段5中所述的用途，其中，所述发酵液上清通过对所述发酵液进行离心而获 得。
[0032] 8.如段5中所述的用途，其中，所述污染了 AFBl的目的酿造调味品或其原料在进 行AFBl降解前已经过粉碎处理。
[0033]9.如段1-4中任一项所述的用途，其中，所述降解在温度25_35°C、湿度80%_100%、 pH5. 5-8. 5的条件下通风反应30-80h。
[0034] 10.如段9中所述的用途，其中，所述降解在恒温条件下进行。
[0035] 11.如段9中所述的用途，其中，所述降解在pH7. 2-7. 4的条件下进行。
[0036] 12.如段1-4中任一项所述的用途，其中，所述红城红球菌选自于：
[0037] 红城红球菌菌株 NHRI-1、NHRI-2、NHRI-3、NHRI-4、NHRI-5、NHRI-6 及 NHRI-7， 所述菌株于2013年12月17日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心 (CGMCC)，保藏编号分别为CGMCC N〇.8590、CGMCC No.8591、CGMCC No.8592、CGMCC No.8593、 CGMCC No. 8594、CGMCC No.8595 及 CGMCC No. 8596 ;和 / 或
[0038] 保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（CGMCC)的红城红球菌菌 株 CGMCC4. 1491 及 CGMCCL 2362。
[0039] 实施例
[0040] 下面结合具体实施例进一步阐明本发明。这些实施例仅用于说明本发明而不用来 限制本发明的范围。
[0041] 实施例1红城红球菌菌株发酵液及其上清的制备
[0042]取-80 °C低温甘油管保藏的七株红城红球菌菌株NHRI-I、NHRI-2、NHRI-3、 NHRI-4、NHRI-5、NHRI-6和NHRI-7 (保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物 中心（CGMCC)，保藏编号分别为 CGMCC No. 8590、CGMCC No. 8591、CGMCC No. 8592、CGMCC No. 8593、CGMCC No. 8594、CGMCC No. 8595 及 CGMCC No. 8596)以及购自于中国微生物菌种 保藏管理委员会普通微生物中心的两株红城红球菌菌株CGMCC4. 1491及CGMCC1. 2362的 冻存液各50 ii L加入到50mL液体培养基(组成成分为：蛋白胨1.00%、牛肉膏0.50%、葡萄 糖0. 50%、氯化钠0. 50% ;pH7. 2-7. 4,121°C高压灭菌20min)活化培养，培养条件为：温度为 30°C，转速为100r/min，培养时间48h。镜检确定相应活化培养液纯度后，取上述9种红城 红球菌菌株的活化培养液各40mL(活菌浓度彡109CFU/ml)，接种于10L摇瓶发酵培养基(组 成成分为：蛋白胨1. 〇〇%、牛肉膏0. 50%、葡萄糖0. 50%、氯化钠0. 50% ;pH7. 2-7. 4,121°C高 压灭菌20min)中进行摇瓶发酵培养，发酵培养温度30°C，pH值7. 2-7. 4,转速100r/min，发 酵时间48h。
[0043] 发酵结束后，每个菌株发酵样品取5L菌株发酵液于4°C保存，剩余发酵液(约5L) 进行离心分离得到发酵液上清，于4°C保存。离心分离条件为：转速10000r/min，温度4°C， 离心时间10min。
[0044] 实施例2混合比例5%的红城红球菌菌株发酵液对酿造调味品原料粉末中AFBl的 降解试验
[0045] 将实施例1中保存的菌株发酵液按5% (体积/重量比）的比例均匀混入经过粉 碎的污染了 AFBl的酿造调味品原料(大豆粉、玉米粉及大米粉等混合物）（AFBl含量为 0. 80mg/kg)中，每种菌株发酵液制备3份混合试验样品，每份样品500g，采用无菌水调整湿 度至80%-100%，无菌纱布包裹后置于32cmX 25cmX 8cm有孔(孔直径约0. 15cm)托盘中，在 温度30°C条件下，采用无菌水维持样品湿度，通风充分反应48h，在此过程中将pH值保持于 7. 2-7. 4。同时，在同等条件下设置5%比例的不含红城红球菌的发酵培养基混合样品作为 对照。
[0046] 反应完成后，每份样品取样5g，采用试剂盒（MycoSep226Afazon + Multifunctional Columns, Romer Labs Inc. MO, USA,生产批号：226903-1306)来提取反应 样品中残留的AFBl，采用HPLC-MS法检测反应样品中残留的AFBl的含量，计算相应酿造调 味品原料样品中的AFBl降解率，结果如表1所示（降解率以3份平行样品测定值的平均值 土标准差的形式示出）：
[0047] 混合比例5%的红城红球菌发酵液对酿造调味品原料中AFBl的降解率在48h时最 高达到82. 6%±2. 6% ;发酵培养基对照则未显示出对AFBl的降解作用。
[0048] 表1红城红球菌发酵液（5%)对酿造调味品原料中AFBl降解率检测结果（48h) *
[0049]
【主权项】
1. 红城红球菌在降解酿造调味品或其原料中的黄曲霉毒素BI (AFBl)中的用途。
2. 如权利要求1中所述的用途，其中，所述酿造调味品或其原料选自于各种农产品原 材料及各种农产品初级加工产品。
3. 如权利要求2中所述的用途，其中，所述农产品原材料为豆类、谷物类或果蔬类；所 述农产品初级加工产品为豆饼柏、谷物麸皮或果蔬皮渣； 优选地，所述酿造调味品或其原料为大豆粉、玉米粉及大米粉的混合物。
4. 如权利要求1-3中任一项所述的用途，其中，将所述红城红球菌的菌株发酵液或发 酵液上清均匀混入污染了 AFBl的目的酿造调味品或其原料中，从而进行AFBl的降解。
5. 如权利要求4中所述的用途，其中，所述红城红球菌的菌株发酵液或发酵液上清与 所述污染了 AFBl的目的酿造调味品或其原料的混合比例分别为：5%-12%及10%-25%，所述 比例均为体积/重量比。
6. 如权利要求4中所述的用途，其中，所述发酵液上清通过对所述发酵液进行离心而 获得。
7. 如权利要求4中所述的用途，其中，所述污染了 AFBl的目的酿造调味品或其原料在 进行AFBl降解前已经过粉碎处理。
8. 如权利要求1-3中任一项所述的用途，其中，所述降解在温度25-35 °C、湿度 80%-100%、pH5. 5-8. 5 的条件下通风反应 30-80h ; 优选地，所述降解在恒温条件下进行。
9. 如权利要求8中所述的用途，其中，所述降解在pH7. 2-7. 4的条件下进行。
10. 如权利要求1-3中任一项所述的用途，其中，所述红城红球菌选自于： 红城红球菌菌株 NHRI-1、NHRI-2、NHRI-3、NHRI-4、NHRI-5、NHRI-6 及 NHRI-7,所述菌 株于2013年12月17日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（CGMCC)， 保藏编号分别为 CGMCC No. 8590、CGMCC No. 8591、CGMCC No. 8592、CGMCC No. 8593、CGMCC No. 8594、CGMCC No. 8595 及 CGMCC No. 8596 ;和 / 或 保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（CGMCC)的红城红球菌菌株 CGMCC4. 1491 及 CGMCCL 2362。
【专利摘要】本发明涉及一种对酿造调味品或其原料中的黄曲霉毒素B1（AFB1）进行微生物脱毒的方法与用途，具体而言，本发明涉及将红城红球菌（Rhodococcus erythropolis）用于酿造调味品或其原料中的AFB1的脱毒的方法及用途。通过将含有AFB1的目的酿造调味品或其原料与红城红球菌菌株发酵液或其发酵液上清均匀混合并通风充分反应，就能够实现对酿造调味品或其原料中AFB1的高效降解脱毒。本发明提供的降解酿造调味品或其原料中AFB1的方法能够高效、温和且安全地降低酿造调味品或其原料中AFB1的含量，而且能耗低、设备要求低、废液（渣）产量小及环境污染少，特别适用于酿造调味品或其原料中AFB1的脱毒。CGMCC No.859020131217 CGMCC No.859120131217 CGMCC No.859220131217 CGMCC No.859620131217 CGMCC No.859320131217 CGMCC No.859420131217 CGMCC No.859520131217
【IPC分类】A23L1-015, A23L1-22
【公开号】CN104738362
【申请号】CN201310734051
【发明人】李慧, 刘洋, 蔡军, 黄蔚霞, 欧静堃, 刘佳佳, 王宇
【申请人】中粮营养健康研究院有限公司, 中粮集团有限公司
【公开日】2015年7月1日
【申请日】2013年12月27日