至水分含量为9-13%;s7、混配:按照红条茶与橘红的重量比为(10-16):1的比例将烘干后的红条茶和橘红混配成金花橘红养生红茶。优选地,所述红条茶的制作原料为一芽二叶的英红九号红茶,所述橘红为化州橘红。优选地,所述红条茶和橘红各自成堆,隔开叠放在一起。进一步地,所述红条茶和橘红各自成堆,用纱布隔开并叠放在一起。本发明首次将广东特色茶树品种加工而成的英红九号红茶和化州特色橘红经过汽蒸、渥堆、二次渥堆、二次汽蒸、发花、干燥等系列工序后制作得到新产品,即金花橘红养生红茶,本发明对金花茶的制作工艺比如渥堆、发花(采用四阶段发花工艺)、红茶和橘红的混配比、红茶和橘红的堆放方式等关键工艺步骤进行了科学、合理的研究,使制作得到的金花橘红养生红茶发花效果好,金花茂盛且分布均匀,橘红果香、茶香和菌花香融合充分且融洽,香气高长,滋味醇厚且滑口,回甘好,且兼具止咳与降血糖的功效,既改善了橘红的口感,同时又提高了红茶和橘红的功效。可见,采用本发明工艺制作的金花橘红养生红茶是一种既能够满足咳嗽患者和高血糖患者的用药需求,又具有中医特色和满足大众口味的饮品。优选地,步骤s2的渥堆和步骤s3的第二次渥堆的渥堆厚度为30-50cm,湿度为80%-90%,温度为26-28℃。进一步地,渥堆的厚度为40cm,湿度为85%,温度为27℃。优选地,步骤s1的汽蒸温度为140-150℃,压力为0.06-0.08mpa,茶叶含水量为13%-14%,时间持续10-20s。优选地,步骤s4的第二次汽蒸的温度为190-195℃,时间为40-50s。优选地,步骤s6的烘干为先将红条茶与橘红置于28-30℃下烘40-50h,随后每天升高温度3℃,直至45-48度,最后恒温下将红条茶和橘红烘至水分含量为9-13%。优选地,步骤s5的四阶段发花前,先将二次汽蒸后的红条茶与橘红的含水量调至24%-28%。优选地,步骤s5的发花分四个阶段:第一个阶段的温度为28.5℃、湿度为72.5%,发花48h;第二个阶段的温度为26.5℃、湿度为62.5%,发花48h;第三个阶段的温度为34.5℃、湿度为60%,发花24h;第四个阶段的温度为27℃、湿度为70%,发花270h。优选地,步骤s7的混配中,红条茶与橘红的重量比为14:1。本发明还提供了采用上述的制作工艺制备得到的具有止咳与降血糖功效的金花橘红养生红茶。与现有技术相比,本发明的有益效果是:本发明将红条茶与橘红堆放在一起,经过汽蒸、渥堆、第二次渥堆、第二次汽蒸、四阶段发花、烘干和混配后制备得到一种金花橘红养生红茶,该茶产品不仅发花效果好,金花茂盛且分布均匀,橘红果香、茶香和菌花香融合充分且融洽,香气高长,滋味醇厚且滑口,回甘好,同时又提高了红茶和橘红的功效,兼具止咳与降血糖的功效;该产品不仅可丰富市场上金花茶的品类,顺应消费者的多元化需求,还可满足消费者对茶产品健康功效的需求;该产品还可带动茶叶的消费,缓解茶叶“供过于求”的产业问题。附图说明图1为金花橘红养生红茶的外观图(a为金花橘红的外观;b为金花红茶的外观);图2为金花橘红养生红茶的外观放大图(a为金花橘红的外观;b为金花红茶的外观);图3为显微镜下的金花菌形态;图4为金花橘红养生红茶的汤色和叶底(a为汤色;b为叶底);图5为不同药物处理的咳嗽小鼠的潜伏期和咳嗽次数(a为潜伏期;b为咳嗽次数);图6为金花橘红养生红茶和阿卡波糖对α-葡萄糖苷酶的抑制活性(a为金花橘红养生红茶和阿卡波糖对α-葡萄糖苷酶活性抑制率的ic50;b为金花橘红养生红茶对α-葡萄糖苷酶活性抑制率的ic50;c为阿卡波糖对α-葡萄糖苷酶活性抑制率的ic50)。具体实施方式下面对本发明的具体实施方式作进一步说明。在此需要说明的是,对于这些实施方式的说明用于帮助理解本发明,但并不构成对本发明的限定。此外,下面所描述的本发明各个实施方式中所涉及的技术特征只要彼此之间未构成冲突就可以相互组合。下述实施例中的实验方法,如无特殊说明,均为常规方法,下述实施例中所用的试验材料,如无特殊说明,均为可通过常规的商业途径购买得到的。实施例1金花橘红养生红茶的制作具体制作步骤包括以下步骤:(1)红条茶的制作:采摘一芽二叶标准的英红九号红茶茶青,按照红茶加工工艺制成红条茶;具体方法如下:①萎凋:将新鲜茶青平铺于室温下萎凋16-24小时,使茶叶的含水量控制在59-61%;②揉捻:萎凋后分两次进行揉捻造形。第一次:空揉15分钟+轻压8分钟+松2分钟+中压8分钟+松2分钟+重压8分钟+松2分钟;第二次:轻揉10分钟+轻压8分钟+松2分钟+中压8分钟+松2分钟+重压8分钟+松2分钟;③解块:把揉好的茶叶投入解块机上,将块状和团状的茶解散,筛出碎末,有利于发酵和烘干;④发酵:把解块好的茶放在发酵筐中发酵,发酵的温度控制在26℃,发酵时间为8小时;⑤干燥:分毛火、足火再次烘干。第一次毛火干燥温度为117℃,茶摊放厚度为1.0㎝,烘干机运行速度为快档;第二次足火温度为102℃,茶摊放厚度为1.5㎝,烘干机运行速度为中档,烘至茶叶的含水量控制在6-7%即可。(2)汽蒸:将红条茶与化州橘红(纱布包着)堆放在一起进行汽蒸灭菌,时间持续15s(秒),气蒸温度为145℃,压力为0.07mpa,橘红和茶叶含水量为13.5%;(3)渥堆:加纯净水将汽蒸后的红条茶与橘红的含水量调整为17.5%,然后进行渥堆,渥堆厚度为40cm,湿度为85%,温度为27℃,持续时间为7.5h(小时);(4)第二次渥堆:将步骤(3)中的红条茶与橘红分别翻堆,堆放在一起进行第二次渥堆,条件同步骤(3),持续时间为5.5h(小时);(5)第二次汽蒸:将红条茶与橘红(用牛皮纸或纱布包着)堆放在一起进行第二次汽蒸:温度为192.5℃,时间为45s;(6)四阶段发花:将二次汽蒸后的红条茶与橘红(用牛皮纸或纱布包着)的含水量调至26%,然后放入烘房内进行发花,发花分四个阶段:第一个阶段的温度为28.5℃、湿度为72.5%,发花48h;第二个阶段的温度为26.5℃、湿度为62.5%,发花48h;第三个阶段的温度为34.5℃、湿度为60%,发花24h;第四个阶段的温度为27℃、湿度为70%,发花270h;(7)烘干:发花后将红条茶与橘红置于29℃下烘45h,随后每天升高温度3℃,直至46.5℃,最后恒温下将茶叶和橘红胚料烘至水分含量为11%;(8)混配:按照红条茶与橘红的重量比为14:1的比例将烘干后的红条茶和橘红混配成金花橘红养生红茶。对上述金花橘红养生红茶进行观察可知,红茶和橘红都身披金花,金花茂盛且分布均匀(如图1-3所示);经感官审评【参照国家标准茶叶感官审评方法(gb/t23776-2018)】,该金花橘红养生红茶的橘红果香、茶香和菌花香融合充分且融洽,香气高长,滋味醇厚且滑口,回甘好,且汤色红浓,叶底乌亮(红浓、叶底如图4所示)。实施例2金花橘红养生红茶的制作具体制作步骤包括以下步骤:(1)红条茶的制作:采摘一芽二叶标准的英红九号红茶茶青,按照实施例1中红茶加工工艺制成红条茶;(2)汽蒸:将红条茶与化州橘红(用牛皮纸或纱布包着)堆放在一起进行汽蒸灭菌,时间持续10s(秒),气蒸温度为140℃,压力为0.06mpa,茶叶含水量为13%;(3)渥堆:加纯净水将汽蒸后的红条茶与橘红的含水量调整为17%,然后进行渥堆,渥堆厚度为30cm,湿度为80%,温度为26℃,持续时间为7h(小时);(4)第二次渥堆:将步骤(3)中的红条茶与橘红分别翻堆,堆放在一起进行第二次渥堆,条件同步骤(3),持续时间为5h(小时);(5)第二次汽蒸:将红条茶与橘红(用牛皮纸或纱布包着)堆放在一起进行第二次汽蒸:温度为190℃,时间为40s;(6)四阶段发花:将二次汽蒸后的红条茶与橘红(用牛皮纸或纱布包着)的含水量调至24%,然后放入烘房内进行发花,发花分四个阶段:第一个阶段的温度为28℃、湿度为70%,发花48h;第二个阶段的温度为26℃、湿度为60%,发花48h;第三个阶段的温度为34℃、湿度为55%,发花24h;第四个阶段的温度为26℃、湿度为65%,发花240h;(7)烘干:发花后将红条茶与橘红置于28℃下烘50h,随后每天升高温度3℃,直至45℃,最后恒温下将茶叶和橘红胚料烘至水分含量为9%;(8)混配:按照红条茶与橘红的重量比为16:1的比例将烘干后的红条茶和橘红混配成金花橘红养生红茶。对上述金花橘红养生红茶进行观察可知,红茶和橘红都身披金花,金花较茂盛且分布均匀;经感官审评【参照国家标准茶叶感官审评方法(gb/t23776-2018)】,该金花橘红养生红茶的橘红果香、茶香和菌花香融合较充分,香气高长,滋味较醇厚且滑口,回甘较好,且汤色黄红,叶底较乌亮。实施例3金花橘红养生红茶的制作具体制作步骤包括以下步骤:(1)红条茶的制作:采摘一芽二叶标准的英红九号红茶茶青,按照实施例如中红茶加工工艺制成红条茶;(2)汽蒸:将红条茶与化州橘红(用纱布包着)堆放在一起进行汽蒸灭菌,时间持续20s(秒),气蒸温度为150℃,压力为0.08mpa,茶叶含水量为14%;(3)渥堆:加纯净水将汽蒸后的红条茶与橘红的含水量调整为18%,然后进行渥堆,渥堆厚度为50cm,湿度为90%,温度为28℃,持续时间为8h(小时);(4)第二次渥堆:将步骤(3)中的红条茶与橘红分别翻堆,堆放在一起进行第二次渥堆,条件同步骤(3),持续时间为6h(小时);(5)第二次汽蒸:将红条茶与橘红(用纱布包着)堆放在一起进行第二次汽蒸:温度为195℃,时间为50s;(6)四阶段发花:将二次汽蒸后的红条茶与橘红(用纱布包着)的含水量调至28%,然后放入烘房内进行发花,发花分四个阶段:第一个阶段的温度为29℃、湿度为75%,发花48h;第二个阶段的温度为27℃、湿度为65%,发花48h;第三个阶段的温度为35℃、湿度为65%,发花24h;第四个阶段的温度为28℃、湿度为75%,发花300h;(7)烘干:发花后将红条茶与橘红置于30℃下烘40h,随后每天升高温度3℃,直至48℃,最后恒温下将茶叶和橘红胚料烘至水分含量为13%;(8)混配:按照红条茶与橘红的重量比为10:1的比例将烘干后的红条茶和橘红混配成金花橘红养生红茶。对上述金花橘红养生红茶进行观察可知,红茶和橘红都身披金花,金花较茂盛且分布均匀;经感官审评【参照国家标准茶叶感官审评方法(gb/t23776-2018)】,该金花橘红养生红茶的橘红果香、茶香和菌花香融合较充分,香气高长,滋味较醇厚且滑口,回甘较好,且汤色黄红,叶底较乌亮。对比例1金花橘红养生红茶的制作具体制作方法同实施例1,不同之处在于:对比例1步骤(6)中的发花只有一个阶段,即发花的温度为34.5℃、湿度为72.5%,发花390h。对上述金花橘红养生红茶进行观察可知,红茶和橘红都只有少量金花,浓度很低;经感官审评【参照国家标准茶叶感官审评方法(gb/t23776-2018)】,该金花橘红养生红茶只有淡淡的菌花香,滋味偏涩,无回甘,且汤色暗红。对比例2金花橘红养生红茶的制作具体制作方法同实施例1,不同之处在于:对比例2步骤(6)中的发花只有二个阶段,即发花分二个阶段:第一个阶段的温度为34.5℃、湿度为60%,发花24h;第二个阶段的温度为27℃、湿度为70%,发花366h。对上述金花橘红养生红茶进行观察可知,红茶和橘红都只有少量金花,浓度低;经感官审评【参照国家标准茶叶感官审评方法(gb/t23776-2018)】,该金花橘红养生红茶只有淡淡的菌花香,滋味较醇和,回甘差,且汤色暗红。对比例3金花橘红养生红茶的制作具体制作方法同实施例1,不同之处在于:对比例3步骤(6)中的发花只有三个阶段,即发花分三个阶段:发花分四个阶段:第一个阶段的温度为28.5℃、湿度为72.5%,发花96h;第二个阶段的温度为34.5℃、湿度为60%,发花24h;第三个阶段的温度为27℃、湿度为70%,发花270h;对上述金花橘红养生红茶进行观察可知,红茶和橘红都有较多金花,但不均匀,且浓度不高;经感官审评【参照国家标准茶叶感官审评方法(gb/t23776-2018)】,该金花橘红养生红茶虽有较明显的菌花香,滋味不醇厚,带涩味,回甘差,且汤色偏暗。对比例4金花橘红养生红茶的制作具体制作方法同实施例1,不同之处在于:对比例4缺少步骤(5)的第二次汽蒸工艺。对上述金花橘红养生红茶进行观察可知,红茶和橘红都有较多金花,但不均匀,且浓度不高;经感官审评【参照国家标准茶叶感官审评方法(gb/t23776-2018)】,该金花橘红养生红茶虽有较明显的菌花香,滋味较醇和有杂味,无回甘,且汤色暗红。实验例1生化成分分析以实施例1的金花橘红养生红茶为例,根据以下方法,对金花橘红养生红茶的主要生化成分进行检测:1)含水量检测:参照(gb5009.3-2016,《食品安全国家标准食品中水分的测定》,103℃恒定法);2)水浸出物检测:参照gb/t8305-2013,《茶水浸出物》;3)可溶性糖检测:采用硫酸-蒽酮比色定量法;4)茶多酚检测:参照(gb/t8313-2018,《茶叶中茶多酚和儿茶素类含量的检测方法》,福林酚试剂法);5)游离氨基酸检测:参照(gb/t8314-2013,《茶游离氨基酸总量的测定》,水合茚三酮比色法);6)黄酮苷类检测:采用三氯化铝比色法;7)其余成分检测方法:采用高效液相色谱法:高效液相色谱法:采用色谱柱phenomenexc18柱(150×4.6mm,5μm);流动相包括a相和b相,a相由0.5%乙酸、1%乙腈和2%甲醇组成,b相由0.5%乙酸、10%乙腈和20%甲醇组成;洗脱过程:0-30min,a相从72.5%降至20%,同时b相由27.5%增至80%;30-35min,a相由20%升至72.5%,b相从80%减到27.5%,然后,持续至40min;进样量为10μl,流速为1.0ml/min,测定温度为28℃,测定波长为280nm,以外标法按峰面积进行定量分析。如表1和表2所示,金花橘红养生红茶各生化成分(儿茶素外)的含量与未发花的英红九号红茶的生化成分相比,稍有降低,儿茶素以非酯型儿茶素为主,占总儿茶素的91%以上;但英九红茶的儿茶素以酯型儿茶素为主,约占总儿茶素的65%,这可能发花过程中儿茶素间发生转换了。表1金花橘红养生红茶的生化成分含量表检测项目含量检测项目含量mg/g含水量%11.30±0.05egc(表没食子儿茶素)2.04±0.20水浸出物%31.44±0.57c(儿茶素)0.61±0.01茶多酚%8.90±0.32ec(表儿茶素)2.62±0.04游离氨基酸%1.14±0.06egcg(表没食子儿茶素没食子酸酯)0.97±0.02酚氨比7.37±0.29gcg(没食子儿茶素没食子酸酯)0.57±0.02可溶性糖%7.11±0.03ecg(表儿茶素没食子酸酯)3.60±0.17黄酮苷类%1.27±0.03cg(儿茶素没食子酸酯)1.45±0.09咖啡碱mg/g45.12±1.44酯型儿茶素6.70±0.26ga(没食子酸)mg/g8.76±0.12非酯型儿茶素75.87±2.11gc(没食子儿茶素)mg/g70.61±2.26总儿茶素82.57±2.37表2英红九号红茶的生化成分含量表检测项目含量mg/g检测项目含量mg/g含水量%11.30±0.05egc(表没食子儿茶素)5.92±0.04水浸出物%32.44±0.57c(儿茶素)1.22±0.01茶多酚%9.22±0.02ec(表儿茶素)2.31±0.02游离氨基酸%2.24±0.06egcg(表没食子儿茶素没食子酸酯)1.31±0.02酚氨比4.12±0.12gcg(没食子儿茶素没食子酸酯)0.40±0.01可溶性糖%7.49±0.04ecg(表儿茶素没食子酸酯)0.30±0.02黄酮苷类%1.60±0.02cg(儿茶素没食子酸酯)0.7±0.04caff(咖啡碱)mg/g46.23±0.04酯型儿茶素12.47±0.11ga(没食子酸)mg/g9.56±0.22非酯型儿茶素6.70±0.32gc(没食子儿茶素)mg/g3.33±0.26总儿茶素19.17±0.43实验例2止咳实验以实施例1的金花橘红养生红茶为例,验证金花橘红养生红茶的止咳功效:(1)冻干粉的制备:以实施例1的金花橘红养生红茶为例,取适量茶叶磨碎,以茶:水=1:20的重量比加入沸水,90℃浸提30min,趁热过滤,重复浸提3次,合并茶汤并旋蒸至原体积的1/10,冷冻干燥后即得金花橘红养生红茶冻干粉。(2)实验分组及剂量:对照组(纯水)、阳药组(枸橼酸喷托维林片,25mg/kg)、英九金花橘红红茶组(800mg/kg)、化橘红皮组(53mg/kg)、英九红茶组(800mg/kg)共5组。(3)咳嗽模型小鼠的建立及筛选:将c57小鼠放入倒扣的2000ml烧杯内,再将重量、形状基本一致的棉球放入直径为5cm的表面皿中,向棉球中注入1.0ml浓氨水,迅速将表面皿放入2000ml烧杯内,从放入浓氨水开始计时,以张大口或小口伴有咳嗽声、腹肌收缩为准,记录小鼠的咳嗽潜伏期和5min内的咳嗽次数(2.5min烧杯内和2.5min烧杯外)。将5min内咳嗽次数少于20次及多于160次者或潜伏期小于15s及大于50s者或动物死亡、动物状态不佳、动物反应异常剧烈等予以剔除。(4)药物干涉及结果统计:筛选获得c57小鼠30只,雌雄各半,分成5组,每组6只,按10ml/kg(0.1ml/10g)的剂量灌胃给予相应药液,连续给药3天,末次给药1h后,按上述方法测定小鼠的咳嗽潜伏期和5min内的咳嗽次数。图5的数据表明,金花橘红养生红茶在延长咳嗽潜伏期和降低咳嗽次数方面都具有明显的效果,且与对照、阳性药物组都具有显著差异,其止咳效果优于阳性药物,说明金花橘红养生红茶具有很好的止咳效果。实验例3体外降血糖实验以实施例1的金花橘红养生红茶为例,验证金花橘红养生红茶的体外降血糖实验:(1)确立α-葡萄糖苷酶活性反应体系:实验分为空白调零组、阴性反应组、样品对照组(阿卡波糖)和样品反应组(金花橘红养生红茶冻干粉,制作同实验例2),各反应物按表2中的剂量在96孔细胞培养板中进行加样,每组3个平行孔,最终反应体积为160μl。加样时,先依次加入pbs缓冲液、α-葡萄糖苷酶和样品(见表2),混合均匀,于37℃水浴保温5min,结束后取出,并加入底物pnpg充分混匀,于37℃水浴反应15min,结束后再加入80μl0.2mol/l的na2co3溶液中止反应。由于pnpg在α-葡萄糖苷酶的作用下能水解产生葡萄糖和pnp,pnp在405nm处有最大吸收,在酶标仪中测定其吸光度,便可计算出各样品对α-葡萄糖苷酶的抑制率及ic50值。抑制百分率%=[1-(样品反应od值-样品对照od值)/(阴性反应od值-空白调零od值)]×100%。表2α-葡萄糖苷酶活性反应体系中各反应物的剂量(2)检验体系的可行性分析:以阿卡波糖为阳性药物,以纯水为溶解或稀释溶剂,将阿卡波糖稀释为0.5、0.75、1.5、2.25、4.5mg/ml,分别做两次α-葡萄糖苷酶活性实验,在酶标仪中用405nm波长测定od值,再用公式计算出抑制率,通过t检验法检验两次结果的数据,p>0.05则表示没有显著性差异,说反应体系稳定。通过分析发现,本发明以纯水为溶剂的反应体系成立。(3)实验结果:以金花橘红养生红茶的冻干粉为原料,在体外检测α-葡萄糖苷酶活性,结果表明,金花橘红养生红茶对α-葡萄糖苷酶活性抑制率的ic50为0.2255mg/ml,而阿卡波糖对α-葡萄糖苷酶活性抑制率的ic50为2.114mg/ml,说明金花橘红养生红茶的体外降血糖活性强于阿卡波糖的(详见图6)。以上对本发明的实施方式作了详细说明,但本发明不限于所描述的实施方式。对于本领域的技术人员而言,在不脱离本发明原理和精神的情况下,对这些实施方式进行多种变化、修改、替换和变型,仍落入本发明的保护范围内。当前第1页12
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