专利名称：含有三乙酰穿心莲内脂的药物组合物及其医药用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及三乙酰穿心莲内酯在制备抗炎、免疫抑制以及抗肿瘤药物中的用途。本发明进一步涉及一种含有三乙酰穿心莲内酯作为活性成分以及药学上可接受的载体的药物组合物，以及在制备抗炎、免疫抑制和抗肿瘤药物中的用途。
背景技术：
穿心莲为爵床科植物穿心莲Andrographis panniculata(Burm.f.)Nees的干燥地上部分。原产于印度，我国华东、中南及西南等地有栽培。味苦，性寒，归心、肺、大肠、膀胱经。具有清热解毒，凉血消肿之功效。用于感冒发热，咽喉肿痛，口舌生疮，顿咳劳嗽，泻泄痢疾，热淋涩痛，痈肿疮疡，毒蛇咬伤。
1896年，Boorsma从穿心莲中首次分离出一种无色结晶物，1911年经Gorter结构鉴定为二萜内酯类化合物，被命名为andrographolide(1)，中文名称穿心莲内酯，又称雄茸内酯，穿心莲乙素，是穿心莲的主要化学成分之一，在我国已作为合成穿琥宁、炎琥宁等解热抗炎药的原料大量生产。迄今为止，有关三乙酰穿心莲内酯的药理活性还没有报道，本发明人对此进行深入研究，体内实验表明三乙酰穿心莲内酯具有抗炎、免疫抑制和抗肿瘤的用途。
发明内容
本发明公开了三乙酰穿心莲内酯在制备抗炎、免疫抑制及抗肿瘤药物中的用途。
本发明进一步涉及一种含有三乙酰穿心莲内酯作为活性成分以及药学上可接受的载体的药物组合物，以及在制备抗炎、免疫抑制和抗肿瘤药物中的用途。
具体实施例方式
1、三乙酰穿心莲内酯的制备
穿心莲内酯(1)5g(14.3mmol)，乙酸酐20mL，新熔融的氯化锌2g，依次加入100mL单口烧瓶中，附上回流冷凝管，油浴80℃加热。反应液澄清后停止反应，将反应液倾入盛有80mL冰水的烧杯中，并剧烈搅拌，抽滤，用水洗涤滤饼至pH7。滤饼用乙醇结晶，得白色针状结晶4.7g，收率67.8％。m.p.128℃。IR(cm-1)2976，2955，2925，2868，1753，1736，1680，1450，1375，1251，1026，908。MS(ESI)m/z476.3M+，477.3(M+1)+，499.3(M+Na)+。1H-NMR(CDCl3，6)7.01(1H，t，J＝5.2，12-H)，5.91(1H，d，J＝6.0，14-H)，4.90，4.53，(各1H，s，17-H)，4.60(1H，dd，J＝6.1，11.2，15-H)，4.55(1H，dd，J＝5.0，11.2，15-H)，4.38，4.14(各1H，d，J＝11.8，19-H)，4.27(1H，d，J＝11.2，3-H)，2.12(3H，s，1×COCH3)，2.05(3H，s，2×COCH3)，1.03(3H，s，18-H)，0.76(3H，s，20-H)。
2、三乙酰穿心莲内酯的药理活性研究2.1对蛋清所致大鼠足肿胀的影响材料动物wistar大鼠，体重180～220g，均为雄性(河南省医学实验动物中心)方法大鼠24只，180～220g，均为雄性，随机分为3组，每组8只。一组ip生理盐水，二组和三组分别ip试药300mg/kg，各组注射容积均为1mL/100g。给药前用记号笔标记大鼠右踝关节浸水边界，排水容积法测量1次致炎前大鼠右足排水容积。给药后立即于大鼠右后脚掌sc新鲜蛋清0.1mL/只。测量给药后1h，2h，4h，6h时的大鼠足排水容积。实验结果见表1-1。
表1-1 三乙酰穿心莲内酯对蛋清所致大鼠足肿胀的影响(X±S，n＝8)
注与NS组相比，*P＜0.05，**P＜0.01实验结果表明三乙酰穿心莲内酯给药4h内能非常显著性抑制蛋清所致的大鼠足肿胀，其抗炎作用明显优于穿心莲内酯。
2.2免疫2.2.1炭粒廓清材料仪器酶联检测仪Multiskan Ascent(Thermo Labsystems)动物昆明小鼠，18～22g，均为雄性(河南省医学实验动物中心)试剂印度墨水(北京笃实精细制剂厂)方法取昆明小鼠30只，18～22g，均为雄性。随机分为3组，每组10只，第1组为阴性对照(溶剂对照)组，2～3组为试药组。各组每天ig给药1次，药物浓度5mg/mL，给药剂量为100mg/kg，给药容积0.2mL/10g，全程给药8d。结束后次日各组小鼠iv印度墨水0.1mL/10g，并于注射后第1min、第10min眶静脉采血，每次采血20μL。将所采血液加至盛有2mL 0.1％ NaHCO3的试管中，以等容量小鼠正常血液0.2mL加至盛有2mL 0.1％ NaHCO3的试管中作为空白。振摇混合后于620nm处用酶标仪测吸光度，并按下式计算炭粒廓清指数。结果如表1-2所示。
炭粒廓清指数K＝(logA1-logA2)/(t2-t1)其中，A1第1min采血所测吸光度A2第10min采血所测吸光度t2第10mint1第1min
表1-2 三乙酰穿心莲内酯炭粒廓清实验结果(X±S，n＝10)
注与对照组相比，*P＜0.05，**P＜0.01实验结果表明三乙酰穿心莲内酯具有非常显著的免疫抑制作用，其作用强于穿心莲内酯。
2.2.2迟发性变态反应材料动物昆明小鼠，18～22g，均为雄性(河南省医学实验动物中心)试剂2，4-二硝基氯苯(DNCB)方法取昆明小鼠30只，18～22g，均为雄性。随机分为3组，每组10只，第1组为阴性对照(溶剂对照)组，2～3组为试药组。取小鼠背部剪毛(1.5cm×1.5cm)，用7％的DNCB丙酮液滴背进行激发，剂量为50μL/只。致敏后的次日，ig给药，药物浓度为5mg/mL，剂量为1mg/10g。连续给药8d后，再用7％的DNCB丙酮液攻击小鼠左耳，作为对照。激发16h后处死小鼠，用9mm打孔器打下耳片，分别称左、右耳片重量。按下式计算肿胀度。结果见表1-3。
肿胀度＝右耳片重-左耳片重表1-3 三乙酰穿心莲内酯迟发性变态反应实验结果(X±S，n＝10)
注与对照组相比较，*P＜0.05，**P＜0.01实验结果表明三乙酰穿心莲内酯能显著抑制迟发性变态反应，其作用与穿心莲内酯相当。
2.3抗肿瘤材料动物昆明小鼠，18～22g，均为雄性(河南省医学实验动物中心)
方法取昆明小鼠30只，18～22g，均为雄性。取接种8d生长良好的HepA小鼠腹水，用NS 1∶5稀释，以0.2mL/只接种于小鼠右侧腋窝下。将接种后的小鼠按体重分为3组，每组10只。设第1组为正常对照组，腹腔注射NS；2～3组为试药组，腹腔注射穿心莲内酯或三乙酰穿心莲内酯300mg/kg，注射容积为0.2mL/10g，每日一次，连续10d。停药次日处死，剥离肿瘤，称体重、瘤重，按下式计算试药的抑瘤率。结果见表1-4。
抑瘤率＝(正常对照组瘤重-给药组瘤重)/正常对照组瘤重×100％表1-4 三乙酰穿心莲内酯体内抗肿瘤实验结果(n＝10)
注与对照组相比，*P＜0.05，**P＜0.01体内抗肿瘤实验结果表明三乙酰穿心莲内酯具有非常显著的抗肿瘤活性，且比穿心莲内酯的抗肿瘤活性还高。
以上实验结果证明三乙酰穿心莲内酯具有显著的抗炎、免疫抑制及抗肿瘤药物活性。
权利要求
1.三乙酰穿心莲内酯在制备抗炎、免疫抑制及抗肿瘤药物的用途。
2.一种药物组合物，其特征在于含有三乙酰穿心莲内酯作为活性成分以及药学上可接受的载体。
3.权利要求2的药物组合物在制备抗炎药物中的用途。
4.权利要求2的药物组合物在制备免疫抑制药物中的用途。
5.权利要求2的药物组合物在制备抗肿瘤药物中的用途。
全文摘要
本发明涉及三乙酰穿心莲内酯在制备抗炎、免疫抑制及抗肿瘤药物中的用途。本发明进一步涉及一种含有三乙酰穿心莲内酯作为活性成分以及药学上可接受的载体的药物组合物，以及在制备抗炎、免疫抑制和抗肿瘤药物中的用途。
文档编号A61K31/365GK1695612SQ20051001765
公开日2005年11月16日 申请日期2005年6月6日 优先权日2005年6月6日
发明者韩光, 许启泰, 刘蕾, 谢松强, 杜钢军 申请人:韩光, 许启泰