一种虫草牛蒡酵素的制备方法
【技术领域】
[0001 ] 本发明属于农产品深加工技术领域，特别涉及一种虫草牛蒡酵素的制备方法。
【背景技术】
[0002] 冬虫夏草又名虫草，冬虫草，夏草冬虫等，是我国独有的珍贵特产。根据分类系统， 冬虫夏草属真菌门（Eumycota)、子囊菌亚门（Ascomycotina)、核菌纲（Pyrenomycrees)、麦 角菌科（Clavicipitaceae)、虫草属（Cordyceps)，为一种寄生于鳞翅目昆虫蝙蝠蛾幼虫中 所形成的虫生真菌，也是一种名贵的药用真菌。冬虫夏草作为药用资源，在我国由来已久。 对于虫草的认识，我国可追溯到公元前11世纪西周至秦朝。从出土的文物中就发现有以虫 草作图案的玉雕饰品。1578年成书的《本草纲目》中记载有雪蚕，根据其生活史、性味功效、 形态、环境及产地判断，应当是冬虫夏草的古名。在1694年清朝汪昂的《本草备要》中也有 关于冬虫夏草的论述，该书记载："冬虫夏草，甘平，保肺益肾，止血化痰，止劳咳。四川嘉定 府所产者佳。冬在土中形如老蚕，有毛能动，至夏则毛出土上，连身俱化成草"，这是冬虫夏 草的最早文字记载。吴仪洛（1757)在《本草从新》中第一次详尽地记载了冬虫夏草及其药 用。赵学敏（1765)著的《本草纲目拾遗》把它的药用归之为"能治诸虚百损"。在中华医药 百味中，虫草正是以"治诸虚百损"、"阴阳平衡"、"保肺益肾、补精益气、专补命门"的神奇功 效被认为是一种不可多得的中药之宝而蜚声华夏，饮誉海外，与人参、鹿茸齐名，共称为中 国的三大补品。当前由于野生资源的枯竭，人工栽培冬虫夏草的技术尚未突破，故多采用蝉 花虫草、蛹虫草或人工发酵虫草菌丝体替代冬虫夏草生药。
[0003] 牛蒡属菊科两年生草本植物，别名蒡翁菜、牛鞭菜、蝙蝠刺、东洋萝卜。牛蒡具有丰 富的营养价值，富含纤维素、糖类、蛋白质、钙、磷、铁、生物碱、维生素 B及人体必需的17种 氨基酸等，其胡萝卜素含量在蔬菜中居第二位，蛋白质和钙的含量为根茎类之首。牛蒡主要 的价值更体现于其药用和保健功能，有健胃益气、利尿、滋阴壮阳、清热解毒、抑菌、消炎等 功能，同时有防治肿瘤、冠心病、糖尿病、结肠症和便秘等功能。
[0004] 酵素是十多年来风靡于欧美国家、日本、东南亚、台湾等国家和地区，深受人们追 捧的具有较好保健效果的微生物发酵制品。微生物酵素以一种或多种新鲜蔬菜、水果、菌 菇、中草药等为原料，经多种有益菌发酵而产生的，含有丰富的维生素、酶、矿物质和次生代 谢产物等营养成分的功能性微生物发酵产品。微生物通过其自身的物质代谢，使发酵原料 分解产生很多复杂的中间代谢产物或交叉代谢产物，实现代谢物质之间的代谢转化，产生 新的具有生理活性的物质和百余种新的生物酶。微生物酵素中不仅保存了发酵原料中原有 的营养物质，而且发酵代谢过程还产生了一些新的生物活性成分。研宄发现，微生物酵素中 含有多种对人体有益的营养保健成分，包括多酚类（黄酮醇、类黄酮、花青素、儿茶素类、酚 酸、苯乙烯、香豆素、木质素、丹宁酸、鞣质等），有机酸（没食子酸、琥珀酸、丙酮酸、苹果酸 等），多种糖类和多种生物活性成分等，其主要的生物活性表现在延缓衰老、预防和治疗心 脑血管疾病；显著的细菌生长抑制活性；抗氧化活性和免疫调节作用等。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的在于克服上述现有技术中存在的缺点与不足，提供一种虫草牛蒡酵 素的制备方法。本发明的制备方法是将一种冬虫夏草液体发酵、食用菌及果蔬深加工成一 种酵素，将发酵液和酵素混合加工成的一种虫草牛蒡酵素。旨在解决虫草和酵素的产品形 式单调，缺乏具有滋肝益肾等保健功能的虫草酵素型饮料的问题。
[0006] 本发明的目的通过下述技术方案实现：一种虫草牛蒡酵素的制备方法，包括以下 步骤：
[0007] (1)冬虫夏草液体种子的制备；
[0008] (2)冬虫夏草液体发酵；
[0009] (3)原料清洗、破碎；
[0010] ⑷酵素发酵；
[0011] (5)混合、均质；
[0012] (6)超微粉碎、保温；
[0013] (7)过滤、浓缩、灌装，获得虫草牛蒡酵素。
[0014] 作为本发明的一种优选方案，步骤（1)所述的冬虫夏草液体种子的制备，具体步 骤如下：按照10%香蕉汁2~5份、10%土豆汁2~8份、鲜牛奶1~3份比例混合液体、在 每L混合液中加入10~30g蔗糖、5~IOg复合氨基酸，充分溶解后，液体培养基装入500ml 三角瓶，每瓶装液量为200ml，于121°C灭菌15min~20min，接入斜面菌种，接种量2cm2/瓶， 19°C恒温震荡培养箱培养10~15d，可得到液体菌种。
[0015] 作为本发明的一种优选方案，步骤（2)所述的冬虫夏草液体发酵，具体步骤为：按 照10%香蕉汁2~5份、10%土豆汁2~8份、鲜牛奶1~3份比例混合液体、纯净水3~ 10份在每L混合液中加入5~20g鹿糖、5~8g复合氨基酸、1~3g蚕蛹浸出粉、5~IOg 酵母粉、〇. 5g磷酸二氢钾、0. 2g硫酸镁，各物料充分溶解后调整pH值为6. 0~6. 5,置入发 酵罐于121°C灭菌15min~30min，后接入液体种子发酵；冬虫夏草发酵罐发酵，以容积为 1000L气升式发酵罐为例，发酵罐装液量为500~700L、罐压为0. 05~0. lOMpa、通气量为 体积比1:0. 8、温度15~17°C，避光发酵14d，可得到冬虫夏草发酵醪液。
[0016] 作为本发明的一种优选方案，步骤（3)所述的原料清洗、破碎，具体步骤为：将鲜 虫单花虫草1~5份、牛蒡2~8份、蛹虫草2~5份、猴头葫1~4份、苹果1~5份、猕猴 桃1~5份、葡萄1~5份、黄瓜1~5份、白萝卜1~5份、梓檬1~5份、生姜1~5份、 木瓜1~5份，纯水清洗干净、50°C热风循环烘箱烘干，果蔬粉碎机粉碎过10目筛，加入上 述各原料总质量的〇. 1~〇. 5倍质量的白砂糖，混匀装坛密闭静置存放。
[0017] 作为本发明的一种优选方案，步骤（4)所述的酵素发酵，具体步骤为：酵素发酵存 放期间1~15d期间维持料液温度20~25°C、15~25d期间维持料液温度25~30°C，25d 后接入固体益生菌种粉（每克菌种粉含有益总菌数多500亿CFU，其中植物乳杆菌多200亿 CFU、保加利亚乳杆菌多200亿CFU、德氏乳杆菌多500亿CFU)，接种量为每升酵素液接入Ig 固体菌种粉，维持料液温度35°C，120d后，即可得到酵素原液。
[0018] 作为本发明的一种优选方案，步骤（5)所述的混合、均质，具体步骤为：将发酵好 的冬虫夏草醪液和酵素原液按照1:2~10的比例混合、采用高剪切均质机均质。
[0019] 作为本发明的一种优选方案，步骤（6)所述的超微粉碎、保温，具体步骤为：双级 剪切式胶体磨进一步超微破碎，使料液中固体颗粒直径小于0. 5 μ m，于30~50°C的温度条 件保存6h。
[0020] 作为本发明的一种优选方案，步骤（7)所述的过滤、浓缩、灌装，具体步骤为：保温 贮存后的料液采用〇. 45um的陶瓷膜过滤澄清处理后，经反渗透膜浓缩后、无菌灌装，即得 红棕色的虫草牛蒡酵素。
[0021] 上述的虫草牛蒡酵素的制备方法，具体制备步骤为：
[0022] (1)冬虫夏草培养液体种子培养基制备，按照10%香蕉汁2~5份、10%土豆汁 2~8份、鲜牛奶1~3份比例混合液体、在每L混合液中加入10~30g鹿糖、5~IOg复 合氨基酸，充分溶解后，液体培养基装入500ml三角瓶，每瓶装液量为200ml，于121°C灭菌 15min~20min，接入斜面菌种，接种量2cm2/瓶，19°C恒温震荡培养箱培养10~15d，可得 到液体菌种；
[0023] (2)冬虫夏草发酵罐发酵，按照10%香蕉汁2~5份、10%土豆汁2~8份、鲜牛 奶1~3份比例混合液体、纯净水3~10份在每L混合液中加入5~20g鹿糖、5~8g复 合氨基酸、1~3g蚕蛹浸出粉、5~IOg酵母粉、0. 5g磷酸二氢钾、0. 2g硫酸镁，各物料充分 溶解后调整pH值为6. 0~6. 5,置入发酵罐于121°C灭菌15min~30min，后接入液体种子 发酵。冬虫夏草发酵罐发酵，以容积为1000L气升式发酵罐为例，发酵罐装液量为500~ 700L、罐压为0. 05~0. lOMpa、通气量为体积比1:0. 8、温度15~17°C，避光发酵14d，可得 到冬虫夏草发酵醪液；
[0024] (3)将市售鲜蝴花虫草1~5份、牛蒡2~8份、蛹虫草2~5份、猴头葫1~4份、 苹果1~5份、猕猴桃1~5份、葡萄1~5份、黄瓜1~5份、白萝卜1~5份、朽1檬1~ 5份、生姜1~5份、木瓜1~5份，纯水清洗干净、50°C热风循环烘箱烘干，果蔬粉碎机粉 碎过10目筛，加入上述各原料总质量的0. 1~0. 5倍质量的白砂糖，混匀装坛密闭静置存 放；
[0025] (4)酵素发酵存放期间1~15d期间维持料液温度20~25°C、15~25d期间维持 料液温度25~30°C，25d后接入固体益生菌种粉（每克菌种粉含有益总菌数多500亿CFU， 其中植物乳杆菌多200亿CFU、保加利亚乳杆菌多200亿CFU、德氏乳杆菌多500亿CFU)，接 种量为每升酵素液接入Ig固体菌种粉，维持料液温度35°C，120d后，即可得到酵素原液；
[0026] (5)将发酵好的冬虫夏草醪液和酵素原液按照1:2~10的比例混合、采用高剪切 均质机均质；
[0027] (6)双级剪切式胶体磨进一步超微破碎，使料液中固体颗粒直径小于0. 5 μ m，于 30~50°C的温度条件保存6h ;
[0028] (7)保温贮存后的料液采用0. 45um的陶瓷膜过滤澄清处理后，经反渗透膜浓缩 后、无菌灌装，即得红棕色的虫草牛蒡酵素。
[0029] -种