专利名称：稳定的冻干形式的药物组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及含有环多肽化合物的稳定的冻干形式的药物组合物。更具体来说，本发明涉及含有环多肽化合物或其盐和稳定剂的稳定的冻干形式的药物组合物。
本发明环多肽化合物是通式(I)化合物或其盐 其中R1是氢或酰基，R2是氢或酰基，R3是具有一个或多个羟基或保护的羟基的低级烷基，R4是氢或羟基，R5是氢、羟基、低级烷氧基或羟基磺酰基氧基，且R6是羟基或酰基氧基。
环多肽化合物(I)或其盐具有抗微生物活性、特别是抗真菌活性和β-1，3-葡聚糖合酶抑制作用，并且可用于预防和治疗各种感染性疾病，包括卡氏肺囊虫(Pneumocystis carinii)感染，例如carinii肺炎。
背景技术：
上述式(I)环多肽化合物公开于WO 01/60846中。
环多肽化合物(I)或其盐通常对光、湿度、酸、热等不稳定。因此，希望开发出其中环多肽化合物(I)或其盐被稳定的药物制剂。
本发明公开本发明提供了含有环多肽化合物(I)或其盐和稳定剂的稳定的冻干形式的药物组合物。
下面详细解释在本说明书上下文描述中的各个定义的合适的实例和举例说明，本发明旨在将它们包括在其范围内除非另有说明，否则术语“低级”是用于表示具有1-6个碳原子的基团。
“一个或多个”的合适的实例可以是1-6的数字，优选的可以是1-3的数字，最优选的可以是数字1或2。
“卤素”的合适的实例可以是氟、氯、溴、碘等。
“低级烷氧基”的合适的实例可包括直链或支链低级烷氧基，例如甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基、异丁氧基、叔丁氧基、戊氧基、叔戊氧基、新戊氧基、己氧基、异己氧基等。
“高级烷氧基”的合适的实例可包括直链或支链高级烷氧基，例如庚氧基、辛氧基、3，5-二甲基辛氧基、3，7-二甲基辛氧基、壬氧基、癸氧基、十一烷氧基、十二烷氧基、十三烷氧基、十四烷氧基、十六烷氧基、十七烷氧基、十八烷氧基、十九烷氧基、二十烷氧基等。
“低级烷基”的合适的实例可包括具有1-6个碳原子的直链或支链低级烷基，例如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、叔戊基、新戊基、己基、异己基等。
“高级烷基”的合适的实例可包括直链或支链高级烷基，例如庚基、辛基、3，5-二甲基辛基、3，7-二甲基辛基、壬基、癸基、十一烷基、十二烷基、十三烷基、十四烷基、十六烷基、十七烷基、十八烷基、十九烷基、二十烷基等。
“芳基”和“ar”的合适的实例可包括可具有低级烷基的苯基(例如苯基、三甲苯基、二甲苯基、甲苯基等)、萘基、蒽基、二氢茚基、芴基等，并且该“芳基”和“ar”可具有一个或多个卤素。
“芳酰基”的合适的实例可包括苯甲酰基、甲苯甲酰基、萘甲酰基、蒽基羰基等。
“杂环基”的合适的实例可包括含有1-4个氮原子的不饱和的3-8元(更优选5或6元)杂单环基，例如吡咯基、吡咯啉基、咪唑基、吡唑基、吡啶基、二氢吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、三唑基(例如4H-1，2，4-三唑基、1H-1，2，3-三唑基、2H-1，2，3-三唑基等)、四唑基(例如1H-四唑基、2H-四唑基等)等；含有1-4个氮原子的饱和的3-8元(更优选5或6元)杂单环基，例如吡咯烷基、咪唑烷基、哌啶基、哌嗪基、氮杂环丁烷基等；含有1-4个氮原子的不饱和的稠合杂环基例如吲哚基、异吲哚基、二氢吲哚基、吲嗪基、苯并咪唑基、喹啉基、异喹啉基、吲唑基、苯并三唑基等；合有1或2个氧原子和1-3个氮原子的不饱和的3-8元(更优选5或6元)杂单环基，例如噁唑基、异噁唑基、噁二唑基(例如1，2，4-噁二唑基、1，3，4-噁二唑基、1，2，5-噁二唑基等)等；含有1或2个氧原子和1-3个氮原子的饱和的3-8元(更优选5或6元)杂单环基，例如吗啉基、悉尼酮基、吗啉代等；含有1或2个氧原子和1-3个氮原子的不饱和的稠合杂环基，例如苯并噁唑基、苯并噁二唑基等；含有1或2个硫原子和1-3个氮原子的不饱和的3-8元(更优选5或6元)杂单环基，例如噻唑基、异噻唑基、噻二唑基(例如1，2，3-噻二唑基、1，2，4-噻二唑基、1，3，4-噻二唑基、1，2，5-噻二唑基等)、二氢噻嗪基等；含有1或2个硫原子和1-3个氮原子的饱和的3-8元(更优选5或6元)杂单环基，例如噻唑烷基、硫代吗啉基、硫代吗啉代等；含有1或2个硫原子的不饱和的3-8元(更优选5或6元)杂单环基，例如噻吩基、二氢二硫杂环己二烯基(dihydrodithiinyl)、dihydrodithionyl等；含有1或2个硫原子和1-3个氮原子的不饱和的稠合杂环基，例如苯并噻唑基、苯并噻二唑基、咪唑并噻二唑基等；
含有氧原子的不饱和的3-8元(更优选5或6元)杂单环基，例如呋喃基等；含有1或2个氧原子的饱和的3-8元(更优选5或6元)杂单环基，例如四氢呋喃、四氢吡喃、二氧杂环戊烷、二氧杂环己烷等；含有氧原子和1或2个硫原子的不饱和的3-8元(更优选5或6元)杂单环基，例如二氢氧硫杂环己二烯基(dihydrooxathiinyl)等；含有1或2个硫原子的不饱和稠合杂环基例如苯并噻吩基、苯并二硫杂环己二烯基等；含有氧原子和1或2个硫原子的不饱和稠合杂环基例如苯并氧硫杂环己二烯基等；等等；该“杂环基”可具有一个或多个选自下列的合适的取代基低级烷基、氧代基、环(低级)烷基、羟基(低级)烷基、可具有氨基的羧基(低级)链烷酰基和杂环羰基。
“环(低级)烷基”的合适的实例可包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基等，该“环(低级)烷基”可具有一个或多个低级烷基。
“环(低级)烷氧基”的合适的实例可包括环丙氧基、环丁氧基、环戊氧基、环己氧基等。
“酰基”的合适的实例可包括羧基；氨基甲酰基；一或二(低级)烷基氨基甲酰基(例如甲基氨基甲酰基、二甲基氨基甲酰基、乙基氨基甲酰基、二乙基氨基甲酰基等)；脂族酰基、芳族酰基、芳基脂族酰基和杂环-脂族酰基，所述酰基衍生自羧酸、碳酸、氨基甲酸、磺酸；等等。
脂族酰基例如低级或高级链烷酰基(例如甲酰基、乙酰基、丙酰基、丁酰基、2-甲基丙酰基、戊酰基、2，2-二甲基丙酰基、己酰基、庚酰基、辛酰基、壬酰基、癸酰基、十一烷酰基、十二烷酰基、十三烷酰基、十四烷酰基、十五烷酰基、十六烷酰基、十七烷酰基、十八烷酰基、十九烷酰基、二十烷酰基等)；低级或高级烷氧基羰基(例如甲氧基羰基、乙氧基羰基、叔丁氧基羰基、叔戊氧基羰基、庚氧基羰基等)；低级链烯氧基羰基(例如乙烯氧基羰基、丙烯氧基羰基、烯丙氧基羰基、丁烯氧基羰基、丁二烯氧基羰基、戊烯氧基羰基、己烯氧基羰基等)；低级或高级烷基磺酰基(例如甲基磺酰基、乙基磺酰基等)；低级或高级烷氧基磺酰基(例如甲氧基磺酰基、乙氧基磺酰基等)；等等；芳族酰基例如芳酰基(例如苯甲酰基、甲苯甲酰基、萘甲酰基等)；芳(低级)链烷酰基[例如苯基(C1-C6)链烷酰基(例如苯基乙酰基、苯基丙酰基、苯基丁酰基、苯基异丁酰基、苯基戊酰基、苯基己酰基等)、萘基(C1-C6)链烷酰基(例如萘基乙酰基、萘基丙酰基、萘基丁酰基等)等]；芳(低级)链烯酰基[例如苯基(C3-C6)链烯酰基(例如苯基丙烯酰基、苯基丁烯酰基、苯基异丁烯酰基、苯基戊烯酰基、苯基己烯酰基等)、萘基(C3-C6)链烯酰基(例如萘基丙烯酰基、萘基丁烯酰基等)等]；芳(低级)烷氧基羰基[例如苯基(C1-C6)烷氧基羰基(例如苄氧基羰基等)、芴基(C1-C6)烷氧基羰基(例如芴基甲氧基羰基等)等]；芳氧基羰基(例如苯氧基羰基、萘氧基羰基等)；芳氧基(低级)链烷酰基(例如苯氧基乙酰基、苯氧基丙酰基等)；芳基氨基甲酰基(例如苯基氨基甲酰基等)；芳基硫代氨基甲酰基(例如苯基硫代氨基甲酰基等)；芳基乙醛酰基(例如苯基乙醛酰基、萘基乙醛酰基等)；可具有1-4个低级烷基的芳基磺酰基(例如苯基磺酰基、对甲苯磺酰基等)；被一个或多个合适的取代基取代的芳酰基(例如苯甲酰基)；等等；杂环酰基例如杂环羰基；杂环(低级)链烷酰基(例如杂环乙酰基、杂环丙酰基、杂环丁酰基、杂环戊酰基、杂环己酰基等)；杂环(低级)链烯酰基(例如杂环丙烯酰基、杂环丁烯酰基、杂环戊烯酰基、杂环己烯酰基等)；杂环乙醛酰基；等；其中在术语“杂环羰基”、“杂环(低级)链烷酰基”、“杂环(低级)链烯酰基”和“杂环乙醛酰基”中的合适的“杂环”部分可以是上述“杂环”部分。
R1的“酰基”的合适的实例可以是上述“酰基”，其中优选的酰基可以是低级烷氧基羰基、高级链烷酰基和被一个或多个合适的取代基取代的苯甲酰基。
在术语“被一个或多个合适的取代基取代的苯甲酰基”中的“合适的取代基”的合适的实例可以是被苯基取代的噻二唑基，所述苯基具有被吗啉代取代的苯基，所述吗啉代具有低级烷基；被苯基取代的噻二唑基，所述苯基具有选自下列的合适的取代基低级烷氧基(低级)烷氧基和低级烷氧基(高级)烷氧基；被具有哌啶基的苯基取代的哌嗪基，所述哌啶基被选自下列的合适的取代基取代具有低级烷氧基(低级)烷氧基的苯基、环(低级)烷氧基和低级烷氧基(低级)烷硫基；被苯基取代的哌嗪基，所述苯基具有被吗啉代取代的苯基，所述吗啉代具有低级烷基；被具有哌啶基的苯基取代的咪唑并噻二唑基，所述哌啶基被选自下列的合适的取代基取代低级烷氧基(低级)烷氧基和低级烷氧基(低级)烷硫基；被苯基取代的咪唑并噻二唑基，所述苯基具有低级烷氧基(低级)烷氧基；被哌嗪基取代的苯基，所述哌嗪基具有被吗啉代取代的苯基，所述吗啉代具有低级烷基；被具有低级烷氧基(低级)烷氧基的苯基取代的异噁唑基；被苯基取代的异噁唑基，所述苯基具有高级烷氧基，所述高级烷氧基被具有低级烷基的吗啉代取代；被具有哌嗪基的苯基取代的噻二唑基，所述哌嗪基被环(低级)烷基取代，所述环(低级)烷基具有一个或多个选自下列的合适的取代基低级烷基、低级链烯基、低级烷氧基(高级)烷氧基和苯基；被具有哌嗪基的苯基取代的噻二唑基，所述哌嗪基被具有环(低级)烷基的低级烷基取代；被具有哌啶基的苯基取代的噻二唑基，所述哌啶基被一个或多个选自下列的合适的取代基取代环(低级)烷氧基、低级烷氧基(低级)烷氧基和低级烷氧基(低级)烷氧基(低级)烷基；被具有哌啶基的苯基取代的噻二唑基，所述哌啶基被环(低级)烷基和低级烷氧基取代；
被具有哌嗪基的吡啶基取代的噻二唑基，所述哌嗪基被具有低级烷基的环(低级)烷基取代；被具有哌啶基的苯基取代的咪唑并噻二唑基，所述哌啶基被环(低级)烷基取代；被具有哌嗪基的苯基取代的咪唑并噻二唑基，所述哌嗪基被具有低级烷基的环(低级)烷基取代；被具有环(低级)烷基的哌嗪基取代的苯基，所述环(低级)烷基被一个或多个选自下列的合适的取代基取代可具有低级烷氧基的环(低级)烷基、低级烷基、低级烷氧基和可具有低级烷氧基的苯基，其中优选的可以是被苯基取代的噻二唑基，所述苯基具有被吗啉代取代的苯基，所述吗啉代具有二甲基；被苯基取代的噻二唑基，所述苯基具有选自甲氧基己氧基和甲氧基庚氧基的取代基；被具有哌啶基的苯基取代的哌嗪基，所述哌啶基被选自下列的取代基取代具有甲氧基丁氧基的苯基、环己氧基和甲氧基己硫基；被苯基取代的哌嗪基，所述苯基具有被吗啉代取代的苯基，所述吗啉代具有二甲基；被具有哌啶基的苯基取代的咪唑并噻二唑基，所述哌啶基被选自下列的取代基取代甲氧基丙氧基、甲氧基丁氧基、甲氧基戊氧基和甲氧基己硫基；被具有甲氧基丁氧基的苯基取代的咪唑并噻二唑基；被哌嗪基取代的苯基，所述哌嗪基具有被吗啉代取代的苯基，所述吗啉代具有二甲基；被具有甲氧基己氧基的苯基取代的异噁唑基；被苯基取代的异噁唑基，所述苯基具有庚氧基，所述庚氧基被具有二甲基的吗啉代取代；被具有哌嗪基的苯基取代的噻二唑基，所述哌嗪基被环己基取代，所述环己基具有一个或两个选自下列的取代基甲基、亚甲基、甲氧基庚氧基、甲氧基辛氧基和苯基；被具有哌嗪基的苯基取代的噻二唑基，所述哌嗪基被甲基取代，所述甲基具有选自环戊基和环己基的取代基；被具有哌啶基的苯基取代的噻二唑基，所述哌啶基被一个或两个选自下列的取代基取代环己基、甲氧基、环己氧基、甲氧基戊氧基、甲氧基己氧基、甲氧基丁氧基甲基和甲氧基戊氧基甲基；被具有哌嗪基的吡啶基取代的噻二唑基，所述哌嗪基被环己基取代，所述环己基具有选自甲基和乙基的取代基；被具有哌啶基的苯基取代的咪唑并噻二唑基，所述哌啶基被环己基取代；被具有哌嗪基的苯基取代的咪唑并噻二唑基，所述哌嗪基被具有甲基的环己基取代；被具有环己基的哌嗪基取代的苯基，所述环己基被一个或两个选自下列的取代基取代乙基、叔丁基、甲氧基、环戊基、可具有甲氧基或二甲基的环己基和可具有甲氧基的苯基。
R1的“酰基”的合适的实例可以是具有被苯基取代的噻二唑基的苯甲酰基，所述苯基具有被吗啉代取代的苯基，所述吗啉代具有二甲基；具有被苯基取代的噻二唑基的苯甲酰基，所述苯基具有选自甲氧基己氧基和甲氧基庚氧基的取代基；具有哌嗪基的苯甲酰基，所述哌嗪基被具有哌啶基的苯基取代，所述哌啶基被选自下列的取代基取代具有甲氧基丁氧基的苯基、环己氧基和甲氧基己硫基；具有被苯基取代的哌嗪基的苯甲酰基，所述苯基具有被吗啉代取代的苯基，所述吗啉代具有二甲基；具有咪唑并噻二唑基的苯甲酰基，所述咪唑并噻二唑基被具有哌啶基的苯基取代，所述哌啶基被选自下列的取代基取代甲氧基丙氧基、甲氧基丁氧基、甲氧基戊氧基和甲氧基己硫基；具有咪唑并噻二唑基的苯甲酰基，所述咪唑并噻二唑基被具有甲氧基丁氧基的苯基取代；具有被哌嗪基取代的苯基的苯甲酰基，所述哌嗪基具有被吗啉代取代的苯基，所述吗啉代具有二甲基；具有异噁唑基的苯甲酰基，所述异噁唑基被具有甲氧基己氧基的苯基取代；具有被苯基取代的异噁唑基的苯甲酰基，所述苯基具有庚氧基，所述庚氧基被具有二甲基的吗啉代取代；具有噻二唑基的苯甲酰基，所述噻二唑基被具有哌嗪基的苯基取代，所述哌嗪基被环己基取代，所述环己基具有一个或两个选自下列的取代基甲基、亚甲基、甲氧基庚氧基、甲氧基辛氧基和苯基；具有噻二唑基的苯甲酰基，所述噻二唑基被具有哌嗪基的苯基取代，所述哌嗪基被甲基取代，所述甲基具有选自环戊基和环己基的取代基；具有噻二唑基的苯甲酰基，所述噻二唑基被具有哌啶基的苯基取代，所述哌啶基被一个或两个选自下列的取代基取代环己基、甲氧基、环己氧基、甲氧基戊氧基、甲氧基丁氧基甲基和甲氧基戊氧基甲基；具有噻二唑基的苯甲酰基，所述噻二唑基被具有哌嗪基的吡啶基取代，所述哌嗪基被环己基取代，所述环己基具有选自甲基和乙基的取代基；具有咪唑并噻二唑基的苯甲酰基，所述咪唑并噻二唑基被具有哌啶基的苯基取代，所述哌啶基被选自甲氧基己氧基、环己基和甲氧基己基的取代基取代；具有咪唑并噻二唑基的苯甲酰基，所述咪唑并噻二唑基被具有哌嗪基的苯基取代，所述哌嗪基被具有甲基的环己基取代；具有苯基的苯甲酰基，所述苯基被具有环己基的哌嗪基取代，所述环己基被一个或两个选自下列的取代基取代乙基、叔丁基、甲氧基、环戊基、可具有甲氧基或二甲基的环己基和可具有甲氧基的苯基。
术语“具有一个或多个羟基或保护的羟基的低级烷基”中的“低级烷基”的合适的实例可以是甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、戊基和己基。
术语“保护的羟基”中的“羟基保护基”的合适的实例可以是可具有一个或多个合适的取代基的苯基(低级)烷基(例如苄基、4-甲氧基苄基、三苯甲基)、三取代的甲硅烷基[例如三(低级)烷基甲硅烷基(例如三甲基甲硅烷基、叔丁基二甲基甲硅烷基等)等]、四氢吡喃基等。
“具有一个或多个羟基或保护的羟基的低级烷基”的合适的实例可以是二羟基丙基、二羟基异丙基、三羟基丁基、四羟基戊基、五羟基己基和二乙酰氧基异丙基。
R2的“酰基”的合适的实例可以是乙酰基、2-乙酰氧基丙酰基、甲基磺酰基、2，5-二氨基戊酰基、苄氧基羰基、芴基甲氧基羰基、烯丙氧基羰基和叔丁氧基羰基。
“酰基氧基”的“酰基”部分的合适的实例可以是低级链烯氧基羰基，最优选的可以是烯丙氧基羰基。
“酰基氧基”的合适的实例可以是低级链烯氧基羰基氧基，更优选的可以是烯丙氧基羰基氧基。
特别是，本发明环多肽化合物(I)的优选的实例如下化合物(I)，其中R1是氢、低级烷氧基羰基、高级链烷酰基或具有一个或多个合适的取代基的苯甲酰基，R2是氢，R3是具有一个或多个羟基的低级烷基，R4是氢或羟基，R5是羟基或羟基磺酰基氧基，且R6是羟基。
更优选的可以是定义如下的化合物(I)，其中R1是氢、低级烷氧基羰基、高级链烷酰基或具有一个或多个合适的取代基的苯甲酰基，R2是氢，R3是具有两个羟基的低级烷基，R4是氢或羟基，R5是羟基或羟基磺酰基氧基，且R6是羟基。
仍然更优选的可以是定义如下的化合物(I)，其中R1是被选自下列的合适的取代基取代的苯甲酰基被苯基取代的噻二唑基，所述苯基具有被吗啉代取代的苯基，所述吗啉代具有低级烷基；被苯基取代的噻二唑基，所述苯基具有选自下列的合适的取代基低级烷氧基(低级)烷氧基和低级烷氧基(高级)烷氧基；被具有哌啶基的苯基取代的哌嗪基，所述哌啶基被选自下列的合适的取代基取代具有低级烷氧基(低级)烷氧基的苯基、环(低级)烷氧基和低级烷氧基(低级)烷硫基；被苯基取代的哌嗪基，所述苯基具有被吗啉代取代的苯基，所述吗啉代具有低级烷基；被具有哌啶基的苯基取代的咪唑并噻二唑基，所述哌啶基被选自下列的合适的取代基取代低级烷氧基(低级)烷氧基和低级烷氧基(低级)烷硫基；被苯基取代的咪唑并噻二唑基，所述苯基具有低级烷氧基(低级)烷氧基；被哌嗪基取代的苯基，所述哌嗪基具有被吗啉代取代的苯基，所述吗啉代具有低级烷基；被具有低级烷氧基(低级)烷氧基的苯基取代的异噁唑基；被苯基取代的异噁唑基，所述苯基具有高级烷氧基，所述高级烷氧基被具有低级烷基的吗啉代取代；被具有哌嗪基的苯基取代的噻二唑基，所述哌嗪基被环(低级)烷基取代，所述环(低级)烷基具有一个或多个选自下列的合适的取代基低级烷基、低级链烯基、低级烷氧基(高级)烷氧基和苯基；被具有哌嗪基的苯基取代的噻二唑基，所述哌嗪基被具有环(低级)烷基的低级烷基取代；被具有哌啶基的苯基取代的噻二唑基，所述哌啶基被一个或多个选自下列的合适的取代基取代环(低级)烷氧基、低级烷氧基(低级)烷氧基和低级烷氧基(低级)烷氧基(低级)烷基；被具有哌啶基的苯基取代的噻二唑基，所述哌啶基被环(低级)烷基和低级烷氧基取代；被具有哌嗪基的吡啶基取代的噻二唑基，所述哌嗪基被具有低级烷基的环(低级)烷基取代；被具有哌啶基的苯基取代的咪唑并噻二唑基，所述哌啶基被环(低级)烷基取代；被具有哌嗪基的苯基取代的咪唑并噻二唑基，所述哌嗪基被具有低级烷基的环(低级)烷基取代；被具有环(低级)烷基的哌嗪基取代的苯基，所述环(低级)烷基被一个或多个选自下列的合适的取代基取代可具有低级烷氧基的环(低级)烷基、低级烷基、低级烷氧基和可具有低级烷氧基的苯基，R2是氢，R3是具有两个羟基的低级烷基，
R4是氢或羟基，R5是羟基或羟基磺酰基氧基，且R6是羟基。
最优选的可以是定义如下的化合物(I)，其中R1是具有噻二唑基的苯甲酰基，所述噻二唑基被具有哌嗪基的苯基取代，所述哌嗪基被具有低级烷基的环(低级)烷基取代；具有噻二唑基的苯甲酰基，所述噻二唑基被具有哌啶基的苯基取代，所述哌啶基被环(低级)烷氧基取代；具有苯基的苯甲酰基，所述苯基被具有环(低级)烷基的哌嗪基取代，所述环(低级)烷基被环(低级)烷基和低级烷氧基取代；具有噻二唑基的苯甲酰基，所述噻二唑基被具有哌啶基的苯基取代，所述哌啶基被环(低级)烷基取代；R2是氢，R3是具有两个羟基的低级烷基，R4是氢或羟基，R5是羟基或羟基磺酰基氧基，且R6是羟基。
环多肽化合物(I)的合适的盐溶于水，并且可药用盐包括与碱成的盐和酸加成盐。这样的盐可通过按照常规方法用合适的碱或酸处理环多肽化合物(I)来制得。
作为与碱成的盐，可提及的有与无机碱成的盐例如碱金属盐(例如钠盐、钾盐等)、碱土金属盐(例如钙盐、镁盐等)、铵盐等；与有机碱成的盐例如有机胺盐(例如三乙胺盐、二异丙基乙基胺盐、吡啶盐、甲基吡啶盐、乙醇胺盐、三乙醇胺盐、二环己基胺盐、N，N′-二苄基乙二胺盐等)；等等。
作为酸加成盐，可提及的有无机酸加成盐(例如盐酸盐、氢溴酸盐、硫酸盐、磷酸盐等)；和有机羧酸或磺酸加成盐(例如甲酸盐、乙酸盐、三氟乙酸盐、马来酸盐、酒石酸盐、富马酸盐、甲磺酸盐、苯磺酸盐、甲苯磺酸盐等)。还可以提及的是与碱性或酸性氨基酸成的盐(例如与精氨酸、天冬氨酸、谷氨酸等成的盐)。
本发明环多肽化合物(I)还可以包括可能的构象异构体和一对或多对立体异构体例如几何异构体以及可由于不对称碳原子而存在的旋光异构体。
包含在本发明单个单位剂量组合物中的环多肽化合物(I)或其盐的量是0.1-400mg，更优选为1-200mg，仍然更优选为5-100mg，具体地为5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、70、75、80、85、90、95和100mg。
优选的冻干组合物可包含环多肽化合物(I)或其盐和稳定剂，可任选加入pH调节剂和/或pH缓冲剂。
作为稳定剂，可提及的有多糖。
多糖的合适的实例有葡聚糖(例如葡聚糖40、葡聚糖70等)、淀粉、纤维素和透明质酸。包含在本发明药物组合物中的多糖可以是α-一水合物、α-脱水物、β-脱水物或其组合。
稳定剂在本发明药物组合物中的用量应当至少足以稳定组合物中的环多肽化合物(I)或其盐。为了稳定环多肽化合物(I)，按环多肽化合物(I)或其盐为1重量份计，在本发明组合物中1重量份的稳定剂是至少足够的。稳定剂还可以起载体或赋形剂的作用。因此，稳定剂的用量没有特别的上限，并且可考虑相对于单位剂量的化合物的组合物的重量或体积等因素来确定。然而，按环多肽化合物(I)或其盐为1重量份计，稳定剂的用量优选为1-50重量份，更优选为5-20重量份，当然其根据环多肽化合物(I)或其盐的种类和用量、其制剂形式等因素而变。
本发明药物组合物可依据本领域已知的方法，如果需要的话使用添加剂来制得。可提及Basic Lecture on Development ofPharmaceuticals XI 20 Production of Pharmaceuticals(第二卷)(Kyobunn Tsuda和Hisashi Nogami编写，由Chizyo Shoten出版)作为参考。
本发明冻干组合物可通过制备环多肽化合物(I)或其盐与稳定剂的水溶液，并任选加入pH缓冲剂和/或pH调节剂来制得。
pH缓冲剂的合适的实例可以是氨基酸(例如甘氨酸、L-精氨酸、L-天冬氨酸、L-谷氨酸等)、L-谷氨酸钠一水合物、乙醇胺、trometamol等，并且按环多肽化合物(I)或其盐为1重量份计，pH缓冲剂的量优选为1-30重量份、更优选为10-20重量份，当然其根据环多肽化合物(I)或其盐的种类和用量、其制剂形式等因素而变。
pH调节剂的合适的实例可以是无机碱(例如氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化钙、氢氧化镁)、有机碱(例如三乙胺、二异丙基乙基胺、吡啶、甲基吡啶、乙醇胺、三乙醇胺、二环己基胺、N，N′-二苄基乙二胺等)、无机酸(例如盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸等)、有机羧酸或磺酸(例如甲酸、乙酸、三氟乙酸、马来酸、酒石酸、富马酸、甲磺酸、苯磺酸、甲苯磺酸等)、无水柠檬酸等，按照需要将溶液调节至pH9.0-10.0，优选达到pH9.5-10.0，然后依据常规方法在小瓶中将所得溶液冻干。因此，当溶解在净化水中时，稳定的冻干形式的药物组合物优选给出pH9.0-10.0、更优选pH9.5-10.0的溶液。
优选将如此制得的冻干形式的组合物密封，并避光贮存。可将冻干组合物以溶液形式加到各个小瓶中，然后再冻干，或者在冻干后以冻干粉末的形式装到小瓶中。
因为环多肽化合物(I)或其盐对湿度的稳定性不令人满意，所以本发明冻干组合物含有3.4％重量或更少的水、优选3.0％、更优选2.0％重量的水。
通常按照需要将本发明稳定的冻干形式的药物组合物溶于等渗氯化钠溶液中，并用作注射液。本发明药物组合物可以作为在使用前需要某些混合的注射剂使用。
现在通过实施例和测试实施例进一步详细描述本发明，这些实施例不应当理解为对本发明范围的限制。
组合物实施例1实施例2的化合物 0.2g葡聚糖40 2g甘氨酸 0.3g适当量的氢氧化钠在环境温度将葡聚糖40和甘氨酸溶解在净化水(30mL)中，将实施例2的化合物分散到该溶液内。通过加入0.4％氢氧化钠水溶液，在大约9.8的pH下将实施例2的化合物溶解。加入净化水后，获得了总共40ml溶液。将每2mL所得溶液填充到10mL大小的I型管状玻璃瓶中。按照常规方法，使用冻干器(Hull Corp.制造的Hull 2FS5C)将在各自小瓶中的溶液冻干，获得了分别含有10mg实施例2的化合物的冻干组合物。
组合物实施例2按照类似于组合物实施例1的方法，获得了分别含有10mg实施例1的化合物的冻干组合物。
组合物实施例3按照类似于组合物实施例1的方法，获得了分别含有10mg实施例3的化合物的冻干组合物。
组合物实施例4按照类似于组合物实施例1的方法，获得了分别含有10mg实施例4的化合物的冻干组合物。
组合物实施例5实施例2的化合物 0.125g葡聚糖401.25g甘氨酸 0.1875g适当量的氢氧化钠在环境温度将葡聚糖40和甘氨酸溶解在净化水(20mL)中，将实施例2的化合物分散到该溶液内。通过加入0.4％氢氧化钠水溶液，在大约9.8的pH下将实施例2的化合物溶解。加入净化水后，获得了总共25ml溶液。
将每1mL所得溶液填充到10mL大小的I型管状玻璃瓶中。按照常规方法，使用冻干器(Hull Corp.制造的Hull 2FS5C)将在各自小瓶中的溶液冻干，获得了分别含有5mg实施例2的化合物的冻干组合物。
组合物实施例6实施例2的化合物 5g
葡聚糖40 50gL-精氨酸 17.4g适当量的无水柠檬酸在环境温度将葡聚糖40和L-精氨酸溶解在净化水(800mL)中，在轻微搅拌下(为了防止起泡)向该溶液中加入实施例2的化合物。加入21％柠檬酸水溶液(约0.5mL)以将pH调节至9.8，加入注射用净化水，获得了总共1000mL溶液。
将每1mL所得溶液填充到10mL大小的I型管状玻璃瓶中。按照常规方法，使用冻干器(Hull Corp.制造的Hull 2FS5C)将在各自小瓶中的溶液冻干，获得了分别含有5mg实施例2的化合物的冻干组合物。
组合物实施例7按照类似于组合物实施例6的方法，获得了分别含有5mg实施例4的化合物的冻干组合物。
组合物实施例8按照类似于组合物实施例6的方法，但是用trometamol代替L-精氨酸，获得了各含有5mg实施例5的化合物的冻干组合物。
组合物实施例9按照类似于组合物实施例5的方法，但是用trometamol代替L-精氨酸，获得了各含有5mg实施例1的化合物的冻干组合物。
组合物实施例10实施例2的化合物 5g葡聚糖40 50gL-精氨酸 70g适当量的无水柠檬酸在环境温度将葡聚糖40和L-精氨酸溶解在注射用水(800mL)中，在轻微搅拌下(为了防止起泡)向该溶液中加入实施例2的化合物。加入20％柠檬酸水溶液(约25mL)以将pH调节至9.8，加入注射用水，获得了总共1000mL溶液。
将每1mL所得溶液填充到10mL大小的I型管状玻璃瓶中。按照常规方法，使用冻干器(Hull Corp.制造的Hull 2FS5C)将在各自小瓶中的溶液冻干，获得了各含有5mg实施例2的化合物的冻干组合物。
组合物实施例11按照类似于组合物实施例10的方法，获得了各含有5mg实施例7的化合物的冻干组合物。
测试实施例1实施例2化合物的稳定的冻干组合物中的稳定剂的作用将实施例2的化合物和葡聚糖40、作为稳定剂的乳糖完全溶解在1或2mL甘氨酸-NaOH缓冲溶液(pH9.8)中。将所得溶液冻干，并在玻璃瓶中于70℃保持。9天后，测试所得组合物的外观、实施例2化合物的残余量和pH。使用不含任何稳定剂的实施例2化合物的溶液作为对照。
结果如表1所示。
表1
每个小瓶含有10mg实施例2的化合物。
*pH是组合物在2mL净化水中的重新配制溶液的pH。
从表1中可清楚且看出，与不含任何稳定剂的冻干组合物或含有其它稳定剂例如乳糖的冻干组合物相比，实施例2化合物与葡聚糖40的冻干组合物要稳定很多。
测试实施例2含有5mg实施例2化合物的冻干组合物的稳定性测试将在组合物实施例6中获得的药物组合物在不同温度下贮存。结果如表2所示。
表2
每个小瓶含有5mg实施例2的化合物。
*pH是组合物在1mL净化水中的重新配制溶液的pH。
从表2中可清楚且看出，在40℃或25℃贮存3个月后，实施例2化合物的残余量都大于95％。
给出下述实施例以更详细地举例说明本发明。
下表给出了在下列实施例1-7中使用的原料化合物和所获得的目标化合物，其中原料化合物的结构式在上栏，目标化合物的结构式在下栏。
实施例1在搅拌下向原料化合物(1)(610.6mg)在甲醇(10ml)与四氢呋喃(25ml)的混合物内的溶液中依次加入三苯基膦(32mg)、四(三苯基膦)钯(O)(35mg)和吗啉(106μl)，并将该混合物在环境温度搅拌3.5小时。加入乙酸乙酯(100ml)，收集所得沉淀，用异丙基醚洗涤，干燥，获得了浅黄色粉末粗产物(535mg)。将该粉末粗产物溶解在氢氧化钠水溶液中，施加到ODS色谱柱上(YMC-凝胶，ODS-AM-S-50(商品名由YMC Co.，Ltd.生产))(37％乙腈水溶液)。将含有目标化合物的级分合并，减压蒸发以除去乙腈。将残余物冻干，获得了目标化合物(1)(293.7mg)。
IR(KBr)3355.5，1633.4，1608.3，1529.3，1517.7，1463.7，1444.4，1267.0，1230.4cm-1NMR(DMSO-d6，δ)0.98(3H，d，J＝6.7Hz)，1.10(3H，d，J＝5.6Hz)，1.2-5.6(65H，m)，6.71(1H，d，J＝8.1Hz)，6.78(1H，d，J＝9.7Hz)，7.00(1H，s)，7.09(2H，d，J＝9.1Hz)，7.75(2H，d，J＝8.7Hz)，7.95(4H，s)，7.3-8.7(7H，m)，8.79(1H，s)MASS(m/z)1465.5(M-H)-元素分析C66H90N12O22S2·7H2O计算值C 49.74，H 6.58，N 10.55实测值C 49.72，H 6.43，N 10.40实施例2在环境温度、搅拌下，向原料化合物(2)(100mg)、1，3-二羟基乙酸酯(13.5mg)和乙酸(0.13ml)在甲醇(1.5ml)与二甲基甲酰胺(0.7ml)的混合物内的悬浮液中加入氰基硼氢化钠(9.4mg)，并将该混合物在同一温度下搅拌过夜。向该反应混合物中加入乙酸乙酯(20ml)。通过过滤收集所得沉淀，并真空干燥。将该沉淀溶解在水与1N氢氧化钠的混合物中，将该溶液施加到ODS色谱柱上(Daiso-凝胶，SP-120-40/60-ODS-B(商品名由Daiso Co.，Ltd.生产))(50ml)，用40％的乙腈水溶液洗脱。收集含有目标化合物的级分，减压蒸发以除去乙腈。将残余物冻干，获得了目标化合物(2)(55mg)。
NMR(DMSO-d6，δ)0.90(3H，d，J＝6.8Hz)，0.98(3H，d，J＝6.7Hz)，1.11(3H，d，J＝5.5Hz)，1.43-5.24(62H，m)，6.69-8.85(17H，m)ESI MASS(m/z)(负)1408.3(M+)实施例3在搅拌下向原料化合物(3)(0.22g)在甲醇(4ml)与THF(1ml)的混合物内的溶液中依次加入三苯基膦(14mg)、四(三苯基膦)钯(O)(8mg)和吗啉(40μl)，并将该混合物在环境温度搅拌3小时。将该反应混合物真空浓缩。将所得残余物溶解在pH6.86标准缓冲液与1N氢氧化钠的混合物中，过滤出去不溶物，将该溶液施加到ODS色谱柱上(Daiso-凝胶，SP-120-40/60-ODS-B(商品名由Daiso Co.，Ltd.生产))(100ml)，用30％的乙腈水溶液洗脱。收集含有目标化合物的级分，减压蒸发以除去乙腈。将残余物冻干，获得了目标化合物(3)(85mg)。
IR(KBr)1633，1537，1516，1450，1234cm-1NMR(DMSO-d6+D2O，δ)0.98(3H，d，J＝7.09Hz)，1.05(3H，d，J＝7.00Hz)，1.15(6H，d，J＝6.21Hz)，1.60-2.30(8H，m)，2.75-3.45(14H，m)，3.80-4.50(10H，m)，4.81(1H，brs)，6.65-7.20(8H，m)，7.50-7.80(5H，m)，7.94(2H，d，J＝8.49Hz)ESI MASS(m/z)(负)1416.4(M++1)元素分析C67H91N11O21S·7H2O计算值C 52.10，H 6.85，N 9.97实测值C 52.29，H 6.60，N 9.61下述化合物是按照类似于实施例3的方法获得的。
实施例4IR(KBr)2931，2854，1632，1510，14 46，1385，1325cm-1NMR(DMSO-d6，δ)0.97(3H，d，J＝6.7Hz)，1.12(3H，d，J＝5.5Hz)，1.08-2.62(23H，m)，2.62-4.50(37H，m)，4.66-5.45(10H，m)，6.70(1H，d，J＝8.1Hz)，6.78(1H，d，J＝8.1Hz)，6.83-7.09(7H，m)，7.34-8.00(3H，m)，7.80(2H，d，J＝8.7Hz)，8.00-8.49(2H，m)，8.71(1H，s)MASS(m/z)1408.4(M++1)元素分析C66H95N11O21S·7H2O
计算值C 51.59，H 7.15，N 10.03实测值C 51.77，H 7.05，N 9.82实施例5在室温向原料化合物(5)(12.50g)和二异丙基乙胺(3.67ml)在N，N-二甲基甲酰胺(250ml)内的溶液中加入4-[2-[4-(4-甲氧基丁氧基)苯基]咪唑并[2，1-b][1，3，4]噻二唑-6-基]苯甲酸苯并三唑-1-基酯。将该溶液在同一温度下搅拌4小时，期间再向该混合物中加入一部分4-[2-[4-(4-甲氧基丁氧基)苯基]咪唑并[2，1-b][1，3，4]噻二唑-6-基]苯甲酸苯并三唑-1-基酯。然后将该反应混合物过滤。在室温向滤液中加入哌啶(9.33ml)。将该溶液在同一温度下搅拌1小时。向该反应混合物中加入乙酸乙酯。通过过滤收集粉末，获得了粗产物(16.12g)。通过ODS色谱柱纯化粗产物，获得了目标化合物(5)(11.10g)。
IR(KBr)1659，1633，1529，1518，1466，1444，1255cm-1NMR(DMSO-d6，δ)0.98(3H，d，J＝6.7Hz)，1.00(3H，d，J＝5.8Hz)，1.5-2.6(12H，m)，2.8-3.6(33H，m)，4.7-5.4(10H，m)，6.65-6.85(2H，m)，7.00(1H，s)，7.15(2H，d，J＝8.9Hz)，7.3-7.7(2H，m)，7.90(2H，d，J＝8.8Hz)，7.96(4H，s)，8.0-8.5(2H，m)，8.71(1H，s)，8.85(1H，s)MAS S(m/z)1392(M++23)元素分析C60H79N11O22S2·5H2O计算值C 49.34，H 6.14，N 10.55实测值C 49.30，H 6.23，N 10.53按照类似于实施例5的方法获得了下述化合物[实施例6和7]。
实施例6IR(KBr)1664，1635，1605，1446，1410，1350，1329，1281cm-1NMR(DMSO-d6，D2O，δ)0.98(3H，d，J＝6.7Hz)，1.10(3H，d，J＝5.9Hz)，1.1-2.6(21H，m)，2.8-4.5(31H，m)，4.7-4.9(2H，m)，6.7-6.9(2H，m)，7.0-7.2(3H，m)，7.85(2H，d，J＝8.9Hz)，8.0-8.2(4H，m)ESI MASS(m/z)(负)1409.4(M--1)元素分析C64H87N11O21S2·6H2O计算值C 50.62，H 6.57，N 10.15实测值C 50.40，H 6.61，N 9.92实施例7IR(KBr)1664，1628，1605，1446，1417，1279，1084，1047cm-1NMR(DMSO-d6+D2O，δ)0.8-1.3(12H，m)，1.5-2.6(16H，m)，2.8-4.5(32H，m)，4.7-4.9(2H，m)，6.7-6.9(2H，m)，7.0-7.2(3H，m)，7.85(2H，d，J＝8.6Hz)，8.0-8.2(4H，m)ESI MASS(m/z)(负)1423.5(M--1)环多肽化合物(I)或其盐具有抗真菌活性，特别是抗下列真菌的活性支顶孢属(Acremonium)；犁头霉属(Absidia)(例如伞枝犁头霉(Absidia corymbifera)等)；曲霉属(Aspergillus)(例如棒曲霉(Aspergillus clavatus)、黄曲霉(Aspergillus flavus)、烟曲霉(Aspergillus fumigatus)、构巢曲霉(Aspergillus nidulans)、黑曲霉(Aspergillus niger)、土曲霉(Aspergillus terreus)、杂色曲霉(Aspergillus versicolor)等)；芽生菌属(Blastomyces)(例如皮炎芽生菌(Blastomycesdermatitidis)等)；念珠菌属(Candida)(例如白色念珠菌(Candida albicans)、团念珠菌(Candida glabrata)、季也蒙氏念珠菌(Candidaguilliermondii)、乳酒念珠菌(Candida kefyr)、克鲁斯氏念珠菌(Candida krusei)、近平滑念珠菌(Candida parapsilosis)、星型念珠菌(Candida stellatoides)、热带念珠菌(Candidatropicalis)、产朊念珠菌(Candida utilis)等)；枝孢属(Cladosporium)(例如毛样枝孢(Cladosporiumtrichoides)等)；球孢菌属(Coccidioides)(例如粗球孢菌(Coccidioidesimmitis)等)；隐球菌属(Cryptococcus)(例如新型隐球菌(Cryptococcusneoformans)等)；小克银汉霉属(Cunninghamella)(例如Cunninghamellaelegans等)；皮霉菌(Dermatophyte)；外瓶柄霉属(Exophiala)(例如Exophiala dermatitidis、斯平尼外瓶柄霉(Exophiala spinifera)等)；表皮癣菌属(Epidermophyton)(例如絮状表皮癣菌(Epidermophyton floccosum)等)；Fonsecaea(例如佩德罗索氏产色芽生菌(Fonsecaea pedrosoi)等)；镰孢属(Fusarium)(例如茄病镰孢(Fusarium solani)等)；地丝菌属(Geotrichum)(例如白地霉(Geotrichum candiddum)等)；组织胞浆菌属(Histoplasma)(例如荚膜组织胞浆菌(Histoplasma capsulatum var.capsulatum)等)；马拉色氏霉菌属(Malassezia)(例如糠秕马拉色氏霉菌(Malassezia furfur)等)；小孢子菌属(Microsporum)(例如犬小孢子菌(Microsporumcanis)、石膏样小孢子菌(Microsporum gypseum)等)；白霉属(Mucor)；副球孢子菌属(Paracoccidioides)(例如巴西芽生菌(Paracoccidioides brasiliensis)等)；青霉菌(Penicillium)(例如马尼弗氏青霉(Penicilliummarneffei)等)；瓶霉属(Phialophora)；肺囊虫属(Pneumocystis)(例如卡氏肺囊虫(Pneumocystiscarinii)等)；假霉样真菌属(Pseudallescheria)(例如波伊德假霉样真菌(Pseudallescheria boydii)等)；根霉菌属(Rhizopus)(例如小孢根霉(Rhizopus microsporusvar.rhizopodiformis)、米根霉(Rhizopus oryzae)等)；酵母属(Saccharomyces)(例如酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)等)；帚霉属(Scopulariopsis)；孢子丝菌属(Sporothrix)(例如Sporothrix schenchii等)；发癣菌属(Trichophyton)(例如须发癣菌(Trichophytonmentagrophytes)、深红色发癣菌(Trichophyton rubrum)等)；丝孢酵母属(Trichosporon)(例如Trichosporon asahii、皮状丝孢酵母(Trichosporon cutaneum)等)。
众所周知，上述真菌会在皮肤、毛发、指甲、口腔粘膜、胃肠道、支气管、肺、心内膜、脑、脑脊膜、泌尿器官、阴道腔(protion)、口腔、眼、全身、肾、支气管、心脏、外耳道、骨、鼻腔、鼻侧腔、脾、肝脏、皮下组织、淋巴管、胃肠、关节、肌肉、腱、肺中的间质性浆细胞等中引起各种感染性疾病。
因此，本发明环多肽化合物(I)或其盐可用于预防和治疗各种感染性疾病，例如皮真菌病(例如发癣菌病等)、花斑糠疹、念珠菌病、隐球菌病、地丝菌病、毛孢子菌病、曲霉病、青霉病、镰孢菌病(fusariosis)、接合菌病(zygomycosis)、孢于丝菌病、着色真菌病、球孢子菌病、组织胞浆菌病、芽生菌病、类球孢子菌病、假霉样真菌病(pseudallescheriosis)、足分支菌病、真菌性角膜炎、耳真菌病、肺囊虫性肺病(pneumocystosis)等。
市售包装，其中包含本发明组合物的环多肽化合物(I)或其盐和与其有关的书面说明书，其中所述书面说明书说明该药物组合物可以或者应当用于预防或治疗感染性疾病。
权利要求
1.稳定的冻干形式的药物组合物，其中包含通式(I)所代表的环多肽化合物或其盐作为活性组分和多糖作为稳定剂， 其中R1是氢或酰基，R2是氢或酰基，R3是具有一个或多个羟基或保护的羟基的低级烷基，R4是氢或羟基，R5是氢、羟基、低级烷氧基或羟基磺酰基氧基，且R6是羟基或酰基氧基。
2.根据权利要求1的组合物，其中所述组合物还包含pH调节剂和/或pH缓冲剂。
3.根据权利要求2的组合物，其中所述多糖是葡聚糖。
4.根据权利要求3的组合物，其中所述葡聚糖是葡聚糖40。
5.根据权利要求2的组合物，其中所述pH缓冲剂是氨基酸。
6.根据权利要求5的组合物，其中所述氨基酸是L-精氨酸。
7.根据权利要求1的组合物，其中按多肽化合物(I)或其盐为1重量份计，所述组合物含有5-50重量份的多糖。
8.根据权利要求1的组合物，其中所述组合物在一个单位剂量中包含0.1-400mg多肽化合物(I)或其盐。
9.根据权利要求1的组合物，其中所述组合物是按照下述步骤制得的将多肽化合物(I)或其盐、稳定剂以及任选的pH调节剂和/或pH缓冲剂溶解在净化水中，将该溶液冻干。
10.权利要求1的组合物，当溶于净化水中时，所述组合物给出pH9.0-10.0的溶液。
11.权利要求1的组合物，其中所述组合物含有3.4％重量或更少的水。
12.通过将权利要求1的组合物溶解在等渗氯化钠溶液中而制得的注射剂。
13.市售包装，其中包含权利要求1-11任一项的药物组合物和与其有关的书面说明书，其中所述书面说明书说明该药物组合物可以或者应当用于预防或治疗感染性疾病。
全文摘要
稳定的冻干形式的药物组合物，其中包含通式(I)所代表的环多肽化合物或其盐和稳定剂，式中R
文档编号A61P31/10GK1484649SQ01821613
公开日2004年3月24日 申请日期2001年12月21日 优先权日2000年12月28日
发明者三宅幸三, 大友和三, 笠井昭宏, 三, 宏 申请人:藤泽药品工业株式会社