一种具有提高免疫力功能的罗伊氏粘液乳杆菌GloryLR15组合物及其制备方法与流程

本发明属于微生物菌剂，具体涉及一种具有提高免疫力功能的罗伊氏粘液乳杆菌glory lr15组合物及其制备方法。

背景技术：

1、免疫力是机体识别和消灭外来侵入异物（病毒、细菌等），处理衰老、损伤、死亡、变性、突变、病毒感染等细胞的能力，是机体排除“异己”的生理反应，更是机体自身的一种防御机制。正常机体在免疫系统的作用下，突变的细胞会被抑制和分解。但对于免疫力低下的人群来说，由于免疫活性细胞不能识别突变细胞，致使突变细胞无序繁殖，最终导致疾病产生。特别是儿童，由于其生理结构和功能发育的不完善，更容易受到环境病原体及家长为了“预防感染”而给孩子使用抗生素所带来的不良影响，需要借助外来的免疫制剂来提高对某些疾病的抵抗能力。因此，提高身体免疫力，预防生物性因子或变态反应感染，找到副作用少的较安全的微生态食品，已成为当今迫切解决的一个话题。

2、随着人们生活节奏的加快，由于饮食营养不均、工作压力大、缺乏运动等，出现了体质虚弱、营养不良 、免疫力低下等现象。通常通过补充各种维生素、氨基酸来进行治疗，但是停用后，免疫力又会降低，尤其是对于儿童来说，生理结构和功能发育不完善，更易受到病原菌的攻击，并且容易发生食物过敏。

3、人体的免疫系统约70%存在于肠道，且机体大量的免疫细胞如t细胞、b细胞、nk细胞等均集中在肠道粘膜，肠道是免疫的第一道防御系统。肠道作为营养物质消化吸收、微生物定殖和免疫细胞聚集的场所，促进了三者之间的互作。正常肠道菌群在促进免疫系统发育，维持正常免疫功能，协同拮抗病原菌入侵方面，发挥着重要作用。因此，当肠道菌群紊乱时，人体的抵抗力变差则容易受到病菌的攻击，增加感染流感、感冒、肠胃炎等疾病的患病率。

4、益生菌能够通过占位效应、营养竞争、分泌抑菌或杀菌物质、产生有机酸，刺激分泌型免疫球蛋白分泌等阻止致病菌及毒素黏附，抑制或抵抗致病菌和其他微生物生长，从而改善菌群失调。通过构成生物屏障，防止肠道有害细菌和内毒素移位，益生菌还能合成人体所需的130多种维生素。益生菌可以通过抑制病原微生物的生长来平衡局部微生物群，或通过分泌各种酶和酸来刺激肠道黏膜和肠上皮细胞代谢，进而增强局部和全身免疫反应。因此，或许可从肠道微生物入手，尝试找到调节免疫力的新方法，以克服现有治疗药物以及治疗方法副作用的缺陷。

5、中国专利申请号为202211522999.7公开了一种提高免疫力的罗伊式乳杆菌ll029及其应用，该罗伊式乳杆菌ll029具有良好的耐胃肠液、耐胆盐的性能，可以有效地维持宿主机体免疫平衡，提高宿主的免疫力，同时可用于制备调节机体免疫力的食品或者药物。但该专利中仅使用单一菌株——罗伊式乳杆菌，其对免疫力的改善有限，还有待进一步提高的空间。

技术实现思路

1、针对现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种具有提高免疫力功能的罗伊氏粘液乳杆菌glory lr15组合物及其制备方法。

2、为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

3、一种具有提高免疫力功能的罗伊氏粘液乳杆菌glory lr15组合物，所述罗伊氏粘液乳杆菌glory lr15组合物由益生菌冻干粉和功能提取物组成，所述益生菌冻干粉由罗伊氏粘液乳杆菌glory lr15冻干粉、副干酪乳杆菌glory lp16冻干粉、鼠李糖乳杆菌glorylg12冻干粉和格氏乳杆菌冻干粉混合而成，所述功能提取物由仙人掌提取物、刺五加提取物和燕麦β-葡聚糖组成。

4、优选的，所述罗伊氏粘液乳杆菌glory lr15冻干粉、副干酪乳杆菌glory lp16冻干粉、鼠李糖乳杆菌glory lg12冻干粉和格氏乳杆菌冻干粉的质量比为10-15:5-7:6-8:2-4。

5、优选的，所述仙人掌提取物、刺五加提取物和燕麦β-葡聚糖质量比为30-40:20-30:10-20。

6、优选的，所述仙人掌提取物的制备方法如下：

7、将仙人掌洗净后捣碎，加入去离子水，接着加入柠檬酸，进行水提，水提完成后过滤，得到水提液和滤渣，水提液减压浓缩至体积的1/3后，加入4倍体积的无水乙醇进行醇沉，离心后去除上清液，将沉淀干燥，得到水提物；将滤渣加入质量分数为80%的乙醇溶液中，进行超声提取，抽滤，减压蒸馏去除溶液，减压蒸馏的压力为40kpa-50kpa，温度为75-80℃，得到醇提物；将水提物与醇提物混合均匀，即得。

8、优选的，所述仙人掌、去离子水、柠檬酸的质量比为10:150-200:1-2，所述水提温度为70-80℃，时间为1-2h；所述滤渣、乙醇溶液的料液比为1:12-18；所述超声提取的温度为60-70℃，时间为30-50min，超声功率为200-300w；所述水提物与醇提物的质量比为5:1-3。

9、优选的，所述刺五加提取物的制备方法如下：

10、将刺五加粉碎过60目筛，加入去离子水中，调节ph至4.5-5.5，接着加入纤维素酶和β-葡萄糖苷酶，进行酶解，酶解完成后过滤，将滤渣干燥后，得到预处理刺五加粉；将预处理刺五加粉加入体积分数为70%的乙醇溶液中，随后加入卵磷脂，进行醇提，醇提完成后过滤，得到滤液；将滤液进行减压浓缩去除溶剂，减压浓缩的压力为40kpa-50kpa，温度为75-80℃，即得。

11、优选的，所述刺五加、去离子水的质量比为10:70-100，所述纤维素酶的用量为刺五加质量的0.3-0.6%，所述β-葡萄糖苷酶的用量为刺五加质量的0.2-0.4%，所述酶解温度为30-35℃，时间为2-3h。

12、优选的，所述预处理刺五加粉与乙醇溶液的料液比为1:10-15，所述卵磷脂的用量为预处理刺五加粉质量的0.5-1%，所述醇提温度为55-65℃，时间为2-3h。

13、优选的，所述罗伊氏粘液乳杆菌glory lr15组合物中益生菌冻干粉的含量为25-35wt%。

14、本发明还保护一种如上所述具有提高免疫力功能的罗伊式粘液乳杆菌glorylr15组合物在制备增强免疫力功能产品中的应用。

15、与现有技术相比，本发明具有如下的有益效果：

16、（1）本发明提供的具有提高免疫力功能的罗伊氏粘液乳杆菌glory lr15组合物，加入的益生菌冻干粉由罗伊氏粘液乳杆菌glory lr15冻干粉、副干酪乳杆菌glory lp16冻干粉、鼠李糖乳杆菌glory lg12冻干粉和格氏乳杆菌冻干粉混合而成，其中，glory lr15对胃肠道环境具有较好的耐受能力，对人工胃液、肠液和胆盐都有一定的耐受性；鼠李糖乳杆菌glory lp16在胃酸和胆汁的低ph条件下具有很强的存活和繁殖能力，易于定植，并在肠道中发挥作用，具有很高的免疫活性；副干酪乳酪杆菌glory lp16是一种具有益生菌特性的菌株，摄入副干酪乳酪杆菌会通过调节细胞因子的分泌、降低促炎细胞因子活性，以达到降低肠道应激综合征免疫激活的作用，同时，副干酪乳酪杆菌可分解蛋白质生成小分子肽，在降血压、抗胆固醇、抗氧化等方面发挥着重要作用；上述四种菌株共同作用，相比于单株益生菌，具有更好的改善免疫力的功效，同时辅以功能提取物，不仅可以促进益生菌的增殖，还可抑制某些有害细菌，提高益生菌在肠道内的定植，从而增进人体健康。

17、（2）本发明提供的具有提高免疫力功能的罗伊氏粘液乳杆菌glory lr15组合物，加入的仙人掌提取物，将水提物中的主要物质多糖与醇提物中的主要物质如异鼠李素和槲皮素的葡萄糖甙、异槲皮甙和三萜化合物进行复配，其具有免疫调节、抗氧化、抗炎、保肝、抗肿瘤、降血脂血糖等功效；加入的刺五加提取物，先将刺五加进行酶解处理，可有效提高刺五加中刺五加多糖、萜类、木脂素类、黄酮类和香豆素类等活性物质的含量和提取率，其活性成分可在增强机体免疫力的同时发挥抗炎作用，同时提取过程中加入卵磷脂作为表面活性，可以起到增溶作用，进一步提高了活性物质的提取率；加入的燕麦β-葡聚糖具有减肥、降糖、降脂、改善心血管疾病、抗肿瘤、提升免疫力等多种健康功效，可与仙人掌提取物、刺五加提取物共同提高免疫力，同时还可促进益生菌的增殖。

18、（3）本发明提供的具有提高免疫力功能的罗伊氏粘液乳杆菌glory lr15组合物，通过益生菌冻干粉和功能提取物之间的协同作用，可提高益生菌在肠道内的增殖，调节肠道内的菌群，进而增强人体免疫力，益生菌冻干粉与功能提取物相辅相成，使罗伊氏粘液乳杆菌glory lr15组合物增强由环磷酰胺免疫抑制小鼠的体液免疫功能，显著改善了小鼠的免疫力。