本发明属于保健食品技术领域，更具体地，涉及一种灵芝猴头菇口服液及其制备方法。
背景技术：
灵芝，外形呈伞状，菌盖肾形、半圆形或近圆形，为多孔菌科真菌灵芝的子实体，是我国著名的食药两用真菌之一。现代医学证明，灵芝中含有多种对人体有明显作用效果的生理调节因子，其中最重要的是灵芝多糖，它具有明显的抗肿瘤、抗损伤、促进受损肝细胞恢复和改善某些老年疾病等作用。
猴头菇，又称猴头菌、猴头、猴菇、猴头蘑，是珍贵的食药用菌。猴头菇肉质鲜美，营养丰富，有“山珍”之称，与熊掌、燕窝和鱼翅并列为四大名菜。猴头菇富含多种有益菌多糖和人体必需氨基酸以及微量元素，具有广泛的药用价值。猴头菇的生物活性组分主要有多糖、低聚糖、蛋白质、脂肪酸、多种维生素等，其中猴头菇多糖是最重要的成分，具有以下作用：加强机体免疫力、抗肿瘤、抗氧化、抗突变、减缓衰老、降血糖、抗萎靡、保肝、治疗慢性胃炎胃溃疡等。
化学性肝损伤，是由化学性肝毒性物质所造成的肝损伤。这些化学物质包括酒精、环境中的化学毒物及某些药物。作为人体的重要解毒器官的肝脏，具有肝动脉和肝静脉双重血液供应。化学物质可通过胃肠道门静脉或体循环进入肝脏进行转化，因此肝脏容易受到化学物中的毒性物质损害。大自然和人类工业生产过程中均存在一些对肝脏有毒性的物质，称为"亲肝毒物"，这些毒物在人群中普遍易感，潜伏期短，病变的过程与感染的剂量直接相关，可引起肝脏不同程度的肝细胞坏死、脂肪变形、肝硬化和肝癌。因此，需十分警惕化学性肝中毒的发生。
通过中草药的生物活性成分，可以制成对化学性肝损伤有保护作用的保健产品。其原料上可以选用灵芝和猴头菇。
但是现有的灵芝猴头菇口服液中的有效成分并不能高效提取，导致出现有效成分含量偏低、品质不高的问题。
综上所述，如何设计一种灵芝猴头菇口服液，能够提高其有效成分含量和品质，是目前急需解决的问题。
技术实现要素：
本发明的目的在于为了解决上述技术问题，而提供一种灵芝猴头菇口服液，不仅能够提高灵芝猴头菇口服液中多糖的含量，还将葛根优化提取工艺后加入口服液中，提高了口服液中葛根素的含量，能够对化学性肝损伤有保护作用。
本发明通过以下技术方案来实现上述目的，一种灵芝猴头菇口服液，以质量百分数计包括灵芝和猴头菇发酵混合物20-30%、葛根10-20%、枳椇子5-15%、蔗糖8-12%、甜菊糖苷0.08-0.15%、山梨酸钾0.03-0.06%、纯化水余量。
进一步地，灵芝和猴头菇发酵混合物的制备方法为：
（1）在无菌条件下，分别将灵芝和猴头菇的母种菌丝体的斜面切成3-6mm的菌丝块，转接于斜面培养基，在25-28℃避光培养6-8天，待菌丝长满整个斜面且茁壮茂密时，分别得灵芝斜面菌种和猴头菇斜面菌种，并置于2-5℃冰箱保藏；
（2）分别将灵芝斜面菌种和猴头菇斜面菌种切成1-3mm的菌丝块后，混合均匀，然后将混合菌丝块放入装有50-60ml种子液培养基的三角瓶中，在24-26℃、180-200r/min摇床的条件下培养5-6天，得灵芝和猴头菇种子液；
（3）分别取灵芝和猴头菇的子实体用水洗净后，切成8-10mm碎块，置于2-4倍量的淀粉中搅拌均匀，然后用筛子去掉多余淀粉，80-90℃干燥1-2h；
（4）将步骤（3）得到的产物，放入装有70-80ml发酵液培养基的三角瓶中，在28-30℃、100-150r/min摇床的条件下培养1-2天，然后再将步骤（2）得到的灵芝和猴头菇种子液倒入三角瓶中，降温至23-25℃，在100-120r/min摇床的条件下培养4-5天，然后抽滤，分别收集滤渣和滤液一；
（5）将步骤（4）得到的滤渣用清水洗涤后烘干，置于500-800r/min的粉碎机中粉碎，过160-200目筛，然后加入10-20倍量水煎煮3-5次，每次30min，冷却后过滤，合并所有滤液得滤液二；
（6）将滤液一和滤液二混合均匀，加入1-2倍量的无水乙醇，静置12-18h后，放入离心机中，在2-5℃、5000-6000r/min的条件下离心20-30min，收集上清液，最后在70-80℃、真空度(-0.05)～(-0.07)mpa减压蒸馏，将液体浓缩至相对密度为1.1-1.2，即得灵芝和猴头菇发酵混合物成品。
进一步地，灵芝与猴头菇的母种菌丝体的质量比为1：(1-2)，灵芝与猴头菇的子实体的质量比为1：(2-3)，灵芝、猴头菇的母种菌丝体总质量：灵芝、猴头菇的子实体总质量=1：(1-1.2)。
进一步地，斜面培养基为pda培养基。
进一步地，种子液培养基为：清水500ml、葡萄糖15g、蛋白胨3.0g、kh2po41.0g、mgso41.0g、vb10.1g、酵母膏2g。
进一步地，发酵液培养基为：清水500ml、葡萄糖10g、蛋白胨1.0g、kh2po40.8g、mgso41.0g、vb10.1g、酵母粉1.0g。
进一步地，葛根的提取方法为：
a、将瓜尔胶在常温下溶解于2-3倍量的水中，然后同时加入过氧化钠和无水醋酸钠，搅拌均匀后静置30-60min，得多孔瓜尔胶凝胶；
b、按照配方称取葛根洗净烘干置于300-500r/min的粉碎机中粉碎，过30-60目筛，得葛根粉；
c、取步骤b得到的葛根粉，加5-8倍量水在60-70℃煎煮20-30min后，加入步骤a得到的多孔瓜尔胶凝胶的一半，然后继续煎煮1-2h，过滤得滤渣一和滤液一，将滤渣一中的凝胶和葛根粉滤渣分离并收集；
d、取步骤c得到的葛根粉滤渣，加10-15倍量水在50-60℃煎煮30-60min后，加入步骤a得到的多孔瓜尔胶凝胶的剩余一半，继续煎煮40-60min，过滤得滤渣二和滤液二，将滤渣二中的凝胶和葛根粉滤渣分离，收集凝胶；
e、在常温下，将步骤c和d收集到的凝胶混合后，加入2-4倍量、ph为3-3.5的水溶液，然后置于1000-1500r/min的高速剪切机中剪切30-60min，抽滤除去不溶物，得滤液三；
f、往滤液三中加入质量比为（1-3）：1的半乳糖酶和甘露糖酶，搅拌1-2h后，经0.8-1.2nm的超滤膜除去游离单糖，得截留物四；
g、将滤液一、二和截留物四混合后，在40-60℃、真空度(-0.04)～(-0.08)mpa减压浓缩至相对密度为1.0-1.1，即得葛根提取液。
进一步地，瓜尔胶、过氧化钠、无水醋酸钠的质量比为1：(0.08-0.12)：(0.1-0.3)。
一种灵芝猴头菇口服液的制备方法，包括如下步骤：
s1、按照配方称取枳椇子，洗净后烘干，置于300-400r/min的粉碎机中粉碎，过100-120目筛，然后加8-12倍量水煎煮2-4次，每次1-2h，抽滤，合并滤液；
s2、按照配方量，将蔗糖、甜菊糖苷、山梨酸钾在2-4倍量纯水中溶解混合，然后加入葛根的提取液、灵芝和猴头菇发酵混合物搅拌均匀；
s3、往步骤s1中得到的滤液中添加步骤s2得到的溶液，搅拌均匀，然后在50-60℃、真空度(-0.07)～(-0.09)mpa减压蒸馏，将液体浓缩至相对密度为1.06-1.08，得浓缩液；
s4、将步骤s3得到的浓缩液放至室温，加入无水乙醇使含醇量达30%，静置过夜，过滤，滤液回收乙醇，然后在40-50℃、真空度(-0.09)～(-0.12)mpa减压蒸馏，将液体浓缩至相对密度为浓缩至相对密度为1.13-1.18，得清膏；
s5、将步骤s4得到的清膏加入纯水定容至配制量，搅拌均匀，在2-5℃冷藏24h后过滤，取滤液按照出厂规格灌装成瓶装口服液，然后在110-120℃灭菌20-40min，即得灵芝猴头菇口服液成品。
一种灵芝猴头菇口服液在对化学性肝损伤起辅助保护功能的保健食品上的应用。
本发明的有益效果在于：
（1）本发明的灵芝猴头菇口服液在制备过程中，通过优化配方及其工艺，能够整体提高灵芝猴头菇口服液中有效成分含量；
（2）本发明在制备灵芝和猴头菇发酵混合物时，将灵芝和猴头菇混合进行液体深层发酵，且在原料上选用母种菌丝体和子实体相结合，从而提高灵芝和猴头菇发酵物的活性成分含量；
（3）本发明制备灵芝和猴头菇发酵混合物时，在发酵液培养时加入灵芝和猴头菇子实体，使得菌丝体在子实体表面聚集生长，有利于菌丝体中活性成分的形成，以及子实体中有效成分的析出；
（4）本发明在制备灵芝和猴头菇发酵混合物时，通过在灵芝和猴头菇子实体的表面进行淀粉处理，不仅给菌丝体提供了适宜环境的生长面，还使得菌丝体的生长更加稳固不易损坏，有利于菌丝体的生长；
（5）本发明在提取葛根时，通过制备多孔瓜尔胶凝胶，然后将其加入水中参与葛根水提过程中，由于凝胶的多孔外观以及瓜尔胶中含羟基，使得葛根粉在水提过程中，其有效成分葛根素（含羟基）会被多孔瓜尔胶凝胶吸附，如此水提液中的葛根素浓度维持在较小的水平，使得葛根细胞内外的浓度差保持在较高水平，促进了葛根细胞内葛根素的渗出，从而提高葛根素得率；
（6）由于瓜尔胶能够形成可逆凝胶，因此本发明还设计了在提取完毕后将瓜尔胶除去，瓜尔胶属于多糖类化合物，主要含有半乳糖和甘露糖，本发明采用半乳糖酶和甘露糖酶将瓜尔胶酶解成单糖小分子，然后再用超滤膜除去小分子单糖，最终达到除去瓜尔胶的目的；
（7）本发明采用灵芝、葛根、枳椇子、猴头菇为主要原料，制成的灵芝猴头菇口服液，可应用于对化学性肝损伤有辅助保护功能的保健食品。
具体实施方式
下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
本实施例提供了一种灵芝猴头菇口服液，包括灵芝和猴头菇发酵混合物200g、葛根200g、枳椇子80g、蔗糖120g、甜菊糖苷0.8g、山梨酸钾0.6g、纯化水398.6g。
本实施例还提供了一种灵芝猴头菇口服液的制备方法，包括如下步骤：
s1、按照配方称取枳椇子，洗净后烘干，置于300r/min的粉碎机中粉碎，过100目筛，然后加8倍量水煎煮2次，每次1h，抽滤，合并滤液；
s2、按照配方量，将蔗糖、甜菊糖苷、山梨酸钾在2倍量纯水中溶解混合，然后加入葛根的提取液、灵芝和猴头菇发酵混合物搅拌均匀；
s3、往步骤s1中得到的滤液中添加步骤s2得到的溶液，搅拌均匀，然后在50℃、真空度-0.07mpa减压蒸馏，将液体浓缩至相对密度为1.06，得浓缩液；
s4、将步骤s3得到的浓缩液放至室温，加入无水乙醇使含醇量达30%，静置过夜，过滤，滤液回收乙醇，然后在40℃、真空度-0.09mpa减压蒸馏，将液体浓缩至相对密度为浓缩至相对密度为1.13，得清膏；
s5、将步骤s4得到的清膏加入纯水定容至1000ml，搅拌均匀，在2℃冷藏24h后过滤，取滤液按照10ml/支灌装成瓶装口服液，然后在110℃灭菌20min，即得灵芝猴头菇口服液成品。
实施例2
在实施例1的基础上，本实施例还提供了一种灵芝和猴头菇发酵混合物的制备方法，具体为：
（1）在无菌条件下，分别将灵芝和猴头菇的母种菌丝体的斜面切成3mm的菌丝块，转接于斜面培养基，在25℃避光培养6天，待菌丝长满整个斜面且茁壮茂密时，分别得灵芝斜面菌种和猴头菇斜面菌种，并置于2℃冰箱保藏；
（2）分别将灵芝斜面菌种和猴头菇斜面菌种切成1mm的菌丝块后，混合均匀，然后将混合菌丝块放入装有50ml种子液培养基的三角瓶中，在24℃、180r/min摇床的条件下培养5天，得灵芝和猴头菇种子液；
（3）分别取灵芝和猴头菇的子实体用水洗净后，切成8mm碎块，置于2倍量的淀粉中搅拌均匀，然后用筛子去掉多余淀粉，80℃干燥1h；
（4）将步骤（3）得到的产物，放入装有70ml发酵液培养基的三角瓶中，在28℃、100r/min摇床的条件下培养1天，然后再将步骤（2）得到的灵芝和猴头菇种子液倒入三角瓶中，降温至23℃，在100r/min摇床的条件下培养4天，然后抽滤，分别收集滤渣和滤液一；
（5）将步骤（4）得到的滤渣用清水洗涤后烘干，置于500r/min的粉碎机中粉碎，过160目筛，然后加入10倍量水煎煮3次，每次30min，冷却后过滤，合并所有滤液得滤液二；
（6）将滤液一和滤液二混合均匀，加入1倍量的无水乙醇，静置12h后，放入离心机中，在2℃、5000r/min的条件下离心20min，收集上清液，最后在70℃、真空度-0.05mpa减压蒸馏，将液体浓缩至相对密度为1.1，即得灵芝和猴头菇发酵混合物成品。
灵芝与猴头菇的母种菌丝体的质量比为1：1，灵芝与猴头菇的子实体的质量比为1：2，灵芝、猴头菇的母种菌丝体总质量：灵芝、猴头菇的子实体总质量=1：1。
斜面培养基为pda培养基。
种子液培养基为：清水500ml、葡萄糖15g、蛋白胨3.0g、kh2po41.0g、mgso41.0g、vb10.1g、酵母膏2g。
发酵液培养基为：清水500ml、葡萄糖10g、蛋白胨1.0g、kh2po40.8g、mgso41.0g、vb10.1g、酵母粉1.0g。
其余与实施例1相同。
实施例3
在实施例1的基础上，本实施例还提供了一种葛根的提取方法，具体为：
a、将瓜尔胶在常温下溶解于2倍量的水中，然后同时加入过氧化钠和无水醋酸钠，搅拌均匀后静置30min，得多孔瓜尔胶凝胶；
b、按照配方称取葛根洗净烘干置于300r/min的粉碎机中粉碎，过30目筛，得葛根粉；
c、取步骤b得到的葛根粉，加5倍量水在60℃煎煮20min后，加入步骤a得到的多孔瓜尔胶凝胶的一半，然后继续煎煮1h，过滤得滤渣一和滤液一，将滤渣一中的凝胶和葛根粉滤渣分离并收集；
d、取步骤c得到的葛根粉滤渣，加10倍量水在50℃煎煮30min后，加入步骤a得到的多孔瓜尔胶凝胶的剩余一半，继续煎煮40min，过滤得滤渣二和滤液二，将滤渣二中的凝胶和葛根粉滤渣分离，收集凝胶；
e、在常温下，将步骤c和d收集到的凝胶混合后，加入2倍量、ph为3的盐酸水溶液，然后置于1000r/min的高速剪切机中剪切30min，抽滤除去不溶物，得滤液三；
f、往滤液三中加入质量比为1：1的半乳糖酶和甘露糖酶，搅拌1h后，经0.8nm的超滤膜除去游离单糖，得截留物四；
g、将滤液一、二和截留物四混合后，在40℃、真空度-0.04mpa减压浓缩至相对密度为1.0，即得葛根提取液。
瓜尔胶、过氧化钠、无水醋酸钠的质量比为1：0.08：0.1。
其余与实施例1相同。
实施例4
本实施例提供了一种灵芝猴头菇口服液，包括灵芝和猴头菇发酵混合物200g、葛根200g、枳椇子80g、蔗糖120g、甜菊糖苷0.8g、山梨酸钾0.6g、纯化水余量。
灵芝和猴头菇发酵混合物的制备方法为：
（1）在无菌条件下，分别将灵芝和猴头菇的母种菌丝体的斜面切成3mm的菌丝块，转接于斜面培养基，在25℃避光培养6天，待菌丝长满整个斜面且茁壮茂密时，分别得灵芝斜面菌种和猴头菇斜面菌种，并置于2℃冰箱保藏；
（2）分别将灵芝斜面菌种和猴头菇斜面菌种切成1mm的菌丝块后，混合均匀，然后将混合菌丝块放入装有50ml种子液培养基的三角瓶中，在24℃、180r/min摇床的条件下培养5天，得灵芝和猴头菇种子液；
（3）分别取灵芝和猴头菇的子实体用水洗净后，切成8mm碎块，置于2倍量的淀粉中搅拌均匀，然后用筛子去掉多余淀粉，80℃干燥1h；
（4）将步骤（3）得到的产物，放入装有70ml发酵液培养基的三角瓶中，在28℃、100r/min摇床的条件下培养1天，然后再将步骤（2）得到的灵芝和猴头菇种子液倒入三角瓶中，降温至23℃，在100r/min摇床的条件下培养4天，然后抽滤，分别收集滤渣和滤液一；
（5）将步骤（4）得到的滤渣用清水洗涤后烘干，置于500r/min的粉碎机中粉碎，过160目筛，然后加入10倍量水煎煮3次，每次30min，冷却后过滤，合并所有滤液得滤液二；
（6）将滤液一和滤液二混合均匀，加入1倍量的无水乙醇，静置12h后，放入离心机中，在2℃、5000r/min的条件下离心20min，收集上清液，最后在70℃、真空度-0.05mpa减压蒸馏，将液体浓缩至相对密度为1.1，即得灵芝和猴头菇发酵混合物成品。
灵芝与猴头菇的母种菌丝体的质量比为1：1，灵芝与猴头菇的子实体的质量比为1：2，灵芝、猴头菇的母种菌丝体总质量：灵芝、猴头菇的子实体总质量=1：1。
斜面培养基为pda培养基。
种子液培养基为：清水500ml、葡萄糖15g、蛋白胨3.0g、kh2po41.0g、mgso41.0g、vb10.1g、酵母膏2g。
发酵液培养基为：清水500ml、葡萄糖10g、蛋白胨1.0g、kh2po40.8g、mgso41.0g、vb10.1g、酵母粉1.0g。
葛根的提取方法为：
a、将瓜尔胶在常温下溶解于2倍量的水中，然后同时加入过氧化钠和无水醋酸钠，搅拌均匀后静置30min，得多孔瓜尔胶凝胶；
b、按照配方称取葛根洗净烘干置于300r/min的粉碎机中粉碎，过30目筛，得葛根粉；
c、取步骤b得到的葛根粉，加5倍量水在60℃煎煮20min后，加入步骤a得到的多孔瓜尔胶凝胶的一半，然后继续煎煮1h，过滤得滤渣一和滤液一，将滤渣一中的凝胶和葛根粉滤渣分离并收集；
d、取步骤c得到的葛根粉滤渣，加10倍量水在50℃煎煮30min后，加入步骤a得到的多孔瓜尔胶凝胶的剩余一半，继续煎煮40min，过滤得滤渣二和滤液二，将滤渣二中的凝胶和葛根粉滤渣分离，收集凝胶；
e、在常温下，将步骤c和d收集到的凝胶混合后，加入2倍量、ph为3的盐酸水溶液，然后置于1000r/min的高速剪切机中剪切30min，抽滤除去不溶物，得滤液三；
f、往滤液三中加入质量比为1：1的半乳糖酶和甘露糖酶，搅拌1h后，经0.8nm的超滤膜除去游离单糖，得截留物四；
g、将滤液一、二和截留物四混合后，在40℃、真空度-0.04mpa减压浓缩至相对密度为1.0，即得葛根提取液。
瓜尔胶、过氧化钠、无水醋酸钠的质量比为1：0.08：0.1。
本实施例还提供了一种灵芝猴头菇口服液的制备方法，包括如下步骤：
s1、按照配方称取枳椇子，洗净后烘干，置于300r/min的粉碎机中粉碎，过100目筛，然后加8倍量水煎煮2次，每次1h，抽滤，合并滤液；
s2、按照配方量，将蔗糖、甜菊糖苷、山梨酸钾在2倍量纯水中溶解混合，然后加入葛根的提取液、灵芝和猴头菇发酵混合物搅拌均匀；
s3、往步骤s1中得到的滤液中添加步骤s2得到的溶液，搅拌均匀，然后在50℃、真空度-0.07mpa减压蒸馏，将液体浓缩至相对密度为1.06，得浓缩液；
s4、将步骤s3得到的浓缩液放至室温，加入无水乙醇使含醇量达30%，静置过夜，过滤，滤液回收乙醇，然后在40℃、真空度-0.09mpa减压蒸馏，将液体浓缩至相对密度为浓缩至相对密度为1.13，得清膏；
s5、将步骤s4得到的清膏加入纯水定容至1000ml，搅拌均匀，在2℃冷藏24h后过滤，取滤液按照10ml/支灌装成瓶装口服液，然后在110℃灭菌20min，即得灵芝猴头菇口服液成品。
实施例5
本实施例提供了一种灵芝猴头菇口服液，包括灵芝和猴头菇发酵混合物270g、葛根100g、枳椇子150g、蔗糖80g、甜菊糖苷1.2g、山梨酸钾0.4g、纯化水余量。
灵芝和猴头菇发酵混合物的制备方法为：
（1）在无菌条件下，分别将灵芝和猴头菇的母种菌丝体的斜面切成4mm的菌丝块，转接于斜面培养基，在26℃避光培养7天，待菌丝长满整个斜面且茁壮茂密时，分别得灵芝斜面菌种和猴头菇斜面菌种，并置于3℃冰箱保藏；
（2）分别将灵芝斜面菌种和猴头菇斜面菌种切成1-3mm的菌丝块后，混合均匀，然后将混合菌丝块放入装有55ml种子液培养基的三角瓶中，在25℃、190r/min摇床的条件下培养6天，得灵芝和猴头菇种子液；
（3）分别取灵芝和猴头菇的子实体用水洗净后，切成9mm碎块，置于3倍量的淀粉中搅拌均匀，然后用筛子去掉多余淀粉，85℃干燥1.5h；
（4）将步骤（3）得到的产物，放入装有75ml发酵液培养基的三角瓶中，在29℃、130r/min摇床的条件下培养2天，然后再将步骤（2）得到的灵芝和猴头菇种子液倒入三角瓶中，降温至24℃，在110r/min摇床的条件下培养5天，然后抽滤，分别收集滤渣和滤液一；
（5）将步骤（4）得到的滤渣用清水洗涤后烘干，置于650r/min的粉碎机中粉碎，过180目筛，然后加入15倍量水煎煮4次，每次30min，冷却后过滤，合并所有滤液得滤液二；
（6）将滤液一和滤液二混合均匀，加入2倍量的无水乙醇，静置15h后，放入离心机中，在3℃、5500r/min的条件下离心25min，收集上清液，最后在75℃、真空度-0.06mpa减压蒸馏，将液体浓缩至相对密度为1.1，即得灵芝和猴头菇发酵混合物成品。
灵芝与猴头菇的母种菌丝体的质量比为1：1.5，灵芝与猴头菇的子实体的质量比为1：2.5，灵芝、猴头菇的母种菌丝体总质量：灵芝、猴头菇的子实体总质量=1：1.1。
葛根的提取方法为：
a、将瓜尔胶在常温下溶解于3倍量的水中，然后同时加入过氧化钠和无水醋酸钠，搅拌均匀后静置45min，得多孔瓜尔胶凝胶；
b、按照配方称取葛根洗净烘干置于400r/min的粉碎机中粉碎，过40目筛，得葛根粉；
c、取步骤b得到的葛根粉，加6倍水在65℃煎煮25min后，加入步骤a得到的多孔瓜尔胶凝胶的一半，然后继续煎煮1.5h，过滤得滤渣一和滤液一，将滤渣一中的凝胶和葛根粉滤渣分离并收集；
d、取步骤c得到的葛根粉滤渣，加12倍量水在55℃煎煮45min后，加入步骤a得到的多孔瓜尔胶凝胶的剩余一半，继续煎煮50min，过滤得滤渣二和滤液二，将滤渣二中的凝胶和葛根粉滤渣分离，收集凝胶；
e、在常温下，将步骤c和d收集到的凝胶混合后，加入3倍量、ph为3.2的醋酸水溶液，然后置于1200r/min的高速剪切机中剪切45min，抽滤除去不溶物，得滤液三；
f、往滤液三中加入质量比为2：1的半乳糖酶和甘露糖酶，搅拌1.5h后，经1nm的超滤膜除去游离单糖，得截留物四；
g、将滤液一、二和截留物四混合后，在50℃、真空度-0.06mpa减压浓缩至相对密度为1.05，即得葛根提取液。
瓜尔胶、过氧化钠、无水醋酸钠的质量比为1：0.1：0.2。
本实施例还提供了一种灵芝猴头菇口服液的制备方法，包括如下步骤：
s1、按照配方称取枳椇子，洗净后烘干，置于350r/min的粉碎机中粉碎，过110目筛，然后加10倍量水煎煮3次，每次1.5h，抽滤，合并滤液；
s2、按照配方量，将蔗糖、甜菊糖苷、山梨酸钾在3倍量纯水中溶解混合，然后加入葛根的提取液、灵芝和猴头菇发酵混合物搅拌均匀；
s3、往步骤s1中得到的滤液中添加步骤s2得到的溶液，搅拌均匀，然后在55℃、真空度-0.08mpa减压蒸馏，将液体浓缩至相对密度为1.07，得浓缩液；
s4、将步骤s3得到的浓缩液放至室温，加入无水乙醇使含醇量达30%，静置过夜，过滤，滤液回收乙醇，然后在45℃、真空-0.1mpa减压蒸馏，将液体浓缩至相对密度为浓缩至相对密度为1.15，得清膏；
s5、将步骤s4得到的清膏加入纯水定容至配制量，搅拌均匀，在3℃冷藏24h后过滤，取滤液按照10ml/支灌装成瓶装口服液，然后在115℃灭菌30min，即得灵芝猴头菇口服液成品。
其余与实施例4相同。
实施例6
本实施例提供了一种灵芝猴头菇口服液，包括灵芝和猴头菇发酵混合物300g、葛根150g、枳椇子50g、蔗糖100g、甜菊糖苷1.5g、山梨酸钾0.3g、纯化水余量。
灵芝和猴头菇发酵混合物的制备方法为：
（1）在无菌条件下，分别将灵芝和猴头菇的母种菌丝体的斜面切成6mm的菌丝块，转接于斜面培养基，在28℃避光培养8天，待菌丝长满整个斜面且茁壮茂密时，分别得灵芝斜面菌种和猴头菇斜面菌种，并置于5℃冰箱保藏；
（2）分别将灵芝斜面菌种和猴头菇斜面菌种切成3mm的菌丝块后，混合均匀，然后将混合菌丝块放入装有60ml种子液培养基的三角瓶中，在26℃、200r/min摇床的条件下培养6天，得灵芝和猴头菇种子液；
（3）分别取灵芝和猴头菇的子实体用水洗净后，切成10mm碎块，置于4倍量的淀粉中搅拌均匀，然后用筛子去掉多余淀粉，90℃干燥2h；
（4）将步骤（3）得到的产物，放入装有80ml发酵液培养基的三角瓶中，在30℃、150r/min摇床的条件下培养2天，然后再将步骤（2）得到的灵芝和猴头菇种子液倒入三角瓶中，降温至25℃，在120r/min摇床的条件下培养5天，然后抽滤，分别收集滤渣和滤液一；
（5）将步骤（4）得到的滤渣用清水洗涤后烘干，置于800r/min的粉碎机中粉碎，过200目筛，然后加入20倍量水煎煮5次，每次30min，冷却后过滤，合并所有滤液得滤液二；
（6）将滤液一和滤液二混合均匀，加入2倍量的无水乙醇，静置18h后，放入离心机中，在5℃、6000r/min的条件下离心30min，收集上清液，最后在80℃、真空度-0.07mpa减压蒸馏，将液体浓缩至相对密度为1.2，即得灵芝和猴头菇发酵混合物成品。
灵芝与猴头菇的母种菌丝体的质量比为1：2，灵芝与猴头菇的子实体的质量比为1：3，灵芝、猴头菇的母种菌丝体总质量：灵芝、猴头菇的子实体总质量=1：1.2。
葛根的提取方法为：
a、将瓜尔胶在常温下溶解于3倍量的水中，然后同时加入过氧化钠和无水醋酸钠，搅拌均匀后静置60min，得多孔瓜尔胶凝胶；
b、按照配方称取葛根洗净烘干置于500r/min的粉碎机中粉碎，过60目筛，得葛根粉；
c、取步骤b得到的葛根粉，加8倍量水在70℃煎煮30min后，加入步骤a得到的多孔瓜尔胶凝胶的一半，然后继续煎煮2h，过滤得滤渣一和滤液一，将滤渣一中的凝胶和葛根粉滤渣分离并收集；
d、取步骤c得到的葛根粉滤渣，加15倍量水在60℃煎煮60min后，加入步骤a得到的多孔瓜尔胶凝胶的剩余一半，继续煎煮60min，过滤得滤渣二和滤液二，将滤渣二中的凝胶和葛根粉滤渣分离，收集凝胶；
e、在常温下，将步骤c和d收集到的凝胶混合后，加入4倍量、ph为3.5的盐酸水溶液，然后置于1500r/min的高速剪切机中剪切60min，抽滤除去不溶物，得滤液三；
f、往滤液三中加入质量比为3：1的半乳糖酶和甘露糖酶，搅拌2h后，经1.2nm的超滤膜除去游离单糖，得截留物四；
g、将滤液一、二和截留物四混合后，在60℃、真空度-0.08mpa减压浓缩至相对密度为1.1，即得葛根提取液。
瓜尔胶、过氧化钠、无水醋酸钠的质量比为1：0.12：0.3。
本实施例还提供了一种灵芝猴头菇口服液的制备方法，包括如下步骤：
s1、按照配方称取枳椇子，洗净后烘干，置于400r/min的粉碎机中粉碎，过120目筛，然后加12倍量水煎煮4次，每次2h，抽滤，合并滤液；
s2、按照配方量，将蔗糖、甜菊糖苷、山梨酸钾在4倍量纯水中溶解混合，然后加入葛根的提取液、灵芝和猴头菇发酵混合物搅拌均匀；
s3、往步骤s1中得到的滤液中添加步骤s2得到的溶液，搅拌均匀，然后在60℃、真空度-0.09mpa减压蒸馏，将液体浓缩至相对密度为1.08，得浓缩液；
s4、将步骤s3得到的浓缩液放至室温，加入无水乙醇使含醇量达30%，静置过夜，过滤，滤液回收乙醇，然后在50℃、真空度-0.12mpa减压蒸馏，将液体浓缩至相对密度为浓缩至相对密度为1.18，得清膏；
s5、将步骤s4得到的清膏加入纯水定容至配制量，搅拌均匀，在5℃冷藏24h后过滤，取滤液按照10ml/支灌装成瓶装口服液，然后在120℃灭菌40min，即得灵芝猴头菇口服液成品。
其余与实施例4相同。
对比例1
本对比例提供了一种灵芝猴头菇口服液，与实施例4的不同之处在于，灵芝和猴头菇发酵混合物为190g。
对比例2
本对比例提供了一种灵芝猴头菇口服液，与实施例4的不同之处在于，灵芝和猴头菇发酵混合物为310g。
对比例3
本对比例提供了一种灵芝猴头菇口服液，与实施例4的不同之处在于，葛根为90g。
对比例4
本对比例提供了一种灵芝猴头菇口服液，与实施例4的不同之处在于，葛根为210g。
对比例5
本对比例提供了一种灵芝猴头菇口服液，与实施例4的不同之处在于，枳椇子为40g。
对比例6
本对比例提供了一种灵芝猴头菇口服液，与实施例4的不同之处在于，枳椇子为160g。
对比例7
本对比例提供了一种灵芝猴头菇口服液，与实施例5的不同之处在于，将灵芝和猴头菇发酵混合物改为灵芝和猴头菇提取混合物，即将灵芝和猴头菇混合进行水提后再混合，具体水提条件与枳椇子水提过程相同。
对比例8
本对比例提供了一种灵芝猴头菇口服液，与实施例5的不同之处在于，将灵芝和猴头菇分开发酵后，再混合，此时灵芝和猴头菇发酵混合物的制备方法为：
（1）在无菌条件下，分别将灵芝和猴头菇的母种菌丝体的斜面切成4mm的菌丝块，转接于斜面培养基，在26℃避光培养7天，待菌丝长满整个斜面且茁壮茂密时，分别得灵芝斜面菌种和猴头菇斜面菌种，并置于3℃冰箱保藏；
（2）将灵芝斜面菌种切成1-3mm的菌丝块后，混合均匀，然后将混合菌丝块放入装有55ml种子液培养基的三角瓶中，在25℃、190r/min摇床的条件下培养6天，得灵芝种子液；
（3）取灵芝子实体用水洗净后，切成9mm碎块，置于3倍量的淀粉中搅拌均匀，然后用筛子去掉多余淀粉，85℃干燥1.5h；
（4）将步骤（3）得到的产物，放入装有75ml发酵液培养基的三角瓶中，在29℃、130r/min摇床的条件下培养2天，然后再将步骤（2）得到的灵芝种子液倒入三角瓶中，降温至24℃，在110r/min摇床的条件下培养5天，然后抽滤，分别收集滤渣和滤液一；
（5）将步骤（4）得到的滤渣用清水洗涤后烘干，置于650r/min的粉碎机中粉碎，过180目筛，然后加入15倍量水煎煮4次，每次30min，冷却后过滤，合并所有滤液得滤液二；
（6）将滤液一和滤液二混合均匀，加入2倍量的无水乙醇，静置15h后，放入离心机中，在3℃、5500r/min的条件下离心25min，收集上清液，最后在75℃、真空度-0.06mpa减压蒸馏，将液体浓缩至相对密度为1.1，即得灵芝发酵物；
（7）将猴头菇斜面菌种按照以上同样的方法制成猴头菇发酵物后，再与灵芝发酵物混合，即得灵芝和猴头菇发酵混合物。
对比例9
本对比例提供了一种灵芝猴头菇口服液，与实施例5的不同之处在于，灵芝和猴头菇发酵混合物的制备方法步骤（1）中，将灵芝和猴头菇的母种菌丝体混合一起培养成斜面菌种，此时步骤（1）具体为：在无菌条件下，分别将灵芝和猴头菇的母种菌丝体的斜面切成4mm的菌丝块，然后混合均匀，转接于斜面培养基，在26℃避光培养7天，待菌丝长满整个斜面且茁壮茂密时，分别得灵芝和猴头菇斜面混合菌种，并置于3℃冰箱保藏。
对比例10
本对比例提供了一种灵芝猴头菇口服液，与实施例5的不同之处在于，灵芝和猴头菇发酵混合物的制备方法中不加入灵芝和猴头菇的子实体，即将步骤（3）和（5）删除，步骤（4）改为：将步骤（2）得到的灵芝和猴头菇种子液倒入三角瓶中，降温至24℃，在110r/min摇床的条件下培养5天，然后抽滤，收集滤液一。
步骤（6）改为：往滤液一中加入2倍量的无水乙醇，静置15h后，放入离心机中，在3℃、5500r/min的条件下离心25min，收集上清液，最后在75℃、真空度-0.06mpa减压蒸馏，将液体浓缩至相对密度为1.1，即得灵芝和猴头菇发酵混合物成品。
对比例11
本对比例提供了一种灵芝猴头菇口服液，与实施例5的不同之处在于，灵芝和猴头菇发酵混合物的制备方法步骤（3）中，不对灵芝和猴头菇的子实体进行淀粉处理。此时步骤（3）改为：分别取灵芝和猴头菇的子实体用水洗净后，切成9mm碎块，85℃干燥1.5h。
对比例12
本对比例提供了一种灵芝猴头菇口服液，与实施例5的不同之处在于，灵芝和猴头菇发酵混合物的制备方法步骤（3）中，不将灵芝和猴头菇的子实体切碎块，此时步骤（3）改为：分别取灵芝和猴头菇的子实体用水洗净后，置于3倍量的淀粉中搅拌均匀，然后用筛子去掉多余淀粉，85℃干燥1.5h。
对比例13
本对比例提供了一种灵芝猴头菇口服液，与实施例5的不同之处在于，灵芝和猴头菇发酵混合物的制备方法步骤（4）为：将步骤（3）得到的产物，与步骤（2）得到的灵芝和猴头菇种子液倒入三角瓶中混合，在24℃、110r/min摇床的条件下培养5天，然后抽滤，分别收集滤渣和滤液一。
对比例14
本对比例提供了一种灵芝猴头菇口服液，与实施例5的不同之处在于，灵芝和猴头菇发酵混合物的制备方法中，删除步骤（5），此时步骤（6）改为：往滤液一中加入2倍量的无水乙醇，静置15h后，放入离心机中，在3℃、5500r/min的条件下离心25min，收集上清液，最后在75℃、真空度-0.06mpa减压蒸馏，将液体浓缩至相对密度为1.1，即得灵芝和猴头菇发酵混合物成品。
对比例15
本对比例提供了一种灵芝猴头菇口服液，与实施例5的不同之处在于，灵芝和猴头菇发酵混合物的制备方法中，灵芝与猴头菇的母种菌丝体的质量比为1：0.8。
对比例16
本对比例提供了一种灵芝猴头菇口服液，与实施例5的不同之处在于，灵芝和猴头菇发酵混合物的制备方法中，灵芝与猴头菇的母种菌丝体的质量比为1：2.2。
对比例17
本对比例提供了一种灵芝猴头菇口服液，与实施例5的不同之处在于，灵芝和猴头菇发酵混合物的制备方法中，灵芝与猴头菇的子实体的质量比为1：1.8。
对比例18
本对比例提供了一种灵芝猴头菇口服液，与实施例5的不同之处在于，灵芝和猴头菇发酵混合物的制备方法中，灵芝与猴头菇的子实体的质量比为1：3.2。
对比例19
本对比例提供了一种灵芝猴头菇口服液，与实施例5的不同之处在于，灵芝和猴头菇发酵混合物的制备方法中，灵芝、猴头菇的母种菌丝体总质量：灵芝、猴头菇的子实体总质量=1：0.8。
对比例20
本对比例提供了一种灵芝猴头菇口服液，与实施例5的不同之处在于，灵芝和猴头菇发酵混合物的制备方法中，灵芝、猴头菇的母种菌丝体总质量：灵芝、猴头菇的子实体总质量=1：1.4。
对比例21
本对比例提供了一种灵芝猴头菇口服液，与实施例6的不同之处在于，葛根提取方法中，不加入多孔瓜尔胶凝胶，此时葛根的提取方法为：
a、按照配方称取葛根洗净烘干置于500r/min的粉碎机中粉碎，过60目筛，得葛根粉；
b、取葛根粉，加8倍量水在70℃煎煮2.5h，过滤得滤渣一和滤液一，；
c、取步骤b得到的滤渣一，加15倍量水在60℃煎煮2h，过滤得滤渣二和滤液二；
d、将滤液一、二混合后，在60℃、真空度-0.08mpa减压浓缩至相对密度为1.1，即得葛根提取液。
对比例22
本对比例提供了一种灵芝猴头菇口服液，与实施例6的不同之处在于，葛根提取方法步骤a中，将无水醋酸钠改为四硼酸钠。
对比例23
本对比例提供了一种灵芝猴头菇口服液，与实施例6的不同之处在于，葛根提取方法步骤a中，将过氧化钠改为市面上的食品发泡剂。
对比例24
本对比例提供了一种灵芝猴头菇口服液，与实施例6的不同之处在于，葛根提取方法中，瓜尔胶、过氧化钠、无水醋酸钠的质量比为1：0.06：0.3。
对比例25
本对比例提供了一种灵芝猴头菇口服液，与实施例6的不同之处在于，葛根提取方法中，瓜尔胶、过氧化钠、无水醋酸钠的质量比为1：0.13：0.3。
对比例26
本对比例提供了一种灵芝猴头菇口服液，与实施例6的不同之处在于，瓜尔胶、过氧化钠、无水醋酸钠的质量比为1：0.12：0.08
对比例27
本对比例提供了一种灵芝猴头菇口服液，与实施例6的不同之处在于，瓜尔胶、过氧化钠、无水醋酸钠的质量比为1：0.12：0.4。
对比例28
本对比例提供了一种灵芝猴头菇口服液，与实施例6的不同之处在于，葛根提取方法中，将多孔瓜尔胶凝胶一次性加入到葛根水提过程中，此时步骤c为：取步骤b得到的葛根粉，加8倍量水在70℃煎煮30min后，加入步骤a得到的多孔瓜尔胶凝胶，然后继续煎煮2h，过滤得滤渣一和滤液一，将滤渣一中的凝胶和葛根粉滤渣分离并收集。
此时步骤d为：取步骤c得到的葛根粉滤渣，加15倍量水在60℃煎煮2h，过滤得滤渣二和滤液二，将滤渣二中的凝胶和葛根粉滤渣分离，收集凝胶。
对比例29
本对比例提供了一种灵芝猴头菇口服液，与实施例6的不同之处在于，葛根提取方法中，成品中不除去瓜尔胶，此时删除步骤f，将步骤g改为：将滤液一、二、三混合后，在60℃、真空度-0.08mpa减压浓缩至相对密度为1.1，即得葛根提取液。
一、灵芝猴头菇口服液中粗多糖的含量测定
采用苯酚-硫酸比色法，对实施例1-6和对比例7-20制备的灵芝猴头菇口服液进行粗多糖含量的测定，其测定原理为：多糖经乙醇沉淀分离后，去除其他可溶性糖及杂质的干扰，再与苯酚-硫酸作用成橙红色化合物，其呈色强度与溶液中糖的浓度成正比，在485nm波长下比色定量，结果如下表1所示：
由表1结果可知，与对比例7-20相比，采用本发明实施例4-6制备的灵芝猴头菇口服液，能够明显提高口服液中粗多糖的含量，提高品质。
二、灵芝猴头菇口服液中葛根素的含量测定
对实施例1-6和对比例21-29制备的灵芝猴头菇口服液进行葛根素含量的测定，测定方法参考gb/t22251，其结果如下表2所示：
由表2结果可知，与对比例21-29相比，采用本发明实施例4-6制备的灵芝猴头菇口服液，能够明显提高口服液中葛根素的含量，提高品质。
三、灵芝猴头菇口服液对化学性肝损伤起辅助保护功能的保健食品上的应用
1、建立四氯化碳肝损伤模型
选取单一性别的小鼠370只，随机分成37组，每组10只，其中1组空白对照组（给予蒸馏水，按照0.02ml/g剂量给小鼠灌胃），1组模型对照组（给予蒸馏水，按照0.02ml/g剂量给小鼠灌胃），35组样品组（分别选取实施例1-6和对比例1-29中的制备的灵芝猴头菇口服液，按照0.02ml/g给小鼠灌胃）。
2、实验方法
按照上述模型分别对所有实验组的小鼠每日经口灌胃，将小鼠每周称重两次，以调整药品剂量。于实验第30天将各组小鼠禁食16h，模型对照组和各样品组一次灌胃给予0.01ml/g的0.5%四氯化碳，空白对照组给予植物油，模型对照组和样品组继续选取实施例1-6和对比例1-29中的制备的灵芝猴头菇口服液，按照0.02ml/g给小鼠灌胃，至实验结束（与四氯化碳灌胃间隔4h以上），给予四氯化碳后24h处死小鼠，取血分离血清，测定alt（血清谷丙转氨酶）、ast（谷草转氨酶），每组取平均值。
造模前，各组小鼠一切正常，体重正常增长。
四氯化碳造模后，空白对照组的小鼠明显活动减弱，皮毛暗淡；模型对照组小鼠有活动迟钝、步行不稳。
空白对照组、模型对照组及各样品组的血清中alt、ast含量见表下3：
表3可知，空白对照组的alt、ast含量明显低于四氯化碳模型对照组，存在明显差异，说明模型成立；各样品组的alt、ast含量明显低于模型对照组，均存在显著差异(p＜0.05)。说明本发明制备的口服液对化学性肝损伤具有辅助保护的作用。
与对比例1-29相比，采用本发明实施例4-6制备的灵芝猴头菇口服液，能够明显提高对化学性肝损伤具有辅助保护的作用。
本发明的有益效果在于：本发明的灵芝猴头菇口服液在制备过程中，通过优化配方及其工艺，能够整体提高灵芝猴头菇口服液中粗多糖和葛根素的含量，且能够明显提高对化学性肝损伤具有辅助保护的作用。
最后应说明的是，以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。