专利名称：灵芝孢子油静脉乳注射液及其制备方法
技术领域：
本发明涉及医药技术领域，具体涉及灵芝孢子油静脉乳注射液及其制备方法。
背景技术：
灵芝孢子油是从多孔菌科真菌赤芝或紫芝的干燥子实体中提取的油脂性物质，中国科学院经过多次实验研究，发现蕴藏在灵芝孢子中的灵芝孢子油是发挥抗肿瘤、保健和治疗作用的“主力”，它的抑瘤率平均高达91.6％(徐金木，中国食用菌，2002版)灵芝孢子油集中了灵芝孢子的全部主要成分，是灵芝中功效成分的集合体。灵芝孢子油的主要成分为三萜类灵芝酸、灵芝多糖、不饱和脂肪酸等，其中三萜类灵芝酸的主要作用有①细胞毒作用三萜类灵芝酸有针对肿瘤细胞的特异性的细胞毒作用，直接毒杀肿瘤细胞，防止扩散，直至消灭肿瘤细胞；②抑制肿瘤蛋白质金合欢酯转移酶(FPT)的活性，阻断肿瘤DNA的金合展欢酯化修饰，阻止肿瘤细胞的转化和膜融合，从而抑制肿瘤细胞转移；③抑制组织胺的释放，减轻肿瘤患者的疼痛；改善过敏体质，消减肿瘤细胞；④抑制血管紧张素转化酶，具有降压、降脂和预防血栓等的作用。灵芝多糖可增强肌体免疫功能，有显著、直接的抗肿瘤作用，能抑制肿瘤生长和转移；另外，不饱和脂肪具有软化血管、净化血液、消除细胞自由基的作用。由于灵芝孢子油集以上诸功效于一体，故灵芝孢子油在抗肿瘤、抗HIV和抗乙肝病毒以及增强肌体免疫功能等方面疗效显著，临床应用越来越广。
目前临床最常用的灵芝孢子油制剂有灵芝孢子油软胶囊、灵芝孢子口服液，主要作为抗肿瘤、抗HIV和抗乙肝病毒以及增强机体免疫功能药使用，这些传统的口服制剂一方面口服吸收较差，生物利用度较低，起效较慢；另一方面口服常规制剂缺乏靶向性，对肿瘤细胞毒杀的同时对人体正常细胞也有损害，毒副作用大，所以研制一种安全、有效的灵芝孢子油新剂型已成为广大医药工作者的共识。
发明内容
本发明的目的之一是克服现有技术的不足，提供一种载药量大、吸收好，起效快，生物利用度高，副作用小、给药方便的灵芝孢子油静脉乳注射液。
本发明的另一目的是提供该灵芝孢子油静脉乳注射液的制备方法。
本发明提供一种灵芝孢子油静脉乳注射剂，由灵芝孢子油和制成静脉乳剂的药物可接受的载体制成。所述制成静脉乳剂的药物可接受的载体选自注射用溶剂、注射用油、乳化剂、等渗调节剂、抗氧化剂、pH调节剂。
各组分的重量/体积百分比(w/v)可以是灵芝孢子油0.01-50％注射用油 0-40％乳化剂0.1-20％等渗调节剂0.01-15％抗氧化剂 0.005-0.50％其余为注射用溶剂和pH调节剂。
也可以是灵芝孢子油0.01-20％注射用油 0-30％乳化剂0.5-10％等渗调节剂0.1-15％抗氧剂0.005-0.50％其余为注射用溶剂和pH调节剂。
其中所述的注射用油选自辛癸酸甘油酯、大豆油、红花籽油、玉米油中的一种或几种；所述乳化剂选自注射用大豆磷脂、蛋黄磷脂、泊洛沙姆188(F68)、甘油单油酸酯中的一种或几种；所述的渗透压调节剂选自甘油、山梨醇、木糖醇、葡萄糖、氯化钠中的一种或几种；所述的抗氧化剂选自乙二胺四乙酸二钠、巯基乙酸、生育酚中的一种；所述的pH调节剂选自氢氧化钠溶液、盐酸、醋酸及其盐中的一种，所述注射用溶剂为水。
所述的pH调节剂优选为氢氧化钠溶液，浓度为0.001-5M或盐酸溶液，浓度为0.001-5M。
本发明的注射剂，其中乳化剂溶解在水相中。
本发明的注射剂，为白色或类白色乳状液体，有时有乳光，载药量为0.1-200mg/ml，平均粒径为100-500nm，pH为6.0-9.0。
本发明还包括，本发明的注射剂的制备方法，包括以下步骤
①在处方量的精制注射用油中加入乳化剂，加热搅拌使乳化剂溶解，加入处方量的灵芝孢子油，加热，搅拌至灵芝孢子油混溶，加入抗氧化剂，搅拌，得油相；向稍少于处方量的注射用水中加入处方量等渗调节剂，搅拌混匀，加热，得水相；②油相、水相加热混合，搅拌乳化或剪切乳化2-300分钟，得初乳；③将初乳进一步乳化，调pH，注射用水定量，分装，充氮，消毒，得灵芝孢子油静脉乳注射液。
优选的是①在处方量的精制注射用油中加入乳化剂，加热至40-90℃，搅拌使乳化剂溶解，加入处方量的灵芝孢子油，加热至40-90℃，搅拌至灵芝孢子油混溶，加入生育酚，搅拌，得油相；②向稍少于处方量的注射用水中加入处方量甘油，搅拌混匀，加热至40-90℃，得水相；油相、水相在40-90℃混合，搅拌乳化或剪切乳化2-100分钟，得初乳；③将初乳采用微射流高压均质机均化乳化或机械搅拌乳化或超声乳化或胶体磨乳化方法进一步乳化，调pH为4.5-9.5，注射用水定量，分装，充氮，消毒，得灵芝孢子油静脉乳注射液。
更优选的是①在处方量的精制注射用油中加入乳化剂，加热至50-80℃，搅拌使乳化剂溶解，加入处方量的灵芝孢子油，加热至50-80℃，搅拌至灵芝孢子油混溶，加入生育酚，搅拌，得油相；向少于处方量的注射用水中加入处方量甘油，搅拌混匀，加热至50-80℃，得水相；②油相、水相在50-80℃混合，500-10000转/分钟搅拌乳化或剪切乳化2-100分钟，得初乳；③将初乳采用微射流高压均质机均化乳化，调pH为6.0-9.0，注射用水定量，分装，充氮，消毒，得灵芝孢子油静脉乳注射液。
步骤③中选用微射流高压均质机均化乳化时压力为500-25000psi。
步骤③中的消毒是指包括但不限于流通蒸汽、高压蒸汽消毒、过滤除菌等方法，优选步骤③中的消毒为旋转高压蒸汽消毒，消毒温度为100-121℃，消毒时间为5-120分钟。
本发明方法也可将乳化剂溶解在水相中，即步骤①为在处方量的精制注射用油中加入处方量的灵芝孢子油，加热，搅拌至灵芝孢子油混溶，加入抗氧化剂，搅拌，得油相；向稍少于处方量的注射用水中加入乳化剂和处方量等渗调节剂，搅拌混匀，加热，得水相。
本发明优选的注射用油选自大豆油、红花籽油、玉米油中的一种或几种；更优选的注射用油为大豆油或玉米油。优选的乳化剂选自大豆磷脂、蛋黄磷脂、甘油单油酸酯中的一种或几种；更优选的乳化剂为大豆磷脂或蛋黄磷脂。优选的渗透压调节剂选自甘油、木糖醇、葡萄糖、氯化钠中的一种或几种；更优选的渗透压调节剂为甘油或氯化钠；所述的渗透压调节剂用量根据调节的需要而定，调节到与体液等渗的剂量为最佳。优选的抗氧化剂选自生育酚或乙二胺四乙酸二钠中的一种或者两种混合；最佳的抗氧化剂为生育酚。
本发明的灵芝孢子油静脉乳注射液配方中还可加入pH调节剂。pH调节剂选自但不限于氢氧化钠溶液、盐酸、醋酸及其盐、枸橼酸及其盐的一种或几种；优选的pH调节剂选自氢氧化钠溶液或盐酸；更优选的pH调节剂选自摩尔浓度为0.001-5.0M的氢氧化钠溶液或盐酸。
本发明采用注射用油、乳化剂等药用辅料，采用亚微乳制备技术，制备成灵芝孢子油静脉乳注射液。本发明的灵芝孢子油静脉乳注射液为白色或类白色乳状液体，有时有乳光，载药量为0.1-200mg/ml，平均粒径为100-500nm，pH为6.0-9.0，其它各项均符合注射乳剂要求。
灵芝孢子油静脉乳注射液一方面改变了给药途径提高了药物生物利用度，提高治疗效果，另一方面静脉注射乳剂具有靶向性，可降低药物毒副作用，提高疗效，同时由于乳剂的包裹也减小了灵芝孢子油本身的刺激性，极大地减少了病人注射时的疼痛，使病人容易接受，可提高病人用药的顺应性。采用亚微乳制备技术该乳剂制备工艺方法简单易行，可适用于大量制备和工业化生产。
具体实施例方式
下面通过实施例对本发明作进一步说明，但不构成对本发明的限制。
实施例1制备灵芝孢子油静脉乳注射液1000ml称取灵芝孢子油100克，水浴加热至75℃，加入注射用大豆磷脂12克，搅拌使溶解，加生育酚0.05克，搅拌混匀，得油相；量取注射用水860毫升，加入甘油22.5克，搅拌使溶解，加热至75℃得水相。将油相和水相在75℃温度下混合，用剪切乳化器乳化5分钟(转速1600转/分)，得初乳，将初乳用微射流高压均质机均化(压力5000psi)三次，用氢氧化钠溶液或盐酸溶液调节其pH为8.5，注射用水定量，分装，充氮，115℃灭菌30分钟，得灵芝孢子油静脉乳注射液。该乳剂平均粒径325.8nm，pH为7.70，灵芝孢子油含量9.9％，其它各项指标符合静脉乳要求。
实施例2制备灵芝孢子油静脉乳注射液1000ml
称取注射用玉米油300克，水浴加热至80℃，加入灵芝孢子油40克，搅拌至溶解，加生育酚0.2克，搅拌混匀，得油相；量取注射用水680毫升，加入注射用泊洛沙姆(F68)30克和注射用大豆磷脂12克，搅拌使溶解，加入甘油2.0克，搅拌使溶解，加热至80℃得水相。将油相和水相在80℃温度下混合，用剪切乳化器乳化5分钟(转速8000转/分)，得初乳，将初乳用微射流高压均质机均化(压力18000psi)三次，用氢氧化钠溶液或盐酸溶液调节其pH为9.0，注射用水定量，分装，充氮，0.22μm微孔虑膜除菌，得灵芝孢子油静脉乳注射液。该乳剂平均粒径145.5nm，pH为7.9，灵芝孢子油含量4.1％，其它各项指标符合静脉乳要求。
实施例3制备灵芝孢子油静脉乳注射液1000ml称取注射用辛癸酸甘油酯200克，水浴加热至75℃，加入注射用大豆磷脂12克，搅拌使溶解，加入灵芝孢子油0.1克，搅拌至溶解，加生育酚0.05克，搅拌混匀，得油相。量取注射用水860毫升，加入甘油22.5克，搅拌使溶解，加热至75℃得水相；将油相和水相在75℃温度下混合，用剪切乳化器乳化5分钟(转速2600转/分)，得初乳，将初乳用微射流高压均质机均化(压力5000psi)三次，用氢氧化钠溶液或盐酸溶液调节其pH为8.5，注射用水定量，分装，充氮，115℃灭菌30分钟，得灵芝孢子油静脉乳注射液。该乳剂平均粒径349.5nm，pH为7.30，灵芝孢子油含量0.0097％，其它各项指标符合静脉乳要求。
实施例4制备灵芝孢子油静脉乳注射液1000ml称取注射用大豆油300克，水浴加热至65℃，加入注射用蛋黄磷脂12克，搅拌使溶解，加入灵芝孢子油5克，搅拌至溶解，加生育酚0.1克，搅拌混匀，得油相；量取注射用水700毫升，加入甘油17.6克，搅拌使溶解，加热至65℃得水相。将油相和水相在65℃温度下混合，用剪切乳化器乳化5分钟(转速3000转/分)，得初乳，将初乳用高压微射流均质机均化(压力3000psi)三次，用氢氧化钠溶液或盐酸溶液调节其pH为8.5，注射用水定量，分装，充氮，115℃灭菌30分钟，得灵芝孢子油静脉乳注射液。该乳剂平均粒径416.1nm，pH为7.77，灵芝孢子油含量0.49％，其它各项指标符合静脉乳要求。
实施例5制备灵芝孢子油静脉乳注射液1000ml称取注射用辛癸酸甘油酯100克和大豆油50克，混合，水浴加热至75℃，加入注射用蛋黄磷脂15克，搅拌使溶解，加入灵芝孢子油10克，搅拌至溶解，加生育酚1克，搅拌混匀，得油相；量取注射用水870毫升，加入甘油22.5克，搅拌使溶解，加热至75℃得水相。将油相和水相在75℃温度下混合，用剪切乳化器乳化5分钟(转速4500转/分)，得初乳，将初乳用微射流高压均质机均化(压力10000psi)三次，用氢氧化钠溶液或盐酸溶液调节其pH为8.5，注射用水定量，分装，充氮，115℃灭菌30分钟，得灵芝孢子油静脉乳注射液1000ml。该乳剂平均粒径220nm，pH为8.30，灵芝孢子油含量1.01％，其它各项指标符合静脉乳要求。
实施例6制备灵芝孢子油静脉乳注射液1000ml称取注射用红花籽油100克，水浴加热至80℃，加入注射用泊洛沙姆(F68)20克和注射用大豆磷脂12克，搅拌使溶解，加入灵芝孢子油100克，搅拌至溶解，加生育酚0.2克，搅拌混匀，得油相；量取注射用水750毫升，加入甘油2.25克，搅拌使溶解，加热至80℃得水相。将油相和水相在80℃温度下混合，用剪切乳化器乳化5分钟(转速6000转/分)，得初乳，将初乳用微射流高压均质机均化(压力20000psi)三次，用氢氧化钠溶液或盐酸溶液调节其pH为9.0，注射用水定量，分装，充氮，121℃灭菌20分钟，得灵芝孢子油静脉乳注射液。该乳剂平均粒径168.9nm，pH为8.6，灵芝孢子油含量9.8％，其它各项指标符合静脉乳要求。
实施例7制备灵芝孢子油静脉乳注射液1000ml称取灵芝孢子油150克，水浴加热至40℃，加入注射用大豆磷脂10克、蛋黄磷脂8克，搅拌使溶解，加生育酚0.05克，搅拌混匀，得油相；量取注射用水900毫升，加入甘油25.5克，搅拌使溶解，加热至40℃得水相。将油相和水相在40℃温度下混合，用剪切乳化器乳化5分钟(转速10000转/分)，得初乳，将初乳用微射流高压均质机均化(压力6000psi)三次，用氢氧化钠溶液或盐酸溶液调节其pH为8.0，注射用水定量，分装，充氮，120℃灭菌5分钟，得灵芝孢子油静脉乳注射液。
实施例8制备灵芝孢子油静脉乳注射液1000ml称取注射用玉米油200克、大豆油100克，水浴加热至90℃，加入灵芝孢子油40克，搅拌至溶解，加二胺四乙酸二钠0.2克，搅拌混匀，得油相；量取注射用水680毫升，加入注射用甘油单油酸酯30克和注射用大豆磷脂12克，搅拌使溶解，加入氯化钠2.0克，搅拌使溶解，加热至90℃得水相；将油相和水相在90℃温度下混合，用剪切乳化器乳化5分钟(转速9000转/分)，得初乳，将初乳用微射流高压均质机均化(压力25000psi)三次，用氢氧化钠溶液或盐酸溶液调节其pH为9.0，注射用水定量，分装，充氮，0.22μm微孔虑膜除菌，得灵芝孢子油静脉乳注射液。该乳剂平均粒径144.5nm，pH为7.9，灵芝孢子油含量4.1％，其它各项指标符合静脉乳要求。
实施例9制备灵芝孢子油静脉乳注射液1000ml称取注射用红花籽油200克，水浴加热至50℃，加入注射用蛋黄磷脂12克，搅拌使溶解，加入灵芝孢子油0.2克，搅拌至溶解，加巯基乙酸0.05克，搅拌混匀，得油相；量取注射用水860毫升，加入甘油22.5克，搅拌使溶解，加热至50℃得水相；将油相和水相在75℃温度下混合，用剪切乳化器乳化5分钟(转速4500转/分)，得初乳，将初乳用微射流高压均质机均化(压力15000psi)三次，用氢氧化钠溶液或盐酸溶液调节其pH为8.5，注射用水定量，分装，充氮，100℃灭菌120分钟，得灵芝孢子油静脉乳注射液。该乳剂平均粒径349.5nm，pH为7.30，灵芝孢子油含量0.0184％，其它各项指标符合静脉乳要求。
实施例10制备灵芝孢子油静脉乳注射液1000ml称取注射用大豆油150克、红花籽油150克，水浴加热至60℃，加入注射用蛋泊洛沙姆188(F68)12克，搅拌使溶解，加入灵芝孢子油2.5克，搅拌至溶解，加生育酚0.1克，搅拌混匀，得油相；量取注射用水700毫升，加入甘油17.6克，搅拌使溶解，加热至65℃得水相。将油相和水相在60℃温度下混合，用剪切乳化器乳化5分钟(转速500转/分)，得初乳，将初乳用高压微射流均质机均化(压力4000psi)三次，用氢氧化钠溶液或盐酸溶液调节其pH为8.5，注射用水定量，分装，充氮，121℃灭菌30分钟，得灵芝孢子油静脉乳注射液。该乳剂平均粒径416.1nm，pH为7.77，灵芝孢子油含量0.245％，其它各项指标符合静脉乳要求。
权利要求
1.一种灵芝孢子油静脉乳注射剂，其特征在于，由灵芝孢子油和制成静脉乳剂的药物可接受的载体制成。
2.权利要求1的注射剂，其特征在于，所述制成静脉乳剂的药物可接受的载体选自注射用溶剂、注射用油、乳化剂、等渗调节剂、抗氧化剂、pH调节剂。
3.权利要求2的注射剂，其特征在于，所述制成静脉乳剂的药物可接受的载体为，注射用溶剂、注射用油、乳化剂、等渗调节剂、抗氧化剂和pH调节剂，各组分的重量/体积百分比(w/v)为灵芝孢子油0.01-50％注射用油 0-40％乳化剂0.1-20％等渗调节剂0.01-15％抗氧化剂 0.005-0.50％其余为注射用溶剂和pH调节剂。
4.如权利要求3的注射剂，其特征在于，其中所述的注射用油选自辛癸酸甘油酯、大豆油、红花籽油、玉米油中的一种或几种；所述乳化剂选自注射用大豆磷脂、蛋黄磷脂、泊洛沙姆188(F68)、甘油单油酸酯中的一种或几种；所述的渗透压调节剂选自甘油、山梨醇、木糖醇、葡萄糖、氯化钠中的一种或几种；所述的抗氧化剂选自乙二胺四乙酸二钠、巯基乙酸、生育酚中的一种；所述的pH调节剂选自氢氧化钠溶液、盐酸、醋酸及其盐中的一种，所述注射用溶剂为水。
5.如权利要求4所述的注射剂，其特征在于，所述的pH调节剂为氢氧化钠溶液，浓度为0.001-5M或盐酸溶液，浓度为0.001-5M。
6.如权利要求4所述的注射剂，其特征在于，乳化剂溶解在水相中。
7.如权利要求4所述的注射剂，其特征在于，它为白色或类白色乳状液体，有时有乳光，载药量为0.1-200mg/ml，平均粒径为100-500nm，pH为6.0-9.0。
8.如权利要求1所述的注射剂的制备方法，包括以下步骤①在处方量的精制注射用油中加入乳化剂，加热搅拌使乳化剂溶解，加入处方量的灵芝孢子油，加热，搅拌至灵芝孢子油混溶，加入抗氧化剂，搅拌，得油相；向稍少于处方量的注射用水中加入处方量等渗调节剂，搅拌混匀，加热，得水相；②油相、水相加热混合，搅拌乳化或剪切乳化2-300分钟，得初乳；③将初乳进一步乳化，调pH，注射用水定量，分装，充氮，消毒，得灵芝孢子油静脉乳注射液。
9.如权利要求8所述的制备方法，包括以下步骤①在处方量的精制注射用油中加入乳化剂，加热至40-90℃，搅拌使乳化剂溶解，加入处方量的灵芝孢子油，加热至40-90℃，搅拌至灵芝孢子油混溶，加入生育酚，搅拌，得油相；②向稍少于处方量的注射用水中加入处方量甘油，搅拌混匀，加热至40-90℃，得水相；油相、水相在40-90℃混合，搅拌乳化或剪切乳化2-100分钟，得初乳；③将初乳采用微射流高压均质机均化乳化或机械搅拌乳化或超声乳化或胶体磨乳化方法进一步乳化，调pH为4.5-9.5，注射用水定量，分装，充氮，消毒，得灵芝孢子油静脉乳注射液。
10.如权利要求8所述的制备方法，包括以下步骤①在处方量的精制注射用油中加入乳化剂，加热至50-80℃，搅拌使乳化剂溶解，加入处方量的灵芝孢子油，加热至50-80℃，搅拌至灵芝孢子油混溶，加入生育酚，搅拌，得油相；向少于处方量的注射用水中加入处方量甘油，搅拌混匀，加热至50-80℃，得水相；②油相、水相在50-80℃混合，500-10000转/分钟搅拌乳化或剪切乳化2-100分钟，得初乳；③将初乳采用微射流高压均质机均化乳化，调pH为6.0-9.0，注射用水定量，分装，充氮，消毒，得灵芝孢子油静脉乳注射液。
全文摘要
本发明涉及灵芝孢子油静脉乳注射液及其制备方法，由灵芝孢子油和制成静脉乳剂的药物可接受的载体制成，所述制成静脉乳剂的药物可接受的载体选自注射用溶剂、注射用油、乳化剂、等渗调节剂、抗氧化剂、pH调节剂，各组分的重量/体积百分比(w/v)是灵芝孢子油0.01－50％、注射用油0－40％、乳化剂0.1－20％、等渗调节剂0.01－15％、抗氧化剂0.005－0.50％，其余为注射用溶剂和pH调节剂。
文档编号A61P35/00GK1857334SQ20051006833
公开日2006年11月8日 申请日期2005年5月8日 优先权日2005年5月8日
发明者陈建明, 叶正良, 张广明, 王国成, 赵颖 申请人:天津天士力制药股份有限公司