专利名称：Sod与动物药或其提取物的组合物及其制备方法
所属领域本发明涉及超氧化物歧化酶SOD与动物药，特别是SOD与动物药或其提取物的组合物及其制备方法。是利用两者相辅相成的功用，消除体内多余的超氧化物阴离子自由基和羟自由基，稳定细胞膜及抗酶活性，用于疾病预防或治疗，并抗疲劳、提高免疫力，能满足人类健康长寿之需要。
背景技术：
SOD是一种复合酶，在人体防御系统中的地位有超氧化氢酶，还谷胱苷肽，氧化型谷胱甘肽，含硒的谷胱甘肽超氧化物酶；人体实验表明正常人血液中SOD含量为90mg/L，超氧化物酶为9mg/L，故胱甘肽转移酶为1mg/L，可见SOD对人体的重要性。因此三酶相比，SOD无疑是防御体系中的关键酶。氧依靠细胞色素氧化酶的催化作用，98％-99％的摄入氧可直接还原为H2O，但剩余的O2通过单电子还原为O2。SOD是需氧生物体内催化超氧化物自由基(O2或HO2)歧化为H2O2与O2的一种金属酶，随着金属种类的不同，分成CuZn-SOD，Mn-SOD，Fe-SOD与Ni-SOD，都属于酸性蛋白，结构和功能比较稳定，能耐受各种物理或化学因素的作用，对热、PH和蛋白水解酶的稳定性比较高，通常在PH5.3-9.5范围内，SOD催化反应速度不受影响，维持细胞内超大型氧自由基处于无害的低水平状态。作为一种功效成分，SOD的生理功效可概括为清除机体代谢过程中产生过量的超氧阴离子自由基，延缓由于自由基侵害而出现的衰老现象，如延缓皮肤衰老和脂褐素沉淀的出现；提高人体对由于自由基侵害而诱发疾病的抵抗力，包括肿瘤、炎症、肺气肿、白内障和自身免疫疾病等；提高人体对自由基外界诱发因子的抵抗力，如烟雾、辐射、有毒化学品和有毒医药品等，增强机体对外界环境的适应力；减轻肿瘤患者在进行化疗、放疗时的疼痛及严重的副作用，如骨髓损伤及白细胞减少等；消除机体疲劳，增强对超负荷大运动量的适应力。在生物体内，锌既是许多酶的组成成分，又可影响某些非酶的有机分配位体的结构，参与体内各种物质与能量的代谢，从而显示出它所具有的生理功效为体内多种金属酶的组成成分；保护稳定生物膜；促进机体的生长发育和组织再生；调节免疫功能；影响内分泌系统；改善味觉并促进食欲；促进维生素A的正常代谢和视觉功能；保护皮肤和骨骼的正常功能；促进智力发育。
影响SOD临床应用的主要因素有生物半衰期；异体蛋白免疫原性；细胞膜的通透性和稳定性。这表明修饰SOD进入体循环后，消除速率变慢，但分布速率仍较快；与游离SOD相比，修饰SOD在肝和肾中含量高，在脑中含量也较高；游离SOD在组织中的分布顺序趋势是胃、肠、肌肉、肺、脑、肝、脑、肾、脾、心和睾丸，结果证明修饰酶的代谢途径发生了变化，这与酶对细胞膜的通透性有关，修饰酶在脑里组织中的含量较高，说明修饰酶能够通过血脑屏障，这对于治疗脑外伤是有意义的。目前国内外主要集中在抗辐射，抗肿瘤，抗衰老及自身免疫性疾病上，治疗的病种有缺血再灌流综合征、氧中毒、辐射损伤、皮肤病、骨关节炎、类风湿关节炎、烧伤、老年性白内障、家族性肌肉萎缩病等，由于目前使用的SOD均为异源蛋白，且分子量都大于30000，因此人体对其耐受性是应用中极为关注的问题，说明SOD无副作用，人对其有较强的耐受力；重组SOD是毒性和副作用很小的生物大分子，但作为抗原，多次注入体内仍可诱发免疫反应，故最理想的方法是将SOD基因克隆和表达人的SOD；或者纳米化使大分子肽变为小肽，利于人体吸收，这都是我们已解决的课题。
传统的中草药医用少为单味，多为处方，讲究君臣佐使，往往以一、二味君药为主治疗疾病，但由于中草药成份复杂，除有效成份外，还有大量杂质，甚至对人体有害的物质，产生副作用，以致毒害，需要其他臣药佐使来消除影响，帮助吸收，因而方剂容积过大，不利使用，还存在消此复彼的毒副作用，以及相互抵消，降低药效，难以发挥主药的真正作用，亟待改进。
发明内容
本发明针对现有技术不足，利用现代生化技术及中医药学理论，提供一种SOD与动物药或其提取物的组合物及其制备方法，即SOD与动物药或其提取物的组合物联合应用，提高药物浓度及有效成份，抗氧化活性提高6倍以上，皮肤、粘膜吸收率达90％以上，半衰期延长两个数量级以上；能进入细胞内直接发挥清除自由基，具有更强的抗脂质过氧化的作用，综合药效发挥更彻底，远非传统复方中药可比，用于提高抗缺氧能力，发挥抗疲劳功效，提高运动耐力，是对人类医药事业的一大创举。
SOD与动物药或其提取物的组合物，其配比为SOD 1000-1万活性单位植物药1-50克。
SOD与动物药或其提取物的组合物制备方法，在于SOD内加入动物药或其提取物。
动物药可为既是食品又是药品的动物，如乌梢蛇、蝮蛇、牡蛎、蜂蜜、鸡内金，或其他中草药、动物药。
动物药的提取物可为胆汁即猪科动物猪，牛科动物牛，牛科动物山羊及绵羊等的胆汁酸类、胆红素、粘蛋白、脂类及无机物。其中酸类有百余种，主要有胆酸、去氧胆酸、鹅去氧胆酸、猪去氧胆酸、熊去氧胆酸等。不同动物的胆酸其化学成分也不同，如猪胆汁中主含a-猪去氧胆酸，其次含3a-羟基酮别胆酸、鹅去氧胆酸、猪胆酸、石胆酸，以及胆酸、胆色素、卵磷脂等；牛胆汁中主含胆酸，去氧胆酸、鹅去氧胆酸、石胆酸及胆色素、粘蛋白、胆锱醇、胆碱、卵磷脂等；前胆汁主含胆锱酸、去氧胆酸、鹅去氧胆酸及胆色素、粘蛋白等；兔胆汁中以去氧胆酸含量最高。具有清肺化痰、清热解毒的功能。用于肺热咳嗽、痰多不爽、目赤肿痛、喉痹、黄疸、痢疾、疮疡肿毒百日咳等；蚕砂，蚕鹅科昆虫有的干燥粪便；蚕砂的有机物83.77％～90.44％，总氮量1.91％～3.60％，又含叶绿素，如叶要素铜盐；叶绿素易溶于乙醚、乙醇、丙醇、氯仿、苯、二硫化碳等有机溶剂，难溶于冷甲醇，可溶于石油醚。具有祛风除湿和胃化浊。用于风湿痹痛、肢体不遂、湿疹瘙痒、湿浊内阴而致的吐泻转筋。
SOD是自由基清道夫，清除病人的多余自由基(病人往往自由基比正常人多)，在药物被人体吸收前进入药效时，用SOD将体内自由基清除，使药物被人体全面吸收，发挥最大的药效，以往由于自由基对药物的药效直接影响，使药效大打折扣，这就是药物不能发挥最大作用的原因，只好增大药量，一方面对付自由基的侵害；另一方面对疾病发挥效力，如今没有了自由基的副作用，药力就大大增强了。长期服用SOD既可清除自由基，使自由基消失或者减少，治病时用药其量已大大减少了，药效比复方药更好，这是药物发挥效力的最好途径，是一种全新理念，必将为人类健康事业做出重大贡献，这正是本发明的一大特点，必将引起药物学、生物学、药理学、药效学的一次革命，引发治疗疾病的新思维。
SOD与中药合并使用的治疗方法，就是将SOD与传统中药合并使用，利用两者相辅相成的功用，可以改变两者分别使用疗效不佳的缺点。
近年来在国际上传统中药的使用愈来愈普遍，中药与天然物包括抗氧化剂的销售量每年均似倍数增长；我们提出以中药天然物代替或辅助西药治疗，取得了良好的效果，在国内、泰国、日本、美国以及欧洲越来越得到普遍重视。
通过实验证实
1、抗氧化活性实验检测方法 化学发光、蛋白电泳、生化测定、紫外扫描。胶囊内容物重量0.35±0.05g/粒；抗氧化活性，每粒胶囊抗氧化活力相当于3200 SOD活力单位；样品在60℃加热2小时后其抗氧化活力相当于650 SOD活力单位；蛋白含量测定样品在日立全自动生化分析仪上测定总蛋白会含量9.5mg/粒，白蛋白含量＜2mg/粒；蛋白电泳分析取样品(浓度为50mg/ml)和牛血清白蛋白(25mg/ml)，标准条件下电泳，结果显示样品无蛋白带，标准质控血清及牛血清白蛋白的显色均十分清晰；样品中金属离子测定表明每粒胶囊含镁0.25mg，未测到钙、磷、铁等离子；紫外扫描表明样品无论加热与否其最大吸光度均恒定在260nm处，小结该样品中含有抗氧化活性物质。
2、抗辐射实验对照组NS；试验组玉米SOD，外周血白细胞计数实验，数据处理及结果判定，白细胞数为计量资料，采用方差分析，但需按方差分析的程序先进行方差齐性检验，方差齐，计算P值，P值＜0.05，结论试验组与对照组之间差异有显著性，P＜0.05照射前的外周血白细胞计数，用于各组白细胞数目的均衡性检验，剂量组与辐射模型对照组比较，差异无显著性，继续进行照射及后续实验。照射后3天辐射模型对照组的白细胞数分别与照射前进行自身比较，差异有显著性，辐射损伤模型成立，照射后第5天、第14天剂量组与辐射模型对照组比较，白细胞总数增多，差异有显著性，该实验阳性。
辐射前后白细胞数比较C(0)C(5)C(14)T(0)Y(5)T(14)Mean7.550.6883 2.2000 7.281.382.84P0.800.0044 0.0479SOD 1.581.310.18 0.481.370.533、抗疲劳实验药物配制(0.5ml/只/次)，试验组B，12mg/ml P+L(2/3-100ml)；试验组C，12mg/ml P+L(2/3-100ml)；玉米SOD(4000U/ml)；试验组D16mg/ml甲鱼胶；试验组E80mg/ml甲鱼胶，缓解体力疲劳功能。血清中的尿素室温下可稳定24h，在4-6℃可稳定7天以上。血乳酸与对照组相比，试验组B、C、D、E与对照组A比较，P值分别为0.04、0.84、0.17、0.19。差异有显著性，该实验阳性。
血清中的尿素比较ControlB C DEUN9.2±0.9 8.5±1.3 7.7±1.09.4±0.9 8.5±1.2P0.2467 0.0083☆0.6052 0.2135小鼠负重游泳时间比较Control B C D EMEAN88 114116 95 103SOD 20.74825 31.48714 28.2101 26.9636813.62351p0.055799 0.0284820.5167790.084634根据一氧化氮、超氧化物自由基和超氧化歧化酶的互相关系，SOD可能作为口服制剂的有效成分之一。它可用于防治消化道的慢性炎症，并可预防或辅助治疗消化道内癌症。高新工程技术酶工程是利用酶的催化作用进行物质转化的技术，是将生物体内具有特定催化功能的酶分离，结合化工技术，在液体介质中固定在特定的固相载体上，作为催休生化反应的反应器，以及对酶进行化学修饰，或采用多肽链结构上的改造，使酶化学稳定性、催化性能甚至抗原性能发生改变，以达到特定目的的工程技术。酶工程在功能性食品的应用广泛，诸如功能性低聚糖、肽、氨基酸、维生素等功效成成分的制造。SOD是生物体内防御氧化损伤的一种重要的酶，能催化超氧自由基发生歧化反应，维持细胞内超大型氧自由基处于无害的低水平状态。
SOD作为用途广泛的生物酶，已应用于药品、食品、保健品、化妆品等领域，SOD在动物药或其提取物中的应用，具有增强细胞免疫功能、巨噬细胞吞噬功能和体液免疫功能的作用。活性氧是动物药或其提取物氧化的重要参与者，添加SOD可以防止动物药或其提取物氧化。
我们应用自由基生物学、自由基医学、中医中药学与营养学，在动物药或其提取物中加入含有抗氧化剂SOD及抗氧化维生素为主的复合剂，成为SOD动物药或其提取物，经过一系列实验，证明它是一种高效的药品或保健品。SOD在人体小肠内的通透性极大提高；释放速率提高；功效和有效利用率大大提高，可有效突破机体生物屏障对药物食品作用的限制，使药物食品更好地进入血液循环，人体有许多保护机体不受损害的天然生物屏障，如血脑屏障，血眼屏障，细胞生物膜屏障等，一般药物很难通过这些机体生物屏障， SOD微粒则可穿过这些屏障，对病灶部位起到治疗作用。
SOD对女士皮肤有清除色斑、黄褐斑、皱纹等作用，并能增加皮肤膜的弹性，防止衰老；对男士有消除疲劳、消除亚健康、提高机体抗病毒能力，防止衰老作用，并能减少前列腺炎的发病机率。该技术克服了目前SOD等生物蛋白酶的应用限制和不足，为其广泛应用打开了新的大门，宜于普及推广。
本发明附图1SOD与中药结合示意图，图2抗疲劳实验结果比较示意图。
具体实施例方式实施例1SOD与动物药或其提取物组合物，其配比SOD1万活性单位动物药1克。
实施例2我们采用一种玉米超氧化物歧化酶SOD复合酶大规模制造方法，制取的SOD母液可达到600-1000活性单位/克；SOD干粉可达到4000-6000活性单位/克。
实施例3斑蝥为芫青科昆虫南方大斑蝥或黄黑小斑蝥的干燥体。斑蝥具有破雪消徽、攻毒蚀疮、发泡冷炙。用于徽瘕癌肿、积年顽癣、瘰、赘疣、痈疽不溃、恶疮死肌。
治疗癌肿药SOD干粉6g，30000活性单位、斑蝥6g。
实施例4蜂王浆(蜂乳)为蜜蜂科昆虫中华蜜蜂等工蜂咽腺分泌的乳白色胶头物和蜂蜜配制而成的液体；成分含有丰富的氨基酸、维生素、糖类、蛋白质和脂肪；王浆酸异名(E)-10-羟基-癸烯酸。棱柱状结晶(乙醚加石油醚或甲醇加水)，反式64℃～65℃，顺式73.5℃～74.5℃。具有滋补、强壮、益肝、健脾的功效。用于病后虚弱、小儿营养不良、老年体衰、传染性肝炎、高血压病、风湿性关节炎、十二指肠溃疡等。
治疗传染性肝炎药SOD母液6g，4800活性单位、王浆酸1.5g。
实施例5在于SOD与动物药或其提取物组合物作为中间体，用于食品、保健品、药品、化妆品、日用化工制品、烟酒制品的载体。
实施例6在于SOD与动物药或其提取物组合物，作为软胶囊、胶囊、乳剂、片剂、注射液或其它剂型的载体。
实施例7
在于SOD与动物药或其提取物组合物，可根据不同目的加入各种药物，作为多种配方的载体。
权利要求
1.SOD与动物药或其提取物的组合物，其配比为SOD 1000-1万活性单位植物药1-50克。
2.根据权利要求1所述SOD与动物药或其提取物的组合物，起配比SOD 1万活性单位动物药1克。
3.根据权利要求1所述SOD与动物药或其提取物的组合物，治疗癌肿药SOD干粉6g，30000活性单位、斑蝥6g。
4.根据权利要求1所述SOD与动物药或其提取物的组合物，治疗传染性肝炎药SOD母液6g，4800活性单位、王浆酸1.5g。
5.SOD与动物药或其提取物的组合物的制备方法，在于SOD内加入动物药或其提取物。
6.根据权利要求5所述SOD与动物药或其提取物的组合物的制备方法，在于SOD母液可达到600-1000活性单位/克；SOD干粉可达到4000-6000活性单位/克。
7.根据权利要求5所述SOD与动物药或其提取物的组合物的制备方法，在于动物药可为既是食品又是药品动物，如乌梢蛇、蝮蛇、牡蛎、蜂蜜、鸡内金，或其他中草药、动物药。
8.根据权利要求5所述SOD与动物药或其提取物的组合物的制备方法，可为胆汁即猪科动物猪，牛科动物牛，牛科动物山羊及绵羊的胆汁酸类、胆红素、粘蛋白、脂类及无机物，如猪胆汁中主含a-猪去氧胆酸，其次含3a-羟基酮别胆酸、鹅去氧胆酸、猪胆酸、石胆酸，以及胆碱、胆色素、卵磷脂等；牛胆汁中主含胆酸，去氧胆酸、额去氧胆酸、石胆酸及胆色素、粘蛋白、胆锱醇、胆碱、卵磷脂等；前胆汁主含胆锱酸、去氧胆酸、鹅去氧胆酸及胆色素、粘蛋白等；兔胆汁的氧胆酸；蚕砂的有机物83.77％～90.44％，总氮量1.91％～3.60％，叶绿素，如叶要素铜盐；叶绿素易溶于乙醚、乙醇、丙醇、氯仿、苯、二硫化碳。
9.SOD与动物药或其提取物的组合物的应用，在于SOD与动物药或其提取物组合物作为中间体，用于食品、保健品、药品、化妆品、日用化工制品、烟酒制品的载体；在于作为软胶囊、胶囊、乳剂、片剂、注射液或其它剂型的载体；在于根据不同目的加入各种药物，作为多种配方的载体。
全文摘要
SOD与动物药或其提取物的组合物及其制备方法，在于纯化SOD与动物药或其提取物组合，其配比为1－10∶1。即纯化的SOD与动物药或其提取物的组合物联合应用，而非SOD与原始复方中药的直接应用，提高药物浓度及有效成分，抗氧化活性提高10倍以上，皮肤、粘膜吸收率达90％以上，半衰期延长两个数量级以上；能进入细胞内直接发挥清除自由基，具有更强的抗脂质过氧化的作用，综合药效发挥更彻底，远非传统复方中药可比，用于提高抗缺氧能力，发挥抗疲劳功效，提高运动耐力，是对人类医药事业的一大创举。这是药物发挥效力的最好途径，必将为人类健康事业做出重大贡献，这正是本发明的一大特点，必将引起药物学、生物学、药理学、药效学的一次革命，引发治疗疾病的新思维。
文档编号A61K38/43GK1618460SQ200410020988
公开日2005年5月25日 申请日期2004年7月19日 优先权日2004年7月19日
发明者王成余, 王刚, 王强 申请人:王成余