用于肌萎缩性侧索硬化的治疗剂的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及用于肌萎缩性侧索硬化的治疗剂，其包含生长激素促分泌素受体激动 剂作为活性成分。
【背景技术】
[0002] 肌萎缩性侧索硬化（在下文中，被称作ALS)，即成年人的最常见运动神经元病，是 涉及上运动神经元和下运动神经元的选择性和系统性死亡的神经变性疾病。作为运动神经 元死亡的结果，发生上肢和下肢的肌萎缩和肌无力，而在大多数情况下，所述疾病的进展也 涉及延髓性麻痹症状诸如言语或吞咽困难和呼吸肌麻痹。ALS主要发生在中年人或老年人 中。该疾病如此严重，以致于许多患者在发病以后2-3年内死于呼吸衰竭，除非使用呼吸机 进行呼吸管理。尽管存在肌肉（包括呼吸肌）的系统性萎缩和无力，但高阶功能诸如智力和 感觉得到维持（非专利文献1)。
[0003] Cu/Zn超氧化物歧化酶（SODl)基因被视作ALS的成因基因之一。在携带从ALS患 者分离的突变体SODl基因的转基因小鼠或大鼠中，已经发现，运动神经元在成熟以后选择 性地死亡且骨骼肌萎缩或肌无力发生，从而导致死亡，如在人ALS的病理学中的那样。这些 携带突变体SODl基因的转基因小鼠或大鼠已经被确认为ALS动物模型并常规地用在ALS 的病理学分析或该疾病的治疗剂的搜索中。具体地，使用表达通过用Ala (A)置换93-位处 的Gly (G)而从人SODl衍生出的突变蛋白的转基因小鼠（即，携带突变体SODl基因（G93A) 的转基因小鼠（在下文中，被称作S0Dl e93M、鼠））的研宄已经成为最先进的，并且欧洲ALS/ MND组推荐使用这些动物的评价（非专利文献2)。
[0004] 目前全世界被批准用于ALS的唯一治疗剂是利鲁唑。该药物拮抗谷氨酸盐毒性， 该毒性据报道是ALS发病的引起因素之一。但是，该药物会产生仅几个月的生命延长作用， 且因而仅仅在有限程度上是有效的（非专利文献1)。
[0005] 葛瑞林是被发现为生长激素促分泌素受体（在下文中，被称作GHS-R)的内源性配 体的肽激素（非专利文献3)。葛瑞林会促进人类和动物中的生长激素（在下文中，被称作 GH)分泌（非专利文献4，等）。
[0006] 已知GH会促进肝脏和骨骼肌中的胰岛素-样生长因子-1 (在下文中，被称作 IGF-1)产生，而IGF-I已知是运动神经元的营养因子。将含有IGF-I基因的重组AAV4病毒 载体注射进S0Dl e93M、鼠的侧脑室中，会显著延长它们的存活期并显著抑制运动功能和肌 肉强度的下降（专利文献1)。尽管该报道表明这样的效应通过IGF-I在脑中的强迫表达而 实现，但是人IGF-I在S0Dl e93A小鼠的骨骼肌中的过表达对运动神经元死亡或存活期没有影 响（非专利文献5)。当在临床试验中将GH或IGF-I施用给ALS患者时，GH治疗是无效的 (非专利文献6)，且IGF-I对ALS患者的肌肉强度、功能结果和存活期中的任一种没有表现 出效力（非专利文献7)。因而，周围GH或IGF-I系统的活化对于ALS而言是无效的。葛瑞 林也会促进从脑下垂体分泌GH和增加血液中的GH浓度（例如，非专利文献3和4)，但是不 知道具有增加脑或脊髓中的IGF-I的作用。因此，不确定葛瑞林是否对于ALS的病理学而 目是有效的。
[0007] 并且，葛瑞林是唯一已知的周围促进食欲肽，据报道其会增加人类和动物中的食 物摄入（例如，非专利文献4)。ALS是涉及由运动神经元死亡引起的骨骼肌萎缩和肌肉强 度减小的疾病，从而导致死亡。葛瑞林的施用可以增加食物摄入并由此维持体重或骨骼肌 质量。但是，葛瑞林的这种作用和运动神经元死亡的抑制之间的关联是未知的。因此，不确 定葛瑞林是否对于ALS的病理学而言是有效的。
[0008] 在ALS患者中，具有高血液LDL/HDL比率并表现出高脂血症的患者已经被报道会 表现出比其它ALS患者长至少12个月的存活期，从而指示高脂血症是ALS患者的存活的预 后因素（非专利文献8)。同样地，具有高血液胆固醇或甘油三酯浓度的ALS患者已经被报 道具有良好的预后（非专利文献9)。
[0009] 根据一篇报道，葛瑞林向小鼠的施用对它们的血液甘油三酯浓度没有影响，但是 会增加血液总胆固醇浓度（非专利文献10)。根据另一篇报道，葛瑞林可用于治疗高脂血症 (专利文献2)。
[0010] 并且，给具有慢性呼吸炎症的患者重复施用葛瑞林3-周，会改善他们的体重或营 养状态，但是对血液胆固醇浓度没有影响（非专利文献11)。
[0011] 如上所述，关于葛瑞林对血液胆固醇或甘油三酯的影响，尚未得到明确的发现。
[0012] 据报道，当通过离子霉素治疗胎儿大鼠海马神经元来升高细胞内钙（Ca)水平从 而诱导细胞死亡时，GHS-R激动剂化合物大鼠葛瑞林、普拉莫瑞林（生长激素释放肽-2 (在 下文中，被称作GHRP-2))、海沙瑞林和MK-0677会表现出细胞死亡抑制作用。在该报道中， ALS被称作所述化合物集合对其有效的非缺血性神经变性疾病（专利文献3)。ALS是涉及 运动神经元的选择性死亡的成年发作疾病，其中海马细胞没有受到损伤。因此，即使GHRP-2 或葛瑞林在体外抑制由Ca浓度的升高诱导的胎儿大鼠海马神经元死亡，也不确定这些化 合物是否对ALS有效。
[0013] 已经报道葛瑞林会抑制体外大鼠器官型脊髓培养系统中由谷氨酸盐诱导的运动 神经元死亡（非专利文献12和13)。不幸的是，所述体外器官型脊髓培养系统可能不足以 反映复杂疾病(诸如ALS)的病理学。
[0014] 已经报道，与对照组相比，普拉莫瑞林（GHRP-2)会使比细胞大小大1. 5倍的具有 树突和轴突的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤衍生的PC-12细胞的比例增加大约1. 2倍（专利文献 4)。由于所述细胞不是运动神经元，不可以判定GHRP-2是否可用于ALS。
[0015] 根据关于1，2-二乙酰基苯的施用诱导的近侧轴突病变的小鼠模型的报道，GHS-R 激动剂生长激素释放肽-6 (在下文中，被称作GHRP-6)和细胞生长因子EGF的同时施用会 在行为方面改善小鼠的行走能力，并且也显著地改善骨骼肌的动作电位，尽管单独每种化 合物的施用仅仅加速改变的步态型式的恢复（非专利文献14)。由于在该实验中使用的动 物模型具有与ALS相比不同的临床病理学，不可以判定GHRP-6是否可用于或不可用于ALS。
[0016] 其它报道公开称，葛瑞林受体GHS-R拮抗剂可用于治疗ALS (专利文献5和6)。 因而，不可假定GHS-R激动剂(包括葛瑞林）可用于治疗ALS。
[0017] 引文列表 专利文献 专利文献 I: W02007/146046 专利文献2:日本专利特开号2008-127377 专利文献 3: W001/047558 专利文献4:日本专利特开号2005-239712 专利文献5: US7829589 专利文献 6: US2012/0080747 非专利文献 非专利文献 I: Expert Opinion on Emerging Drugs (2011)，第 16卷（第 2 期），第 537-558 页 非专利文献 2: Amyotrophic Lateral Sclerosis (2010)，第 11 卷，第 38-45 页 非专利文献3: Nature (1999)，第402卷，第656-660页 非专利文献 4: Physiological Reviews (2005)，第 85 卷，第 495-522 页 非专利文献 5: Experimental Neurology (2007)，第 207 卷，第 52-63 页 非专利文献 6: Muscle & Nerve (1993)，第 16 卷（第6 期），第 624-633 页 非专利文献 7: Neurology (2008)，第 71 卷，第 1770-1775 页 非专利文献 8: Neurology (2008)，第 70 卷，第 1004-1009 页 非专利文献9: Journal of Neurology (2011)，第 258 卷（第 4 期），第 613-617 页 非专利文献 10: Nature Neuroscience (2010)，第 13 卷（第 7 期），第 877-883 页 非专利文献 11: Pulmonary Pharmacology & Therapeutics (2008)，第 21 卷（第 5 期），第774-779页 非专利文献 12: Experimental Neurology (2011)，第 230 卷，第 114-122 页 非专利文献 13: Korean Journal of Physiology and Pharmacology (2012)，第 16 卷（第I期），第43-48页 非专利文献 14: Neurotoxicity Research (2011)，第 19 卷，第 195-209 页。
【发明内容】
[0018] 技术问题 利鲁唑(一种现有的用于ALS的治疗剂)在临床上在有限程度上是有效的。尽管自该药 物首创以来已经过去了 15年或更多年并且同时已经在临床上开发了多种化合物，用于ALS 的新治疗剂仍然有待开发。因而，对ALS有效的治疗剂的开发，存在强烈的未得到满足的医 学需求。本发明的一个目的是，提供用于不存在有效药物的ALS的治疗剂，所述治疗剂能够 抑制ALS的病理学进展和有效地治疗该疾病。
[0019] 问题的解决方案 本发明的发明人已经对不存在完全（或充分）有效药物(特别是与唯一存在的药物利 鲁唑相比能够更有效地治疗ALS的药物)的ALS的有用治疗剂进行了勤奋研宄。所以，本发 明的发明人通过以下发现已经完成了本发明：GHS-R激动剂表现出比现有药物更有效的运 动神经元保护作用。具体地，本发明包括下述方面： (1)用于施用给具有肌萎缩性侧索硬化和不严重吞咽困难的个体的、用于肌萎缩性侧 索硬化的治疗剂，其包含生长激素促分泌素受体激动剂或其药学上可接受的盐作为活性成 分。
[0020] (2)根据（1)所述的治疗剂，其中所述个体对肌萎缩性侧索硬化的现有治疗剂也 无应答或不充分应答。
[0021] (3)根据⑴或⑵所述的治疗剂，其中所述治疗剂与肌萎缩性侧索硬化的现有治 疗剂联合使用。
[0022] (4)根据⑵或⑶所述的治疗剂，其中所述肌萎缩性侧索硬化的现有治疗剂是利 鲁唑。
[0023] (5)根据（1)或（2)所述的治疗剂，其中所述治疗剂通过皮下注射来施用。
[0024] (6)根据（1)至（5)中的任一项所述的治疗剂，其中所述生长激素促分泌素受体激 动剂是葛瑞林、普拉莫瑞林、GHRP-6、海沙瑞林、伊莫瑞林、甲