专利名称：细菌芽孢染色纸片及其使用方法
技术领域：
本发明属于一种微生物检验试品，特别是鉴定芽孢杆菌科细菌的试品。
在微生物检验工作中，细菌芽孢染色是鉴定芽孢杆菌不可缺少的重要步骤。过去我国微生物实验室均采用液体染液进行染色。此种染液一旦放置时间稍长，容易干涸并析出沉淀物，需过滤后使用、或作废，因此染液的配制、贮存和运输都给检验工作带来许多不便，尤其对类脂含量高、含水量低和外膜通透性差的芽孢，用常规方法不易着色，必须采用特殊的方法。
本发明的目的是提供一种细菌芽孢染色纸片及其使用方法，以替代染液，它能有效地避免上述不足。
本发明的技术方案是1、纸片的组成及制法将孔雀绿纸溶液吸附到定性滤纸上，晾干，制成孔雀绿纸片;将番红溶液吸附到定性滤纸上，晾干，制成番红纸片。
2、使用方法芽孢染色用菌种，共7株蜡样芽孢杆菌由沈阳市防疫站中心实验室供给;
蜡样芽孢杆菌S-1变种由辽宁省防疫站细菌病科供给;
枯草芽孢杆菌由辽宁省卫生防疫站细菌病科供给;
短小芽孢杆菌中国科学院微生物研究所二室供给;
产气荚膜梭菌辽宁省防疫站细菌病科供给;
苏云金芽孢杆菌东北农学院微生物教研组供给;
环状芽孢杆菌哈尔滨防疫站微生物科供给。
将上述7株菌，在37℃中，经48小时培养，同时用染液和本发明对比作芽孢染色2.1 使用染液作芽孢常规染色法将上述菌种制成涂抹标本，火焰固定后，首先用5%孔雀绿溶液，在微火焰上加温染色3分钟，冷却后水洗，用吸水纸吸干。再滴加0.5%番红溶液30-60秒，然后水洗、干燥、油浸、镜验。
结果芽孢染成绿色，菌体染成红色。
2.2 使用本发明染色法2.2.1 细菌培养物涂片，火焰固定;
2.2.2 将孔雀绿纸片放在涂抹标本面上，加灭菌蒸馏水2-3滴，使纸片润湿，在微火焰上加温染5-6分钟，冷却后水洗;
2.2.3 将番红纸片放在涂抹标本面上，加灭菌蒸馏水1-2滴，染色40-60秒，水洗;
2.2.4 干燥、油浸、镜验。
结果与2.1常规方法相同，即芽孢染成绿色，菌体染成红色。
本发明与现有技术相比，具有使用方便，便于贮存、运输等优点。
下面给出一个实施例。
定性滤纸新华造纸厂生产。
孔雀绿由沈阳市试剂厂生产。
番红北京化工厂生产。
将9%孔雀绿和0.8%番红溶液分别吸附到定性滤纸上，置暗处晾干，制成孔雀绿纸片和番红纸片，然后裁成2.5cm×1.5cm规格的长方形纸片，两种纸片分别盛入褐色玻璃瓶内，密封，放在干燥处贮存、备用，初步观察，一年有效。
权利要求
1.一种细菌芽孢染色纸片，有孔雀绿溶液和番红溶液，其特征是将孔雀绿溶液吸附到定性滤纸上，晾干，制成孔雀绿纸片，将番红溶液吸附到定性滤纸上，晾干，制成番红纸片。
2.一种使用按照权利要求1所述的染色纸片对芽孢染色的方法，其特征是(1)、细菌培养物涂片，火焰固定;(2)、将孔雀绿纸片放在涂抹标本面上，加灭菌蒸馏水2-3滴，使纸片润湿，在微火焰上加温染5-6分钟，冷却后水洗;(3)、将番红纸片放在涂抹标本面上，加灭菌蒸馏水1-2滴，染色40-60秒，水洗;(4)、干燥、油浸、镜验。
全文摘要
本发明提供一种细菌芽孢染色纸片及其使用方法，其技术要点是将孔雀绿溶液和番红溶液吸附到定性滤纸上，晾干，制成孔雀绿纸片和番红纸片。使用方法是将孔雀绿纸片和番红纸片先后放在涂抹本面上，加灭菌蒸馏水，使纸片湿润，加热后再冷却，水洗，最后干燥、油浸、镜验。本发明克服了染液不便贮存、不便配制和不便检验的缺点，它适合于微生物实验室里使用。
文档编号C12Q1/00GK1062551SQ90106478
公开日1992年7月8日 申请日期1990年12月18日 优先权日1990年12月18日
发明者韩桂荣, 朴文芝, 杜晓岚, 汪芹, 于柏英, 陈刚, 王玉, 李延军 申请人:沈阳市皇姑区卫生防疫站