专利名称：含有木葡聚糖酶的洗衣和清洗组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及包含具有木葡聚糖酶活性的酶的洗衣和清洗组合物。
背景技术：
如先前在Novo Nordisk的1994年7月7日公布的WO94/14953所述，内葡聚糖酶(EC编号3.2.1.4)构成了一组水解酶，它们能催化纤维素、纤维素衍生物(例如羧甲基纤维素和羟乙基纤维素)、地衣多糖、混合的β-1，3-葡聚糖(例如谷物β-D-葡聚糖或木葡聚糖)中的β-1，4-键和其他含纤维素成分的植物材料中的1，4-β-D-配糖键的内水解。它被指定的名称是内-1，4-β-D-葡聚糖4-葡聚糖水解酶，但也使用它的缩写术语内葡聚糖酶。
已发现内葡聚糖酶可由各种类型的诸如植物和微生物的有机体产生，并且据说已确认内葡聚糖酶有各种特异性。例如，在各种植物中已发现了对木葡聚糖特异性的内葡聚糖酶，参见例如Fry等的生物化学杂志(Biochem.J.)(1992)，第282卷，821-828页，Nishitani和Tominaga，生物化学杂志(The Journal of Biol.Chemistry)(1992)，第267卷，29号，21058-21064页，Hayashi等，植物生理学(Plant Physiol)(1984)，第75卷，605-610页，McDougall和Fry，植物生理学杂志(J.Plant Physiol)(1991)，第137卷，332-336页，和WO93/17101中的内容。已发现所有这些酶具有转移酶活性(例如由Fry等，1992年和Nishitani等，1992年定义的)，因此据说不被分类为真正的内葡聚糖酶。另外，微生物体中的对木葡聚糖特异性的内葡聚糖酶描述在WO94/14953中。其中，一般性地陈述了“具有高木葡聚糖降解活性的内葡聚糖酶可具有降解含有高含量木葡聚糖的细胞壁材料的特殊用途，例如应用于葡萄酒和水果工业，用于提取果胶和用于从织物纤维中去除半纤维素”。具体而言，关于最后这个性质是这些酶用于制备织物纤维的用途“植物纤维诸如棉、亚麻、大麻和黄麻在它们应用于纺织品之前必须从中除去诸如木葡聚糖的半纤维素。为达到这个目的，II型内葡聚糖酶[即，对木葡聚糖特异性的酶]具有优势，具体而言，其能除去木葡聚糖而不损坏纤维素。该内葡聚糖酶可单独使用或与其他对纤维的果胶物质有活性的酶(例如果胶酶)一起使用。”“另外，本发明的内葡聚糖酶和其类似物可用于处理纤维素纤维或富含纤维素纤维的材料。该内葡聚糖酶可用于例如造纸工业来改善纸浆排水和处理织物例如棉织物，以得到更光滑的织物。”[第12页]。
本发明的目的是提供含有具有指定木葡聚糖酶活性水平的酶的洗衣和清洗组合物。通过本文的详细描述，这些和其他目的将显而易见。
背景文献参见Fry等，生物化学杂志(Biochem.J)(1992)，第282卷，821-828页，Nishitani和Tominaga，生物化学杂志(The Journalof Biol.Chemistry)(1992)，第267卷，29号，21058-21064页，Hayashi等，植物生理学(Plant Physiol)(1984)，第75卷，605-610页，McDougall和Fry，植物生理学杂志(J.Plant Physiol)(1991)，第137卷，332-336页，WO93/17101和WO94/14953。还参见US5356803，II型内糖苷酶(内-D，内-H，内-F和PNGaseF)在洗衣和清洗组合物中的应用。
发明概述本发明涉及洗衣或清洗产品，其包含按该组合物的重量计，优选约0.001％-1％，更优选约0.01％-0.5％的一种或多种对木葡聚糖表现出特异的内葡聚糖酶活性的酶。本发明还涉及洗涤织物(优选衣服)的方法，该方法包括将需要清洗的织物与含有有效量的一种或多种对木葡聚糖表现出特异的内葡聚糖酶活性的酶的水溶液接触，优选与根据本发明组合物的水溶液接触。本发明还涉及清洗盘和餐具的方法，该方法包括将需要清洗的盘或餐具与含有有效量的一种或多种对木葡聚糖表现出特异的内葡聚糖酶活性的酶的水溶液接触，优选与根据本发明组合物的水溶液接触，更优选在自动洗餐具机中接触。
本文使用的术语“内葡聚糖酶活性”意思是酶水解存在于任何纤维素材料例如纤维素、纤维素衍生物、地衣多糖、β-D-葡聚糖或木葡聚糖中的1，4-β-D-配糖键的能力。内葡聚糖酶活性可根据本领域公知的方法来测定，其实例描述在WO94/14953和下文中。一单位的内葡聚糖酶活性(例如CMCU，AVIU，XGU或BGU)被定义为从葡聚糖基质中产生1μmol还原糖/分钟，葡聚糖基质是例如CMC(CMCU)，酸溶胀的微晶纤维素(AVIU)，木葡聚糖(XGU)或谷物β-葡聚糖(BGU)。还原糖按WO94/14953和下文中描述的方法测定。内葡聚糖酶对基质的比活性被定义为单位/毫克蛋白。
更具体而言，本发明涉及包含表现出为其最大活性的XGU内葡聚糖酶活性(下文“对木葡聚糖特异的”)的酶的洗衣和清洗组合物，其中酶i)由包含或包括在至少一种以下部分序列中的DNA序列或编码具有内葡聚糖酶活性的对木葡聚糖有特异性的多肽的同源序列编码(a)ATTCATTTGT GGACAGTGGA C(SEQ ID No1)(b)GTTGATCGCA CATTGAACCA(SEQ ID NO2)(c)ACCCCAGCCG ACCGATTGTC(SEQ ID NO3)(d)CTTCCTTACC TCACCATCAT(SEQ ID NO4)(e)TTAACATCTT TTCACCATGA(SEQ ID NO5)(f)AGCTTTCCCT TCTCTCCCTT(SEQ ID NO6)(g)GCCACCCTGG CTTCCGCTGC CAGCCTCC(SEQ ID NO7)(h)GACAGTAGCA ATCCAGCATT(SEQ ID NO8)(i)AGCATCAGCC GCTTTGTACA(SEQ ID NO9)j)CCATGAAGTT CACCGTATTG(SEQ ID NO10)(k)GCACTGCTTC TCTCCCAGGT(SEQ ID NO11)(l)GTGGGCGGCC CCTCAGGCAA(SEQ ID NO12)(m)ACGCTCCTCC AATTTTCTCT(SEQ ID NO13)(n)GGCTGGTAG TAATGAGTCT(SEQ ID NO14)(o)GGCGCAGAGT TTGGCCAGGC(SEQ ID NO15)(p)CAACATCCCC GGTGTTCTGG G(SEQ ID NO16)(q)AAAGATTCAT TTGTGGACAG TGGACGTTGA TCGCACATTGAACCAACCCC AGCCGACCGATTGTCCTTCC TTACCTCACC ATCATTTAAC ATCTTTTCAC CATGAAGCTTTCCCTTCTCTCCCTTGCCAC CCTGGCTTCC GCTGCCAGCC TCCAGCGCCG CACACTTCTGCGGTCAGTGGGATACCGCCA CCGCCGGTGA CTTCACCCTG TACAACGACC TTTGGGGCGAGACGGCCGGCACCGGCTCCC AGTGCACTGG AGTCGACTCC TACAGCGGCG ACACCATCGCTTGTCACACCAGCAGGTCCT GGTCGGAGTA GCAGCAGCGT CAAGAGCTAT GCCAACG(SEQ ID NO17)或(r)CAGCATCTCC ATTGAGTAAT CACGTTGGTG TTCGGTGGCCCGCCGTGTTG CGTGGCGGAGGCTGCCGGGA GACGGGTGGG GATGGTGGTG GGAGAGAATGTAGGGCGCCG TGTTTCAGTCCCTAGGCAGG ATACCGGAAA ACCGTGTGGT AGGAGGTTTA TAGGTTTCCAGGAGACGCTGTATAGGGGAT AAATGAGATT GAATGGTGGC CACACTCAAA CCAACCAGGTCCTGTACATACAATGCATAT ACCAATTATA CCTACCAAAA AAAAAAAAAAAAAAAAAAAA AAAA(SEQ ID NO18)ii)对由i)中定义的DNA序列编码并得自于棘孢曲霉，CBS101.43的高纯化内葡聚糖酶产生的抗体呈免疫反应性和对木葡聚糖有特异性。
更具体而言，本文使用的术语“对木葡聚糖特异的”意思是内葡聚糖酶对木葡聚糖基质表现出其最大内葡聚糖酶活性，和对其他含纤维素基质例如羧甲基纤维素、纤维素或其他葡聚糖表现出优选低于75％活性，更优选低于50％活性，最优选低于约25％活性。
优选，内葡聚糖酶对木葡聚糖的特异性还被定义为分别在用木葡聚糖培育酶得到的最佳条件和被测试的其他基质下按释放的还原糖确定的相对活性。例如，特异性可被定义为木葡聚糖相对β-葡聚糖的活性(XGU/BGU)，木葡聚糖相对羧甲基纤维素的活性(XGU/CMCU)，或木葡聚糖相对酸溶胀的微晶纤维素活性(XGU/AVIU)，其优选大于约50，例如75、90或100。
本文使用的术语“得自于”不仅是指由菌株CBS101.43产生的内葡聚糖酶，而且还指由从菌株CBS101.43中分离出的DNA序列编码并在用所说的DNA序列转化的宿主有机体中产生的内葡聚糖酶。
本文使用的术语“同系物”表示由DNA编码的多肽，所述DNA杂交至与在某些规定条件下(例如预浸泡在5×SSC中，和在-40℃下的5×SSC、5×Denhardt溶液和50μg变性声处理的牛胸腺DNA溶液中预杂交1小时，然后在补充以50μCi 32-P-dCTP标记的探针的相同溶液中，在-40℃下杂交18小时并在40℃下，2×SSC，0.2％SDS中，洗涤三次，进行30分钟)编码对木葡聚糖特异性的内葡聚糖酶的DNA相同的探针。更具体而言，该术语意思是指与以上所示的编码对木葡聚糖特异性的内葡聚糖酶的任何序列有至少70％同源的DNA序列，包括与以上所示的任何序列至少75％，至少80％，至少85％，至少90％或甚至至少95％同源。该术语意思是包括对以上所示的任何DNA序列的修饰，例如不产生由该序列编码的多肽的另一氨基酸序列的核苷酸取代，而其相当于包含任何DNA序列的DNA结构注入的宿主有机体的密码子应用，或产生不同的氨基酸序列和由此可能产生不同的氨基酸序列和由此可能产生不同的蛋白质结构的核苷酸取代，其可能产生与天然酶具有不同性质的内葡聚糖酶突变体。可能的修饰的其他实例是一个或多个核苷酸插入序列中，在序列末端之一处加入一个或多个核苷酸，或在序列末端之一或序列中缺失一个或多个核苷酸。
除非另外说明，本文使用的所有份数、百分数和比例是按重量百分数表示。本文引用的所有文献、专利或其他文献的相关部分或全部在本文引用作参考。
发明详述对木葡聚糖特异性的内葡聚糖酶在本文已被确认为它们的清洗性质在洗衣和清洗组合物中特别有用。
在本发明中有用的对木葡聚糖特异性的内葡聚糖酶优选是具有XGU/BGU，XGU/CMU和/或XGU/AVIU比(如以上定义)大于50，例如75、90或100的一种内葡聚糖酶。
另外，对木葡聚糖特异性的内葡聚糖酶当对木葡聚糖的活性为100％时，优选基本上对β-葡聚糖无活性和/或对羧甲基纤维素和/或微结晶纤维素表现出最多25％，例如最多10％或约5％的活性。此外，本发明对木葡聚糖特异性的内葡聚糖酶优选基本上无转移酶活性，观察到对植物源的木葡聚糖特异性的大多数内葡聚糖酶具有该活性。
对木葡聚糖特异性的内葡聚糖酶可由如在WO94/14953中描述的霉菌种棘孢曲霉得到。对木葡聚糖特异性的微生物内葡聚糖酶也描述在WO94/14953中。对由植物得到的木葡聚糖特异性的内葡聚糖酶也有所描述，但这些酶具有转移酶活性，因此无论何时需要彻底降解木葡聚糖时，其都被认为次于对木葡聚糖特异性的微生物内葡聚糖酶。微生物酶的另一优点是，一般，它们在微生物宿主中比其他来源的酶可以更高的量产生。
本发明酶可通过一般方法分离，包括-在适当载体中克隆来自曲霉属菌种类的DNA库，-用所说的载体转化适当的酵母宿主细胞，-在适当的条件下培养宿主细胞，以表达由DNA库中的一个克隆编码的有兴趣的任何酶，和-通过测定由这种克隆产生的酶的任何内葡聚糖酶活性来筛选阳性克隆。
这种筛选方法的更详细描述公开在WO94/14953。
编码该酶的DNA序列例如可通过筛选棘孢曲霉，例如菌株CBS101.43的cDNA库(公众可从Centraalbureau voorSchimmelcultures得到)并选择表达具有水解含有葡萄糖的聚合物(例如纤维素、谷物β-葡聚糖或木葡聚糖)中的两个葡萄糖分子间的β-1，3和/或β-1，4键能力的酶的克隆来分离。然后可通过例如WO94/14953，实施例1中描述的标准步骤从克隆中分离适当的DNA序列。期望编码同源酶的DNA序列可通过类似筛选另一微生物体的cDNA库得到，所述另一微生物体特别是霉菌，例如曲霉属菌株，特别是棘孢曲霉或黑色曲霉，木霉属菌株，特别是T.harianun，T.reesie，镰孢属菌株，特别是尖孢镰孢，或腐质霉属菌株。
另外，编码本发明内葡聚糖酶的DNA可根据公知的步骤，通过使用基于本文公开的DNA序列制备的寡核苷酸探针，例如20mer探针，方便地从上述的任何有机体得到的DNA中分离。例如，适合的寡核苷酸探针可以例如基于在WO94/14953中所列的任何部分核苷酸序列a)-p)来制备。
该DNA序列然后可植入重组表达载体中。该载体可以是方便地经受重组DNA步骤的任何载体，载体的选择通常取决于其注入的宿主细胞。因此，载体可以是自发复制的载体，即载体作为染色体外的实体存在，它的复制与染色体的复制无关，例如质粒。另外，载体可以是当引入宿主细胞时结合到宿主细胞染色体组中并与其结合的染色体一起复制的一种载体。
在载体中，编码对木葡聚糖特异性的内葡聚糖酶的DNA序列应当与适合的启动子和终止子序列可操作地连接。启动子可以是在选择的宿主细胞中表现出转录活性的任何DNA序列，其可从编码与宿主细胞同源或异源的蛋白质的基因得到。用于结扎分别编码内葡聚糖酶、启动子和终止子的DNA序列的方法和将它们植入适合的载体中的方法是本领域技术人员公知的(参考例如Sambrook等，分子克隆实验室手册，(Molecular Cloning.A Laboratory Manual)，Cold SpringHarbor，NY1989)。
用编码适用于本发明组合物的酶的DNA序列转化的宿主细胞优选是真核细胞，特别是霉菌细胞例如酵母或丝状霉菌细胞。特别是，该细胞可属于曲霉菌种，最优选是米曲霉或黑色曲霉。霉菌细胞可用包括原生质体形成和原生质体转化的方法来转化，然后用本领域公知的方法再生细胞壁。曲霉作为宿主微生物的应用描述在EP238023(NovoNordisk A/S)。宿主细胞还可以是酵母细胞，例如糖酵母菌株，特别是啤酒糖酵母。
用于培育转化的宿主细胞的介质可以是任何常规的适合于生长所讨论的宿主细胞的介质。被表达的对木葡聚糖特异性的内葡聚糖酶可方便地分泌到培养基中并可用公知的方法从中回收，包括通过离心或过滤从介质中分离细胞，通过盐例如硫酸铵沉淀介质中的蛋白成分，然后通过层析方法例如离子交换层析、亲和层析等。
这样纯化的内葡聚糖酶可用于动物的免疫，用于产生抗体。更具体而言，根据N.Axelsen等在定量免疫电泳手册(A Manual ofQuantitative Immunoeletrophoresis)，Blackwell科技出版物，1973，第23章或A.Johnstone和R.Thorpe，免疫化学实践(Immunochemistry in Practice)，Blackwell科技出版物，1982(更具体是第27-31页)中描述的方法，通过使兔(或其他啮齿类)免疫可提高抗对木葡聚糖特异性的内葡聚糖酶的抗血清。纯化的免疫球蛋白可由抗血清得到，例如通过盐析沉淀((NH4)2SO4)，然后通过透析和离子交换层析例如于DEAE-Sephadex上。蛋白的免疫化学表征可通过乌赫特朗尼氏双扩散分析(O.Ouchterlony在实验免疫学手册(Handbook of Experimental Immunology)(D.M.Weir编辑)，Blackwell科技出版物，1967，第655-706页的文章)，交叉免疫电泳(N.Axelsen等，超(supra)，第3和4章)或火箭免疫电泳(N.Axelsen等，第2章)中的任何一种方法来进行。
用于本发明组合物的对木葡聚糖特异性的内葡聚糖酶可制成基本上不含其他植物细胞壁降解酶。这使得该酶可单独使用或与其他酶例如半乳聚糖酶和木聚糖酶一起使用，得到用于特殊应用的酶的最佳组合。因此可以设计酶组合物，其只能降解植物细胞的特定部分。
用于本发明组合物的酶制剂可根据现有技术公知的方法来制备，其可以是液体或干制剂形式。例如，酶制剂可以是颗粒或微颗粒形式。包括在制剂中的酶还可以根据本领域公知的方法来稳定。
用于本发明组合物的酶制剂除了含有对木葡聚糖特异性的内葡聚糖酶外，还含有一种或多种其他洗涤剂酶和/或其他植物细胞壁降解酶，例如具有解纤维素、解木聚糖或解果胶糖活性的那些，例如木聚糖酶、阿拉伯聚糖酶、鼠李半乳糖醛酸酶、果胶乙酰酯酶、半乳聚糖酶、聚半乳糖醛酸酶、果胶裂合酶、果胶酸盐裂合酶、内-葡聚糖酶或果胶甲基酯酶。其他的酶可通过属于曲霉属，优选黑色曲霉、棘孢曲霉、泡盛曲霉或米曲霉的微生物来生产。试验方法标准培育为了表征酶，在包含1ml基质(由MegaZyme，澳大利亚得到的AZCL-木葡聚糖基质或纯的多糖)的Eppendorf试管中进行培育。将0.5ml的0.4％AZCL-基质悬浮液与具有最佳pH的0.5ml 0.1M柠檬酸盐/磷酸盐缓冲液混合，并加入10μl适当稀释的酶溶液。在Eppendorf Theromixers中于30℃下培育15分钟(若没有另外说明)，然后在95℃下热-失活20分钟。酶的培育重复进行三次。制备空白试验，其中加入酶，但立即失活。离心之后，在620nm处，在微量滴定板上测定上清液的吸收并减去空白。
测定酶对不同的纯多糖的活性由MegaZyme得到的木葡聚糖和β-葡聚糖(AZCL-木葡聚糖和AZCL-HE纤维素)，CMC(由Aqualon得到的Blanose)和Avicell(由Merck得到的微晶纤维素)。在使用前，Avicell于室温下在85％正磷酸中溶胀1小时，并用丙酮和水洗涤。在具有最佳pH的0.1M乙酸盐缓冲液(若没有另外说明)中制备不同基质的0.5％溶液/悬浮液，向1ml基质中加入10μl酶溶液，如以上所述，在热失活之前，在30℃下培育15分钟。在微量滴定板上通过与PHBAH反应试剂反应来测定还原糖，其中PHBAH试剂包含0.15g对羟基苯甲酸酰肼(Sigma H-9882)、0.50g酒石酸钾钠(Merck8087)和2％NaOH溶液至10.0ml。减去空白结果。使用葡萄糖作为标准。
对由MegaZyme得到的基质(用于下文描述的酶作用于AZCL-木葡聚糖的EG II，作用于纯β-葡聚糖的EG III，和作用于AZCL-β-葡聚糖的EG IV)测定最佳pH。将0.5ml的0.4％基质与具有不同pH的0.5ml 0.1M柠檬酸盐/磷酸盐缓冲液混合，并加入10μl适当稀释的酶溶液。按上述进行培育。虽然用于本发明的酶可具有与本发明组合物或清洗方法的pH相匹配所需的任何pH范围的最佳pH，但用于本发明的酶优选在pH约6-11，优选7-11，更优选约8-约10.5范围内有活性。
在最佳pH下，在0.1M乙酸盐缓冲液中，按以上测试不同酶对不同AZCL-基质的特异性。
于最佳pH下，在酶用于培育AZCL-β-葡聚糖之前，将酶在具有不同pH的0.1M柠檬酸/磷酸三钠缓冲液中放置1小时来测定pH稳定性。
在最佳pH下，在不同的温度下，用AZCL-β-葡聚糖基质培育酶15分钟来测定最佳温度。
于30℃下用相关基质培育之前，在各种温度下，将稀释在水中的酶放置1小时来测定对温度的稳定性。
在基质浓度范围0.025-1.5％下(下文用于EG II的木葡聚糖和用于EG IV的β-葡聚糖)进行培育来测定Km和特异活性，测定反应速率(v)，图S/v为S的函数，进行线性回归分析，找到斜率(＝1/V最大)和截距(Km/V最大)，并计算Km和特异活性(＝V最大/E)，其中E是加入的酶的量。
制备上述的纯多糖的1％溶液/悬浮液，用于凝胶过滤层析。加入适当量的酶，并在热失活之前培育0、1、2、4和24小时。将25μl样品注入在一排的三个TSK-柱中(PW G4000，PW G3000，PW G2500)，用pH3.0的0.4M乙酸盐缓冲液以0.8毫升/分钟速度洗脱糖化物。用Shimadzu RI检测器测定洗脱的糖化物，收集数据并通过Dionex软件处理。使用葡聚糖(从Sersa得到)作为分子量标准。基质特异性相对于最佳基质(100％)，按从不同多糖中不同酶的还原糖释放来测定相对活性，其给在WO94/14953中并复写在下表中。酶EG II EG IIIEG IV微晶纤维素 1％0％ 3％CMC1％2％ 11％β-葡聚糖 0％100％100％木葡聚糖 100％ 31％ 0％由这些结果，不同内葡聚糖酶的特异性被表示为酶 EG II EG III EG IVXGU/BGU ∞0.310XGU/CMC 104 18 0XGU/AVIU114 ∞ 0BGU/XGU 0 3.2 ∞BGU/CMC 0 58 9.4BGU/AVIU0 ∞ 25对AZCL-基质测定的基质特异性结果还给在WO94/14953中，并复写在下表中酶 EG II EG III EG IVHE-纤维素 1％100％ 100％β-葡聚糖 0％36％56％木葡聚糖 100％ 33％1％Curdlan0％2％ 4％由该特异性结果可以看出，与EG III和EG IV相比，本文定义的用于本发明组合物的EG II对木葡聚糖有特异性，而其他两种内葡聚糖酶则不具有特异性。EG III对所有类型的基质都有活性，但其对木葡聚糖不具有最高活性，而EG IV不能降解木葡聚糖和对β-葡聚糖有非常好的特异性。(对还原糖和AZCL-基质所得到的结果有些不同。对此的一种解释是一些AZCL-基质比其他的更敏感。在这种情况下，AZCL-HE-纤维素似乎比AZCL-β-葡聚糖更敏感)。
EG II和EG III的Km和特异活性给在WO94/14953中。其中使用由线性回归分析得到的1/V最大和Km/V最大的标准偏差来计算酶的间隔，可见于下表中酶 基质 Km 特异活性 rΛ2％基质 单位/mgEG II 木葡聚糖 0.242-0.306106-119 0.98EG IIIβ-葡聚糖0.136-0.207165-186 0.98最佳温度和温度/pH稳定性-EG II和EG III具有类似的最佳温度(最佳活性在30℃-60℃之间)和温度稳定性(在高至60℃下稳定1小时)，但EG III在碱性pH条件下比EG II更稳定。
凝胶过滤层析其证实了基质特异性，表明了EG II完全将木葡聚糖降解成具有大约7-9个为公知的木葡聚糖重复亚单元的残基的低聚物(Fry，1989)。EG III将木葡聚糖降解至更低的程度，EG IV完全不降解木葡聚糖。EG III将β-葡聚糖较大程度地降解成DP3-4和高级低聚物。这与β-葡聚糖由成一排的3-4β-1，4-键合的葡萄糖单元组成，其中插有单一的β-1，3-键是一致的。清洗组合物组分和洗涤剂组合物本发明洗涤剂组合物含有下文描述的洗衣或清洗组合物组分。这些组分的准确性质和其掺入量将取决于组合物的物理形式和其用于的清洗操作的性质。
根据本发明的洗涤剂组合物可以是液体、膏、凝胶、条、片、粉末或颗粒形式。颗粒组合物还可以是“密实”形式，液体组合物还可以是“浓缩”形式。
本发明组合物例如可配制为手洗和机器用洗衣洗涤剂组合物，其包括洗衣添加剂组合物和适用于浸泡/预处理脏织物的组合物、漂洗时加入的织物柔软剂组合物。对织物的预处理或后处理包括凝胶、喷雾和液体织物调理组合物。
当配制适合用于洗衣机洗涤方法中的组合物时，本发明组合物优选含有表面活性剂和助洗剂化合物这两种组分和附加的一种或多种洗涤剂组分，该洗涤剂组分优选选自有机聚合物、漂白剂、附加酶、抑泡剂、分散剂、钙皂分散剂、污垢悬浮剂和抗再沉积剂和腐蚀抑制剂。洗衣组合物还可含有柔软剂，其作为附加的洗涤剂组分。
本发明组合物还可用作洗涤剂添加剂产品。这种添加剂产品是用来补充或促进常规洗涤剂组合物的性能。
若需要，在20℃下测定的本发明洗衣洗涤剂组合物的密度范围在400-1200g/l，优选600-950g/l组合物。
本发明组合物的“密实”形式由密度和，就组成而言，由无机填料盐的量得以最好地体现。无机填料盐是粉状洗涤剂组合物的常规组分。在常规洗涤剂组合物中，填料盐以显著的量存在，一般为总组合物重量的17-35％。
在密实组合物中，填料盐的含量不超过总组合物的15％，优选不超过10％，最优选不超过组合物重量的5％。
无机填料盐，例如在本发明组合物中所指的那些，选自碱金属和碱土金属硫酸盐和氯化物。
优选的填料盐是硫酸钠。
根据本发明的液体洗涤剂组合物还可以是“浓缩形式”，在这种情况下，根据本发明的液体洗涤剂组合物比常规液体洗涤剂将含有更低量的水。
一般浓缩液体洗涤剂的水含量，按洗涤剂组合物重量计，优选少于40％，更优选少于30％，最优选少于20％。表面活性剂优选，本发明的洗涤剂组合物包含表面活性剂或表面活性剂体系，其中表面活性剂可选自非离子型和/或阴离子型和/或阳离子型和/或两性和/或两性离子型和/或半极性表面活性剂。
表面活性剂一般含量为0.1％至60％重量，更优选的掺入量为本发明洗涤剂组合物重量的1％至35％，最优选1％-30％。
优选所配制的表面活性剂与本发明组合物中存在的酶组分相容。在液体或凝胶组合物中，配制的表面活性剂最好使得其促进或至少不降解这些组合物中的任何酶的稳定性。
适合的非离子、阴离子、阳离子、两性、两性离子和半极性非离子表面活性剂的实例公开在美国专利US5707950和US5576282中。
高度优选的非离子表面活性剂是下式的多羟基脂肪酸酰胺表面活性剂
R2-C(O)-N(R1)-Z其中R1是H，或R1是C1-4烃基、2-羟基乙基、2-羟基丙基或其混合物，R2是C5-31烃基，Z是具有直接连有至少3个羟基的直链烃基链的多羟基烃基，或其烷氧基化的衍生物。优选R1是甲基，R2是直链C11- 15烷基或C16-18烷基或链烯基例如椰子油烷基或其混合物，Z是在还原胺化反应中由还原糖例如葡萄糖、果糖、麦芽糖、乳糖得到。
高度优选的阴离子表面活性剂包括烷基烷氧基化硫酸盐表面活性剂，其是式RO(A)mSO3M的水溶性盐或酸，其中R是未取代的C10-C24烷基或具有C10-C24烷基部分的羟烷基，优选C12-C20烷基或羟烷基，更优选C12-C18烷基或羟烷基，A是乙氧基或丙氧基单元，m值大于0，一般在约0.5至约6之间，更优选在约0.5至约3之间，M是H或阳离子，其可以是例如金属阳离子(例如钠、钾、锂、钙、镁等)、铵或取代的铵阳离子。烷基乙氧基化硫酸盐以及烷基丙氧基化硫酸盐是本文期望的。
当含有它们时，本发明洗衣洗涤剂组合物典型地含有约1％至约40％，优选约3％至约20％重量这种阴离子表面活性剂。
用于本发明组合物的高度优选的阳离子型表面活性剂是水溶性季铵盐化合物，其具有下式R1R2R3R4N+X-其中R1是C8-C16烷基，每个R2、R3和R4独立地是C1-C4烷基、C1-C4羟烷基、苄基和-(C2H4O)xH，其中x值为2至5，X是阴离子。R2、R3、或R4中不多于一个应当是苄基。
当包含它们时，本发明洗涤剂组合物典型地含有0.2％至约25％，优选约1％至约8％重量这种阳离子表面活性剂。
当包含它们时，本发明洗涤剂组合物典型地含有0.2％至约15％，优选约1％至约10％重量这种两性表面活性剂。
当包含它们时，本发明洗涤剂组合物典型地含有0.2％至约15％，优选约1％至约10％重量这种两性离子表面活性剂。
当包含它们时，本发明洗涤剂组合物典型地含有0.2％至约15％，优选约1％至约10％重量这种半极性非离子表面活性剂。
本发明洗涤剂组合物还可包含选自伯或叔胺的辅助表面活性剂。
表1<
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用于本发明组合物最优选的胺是1-己胺、1-辛胺、1-癸胺、1-十二烷基胺。特别适合的是正十二烷基二甲基胺和二羟乙基椰子油烷基胺和7摩尔乙氧基化的油胺、月桂基酰氨基丙基胺和椰子油酰氨基丙基胺。
本发明表面活性剂和表面活性剂体系优选被配制成与含在组合物中的酶组分是相容的。在液体或凝胶组合物中，配制表面活性剂最好使得其促进或至少不降解这些组合物中的任何酶的稳定性。助洗剂本发明组合物还可包含助洗剂或助洗剂体系。任何常规的助洗剂体系都适用于本发明，包括硅铝酸盐物质、硅酸盐、多羧酸盐、烷基或链烯基琥珀酸和脂肪酸、以及例如乙二胺四乙酸、二亚乙基三胺五亚甲基乙酸盐的物质、金属离子螯合剂例如氨基聚膦酸盐，特别是乙二胺四亚甲基膦酸和二亚乙基三胺五亚甲基膦酸。磷酸盐助洗剂也可用于本发明。
本发明可包括适合的助洗剂或洗涤盐。洗涤剂盐/助洗剂的含量可根据组合物的最终用途和希望的物理形式在宽范围内变化。当存在时，本发明组合物典型地包含至少约1％助洗剂，更典型地是约10％-约80％，最典型地是约15％-约50％重量助洗剂。但不意味着排除较低或更高的含量。
无机或含磷洗涤剂盐包括，但不局限于此，以下的碱金属，铵和烷醇铵盐聚磷酸盐(示例为三聚磷酸盐，焦磷酸盐，和玻璃状聚合的偏磷酸盐)、膦酸盐、肌醇六磷酸、硅酸盐、碳酸盐(包括碳酸氢盐和倍半碳酸盐)、硫酸盐和硅铝酸盐。但是，在某些地区需要非磷助洗剂。重要的是，甚至在所谓的“弱”助洗剂(与磷酸盐比较)如柠檬酸盐存在下，或在所谓的“低助洗”情况下(这种情况在使用沸石或层状硅酸盐助洗剂时会发生)本发明组合物的功效出乎意料地好。
适合本发明目的的有机洗涤助洗剂包括，但不局限于此各种多羧酸盐化合物。本文中所使用的＂多羧酸盐＂指的是具有许多个羧酸根基团，优选至少3个羧酸根基团的化合物。多羧酸盐助洗剂通常可以以酸形式加入组合物中，但也可以以中和盐的形式加入。当以盐的形式使用时，碱金属，如钠、钾和锂或烷醇铵盐是优选的。
适合的硅酸盐助洗剂、碳酸盐、硅铝酸盐助洗剂、多羧酸盐助洗剂、柠檬酸盐助洗剂、在Bush的美国专利US4566984中公开的3，3-二羧基-4-氧杂-1，6-己二酸盐助洗剂和相关的化合物、琥珀酸助洗剂、含磷助洗剂和脂肪酸的实例公开在美国专利US5576282、5728671和5707950中。
其他适合的助洗剂可以是无机离子交换物质，通常是无机水合的硅铝酸盐物质，更具体地是水合的合成沸石例如水合的沸石A、X、B、HS或MAP。
适合于本发明的具体多羧酸盐是含有一个羧基的多羧酸盐，包括乳酸、羟基乙酸和它们的醚衍生物，如公开于比利时专利Nos.831,368、821,369和821,370中。含有两个羧基的多羧酸盐包括琥珀酸、丙二酸、(亚乙二氧基)二乙酸、马来酸、二乙醇酸、酒石酸、羟基丙二酸和富马酸的水溶性盐，以及描述于德国专利2,446,686和2,446,687和美国专利US3,935,257中的醚羧酸盐，以及比利时专利840,623中描述的亚硫酰基羧酸盐。含有三个羧基的多羧酸盐包括特别是水溶性的柠檬酸盐、乌头酸盐和柠康酸盐，以及琥珀酸盐衍生物例如描述于英国专利1,379,241中的羧甲氧基琥珀酸盐、描述于荷兰专利申请7205873中的乳酰氧基琥珀酸盐，和氧多羧酸盐物质例如描述于英国专利No.1,387,447中的2-氧杂-1，1，3-丙烷三羧酸盐。
含有四个羧基的多羧酸盐包括英国专利No.1,261,829中公开的氧联二琥珀酸盐、1，1，2，2-乙烷四羧酸盐、1，1，3，3-丙烷四羧酸盐和1，1，2，3-丙烷四羧酸盐。含有磺基取代基的多羧酸盐包括公开于英国专利Nos.1,398,421和1,398,422和美国专利3,936,448中的磺基琥珀酸盐衍生物，和英国专利No1,082,179中描述的磺化的热解柠檬酸盐，而含有膦取代基的多羧酸盐公开在英国专利No.1,439,000中。
脂环和杂环的多羧酸盐包括环戊烷-顺、顺、顺-四羧酸盐、环戊二烯五羧酸盐、2，3，4，5-四氢呋喃-顺、顺、顺-四羧酸盐、2，5-四氢呋喃-顺二羧酸盐、2，2，5，5-四氢呋喃四羧酸盐、1，2，3，4，5，6-己烷六羧酸盐和多元醇例如山梨醇、甘露醇和木糖醇的羧甲基衍生物。芳香族多羧酸盐包括英国专利No.1,425,343中公开的蜜石酸、1，2，4，5-苯四酸和邻苯二甲酸的衍生物。
以上这些化合物中，优选的多羧酸盐是每个分子中含有多至三个羧基的羟基羧酸盐，更具体地是柠檬酸盐。
用于本发明组合物中的优选的助洗剂体系包括水不溶性硅铝酸盐助洗剂例如沸石A或具有层状的硅酸盐(SKS-6)与水溶性羧酸盐螯合剂例如柠檬酸的混合物。
优选的助洗剂体系包括水不溶性硅铝酸盐助洗剂例如沸石A与水溶性羧酸盐螯合剂例如柠檬酸的混合物。用于本发明液体洗涤剂组合物中的优选的助洗剂体系是皂和多羧酸盐。
其它适合的水溶性有机盐是均聚或共聚的酸或它们的盐，其中多羧酸包含被不多于两个碳原子彼此分开的至少两个羧基。这种类型的聚合物公开在GB-A-1,596,756中。这类盐的实例是具有MW2000-5000的聚丙烯酸盐，以及它们与马来酸酐的共聚物，这种共聚物具有分子量20,000至70,000，特别是约40,000。
洗涤助洗剂盐一般含量是组合物重量的5％至80％，优选10％至70％，最通常是30％至60％。漂白剂可包括在本发明洗涤剂组合物中的另外的任选洗涤剂组分包括漂白剂，例如过氧化氢、PB1、PB4和具有粒度400-800微米的过碳酸盐。这些漂白剂组分可包括一种或多种氧漂白剂，和根据所选择的漂白剂的一种或多种漂白活化剂。当存在氧漂白化合物时，其一般地以约1％至约25％含量存在。
用于本发明的漂白剂组分可以是任何一种适用于洗涤剂组合物的漂白剂，包括氧漂白剂和本技术领域中公知的其它漂白剂。适用于本发明的漂白剂可以是活化的或非活化的漂白剂。
适合的漂白剂的实例公开在美国专利US5707950和US5576282中。
过氧化氢释放剂可以和例如公开在美国专利US5707950中的漂白活化剂或N-壬酰基-6-氨基己酸的酚磺酸酯(NACA-OBS，描述在WO94/28106中)结合起来使用，这些漂白活化剂被过水解形成为活性漂白物的过酸，从而导致改善的漂白效果。还适合的活化剂是酰化的柠檬酸酯。
用于本发明洗涤剂组合物中的适用的漂白剂，包括过氧酸，和包含漂白活化剂和过氧漂白化合物的漂白体系描述于WO95/27772、WO95/27773、WO95/27774、WO95/27775和美国专利US5707950中。
用于漂白组合物中的含金属的催化剂包括含钴的催化剂，例如五胺乙酸钴(III)盐和含锰的催化剂，例如在EPA549271、EPA549272；EPA458397；US5246621；EPA458398；US5194416和US5114611中描述的那些。含有过氧化合物、含锰的漂白催化剂和螯合剂的漂白组合物描述在专利申请94870206.3中。染料转移抑制作用本发明洗涤剂组合物还可包括用于抑制在包括带色织物的织物洗涤和调理操作过程中碰到的溶解和悬浮的染料从一种织物转移至另一种织物上的化合物。聚合染料转移抑制剂本发明洗涤剂组合物还可包含0.001％至10％，优选0.01％至2％，更优选0.05％至1％重量聚合的染料转移抑制剂。通常将所说的聚合的染料转移抑制剂掺入洗涤剂组合物中是为了抑制染料从带色的织物上转移至同时洗涤的织物上。在从带色织物洗涤下来的短效染料有机会附着到洗涤中的其它物品之前，这些聚合物具有将其螯合或吸附的能力。
特别适合的聚合的染料转移抑制剂是聚胺N-氧化物聚合物、N-乙烯基吡咯烷酮和N-乙烯基咪唑的共聚物、聚乙烯基吡咯烷酮聚合物、聚乙烯基噁唑烷酮和聚乙烯基咪唑或它们的混合物。这种染料转移抑制剂的实例公开在美国专利US5707950和US5576282中。
其他适合的染料转移抑制剂包括，但不限于交联的聚合物。交联聚合物是其骨架互连至一定程度的聚合物；这些键可以是化学或物理性的，在骨架上或在支链上可具有活性基团。交联聚合物已被描述在聚合物科学杂志，第22卷，第1035-1039页。
在一种实施方案中，交联聚合物是以这样的方法制备的，即它们形成三维的刚性结构，其能将染料捕集在由三维结构形成的孔中。在另一实施方案中，交联聚合物通过溶胀捕集染料。
这种交联聚合物被描述在待审的欧洲专利申请94870213.9中。
另外，这种聚合物还增强本发明酶的性能。分散剂本发明洗涤剂组合物还可含有分散剂适合的水溶性有机盐，它们是均聚或共聚合的酸或其盐，其中多羧酸包括被不多于2个碳原子彼此分开的至少两个羧基。
这种类型的聚合物公开在GB-A-1596756中。这种盐的实例是MW2000-5000的聚丙烯酸盐，和它们与马来酸酐的共聚物，这种聚合物具有分子量1000-100000。
尤其是丙烯酸盐和异丁烯酸盐的共聚物，例如分子量4000的480N，按组合物的重量计，其可以0.5％-20％重量加入本发明洗涤剂组合物中。
本发明组合物可含有钙皂胶溶剂化合物，其具有不超过8，优选不超过7，最优选不超过6的如下文定义的分散钙皂的能力(LSDP)。钙皂胶溶剂化合物的含量，按组合物重量计，优选为0％-20％。
钙皂胶溶剂效力的数值量度由钙皂分散剂的能力(LSDP)给出，所述钙皂分散剂的能力是使用H.C.Borghetty和C.A.Bergman，美国油化学会会志(J.Am.Oil.Chem.Soc.)第27卷，第88-90页(1950)的文章中描述的钙皂分散剂试验测定。该钙皂分散试验方法被本技术领域的专业人员广泛使用，参考例如，以下的综述文章；W.N.Linfield，表面活性剂科学丛书(Surfactant Science Series)，第7卷p3；W.N.Linfield，表面活性剂洗涤剂(Tenside Surf.Det.)，第27卷，第1 59-163页(1990)；和M.K.Nagarajan，W.F.Masler，化妆品和盥洗用品(Cosmetic and Toiletries)，第104卷，第71-73页(1989)。LSDP是分散钙皂沉积物需要的分散剂与油酸钠的重量％比值，所说的钙皂沉积物是由在30ml的333ppm CaCO3(Ca∶Mg＝3∶2)当量硬度水中的0.025g油酸钠形成的。
具有良好的钙皂溶胶剂能力的表面活性剂包括某些氧化胺、甜菜碱、磺基甜菜碱、烷基乙氧基硫酸盐和乙氧基化醇。
用于本发明的具有LSDP不超过8的表面活性剂示例包括C16-C18二甲基氧化胺、具有平均乙氧基化度1-5的C12-C18烷基乙氧基硫酸盐、特别是具有乙氧基化度为3(LSDP＝4)的C12-C15烷基乙氧基硫酸盐表面活性剂、和具有平均乙氧基化度为12(LSDP＝6)或30的C14-C15乙氧基化醇，由BASF GmbH分别按商品名Lutensol A012和Lutensol A030出售。
适用于本发明的聚合的钙皂溶胶剂描述在M.K.Nagarajan和W.F.Masler的文章中，见化妆品和盥洗用品(Cosmetic andToiletries)，第104卷，第71-73页(1989)。
疏水漂白剂例如4-[N-辛酰基-6-氨基己酰基]苯磺酸盐，4-[N-壬酰基-6-氨基己酰基]苯磺酸盐，4-[N-癸酰基-6-氨基己酰基]苯磺酸盐和它们的混合物；和壬酰基氧苯磺酸盐与亲水/疏水漂白剂制剂的组合也可用作该皂溶胶剂组分。
其他适合的分散剂的实例公开在美国专利US5576282和5728671中。常规洗涤剂酶本发明洗涤剂组合物除了含有己糖胺酶(hexosaminidase)之外，还含有提供清洗性能和/或护理织物益处的一种或多种酶。
所说的酶包括选自以下的那些酶半纤维素酶、过氧化物酶、蛋白酶、纤维素酶、木聚糖酶、脂肪酶、磷脂酶、酯酶、角质酶、果胶酶、角蛋白酶、还原酶、氧化酶、酚氧化酶、脂氧合酶、木质素酶、支链淀粉酶、单宁酶、戊聚糖酶、苹果酸酶(malanase)、β-葡聚糖酶、阿拉伯糖苷酶、透明质酸酶、软骨素酶、漆酶和公知的淀粉酶，或它们的混合物。
适合的酶的实例公开在美国专利US5576282、5728671和5707950中。
优选的组合是含有常规适用酶如蛋白酶、脂肪酶、角质酶和/或纤维素酶与己糖胺酶结合的混合酶的洗涤剂组合物。
特别适合的蛋白酶描述在PCT公开文献中The Procter &GambleCompany的1995年11月9日公布的WO95/30010；The Procter &GambleCompany的1995年11月9日公布的WO95/30011；The Procter &GambleCompany的1995年11月9日公布的WO95/29979。
除了在美国专利US5576282、5728671和5707950中公开的过氧化物酶之外，其他适合的过氧化物酶公开在1996年2月20日提交的欧洲专利申请EP96870013.8中。还适合的是漆酶。
优选的增强剂为取代的吩噻嗪和吩噁嗪(phenoxasine)10-吩噻嗪丙酸(PPT)、10-乙基吩噻嗪-4-羧酸(EPC)、10-吩噁嗪丙酸(POP)和10-甲基吩噁嗪(如WO94/12621所述)和取代的丁香酸酯(C3-C5取代的烷基丁香酸酯)和苯酚。过碳酸钠或过硼酸钠是优选的过氧化氢源。
以洗涤剂组合物重量计，洗涤剂组合物中所述过氧化物酶的掺入量通常为0.0001-2％活性酶。
本发明洗涤剂组合物可包括的其它优选酶包括脂肪酶。洗涤剂可使用的适宜脂肪酶包括由假单胞菌属族中的微生物，如司徒茨氏(stutzeri)假单胞菌ATCC 19.154产生的那些脂肪酶，如公开在英国专利1372034中。适合的脂肪酶包括由微生物荧光假单胞菌IAM1057产生的与脂肪酶的抗体表现出阳性免疫交叉反应的那些脂肪酶。这种脂肪酶可由Amano Pharmaceutical Co.Ltd.Nagoya，日本，买到，商品名为脂肪酶P“Amano”，下文称之为“Amano-P”。其他适合的商售脂肪酶包括Amano-CES，由Chromobacter viscosum得到的脂酶，例如，Chromobacter viscosum var.lipolyticum NRRLB3673，它们来自Toyo Jozo Co.，Tagata，日本；Chromobacter viscosum脂酶，其来自U.S.Biochemical Corp.，U.S.A.，和荷兰的DisoynthCo.，和由唐菖蒲假单胞菌(Pseudomonas gladioli)得到的脂酶。特别适合的脂肪酶是例如M1 LipaseR和LipomaxR(Gist-Brocades)和LipolaseR和Lipolase UltraR(Novo)，已发现当它们与本发明组合物组合使用时是非常有效的。
还适合的酶是角质酶[EC 3.1.1.50]，其被认为是一种特殊种类的脂肪酶，即不需要界面活化的脂肪酶。在洗涤剂组合物中加入角质酶已被描述在例如WO-A-88/09367(Genencor)中。
脂肪酶和/或角质酶一般在洗涤剂组合物中的掺入量为洗涤剂组合物重量的0.0001％至2％活性酶。
可包括公知的淀粉酶(α和/或β)，用于去除基于碳水化合物的污渍。1994年2月3日公布的Novo Nordisk A/S的WO/94/02597描述了掺入突变体淀粉酶的清洗组合物。还参见1994年8月18日公布的Genencor的WO/94/18314和1995年4月20日公布的Novo Nordisk A/S的WO/95/10603。用于洗涤剂组合物中的其它公知的淀粉酶包括a-和β-淀粉酶。a-淀粉酶是现有技术已知的，包括在US5003257；EP252666；WO/91/00353；FR2676456；EP285123；EP525610；EP368341和英国专利说明书1296839(Novo)中公开的那些淀粉酶。其它适合的淀粉酶是稳定性增强的淀粉酶，包括在1994年8月18日公布的WO94/18314和在1996年2月22日公布的Genencor的WO96/05295中描述的Purafact Ox AmR和在95年4月公布的WO95/10603中公开的从Novo Nordisk A/S购得的淀粉酶变异体。
商售a-淀粉酶产品的实例是Termamyl，Ban，Fungamyl和Duramyl，都可从Novo Nordisk A/S丹麦购得。WO95/26397描述了其它适合的淀粉酶a-淀粉酶，特征在于通过Phadebasa-淀粉酶活性实验测定，在25℃-55℃温度和pH值在8-10范围下其比活度高于Termamyl的比活度至少25％。具有改善的关于活性水平和热稳定性与更高活性水平组合性质的其它淀粉分解酶描述在WO95/35382中。
上述的酶可以来自任何适宜的来源，如植物、动物、细菌、霉菌和酵母源。可使用这些酶的纯化或非纯化形式。通过确定还包括天然酶的突变体。突变体可通过例如对天然酶的蛋白质和/或遗传工程、化学和/或物理改性而得到。通常的做法是通过宿主有机体表达酶，在宿主有机体中克隆其中负责产生酶的遗传物质。
所述酶一般在洗涤剂组合物中的掺入量为洗涤剂组合物重量的0.0001％至2％活性酶。酶可作为独立的单一组分加入(含有一种酶的丸、粒、稳定的液体等…)或作为两种或多种酶的混合物加入(例如复合颗粒)。
可加入的其它适合的洗涤剂组分是酶氧化清除剂，这种酶氧化清除剂的实例是乙氧基化的四亚乙基聚胺。
各种酶物质和将它们掺入合成洗涤剂组合物中的方法也公开在Genencor International的WO 9307262和WO 9307260，Novo的WO8908694，和1971年1月5日授权的McCarty等人的美国专利US3553139中。一些酶还公开在1978年7月18日授权的Place等人的美国专利US4101457和1985年3月26日授权的Hughes的美国专利US4507219中。用于液体洗涤剂配方的酶物质，和它们掺入到这些配方中，被公开在1981年4月14日授权的Hora等人的美国专利US4261868中。用于洗涤剂中的酶可用各种技术使其稳定化。酶稳定化技术公开并举例说明在1971年8月17日授权的Gedge等人的美国专利US3600319，EP199405和1986年10月29日公开的Venegas的欧洲专利EP200586中。酶稳定体系也描述在例如美国专利US3519570中。产生蛋白酶、木聚糖酶和纤维素酶的有用的杆菌AC13描述在Novo的WO 9401532A中。螯合剂本发明的洗涤剂组合物还可以任选地含有一种或多种铁和/或锰螯合剂。这类螯合剂可选自氨基羧酸盐，氨基膦酸盐，多官能取代的芳族螯合剂及其混合物，所有的螯合剂在下文中被定义。不受理论的制约，人们认为这些物质的优点部分在于它们通过形成可溶性螯合剂具有从洗涤溶液中除去镁和锰离子的非凡能力。
适合的螯合剂的实例公开在美国专利US5728671中。
本发明组合物还可含有水溶性的甲基甘氨酸二乙酸(MGDA)盐(或酸形式)作为螯合剂，或作为例如不溶性的助洗剂如沸石、层状硅酸盐等的有用的辅助助洗剂。
如果使用螯合剂，则这些螯合剂的用量一般为本发明洗涤剂组合物重量的约0.1％-15％。若使用，更优选螯合剂用量是该组合物重量的约0.1％-3.0％。抑泡剂另一种任选的组分是抑泡剂，示例为聚硅氧烷，和二氧化硅-聚硅氧烷混合物。适合的抑泡剂的实例公开在美国专利US5707950和5728671中。这些抑泡剂的用量一般为组合物重量的0.001％至2％，优选0.01％至1％。柔软剂织物柔软剂也可掺入本发明洗衣洗涤剂组合物中。这些柔软剂可为无机或有机类型。无机柔软剂的示例有公开在GB-A-1400898和USP 5,019,292中的绿土类。有机织物柔软剂包括如公开在GB-A 1514 276和EP-B 0 011 340中的水不溶性叔胺和公开在EP-B-0 026527和EP-B-0 026 528中前者叔胺与单C12-C14季铵盐的混合物，以及如公开在EP-B-0242 919中的双长链酰胺。用于织物柔软剂体系的其它适合的有机组分包括公开在EP-A-0299 575和0 313 146中的高分子量聚环氧乙烷物质。
特别适合的织物柔软剂公开在美国专利US5707950和5728673中。
绿土的含量通常为2％至20％，更优选5％至15％重量，该物质是作为干混组分加入到配方的其余组分中。有机织物柔软剂例如水不溶性叔胺或双长链的酰胺物质的掺入量是0.5％至5％重量，通常是1％至3％重量，而高分子量聚环氧乙烷物质和水溶性阳离子物质的加入量是0.1％至2％，通常是0.15％至1.5％重量。虽然在某些情况下，这些物质作为干混颗粒加入或将它们作为熔融液体喷到组合物的其它固体组分上可能更为方便，但通常将它们加入组合物的喷雾干燥的部分中。
典型的阳离子织物柔软组分包括水不溶性的季铵织物柔软活性物，最通常使用的是二长烷基链氯化铵或甲基硫酸铵。
其中优选的阳离子柔软剂包括以下1)氯化二牛油基二甲基铵(DTDMAC)；2)氯化二氢化牛油基二甲基铵；3)甲基硫酸化二氢化牛油基二甲基铵；4)氯化二硬脂基二甲基铵；5)氯化二油基二甲基铵；6)氯化二棕榈基羟乙基甲基铵；7)氯化硬脂基苄基二甲基铵；8)氯化牛油基三甲基铵；9)氯化氢化牛油基三甲基铵；10)氯化C12-14烷基羟乙基二甲基铵；11)氯化C12-18烷基二羟乙基甲基铵；12)氯化二(硬脂酰氧基乙基)二甲基铵(DSOEDMAC)；13)氯化二(牛油酰氧基乙基)二甲基铵；14)甲基硫酸化二牛油基咪唑啉鎓；15)甲基硫酸化1-(2-牛油酰氨基乙基)-2-牛油基咪唑啉鎓。
生物可降解的季铵化合物已作为传统使用的氯化和甲基硫酸化双长链烷基铵的替代物而存在。这种季铵化合物含有由官能基团例如羧基间隔的长链烷(链烯)基基团。所述物质和含有它们的织物柔软组合物在许多出版物，例如EP-A-0040562和EP-A-0239910中公开。
用于季铵化合物和胺前体的与柔软剂相容的阴离子的非限制实例包括氯根或甲基硫酸根。其他可使用用于洗涤剂组合物中的其他组分，例如污垢悬浮剂、污垢解脱剂、荧光增白剂、磨料、杀菌剂、晦暗抑制剂、着色剂和/或包封或非包封香料，其实例公开在美国专利US5707950，5576282和和5728671中。
本领域已知自来水中的游离氯会使包含在洗涤剂组合物中的酶快速失活。因此，在配方中使用占总组合物重量高于0.1％的氯清除剂例如过硼酸盐、硫酸铵、亚硫酸钠或聚乙烯亚胺将在洗涤全过程中提供对洗涤剂酶稳定性的改善。包含氯清除剂的组合物描述在1992年1月31日提交的欧洲专利申请92870018.6中。
烷氧基化多羧酸盐，例如由聚丙烯酸盐制备的那些，适用于本发明，以提供额外的去油脂性能。这类物质被描述在WO91/08281和PCT90/01815，第4页以及下文等中，其在本文引用作参考。从化学上说，这些物质包括每7-8个丙烯酸盐单元有一个乙氧基侧链的聚丙烯酸盐。侧链具有式-(CH2CH2O)m(CH2)nCH3，其中m是2-3，n是6-12。该侧链通过酯键与聚丙烯酸盐“骨架”连接，以形成“梳状”结构类型的聚合物。其分子量可以变化，但一般在约2000-约50000范围。这种烷氧基化多羧酸盐可占本发明组合物重量的约0.05％-约10％。洗涤方法本发明组合物基本上可用于任何洗涤或清洗方法中，包括浸泡方法，预处理方法和带有漂洗步骤的方法中，在所述的漂洗步骤中可加入单独的漂洗助剂组合物。
这里描述的方法包括按通常的方法和下文例举说明的方法将织物与洗涤溶液接触。
本发明方法可方便地在洗涤过程中完成。该清洗方法优选在5℃至95℃下进行，特别是在10℃至60℃下进行。处理溶液的pH优选为7至11。
以下实施例是用于说明本发明的组合物，而不是用于限制或另外定义本发明的范围。在洗涤剂组合物中，酶的含量按纯酶占总组合物重量来表示，除非另外说明，洗涤剂组分按占总组合物重量来表示。其中简写的组分符号具有以下定义LAS 直链C12烷基苯磺酸钠TAS 牛油烷基硫酸钠CXYAS C1X-C1Y烷基硫酸钠25EY 与平均Y摩尔环氧乙烷缩合的主要是直链的C12-C15伯醇CXYEZ ； 与平均Z摩尔环氧乙烷缩合的主要是直链的C1X-C1Y伯醇XYEZS 每摩尔与平均Z摩尔环氧乙烷缩合的C1X-C1Y烷基硫酸钠QAS R2.N+(CH3)2(C2H4OH)，R2＝C12-C14皂 由牛油和椰子油的80/20的混合物得到的直链烷基羧酸钠非离子型表 具有平均乙氧基化度为3.8和平均丙氧基化度为4.5的C13-C15面活性剂 混合的乙氧基化/丙氧基化脂肪醇，由BASF Gmbh以商品名Plurafax LF404出售CFAA C12-C14烷基N-甲基葡糖酰胺TFAA C16-C18烷基N-甲基葡糖酰胺TPKFA C12-C14拔顶的全馏分脂肪酸DEQA 氯化二(牛油氧基乙基)二甲基铵Neodol 45- 由Shell Chemical公司出售的C14-C15直链伯醇乙氧基化物13硅酸盐 无定形硅酸钠(SiO2∶Na2O比率＝2.0)NaSKS-6 式δ-Na2Si2O5的结晶层状硅酸盐碳酸盐 粒度在200μm-900μm之间的无水碳酸钠碳酸氢盐 粒度在400μm-1200μm之间的无水碳酸氢钠STPP 无水三聚磷酸钠MA/AA 1∶4马来酸/丙烯酸共聚物，平均分子量约70000-80000沸石A 式Na12(AlO2SiO2)12·27H2O的水合硅铝酸钠，初级粒度为0.1至
10微米柠檬酸盐 柠檬酸三钠二水合物，活度为86.4％，粒度分布在425μm-850μm柠檬酸 无水柠檬酸PB1 经验式NaBO2.H2O2的无水过硼酸钠一水合物漂白剂PB4 无水过硼酸钠四水合物过碳酸盐 经验式为2Na2CO3·3H2O2的无水过碳酸盐漂白剂TAED 四乙酰乙二胺NOBS 钠盐形式的壬酰基氧苯磺酸盐光活化的漂 用糊精可溶的聚合物包封的磺化酞菁锌白剂蛋白酶 由Novo Nordisk A/S以商品名Savinase、Alcalase、Durazym和由Gist Brocades以商品名Maxacal、Maxapem出售的蛋白水解酶，和在专利WO91/06637和/或WO95/10591和/或EP251446中描述的蛋白酶淀粉酶 在WO94/18314、WO96/05295中描述的由Genencor按商品名Purafact Ox AmR出售的淀粉分解酶；由Novo Nordisk A/S得到的Termamyl、Fungamyl和Duramyl，和在WO95/26397中描述的那些淀粉分解酶脂肪酶 由Novo Nordisk A/S以商品名Lipolase、Lipolase Ultra出售的脂解酶木葡聚糖酶 如上文描述的和在WO94/14953中定义为EG II的对木葡聚糖特异性的内葡聚糖酶纤维素酶 ； 由Novo Nordisk A/S以商品名Carezyme、Celluzyme和/或Endolase出售的纤维素酶CMC 羧甲基纤维素钠HEDP 1，1-羟乙烷二膦酸DETPMP 二亚乙基三胺五(亚甲基膦酸)，由Monsanto以商品名Dequest2060出售PVNO 聚(4-乙烯基吡啶)-N-氧化物PVPVI 聚(4-乙烯基吡啶)-N-氧化物/乙烯基咪唑和乙烯基吡咯烷酮的共聚物增白剂1 4，4’-双(2-磺基苯乙烯基)联苯二钠增白剂2 4，4’-双(4-苯氨基-6-吗啉代-1，3，5-三嗪2-基)芪-22’-二磺酸二钠聚硅氧烷抗 聚二甲基硅氧烷控泡剂与作为分散剂的硅氧烷-氧化烯共聚物泡剂 的混合物，所述控泡剂与所述分散剂的比例为10∶1-100∶1颗粒抑泡剂 12％硅氧烷/二氧化硅，18％硬脂醇，70％颗粒状淀粉SRP1 磺基苯甲酰基或羟乙磺酸钠封端的带有氧亚乙基氧基和对苯二酰基骨架的酯SRP2 二乙氧基化的聚(对苯二酸1，2-亚丙酯)短嵌段聚合物硫酸盐 无水硫酸钠HMWPEO 高分子量聚环氧乙烷实施例1制备根据本发明的以下洗涤剂制剂，其中I和III是含磷的洗涤剂组合物，II是含沸石的洗涤剂组合物。
III III吹制粉末STPP 24.0 - 24.0沸石A- 24.0 -C45AS9.0 6.013.0MA/AA2.0 4.02.0LAS 6.0 8.011.0TAS 2.0 - -硅酸盐 7.0 3.03.0CMC 1.0 1.00.5增白剂2 0.2 0.20.2皂 1.0 1.01.0DETPMP 0.4 0.40.2喷上C45E72.5 2.52.0C25E32.5 2.52.0聚硅氧烷抗泡剂 0.3 0.30.3香料 0.3 0.30.3干添加剂碳酸盐 6.0 13.0 15.0PB4 18.0 18.0 10.0PB1 4.0 4.0 0TAED 3.03.0 1.0光活化的漂白剂0.02 0.02 0.02蛋白酶0.01 0.01 0.01脂肪酶0.009 0.009 --淀粉酶0.002 --0.001木葡聚糖酶0.05 0.05 0.05干混的硫酸钠 3.03.0 5.0平衡物(水分及其他少量组分) 100.0 100.0 100.0密度(g/l) 630670 670实施例2制备根据本发明的特别用于洗涤有色衣服的以下不含漂白剂的洗涤剂制剂III III吹制粉末沸石A 15.0 15.0 -硫酸钠0.0 5.0-LAS 3.0 3.0-DETPMP0.4 0.5-CMC 0.4 0.4-MA/AA 4.0 4.0-附聚物C45AS - - 11.0LAS 6.0 5.0-TAS 3.0 2.0-硅酸盐4.0 4.0-沸石A 10.0 15.0 13.0CMC - - 0.5MA/AA - - 2.0碳酸盐9.0 7.07.0喷上香料 0.3 0.30.5C45E7 4.0 4.04.0C25E3 2.0 2.02.0干添加剂MA/AA - - 3.0NaSKS-6 - - 12.0柠檬酸盐 10.0 - 8.0碳酸氢盐 7.0 3.05.0碳酸盐8.0 5.07.0PVPVI/PVNO0.5 0.50.5蛋白酶0.026 0.016 0.047脂肪酶0.009 -- 0.009淀粉酶0.005 0.005 --木葡聚糖酶0.05 0.05 0.05纤维素酶 0.006 0.006 --聚硅氧烷抗泡剂5.0 5.05.0干添加剂硫酸钠0.0 9.00.0平衡物(水分及其他少量组分)100.0 100.0 100.0密度(g/l) 700 700700实施例3制备根据本发明的以下洗涤剂制剂I II IIIIVLAS 20.0 14.024.0 22.0QAS 0.7 1.0 - 0.7TFAA -1.0 - -C25E5/C45E7 -2.0 - 0.5C45E3S -2.5 - -STPP 30.0 18.030.0 22.0硅酸盐 9.0 5.0 10.0 8.0碳酸盐 13.0 7.5 - 5.0碳酸氢盐 -7.5 - -DETPMP 0.7 1.0 - -SRP1 0.3 0.2 - 0.1MA/AA2.0 1.5 2.01.0CMC 0.8 0.4 0.40.2木葡聚糖酶 0.05 0.050.05 0.05蛋白酶 0.0080.010.026 0.026淀粉酶 0.007-- 0.005 0.002脂肪酶 0.004-- -- 0.002纤维素酶 0.0015 0.0005 - -光活化的漂化剂 70ppm45ppm - 10ppm增白剂1 0.2 0.2 0.08 0.2PBI 6.0 2.0 - -NOBS 2.0 1.0 - -平衡物(水分及其他少 100 100 100100量组分)实施例4制备根据本发明的以下液体洗涤剂制剂I II IIIIV V VI VII VIIILAS 10.013.0 9.0- 25.0- - -C25AS 4.0 1.0 2.010.0 - 13.018.015.0C25E3S 1.0- - 3.0 - 2.0 2.04.0C25E7 6.08.0 13.02.5 - -4.04.0TFAA - - - 4.5 - 6.0 8.08.0QAS- - - - 3.0 1.0 - -TPKFA 2.0- 13.02.0 - 15.0 7.07.0菜子脂肪酸 - - - 5.0 - -4.04.0柠檬酸 2.03.0 1.0 1.5 1.0 1.0 1.01.0十二碳烯基/12.0 10.0- - 15.0-- -十四碳烯基琥珀酸油酸 4.02.0 1.0 - 1.0 -- -乙醇 4.04.0 7.0 2.0 7.0 2.0 3.02.01，2-丙二醇4.04.0 2.0 7.0 6.0 8.0 10.0 13.单乙醇胺 - - - 5.0 - -9.09.0三乙醇胺 - - 8 - - -- -NaOH(pH) 8.08.0 7.6 7.7 8.0 7.5 8.08.2乙氧基化四亚 0.5- 0.5 0.2 - -0.40.3乙基五胺DETPMP 1.01.0 0.5 1.0 2.0 1.2 1.0-SRP2 0.3- 0.3 0.1 - -0.20.1PVNO - - - - - -- 0.10木葡聚糖酶 0.05 0.050.050.050.050.05 0.05 0.05蛋白酶 .005 .005.004.0030.08.005 .003 .006脂肪酶 - .002- .000- -.003 .0032淀粉酶 .002 -- -- .004.002.008 .005 .005纤维素酶 - - - .000- -.0004 .00041硼酸 0.10.2 - 2.0 1.0 1.5 2.52.5甲酸钠 - - 1.0 - - -- -氯化钙 - 0.01- 0.01- -- -5膨润土 - - - - 4.0 4.0 - -悬浮粘土 - - - - 0.6 0.3 - -SD3平衡物水分和 100100 100 100 100 100 100100其他少量组分实施例5制备根据本发明的提供“洗涤过程柔软”能力的粒状织物洗涤剂组合物
I II45AS - 10.0LAS 7.6-68AS 1.3-45E7 4.0-25E3 - 5.0椰子烷基二甲基羟乙基 1.41.0氯化铵柠檬酸盐 5.03.0Na-SKS-6 - 11.0沸石A 15.0 15.0MA/AA 4.04.0DETPMP0.40.4PB1 15.0 -过碳酸盐 - 15.0TAED 5.05.0绿土 10.0 5.0HMWPEO- 0.1木葡聚糖酶0.05 0.05蛋白酶0.02 0.01脂肪酶0.02 0.01淀粉酸0.01 0.005纤维素酶 0.001 -硅酸盐3.05.0碳酸盐10.0 10.0颗粒抑泡剂1.04.0CMC 0.20.1水/少量组分 最多至100％实施例6制备根据本发明的合成条织物洗涤剂组合物I IIIII IVC26 AS 20.0020.00 20.00 20.00CFAA5.0 5.05.05.0LAS(C11-13) 10.0 10.0 10.0 10.0碳酸钠 25.0 25.0 25.0 25.0焦磷酸钠7.0 7.07.07.0STPP7.0 7.07.07.0沸石A 5.0 5.05.05.0CMC 0.2 0.20.20.2聚丙烯酸盐(MW 1400) 0.2 0.20.20.2椰子油单乙醇酰胺5.0 5.05.05.0木葡聚糖酶 0.05 0.05 0.05 0.05淀粉酶 0.01 -- 0.005 --蛋白酶 0.3 - 0.50.05增白剂，香料0.2 0.20.20.2CaSO4 1.0 1.01.01.0MgSO4 1.0 1.01.01.0水 4.0 4.04.04.0填料*余量至100％*可选自方便的物质例如CaCO3、滑石、粘土(高岭土、绿土)、硅酸盐等。
序列表(1)一般信息(i)申请人Convents，Andre C.
Moese，Rosa Laura(ii)发明题目含有木葡聚糖酶的洗衣和清洗组合物(iii)序列号18(iv)通信地址(A)收件人THE PROCTER & GAMBLE COMPANY(B)街道11810 East Miami River Road(C)城市Ross(D)州OH(E)国家USA(F)ZIP45061(v)计算机可读形式(A)载体类型软盘(B)计算机IBM PC兼容机(C)操作系统PC-DOS/MS-DOS(D)软件PatentIn Release#1.0，Version #1.30(vi)现有申请资料(A)申请号(B)申请日(C)分类(viii)代理人信息(A)姓名Zerby，Kim Willm(B)登记号32，323(C)参照/备案号6613P(ix)通信信息(A)电话(513)627-2885(B)电传(513)627-0318(2)SEQ ID NO1的信息(i)序列特征(A)长度21个碱基对
(B)类型核酸(C)链型单链(D)拓扑结构线性(ii)分子类型cDNA(xi)序列描述SEQ ID NO1ATTCATTTGT GGACAGTGGA C 21(2)SEQ ID NO2的信息(i)序列特征(A)长度20个碱基对(B)类型核酸(C)链型单链(D)拓扑结构线性(ii)分子类型cDNA(xi)序列描述SEQ ID NO2GTTGATCGCA CATTGAACCA 20(2)SEQ ID NO3的信息(i)序列特征(A)长度20个碱基对(B)类型核酸(C)链型单链(D)拓扑结构线性(ii)分子类型cDNA(xi)序列描述SEQ ID NO3ACCCCAGCCG ACCGATTGTC 20(2)SEQ ID NO4的信息(i)序列特征(A)长度20个碱基对(B)类型核酸(C)链型单链(D)拓扑结构线性(ii)分子类型cDNA(xi)序列描述SEQ ID NO4CTTCCTTACC TCACCATCAT20(2)SEQ ID NO5的信息(i)序列特征(A)长度20个碱基对(B)类型核酸(C)链型单链(D)拓扑结构线性(ii)分子类型cDNA(xi)序列描述SEQ ID NO5TTAACATCTT TTCACCATGA 20(2)SEQ ID NO6的信息(i)序列特征(A)长度20个碱基对(B)类型核酸(C)链型单链(D)拓扑结构线性(ii)分子类型cDNA(xi)序列描述SEQ ID NO6AGCTTTCCCT TCTCTCCCTT 20(2)SEQ ID NO7的信息(i)序列特征(A)长度28个碱基对(B)类型核酸(C)链型单链(D)拓扑结构线性(ii)分子类型cDNA(xi)序列描述SEQ ID NO7GCCACCCTGG CTTCCGCTGC CAGCCTCC 28(2)SEQ ID NO8的信息(i)序列特征(A)长度20个碱基对(B)类型核酸
(C)链型单链(D)拓扑结构线性(ii)分子类型cDNA(xi)序列描述SEQ ID NO8GACAGTAGCA ATCCAGCATT 20(2)SEQ ID NO9的信息(i)序列特征(A)长度20个碱基对(B)类型核酸(C)链型单链(D)拓扑结构线性(ii)分子类型cDNA(xi)序列描述SEQ ID NO9AGCATCAGCC GCTTTGTACA 20(2)SEQ ID NO10的信息(i)序列特征(A)长度20个碱基对(B)类型核酸(C)链型单链(D)拓扑结构线性(ii)分子类型cDNA(xi)序列描述SEQ ID NO10CCATGAAGTT CACCGTATTG 20(2)SEQ ID NO11的信息(i)序列特征(A)长度20个碱基对(B)类型核酸(C)链型单链(D)拓扑结构线性(ii)分子类型cDNA(xi)序列描述SEQ ID NO11GCACTGCTTC TCTCCCAGGT 20(2)SEQ ID NO12的信息(i)序列特征(A)长度20个碱基对(B)类型核酸(C)链型单链(D)拓扑结构线性(ii)分子类型cDNA(xi)序列描述SEQ ID NO12GTGGGCGGCC CCTCAGGCAA 20(2)SEQ ID NO13的信息(i)序列特征(A)长度20个碱基对(B)类型核酸(C)链型单链(D)拓扑结构线性(ii)分子类型cDNA(xi)序列描述SEQ ID NO13ACGCTCCTCC AATTTTCTCT 20(2)SEQ ID NO14的信息(i)序列特征(A)长度19个碱基对(B)类型核酸(C)链型单链(D)拓扑结构线性(ii)分子类型cDNA(xi)序列描述SEQ ID NO14GGCTGGTAGT AATGAGTCT 19(2)SEQ ID NO15的信息(i)序列特征(A)长度20个碱基对(B)类型核酸(C)链型单链
(D)拓扑结构线性(ii)分子类型cDNA(xi)序列描述SEQ ID NO15GGCGCAGAGT TTGGCCAGGC 20(2)SEQ ID NO16的信息(i)序列特征(A)长度21个碱基对(B)类型核酸(C)链型单链(D)拓扑结构线性(ii)分子类型cDNA(xi)序列描述SEQ ID NO16CAACATCCCC GGTGTTCTGG G 21(2)SEQ ID NO17的信息(i)序列特征(A)长度347个碱基对(B)类型核酸(C)链型单链(D)拓扑结构线性(ii)分子类型cDNA(xi)序列描述SEQ ID NO17AAAGATTCAT TTGTGGACAG TGGACGTTGA TCGCACATTG AACCAACCCC AGCCGACCGA 60TTGTCCTTCC TTACCTCACC ATCATTTAAC ATCTTTTCAC CATGAAGCTT TCCCTTCTCT 120CCCTTGCCAC CCTGGCTTCC GCTGCCAGCC TCCAGCGCCG CACACTTCTG CGGTCAGTGG 180GATACCGCCA CCGCCGGTGA CTTCACCCTG TACAACGACC TTTGGGGCGA GACGGCCGGC 240ACCGGCTCCC AGTGCACTGG AGTCGACTCC TACAGCGGCG ACACCATCGC TTGTCACACC 300AGCAGGTCCT GGTCGGAGTA GCAGCAGCGT CAAGAGCTAT GCCAACG 347(2)SEQ ID NO18的信息(i)序列特征(A)长度294个碱基对
(B)类型核酸(C)链型单链(D)拓扑结构线性(ii)分子类型cDNA(xi)序列描述SEQ ID NO18CAGCATCTCC ATTGAGTAAT CACGTTGGTG TTCGGTGGCC CGCCGTGTTG CGTGGCGGAG 60GCTGCCGGGA GACGGGTGGG GATGGTGGTG GGAGAGAATG TAGGGCGCCG TGTTTCAGTC 120CCTAGGCAGG ATACCGGAAA ACCGTGTGGT AGGAGGTTTA TAGGTTTCCA GGAGACGCTG 180TATAGGGGAT AAATGAGATT GAATGGTGGC CACACTCAAA CCAACCAGGT CCTGTACATA 240CAATGCATAT ACCAATTATA CCTACCAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAA 29权利要求
1.一种包含一种或多种对木葡聚糖表现特异的内葡聚糖酶活性的酶的洗衣或清洗产品。
2.根据权利要求1的洗衣或清洗产品，其中所述对木葡聚糖表现出特异的内葡聚糖酶活性的酶选自以下定义的酶i)该酶由包含或包括在至少一种以下部分序列中的DNA序列或编码具有内葡聚糖酶活性的对木葡聚糖有特异性的多肽的同源序列编码(a)ATTCATTTGT GGACAGTGGA C(SEQ ID No1)(b)GTTGATCGCA CATTGAACCA(SEQ ID NO2)(c)ACCCCAGCCG ACCGATTGTC(SEQ ID NO3)(d)CTTCCTTACC TCACCATCAT(SEQ ID NO4)(e)TTAACATCTT TTCACCATGA(SEQ ID NO5)(f)AGCTTTCCCT TCTCTCCCTT(SEQ ID NO6)(g)GCCACCCTGG CTTCCGCTGC CAGCCTCC(SEQ ID NO7)(h)GACAGTAGCA ATCCAGCATT(SEQ ID NO8)(i)AGCATCAGCC GCTTTGTACA(SEQ ID NO9)(j)CCATGAAGTT CACCGTATTG(SEQ ID NO10)(k)GCACTGCTTC TCTCCCAGGT(SEQ ID NO11)(l)GTGGGCGGCC CCTCAGGCAA(SEQ ID NO12)(m)ACGCTCCTCC AATTTTCTCT(SEQ ID NO13)(n)GGCTGGTAG TAATGAGTCT(SEQ ID NO14)(o)GGCGCAGAGT TTGGCCAGGC(SEQ ID NO15)(p)CAACATCCCC GGTGTTCTGG G(SEQ ID NO16)(q)AAAGATTCAT TTGTGGACAG TGGACGTTGA TCGCACATTGAACCAACCCC AGCCGACCGATTGTCCTTCC TTACCTCACC ATCATTTAAC ATCTTTTCAC CATGAAGCTTTCCCTTCTCTCCCTTGCCAC CCTGGCTTCC GCTGCCAGCC TCCAGCGCCG CACACTTCTGCGGTCAGTGGGATACCGCCA CCGCCGGTGA CTTCACCCTG TACAACGACC TTTGGGGCGAGACGGCCGGCACCGGCTCCC AGTGCACTGG AGTCGACTCC TACAGCGGCG ACACCATCGCTTGTCACACCAGCAGGTCCT GGTCGGAGTA GCAGCAGCGT CAAGAGCTAT GCCAACG(SEQ ID NO17)或(r)CAGCATCTCC ATTGAGTAAT CACGTTGGTG TTCGGTGGCCCGCCGTGTTG CGTGGCGGAGGCTGCCGGGA GACGGGTGGG GATGGTGGTG GGAGAGAATGTAGGGCGCCG TGTTTCAGTCCCTAGGCAGG ATACCGGAAA ACCGTGTGGT AGGAGGTTTA TAGGTTTCCAGGAGACGCTGTATAGGGGAT AAATGAGATT GAATGGTGGC CACACTCAAA CCAACCAGGTCCTGTACATACAATGCATAT ACCAATTATA CCTACCAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAAAAAA(SEQ ID NO18)ii)该酶对由i)中定义的DNA序列编码并得自于棘孢曲霉，CBS101.43的高纯化内葡聚糖酶产生的抗体呈免疫反应性和对木葡聚糖有特异性。
3.根据权利要求1或2的洗衣或清洗产品，其中所述对木葡聚糖表现出特异的内葡聚糖酶活性的酶对其他非木葡聚糖的含纤维素基质表现出低于75％活性，更优选低于50％活性，最优选低于25％活性。
4.根据任一权利要求1-3的洗衣或清洗产品，其中所述对木葡聚糖表现出特异的内葡聚糖酶活性的酶具有木葡聚糖相对β-葡聚糖的活性(XGU/BGU)，木葡聚糖相对羧甲基纤维素的活性(XGU/CMCU)，或木葡聚糖相对酸溶胀的微晶纤维素的活性(XGU/AVIU)，其优选大于50，更优选大于75。
5.根据任一权利要求1-4的洗衣或清洗产品，其还包含洗衣或清洗组合物组分，选自去污表面活性剂、去污酶、助洗剂、漂白剂和其混合物。
6.根据任一权利要求1-5的洗衣或清洗产品，其中去污酶选自蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶、纤维素酶和它们的混合物。
7.根据任一权利要求1-6的洗衣或清洗产品，其中助洗剂选自沸石、磷酸盐和它们的混合物。
8.根据任一权利要求1-7的洗衣或清洗产品，其中漂白剂选自过硼酸盐、过碳酸盐和它们的混合物，优选还包含漂白活化剂。
9.根据任一权利要求1-8的洗衣或清洗产品，其中表面活性剂选自阴离子表面活性剂，优选烷基硫酸盐和/或直链烷基苯磺酸盐表面活性剂，阳离子表面活性剂，非离子表面活性剂和它们的混合物。
10.一种洗涤织物的方法，所述方法包括将需要清洗的织物与含有有效量的一种或多种对木葡聚糖表现出特异的内葡聚糖酶活性的酶的水溶液接触，优选与根据任一权利要求1-9的组合物的水溶液接触。
11.一种清洗盘和餐具的方法，该方法包括将需要清洗的盘或餐具与含有有效量的一种或多种对木葡聚糖表现出特异的内葡聚糖酶活性的酶的水溶液接触，优选与根据任一权利要求1-9的组合物的水溶液接触。
12.根据权利要求11的清洗盘和餐具的方法，其中所述方法在自动洗餐具机中进行。
全文摘要
包含一种或多种对木葡聚糖表现出特异的内葡聚糖酶活性的酶的洗衣或清洗产品,和用含有有效量的一种或多种对木葡聚糖表现出特异的内葡聚糖酶活性的酶的水溶液洗涤织物和清洗盘和餐具的方法。
文档编号C12N9/42GK1261400SQ98806560
公开日2000年7月26日 申请日期1998年5月5日 优先权日1997年5月5日
发明者A·C·康文茨, R·L·梅瑟 申请人:普罗格特-甘布尔公司