一种含弹性蛋白肽的组合物及其应用的制作方法

1.本专利属于功能性组合物技术领域，具体地，涉及一种含弹性蛋白肽的组合物及其应用。


背景技术：

2.衰老是人体各器官功能开始降低的一种生理现象，是不可避免的自然规律。随着年龄的增长，皮肤对机体的防护能力，适应性和调节能力减退，会失去柔软性，弹性下降，水分流失，出现皱纹、下垂、粗糙。慢性紫外线照射也会增加表皮厚度，促进胶原蛋白流失，导致皮肤老化。随着经济的高速发展和科学发展脚步的迈进，人们越来越关注如何科学、正确地保养肌肤，使皮肤恢复光滑有弹性。
3.弹性蛋白是弹性纤维(elastic fibers)的主要成分，弹性纤维与胶原纤维共同存在，赋予皮肤组织以弹性和抗张能力。弹性蛋白是皮肤老化产生松弛、下垂和细皱纹的主要原因，随着皮肤自然老化，弹性蛋白的分解越来越显著。因此，通过提升皮肤中的弹性蛋白含量能够有效地使皮肤恢复年轻的状态。
4.然而，目前市售的抗衰老产品的起效时间一般较长，而且能够有针对性地提高皮肤中的弹性蛋白含量的产品较少。基于此，有必要寻求一种能够在短时间内通过提高皮肤弹性蛋白含量以改善皮肤衰老状态的产品，满足消费者需求。


技术实现要素：

5.本发明的目的是寻求到一种含弹性蛋白肽的组合物及其应用，以在短时间内改善使用者的皮肤状况。
6.根据本发明的一个方面，提供一种含弹性蛋白肽的组合物，按照质量份数计算，由以下物料组成：弹性蛋白肽15份、雨生红球藻4～16份、刺槐植物原料8～40份。
7.在本方案提供的含弹性蛋白肽的组合物中，利用刺槐植物原料与弹性蛋白肽搭配使用，能够显著地提高皮肤中弹性蛋白的生成量，从而能够有效地提升皮肤组织的弹性。除此以外，使弹性蛋白肽、雨生红球藻与刺槐植物原料按照本方案所限定的比例复合，还能够提升皮肤组织中的胶原蛋白生成量、透明质酸钠生成量以及水通道蛋白aqp3生成量。透明质酸钠具有良好的保湿能力和去皱作用，促进表皮细胞的增殖和分化，带动干燥损伤细胞再生，保持皮肤滋润亮泽；水通道蛋白具有跨膜转运水、甘油等小分子物质的功能，将循环中的内源性甘油、皮脂腺中的甘油三脂带入表皮，还进一步参与表皮细胞的甘油代谢，利于促进表皮保湿屏障的形成。通过提高透明质酸钠和水道蛋白的含量，表皮细胞自我修复能力和自我强化功能得到增强，皮肤维持正常的结构和功能，可以有效预防干纹，保持肌肤滋润弹性。基于此，本方案所提供的含弹性蛋白肽的组合物，通过促进人体合成弹性蛋白、胶原蛋白、透明质酸钠和水通道蛋白aqp3的合成，使皮肤恢复弹性和水分，从而能够在短时间内显著地改善皮肤衰老状态。
8.优选地，按照质量份数计算，上述含弹性蛋白肽的组合物由以下物料组成：弹性蛋
白肽15份、红球藻5.4～12份、刺槐植物原料10～30份。将弹性蛋白肽、雨生红球藻和刺槐植物原料按照上述配比进行复配，上述三种物料呈现出优异的抗氧化协同作用。刺槐植物原料中富含芦丁也称芸香苷，是消除自由基的强氧化剂，可以终止自由基的连锁反应；雨生红球藻中富含虾青素，虾青素分子结构中含有多个共轭双键，分子末端的不饱和酮基和羟基中含有大量活泼电子，可提供电子给自由基或吸引自由基的未配对电子，从而使自由基形成稳定结构，生成新的化学物质。芸香苷与虾青素组合后在由自由基引发的脂质氧化反应中表现出显著的协同作用，当虾青素清除细胞的自由基时，便生成虾青素自由基阳离子，与细胞膜中的轮磷脂氧化竞争。由于共振稳定作用，虾青素自由基阳离子中的单电子被重新定位到芸香苷的共振基团上，从而能够使虾青素阳离子自由基再生成虾青素。但虾青素和芸香苷浓度过高时，自由基清除率比未混合前2种单体清除能力之和低，表现为拮抗作用。因此，需要找出合理的组合物配比，避免发生拮抗现象。使配方中的刺槐植物原料和雨生红球藻按照本方案所限定的比例进行复配，可以使人体游离的自由基与组合物快速结合，终止自由基的连锁反应，形成稳定的分子团然后排出体外，进而降低皮肤被氧化的可能性，增强血管壁弹性，提高毛细血管的韧性，可有效改善皮肤弹性的特点它能清除自由基以及有效地结束过氧化链式反应，从而保护人体细胞减少受氧化反应的伤害。
9.优选地，按照质量份数计算，上述含弹性蛋白肽的组合物由以下物料组成：弹性蛋白肽15份、雨生红球藻8份、刺槐植物原料20份。
10.在本方案中，所述份数比例寻求到的最合理的组合物配比，使其不仅能够显著改善皮肤弹性、水分，而且见效时长短。市面上的产品普遍需要4周才开始起效，而本发明的促进效果好，皮肤弹性和角质层水分含量生成量高，只需服用2周即可显著性改善皮肤状态。
11.优选地，所述刺槐植物原料包括槐花、槐米中的至少一种。18世纪末，刺槐从欧洲引入青岛进行栽培，现已遍布全国。刺槐树皮呈黑褐色，花为白色，有香味，可入药，也可食用，其完全开放时采收的花朵被称为“槐花”，也称“槐蕊”。刺槐的花在未完全开放时采收的花蕾，因其体积较小且形似米粒，故称为“槐米”。槐米的味苦，微寒，具有一定的药用价值，可用于多种疾病的治疗。即使是同一种植物相同部位的提取物，因为花期不同导致了其化学组成成分虽然种类非常接近，但是含量有所区别。
12.实验研究对比了刺槐槐花和槐米的营养成分，结果显示槐花中可溶性糖和维生素c的含量比不同发育时期的槐米中可溶性糖和维生素c的含量都要高，而它的可溶性蛋白含量偏低，且不同生长阶段的槐米中芦丁的含量比槐花中芦丁的含量都要高，因此槐米被用作药物或功能性食品的价值要较槐花更高。
13.优选地，所述刺槐植物原料包括槐花和槐米。原因是槐花和槐米营养成分接近，虽然天然槐米和槐花芦丁含量有区别，但是本实验方案中选用的槐米和槐花为相同规格物料，即功效指标芦丁含量接近，且本发明人在长期的生产操作中发现，在同等实验条件下，含槐花组合物和含槐米组合物对弹性蛋白和透明质酸ha的促进生成率非常接近，但含槐花组合物对胶原蛋白的促进生成率远高于含槐米组合物，而含槐米组合物对水通道蛋白aqp3的表达促进生成率也远高于含槐花组合物。因此综上所述，槐花和槐米都有促进皮肤弹性增加、保持皮肤水分、补充细胞外基质ecm的功效，其中槐花的作用更倾向于使皮肤弹性增强，而槐米的作用更多在于促进皮肤的持水和保湿能力。
14.根据本发明的另一个方面，提供上述含弹性蛋白肽的组合物在制备保健食品和/
或美容产品中的应用。
15.根据本发明的再一个方面，提供一种保健食品和/或美容产品，包括上述含弹性蛋白肽的组合物。
16.优选地，保健食品和/或美容产品包括液体饮料、软糖、果冻、凝胶、固体饮料、片剂、胶囊、粉剂。
17.优选地，液体饮料中的溶剂为水；液体饮料还包括亲水胶体，在液体饮料中，亲水胶体和槐花的质量比满足，槐花：亲水胶体＝1～10：3～12。
18.发明人在长期的研究与生产中发现，应用由弹性蛋白肽、槐花和红球藻复配而成的组合物加工得到的液体制剂在储存过程中会发生沉淀，而沉淀发生主要由槐花引起。液体制剂发生沉淀，导致了液体制剂难以在一段储存时间内容保持稳定的有效浓度，导致使用该液体制剂产品的作用效果无法稳定发挥，使用者无法达到预期的皮肤状态。使亲水胶体与本方案所提供的含弹性蛋白肽的组合物搭配使用制备液体制剂，能够有效地改善由于采用槐花所导致的沉淀现象，从而提高了液体制剂的储存稳定性，使含有上述含弹性蛋白肽的组合物的液体制剂在经历长时间储存后依然能够保持稳定的功效以及良好的口感。
19.优选地，亲水胶体选自结冷胶、黄原胶中的至少一种。
20.优选地，亲水胶体为黄原胶。
21.优选地，上述液体饮料还包括以下质量份数的物料：抗氧化剂10～40份、果汁200～800份、食用香精8～32份、甜味剂0.3～1.2份、酸味剂6～24份、果胶5～20份。
22.综上所述，相比于现有技术，本发明所提供的方案具有如下有益效果：
23.(1)使弹性蛋白肽、红球藻和槐花三种物料按照特定的配比复合，促进弹性蛋白、胶原蛋白(羟脯氨酸)、透明质酸(ha)的生成及水通道蛋白(aqp3)的表达，表现为显著改善皮肤状态，延缓皮肤衰老，增强肌肤免疫机能。
24.(2)与现有的抗衰产品相比，本发明所提供的含弹性蛋白肽的组合物能够更快、更有效的改善皮肤弹性、水分，通过人体试验证明口服该组合物可达到2周显著性改善肌肤氧化干燥损伤状态，恢复健康皮肤的弹性、水分。
25.(3)将上述组合物应用于保健食品、美容产品的制备中，使其具有抗氧化以及改善皮肤状态功效。
26.(4)本发明得到的液体饮料具有良好的储存稳定性，在经历长时间储存后，该液体饮料依然能够稳定地保有应有的美容效果，并能够保持良好的成品形态以及口感。
附图说明
27.图1为测试例4中的实验组1样品静置一周后的展示图；
28.图2为测试例4中的实验组2样品静置一周后的展示图；
29.图3为测试例4中的实验组3样品静置一周后的展示图。
具体实施方式
30.为了使本技术领域的人员更好地理解本发明中的技术方案，下面将结合本发明实施例和实施例中的附图对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技
术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都应当属于本发明保护的范围。
31.实施例1
32.1.含弹性蛋白肽的组合物的制备
33.本实施例采用弹性蛋白肽、雨生红球藻以及刺槐植物原料作为原料，上述原料分别经过如下对应工序的加工：
34.使弹性蛋白肽通过前处理、酶解、灭酶、浓缩、干燥、收粉制成弹性蛋白肽粉。
35.对雨生红球藻经过收集原料，超声破碎10～30min获取藻液，加入食用油作为提取溶剂后升温浸取，提取完成后离心取上清液，干燥得到提取物粉末，进行混合、包装制成。
36.刺槐植物原料包括槐花、槐米中的至少一种。对槐花通过前处理、提取、减压浓缩、干燥、过筛混合、包装制成槐花粉；对槐米通过前处理、提取、减压浓缩、干燥、过筛混合、包装制成槐米粉。
37.将经过上述处理后的物料按照不同的组分配比混合得到含有抗衰活性物质的试样，各试样所采用的抗衰活性物质混合物组成如表1所示。
38.表1.含弹性蛋白肽的组合物的重量份组成(mg)
39.[0040][0041]
测试例1
[0042]
组合物制剂在hff-1细胞抗衰老试验
[0043]
1.模型构建方式
[0044]
(1)完全培养基配制：dmem(pm150210)+15％fbs(164210-500)+1％p/s(pb180120)，取42ml dmem培养基，加入7.5ml血清、0.5ml双抗配制成。
[0045]
(2)细胞培养：显微镜下观察细胞生长至80％-90％进行细胞传代。弃去旧培养基，用pbs冲洗1-2遍。加入1ml胰酶。放在37℃培养箱中进行消化，每隔1min取出在显微镜下观察细胞消化程度，观察至细胞变圆终止消化。用2ml完全培养基终止消化。收集细胞，1000rpm离心5min，弃去上清液，用培养基将细胞重悬。
[0046]
(3)构建双氧水氧化hff-1造抗衰老模型：
[0047]
①
细胞分组：将细胞按照1
×
105个/孔转移六孔板种板，置于5％co
2 37℃培养箱培养24h；
[0048]
②
氧化损伤处理：弃去培养基，模型组和组合物组分别加入一定浓度h2o2处理细胞一段时间(双氧水的含量根据cck-8实验结果确定)；将液体移除，然后用无菌pbs洗涤3次；
将细胞放入37℃，5％co2培养箱中继续培养24h。
[0049]
2.实验分组
[0050]
以实施例1所制得的试样1～5以及对照试样1～5作为待测物料；以正常培养的细胞作为对照组，以氧化损伤处理的细胞为模型组；将参试的待测物料施用于氧化损伤模型设置实验组，每组3个平行。按照所施用的待测物料不同，将本测试例设置的实验组进行以下标记：试样1a，实验组1a；试样1b，实验组1b；试样2a，实验组2a；试样2b，实验组2b；试样3a，实验组3a；试样3b，实验组3b；试样4a，实验组4a；试样4b，实验组4b；试样5a，实验组5a；试样5b，实验组5b；对照试样1a，对照实验组1a；对照试样1b，对照实验组1b；对照试样2a，对照实验组2a；对照试样2b，对照实验组2b；对照试样3，对照实验组3；对照试样4，对照实验组4。对照试样4b，对照实验组4b；对照试样5a，对照实验组5a。对照试样5b，对照实验组5b。
[0051]
3.测试项目：hff-1细胞的弹性蛋白肽、胶原蛋白(羟脯氨酸)生成量的测定
[0052]
(1)弹性蛋白生成量检测
[0053]
①
细胞铺板：按照10
×
103个/孔转移细胞至48孔板孵育过夜培养24h。
[0054]
②
建立氧化损伤模型，按照200μg/ml的加入量向氧化损伤模型中加入待测物料，并采用待测物料处理细胞24h，。
[0055]
③
孵育24h后，从所有细胞板中取出上清液，收集在预先标记的离心管中，用于估计弹性蛋白水平。
[0056]
④
elisa试剂盒检测弹性蛋白含量。
[0057]
(2)羟脯氨酸生成量的测定
[0058]
胶原蛋白的流失量可以采用细胞中羟脯氨酸的含量进行评估。
[0059]
①
细胞铺板：按照2
×
105个/ml转移细胞至6孔板培养24h。
[0060]
②
建立氧化损伤模型，按照200μg/ml的加入量向氧化损伤模型中加入待测物料，并采用待测物料处理细胞24h。
[0061]
③
孵育24h后，从所有细胞板中取出上清液，收集在预先标记的离心管中，用于估计羟脯氨酸水平。
[0062]
④
试剂盒检测细胞中羟脯氨酸含量。
[0063]
4.实验结果
[0064]
弹性蛋白生成量的测试结果如表2、表3所示，与模型组相比，实验组1a～5a、实验组1b～5b的弹性蛋白生成量都有所提高，由此说明，当抗衰活性物质按照弹性蛋白肽：红球藻：刺槐植物原料＝15：4～16：8～40的质量比复配时，所形成的复合物能够有效促进弹性蛋白的生成。其中，当抗衰活性物质按照弹性蛋白肽：雨生红球藻：刺槐植物原料＝15：8：20的质量比复配时，所形成的复合物促进弹性蛋白生成的效果最显著(对应实验组5a，含槐花组合物的弹性蛋白促进生成率约为155.98％；对应实验组5b，含槐米组合物的弹性蛋白促进生成率约为169.67％)。
[0065]
弹性蛋白促进生产率＝(实验组弹性蛋白生成量平行实验平均值-模型组弹性蛋白生成量平行实验平均值)/模型组弹性蛋白生成量平行实验平均值
[0066]
表2.含槐花组合物对弹性蛋白含量的影响(pg/ml)
[0067][0068][0069]
表3.含槐米组合物对弹性蛋白含量的影响(pg/ml)
[0070]
分组平行1平行2平行3对照组b22.4723.2021.75模型组b5.475.204.96实验组1b6.937.027.07实验组2b10.3310.6110.92实验组3b7.226.877.08实验组4b11.0510.9111.31实验组5b14.4713.5614.11对照实验组1b5.775.836.17对照实验组2b6.346.897.11对照实验组35.535.925.13对照实验组45.316.025.73对照实验组5b6.155.996.83
[0071]
胶原蛋白生成量的测试结果如表4、表5所示，与模型组相比，实验组1a～5a、实验组1b～5b的胶原蛋白生成量都有所提高，由此说明，当抗衰活性物质按照弹性蛋白肽：雨生红球藻：刺槐植物原料＝15：4～16：8～40的质量比复配时，所形成的复合物能够有效促进胶原蛋白的生成。其中，当抗衰活性物质按照弹性蛋白肽：雨生红球藻：刺槐植物原料＝15：8：20的质量比复配时，所形成的复合物促进胶原蛋白生成的效果最显著(对应实验组5a，含槐花组合物的胶原蛋白促进生成率约为104.79％，对应实验组5b，含槐米组合物的胶原蛋
白促进生成率约为47.87％)。
[0072]
胶原蛋白促进生产率＝(实验组胶原蛋白生成量平行实验平均值-模型组胶原蛋白生成量平行实验平均值)/模型组胶原蛋白生成量平行实验平均值
[0073]
表4.含槐花组合物对胶原蛋白生成量(羟脯氨酸)的影响(μg/ml)
[0074]
分组平行1平行2平行3对照组a8.898.288.45模型组a2.652.862.48实验组1a3.413.743.47实验组2a4.184.013.96实验组3a3.583.303.30实验组4a3.854.074.12实验组5a5.555.445.38对照实验组1a3.082.862.92对照实验组2a2.813.362.97对照实验组32.872.612.93对照实验组42.882.973.13对照实验组5a3.123.313.03
[0075]
表5.含槐米组合物对胶原蛋白生成量(羟脯氨酸)的影响(μg/ml)
[0076][0077][0078]
测试例2
[0079]
组合物制剂在人永生角质细胞hacat进行保湿试验
[0080]
1.模型构建方式
[0081]
构建干燥损伤模型
[0082]
选用人永生角质细胞hacat，待hacat长满12孔板70％时，放置于超净台中暴露20min，控制条件为无风，温度为25℃，待细胞活力降至45％-70％。
[0083]
2.实验分组
[0084]
以实施例1所制得的试样1～5以及对照试样1～5作为待测物料；以未干燥的细胞作为对照组，以干燥损伤细胞作为模型组；将参试的待测物料施用于干燥损伤模型设置实验组，每组3个平行。按照所施用的待测物料不同，将本测试例设置的实验组进行以下标记：试样1a，实验组1a；试样1b，实验组1b；试样2a，实验组2a；试样2b，实验组2b；试样3a，实验组3a；试样3b，实验组3b；试样4a，实验组4a；试样4b，实验组4b；试样5a，实验组5a；试样5b，实验组5b；对照试样1a，对照实验组1a；对照试样1b，对照实验组1b；对照试样2a，对照实验组2a；对照试样2b，对照实验组2b；对照试样3，对照实验组3；对照试样4，对照实验组4；对照试样5a，对照实验组5a；对照试样5b，对照实验组5b。
[0085]
3.测试项目：人永生角质细胞hacat的ha含量和水通道蛋白aqp3表达量的测定。
[0086]
(1)elisa检测细胞上清中ha含量
[0087]
①
按照200μg/ml的加入量向干燥损伤模型中加入待测物料，并采用待测物料处理细胞24h。
[0088]
②
将细胞上清吸出，3000rpm离心20min，去除细胞碎片等，由于细胞上清中ha含量较高，故需稀释10倍，备用。
[0089]
③
按照elisa试剂盒说明书操作，绘制标准曲线，根据od值计算出相应ha含量。
[0090]
(2)aqp3表达量测定
[0091]
①
按照200μg/ml的加入量向干燥损伤模型中加入待测物料，并采用待测物料处理细胞24h。
[0092]
②
用预热好的胰酶消化，培养基中止，计数，每管细胞约10万个。
[0093]
③
用4％多聚甲醛固定10分钟，冰pbs洗一遍。
[0094]
④
0.5％triton-100室温通透5分钟，pbs洗一遍。
[0095]
⑤
1％bsa室温封闭60分钟。
[0096]
⑥
离心去除封闭液，加1ul aqp3一抗，室温孵育30分钟，pbs洗一遍。
[0097]
⑦
加入0.5ulaqp3二抗，室温孵育30分钟，pbs洗一遍。
[0098]
⑧
加入200ul buffer，流式上机检测。
[0099]
4.实验结果
[0100]
角质细胞的透明质酸钠(ha)含量测试结果如表6、表7所示，与模型组相比，实验组1a～5a、实验组1b～5b的ha含量都有所提高，由此说明，当抗衰活性物质按照弹性蛋白肽：红球藻：刺槐植物原料＝15：4～16：8～40的质量比复配时，所形成的复合物能够有效促进ha的生成。其中，当抗衰活性物质按照弹性蛋白肽：雨生红球藻：刺槐植物原料＝15：8：20的质量比复配时，所形成的复合物促进ha生成的效果最显著(对应实验组5a，含槐花组合物的ha促进生成率约为120.98％，对应实验组5b，含槐米组合物的ha促进生成率约为94.70％)。
[0101]
ha促进生成率＝(实验组ha含量平行实验平均值-模型组ha含量平行实验平均值)/模型组-ha含量平行实验平均值
[0102]
表6.含槐花组合物对透明质酸钠(ha)含量的影响(ng/ml)
[0103][0104][0105]
表7.含槐米组合物对透明质酸钠(ha)含量的影响(ng/ml)
[0106]
分组平行1平行2平行3对照组b21.1220.1319.10模型组b18.1217.7217.92实验组1b28.8928.9127.18实验组2b30.1229.9929.52实验组3b32.7931.9230.12实验组4b33.2131.1231.23实验组5b34.1234.8935.68对照实验组1b27.1225.1224.15对照实验组2b30.1228.1229.67对照实验组326.3424.6823.55对照实验组431.1230.1430.91对照实验组5b32.2332.1431.91
[0107]
角质细胞的aqp3表达量测试结果如表8、表9所示，与模型组相比，实验组1a～5a、实验组1b～5b的aqp3表达量都有所提高，由此说明，当抗衰活性物质按照弹性蛋白肽：红球藻：刺槐植物原料＝15：4～16：8～40的质量比复配时，所形成的复合物能够有效促进aqp3的表达。其中，当抗衰活性物质按照弹性蛋白肽：雨生红球藻：刺槐植物原料＝15：8：20的质量比复配时，所形成的复合物促进aqp3表达的效果最显著(对应实验组5a，含槐花组合物的aqp3促进生成率约为106.19％，对应实验组5b，含槐米组合物的aqp3促进生成率约为
167.04％)。
[0108]
aqp3促进生成率＝实验组aqp3表达量平行实验平均值-模型组aqp3表达量平行实验平均值)/模型组aqp3表达量平行实验平均值
[0109]
表8.含槐花组合物对aqp3表达量的影响(荧光强度值mean)
[0110]
分组平行1平行2平行3对照组a702307156069540模型组a501204897052170实验组1a722317324571345实验组2a809127562377236实验组3a890208926090230实验组4a956708802085030实验组5a10502310689099970对照实验组1a756807023153420对照实验组2a882348910390001对照实验组3a689016914565189对照实验组4a756897712676983对照实验组5a791108016781239
[0111]
表9.含槐米组合物对aqp3表达量的影响(荧光强度值mean)
[0112][0113][0114]
补充说明关于含槐花组合物和含槐米组合物细胞实验两次数据差异的原因：关于细胞实验数据的差异的原因是因为细胞实验的稳定性来源于每一批细胞的状态，含槐花组
合物和含槐米组合物进行的增弹、补水的实验是分别复苏了两支细胞，因此无法保证两支细胞的状态完全相同，导致细胞增值速度也不相同，即使使用了同样的实验方法造模最终也有可能会得到不同的数据。另一个原因是槐花和槐米虽然是刺槐花朵的不同花期，主要生物活性的组成成分如芦丁、槲皮素、山奈酚、大豆皂苷、槐花皂苷等是基本一致的，但是成分各自的含量仍然存在较大差异，导致两种物料对细胞的补水和保湿功能还是存在一定差异，但总体数据的趋势是相同的，即槐花和槐米都能在一定程度上改善皮肤弹性，促进皮肤水份的保持。
[0115]
测试例3
[0116]
组合物在人体服用上的体感测试
[0117]
选取健康女性，服用弹性蛋白肽、雨生红球藻、刺槐植物原料制备的口服液4周后，进行皮肤弹性、皮肤角质层水分含量的测定。具体信息如下：
[0118]
(1)试验样品：含弹性蛋白肽(75mg/25ml)、雨生红球藻(40mg/25ml)、刺槐植物原料(100mg/25ml)制备的口服液
[0119]
(2)试验方法：本实验采用组内自身前后对照方式进行，比较受试者服用前后脸部皮肤指标。受试者每天服用1份弹性蛋白肽组合物，持续4周，并于服用前、服用后的2、4周进行皮肤角质层含水量、皮肤弹性(r2、r5、r7)测量。
[0120]
(3)实验分组：
[0121]
采用本测试例的上述试验样品以及选自现有专利提供的配方构建实验分组，所选用的物料的具体配方组成如表10所示。
[0122]
表10.配方配比(单位：mg/25ml)
[0123][0124]
(4)实验结果
[0125]
表11所展示的数据说明，相比起其他现有技术，服用本发明所提供的组合物能更快、更有效提高受试者皮肤弹性、水分。
[0126]
表11.人体服用上的体感测试
[0127][0128]
测试例4
[0129]
组合物在口服液中沉淀析出现象的解决试验
[0130]
(1)实验方法及分组
[0131]
共三组实验，每组含一个对照样品和三个实验样品，即不做任何处理a(对照样品)、调节ph至碱性b、加入黄原胶c、江阴天槐花粉更换为青云山槐花粉d。每组样品分别有对照样品和两组实验样品。
[0132]
1.实验组1
[0133]
(1)样品设置方式
[0134]
①
对照样品a1准备：称量200mg江阴天槐花粉、300mg弹性蛋白肽、160mg雨生红球藻混合，加入100g纯净水至烧杯，搅匀至无明显不溶物，使用一水柠檬酸调节ph至3.8左右，过200目筛网后装入50ml离心管备用。
[0135]
②
实验样品b1准备：称量200mg江阴天槐花粉、300mg弹性蛋白肽、160mg雨生红球藻混合，加入100g纯净水，搅匀至无明显不溶物，使用小苏打(nahco3)调节ph至9.5，静置10分钟后，用一水柠檬酸调节ph至3.8左右，过200目筛网后装入50ml离心管备用。
[0136]
③
实验样品c1准备：称量120mg黄原胶，将100g纯净水加热至沸腾，放入转子边搅拌边缓慢加入黄原胶，此过程须保证黄原胶全部溶解，无块状凝结。继续搅拌并缓慢加入200mg江阴天槐花粉、300mg弹性蛋白肽、160mg雨生红球藻混合物。静置五分钟后用一水柠檬酸调节ph至3.8左右，过200目筛网后装入50ml离心管备用。
[0137]
④
实验样品d1准备：称量200mg青云山槐花粉、300mg弹性蛋白肽、160mg雨生红球藻混合，加入100g纯净水至烧杯，搅匀至无明显不溶物，使用一水柠檬酸调节ph至3.8左右，过200目筛网后装入50ml离心管备用。
[0138]
在实验组1中，对照样品a1、实验样品b1、实验样品c1和实验样品d1中，芦丁总含量为5mg/25ml。
[0139]
所有样品准备完后50ml离心管被放入水浴锅加热灭菌，95℃加热30min，取出后用纸巾擦干在室温下静置观察沉淀析出。
[0140]
(2)实验结果
[0141]
图1展示了本测试例实验组1所设置的样品在静置一周后的情况，在图1中，按照位置顺序依次为：右1，对照样品a1；右2，对照样品d1；左2，实验样品c1；左1，实验样品b1。如图1所示，对照样品a1(图1右1)和实验样品b1(图1左1)有明显絮状沉淀在离心管底部析出，呈现黄褐色。对照样品d1(图1右2)有明显粉末状沉淀析出，呈现灰褐色。实验样品c1(图1左2)无沉淀析出，因加入黄原胶形成胶体后质感较粘稠且伴随细小气泡。
[0142]
2.实验组2
[0143]
(1)样品设置方式
[0144]
本实验组参照实验组1的对照样品a1、实验样品b1、实验样品c1、实验样品d1，将槐花的添加量调整为120mg，分别设置本实施例的对照样品a2、实验样品b2、实验样品c2、实验样品d2，在实验组2中，对照样品a2、实验样品b2、实验样品c2和实验样品d2中，芦丁总含量为3mg/25ml。
[0145]
(2)实验结果
[0146]
图2展示了本测试例实验组2所述设置的样品在静置一周后的情况，在图2中，按照位置顺序依次为：右1，对照样品d2；右2，对照样品a2；左2，实验样品b2；左1，实验样品c2。如图2所示，对照样品a2(图2右2)和实验样品b2(图2左2)有明显絮状沉淀在离心管底部析出，呈现黄褐色，沉淀的数量明显少于实验组1的对照样品a1(图1右1)和实验样品b1(图1左1)。实验组2的对照样品d2(图2右1)有明显粉末状沉淀析出，呈现灰褐色，沉淀数量也明显少于实验组1的对照样品d1(图1右2)。实验组2的实验样品c2(图2左1)无沉淀析出，因加入黄原胶形成胶体后质感较粘稠。
[0147]
3.实验组3
[0148]
(1)样品设置方式
[0149]
本实验组参照实验组1的对照样品a1、实验样品b1、实验样品c1、实验样品d1，将槐花的添加量调整为40mg，分别设置本实施例的对照样品a3、实验样品b3、实验样品c3、实验样品d3，在实验组3中，对照样品a3、实验样品b3、实验样品c3和实验样品d3中，芦丁总含量为1mg/25ml。
[0150]
(2)实验结果
[0151]
图3展示了本测试例实验组3所述设置的样品在静置一周后的情况，在图3中，按照位置顺序依次为：右1，对照样品d3；右2，对照样品a3；左2，实验样品b3；左1，实验样品c3。如图3所示，本实验组的对照样品a3(图3右2)、实验样品b3(图3左2)、实验样品c3(图3左1)和对照样品d3(图3右1)均无明显沉淀析出，原因可能是芦丁含量减少到适宜的溶解度范围，在室温下析出时间延长。
[0152]
以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非对本发明保护范围的限制，尽管参照上述实施例对本发明进行了详细的说明，所属领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，但这些修改或替换均在本发明的保护范围之内。