专利名称：作为5－ht的制作方法
技术领域：
1-氨基-烷基环己烷的新用途。
现有技术现有技术的代表是我们在2000年3月7日的在先专利USP6,034,134和我们的公开申请WO 99/01416、PCT/EP98/04026和Parsons等人，Neuropharmacology(神经药理学)38，85-108(1999)，其中公开了本发明使用的活性化合物，并公开它是NMDA受体拮抗剂和抗惊厥药。
本发明本发明涉及选自下式化合物的1-氨基-烷基环己烷化合物和它们的对映体、光学异构体、水合物和药学上可接受的盐以及它们的药物组合物的新用途， 其中，R*为-(CH2)n-(CR6R7)m-NR8R9；其中，n+m＝0、1或2；其中，R1至R7独立地选自氢和低级烷基(1-6C)；和其中，R8和R9各自代表氢和低级烷基(1-6C)或一起代表低级亚烷基-(CH2)x-，其中x为2-5，包括2和5；以及这些化合物和组合物作为5HT3和神经元烟碱性受体拮抗剂以及神经保护剂用于治疗活动物以减轻对其具有反应性的病症的制备和用途。
这些化合物的代表如下MRZ 2/5791-氨基-1，3，3，5，5-五甲基环己烷，HCl6011-氨基-1-丙基-3，3，5，5-四甲基环己烷，HCl6071-氨基-1，3，3，5(反式)-四甲基环己烷(轴向氨基)，HCl6151-氨基-1，3，5，5-四甲基-3-乙基环己烷(非对映体的混合物)，HCl6161-氨基-1，3，5-三甲基环己烷(非对映体的混合物)，HCl6171-氨基-1，3-二甲基-3-丙基环己烷(非对映体的混合物)，HCl6181-氨基-1，3(反式)，5(反式)-三甲基-3(顺式)丙基环己烷，HCl6201-氨基-1，3-二甲基-3-乙基环己烷，HCl6211-氨基-1，3，3-三甲基环己烷，HCl6251-氨基-1，3(反式)-二甲基环己烷，HCl6271-氨基-1-甲基-3(反式)丙基环己烷，HCl6291-氨基-1-甲基-3(反式)乙基环己烷，HCl6321-氨基-1，3，3-三甲基-5(顺式)乙基环己烷，HCl6331-氨基-1，3，3-三甲基-5(反式)乙基环己烷，HCl640N-甲基-1-氨基-1，3，3，5.5-五甲基环己烷，HCl6411-氨基-1-甲基环己烷，HCl642N，N-二甲基-1-氨基-1，3，3，5，5-五甲基环己烷，HCl.H2O705N-(1，3，3，5，5-五甲基环己基)吡咯烷，HCl6801-氨基-1，3(反式)，5(反式)-三甲基环己烷，HCl6811-氨基-1，3(顺式)，5(顺式)-三甲基环己烷，HCl.H2O，6821-氨基-(1R，5S)反式-5-乙基-1，3，3-三甲基环己烷，HCl6831-氨基-(1S，5S)顺式-5-乙基-1，3，3-三甲基环己烷，HCl.H2O，
1-氨基-1，5，5-三甲基-3(顺式)-异丙基-环己烷HCl，1-氨基-1，5，5-三甲基-3(反式)-异丙基-环己烷HCl，1-氨基-1-甲基-3(顺式)-乙基-环己烷HCl，1-氨基-1-甲基-3(顺式)-甲基-环己烷HCl，1-氨基-5，5-二乙基-1，3，3-三甲基-环己烷HCl，和还有，1-氨基-1，3，3，5，5-五甲基环己烷，1-氨基-1，5，5-三甲基-3，3-二乙基环己烷，1-氨基-1-乙基-3，3，5，5-四甲基环己烷，N-乙基-1-氨基-1，3，3，5，5-五甲基环己烷，N-(1，3，5-三甲基环己基)吡咯烷或哌啶，N-[1，3(反式)，5(反式)-三甲基环己基]吡咯烷或哌啶，N-[1，3(顺式)，5(顺式)-三甲基环己基]吡咯烷或哌啶，N-(1，3，3，5-四甲基环己基)吡咯烷或哌啶，N-(1，3，3，5，5-五甲基环己基)吡咯烷或哌啶，N-(1，3，5，5-四甲基-3-乙基环己基)吡咯烷或哌啶，N-(1，5，5-三甲基-3，3-二乙基环己基)吡咯烷或哌啶，N-(1，3，3-三甲基-顺式-5-乙基环己基)吡咯烷或哌啶，N-[(1S，5S)顺式-5-乙基-1，3，3-三甲基环己基]吡咯烷或哌啶，N-(1，3，3-三甲基-反式-5-乙基环己基)吡咯烷或哌啶，N-[(1R，5S)反式-5-乙基-1，3，3-三甲基环己基]吡咯烷或哌啶，N-(1-乙基-3，3，5，5-四甲基环己基)吡咯烷或哌啶，和N-(1-丙基-3，3，5，5-四甲基环己基)吡咯烷或哌啶，和它们的光学异构体、对映体，以及前述任何化合物的盐酸盐、氢溴酸盐、盐酸盐水合物或其它药学上可接受的盐。
特别令人感兴趣的是其中至少R1、R4、和R5为低级烷基的上式的化合物，和其中R1至R5为甲基的化合物，其中x为4或5的化合物，特别是化合物N-(1，3，3，5，5-五甲基环己基)吡咯烷，及其光学异构体、对映体、水合物和药学上可接受的盐。
在我们2000年3月7日的USP 6,034,134中，我们公开了上式的化合物，它们的药物组合物和它们作为NMDA-受体拮抗剂和抗惊厥药的用途。已发现上式的化合物和它们的光学异构体、对映体、水合物和药学上可接受的盐，除了其NMDA拮抗剂和抗惊厥药性能以外，还相当不可预测地具有高度的5HT3和神经元烟碱性受体拮抗性，使得它们可用于治疗其中重要性在于阻断这些受体的疾病或病症。
发明概述因此我们认为本发明包括的内容可以特别概述为以下文字一种用于抑制病症的进展和减轻这种病症的活动物治疗方法，所述病症是通过5HT3或神经元烟碱性受体拮抗剂而减轻的，所述方法包括步骤给所述的活动物施用一定量的选自下式化合物的1-氨基烷基环己烷化合物 其中，R*为-(CH2)n-(CR6R7)m-NR8R9；其中，n+m＝0、1或2；其中，R1至R7独立地选自氢和低级烷基(1-6C)；其中，R8和R9独立地选自氢和低级烷基(1-6C)或一起代表低级亚烷基-(CH2)x-，其中x为2-5，包括2和5；和它们的光学异构体、对映体、水合物和药学上可接受的盐，所述化合物有效地用于所述的目的；这样一种方法其中至少R1、R4和R5为低级烷基；这样一种方法其中R1至R5为甲基；
这样一种方法其中R1为乙基；这样一种方法其中R2为乙基；这样一种方法其中R3为乙基；这样一种方法其中R4为乙基；这样一种方法其中R5为乙基；这样一种方法其中R5为丙基；这样一种方法其中R6或R7为甲基；这样一种方法其中R6或R7为乙基；这样一种方法其中X为4或5；这样一种方法其中，所治疗或抑制的病症选自呕吐、焦虑症、精神分裂症、药物和酒精滥用症、抑郁症、认知障碍、阿尔茨海默氏病、小脑震颤、帕金森氏病、图雷特综合征、疼痛和食欲障碍；这样一种方法其中，所述化合物选自1-氨基-1，3，3，5，5-五甲基环己烷，1-氨基-1-丙基-3，3，5，5-四甲基环己烷，1-氨基-1，3，3，5(反式)-四甲基环己烷(轴向氨基)，1-氨基-1，3，5，5-四甲基-3-乙基环己烷(非对映体的混合物)，1-氨基-1，3，5-三甲基环己烷(非对映体的混合物)，1-氨基-1，3-二甲基-3-丙基环己烷(非对映体的混合物)，1-氨基-1，3(反式)，5(反式)-三甲基-3(顺式)-丙基环己烷，1-氨基-1，3-二甲基-3-乙基环己烷，1-氨基-1，3，3-三甲基环己烷，1-氨基-1，3(反式)-二甲基环己烷，1-氨基-1-甲基-3(反式)丙基环己烷，1-氨基-1-甲基-3(反式)乙基环己烷，1-氨基-1，3，3-三甲基-5(顺式)乙基环己烷，1-氨基-1，3，3-三甲基-5(反式)乙基环己烷，N-甲基-1-氨基-1，3，3，5.5-五甲基环己烷，1-氨基-1-甲基环己烷，
N，N-二甲基-1-氨基-1，3，3，5，5-五甲基环己烷，1-氨基-1，5，5-三甲基-3(顺式)-异丙基-环己烷，1-氨基-1，5，5-三甲基-3(反式)-异丙基-环己烷，1-氨基-1-甲基-3(顺式)-乙基-环己烷，1-氨基-1-甲基-3(顺式)-甲基-环己烷，1-氨基-5，5-二乙基-1，3，3-三甲基-环己烷，和N-(1，3，3，5，5-五甲基环己基)吡咯烷，和前述任何化合物的光学异构体、对映体、水合物和药学上可接受的盐；和这样一种方法其中，所述化合物的给药形式为包含所述化合物与一种或多种药学上可接受的稀释剂、赋形剂或载体组合的其药物组合物。
此外，选自下式化合物的1-氨基烷基环己烷 其中，R*为-(CH2)n-(CR6R7)m-NR8R9；其中，n+m＝0、1或2；其中，R1至R7独立地选自氢和低级烷基(1-6C)；其中，R8和R9独立地选自氢和低级烷基或一起代表低级亚烷基-(CH2)x-，其中x为2-5，包括2和5，和它们的光学异构体、对映体、水合物和药学上可接受的盐，在制备用于治疗活动物以减轻通过5HT3受体拮抗剂而减轻的病症的药物中的用途，这样一种用途，其中至少R1、R4和R5为低极烷基；这样一种用途，其中R1至R5为甲基；这样一种用途，其中x为4或5；这样一种用途，其中，所述化合物选自1-氨基-1，3，3，5，5-五甲基环己烷，1-氨基-1-丙基-3，3，5，5-四甲基环己烷，1-氨基-1，3，3，5(反式)-四甲基环己烷(轴向氨基)，1-氨基-1，3，5，5-四甲基-3-乙基环己烷(非对映体的混合物)，1-氨基-1，3，5-三甲基环己烷(非对映体的混合物)，1-氨基-1，3-二甲基-3-丙基环己烷(非对映体的混合物)，1-氨基-1，3(反式)，5(反式)-三甲基-3(顺式)丙基环己烷，1-氨基-1，3-二甲基-3-乙基环己烷，1-氨基-1，3，3-三甲基环己烷，1-氨基-1，3(反式)-二甲基环己烷，1-氨基-1-甲基-3(反式)丙基环己烷，1-氨基-1-甲基-3(反式)乙基环己烷，1-氨基-1，3，3-三甲基-5(顺式)乙基环己烷，1-氨基-1，3，3-三甲基-5(反式)乙基环己烷，N-甲基-1-氨基-1，3，3，5.5-五甲基环己烷，1-氨基-1-甲基环己烷，N，N-二甲基-1-氨基-1，3，3，5，5-五甲基环己烷，1-氨基-1，5，5-三甲基-3(顺式)-异丙基-环己烷，1-氨基-1，5，5-三甲基-3(反式)-异丙基-环己烷，1-氨基-1-甲基-3(顺式)-乙基-环己烷，1-氨基-1-甲基-3(顺式)-甲基-环己烷，1-氨基-5，5-二乙基-1，3，3-三甲基-环己烷，和N-(1，3，3，5，5-五甲基环己基)吡咯烷，和前述任何化合物的光学异构体、对映体、水合物和药学上可接受的盐；以及最后这样一种用途，其中，所治疗的病症选自呕吐、焦虑症、精神分裂症、药物和酒精滥用症、抑郁症、认知障碍、阿尔茨海默氏病、小脑震颤、帕金森氏病、图雷特综合征、疼痛、和食欲障碍。
发明详述背景和药理学5-HT3受体拮抗剂5-HT3受体是阳离子通透性配体门控离子向性受体。在人体中，5-HT3受体在胃肠粘膜中的肠嗜铬细胞上表现出最高的密度，它受传入迷走神经和脑干最后区支配，所述区域形成化学受体触发区。
由于5-HT3受体不仅在最后区具有高密度，而且在边缘系统的海马和杏仁核区也具有高密度，因此已提示5-HT3选择性拮抗剂可能具有向精神作用(Greenshaw&Silverstone，1997)。
实际上，早期动物研究表明5-HT3受体拮抗剂除了它们已知的止吐用途以外，还可能在多种领域具有临床用途。这些范围包括焦虑症、精神分裂症、药物和酒精滥用症、抑郁症、认知障碍、阿尔茨海默氏病、小脑震颤、帕金森氏病治疗相关的精神病、疼痛(偏头痛和过敏性肠综合征)和食欲障碍。
神经元烟碱性受体目前已知烟碱性受体的九种α亚基(α1-α9)和四种β(β1-β4)亚基。α4β2受体可能在CNS中最为普遍，特别是在海马和纹状体中。它们形成具有缓慢、不完全脱敏电流的非选择性阳离子通道(II型)。同聚性α7受体是突触前和突触后的受体，发现存在于海马、运动皮层和边缘系统以及外周自主神经系统中。这些受体的特征是它们的高Ca2+通透性和快速、强烈的脱敏反应(1A型)。
烟碱性受体的变化涉及许多疾病。这些疾病包括阿尔茨海默氏病、帕金森氏病、图雷特氏综合征、精神分裂症、药物滥用、和疼痛。
基于观察到烟碱性激动剂烟碱本身似乎具有有益作用，目前的药物研制瞄准选择性烟碱性激动剂的发现。
另一方面，不清楚烟碱性激动剂在如图雷特氏综合征和精神分裂症中的作用是否是由于神经元烟碱性受体的活化或失活/脱敏所导致的。
激动剂对神经元烟碱性受体的作用主要取决于接触时间。快速可逆脱敏在几毫秒内发生，衰减发生在数秒内，含α4β2和α7的受体的不可逆失活在数小时内发生，而它们的上调发生在数天内。
换句话说，烟碱性“激动剂”的作用可能实际上是神经元烟碱性受体部分激动、失活和/或脱敏导致的。反过来，中等浓度的神经元烟碱性受体通道阻滞剂在上述适应症中可产生与烟碱性激动剂所报道的相同的作用。
氨基-烷基环己烷为5-HT3和神经元烟碱性受体拮抗剂我们推测描述为非竞争性NMDA受体拮抗剂和抗惊厥药的新氨基-烷基环己烷生物(USP 6,034,134)，是否还可能用作5HT3和神经元烟碱性拮抗剂。这些性能将允许在所有重要性在于阻滞5HT3或烟碱性受体的疾病或病症中使用氨基-烷基环己烷。我们的发现是肯定的。
方法合成已在2000年3月7日的USP 6,034,134中公开了本发明所用的新氨基-烷基环己烷的合成。
可选择的方法还可以根据以下的代表性实施例，通过相应的1-游离氨基-烷基环己烷和所选择的α、ω-二卤代烷基化合物，如1，3-二溴丙烷，1，4-二溴丁烷或1，5-二溴戊烷反应而制备1-环氨基化合物
N-(1，3，3，5，5-五甲基环己基)吡咯烷盐酸盐将1，3，3，5，5-五甲基环己胺盐酸盐(12g，58.3mmol)、碳酸钾(48.4g，350mmol)和1，4-二溴丁烷(7.32ml，61.3mmol)在乙腈(250ml)中回热60小时。冷却至室温后，将混合物过滤并用乙醚(600ml)洗涤沉淀。真空下通过旋转蒸发浓缩滤液，并在减压(11mm/Hg)下分馏残留物。收集129℃下馏分得到无色油(8.95g)。将此油溶于乙醚(120ml)并加入在乙醚(30ml)中的2.7M HCl溶液。滤去所得的沉淀，用乙醚(3*30ml)洗涤，并用NaOH真空干燥得到m.p.158℃的N-(1，3，3，5，5-五甲基环己基)吡咯烷盐酸盐水合物(12.9g，68％)。PMR光谱(DMSO-d6，TMS)d0.97(6H，s，3，5-CH3)；1.11(6H，s，3，5-CH3)；0.8-1.4(2H，环己烷4-CH2)1.41(3H，s，1-CH3)；1.69(4H，m，环己烷2，6-CH2)；1.84(4H，m，吡咯烷3，4-CH2)；3.20(4H，m，吡咯烷2，5-CH2)；10.9ppm(1H，br s，NH+)。
元素分析(C15H29n*HCl*H2O)实测值(％)C 65.0；H 11.7；N 5.0计算值(％)C 64.8；H 11.6；N 5.0。
电生理学从大鼠胚胎(E20-E21)中获得海马，然后将其转移到在冰上的无Ca2+和Mg2+的Hank’s缓冲盐溶液(Gibco)。在0.05％DNA酶/0.3％卵类粘蛋白(Sigma)中将细胞机械解离，然后与0.66％胰蛋白酶/0.1％DNA酶(Sigma)进行8分钟的预温育。随后将解离的细胞在18G下离心10分钟，重悬于极限必需培养基(Gibco)中，并以150,000细胞cm-2密度平板接种到预涂布聚-DL-鸟氨酸(Sigma)/层粘连蛋白(Gibco)的塑料皮氏培养皿(Falcon)。用补充5％胎牛血清和5％马血清(Gibco)的NaHCO3/HEPES缓冲的极限必需培养基(Gibco)给细胞提供营养，并在37℃、5％CO2和95％湿度下培养。体外培养大约5天以后，用胞嘧啶-β-D-阿拉伯呋喃糖苷(ARAC，5μM Sigma)抑制进一步的神经胶质有丝分裂，然后全部更换培养基。
体外培养15-21天后，室温(20-22℃)下，在EPC-7放大器(List)的帮助下，在全细胞模式下用磨光玻璃电极(2-3MΩ)由这些神经元进行膜片钳记录。使用带有用Zeiss DMZ(Augsburg，Munich)水平拉出器拉出的具有100μM开口直径的θ玻璃(Clark TGC 200-10)的改良快速应用系统(SF-77B Fast Step，Warner Instruments)应用试验物质。胞内溶液的内容物含量一般如下(mM)CsCl(95)、TEAC1(20)、EGTA(10)、HEPES(10)、MgCl2(1)、CaCl2(0.2)、葡萄糖(10)、Tris-ATP(5)、Di-Tris-磷酸肌酸酐(20)、肌酸磷酸激酶(50U)；用CsOH或HCl将pH调到7.3。胞外溶液具有以下基本组成(mM)NaCl(140)、KCl(3)、CaCl2(0.2)、葡萄糖(10)、HEPES(10)、蔗糖(4.5)、河豚毒素(TTX 3*10-4)。
从欧洲细胞培养物收藏中心(ECACC，Salisbury，UK)购得N1E-115细胞，并将其贮存在-80℃直至以后使用。将这些细胞以100,000细胞Gm-2的密度平板接种到塑料皮氏培养皿(Falcon)，并用补充15％胎牛血清(Gibco)的用NaHCO3/HEPES缓冲的极限必需培养基(MEM)给细胞提供营养，并在37℃、5％CO2和95％湿度下培养。每天全部更换培养基。每三天一次，在用胰蛋白酶-EDTA(1％，在PBS中)处理，重悬于MEM，并在1000转速下离心4分钟之后，将细胞再接种到新鲜的皮氏培养皿。
接种后2-3天，在室温(20-22℃)下，用EPC-7扩大器(List)，在全细胞模式下用磨光玻璃电极(2-3MΩ)由提升的细胞(liftedcells)进行膜片钳记录。如对于海马细胞一样应用试验物质。胞内溶液的内容物含量如下(mM)CsCl(130)、HEPES(10)、EGTA(10)、MgCl2(2)、CaCl2(2)、K-ATP(2)、Tris-GTP(0.2)、D-葡萄糖(10)；用CsOH或HCl将pH调节到7.3。胞外溶液具有以下基本组成(mM)NaCl(124)、KCl(2.8)、HEPES(10)，用NaOH或HCl调至pH 7.3。
只接受稳定细胞的结果纳入最后的分析，即在除去受试拮抗剂之后表现出至少75％恢复对激动剂(5-羟色胺或Ach)的反应。尽管如此，由于某些细胞的衰减(10分钟内＜＝10％)，药物作用的恢复不总是100％。当存在时，它总是通过将各种浓度下的拮抗％基于对照和恢复基础上并假设这种衰减为线性时间过程而得到补偿的。在至少5个细胞上使用3-6种浓度进行稳定状态阻滞的情况下对所有的拮抗剂进行评价。取决于拮抗剂的浓度，在2-5次激动剂应用内实现平衡阻滞。
结果表1显示所选择的用于本研究的氨基-烷基环己烷的一般结构。
氨基-烷基环己烷的基本结构
表1括号内的代替代表外消旋混合物中的可选择物，例如CH3(C3H7)意指CH3或C3H7。
*****附图的简要说明
图1A和图1B显示在N1E-115培养细胞中由MRZ 2/633导致的5HT3受体的浓度依赖性阻滞。在多种浓度的MRZ 2/633(1-10μM)持续存在下每30秒应用5-羟色胺(10μM)2秒。
A如条柱所示，应用单一N1E-115细胞5-羟色胺的原始数据。左图和右图分别表示对照和恢复反应。中间的三幅图分别表示在MRZ2/633 1、3和10μM连续存在下的平衡反应。
B将峰值和稳定状态(坪值)5-羟色胺电流反应标准化至对照水平，并绘制平均值(±SEM)对MRZ 2/633浓度(n＝8)图。根据4参数对数方程(GraFit，Erithacus Software)进行IC50s的估算和曲线拟合。
图2A和图2B显示烟碱通过诱导受体脱敏而用作海马神经元中神经元烟碱性(Ia型＝α7)受体的功能性拮抗剂。在多种浓度(-)烟碱(1-10μM)持续存在下每30秒应用Ach(1mM)2秒。
A如条柱所示，应用单一海马神经元-Ach的原始数据。左图和右图分别表示对照和恢复反应。中间的三幅图分别表示在(-)烟碱1、3和10μM连续存在下的平衡反应。
B将峰值Ach电流反应标准化至对照水平，并绘制平均值(±SEM)对(-)烟碱浓度(n＝12/浓度)图。根据4参数对数方程(GraFit，Erithacus Software)进行IC50s的估算和曲线拟合。
图3A和图3B表示在海马神经元中由MRZ 2/616导致的神经元烟碱性(Ia型＝α7)受体的浓度依赖性阻滞。在多种浓度的MRZ2/616(1-100μM)连续存在下每30秒应用Ach(1mM)2秒。
A如条柱所示，应用单一海马神经元-Ach的原始数据。左图和右图分别表示对照和恢复反应。中间的三幅图分别表示在MRZ 2/616 10、30和100μM连续存在下的平衡反应。
B将峰值Ach电流反应标准化至对照水平，并绘制平均值(±SEM)对MRZ 2/616浓度(n＝11/浓度)图。根据4参数对数方程(GraFit，Erithacus Software)进行IC50s的估算和曲线拟合。
图4A和图4B表示在海马神经元中由MRZ 2/705导致的神经元烟碱性(Ia型＝α7)受体的浓度依赖性阻滞。在多种浓度的MRZ2/705(0.3-30μM)连续存在下每30秒应用Ach(1mM)2秒。
A如条柱所示，应用单一海马神经元-Ach的原始数据。左图和右图分别表示对照和恢复反应。中间的三幅图分别表示在MRZ 2/7050.3、1.0和3.0μM连续存在下的平衡反应。
B将峰值Ach电流反应标准化至对照水平，并绘制平均值(±SEM)对MRZ 2/705浓度(n＝9/浓度)图。根据4参数对数方程(GraFit，Erithacus Software)进行IC50s的估算和曲线拟合。
*******氨基-烷基环己烷对5-HT3受体的作用全部10种受试的氨基-烷基环己烷在N1E-115细胞中拮抗5-羟色胺诱导的内向电流，具有类似于以前报道的NMDA诱导的内向电流的效力(图1，还参见Parsons等人，1999)。当对在HEK-293细胞中永久性表达的5-HT3受体进行测试时，对相同的化合物观察到类似的作用。因此，受试的氨基-烷基环己烷对5-HT3受体的作用类似于以前报道的多种抗抑郁剂的作用(Fan，1994)，即它们通过诱导脱敏而拮抗反应。
表2关于氨基-烷基环己烷对NMDA和5-HT3受体的效力的总结。从Parsons等人，1999获得关于置换大鼠皮层膜中的[3H]MK-801结合和培养的大鼠海马神经元中NMDA诱导的内向电流(在-70mV)的拮抗作用的数据。抗5-HT3受体的效力评价为对抗N1E-115细胞对应用2秒5-羟色胺(10μM)的“稳态”反应的IC50s(μM)。
氨基-烷基环己烷对神经元烟碱性受体的作用将Ach(1mM)浓度-箝应用于培养的海马细胞导致快速、显著的内向电流，所述电流快速脱敏至低得多的坪值水平。烟碱导致神经元对Ach反应的浓度依赖性阻滞，且在吸烟者的CNS中达到的浓度导致实质上的拮抗作用(图2，IC50＝1.17μM)。
接下来我们还评价了多种氨基-烷基环己烷作为α7神经元烟碱性拮抗剂的效力。在位置R1至R4具有低级烷基取代的简单氨基-烷基环己烷(见表1)是有效的α7神经元烟碱性拮抗剂，且某些氨基-烷基环己烷如MRZ 2/616所例示，实际上在这方面比先前关于NMDA受体报道的有效得多(参见图3和Parsons等人，1999)。
N-吡咯烷衍生物MRZ 2/705作为α7神经元烟碱性拮抗剂的效力比作为NMDA受体拮抗剂的效力大16倍(表3和图4)。
表3氨基-烷基环己烷对NMDA和α7神经元烟碱性受体的效力的总结。从Parsons等人，1999获得关于置换大鼠皮层膜中的[3H]MK-801结合和所培养的大鼠海马神经元中NMDA诱导的内向电流(在-70mV，PC NMDA)的拮抗作用的数据。对抗α7神经元烟碱性受体(PC ACh)的效力评价为对抗培养的海马神经元对应用2秒ACh(1mM)的峰值反应的IC50s(μM)。
结论现有数据表明，氨基-烷基环己烷为5-HT3受体拮抗剂。这些作用在类似于或者甚至低于如由Parsons等人，1999报道的用于NMDA受体非竞争性拮抗作用所需的浓度下可以看到。因此这些化合物对NMDA和5-HT3受体的联合拮抗作用导致正协同作用，通过增加目标作用-认知提高和抗抑郁作用，同时通过如降低中边缘(meso-limbic)多巴胺机能亢进而进一步减少可能的NMDA受体拮抗的副作用，从而导致其在阿尔茨海默氏病中的治疗安全性和有效性。而且，5-HT3拮抗作用本身用于治疗认知缺陷、抑郁、酒精滥用、焦虑、偏头痛、过敏性肠综合征和呕吐。
现有数据还表明某些氨基烷基环己烷作为α7神经元烟碱性受体拮抗剂实际上比其NMDA和/或5-HT3受体作用更为有效。可能这些试剂中的许多还是α4β2受体的拮抗剂，如Buisson等人(1998)关于试剂如美金刚胺和金刚烷胺所报道。我们提出其他人报道的关于神经元烟碱激动剂在多种疾病的动物模型中的积极作用实际上是由于α7受体脱敏和α4/β2受体失活/下调或由例如部分拮抗作用导致的其它形式的功能性拮抗作用。因此，中等浓度的神经元烟碱性受体拮抗剂用于对与烟碱传递障碍相关的疾病，如阿尔茨海默氏病、帕金森氏病、精神分裂症、图雷特氏综合征、药物滥用和疼痛进行神经保护或治疗。
药物组合物本发明的活性成分可以与一种或多种常规助剂、载体或稀释剂一起置于药物组合物及其单位剂量的形式内，且可以作为以下剂型使用固体，如包衣或未包衣的片剂或填充的胶囊，或液体如溶液、悬浮液、乳液、酏剂或填充酏剂的胶囊，这些剂型都用于口服；用于直肠给药的栓剂或胶囊剂型或用于肠胃外(包括静脉内或皮下)应用的无菌注射液剂型。因此这些药物组合物及其单位剂型可以包含常规或特定比例的常规或新的成分，含或不含另外的活性化合物或成分，且这些剂型可以包含与期望使用的日剂量范围相当的任何适宜有效量的活性成分。因此，每片包含二十(20)至一百(100)毫克活性成分，或更宽范围，每片十(10)至二百五十(250)毫克的片剂是单位剂型的代表。
治疗方法由于它们高度的活性和低毒性，且表现出非常有利的治疗指数，本发明的活性成分可以对需要给药的受试者，如活动物(包括人)身体进行给药，用于治疗、缓解或改善、减轻或消除对其易感的症状或病症，或本申请其它地方所述的症状或病症的代表，所述给药优选与一种或多种药学可接受的赋形剂、载体或稀释剂并行、同时或一起给药，具体并优选以其药物组合物的形式，通过口服、直肠或肠胃外(包括静脉内或皮下)或某些情况下甚至局部途径以有效量用药。剂量范围可以是每天1-1000毫克，优选每天10-500毫克，特别是每天50-500毫克，这通常取决于确切的给药模式、给药的剂型、给药针对的适应症、涉及的受试者和涉及的受试者的体重，以及主管的医师或兽医的偏好和经验。
代表性药物组合物的实施例在常用溶剂、辅剂和载体的辅助下，可以将反应产物加工成片剂、包衣片、胶囊、滴液、栓剂、注射剂和输入制剂等等，并可以通过口服、直肠、肠胃外和其它途径进行治疗应用。代表性的药物组合物如下。
(a)可以通过常规制片技术制备包含活性成分的适于口服的片剂。
(b)关于栓剂，可以采用任何常规的栓剂基质通过常规操作将活性成分引入其中，所述基质如在正常的室温下为固体但在体温或大约体温熔化的聚乙二醇。
(c)关于肠胃外(包括静脉内和皮下)无菌溶液，同时使用常规量的活性成分和常规成分，例如氯化钠和双蒸水适量，依据常规方法，如过滤、无菌填充至安瓿或IV滴瓶和高温灭菌以达到无菌。
其它适宜的药物组合物对本领域技术人员来说是非常显而易见的。
仅以例示的方式给出以下的实施例，不将其理解为限定。
实施例1片剂配方包含10毫克活性成分的片剂的适宜配方如下Mg.
活性成分 10乳糖 63微晶纤维素 21滑石 4硬脂酸镁 1胶态二氧化硅 1实施例2片剂配方包含100毫克活性成分的片剂的另一种适宜配方如下Mg.
活性成分 100马铃薯淀粉 20聚乙烯吡咯烷酮 10薄膜包衣和着色膜包衣材料的组成乳糖 100微晶纤维素 80明胶 10聚乙烯吡咯烷酮，交联的 10滑石 10硬脂酸镁 2胶态二氧化硅 3色素 5
实施例3胶囊配方包含50毫克活性成分的胶囊的适宜配方如下Mg.
活性成分 50玉米淀粉 20二代磷酸钙 50滑石 2胶态二氧化硅 2填充在凝胶胶囊中。
实施例4注射液包含1％活性成分的可注射溶液的适宜配方如下活性成分mg 12氯化钠 mg 8无菌水 至制备1ml实施例5液体口服配方在1毫升混合物中含有2毫克活性成分的1升液体混合物的适宜配方如下G.
活性成分2蔗糖250葡萄糖 300山梨醇 150橙味香料10日落黄.
纯净水加入至制备总共1000ml
实施例6液体口服配方在1毫升混合物中含20毫克活性成分的1升液体混合物的另一种适宜的配方如下G.
活性成分 20黄芪胶 7甘油 50蔗糖 400羟苯甲酸甲酯 0.5对羟基苯甲酸丙酯 0.05红醋栗香料 10可溶性红色颜料 0.02纯净水加入至制备总共1000ml实施例7液体口服配方在1毫升混合物中含2毫克活性成分的1升液体混合物的另一种适宜的配方如下G.
活性成分2蔗糖400苦橙皮酊20甜橙皮酊15纯净水加入至制备总共1000ml
实施例8气雾剂配方180g气雾剂溶液包含G.
活性成分 10油酸 5乙醇 81纯净水9四氟乙烷 75将15ml溶液装入铝气雾剂罐中，加盖定量阀，用3.0bar吹洗(purge)。
实施例9TDS配方100g溶液包含G.
活性成分 10.0乙醇 57.5丙二醇7.5二甲亚砜 5.0羟乙基纤维素 0.4纯净水19.6将1.8ml溶液置于被粘性衬片覆盖的羊毛上。通过保护性衬垫封闭该体系，该衬垫在使用前除去。
实施例10纳米颗粒(nanoparticle)配方10g聚丁基氰基丙烯酸酯纳米颗粒包含G.
活性成分 1.0泊洛沙姆 0.1丁基氰基丙烯酸酯 8.75甘露醇 0.1氯化钠 0.05通过在作为聚合反应介质的水/0.1 N HCl/乙醇混合物中乳化聚合而制备聚丁基氰基丙烯酸酯。最后将悬浮液中的纳米颗粒在真空下冻干。
因此，发现本发明的化合物可用于治疗活的动物体尤其是人的疾病，在5HT3和烟碱性受体适应症中用于治疗症状和神经保护目的。
如前述，使用本发明的化合物治疗活的动物以抑制所选择的疾病的进展和减轻该疾病的方法可通过任何通常接受的药学途径，使用有效缓解欲减轻的具体疾病的所选择剂量来进行。
本发明的化合物在制备治疗活的动物以抑制所选择的疾病或病症，特别是易感于用5HT3或烟碱性受体拮抗剂治疗的疾病或病症的进展或缓解所述疾病的药物中的应用，是以常规方式实施的，包括将有效量的本发明的化合物与药学上可接受的稀释剂、赋形剂或载体混合的步骤，而治疗方法、药物组合物和本发明化合物在制备药物中的用途与前述和关于相同的1-氨基化合物的我们的在先USP 6,034,134的内容一致，且代表性的酸加成盐、对映体、异构体和水合物及它们的制备方法类似地公开在关于1-氨基-烷基环己烷化合物的我们的在先USP和公开的WO申请中。
通过将活性成分与适宜的药学上可接受的赋形剂、稀释剂或载体混合而制备的代表性的药物组合物包括片剂、胶囊、用于注射的溶液、液体口服配方、气雾剂配方、TDS配方和纳米颗粒配方，从而生产用于口服、注射或皮肤应用的药物，这些药物组合物也与前述和在关于这些1-氨基-烷基环己烷的美国专利6,034,134中所给出的药物组合物实施例相一致。
*****应该理解本发明不限于具体的操作细节或具体的组合物、方法、步骤或所示和所述的实施方案，明显的修改和等同对本领域技术人员来说是显而易见的，因此本发明仅由根据所附的权利要求合法得出的完整保护范围所限定。
参考文献Buisson，B.，Bertrand，D.，1998，Open-channel blockers atthe human alpha4beta2 neuronal nicotinic acetylcholinereceptor(人α4β2神经元烟碱性乙酰胆碱受体的开放通道阻滞剂)。Mol.Pharmacol.53，555-563。
Fan，P.，1994，Effects of antidepressants on the inwardcurrent mediated by 5-HT3receptors in rat nodose ganglionneurones(抗抑郁剂对大鼠节状神经节神经元中5-HT3受体介导的内向电流的影响).Br J Pharmacol 112，741-744。
Greenshaw，A.J.，Silverstone，P.H.，1997，Thenonantiemetic uses of serotonin 5-HT3receptor antagonists(5-羟色胺5-HT3受体拮抗剂的非止吐应用).Clinical pharmacology andtherapeutic applications.Drugs 53，20-39。
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权利要求
1.一种治疗活动物以抑制病症进展或减轻病症的方法，所述病症通过5HT3或神经元烟碱性受体拮抗剂而减轻，所述方法包括以下步骤给所述的活动物施用有效量的下式的1-氨基烷基环己烷化合物 其中R*为-(CH2)n-(CR6R7)m-NR8R9；n+m＝0、1或2；R1至R7独立地选自氢和C1-6烷基；R8和R9独立地选自氢和C1-6烷基或一起代表C2-5-亚烷基；或它们的光学异构体、对映体、水合物或药学上可接受的盐。
2.权利要求1的方法，其中至少R1、R4和R5为C1-6烷基。
3.权利要求2的方法，其中R1至R5为甲基。
4.权利要求1的方法，其中R1、R2、R3、R4、R5、R6和R7之一为乙基。
5.权利要求1的方法，其中R5为丙基。
6.权利要求1-3之任一项的方法，其中R6或R7为甲基。
7.权利要求2-6之任一项的方法，其中R8和R9一起代表C4或C5亚烷基。
8.权利要求1的方法，其中所述化合物选自1-氨基-1，3，3，5，5-五甲基环己烷，1-氨基-1-丙基-3，3，5，5-四甲基环己烷，1-氨基-1，3，3，5(反式)-四甲基环己烷(轴向氨基)，1-氨基-1，3，5，5-四甲基-3-乙基环己烷(非对映体的混合物)，1-氨基-1，3，5-三甲基环己烷(非对映体的混合物)，1-氨基-1，3-二甲基-3-丙基环己烷(非对映体的混合物)，1-氨基-1，3(反式)，5(反式)-三甲基-3(顺式)-丙基环己烷，1-氨基-1，3-二甲基-3-乙基环己烷，1-氨基-1，3，3-三甲基环己烷，1-氨基-1，3(反式)-二甲基环己烷，1-氨基-1-甲基-3(反式)丙基环己烷，1-氨基-1-甲基-3(反式)乙基环己烷，1-氨基-1，3，3-三甲基-5(顺式)乙基环己烷，1-氨基-1，3，3-三甲基-5(反式)乙基环己烷，N-甲基-1-氨基-1，3，3，5，5-五甲基环己烷，1-氨基-1-甲基环己烷，N，N-二甲基-1-氨基-1，3，3，5，5-五甲基环己烷，1-氨基-1，5，5-三甲基-3(顺式)-异丙基-环己烷，1-氨基-1，5，5-三甲基-3(反式)-异丙基-环己烷，1-氨基-1-甲基-3(顺式)-乙基-环己烷，1-氨基-1-甲基-3(顺式)-甲基-环己烷，1-氨基-5，5-二乙基-1，3，3-三甲基-环己烷，和N-(1，3，3，5，5-五甲基环己基)吡咯烷，和前述任何化合物的光学异构体、对映体、水合物和药学上可接受的盐。
9.权利要求1-8之任一项的方法，其中所述减轻或抑制的病症选自呕吐、焦虑症、精神分裂症、药物和酒精滥用症、抑郁症、认知障碍、阿尔茨海默氏病、小脑震颤、帕金森氏病、图雷特氏综合征、疼痛和食欲障碍。
10.权利要求1-9之任一项的方法，其中所述化合物的给药形式为包含该化合物与一种或多种药学上可接受的稀释剂、赋形剂或载体组合的药物组合物。
11.权利要求1-8之任一项中定义的1-氨基烷基环己烷，包括其光学异构体、对映体、水合物和药学上可接受的盐在制备治疗活的动物以抑制病症进展或减轻病症的药物中的用途，所述病症通过5HT3或神经元烟碱性受体拮抗剂而减轻。
12.权利要求1-8之任一项中定义的1-氨基烷基环己烷，包括其光学异构体、对映体、水合物和药学上可接受的盐用于治疗通过5HT3或神经元烟碱性受体拮抗剂而减轻的病症。
13.权利要求11或12所要求的用途，其中所述减轻或抑制的病症选自呕吐、焦虑症、精神分裂症、药物和酒精滥用症、抑郁症、认知障碍、阿尔茨海默氏病、小脑震颤、帕金森氏病、图雷特氏综合征、疼痛和食欲障碍。
全文摘要
某些1－氨基烷基环己烷是具有全身活性的5HT
文档编号A61P25/28GK1620419SQ01811413
公开日2005年5月25日 申请日期2001年6月19日 优先权日2000年6月20日
发明者C·G·R·帕森斯, W·丹尼兹, M·戈尔德, I·卡尔文施, V·考斯, A·杰金森斯 申请人:莫茨药物股份两合公司