基中添加初始培养基重量3_5wt %的蛋 氨酸螯合铜。
[0060] 所述酶解玉米粉的制备方法为：将玉米粉与水混合，湿法粉碎制备细微玉米粉 料液，加入a -淀粉酶和氯化钙，调节pH 5. 5-6. 0,72°C保温15min，再加热至90°C酶解 20-30min，然后降温至55-60°C，调节pH4. 5-5. 0,添加酸性蛋白酶水解30-40min，酶解液离 心洗涤后即得浓缩的酶解玉米粉。
[0061] 所述枸杞酶解粉的制备方法如下：
[0062] 枸杞冲洗后迅速冷冻至_20°C至_40°C ;升华干燥，真空度400_500Pa，温度-KTC 至-0°C，干燥到水分〈12% ;控制温度在-KTC粉碎至粒径在I. 2_以下；添加枸杞重量4 倍的亚硫酸钠水溶液，控制溶液的pH为4,添加混合物重量0. 5 %的复合酶，所述复合酶 由酸性果胶酶、纤维素酶和葡聚糖酶组成，酸性果胶酶、纤维素酶和葡聚糖酶的重量比为 2. 5 : 1 : 1，酶解温度为50°C，酶解时间为2h;之后将pH值调整为5. 3,温度升到55°C，同 时添加混合物重量0. 4%的果胶酶和0. 3%的蛋白酶，作用时间为2. 5h ;酶解液在6°C过滤； 滤液喷雾干燥后粉碎过60目筛，即得枸杞酶解粉。所述枸杞酶解粉中多糖含量达到42%。
[0063] 所述海洋红酵母发酵培养物的制备方法如下：
[0064] 发酵培养基组成为葡萄糖1 %，酶解玉米粉2 %，蛋白胨2. 5 %，硫酸镁0. 02 %，磷 酸二氢钾〇. 15 %，铜含量180mg/L (硫酸铜配置，以铜离子计算），氯化钠20 %，其余为水； 初始pH为8,接种量5%，摇床转速为60r/min，26°C培养12小时后调整温度为18°C进行低 温静止培养，停止搅拌，PH调整为4,保持3小时；之后每小时2-4°C阶梯形升温到28°C，pH 调整为5. 3,按照2. 5 %的添加量添加蛋白胨，按照2 %的量添加酵母粉；摇床转速为80r/ min，继续发酵12h。发酵液干燥粉碎过50-60目筛后即得海洋酵母发酵培养物。
[0065] 优选的，在低温静止培养阶段向培养基中添加培养基重量4wt%的灭菌蛋氨酸螯 和铜。
[0066] 所述酶解玉米粉的制备方法为：将玉米粉与水混合，湿法粉碎制备细微玉米粉 料液，加入a -淀粉酶和氯化钙，调节pH 5. 5-6. 0,72°C保温15min，再加热至90°C酶解 20min，然后降温至55°C，调节pH4. 5-5. 0,添加酸性蛋白酶水解40min，酶解液离心洗涤后 即得浓缩的酶解玉米粉。
[0067] 采用上述方法发酵培养海洋红酵母WYN1，其生物量、类胡萝卜素产量及胞内铜含 量分别为28g/L以上、38mg/L和7650 y g/g干菌。
[0068] 饲料添加剂的制备方法如下：
[0069]将甘草、山楂、鱼腥草和蒲公英分别干燥粉碎过60目筛，再与通过上述方法制得 的海洋红酵母发酵培养物、复合多糖提取物和枸杞酶解粉按所述比例混合均匀即可
[0070] 实施例4 :饲料添加剂及其制备
[0071] 饲料添加剂的重量份数组成如下：
[0072] 复合多糖提取物12,海洋红酵母发酵培养物20,枸杞酶解粉10,甘草8,山楂8,鱼 腥草5,蒲公英8 ;所述复合多糖提取物来自黄芪和苜蓿；所述海洋红酵母保藏编号为CCTCC No :M 2014592。
[0073] 所述复合多糖提取物的制备方法如下：
[0074] 将原料黄芪和苜蓿质量比5:1干燥粉碎过60目筛，添加粉碎物总重量6倍沸水， 浸提3次每次30min，过滤将浸提液混合，自然冷却至室温，向浸提液中加入无水乙醇，使混 合液中乙醇浓度达到85%，KTC密闭冷藏沉淀6小时，沉淀物真空干燥，粉碎过60目筛，即 得复合多糖提取物。
[0075] 所述海洋红酵母发酵培养物的制备方法如下：
[0076] 发酵培养基组成为葡萄糖1%，酶解玉米粉1%，蛋白胨2. 5%，硫酸镁0.02%，磷 酸二氢钾〇. 15%，铜含量200mg/L，氯化钠20 %，其余为水；初始pH为8,接种量8 %，摇床 转速为80r/min，24°C培养10小时后调整温度为16°C进行低温静止培养，停止搅拌，pH调 整为5,保持2小时；之后阶梯形升温到26°C，pH调整为5. 5,按照2. 5%的添加量添加蛋白 胨，按照2 %的量添加酵母粉；摇床转速为50r/min，继续发酵15h。发酵液干燥粉碎过50-60 目筛后即得海洋酵母发酵培养物。
[0077] 优选的，在低温静止培养阶段向培养基中添加培养基重量3wt%的蛋氨酸螯和铜。
[0078] 所述酶解玉米粉的制备方法为：将玉米粉与水混合，湿法粉碎制备细微玉米粉 料液，加入a -淀粉酶和氯化钙，调节pH 5. 5-6. 0,72°C保温15min，再加热至90°C酶解 30min，然后降温至60°C，调节pH4. 5-5. 0,添加酸性蛋白酶水解30min，酶解液离心洗涤后 即得浓缩的酶解玉米粉。
[0079] 采用上述方法发酵培养海洋红酵母WYN1，其生物量、类胡萝卜素产量及胞内铜含 量分别为27g/L以上、35mg/L和7350 y g/g干菌。
[0080] 所述枸杞酶解粉的制备方法如下：枸杞冲洗后迅速冷冻至_20°C至40°C ;升华干 燥，真空度400-500Pa，温度-KTC至0°C，干燥到水分〈12% ;控制温度在-KTC至_2°C粉 碎至粒径在I. 2_以下；添加枸杞重量2倍的亚硫酸钠水溶液，控制溶液的pH为3,添加混 合物重量0.3%的复合酶，所述复合酶由酸性果胶酶、纤维素酶和葡聚糖酶组成，酸性果胶 酶、纤维素酶和葡聚糖酶的重量比为2.5 : 1 : 1.5,酶解温度为45°C，酶解时间为2.5h; 之后将pH值调整为5. 0,温度升到50°C，同时添加混合物重量0. 2%的果胶酶和0. 5%的蛋 白酶，作用时间为2. 5h;酶解液在5°C过滤；滤液喷雾干燥后粉碎过60目筛，即得枸杞酶解 粉。
[0081] 饲料添加剂的制备方法如下：
[0082] 将甘草、山楂、鱼腥草和蒲公英分别干燥粉碎过60目筛，再与通过上述方法制得 的海洋红酵母发酵培养物、复合多糖提取物和枸杞酶解粉按所述比例混合均匀即可
[0083] 实施例5 :饲料添加剂及其制备
[0084] 饲料添加剂的重量份数组成如下：
[0085]复合多糖提取物15,海洋红酵母发酵培养物8,枸杞酶解粉5,甘草3,山楂6,鱼腥 草3,蒲公英I ;所述复合多糖提取物来自黄芪和苜蓿；所述海洋红酵母保藏编号为CCTCC No :M 2014592。
[0086] 所述复合多糖提取物的制备方法如下：
[0087] 将原料黄芪和苜蓿干燥粉碎过60目筛，添加粉碎物总重量7倍沸水，浸提2次每 次40min，过滤将浸提液混合，自然冷却至室温，向浸提液中加入无水乙醇，使混合液中乙醇 浓度达到80%，KTC密闭冷藏沉淀7小时，沉淀物真空干燥，粉碎过60目筛，即得复合多糖 提取物。
[0088] 所述海洋红酵母发酵培养物由如下方法制备：
[0089] 发酵培养基组成为葡萄糖1%，酶解玉米粉3%，蛋白胨2. 5%，硫酸镁0.02%，磷 酸二氢钾〇. 15 %，铜含量150mg/L (硫酸铜配置，以铜离子计算），氯化钠20 %，其余为水； 初始pH为8,接种量3%，摇床转速为50r/min，28°C培养15小时后调整温度为20°C进行低 温静止培养，停止搅拌，PH调整为3,保持4小时；之后阶梯形升温到30°C，pH调整为4. 8， 按照初始培养基2. 5 %的添加量添加蛋白胨，按照2 %的量添加酵母粉，摇床转速为IOOr/ min，继续发酵IOh ;发酵液干燥粉碎过50-60目筛后即得海洋酵母发酵培养物。
[0090] 优选的，在所述低温静止培养阶段向培养基中添加初始培养基重量5wt %的蛋氨 酸螯合铜。
[0091] 所述酶解玉米粉的制备方法同实施例4。
[0092] 饲料添加剂的制备方法如下：
[0093] 将甘草、山楂、鱼腥草和蒲公英分别干燥粉碎过60目筛，再与通过上述方法制得 的海洋红酵母发酵培养物、复合多糖提取物和枸杞酶解粉按所述比例混合均匀即可
[0094] 所述枸杞酶解粉的制备方法如下：枸杞冲洗后迅速冷冻至_20°C至40°C ;升华干 燥，真空度400-500Pa，温度-KTC至0°C，干燥到水分〈12% ;控制温度在-KTC至_2°C粉 碎至粒径在I. 2mm以下；添加枸杞重5倍的亚硫酸钠水溶液，控制溶液的pH为5,添加混合 物重量0. 6%的复合酶，所述复合酶由酸性果胶酶、纤维素酶和葡聚糖酶组成，酸性果胶酶、 纤维素酶和葡聚糖酶的重量比为2.5 : 1 : (1-1.2)，酶解温度为55°C，酶解时间为3h