一种提高免疫机能的虹鳟鱼饲料添加剂及其制备方法和用图_2

文档序号:9459130阅读:来源:国知局
、麦教14份。
[0030] 制备过程与实施例3 -致。 阳0川 实施例5
[0032] 本发明实施例中,一种提高免疫机能的虹縛鱼饲料添加剂,由W下按照重量份的 原料组成:波缘惚木6份、秦巧3份、胡萝h20份、麦教13份。
[0033] 制备过程与实施例3 -致。
[0034] 对比例1
[0035] 不包含波缘惚木,其余过程与实施例5 -致。
[0036] 对比例2
[0037] 仅含有波缘惚木,其余过程与实施例5 -致。 阳0測 实施例6
[0039] 本实施例选择规格整齐,体格健壮,平均体质量(280. 39 + 3. 8g的虹縛鱼360尾, 随机分6组,每组设3个重复,每重复组20尾鱼。I~III组为试验组,分别饲喂在基础饲料 中添加了 500mg/kg、1000mg/kg、1500mg/kg、2000mg/kg、2500mg/kg的实施例 5 饲料添加剂 的饲料,另设一对照组,投喂基础饲料。试验进行60d停止投食,停食第2d,测定虹縛鱼血细 胞的吞隧活性、溶菌酶活力。 W40] 免疫指柄测定:
[0041] 1、采血
[0042] 停饲后第2d,随机拱取10尾供试鱼,用MS-222 (150mg/L)麻醉鱼体,1 %肝素湿润 的注射器尾部血管采血。将每尾鱼的血液分为2份,其中1份血液首先在室溫下静置比待 其凝固,置冰箱4°C保存4h,4°C,400化/min离屯、lOmin,收集血清用于溶菌酶测定;另1份 用肝素抗凝,制备抗凝血,供测定白细胞吞隧活性。
[0043] 2、吞隧细胞吞隧功能的测定
[0044] 在抗凝血中加入0. 25ml金黄色葡萄球菌悬液,充分混匀后于28°C下水浴比,水浴 期间每隔lOmin摇匀1次。再加入0. 15mol/L冷化C1溶液0. 8ml,2000;r/min离屯、4min,弃 去上清液。然后用吸管吸取血细胞涂片,每个血样涂5片,甲醇固定5~7min,蒸馈水冲洗, Giemsa染色1~化,水洗惊干后镜检。吞隧活性分别W吞隧百分比(P巧和吞隧指数(PI) 表示:PP%= (100个吞隧细胞中参与吞隧的细胞数/100)X100%;PI%=(吞隧细胞内的 细菌总数/参与吞隧的吞隧细胞数)X100%。 柳例 3、溶菌酶化S幻活力的测定
[0046] W溶壁微球菌为底物,用0.Imol/ml憐酸缓冲液(P册.4)将溶壁微球菌配成 0. 3mg/ml的菌悬液,每个样品取3ml菌悬液,吸取0. 04ml血清加入菌悬液中,混匀后立即 用UV-2000分光光度计于570皿下测定A0值。然后在37°C水浴中溫浴30min后,取出置于 4°C水浴中lOminW终止反应,测定其于570nm处的光密度值A,按下式计算溶菌酶活力:
[0047] U=(A0-A)/A0。
[0048] 测定结果见表 1。结果表明,添加了 500mg/kg、lOOOmg/kg、1500mg/kg、2000mg/kg、 2500mg/kg的饲料添加剂的饲料均能显著地提高虹縛鱼的吞隧活力,其吞隧百分比、吞隧指 数与对照组相比,差异均极显著,且虹縛鱼血清溶菌酶活力也显著地提高。1500mg/kg饲料 添加剂组吞隧百分比、吞隧指数好于500mg/kg、1000mg/kg、2000mg/kg、2500mg/kg的饲料 添加剂组。
[0049]表1 阳化0] 阳化1] 实施例7
[0052] 本实施例自养殖渔场选取2龄健康虹縛鱼720尾,平均体重(281. 6 + 5. 5)g,随机 分为8组,每组3个重复,每个重复30尾鱼(雌雄各占1/2)。6组试验鱼分别饲喂在基础 饲料中添加0 (对照组)、1500mg/kg本发明实施例1-5饲料添加剂的试验饲料,另外2组试 验鱼分别饲喂在基础饲料中添加1500mg/kg对比例1-2的试验饲料。
[0053] 虹縛鱼养殖8周后,经迟纯爱德华氏菌活菌攻毒96h,试验结果见表2,对照组死亡 率为80%,各添加组的死亡率均有所降低,获得了一定的免疫保护率,尤其是实施例5组, 死亡率仅为15%,免疫保护率达到82. 3%。
[0054] 免疫保护率=(对照组死亡率-试验组死亡率)/对照组死亡率*100 %。 阳化5] 表2
[0056]
口〇贡_对于本领域技术人员而言^显然本发明不限于上述示范性实施例的细节,而且在 不背离本发明的精神或基本特征的情况下,能够W其他的具体形式实现本发明。因此,无论 从哪一点来看,均应将实施例看作是示范性的,而且是非限制性的,本发明的范围由所附权 利要求而不是上述说明限定,因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有 变化囊括在本发明内。
[0058] 此外,应当理解,虽然本说明书按照实施方式加W描述,但并非每个实施方式仅包 含一个独立的技术方案,说明书的运种叙述方式仅仅是为清楚起见,本领域技术人员应当 将说明书作为一个整体,各实施例中的技术方案也可W经适当组合,形成本领域技术人员 可W理解的其他实施方式。
【主权项】
1. 一种提高免疫机能的虹鳟鱼饲料添加剂,其特征在于,由以下按照重量份的原料组 成:波缘橡木3-8份、秦艽1-5份、胡萝卜15-25份、麦麸10-15份。2. 根据权利要求1所述的提高免疫机能的虹鳟鱼饲料添加剂,其特征在于,由以下按 照重量份的原料组成:波缘橡木5-7份、秦艽2-4份、胡萝卜18-22份、麦麸12-14份。3. 根据权利要求2所述的提高免疫机能的虹鳟鱼饲料添加剂,其特征在于,由以下按 照重量份的原料组成:波缘橡木6份、秦艽3份、胡萝卜20份、麦麸13份。4. 如权利要求1-3任一所述的提高免疫机能的虹鳟鱼饲料添加剂的制备方法,其特征 在于,由以下步骤组成: 1) 取波缘橡木,粉碎过140目筛,以95% (v/v)乙醇为溶剂,料液比I:25-30mg/mL,在 70-75°C下超声处理50-60min,超声处理功率为500-600W,然后将超声后的料液在70-75°C 下浸渍提取2-3h,提取2-3次,合并提取液即得波缘橡木溶液; 2) 取秦充,粉碎过140目筛,以95% (v/v)乙醇为溶剂,料液比I:15-20mg/mL,在 80-85°C下超声处理50-60min,超声处理功率为500-600W,然后将超声后的料液在80-85°C 下浸渍提取2-3h,提取2-3次,合并提取液即得秦艽溶液; 3) 将波缘橡木溶液与秦艽溶液混合后,置入低温真空浓缩设备中进行浓缩,低温温度 为45-50°C,浓缩时间为15-20min,得混合浓缩液; 4) 将混合浓缩液加入其质量6-8倍的水,并加热至50-60°C,搅拌10_15min,制得混 合水溶液;将胡萝卜洗净、烘干后,与麦麸混合后研磨成粉,然后加入混合水溶液,混合均匀 后,静置l〇_12h,经过造粒即得虹鳟鱼饲料添加剂。5. 如权利要求1-3任一所述的虹鳟鱼饲料添加剂用于制备提高免疫机能的饲料添加 剂中的应用。6. 根据权利要求5所述的虹鳟鱼饲料添加剂用于制备提高免疫机能的饲料添加剂中 的应用,其特征在于,虹鳟鱼饲料添加剂按照500-2500mg/kg的添加量添加到基础饲料中。7. 根据权利要求6所述的虹鳟鱼饲料添加剂用于制备提高免疫机能的饲料添加剂中 的应用,其特征在于,虹鳟鱼饲料添加剂按照1500mg/kg的添加量添加到基础饲料中。
【专利摘要】本发明公开了一种提高免疫机能的虹鳟鱼饲料添加剂及其制备方法和用途,该虹鳟鱼饲料添加剂,由以下按照重量份的原料组成:波缘楤木3-8份、秦艽1-5份、胡萝卜15-25份、麦麸10-15份。将波缘楤木与秦艽分别粉碎过筛、超声处理、浸渍提取2-3次,合并提取液即得波缘楤木溶液与秦艽溶液;混合后经过浓缩得混合浓缩液;将混合浓缩液加水,加热搅拌10-15min,制得混合水溶液;将胡萝卜洗净、烘干后,与麦麸混合后研磨成粉,加入混合水溶液,静置、造粒即得虹鳟鱼饲料添加剂。本发明饲料添加剂成分来源广泛,价格低廉,提高虹鳟鱼免疫力,增强机身功能,适于大规模养殖虹鳟鱼。
【IPC分类】A23K1/16, A23K1/14, A23K1/18
【公开号】CN105211587
【申请号】CN201510762701
【发明人】刘雷
【申请人】刘雷
【公开日】2016年1月6日
【申请日】2015年11月10日
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