一种减轻流感病毒感染引起机体损伤的药物的制作方法
【技术领域】
[0001 ]本发明涉及免疫学及流行病学领域，具体地说，涉及一种减轻流感病毒感染引起机体损伤的药物。
【背景技术】
[0002]流感是人类最常见的传染病之一，流感病毒随着在禽类、家畜和人类之间的循环而不断变异，出现跨物种屏障的新重组病毒的威胁永远存在。
[0003]为了进一步研究流感病毒的致病机制，通常需要构建流感病毒感染BALB/c动物模型，直接从感染人体中分离出的流感病毒，最初并不有效地感染小鼠，需要不断在小鼠体内传代，使毒株的毒力和致病力改变，制成鼠肺适应株，从而建立流感病毒的小鼠感染模型。有些强毒株不需要进行受试动物的体内连续传代，即可直接感染受试动物，建立感染模型。如孙惠惠(A/California/7/2009与A/California/4/2009病毒感染力比较，鲍琳琳等；中国比较医学杂志，2010.01)建立的BALB/c小鼠H1N1流感病毒(A/California/7/2009)的动物模型，未经过BALB/c小鼠体内的连续传代即建立了感染模型。
[0004]目前，关于流感以及流感病毒的临床研究通常不按照性别进行数据分析，或者实验动物根本不报道性别。本发明提供流感病毒感染动物后两性间病原发生情况的不同，以及这种差异是由于性激素对于炎症免疫反应的效应差异引起的。本发明拟通过小鼠染毒试验，研究雄性激素与流感病毒和宿主免疫系统的关系，力图在雄性激素和流感病毒和宿主的致病的分子机理研究上有新的突破，为防治流感的新药筛选和临床治疗提供理论依据和靶标。
【发明内容】
[0005]本发明的目的是提供一种减轻流感病毒感染引起机体损伤的药物。
[0006]为了实现本发明目的，本发明的一种减轻流感病毒感染引起机体损伤的药物，其有效成分为雄性激素。
[0007]优选地，本发明的一种减轻流感病毒感染引起机体损伤的药物，其有效成分为二氢睾酮(DHT)。
[0008]所述药物中还含有维生素C(VC)，DHT和VC的质量比为1:2-10，优选1:4。
[0009]本发明所述的药物为溶液剂、乳剂、混悬剂、针剂等剂型。
[0010]更优选地，所述药物是将二氢睾酮和维生素C溶解于玉米胚芽油中制成的针剂。所述针剂的单次剂量单元为:二氢睾酮0.5-1.5mg/kg体重；维生素C 2_10mg/kg体重，优选4mg/kg体重。采用皮下注射的方式给药。
[0011]本发明还提供上述针剂的制备方法:按比例称取DHT、VC，加入玉米胚芽油中，搅拌1小时左右，待DHT和VC完全溶解，即得。
[0012]本发明还提供雄性激素在制备用于减轻流感病毒感染引起机体损伤的药物中的应用。
[0013]本发明还提供二氢睾酮在制备用于减轻流感病毒感染引起机体损伤的药物中的应用。
[0014]本发明通过将流感病毒感染雄性小鼠，并使用雄性激素处理小鼠，发现处理组比对照组发病率及死亡率低，随后进行病理学检测及肺泡灌注液(BALF)中炎细胞总数和各种炎症细胞比例的分析，并通过细胞水平实验验证组织病理的实验结果。
[0015]本发明首次揭示了流感病毒感染后雄激素对雄性小鼠的保护作用，该机制的发现具有较强的临床意义，可以为雄性流感的预防措施和治疗方法优化提供坚实的基础。
【附图说明】
[0016]图1为本发明实施例1中各实验组小鼠感染WSN病毒后体重、体温、存活率的变化情况。
[0017]图2为本发明实施例1中各实验组的小鼠肺泡灌注液中总细胞数量和中性粒细胞、巨噬细胞及淋巴细胞比例的变化图。
[0018]图3为本发明实施例1中感染WSN病毒9天后解剖小鼠所得肺部组织切片。
[0019]图4为本发明实施例1中感染WSN病毒9天后肺泡巨噬细胞中Ml和M2相关Marker的表达情况。
【具体实施方式】
[0020]以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。若未特别指明，实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段，所用原料均为市售商品。
[0021 ] 本发明中使用的维生素C，化学名称L-抗坏血酸，简写VC，CAS N0.50-81-7，分子式ΟθΗβΟθ，分子量 176.12。
[0022]实施例1雄性激素在制备用于减轻流感病毒感染引起机体损伤的药物中的应用
[0023]用于减轻流感病毒感染引起机体损伤的针剂，针剂配方如下:DHT0.0125g、VC
0.05g、玉米胚芽油50mL。
[0024]按比例称取DHT、VC，加入玉米胚芽油中，搅拌1小时左右，待DHT和VC完全溶解，SP得。
[0025]①小鼠感染流感病毒:将2-3月龄、体重约25g的雄性C57BL/6鼠随机分成实验组1、实验组2、实验组3，每组10只。乙醚轻度麻醉后，三个实验组小鼠滴鼻接种流感病毒WSN病毒液50yl(3000pfu，)。三个实验组小鼠接种病毒后，实验组1小鼠皮下注射玉米胚芽油(oil)
0.lmL，实验组2小鼠皮下注射含lmg DHT的玉米胚芽油0.lmL，实验组3小鼠皮下注射含lmgDHT和4mg VC的玉米胚芽油0.lmL。然后每天记录小鼠体温体重情况，以检测小鼠染病率及致死率。
[0026]各实验组小鼠感染WSN病毒后体重、体温、存活率的变化情况如图1所示。从图1可以看出，DHT组和DHT+VC组能够抑制病毒的感染，能够提高小鼠的存活率。
[0027]结果表明，DHT+VC组比单药DHT组效果更好，其中DHT+VC组中，按DHT lmg/kg体重/d，VC 4mg/kg体重/d给药效果最显著。
[0028]图2为各实验组小鼠肺泡灌注液中总细胞数、中性粒细胞、巨噬细胞及淋巴细胞比例的变化图。
[0029]③感染WSN病毒9天后解剖小鼠，进行病理切片分析肺部炎症反应的程度。
[0030]各实验组小鼠肺部组织切片见图3。
[0031]④分离感染WSN病毒9天后的小鼠肺泡巨噬细胞，检测促炎相关的Ml巨噬细胞的Marker和抑制炎症相关的M2巨噬细胞的Marker.如图4所示，细胞水平实验表明，DHT处理和DHT+VC处理可抑制肺泡巨噬细胞中Ml巨噬细胞的Marker表达，而促进M2巨噬细胞的Marker的表达。
[0032]组织和细胞水平的实验结果均表明，本发明制备的针剂能够通过抑制肺部的炎症反应，从而有效地降低雄性小鼠病毒的感染，能够抑制小鼠感染后的发病率，提高小鼠的存活率。
[0033]虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。
【主权项】
1.一种减轻流感病毒感染引起机体损伤的药物，其特征在于，其有效成分为雄性激素。2.根据权利要求1所述的药物，其特征在于，其有效成分为二氢睾酮。3.根据权利要求2所述的药物，其特征在于，所述药物中还含有维生素C，二氢睾酮和维生素C的质量比为1:2-10，优选1:4。4.根据权利要求1-3任一项所述的药物，其特征在于，所述药物为溶液剂、乳剂、混悬剂、针剂。5.根据权利要求4所述的药物，其特征在于，其是将二氢睾酮和维生素C溶解于玉米胚芽油中制成的针剂。6.根据权利要求5所述的药物，其特征在于，单次剂量单元为:二氢睾酮0.5-1.5mg/kg体重;维生素C 2-10mg/kg体重，优选4mg/kg体重。7.雄性激素在制备用于减轻流感病毒感染引起机体损伤的药物中的应用。8.二氢睾酮在制备用于减轻流感病毒感染引起机体损伤的药物中的应用。
【专利摘要】本发明提供一种减轻流感病毒感染引起机体损伤的药物，所述药物的有效成分为雄性激素。优选地，所述药物的有效成分为二氢睾酮。本发明首次揭示了流感病毒感染后雄激素对雄性小鼠的保护作用，该机制的发现具有较强的临床意义，可以为雄性流感的预防措施和治疗方法优化提供坚实的基础。
【IPC分类】A61P31/16, A61K31/566, A61K31/375
【公开号】CN105456276
【申请号】CN201510958363
【发明人】李向东, 郭仰东, 姚建飞
【申请人】中国农业大学
【公开日】2016年4月6日
【申请日】2015年12月18日