用趋化因子的组合活化祖细胞/干细胞的制作方法

专利名称：用趋化因子的组合活化祖细胞/干细胞的制作方法
技术领域：
本发明属于治疗和药物化学领域。更具体的，本发明涉及采用组合疗法活化(mobilize)祖细胞/干细胞的方法。
背景技术：
血细胞在维持动物，包括人类健康和生存方面发挥重要作用。白血细胞包括噬中性粒细胞、巨噬细胞、嗜曙红细胞和嗜碱细胞/肥大细胞以及免疫系统的B和T细胞。白血细胞通过造血系统经集落刺激因子(CSF)和各种细胞因子对造血组织中干细胞和祖细胞的作用而不断被更新。编码这些生长因子的核苷酸序列已经被克隆和测序。其中了解得最清楚的可能是粒细胞集落刺激因子(G-CSF)，它被证明可通过刺激白血细胞和祖细胞产生(外周血干细胞活化)而抵消化学治疗的负面作用。关于这种因子造血作用的讨论可在，例如，美国专利5,582,823中找到，在此将其并入以供参考。
已报道其它一些因子也可升高人类和动物对象的白血细胞和祖细胞。这些试剂包括粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-3(IL-3)、白细胞介素-8(IL-8)、PIXY-321(GM-CSF/IL-3融合蛋白)、巨噬细胞炎性蛋白、干细胞因子(SCF)、血小板生成素、flt-3、髓细胞生成蛋白(myelopoietin)、抗-VLA4抗体和生长相关癌基因(GRO)，它们可单独使用或联合使用(Dale，D.等，Am.J.ofHematol.(1998)577-15；Rosenfeld，C.等，Bone Marrow Transplantation(1997)17179-183；Pruijt，J.等，Cur.Op.in Hematol.(1999)6152-158；Broxmeyer，H.等，Exp.Hematol.(1995)23335-340；Broxmeyer等，Blood Cell，Molecules and Diseases(1998)2414-30；Glaspy，J.等，Cancer Chemother.Pharmacol.(1996)38(增刊)S53-S57；Vadhan-Raj，S.等，Ann.Intern.Med.(1997)126673-81；King，A.等，Blood(2001)971534-1542；Glaspy，J.等，Blood(1997)902939-2951)。
此外，King等(King，A.等，Blood(2001)971534-1542)已经证实，人趋化因子GROβ的N-末端4-氨基酸截短重组形式(也称为SB-251353或Garnocestim)在一起给予SB-251353和G-CSF之后可活化祖细胞，在研究期间中性白细胞和血小板被活化。WO 94/29341；WO 97/15594；WO 97/15595；WO 99/26645；WO 02/02132；美国专利6080398；美国专利6399053；和美国专利6447766也讨论了诸如SB-251353、GROα、GROβ和GROγ之类的趋化因子，所有这些专利通过引用纳入本文。
SB-251353是一种碱性肝素结合蛋白，其分子量约为7500Da，并且是一种特异性CXCR2受体激动剂(King，A.等，J.Immunol.(2000)1643774-3782，Hepburn，T.等，Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics，(2001)298886-893)。除GROβ外，通过CXCR2受体发挥作用的其它趋化因子包括GROα、GROγ、GCP-2(粒细胞趋化蛋白(chemo-attractant protein)2)、IL-8、NAP-2(中性白细胞激活肽2)、ENA-78(上皮细胞衍生的中性白细胞激活蛋白78)和MGSA。
趋化因子受体CXCR4及其天然配体基质细胞衍生因子-1(SDF-1)在血细胞的发育和成熟过程中似乎非常重要，其中，成熟的血细胞衍生自存在于包括骨髓在内的特定造血组织中的造血前体细胞(祖细胞)细胞和干细胞(为回顾该内容可参见Maekawa，T.等，Internal Med.(2000)3990-100；Nagasawa，T.等，Int.J.Hematol.(2000)72408-411)。报告证实，CXCR4或SDF-1敲除小鼠显示出造血缺陷(Ma，Q.等，Proc.Natl.Acad.Sci USA(1998)959448-9453；Tachibana，K.等，Nature(1998)393591-594；Zou，Y-R.等，Nature(1998)393595-599)。还已知CD34+祖细胞表达CXCR4并需要骨髓基质细胞产生的SDF-1以进行趋化(chemoattraction)和移植(Peled，A.等，Science(1999)283845-848)，SDF-1在体外对CD34+细胞(Aiuti，A.等，J.Exp.Med.(1997)185111-120；Viardot，A等，Ann.Hematol.(1998)77194-197)和祖细胞/干细胞(Jo，D-Y.等，J.Clin.Invest.(2000)105101-111)都有趋化作用。SDF-1对于其它一些更加定型的祖细胞和包括T-淋巴细胞和单核细胞(Bleul，C等，J.Exp.Med.(1996)1841101-1109)、原B淋巴细胞和前B淋巴细胞(Fedyk，E.R.等，J.Leukoc.Biol.(1999)66667-673；Ma，Q.等，Immunity(1999)10463-471)和巨核细胞(Hodohara，K.等，Blood(2000)95769-775；Riviere，C等，Blood(1999)951511-1523；Majka，M.等，Blood(2000)964142-4151；Gear，A.等，Blood(2001)97937-945；Abi-Younes，S.等，Ore.Res.(2000)86131-138)在内的成熟血细胞也是一种重要的趋化物，它通过CXCR4受体发生信号传导。
因此总之，SDF-1似乎能够控制带有CXCR4受体的细胞的定位和分化，无论这些细胞是干细胞(即CD34+细胞)或祖细胞(可以响应特定刺激形成特定集落类型；可以是CD34+或CD34-)或是更加分化的细胞。
最近，相当多的注意力集中于用于自体干细胞移植的外周血祖细胞群中活化的CD34+细胞的数目。干细胞移植可以是同种异体的(此时细胞移植自健康供体，通常是同胞)或是自体的(此时细胞收集自患者并在化疗后重新输入)。在收集干细胞的典型过程中，患者或供体连续接受4或5天G-CSF日剂量以刺激干细胞产生，然后进行血浆分离置换法(apheresis)直到达到细胞的目标水平。在血浆分离置换法期间也连续使用G-CSF。通常显著数量的患者需要多次血浆分离置换过程以达到目标细胞水平。CD34+群体被认为是主要负责改善化学治疗后恢复时间的成分，这种细胞更可能负责长期移植和造血作用的恢复(Croop，J.M.等，Bone Marrow Transplantation(2000)261271-1279)。CD34+细胞再移植(re-engraft)的机制可能是由于SDF-1对CXCR4表达细胞的趋化作用(Voermans，C，Blood，2001，97，799-804；Ponomaryov，T.等，J.Clin.Invest.(2000)1061331-1339)。最近，成人造血干细胞显示能够恢复小鼠受损的心脏组织(Jackson，K.等，J.Clin.Invest.(2001)1071395-1402；Kocher，A.等，Nature Med.(2001)7430-436)。
因此，可假定CXCR4受体对控制细胞定位和分化是非常重要的。化合物AMD3100，即1，1[1，4-亚苯基-双(亚甲基)]-双-1，4，8，11-四氮杂环十四烷，是一种已知的本身即可活化祖细胞的CXCR4拮抗剂(参见，例如，Hubel，K.等，Supportive CancerTherapy(2004)1165-172，引用了De Clercq，E.等，Nat.Rev.Drug Discov.(2003)2581-587。此外，PCT公开WO 00/45814公开了包括AMD3100在内的各种可以升高白细胞计数的环状多胺化合物。PCT公开WO 03/011277还显示，包括AMD3100在内的这种化合物可以活化祖细胞/干细胞；还提到了AMD3100与各种其它因子的组合，所述其它因子包括GM-CSF、IL-1、IL-3、IL-8、PIXY-321、巨噬细胞炎性蛋白、皮肤细胞因子、血小板生成素、生长相关癌基因或化学疗法，或者其它活性成分(通常诸如抗生素、维生素、草本提取物、抗炎药、葡萄糖、解热药、镇痛药)。
已经发现CXCR4拮抗剂与GROβ(包括GROβ的修饰形式)的特定组合对于活化祖细胞特别有效。
应用上述文献不是要承认上述内容为相关的现有技术。所有关于这些文件的数据的声明或关于内容的表述是基于申请人可获得的信息，且不对这些文件的数据或内容的正确性负责。此外，本申请提到的所有文献在此全文并入以供参考。

发明内容
本发明涉及治疗动物对象，尤其是兽类和人类对象，以增加祖细胞和/或干细胞数目的方法。所述祖细胞和/或干细胞可被收获并用于细胞移植。本发明的方法采用CXCR4受体抑制剂(如下文所述的某些多胺)和至少一种形式的GROβ(即GROβ本身或其修饰形式)的组合。该方法被用于干细胞移植、组织修复和涉及需要体内刺激造血作用的情况。
文中，术语“一个”、“一种”和“这种”包括单数和复数形式，上下文有明确说明除外。因此，例如，当提及一种CXCR4拮抗剂时包括一种或多种CXCR4拮抗剂。
因此，本发明一方面涉及升高对象中的祖细胞和/或干细胞的方法，该方法包括给予所述对象一定量抑制CXCR4受体的化合物，如下述式(1)的化合物，与GROβ及其修饰形式中的一种的组合。在一个实施方案中，骨髓细胞被活化以进行心肌修复。其它实施方案包括离体(ex vivo)或者体外活化细胞，随后再移植入自体或同种异体对象。
因此，本发明的方法还包括用CXCR4抑制剂和GROβ或其修饰形式的组合离体处理细胞群，并将处理过的群体引入相容的对象以升高外周血中干细胞和/或祖细胞的数量。也可升高骨髓中白细胞的数量。
另一方面，本发明涉及含有CXCR4拮抗剂和GROβ蛋白的组合产品，其中，所述组合能够升高外周血或骨髓中的祖细胞和/或干细胞数目。所述组合产品可以是混合物、溶液或药物组合物。另一方面，本发明涉及含有CXCR4抑制剂和GROβ趋化因子的药物组合物以用于有效升高动物对象或者离体培养物中的祖细胞和/或干细胞。
此外，本发明提供了含有CXCR4拮抗剂和GROβ蛋白的组合产品或其药物组合物在升高外周血或骨髓中的祖细胞和/或干细胞数目中的应用。本发明还提供了含有CXCR4拮抗剂和GROβ蛋白的组合产品或其药物组合物在制造用于升高外周血或骨髓中的祖细胞和/或干细胞数目的药物中的应用。此外，本发明涉及用于升高外周血或骨髓中的祖细胞和/或干细胞数目的含有CXCR4拮抗剂和GROβ蛋白的化合物或药物。
惊奇的是，CXCR4拮抗剂，如式(1)的化合物，与趋化因子GROβ，包括其修饰形式，的组合能够在较短时间—少于1小时内有效地显著活化祖细胞和干细胞，而单独使用任何一种试剂则需要数小时或数天。
用于本发明方法的CXCR4拮抗剂的例子有式(1)的化合物Z-连接基-Z1(1)其中，Z是含有9-32个环成员的任选取代的环状多胺，其中有2-8个是氮原子，所述氮原子被至少2个碳原子相互分隔，且其中所述杂环可任意含有氮原子以外的其它杂原子和/或可以和其它的环系统稠合；或Z具有式 其中，A包含含有至少一个N的单环或双环稠环系统，且B是H或有1-20个原子的有机部分；Z’可以按上面Z定义的形式，或者可具有式-N(R)-(CR2)n-X其中，各R独立为H或直链、支链或环状烷基(1-6C)，n是1或2，和X是芳环，包括杂芳环，或是硫醇；或其中，Z’可以是含氮杂环或NR2，其中各R如上面的定义；“连接基”代表键、亚烷基(1-6C)、或者可包括芳基、稠芳基、包含在亚烷基链中的氧原子，或者可包含酮基或氮原子或硫原子。
CXCR4拮抗剂优选是具有上述式(1)的化合物。本发明还涉及升高对象中祖细胞和/或干细胞的方法，该方法包括给予所述对象一定量的至少一种抑制CXCR4受体的化合物，如下述式(1A)-(1F)、(2A)-(2B)、(3)、(3A)-(3C)、(4)、(4A)-(4C)、(5)、(6)、(6A)-(6D)、(7)和(8)的化合物，与GROβ及其修饰形式中至少一种的组合。
本发明的实施方式本发明涉及CXCR4拮抗剂和GROβ蛋白的特定组合，以活化祖细胞和/或干细胞或者增强祖细胞和/或干细胞的增殖。该组合能够在相比单独使用任一组分和相比之前披露的组合短得多的时间内实现这种刺激。干细胞和/或祖细胞的活化可用于下文进一步描述的多种情况。
该组合可直接给予对象或者可用于处理离体培养的细胞，然后可将处理的细胞给予对象，所述对象通常是得到该细胞的对象(自体移植)或是密切相关的对象(同种异体移植)。该组合的各必需成分可作为单一类别成员提供或者可作为类别各成员的混合物或其它组合提供。该组合的各组分(实际上是代表单一类别的亚组合的各成员)可同时通过相同途径单独给予，或者同时通过不同途径单独给予，或者在不同时刻通过相同或不同途径给予该组合中的任何其它组分。因此，例如，如果使用两种不同CXCR4拮抗剂，则可同时给予这两种拮抗剂(但不一定要这样)；可静脉内给予这两种拮抗剂(但不一定要这样)。类似地，如果使用两种或多种GROβ蛋白，则可对这些蛋白质采用刚才描述过的各种给药类型。在给予CXCR4拮抗剂类的成员和GROβ蛋白类的成员时也可这么做。GROβ蛋白和CXCR4拮抗剂的组合也可按照这种可变方法单独或在同一组合物中给予。
“GROβ蛋白”或“GROβ趋化因子”类别包括GROβ自身以及GROβ的修饰形式。如文中将进一步描述的，这些修饰形式可以是截短的、多聚的(multimerized)、含有氨基酸取代、删除或插入、或者可含有这些的组合。
CXCR4拮抗剂优选是式(1)的化合物。其它优选的用于本发明方法的CXCR4拮抗剂是下述式(1A)-(1F)、(2A)-(2B)、(3)、(3A)-(3C)、(4)、(4A)-(4C)、(5)、(6)、(6A)-(6D)、(7)and(8)的化合物。
式(1)的化合物通过抑制CXCR4抑制HIV复制，CXCR4是T-热带HIV菌株融合和进入必需的共同受体，该化合物还抑制天然配体趋化因子SDF-1诱导的结合和信号传导。由于不希望局限于任何理论，式(1)的化合物抑制SDF-1与CXCR4结合从而导致干细胞和/或祖细胞增加。血液中的干细胞和/或祖细胞增加有助于缓解对骨髓造成不良影响的方案，如导致白细胞减少的方案的影响。这些都是化疗和放疗的已知副作用。式(1)的化合物还能提高骨髓移植的成功率、加快伤口愈合和烧伤治疗，并有助于恢复受损的器官组织。它们还能抵抗在白血病中普遍的细菌感染。如WO03/011277所述，式(1)的化合物可与其它活化因子一起或者单独用于活化CD34+细胞并通过血浆分离置换法收获CD34+细胞。收获的细胞被用于需要干细胞移植的治疗。
文中，术语“祖细胞”是指可响应某种刺激形成分化的造血细胞或骨髓细胞的细胞。可根据样品中的细胞形成各种类型集落形成单位的能力来判断祖细胞的存在，例如包括CFU-GM(粒细胞-巨噬细胞集落形成单位)；CFU-GEMM(多潜能集落形成单位)；BFU-E(红细胞爆裂型集落形成单位)；HPP-CFC(高增殖性潜在集落形成细胞)；或可在培养基中用已知方法获得的其它类型的分化集落。
文中，“干”细胞是祖细胞分化较少的形式。通常，这种细胞通常是CD34阳性的。然而，一些干细胞不含有这种标记。可用荧光激活细胞分选仪(FACS)测定这些CD34+细胞，因此可用这种技术评定它们在样品中的存在情况。
通常，CD34+细胞仅以低水平在血液中存在，但大量存在于骨髓。而其它类型的细胞，如内皮细胞和肥大细胞也可能表示这种标记，CD34被认为是干细胞存在的指标。
在一些式(1)的化合物中，Z和Z’是含有9-24个碳的环状多胺部分，其中包括3-5个氮原子，如U.S.5021409；6001826和5583131所述，所述文献通过引用纳入本文。特别优选的是1，5，9，13-四氮杂环十六烷；1，5，8，11，14-五氮杂环十六烷；1，4，8，11-四氮杂环十四烷；1，5，9-三氮杂环十二烷；1，4，7，10-四氮杂环十二烷等，包括与其它芳环或杂芳环稠合的环状多胺和/或在环中含有氮原子外的杂原子的环状多胺。含有稠合的其它环状系统或一个或多个其它杂原子的环状多胺的例子描述在美国专利5698546和WO 01/44229，所述文献通过引用纳入本文。同样优选的有3，7，11，17-四氮杂二环(13.3.1)十七烷-1(17)，13，15-三烯；4，7，10，17-四氮杂二环(13.3.1)十七烷-1(17)，13，15-三烯；1，4，7，10-四氮杂环十四烷；1，4，7-三氮杂环十四烷；和4，7，10-三氮杂二环(13.3.1)十七烷-1(17)，13，15-三烯。
当Z’不是Z中定义的环状多胺时，其优选的实施方案如美国专利5817807；6756391；6506770；和6667320所述，也通过引用纳入本文。
Z具有下式的形式揭示于U.S.6734191；6750348；以及2001年9月17日提交、现在已被授权的申请09/957,682；2001年9月17日提交、现在已被授权的申请09/957,654，所有文献通过引用纳入本文 其中A包括含有至少一个N的单环或双环的稠环系统，B是H或有1-20个原子的有机部分。
连接基部分的优选形式包括以下这些，其中连接基是键，或其中连接基是亚烷基或包括侧翼连接有亚烷基，优选亚甲基部分的芳香部分。优选的连接基团包括侧翼连接有亚甲基的1，3-亚苯基、2，6-吡啶、3，5-吡啶、2，5-噻吩、4，4’-(2，2’-联嘧啶)、2，9-(1，10-菲咯啉)等。特别优选的连接基是1，4-亚苯基-双-(亚甲基)。
一方面，用于本发明方法的CXCR4拮抗剂的例子有具有式(1A)的化合物V-CR2-Ar1-CR2NR-(CR2)x-Ar2(1A)其中，V是9-24元取代的杂环，其含有2-4个任选地被取代的、彼此被2个或多个任选地被取代的碳原子隔开的胺氮原子，且该杂环可任选地包括稠合芳环或杂芳环；且其中(a)所述的杂环含有至少一个O或S，且所述的O或S与任何相邻的杂原子距离至少2个碳原子，且所述的S任选地被氧化或(b)所述的环中至少一个碳原子被吸电子取代基取代，或(c)(a)和(b)二者；且其中各R分别是H或含有1-6C的直链、支链或环烷基；x是0-4；Ar1是未取代的或取代的芳族或杂芳族部分；和Ar2是未取代的或取代的芳基或杂环基。
在上述式(1A)中，V含有2-4个N，宜为3-4个N，如果没有其它杂原子。V的优选环大小为9-18元，更佳地为12-16元。V还可包括稠合的芳环或杂芳环，宜为1，2或1，3或1，4亚苯基或2，6或2，5或2，4或2，3亚吡啶(pyridinylene)。稠合环可以是如2，5或2，6亚嘧啶基(pyrimidinylene)或2，4或2，3-亚吡咯基。
在上式I中，所需的存在于环V至少一个碳原子上的吸电子取代基可以是卤素、硝基、氰基、羧酸基、羧酸酯(含有1-6C醇)或由0-12C胺形成的酰胺、磺酸或亚磺酸、或磺酸或亚磺酸的酯或酰胺、CF3等。优选的吸电子取代基是＝O和卤素。卤素的例子包括氟、氯、溴、碘等，优选氟和氯。
在上述式(1A)中，Ar2是任选取代的杂环基团或芳基。芳基的例子包括但不限于苯、萘、二氢萘和四氢萘。杂环基的例子包括5-6元饱和、部分饱和、或芳族杂环，这些杂环含有1-4个选自氮、氧和硫的杂原子。杂环可以是吡啶、喹啉、异喹啉、咪唑、苯并咪唑、氮杂苯并咪唑、苯并三唑、呋喃、苯并呋喃、噻唑、苯并噻唑、唑、苯并唑、吡咯、吲哚、二氢吲哚、吲唑、吡咯烷、吡咯烷酮、吡咯啉、哌啶、哌嗪、四氢喹啉、四氢异喹啉、吡唑、噻吩、异唑、异噻唑、三唑、四唑、二唑、噻二唑、吗啉、硫代吗啉、吡唑烷、咪唑烷、咪唑啉、四氢吡喃、二氢吡喃、苯并吡喃、二烷、二噻烷、四氢呋喃、四氢噻吩、二氢呋喃、二氢噻吩等。含氮和硫的杂环氧化物也包括在本发明中。
Ar2上的任选取代基包括(1-6C)烷基、(1-6C)链烯基、(1-6C)炔基、卤素、硝基、氰基、羧酸、由1-6C醇形成的羧酸酯基、由0-12C胺形成的酰胺基、磺酸、亚磺酸、磺酸或亚磺酸的酯或酰胺、OR、SR、NR2、OCR、OOCR、NRCOR，其中所有R都是氢或直链或支链(1-6C)烷基、任选取代的芳基或杂环基、CF3等。优选的取代基包括烷基、OR、NR2和卤素。Ar2优选的例子包括苯基、吡啶基、嘧啶基和咪唑基。
在上述式(1A)中，Ar1是5-6元芳族体系，为二价的苯、吡啶、噻吩、嘧啶等。Ar1可以任选地被以下基团取代烷基、烯基、卤素、硝基、氰基、CF3、COOR、CONR2、OCR、OOCR、NRCOR、OR、NR2、SR(其中R是H或1-6C烷基)、磺酸基或磺酸、酯或酰胺等。Ar1的优选例子为亚苯基(尤其是1，3和1，4亚苯基)和亚吡啶基(尤其是2，6亚吡啶基和3，5亚吡啶基)。优选的取代基是烷基、OR、NR2和卤素。
另外，在式(1A)的化合物中，各R基团是氢或1-2C烷基，优选氢。偶合于氮的R基团是氢或1-6C烷基，优选直链1-3C烷基，更优选的是H或甲基。在一个实施例中，1、2、3、4、或5个R是甲基或乙基，其余的R基团是氢。
在一个实施方案中，CXCR4拮抗剂具有下式V-CH2-Ar1-CH2NR-CH2-Ar2其中，V是在式(1A)中定义的杂环，且其中(a)所述杂环被卤素或＝O取代的，或(b)所述杂环含有O或S；或(c)(a)和(b)二者，且其中，Ar1是未取代的1，3或1，4-亚苯基，R是H、甲基或乙基，Ar2是未取代的苯基或吡啶基。x的优选例为0-2和1-2。
杂环V可含有3个N，且杂环中有至少一个碳原子被至少一个氟取代基取代。R部分可独立为氢或甲基。(CR2)x基团的数目可以是0-4、0-2或1-2。Ar1部分可以是1，3或1，4-亚苯基。Ar2部分可以是苯基或吡啶基。杂环V可以是12-16元杂环，或者可含有O或S作为环原子。杂环V也可含有氧化的硫作为环原子。在一个实施例中，杂环V中有至少一个碳被＝O取代。
式(1A)的化合物以及合成这种化合物的方法描述于WO 01/44229，该文献通过引用纳入本文。式(1A)的化合物、其药学上可接受的盐或其金属络合物的例子包括但不限于N-[4-(11-氟-1，4，7-三氮杂环十四烷基)-1，4-亚苯基双(亚甲基)]-2-(氨基甲基)吡啶；N-[4-(11，11-二氟-1，4，7-三氮杂环十四烷基)-1，4-亚苯基双(亚甲基)]-2-(氨基甲基)吡啶；N-[4-(1，4，7-三氮杂环十四烷-2-酮基)-1，4-亚苯基双(亚甲基)]-2-(氨基甲基)吡啶；
N-[12-(5-氧杂-1，9-二氮杂环十四烷基)-1，4-亚苯基双(亚甲基)]-2-(氨基甲基)吡啶；N-[4-(11-氧杂-1，4，7-三氮杂环十四烷基)-1，4-亚苯基双(亚甲基)]-2-(氨基甲基)吡啶；N-[4-(11-硫杂-1，4，7-三氮杂环十四烷基)-1，4-亚苯基双(亚甲基)]-2-(氨基甲基)吡啶；N-[4-(11-硫氧(sulfoxo)-1，4，7-三氮杂环十四烷基)-1，4-亚苯基双(亚甲基)]-2-(氨基甲基)吡啶；N-[4-(11-硫氧(sulfono)-1，4，7-三氮杂环十四烷基)-1，4-亚苯基双(亚甲基)]-2-(氨基甲基)吡啶；或N-[4-(3-碳氧(carboxo)-1，4，7-三氮杂环十四烷基)-1，4-亚苯基双(亚甲基)]-2-(氨基甲基)吡啶。
另一方面，用于本发明方法的CXCR4化合物的例子为具有式(1B)的化合物V-CR1R2-Ar-CR3R4-N(R5)-(CR6R7)x-R8(1B)其中，V是任选取代的1，4，8，11-四氮杂环十四烷基、4，7，10，17-四氮杂二环[13.3.1]十七烷-1(17)，13，15-三烯基、1，4，7-三氮杂环十四烷基、4，7，10-三氮杂二环[13.3.1]十七烷-1(17)，13，15-三烯基、1，7-二氮杂环十四烷基或4，10-二氮杂二环[13.31.1]十七烷-1(17)，13，15-三烯基系统；R1-R7可以相同或不同，并独立选自氢或直链、支链或环状C1-6烷基；R8是吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、咪唑基、噻吩基、硫苯基、氨苄基、哌啶基、嘌呤、哌嗪基、苯基哌嗪基或硫醇；Ar是在一个或多个位置被烷基、芳基、氨基、烷氧基、羟基、卤素、羧基和/或酰胺基任选取代的亚苯基环；和x是1或2。
在上述式(1B)中，V部分可任选被羟基、烷氧基、硫醇、硫烷基、卤素、硝基、羧基、酰氨基、磺酸和/或磷酸酯取代。
式(1B)的化合物、其药学上可接受的盐或其金属络合物、以及合成这种化合物的方法描述于WO 00/02870，该文献通过引用纳入本文。具有式(1B)的化合物的例子包括但不限于N-[1，4，8，11-四氮杂环十四烷基-1，4-亚苯基双-(亚甲基)]-2-(氨基甲基)吡啶；N-[1，4，8，11-四氮杂环十四烷基-1，4-亚苯基双(亚甲基)]-N-甲基-2-(氨基甲基)吡啶；
N-[1，4，8，11-四氮杂环十四烷基-1，4-亚苯基双(亚甲基)]-4-(氨基甲基)吡啶；N-[1，4，8，11-四氮杂环十四烷基-1，4-亚苯基双(亚甲基)]-3-(氨基甲基)吡啶；N-[1，4，8，11-四氮杂环十四烷基-1，4-亚苯基双(亚甲基)]-(2-氨基甲基-5-甲基)吡嗪；N-[1，4，8，11-四氮杂环十四烷基-1，4-亚苯基双(亚甲基)]-2-(氨基乙基)吡啶；N-[1，4，8，11-四氮杂环十四烷基-1，4-亚苯基双(亚甲基)]-2-(氨基甲基)噻吩；N-[1，4，8，11-四氮杂环十四烷基-1，4-亚苯基双(亚甲基)]-2-(氨基甲基)硫醇；N-[1，4，8，11-四氮杂环十四烷基-1，4-亚苯基双(亚甲基)]-2-氨基苄胺；N-[1，4，8，11-四氮杂环十四烷基-1，4-亚苯基双(亚甲基)]-4-氨基苄胺；N-[1，4，8，11-四氮杂环十四烷基-1，4-亚苯基双(亚甲基)]-4-(氨基乙基)咪唑；N-[1，4，8，11-四氮杂环十四烷基-1，4-亚苯基双(亚甲基)]-苄胺；N-[4-(1，4，7-三氮杂环十四烷基)-1，4-亚苯基双(亚甲基)]-2-(氨基甲基)吡啶；N-[7-(4，7，10，17-四氮杂二环[13.3.1]十七烷-1(17)，13，15-三烯基)-1，4-亚苯基双(亚甲基)]-2-(氨基甲基)吡啶；N-[7-(4，7，10-三氮杂二环[13.3.1]十七烷-1(17)，13，15-三烯基)-1，4-亚苯基双(亚甲基)]-2-(氨基甲基)吡啶；N-[I-(1，4，7-三氮杂环十四烷基)-1，4-亚苯基双(亚甲基)]-2-(氨基甲基)吡啶；N-[4-[4，7，10，17-四氮杂二环[13.3.1]十七烷-1(17)，13，15-三烯基]-1，4-亚苯基双(亚甲基)]-2-(氨基甲基)吡啶；N-[4-[4，7，10-三氮杂二环[13.3.1]十七烷-1(17)，13，15-三烯基]-1，4-亚苯基双(亚甲基)]-2-(氨基甲基)吡啶；N-[1，4，8，11-四氮杂环十四烷基-1，4-亚苯基双(亚甲基)]-嘌呤；1-[1，4，8，11-四氮杂环十四烷基-1，4-亚苯基双(亚甲基)]-4-苯基哌嗪；N-[4-(1，7-二氮杂环十四烷基)-1，4-亚苯基双(亚甲基)]-2-(氨基甲基)吡啶；和N-[7-(4，10-二氮杂二环[13.3.1]十七烷-1(17)，13，15-三烯基)-1，4-亚苯基双(亚甲基)]-2-(氨基甲基)吡啶。
再在另一方面，用于本发明方法的CXCR4的例子为具有式(1C)的化合物以及酸加成盐和金属络合物V2-CR9R10-Ar2(1C)其中，V是任选取代的1，4，8，11-四氮杂环十四烷基或4，7，10，17-四氮杂二环[13.3.1]十七烷-1(17)，13，15-三烯基系统；
R9和R10可以相同或不同，并独立选自氢或直链、支链或环状C1-6烷基；Ar2是芳环或杂环，各环可在一个或多个位置任选被供电子基或吸电子基和/或芳环和杂环基团以及它们的烷基衍生物取代。
在上述式(1C)中，Ar2可任选被烷基、芳基、氨基、烷氧基、羟基、卤素、羧基和/或酰胺基取代。在具体实施例中，Ar2可任选被烷氧基、烷基或卤素取代。
具有式(1C)的化合物以及该化合物的合成方法描述于WO 00/02870，该文献通过引用纳入本文。具有式(1C)的化合物的例子包括但不限于1-[2，6-二甲氧基吡啶-4-基(亚甲基)]-1，4，8，11-四氮杂环十四烷；1-[2-氯吡啶-4-基(亚甲基)]-1，4，8，11-四氮杂环十四烷；1-[2，6-二甲基吡啶-4-基(亚甲基)]-1，4，8，11-四氮杂环十四烷；1-[2-甲基吡啶-4-基(亚甲基)]-1，4，8，11-四氮杂环十四烷；1-[2，6-二氯吡啶-4-基(亚甲基)]-1，4，8，11-四氮杂环十四烷；1-[2-氯吡啶-5-基(亚甲基)]-1，4，8，11-四氮杂环十四烷；和7-[4-甲基苯基(亚甲基)]-4，7，10，17-四氮杂二环[13.3.1]十七烷-1(17)，13，15-三烯。
再在另一方面，用于本发明方法的CXCR4拮抗剂可例子有具有式(ID)的化合物V--R--A--R’--W(ID)其中，V和W独立为含有9-32个环成员的环状多胺，环中有3-8个胺氮氮原子被2个或多个碳原子相互分隔，并有一个或多个芳环或杂芳环与其稠合，当V和W有一个或多个芳族或杂芳族部分与其稠合并且环中有或没有掺入氮原子之外的其它杂原子时A是芳族或杂芳族部分，或者当V和W的环中掺入有除了氮原子之外的杂原子但没有一个或多个芳族或杂芳族部分与其稠合时A是芳族或杂芳族部分，R和R’各自为将环状多胺和A部分分隔开的取代或未取代的亚烷基链或含有杂原子的链。
在上述式(ID)中，R和R’可以各自为亚甲基。一实施例中，A是1，3-或1，4-亚苯基。另一实施例中，各V和W为未取代的或取代的三环或双环环系统，环中仅含有碳原子和氮原子。所述环系统之一可以是具有3-6个胺氮原子的10-20元多胺环系统，且该环系统或系统与苄基或吡啶基环系统稠合。
具有式(ID)的化合物以及合成该化合物的方法描述于美国专利5,698,546，该文献通过引用纳入本文。这些化合物包括但不限于
7，7’-[1，4-亚苯基-双(亚甲基)]双-3，7，11，17-四氮杂二环[13.3.1]十七烷-1(17)，13，15-三烯；7，7’-[1，4-亚苯基-双(亚甲基)]双[15-氯-3，7，11，17-四氮杂二环[13.3.1]十七烷-1(17)，13，15-三烯]；7，7’-[1，4-亚苯基-双(亚甲基)]双[15-甲氧基-3，7，11，17-四氮杂二环[13.3.1]十七烷-1(17)，13，15-三烯]；7，7’-[1，4-亚苯基-双(亚甲基)]双-3，7，11，17-四氮杂二环[13.3.1]-十七烷-13，16-三烯-15-酮；7，7’-[1，4-亚苯基-双(亚甲基)]双-4，7，10，17-四氮杂二环[13.3.1]-十七烷-1(17)，13，15-三烯；8，8’-[1，4-亚苯基-双(亚甲基)]双-4，8，12，19-四氮杂二环[15.3.1]十九烷-1(19)，15，17-三烯；6，6’-[1，4-亚苯基-双(亚甲基)]双-3，6，9，15-四氮杂二环[11.3.1]十五烷-1(15)，11，13-三烯；6，6’-[1，3-亚苯基-双(亚甲基)]双-3，6，9，15-四氮杂二环[11.3.1]十五烷-1(15)，11，13-三烯；和17，17’-[1，4-亚苯基-双(亚甲基)]双-3，6，14，17，23，24-六氮杂三环[17.3.1.18，12]二十四烷-1(23)，8，10，12(24)，19，21-六烯(hexaene)。
再在另一方面，用于本发明方法的CXCR4拮抗剂的例子有具有式(1E)的化合物Z-R-A-R’-Y(1E)其中Z和Y相同，为具有10-15个环成员的环状多胺部分，且环中有3-6个胺氮原子被2个或多个碳原子相互分隔，所述胺氮是唯一的环杂原子，A是喹啉之外的芳族或杂芳族部分，R和R’各自为连接Z和Y中氮原子的亚甲基，胺氮原子否则是未取代的。
在上述式(1E)中，各Z和Y部分可具有14个环成员，并在环中有4个胺氮原子。具有式(1E)的化合物即该化合物的合成方法描述于美国专利5,583,131，该文献通过引用纳入本文。这些化合物包括但不限于1，1’-[1，3-亚苯基双(亚甲基)]-双-1，4，8，11-四-氮杂环十四烷；1，1’-[1，4-亚苯基双(亚甲基)]-双-1，4，8，11-四-氮杂环十四烷(AMD 3100)；1，1’-[1，4-亚苯基-双-(亚甲基)]-双-1，4，8，11-四氮杂环十四烷；
1，1’-[1，4-亚苯基-双-(亚甲基)]-双-1，4，8，11-四氮杂环十四烷的双-锌或双-铜络合物；1，1’-[3，3’-联亚苯基-双-(亚甲基)]-双-1，4，8，11-四氮杂环十四烷；11，11’-[1，4-亚苯基-双-(亚甲基)]-双-1，4，7，11-四氮杂环十四烷；1，11’-[1，4-亚苯基-双-(亚甲基)]-1，4，8，1 1-四氮杂环十四烷-1，4，7，11-四氮杂环十四烷；1，1’-[2，6-吡啶-双-(亚甲基)]-双-1，4，8，11-四氮杂环十四烷；1，1-[3，5-吡啶-双-(亚甲基)]-双-1，4，8，11-四氮杂环十四烷；1，1’-[2，5-噻吩-双-(亚甲基)]-双-1，4，8，11-四氮杂环十四烷；1，1’-[4，4’-(2，2’-联吡啶)-双-(亚甲基)]-双-1，4，8，11-四氮杂环十四烷；1，1’-[2，9-(1，10-菲咯啉)-双-(亚甲基)]-双-1，4，8，11-四氮杂环十四烷；1，1’-[1，3-亚苯基-双-(亚甲基)]-双-1，4，7，10-四氮杂环十四烷；1，1’-[1，4-亚苯基-双-(亚甲基)]-双-1，4，7，10-四氮杂环十四烷；1’-[5-硝基-1，3-亚苯基双(亚甲基)]双-1，4，8，11-四氮杂环十四烷；1，1’-[2，4，5，6-四氯-1，3-亚苯基双(phenyleneis)(亚甲基)]双-1，4，8，11-四氮杂环十四烷；1，1’-[2，3，5，6-四-氟-1，4-亚苯基双(亚甲基)]双-1，4，8，11-四氮杂环十四烷；1，1’-[1，4-亚萘基-双-(亚甲基)]双-1，4，8，11-四氮杂环十四烷；1，1’-[1，3-亚苯基双-(亚甲基)]双-1，5，9-三氮杂环十二烷；1，1’-[1，4-亚苯基-双-(亚甲基)]-1，5，9-三氮杂环十二烷；1，1’-[2，5-二甲基-1，4-亚苯基双-(亚甲基)]-双-1，4，8，11-四氮杂环十四烷；1，1’-[2，5-二氯-1，4-亚苯基双-(亚甲基)]-双-1，4，8，11-四氮杂环十四烷；1，1’-[2-溴-1，4-亚苯基双-(亚甲基)]-双-1，4，8，11-四氮杂环十四烷；和1，1’-[6-苯基-2，4-吡啶双-(亚甲基)]-双-1，4，8，11-四氮杂环十四烷。
再在另一方面，用于本发明方法的CXCR4拮抗剂的例子有具有式(1F)的化合物Z-(A)n-Y(1F)其中，Z和Y独立为含有9-32个环成员的环状多胺部分，且环中有3-8个胺氮原子，A是连接原子或连接基，n是0或1-6个整数。
在上述式(1F)中，各Z和Y部分可具有10-24个环成员，或12-18个环成员。各Z和Y部分也可在环中含有4-6个胺氮原子。一实施例中，n是0。另一实施例中，A是亚甲基。
具有式(1F)的化合物及该化合物的合成方法描述于美国专利5,021,409，该文献通过引用纳入本文。这些化合物包括但不限于2，2’-bicyclam、6，6’-bicyclam；3，3’-(双-1，5，9，13-四氮杂环十六烷)；3，3’-(双-1，5，8，11，14-五氮杂环十六烷)；亚甲基(或聚亚甲基)二-1-N-1，4，8，11-四氮杂环十四烷；3，3’-双-1，5，9，13-四氮杂环十六烷；3，3’-双-1，5，8，11，14-五氮杂环十六烷；5，5’-双-1，4，8，11-四氮杂环十四烷；2，5’-双-1，4，8，11-四氮杂环十四烷；2，6’-双-1，4，8，11-四氮杂环十四烷；11，11’-(1，2-乙二基(ethanediyl))双-1，4，8，11-四氮杂环十四烷；11，11-(1，2-丙二基(propanediyl))双-1，4，8，11-四氮杂环十四烷；11，11’-(1，2-丁二基(propanediyl))双-1，4，8，11-四氮杂环十四烷；11，11’-(1，2-戊二基(pentanediyl))双-1，4，8，11-四氮杂环十四烷；和11，11’-(1，2-己二基(hexanediyl))双-1，4，8，11-四氮杂环十四烷。
另一方面，用于本发明方法的CXCR4拮抗剂的例子有具有式(2A)的化合物或其药学上可接受的酸加成盐 W是氮原子且Y不存在，或者W是碳原子且Y＝H；R1-R7可以相同或不同，且独立为氢或直链、支链或环状C1-6烷基；R8是任选取代的杂环基或任选取代的芳基Ar是任选在一个或多个非连接位置被供电子基或吸电子基取代的芳环或杂芳环；n和n’独立为0-2；X为具有下式的基团
其中，环A是任选取代的、饱和或不饱和的5或6元环，P是任选取代的氮原子，且环A中除P之外的任何杂原子是N；其中，环B是任选取代的5-7元环；其中，环A或环B通过V基团从任何位置结合到W基团；其中，V是化学键，或者V是(CH2)n”基(其中n”＝1-2)，或者V是C＝O基；和其中，Z选自下组氢原子；任选取代的C1-6烷基；任选取代的芳基或杂环基；任选取代的氨基；任选取代的C1-6烷基氨基或C3-7环烷基氨基；和取代的羰基；或其中，所述化合物可以是任何立体异构形式，或者以其立体异构形式的混合物存在；其中，环B选自下组苯环和5-7元环烷基环；以及其任选取代的形式。
在上述式(2A)中，环A可以是吡啶；嘧啶；吡嗪；哒嗪；三嗪；哌啶；哌嗪；咪唑；吡唑；或三唑，以及其任选取代的形式。环B可以是环戊基；环己基；环庚基；环戊烯基；环己烯基；或环庚烯基，以及其任选取代的形式。一实施方案中，环A和环B一起是任选取代的二氢喹啉或四氢喹啉。
在上述式(2A)中，环A和环B独立被选自下组的取代基任选取代卤素；硝基；氰基；羧酸；任选取代的烷基、烯基或环烷基；任选取代的羟基；任选取代的硫醇基；任选取代的氨基或酰基；任选取代的羧酸酯基、氨甲酰基或氨磺酰基；和任选取代的芳基或杂环基。一实施方案中，环A或环B中的任选取代基独立为任选取代的芳烷基或杂环烷基，其中，所述杂环烷基是含有1-4个杂原子的5或6元环。例如，任选取代的芳烷基或杂环烷基可以是苯基C1-4烷基；苯基甲基(苄基)；苯乙基；吡啶基甲基；或吡啶基乙基。
在上述式(2A)中，Z可以是任选取代的C1-6烷基，其中所述C1-6烷基被一个或多个选自下组的取代基取代卤素；硝基；氰基；羧酸；任选取代的烷基、烯基或环烷基；任选取代的羟基；任选取代的硫醇基；任选取代的氨基或酰基；任选取代的羧酸酯基、氨甲酰基或氨磺酰基；和任选取代的芳基或杂环基。
在上述式(2A)中，Z是任选取代的芳基或杂环基或被任选取代的芳基或杂环基任选取代的C1-6烷基。一实施方案中，Z是被任选取代的芳基或杂环基取代的C1-6烷基。所述任选取代的芳基可被选自下组的取代基取代苯；萘；二氢萘；和四氢萘；和其中，所述任选取代的杂环基是5-6元饱和、部分饱和或芳族杂环，所述环含有1-4个选自氮、氧或硫的杂原子。所述杂环基选自下组吡啶、喹啉、异喹啉、咪唑、苯并咪唑、氮杂苯并咪唑、苯并三唑、呋喃、苯并呋喃、噻唑、苯并噻唑、唑、苯并唑、吡咯、吲哚、二氢吲哚、吲唑、吡咯烷、吡咯烷酮、吡咯啉、哌啶、哌嗪、四氢喹啉、四氢异喹啉、吡唑、噻吩、异唑、异噻唑、三唑、四唑、二唑、噻二唑、吗啉、硫代吗啉、吡唑烷、咪唑烷、咪唑啉、四氢吡喃、二氢吡喃、苯并吡喃、二烷、二噻烷、四氢呋喃、四氢噻吩、二氢呋喃和二氢噻吩。所述杂环基也可含有氮或硫杂原子；且其中，所述氮或硫杂原子任选为氧化物形式。
在另一实施方案中，用于本发明方法的CXCR4拮抗剂可以是具有式(2B)的化合物或其药学上可接受的酸加成盐 其中，W为氮原子且Y不存在；R1-R7可以相同或不同，且独立为氢或直链、支链或环状C1-6烷基；R8是任选取代的杂环基或任选取代的芳基Ar是任选在一个或多个非连接位置被供电子基或吸电子基取代的芳环或杂芳环；n和n’独立为0-2；X为具有下式的基团 其中，环A是任选取代的、饱和或不饱和的5或6元环，P是任选取代的氮原子，且环A或B中的任何杂原子是N；其中，环B是任选取代的5-7元环；其中，环A或环B通过V基团从任何位置结合到W基团；其中，V是化学键，或者V是(CH2)n”基(其中n”＝1-2)，或者V是C＝O基；和其中，Z选自下组氢原子；任选取代的C1-6烷基；任选取代的芳基或杂环基；任选取代的氨基；任选取代的C1-6烷基氨基或C3-7环烷基氨基；和取代的羰基；或其中，所述化合物可以是任何立体异构形式，或者以其立体异构形式的混合物存在。
在上述式(2B)中，环A可以是吡啶；嘧啶；吡嗪；哒嗪；三嗪；哌啶；哌嗪；咪唑；吡唑；或三唑，以及其任选取代的形式。环B可以是苯或5-7元环烷基环，以及其任选取代的形式。例如，环B可以是环戊基；环己基；环庚基；环戊烯基；环己烯基；或环庚烯基，以及其任选取代的形式。
在上述式(2B)中，环A和环B一起可以是任选取代的二氢喹啉或四氢喹啉。例如，环A和环B独立被选自下组的取代基任选取代卤素；硝基；氰基；羧酸；任选取代的烷基、烯基或环烷基；任选取代的羟基；任选取代的硫醇基；任选取代的氨基或酰基；任选取代的羧酸酯基、氨甲酰基或氨磺酰基；和任选取代的芳基或杂环基。在一个实施例中，环A或环B中的任选取代基独立为任选取代的芳烷基或杂环烷基，其中，所述杂环烷基是含有1-4个杂原子的5或6元环。例如，任选取代的芳烷基或杂环烷基选自苯基C1-4烷基；苯基甲基(苄基)；苯乙基；吡啶基甲基；和吡啶基乙基。
在上述式(2B)中，Z可以是任选取代的C1-6烷基，其中所述C1-6烷基被一个或多个选自下组的取代基取代卤素；硝基；氰基；羧酸；任选取代的烷基、烯基或环烷基；任选取代的羟基；任选取代的硫醇基；任选取代的氨基或酰基；任选取代的羧酸酯基、氨甲酰基或氨磺酰基；和任选取代的芳基或杂环基。一实施例中，Z是被任选取代的芳基或杂环基取代的C1-6烷基。
另一实施例中，Z是任选取代的芳基或杂环基或被任选取代的芳基或杂环基任选取代的C1-6烷基。例如，所述任选取代的芳基可被选自下组的取代基取代苯；萘；二氢萘；和四氢萘；和其中，所述任选取代的杂环基是5-6元饱和、部分饱和或芳族杂环，所述环含有1-4个选自氮、氧或硫的杂原子。所述杂环基可以是吡啶、喹啉、异喹啉、咪唑、苯并咪唑、氮杂苯并咪唑、苯并三唑、呋喃、苯并呋喃、噻唑、苯并噻唑、唑、苯并唑、吡咯、吲哚、二氢吲哚、吲唑、吡咯烷、吡咯烷酮、吡咯啉、哌啶、哌嗪、四氢喹啉、四氢异喹啉、吡唑、噻吩、异唑、异噻唑、三唑、四唑、二唑、噻二唑、吗啉、硫代吗啉、吡唑烷、咪唑烷、咪唑啉、四氢吡喃、二氢吡喃、苯并吡喃、二烷、二噻烷、四氢呋喃、四氢噻吩、二氢呋喃或二氢噻吩。其它实施例中，杂环基含有氮或硫杂原子；且其中，所述氮或硫杂原子任选为氧化物形式。
一实施方案中，CXCR4拮抗剂是选自下组的化合物N-(2-吡啶基甲基)-N’-(6，7，8，9-四氢-5H-环庚[b]吡啶-9-基)-1，4-苯二甲胺(dimethanamine)；N-(2-吡啶基甲基)-N’-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N’-(6，7-二氢-5H-环戊[b]吡啶-7-基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N’-(1，2，3，4-四氢-1-萘基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N’-(1-萘基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N’-(8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N’-[2-[(2-吡啶基甲基)氨基]乙基]-N’-(1-甲基-1，2，3，4-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N’-[2-[(1H-咪唑-2-基甲基)氨基]乙基]-N’-(1-甲基-1，2，3，4-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N’-(1，2，3，4-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N’-[2-[(1H-咪唑-2-基甲基)氨基]乙基]-N’-(1，2，3，4-四氢-1-萘基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N’-(2-苯基-5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N，N’-双(2-吡啶基甲基)-N’-(2-苯基-5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N’-(5，6，7，8-四氢-5-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N’-(1H-咪唑-2-基甲基)-N’-(5，6，7，8-四氢-5-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N’-(1H-咪唑-2-基甲基)-N’-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N’-[(2-氨基-3-苯基)丙基]-N’-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)N’-(1H-咪唑-4-基甲基)-N’-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N’-(2-喹啉基甲基)-N’-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N’-(2-(2-萘甲酰基)氨基乙基)-N’-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N’-[(S)-(2-乙酰氨基-3-苯基)丙基]-N’-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N’-[(S)-(2-乙酰氨基-3-苯基)丙基]-N’-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N’-[3-((2-萘基甲基)氨基)丙基]-N’-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N’-[2-(S)-吡咯烷基(pyrollidinyl)甲基]-N’-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N’-[2-(R)-吡咯烷基甲基]-N’-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N’-[3-吡唑基甲基]-N’-(556，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N’-[2-吡咯基甲基]-N’-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N’-[2-噻吩基甲基]-N’-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺N-(2-吡啶基甲基)-N’-[2-噻唑基甲基]-N’-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N’-[2-呋喃基甲基]-N’-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N’-[2-[(苯基甲基)氨基]乙基]-N’-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N’-(2-氨基乙基)-N’-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N’-3-吡咯烷基-N’-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺N-(2-吡啶基甲基)-N’-4-哌啶基-N’-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N’-[2-[(苯基)氨基]乙基]-N’-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N’-(7-甲氧基-1，2，3，4-四氢-2-萘基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N’-(6-甲氧基-1，2，3，4-四氢-2-萘基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N’-(1-甲基-1，2，3，4-四氢-2-萘基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N’-(7-甲氧基-3，4-二氢萘基)-1-(氨基甲基)-4-苯甲酰胺；N-(2-吡啶基甲基)-N’-(6-甲氧基-3，4-二氢萘基)-1-(氨基甲基)-4-苯甲酰胺；N-(2-吡啶基甲基)-N’-(1H-咪唑-2-基甲基)-N’-(7-甲氧基-1，2，3，4-四氢-2-萘基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N’-(8-羟基-1，2，3，4-四氢-2-萘基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N’-(1H-咪唑-2-基甲基)-N’-(8-羟基-1，2，3，4-四氢-2-萘基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N’-(8-氟-1，2，3，4-四氢-2-萘基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N’-(1H-咪唑-2-基甲基)-N’-(8-氟-1，2，3，4-四氢-2-萘基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N’-(5，6，7，8-四氢-7-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N’-(1H-咪唑-2-基甲基)-N’-(5，6，7，8-四氢-7-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N’-[2-[(2-萘基甲基)氨基]乙基]-N’-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N’-[2-(异丁基氨基)乙基]-N’-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N’-[2-[(2-吡啶基甲基)氨基]乙基]-N’-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N’-[2-[(2-呋喃基甲基)氨基]乙基]-N’-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N’-(2-胍基乙基)-N’-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N’-[2-[双-[(2-甲氧基)苯基甲基]氨基]乙基]-N’-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N’-[2-[(1H-咪唑-4-基甲基)氨基]乙基]-N’-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N’-[2-[(1H-咪唑-2-基甲基)氨基]乙基]-N’-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N’-[2-(苯基脲基)乙基]-N’-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N’-[[N”-(正丁基)酰胺基]甲基]-N’-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N’-(酰胺基甲基)-N’-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N’-[(N”-苯基)酰胺基甲基]-N’-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N’-(羧基甲基)-N’-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；
N-(2-吡啶基甲基)-N’-(苯基甲基)-N’-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N’-(1H-苯并咪唑-2-基甲基)-N’-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N’-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基甲基)-N’-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺(氢溴酸盐)；N-(2-吡啶基甲基)-N’-(5-硝基-1H-苯并咪唑-2-基甲基)-N’-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N’-[(1H)-5-氮杂苯并咪唑-2-基甲基]-N’-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N-(4-苯基-1H-咪唑-2-基甲基)-N’-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N’-[2-(2-吡啶基)乙基]-N’-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N’-(2-苯并唑基)-N’-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N’-(反-2-氨基环己基)-N’-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N’-(2-苯基乙基)-N’-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N’-(3-苯基丙基)-N’-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N’-(反-2-氨基环戊基)-N’-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-[[4-[[(2-吡啶基甲基)氨基]甲基]苯基]甲基]-N-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-甘氨酰胺；N-[[4-[[(2-吡啶基甲基)氨基]甲基]苯基]甲基]-N-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-(L)-丙氨酰胺；N-[[4-[[(2-吡啶基甲基)氨基]甲基]苯基]甲基]-N-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-(L)-天冬酰胺；N-[[4-[[(2-吡啶基甲基)氨基]甲基]苯基]甲基]-N-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-吡嗪酰胺；N-[[4-[[(2-吡啶基甲基)氨基]甲基]苯基]甲基]-N-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-(L)-脯氨酰胺；
N-[[4-[[(2-吡啶基甲基)氨基]甲基]苯基]甲基]-N-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-(L)-赖氨酰胺；N-[[4-[[(2-吡啶基甲基)氨基]甲基]苯基]甲基]-N-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-苯甲酰胺；N-[[4-[[(2-吡啶基甲基)氨基]甲基]苯基]甲基]-N-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-吡啶酰胺；N’-苄基-N-[[4-[[(2-吡啶基甲基)氨基]甲基]苯基]甲基]-N-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-脲；N’-苯基-N-[[4-[[(2-吡啶基甲基)氨基]甲基]苯基]甲基]-N-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-脲；N-(6，7，8，9-四氢-5H-环庚[细菌(bacteria)吡啶-9-基)-4-[[(2-吡啶基甲基)氨基]甲基]苯甲酰胺；N-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-4-[[(2-吡啶基甲基)氨基]甲基]苯甲酰胺；N，N’-双(2-吡啶基甲基)-N’-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N，N’-双(2-吡啶基甲基)-N’-(6，7，8，9-四氢-5H-环庚[细菌吡啶-9-基)-1，4-苯二甲胺；N，N’-双(2-吡啶基甲基)-N’-(6，7-二氢-5H-环戊[细菌吡啶-7-基)-1，4-苯二甲胺；N，N’-双(2-吡啶基甲基)-N’-(1，2，3，4-四氢-1-萘基)-1，4-苯二甲胺；N，N’-双(2-吡啶基甲基)-N’-[(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)甲基]-1，4-苯二甲胺；N，N’-双(2-吡啶基甲基)-N’[(6，7-二氢-5H-环戊[细菌吡啶-7-基)甲基]-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N-(2-甲氧基乙基)-N’-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N-[2-(4-甲氧基苯基)乙基]-N’-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N，N’-双(2-吡啶基甲基)-1，4-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)苯二甲胺；N-[(2，3-二甲氧基苯基)甲基]-N’-(2-吡啶基甲基)-N-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N，N’-双(2-吡啶基甲基)-N-[1-(N”-苯基-N”-甲基脲基)-4-哌啶基]-1，3-苯二甲胺；N，N’-双(2-吡啶基甲基)-N-[N”-对甲苯磺酰苯基丙氨酰)-4-哌啶基]-1，3-苯二甲胺；N，N’-双(2-吡啶基甲基)-N-[1-[3-(2-氯苯基)-5-甲基-异唑-4-基(isoxazol-4-oyl)]-4-哌啶基]-1，3-苯二甲胺；
N-[(2-羟基苯基)甲基]-N’-(2-吡啶基甲基)-N-(6，7，8，9-四氢-5H-环庚[细菌吡啶-9-基)-1，4-苯二甲胺；N-[(4-氰基苯基)甲基]-N’-(2-吡啶基甲基)-N-(6，7，8，9-四氢-5H-环庚[细菌吡啶-9-基)-1，4-苯二甲胺；N-[(4-氰基苯基)甲基]-N’-(2-吡啶基甲基)-N-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-[(4-乙酰氨基苯基)甲基]-N’-(2-吡啶基甲基)-N-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-[(4-苯氧基苯基)甲基]-N’-(2-吡啶基甲基)-N-(6，7，8，9-四氢-5H-环庚[细菌吡啶-9-基)-1，4-苯二甲胺；N-[(1-甲基-2-酰胺基)乙基]-N，N’-双(2-吡啶基甲基)-1，3-苯二甲胺；N-[(4-苄氧基苯基)甲基]-N’-(2-吡啶基甲基)-N-(6，7，8，9-四氢-5H-环庚[细菌吡啶-9-基)-1，4-苯二甲胺；N-[(噻吩-2-基)甲基]-N’-(2-吡啶基甲基)-N-(6，7，8，9-四氢-5H-环庚[细菌吡啶-9-基)-1，4-苯二甲胺；N-[1-(苄基)-3-吡咯烷基]-N，N’-双(2-吡啶基甲基)-1，3-苯二甲胺；N-[[1-甲基-3-(吡唑-3-基)]丙基]-N，N’-双(2-吡啶基甲基)-1，3-苯二甲胺；N-[1-(苯基)乙基]-N，N’-双(2-吡啶基甲基)-1，3-苯二甲胺；N-[(3，4-亚甲二氧基苯基)甲基]-N’-(2-吡啶基甲基)-N-(6，7，8，9-四氢-5H-环庚[b]吡啶-9-基)-1，4-苯二甲胺；N-[1-苄基-3-羧基甲基-4-哌啶基]-N，N’-双(2-吡啶基甲基)-1，3-苯二甲胺；N-[(3，4-亚甲二氧基苯基)甲基]-N’-(2-吡啶基甲基)-N-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(3-吡啶基甲基)-N’-(2-吡啶基甲基)-N-(6，7，8，9-四氢-5H-环庚[b]吡啶-9-基)-1，4-苯二甲胺；N-[[1-甲基-2-(2-甲苯基)酰胺基]乙基]-N，N’-双(2-吡啶基甲基)-1，3-苯二甲胺；N-[(1，5-二甲基-2-苯基-3-吡唑啉酮-4-基)甲基]-N’-(2-吡啶基甲基)-N-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-[(4-丙氧基苯基)甲基]-N’-(2-吡啶基甲基)-N-(6，7，8，9-四氢-5H-环庚[b]吡啶-9-基)-1，4-苯二甲胺；
N-(1-苯基-3，5-二甲基吡唑啉-4-基甲基)-N’-(2-吡啶基甲基)-N-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-[1H-咪唑-4-基甲基]-N，N’-双(2-吡啶基甲基)-1，3-苯二甲胺；N-[(3-甲氧基-4，5-亚甲二氧基苯基)甲基]-N’-(2-吡啶基甲基)-N-(6，7，8，9-四氢-5H-环庚[b]吡啶-9-基)-1，4-苯二甲胺；N-[(3-氰基苯基)甲基]-N’-(2-吡啶基甲基)-N-(6，7，8，9-四氢-5H-环庚[b]吡啶-9-基)-1，4-苯二甲胺；N-[(3-氰基苯基)甲基]-N’-(2-吡啶基甲基)-N-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(5-乙基噻吩-2-基甲基)-N’-(2-吡啶基甲基)-N-(6，7，8，9-四氢-5H-环庚[b]吡啶-9-基)-1，4-苯二甲胺；N-(5-乙基噻吩-2-基甲基)-N’-(2-吡啶基甲基)-N-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-[(2，6-二氟苯基)甲基]-N’-(2-吡啶基甲基)-N-(6，7，8，9-四氢-5H-环庚[b]吡啶-9-基)-1，4-苯二甲胺；N-[(2，6-二氟苯基)甲基]-N’-(2-吡啶基甲基)-N-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-[(2-二氟甲氧基苯基)甲基]-N’-(2-吡啶基甲基)-N-(6，7，8，9-四氢-5H-环庚[b]吡啶-9-基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-二氟甲氧基苯基甲基)-N’-(2-吡啶基甲基)-N-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(1，4-苯并二烷-6-基甲基)-N’-(2-吡啶基甲基)-N-(6，7，8，9-四氢-5H-环庚[b]吡啶-9-基)-1，4-苯二甲胺；N，N’-双(2-吡啶基甲基)-N-[1-(N”-苯基-N”-甲基脲基)-4-哌啶基]-1，4-苯二甲胺；N，N’-双(2-吡啶基甲基)-N-[N”-对甲苯磺酰苯基丙氨酰)-4-哌啶基]-1，4-苯二甲胺；N-[1-(3-吡啶酰胺基)-4-哌啶基]-N，N’-双(2-吡啶基甲基)-1，4-苯二甲胺；N-[1-(环丙基酰胺基)-4-哌啶基]-N，N’-双(2-吡啶基甲基)-1，4-苯二甲胺；N-[1-(1-苯基环丙基酰胺基)-4-哌啶基]-N，N’-双(2-吡啶基甲基)-1，4-苯二甲胺；N-(1，4-苯并二烷-6-基甲基)-N’-(2-吡啶基甲基)-N-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；
N-[1-[3-(2-氯苯基)-5-甲基-异唑-4-酰胺基]-4-哌啶基]-N，N’-双(2-吡啶基甲基)-1，4-苯二甲胺；N-[1-(2-甲硫基吡啶-3-酰胺基)-4-哌啶基]-N，N’-双(2-吡啶基甲基)-1，4-苯二甲胺；N-[(2，4-二氟苯基)甲基]-N’-(2-吡啶基甲基)-N-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(1-甲基吡咯-2-基甲基)-N’-(2-吡啶基甲基)-N-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-[(2-羟基苯基)甲基]-N’-(2-吡啶基甲基)-N-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-[(3-甲氧基-4，5-亚甲二氧基苯基)甲基]-N’-(2-吡啶基甲基)-N-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(3-吡啶基甲基)-N’-(2-吡啶基甲基)-N-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-[2-(N”-吗啉代甲基)-1-环戊基]-N，N’-双(2-吡啶基甲基)-1，4-苯二甲胺；N-[(1-甲基-3-哌啶基)丙基]-N，N’-双(2-吡啶基甲基)-1，4-苯二甲胺；N-(1-甲基苯并咪唑-2-基甲基)-N’-(2-吡啶基甲基)-N-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-[1-(苄基)-3-吡咯烷基]-N，N’-双(2-吡啶基甲基)-1，4-苯二甲胺；N-[[(1-苯基-3-(N”-吗啉代)]丙基]-N，N’-双(2-吡啶基甲基)-1，4-苯二甲胺；N-[1-(异丙基)-4-哌啶基]-N，N’-双(2-吡啶基甲基)-1，4-苯二甲胺；N-[1-(乙氧基羰基)-4-哌啶基]-N’-(2-吡啶基甲基)-N-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-[(1-甲基-3-吡唑基)丙基]-N’-(2-吡啶基甲基)-N-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-[1-甲基-2-(N”，N”-二乙基酰胺基)乙基]-N，N’-双(2-吡啶基甲基)-1，4-苯二甲胺；N-[(1-甲基-2-苯基磺酰基)乙基]-N’-(2-吡啶基甲基)-N-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-[(2-氯-4，5-亚甲二氧基苯基)甲基]-N’-(2-吡啶基甲基)-N-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-[1-甲基-2-[N″-(4-氯苯基)酰胺基]乙基]-N’-(2-吡啶基甲基)-N-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；
N-(1-乙酰氧基吲哚-3-基甲基)-N’-(2-吡啶基甲基)-N-(6，7，8，9-四氢-5H-环庚[b]吡啶-9-基)-1，4-苯二甲胺；N-[(3-苄氧基-4-甲氧基苯基)甲基]-N’-(2-吡啶基甲基)-N-(6，7，8，9-四氢-5H-环庚[b]吡啶-9-基)-1，4-苯二甲胺；N-(3-喹啉基甲基)-N’-(2-吡啶基甲基)N-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基(quinolinyl))-1，4-苯二甲胺；N-[(8-羟基)-2-喹啉基甲基]-N’-(2-吡啶基甲基)-N-(6，7，8，9-四氢-5H-环庚[b]吡啶-9-基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-喹啉基甲基)-N’-(2-吡啶基甲基)-N-(6，7，8，9-四氢-5H-环庚[b]吡啶-9-基)-1，4-苯二甲胺；N-[(4-乙酰氨基苯基)甲基]-N’-(2-吡啶基甲基)-N-(6，7，8，9-四氢-5H-环庚[b]吡啶-9-基)-1，4-苯二甲胺；N-[1H-咪唑-2-基甲基]-N，N’-双(2-吡啶基甲基)-1，4-苯二甲胺；N-(3-喹啉基甲基)-N’-(2-吡啶基甲基)-N-(6，7，8，9-四氢-5H-环庚[b]吡啶-9-基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-噻唑基甲基)-N’-(2-吡啶基甲基)-N-(6，7，8，9-四氢-5H-环庚[b]吡啶-9-基)-1，4-苯二甲胺；N-(4-吡啶基甲基)-N’-(2-吡啶基甲基)-N-(6，7，8，9-四氢-5H-环庚[b]吡啶-9-基)-1，4-苯二甲胺；N-[(5-苄氧基)苯并[b]吡咯-3-基甲基]-N，N’-双(2-吡啶基甲基)-1，4-苯二甲胺；N-(1-甲基吡唑-2-基甲基)-N’-(2-吡啶基甲基)N-(6，7，8，9-四氢-5H-环庚[b]吡啶-9-基)-1，4-苯二甲胺；N-[(4-甲基)-1H-咪唑-5-基甲基]-N，N’-双(2-吡啶基甲基)-1，4-苯二甲胺；N-[[(4-二甲基氨基)-1-萘基(napthalenyl)]甲基]-N，N’-双(2-吡啶基甲基)-1，4-苯二甲胺；N-[1，5-二甲基-2-苯基-3-吡唑啉酮-4-基甲基]-N，N’-双(2-吡啶基甲基)-1，4-苯二甲胺；N-[1-[(1-乙酰基-2-(R)-脯氨酰]-4-哌啶基]-N-[2-(2-吡啶基)乙基]-N’-(2-吡啶基甲基)-1，3-苯二甲胺；N-[1-[2-乙酰氨基苯甲酰基-4-哌啶基]-4-哌啶基]-N-[2-(2-吡啶基)乙基]-N’-(2-吡啶基甲基)-1，3-苯二甲胺；N-[(2-氰基-2-苯基)乙基]-N’-(2-吡啶基甲基)-N-(6，7，8，9-四氢-5H-环庚[b]吡啶-9-基)-1，4-苯二甲胺；N-[(N”-乙酰基色氨酰)-4-哌啶基]-N-[2-(2-吡啶基)乙基]-N’-(2-吡啶基甲基)-1，3-苯二甲胺；N-[(N”-苯甲酰基缬氨酰)-4-哌啶基]-N-[2-(2-吡啶基)乙基]-N’-(2-吡啶基甲基)-1，3-苯二甲胺；N-[(4-二甲基氨基苯基)甲基]-N’-(2-吡啶基甲基)-N-(6，7，8，9-四氢-5H-环庚[b]吡啶-9-基)-1，4-苯二甲胺；N-(4-吡啶基甲基)-N’-(2-吡啶基甲基)-N-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(1-甲基苯并咪唑(benzimadazol)-2-基甲基)-N’-(2-吡啶基甲基)-N-(6，7，8，9-四氢-5H-环庚[b]吡啶-9-基)-1，4-苯二甲胺；N-[1-丁基-4-哌啶基]-N-[2-(2-吡啶基)乙基]-N’-(2-吡啶基甲基)-1，3-苯二甲胺；N-[1-苯甲酰基-4-哌啶基]-N-[2-(2-吡啶基)乙基]-N’-(2-吡啶基甲基)-1，3-苯二甲胺；N-[1-(苄基)-3-吡咯烷基]N-[2-(2-吡啶基)乙基]-N’-(2-吡啶基甲基)-1，3-苯二甲胺；N-[(1-甲基)苯并[b]吡咯-3-基甲基]-N-[2-(2-吡啶基)乙基]-N’-(2-吡啶基甲基)-1，3-苯二甲胺；N-[1H-咪唑-4-基甲基]N-[2-(2-吡啶基)乙基]-N’-(2-吡啶基甲基)-1，3-苯二甲胺；N-[1-(苄基)-4-哌啶基]N-[2-(2-吡啶基)乙基]-N’-(2-吡啶基甲基)-1，4-苯二甲胺；N-[1-甲基苯并咪唑-2-基甲基]-N-[2-(2-吡啶基)乙基]-N’-(2-吡啶基甲基)-1，4-苯二甲胺；N-[(2-苯基)苯并[b]吡咯-3-基甲基]-N-[2-(2-吡啶基)乙基]-N’-(2-吡啶基甲基)-1，4-苯二甲胺；N-[(6-甲基吡啶-2-基)甲基]-N’-(2-吡啶基甲基)-N-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(3-甲基-1H-吡唑-5-基甲基)-N’-(2-吡啶基甲基)-N-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，3-苯二甲胺；N-[(2-甲氧基苯基)甲基]-N’-(2-吡啶基甲基)-N-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，3-苯二甲胺；N-[(2-乙氧基苯基)甲基]-N’-(2-吡啶基甲基)-N-(6，7，8，9-四氢-5H-环庚[b]吡啶-9-基)-1，3-苯二甲胺；N-(苄氧基乙基)-N’-(2-吡啶基甲基)N-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，3-苯二甲胺；N-[(2-乙氧基-1-萘基)甲基]-N’-(2-吡啶基甲基)-N-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，3-苯二甲胺；N-[(6-甲基吡啶-2-基)甲基]-N’-(2-吡啶基甲基)-N-(5，6，7，8-四氢-8-喹啉基)-1，3-苯二甲胺；1-[[4-[[(2-吡啶基甲基)氨基]甲基]苯基]甲基]胍；N-(2-吡啶基甲基)-N-(8-甲基-8-氮杂二环[3.2.1]辛-3-基)-1，4-苯二甲胺；1-[[4-[[(2-吡啶基甲基)氨基]甲基]苯基]甲基]高哌嗪(homopiperazine)；1-[[3-[[(2-吡啶基甲基)氨基]甲基]苯基]甲基]高哌嗪；反-和顺-1-[[4-[[(2-吡啶基甲基)氨基]甲基]苯基]甲基]-3，5-哌啶二胺；N，N’-[1，4-亚苯基双(亚甲基)]双-4-(2-嘧啶基)哌嗪；1-[[4-[[(2-吡啶基甲基)氨基]甲基]苯基]甲基]-1-(2-吡啶基)甲基胺；2-(2-吡啶基)-5-[[(2-吡啶基甲基)氨基]甲基]-1，2，3，4-四氢异喹啉；1-[[4-[[(2-吡啶基甲基)氨基]甲基]苯基]甲基]-3，4-二氨基吡咯烷；1-[[4-[[(2-吡啶基甲基)氨基]甲基]苯基]甲基]-3，4-二乙酰氨基吡咯烷；8-[[4-[[(2-吡啶基甲基)氨基]甲基]苯基]甲基]-2，5，8-三氮杂-3-氧杂二环[4.3.0]壬烷；和8-[[4-[[(2-吡啶基甲基)氨基]甲基]苯基]甲基]-2，5，8-三氮杂二环[4.3.0]壬烷。
具有式(2A)和(2B)的化合物及该化合物的合成方法描述于WO 00/56729，该文献通过引用纳入本文。
另一方面，用于本发明方法的CXCR4拮抗剂的例子有具有式(3)的化合物或其盐、前药和立体化学形式 其中
环A任选含有选自N、O或S的杂原子；虚线表示任选为不饱和键；R1是卤素、硝基、氰基、任选取代的羟基、任选取代的硫醇、任选取代的氨基、羧酸酯、氨甲酰、磺酸酯、氨磺酰、C2-4烷酰基、烷基磺酰基或芳酰基；R2和R3独立为H、任选卤化的C1-4烷基、任选取代的芳基或杂环基，或者R2和R3与环E一起形成取代或未取代的5-7元环；k是0-4；m是0-2；L1是共价键或任选含有N或O的C1-6烷基；X是未取代的或取代的C或N；或是O或S；Ar是亚苯基；各n独立为0-2；各R独立为H或烷基(1-6C)；和Y是稠合或未稠合的芳环或杂芳环，或是5-6元杂环基。
在上述式(3)中，Y可以是取代或未取代的苯、萘(napthalene)、二氢萘、四氢萘、吡啶、喹啉、异喹啉、咪唑、苯并咪唑、氮杂苯并咪唑、苯并三唑、呋喃、苯并呋喃、噻唑、苯并噻唑、唑、苯并唑、吡咯、吲哚、二氢吲哚、吲唑、吡咯烷、吡咯烷酮、吡咯啉、哌啶、哌嗪、四氢喹啉、四氢异喹啉、吡唑、噻吩、异唑、异噻唑、三唑、四唑、二唑、噻二唑、吗啉、硫代吗啉、吡唑烷、咪唑烷、咪唑啉、四氢吡喃、二氢吡喃、苯并吡喃、二烷、二噻烷、四氢呋喃、四氢噻吩、二氢呋喃或二氢噻吩。
在上述式(3)中，L1可连接到环E的2位。环E中的虚线还可表示所示氮和2位之间的双键。一实施例中，R2和R3可连接形成环E上的苯并(benzo)取代基。
在上述式(3)中，环A可以是饱和的。一些实施例中，m是1，k是0或1。
在另一实施方案中，用于本发明方法的CXCR4拮抗剂具有式(3A)，或是其盐、前药和立体化学形式
其中R、m、n、Ar和各Y如式(3)中的定义；L2是共价键或任选含有N或O的C1-6烷基；和各Z独立为CR2、NR、O或S，条件是只有两个Z可以不是CR2。
在上述式(3A)中，L2可以是亚甲基或亚乙基。一实施例中，m是1，所有Z都是CR2，尤其是CH2。
在上述式(3A)中，各Y可以是嘧啶基、吡啶基、苯基、苯并咪唑或苯并唑。
再在另一实施方案中，用于本发明方法的CXCR4拮抗剂具有式(3B)，或是其盐、前药和立体化学形式 其中W1是含有至少一个选自N、O或S的杂原子的未取代或取代的单环(5-6元)或稠合双环(8-12元)系统；W2是H，或者选自任选取代的C1-6烷基；被任选取代的芳基或杂环基取代的C0-6烷基；任选取代的C0-6烷基氨基或C3-7环烷基氨基；和任选取代的羰基或磺酰基；Ar、R和n如式(3)中的定义，和 是含有1-2个选自N、O或S的杂原子的饱和或不饱和的5元环。
再在另一实施方案中，用于本发明方法的CXCR4拮抗剂具有式(3C)，或是其盐、前药和立体化学形式 其中W1是苯基、吡啶基、嘧啶基、咪唑基、硫苯基(thiophenylyl)或任选含有选自N、O或S的杂原子的稠环系统；
W2是H；Ar、R和n如式(3)中的定义；和 表示任选含有1或2个选自N、O或S的杂原子的10元稠环系统。
具有式(3)和(3A)-(3C)的化合物及该化合物的合成方法描述于WO 02/22600，该文献通过引用纳入本文。
另一方面，用于本发明方法的CXCR4拮抗剂的例子有具有式(4)的化合物，或是其盐、前药和立体化学形式 其中X是含有至少一个选自N、O或S的杂原子的未取代或取代的单环(5-6元)或稠合双环(9-12元)系统；Z是H，或是任选取代的含有N、O或S的5-6元单环或9-12元稠合双环环系统；Ar是任选取代的芳环或杂芳环；L1、L2和L3各自独立为键、CO、SO2或CH2，其中，L2和L3中的至少一个必须是CO或SO2；且其中L1也可以是亚烷基(2-5C)，其中，一个或两个C可任选被N取代，且该亚烷基自身可被桥连亚烷基(3-4C)任选取代；L2和L3也可以独立为SO2NH、CONH、SO2NHCH2或CONHCH2；n是0、1或2；R1和R2各自独立为H或者直链、支链或环烷基(1-6C)，它可任选被取代，且其中的R2可以是偶联到Y的亚烷基；和Y含有至少一个直接偶联到L3的芳环或杂芳环或其它取代或未取代的杂环。
在上述式(4)中，X可以是二氢喹啉、四氢喹啉、吡喃吡啶、二氢吡喃吡啶、硫代吡喃吡啶、二氢硫代吡喃吡啶、二氢1，5-二氮杂萘、四氢1，5-二氮杂萘、咪唑基、唑基、噻唑基、苯并咪唑基、苯并噻唑基或苯并唑基。
在上述式(4)中，L1以是亚烷基(2-5C)，其中的一个C可任选被N取代，且可任选被桥连亚烷基(3-4C)取代。例如，L1可以是亚烷基、CO或SO2，X是任选取代的咪唑、唑、噻唑、苯并咪唑、苯并噻唑或苯并唑。或者，L1可以是键，而X是取代或未取代的二氢喹啉、四氢喹啉、吡喃吡啶、二氢吡喃吡啶、硫代吡喃吡啶、二氢硫代吡喃吡啶、二氢1，5-二氮杂萘或四氢1，5-二氮杂萘。
在上述式(4)中，Z可以是氢。
在上述式(4)中，Y可以是任选取代的咪唑、苯并咪唑、吡啶、吡啶、嘧啶或苯基，其中，环氮原子可任选被氧化。例如，Y可被卤素、腈、烷基、-OR、-SR、-NR2、-NRCOR、-OOCR、-COR、-CONR2、-COOR、-NO2、-NOH、-CF3取代，其中的R是H或烷基(1-6C)。
在上述式(4)中，各X或Z可任选被卤素、硝基、氰基、羧基、C1-10烷基、C2-10烯基、C3-10环烷基、羟基、硫醇、氨基、酰基、羧酸酯、氨基甲酸酯、氨甲酰、氨磺酰、与氢结合的羰基或磺酰基取代，或被C1-10烷基、C2-10烯基、C3-7环烷基或5-6元单环芳基取代；或者X或Z可任选被5-6元单环芳基、萘基或5-6元杂环取代；一实施方案中，用于本发明方法的化合物具有式(4A)或式(4B) 其中，l是0-3，R’是OH、MeO、SH SMe、CN、CO2Me、F、Cl、Br、NO2、CH3CO、NH2、NHCH3、N(CH3)2、CH3CONH、CH3SO2NH、CONH2、SO2NH2、CF3或Me；Z1、Z2和Z3各自独立为CH、CR’或N，其中，所述Z1、Z2和Z3中只有两个可以是N；
和L2和L3如式(4)中的定义。
在上述式(4A)或(4B)中，Z1、Z2和Z3都可以是CH或CR’。一实施例中，Z3是N，L3是CO。此外，L2和L3之一可以是SO2，而另一个是键或CH2。或者，L2和L3之一是CO而另一个是键或CH2。
在另一实施方案中，用于本发明方法的化合物具有式(4C) 其中，l是0-3，R’是OH、MeO、SH SMe、CN、CO2Me、F、Cl、Br、NO2、CH3CO、NH2、NHCH3、N(CH3)2、CH3CONH、CH3SO2NH、CONH2、SO2NH2、CF3或Me；k是0-2；Z1、Z2和Z3各自独立为CH、CR’或N，其中，所述Z1、Z2和Z3中只有两个可以是N；和X、L2和L3如式(4)中的定义。
在上述式(4C)中，Z1、Z2和Z3都可以是CH或CR’。一实施例中，Z3是N，L3是CO。此外，L2和L3之一可以是SO2，而另一个是键或CH2。或者，L2和L3之一是CO而另一个是键或CH2。
具有式(4)和(4A)-(4C)的化合物以及该化合物的合成方法描述于WO 02/22599，该文献通过引用纳入本文。
另一方面，用于本发明方法的CXCR4拮抗剂的例子有具有式(5)的化合物，或是其盐、前药和立体化学形式
环A任选含有选自N、O或S的杂原子；虚线表示任选为不饱和键；R1、R2和R3独立为H、卤素、取代或未取代的烷基、羟基、氨基、硫醇或酰基；或者R2和R3可以一起形成苯环；k是0-4；l是0、1或2；X是未取代的或取代的C或N；或是O或S；Ar是芳族或杂芳族部分的残基；各n独立为0-2；各R独立为H或烷基(1-6C)；j是0-3；和各Y独立选自下组卤素；OR；SH；SO；SO2；任选取代的苯基；-(CR2)mOR；-(CR2)mCOR；-(CR2)mCOOR；-(CR2)mN＝CH-NR2；-(CR2)mCONHNHR；-(CR2)mCN；-(CR2)mNR52；-(CR2)mNR(CR2)mNRR4；-(CR2)mNR(CR2)mNR(CR2)mNR52；-(CR2)mCO(CR2)mNR52；
-(CR2)mCO(CR2)mNR(CR2)mNRR4；-(CR2)mCO(CR2)mNR(CR2)mNR(CR2)mNR52；-(CR2)mNRCO(CR2)mNRR4；-(CR2)mNRCO(CR2)mNR(CR2)mNR52；-(CR2)mNRCO(CR2)mNR(CR2)mNR(CR2)mNR(CR2)mNR52；-(CR2)mNROH；-(CR2)mCONROH；-(CR2)mCR＝NOH；-NHNHR；-CH＝N-Z；和-胍基或脒基，其中的每一个可通过(CR2)m部分连接到Y；其中，R是H或烷基(1-6C)，各m独立为0-4，且各R4和各R5独立为H、烷基(1-6C)、烯基(2-6C)、炔基(2-6C)或酰基(1-6C)，各自可被一个或多个非芳族、非杂环取代基任选取代，其中，两个R5可以连接形成任选含有一个或多个选自N、O或S的其它杂原子的环胺；a表示环A和N之间的连接基；b表示环E和N之间的连接基；和其中，Z是含有5-12个环成员的芳族或杂芳族部分。
在上述式(5)中，Ar可以是5-6元单环或9-12元稠环系统。例如，Ar可以是苯、萘、二氢萘、四氢萘、吡啶、嘧啶、喹啉、异喹啉、咪唑、苯并咪唑、氮杂苯并咪唑、苯并三唑、呋喃、苯并呋喃、噻唑、苯并噻唑、唑、苯并唑、吡咯、吲哚、咪唑、四氢喹啉、四氢异喹啉、吡唑、噻吩、异唑、异噻唑、三唑、四唑、二唑、噻二唑、咪唑啉或苯并吡喃。在具体实施例中，Ar是苯、苯并咪唑、苯并噻唑、咪唑、唑、苯并三唑、噻唑、吡啶或嘧啶。一实施方案中，至少一个可以是Y的是-(CR2)mNR52。
在上述式(5)中，R2和R3一起形成苯并取代基。一实施方案中，X是N，环E包含偶联到一个N的π键。一实施方案中，环E在2位偶联到分子的剩余部分。
在上述式(5)中，环A可以是饱和的，l是1。一个实施例中，k是0-1。其它实施例中，包含A的环系统是四氢喹啉或是其取代形式。
在上述式(5)中，(CR2)an和(CR2)bn之一可以是CH2，而另一个是键。例如，(CR2)an可以是键而(CR2)bn是CH2。
具有式(5)的化合物及该化合物的合成方法描述于WO 02/34745，该文献通过引用纳入本文。
另一方面，用于本发明方法的CXCR4拮抗剂的例子有具有式(6)的化合物，或是其盐、前药和立体化学形式 其中，X和Y独立为N或CR1；Z是S、O、NR1或CR12；R1-R6各自独立为H、卤素、O(C＝O)R、NR(C＝O)R、OR、SR、NR2、COOR、CONR2，其中的R是H或任选取代的烷基、烯基、炔基或芳基；或R1-R6各为烷基(C1-10)、烯基(C2-10)、炔基(C2-10)、芳基(C5-12)、芳基烷基、芳基烯基或芳基炔基，各基团可任选被取代并任选含有O、S或N；或任选取代的酰基、芳基酰基、烷基-烯基-、炔基-或芳基磺酰基，其中，各烷基、烯基、炔基或芳基部分可含有O、O或N；n1是0-4；n2是0-1，其中，*表示C≡C可被取代成CR5＝CR5；n3是0-4；其中，n1+n2+n3大于或等于2；b是0-2；其中，R基团的以下组合可偶联形成一个环，该环可以是饱和或不饱和的R2+R2一个R2+R3R3+一个R4，
R4+R4，一个R5+另一个R5，一个R5+一个R6，和R6+R6；其中，当环的组成部分是两个R5时该环可以是芳环；和其中，当n2是1时，n1和n3都不能是0。
一实施方案中，用于本发明方法的化合物具有式(6A)，或是其盐、前药和立体化学形式 其中，R1-R6和n1-n3如式(6)中的定义。
在另一实施方案中，用于本发明方法的化合物具有式(6B)或式(6C)，或是其盐、前药和立体化学形式 其中，n是0-1；d是0-3；虚线是任选的π键；和
R1-R6如式(6)中的定义。
再在另一实施方案中，用于本发明方法的化合物具有式(6D)，或是其盐、前药和立体化学形式 其中，R1-R6如式(6)中的定义，n4是2-6。
在上述式(6)或(6A)-(6D)中，各R1可以是H、卤素、烷基、烷氧基或CF3。一实施方案中，各R2是H或烷基。在另一实施方案中，各R3是H、烷基、烯基、芳基烷基或芳基。
在上述式(6)或(6A)-(6D)中，各R4可以是H、烷基或芳基。或者，两个R4可形成任选取代的芳环或杂芳环。例如，两个R4可形成苯基或吡啶基环，该环可被卤素、烷基、卤化的烷基、羟基或烷氧基取代。
在上述式(6)或(6A)-(6D)中，各R5可以是H、烷基或烯基，其中，所述烷基或烯基可任选被取代。一实施方案中，在单个碳上或在非相邻或相邻的碳上的烷基或烯基取代基形成饱和或不饱和环。一实施例中，取代基形成非芳环，在另一实施方案中，一个R5是肟、烷基化肟、烷基化羟胺、羟胺或卤素。
在上述式(6)或(6A)-(6D)中，各R6可独立为H或者芳基烷基或芳基磺酰基，其中，芳基部分可含有杂原子；或者两个R6可形成胍基、羰基或氨甲酰基。一实施方案中，两个R6或者一个R5和一个R6可一起形成饱和环、不饱和环或芳环，其中，各环可任选含有N、S或O。
具有式(6)的化合物及该化合物的合成方法描述于WO 03/055876，该文献通过引用纳入本文。
另一方面，用于本发明方法的CXCR4拮抗剂的例子有具有式(7)的化合物，或是其盐、前药和立体化学形式 其中，X是(CR32)o-(CR3＝CR3)p-(CR32)q-NR52；(CR32)r-R4；或任选取代的苄基或任选含有N、O或S的单环或双环；Y是含有氮原子的任选取代的5-12元杂环，所述杂环可以是单环或稠环，并且是芳族的或部分芳族的；A和R1独立为卤素、CF3、氰基、硝基、OR、SR、NR2、COOR、CONR2、NSO2R、OSO2R或OSO2NR，其中各R是H、烷基、烯基、炔基或芳基；或A和R1独立为任选取代的烷氧基(C1-10)、烷基(C1-10)、烯基(C2-10)、炔基(C2-10)、芳基(5-12元)、芳基烷基、芳基烯基或芳基炔基，它们各自可任选含有O、S或N；R2和R3独立为H或任选取代的烷基；R4是任选取代的杂环环或杂芳基；或R4包括脲、羟基脲、磺酰胺、乙酰胺、胍、氨腈、羟胺、氨腈、咪唑烷-2-酮或是烟酰胺部分，它们各自可被杂环取代；R5是H或烷基；l和n独立为0-4；p是0-1；o和q独立为1-4；和r是1-6。
在上述式(7)中，R1和R2中至少有一个可以不是H，并且可以相连形成额外的环，如芳基或杂芳基。一实施例中，两个As可形成一个额外的环。另一实施例中，X是(CR32)r-R4，r至少为2，R4是2-吡啶基、喹啉基、咪唑基或呋喃。
在上述式(7)中，X可以是(CR32)o-(CR3＝CR3)p-(CR32)q-NR52，其中，R3和R5各自独立为H，且p可以是0。一具体实施方案中，o和q一起为2-6。或者，X可以是(CR32)r-R4，其中，R4是杂环或杂芳基，它们各自可含有氮原子。例如，R4可以是氮杂环丁烷、吡咯烷基、吡啶基、硫苯基(thiophenyl)、咪唑基或苯并咪唑基。或者，X可以是任选含有N、O或S的单环或双环，如环己基、哌啶、8-氮杂-二环[3.2.1]辛烷或3-氮杂-二环[3.2.1]辛烷。再在另一实施方案中，X是任选取代的苄基，特别是二取代的苄基。
在上述式(7)中，Y可以是5-6元杂环，该环在连接到分子剩余部分的原子相邻处含有氮原子。所述5-6元杂环可与另一个环稠合。例如，Y可以是吡啶、嘧啶、吡嗪、吲哚、苯并咪唑、苯并噻唑、咪唑、异喹啉、四氢喹啉、哒嗪、噻唑或苯并咪唑。一具体实施例中，Y是四氢喹啉，特别是5，6，7，8四氢喹啉部分，它在8位连接到分子的剩余部分。
在上述式(7)中，各任选取代的部分可被杂原子、卤素、CF3、氰基、硝基、羟基、烷氧基、羰基、羧基、氨基、酰氨基、亚氨基、氰基、磺酰基、C1-6烷基或C2-6烯基取代，其中各自可含有N、O或S；或被芳基、杂芳基、碳环或杂环取代，其中各自还可被相同的取代基取代。
具有式(7)的化合物及该化合物的合成方法描述于WO 04/091518，该文献通过引用纳入本文。
另一方面，用于本发明方法的CXCR4拮抗剂的例子有具有式(8)的化合物，或是其盐、前药和立体化学形式 其中，A和B各自独立为任选取代的5-6元单环杂芳基；环C是任选取代的饱和或部分饱和的5-7元环，并可含有氮原子之外的杂原子，其中，所述杂原子是N、O或S；Y是H、含有一个或多个杂原子的C1-6烷基或是环部分，它们各自可任选被取代；R1和R2独立为H、卤素或任选取代的烷基；L是(CR32)1或NR(CR32)1，其中，烷基键可被烯基或炔基键替代；l是1-6；和各R3是H或烷基。
在上述式(8)中，当C是哌啶基或1，2，3，6-四氢吡啶基且环A和B是吡啶基时，R1和R2中至少有一个不是H。在其它实施方案中，当环C是哌啶基且环A和B是吡啶基时R1和R2不都是萘基。再在另一实施方案中，如果L-Y是CH3则环C不是4-氧-哌啶-3，5-二羧酸；且如果L-Y是苄基则环C不是4-羟基-1，2，5，6-四氢-吡啶-3-羧酸。
在上述式(8)中，R1和R2可在邻接于环C的键的位置。一实施例中，R1和R2独立为未取代的烷基，如甲基。
在上述式(8)中，环A和B各自可以是吡啶、嘧啶、吡嗪、哒嗪、1，2，3-三嗪、1，2，4-三嗪、1，3，5-三嗪、1，2，4，5-四嗪、吡咯、咪唑、吡唑、1，2，3-三唑、1，2，4-三唑、四唑、噻唑、唑、异噻唑、异唑、1，2，3-噻二唑、1，3，4-噻二唑、1，2，3-二唑、1，3，4-二唑、喹啉、异喹啉、喹喔啉、喹唑啉、酞嗪(pthalazine)、噌啉、1，2，3-苯并三嗪、1，2，4-苯并三嗪、吲哚、苯并咪唑、1H-吲唑、苯并唑、苯并噻唑、苯并[d]异唑、苯并[d]异噻唑或嘌呤。一具体实施例中，环A和B各自为吡啶、嘧啶、咪唑或苯并咪唑，且环A和B可以相同。环A和B各自还可以在连接该环与环C的键相邻的位置上含有单个取代基，所述取代基可以相同。
在上述式(8)中，环C可以是饱和的环，或者可以含有双键。例如，环C可以是吡咯烷、哌啶、六氢-1H-氮杂(azepine)、哌嗪、吗啉、硫代吗啉、azepane、azocane、2，3，4，7-四氢-1H-氮杂、2，3，6，7-四氢-1H-氮杂、3-吡咯啉、1，2，3，6-四氢吡啶、异二氢吲哚、1，2，3，4-四氢异喹啉、2，3，4，5-四氢-1H-苯并[d]氮杂、2，3，4，5-四氢-1H-苯并[c]氮杂、环丁烷、环戊烷、环己烷、环庚烷、环辛烷、环戊烯、环己烯、环庚烯、环辛烯、四氢吡喃、四氢硫代吡喃、oxepane、thiepane、oxocane或thiocane。一具体实施例中，环C是吡咯烷、哌啶、哌嗪或六氢-1H-氮杂。环C可被任选取代的烷基、卤素、氰基、肟、OR或C＝N-OR取代，其中，R是任选取代的烷基。
在上述式(8)中，Y可以选自下组-(CR2)mNR2，-(CR2)mNR2(CR3)，-(CR2)mNR(CR2)mNR2，-(CR2)mNR(CR2)mNR(CR2)mNR2，-(CR2)mOR，-(CR2)mCO(CR2)mOR，-(CR2)mCO(CR2)mNR2，
-(CR2)mCO(CR2)mNR(CR2)mNR2，-(CR2)mNRCO(CR2)mNR2，-(CR2)mNR(CR2)mCO2R，-(CR2)mNR(CR2)mCOR，-(CR2)mNR(CR2)mSO2R，-(CR2)mNRCO(CR2)mNR(CR2)mNR2，-(CR2)mNRCO(CR2)mNR(CR2)mNR(CR2)mNR(CR2)mNR2，-(CR2)mNR(CR2)mOR，-(CR2)mCR＝NOH，-(CR2)mCONR(CR2)mOR，-(CR2)mN[(CR2)mCO2R]2；-(CR2)mONRCONR2，-(CR2)m-Z，-(CR2)mNR-(CO)mZ，-(CR2)mNR-(CR2)mZ，和-(CR2)m-CR＝N＝Z；其中，各R是H或任选取代的烷基，各m独立为0-4；和Z是含有5-12个环成员的任选取代的芳族或杂芳族部分。
一具体实施方案中，Y是(CH2)1NR2且l是1-10。或者，Y可以是5-12元芳族、杂芳族或杂环部分，其中各自可以是单环或稠环。例如，Y可以是苯基、咪唑、吡啶、噻吩、吡咯烷、吡唑、哌啶、氮杂环丁烷、苯并咪唑、苯并[c]异唑或噻唑。此外，Y可任选被以下基团取代卤素；氰基；硝基；烷氧基；卤化烷基；取代的羰基；环部分，如含有N、O或S的5-12元芳基或杂芳基；或任选含有一个或多个N、O、S的烷基、烯基或杂烷基部分，其中各自可以是任选取代的并任选可以是氧化物形式，在具体实施例中，Y被吡啶、苯基、哌啶或2H-四唑取代。
在上述式(8)中，各任选取代的基团可被无机部分如杂原子、卤素、硝基、羟基、羧基、氨基、酰氨基、氰基或磺酰基取代；或者可被烷基(C1-10)、烯基(C2-10)、炔基(C2-10)、芳基(5-12元)、芳基烷基、芳基烯基或芳基炔基取代，其中各自可任选含有杂原子，如O、S或N，且其中各自还可被相同的取代基取代。例如，各任选取代的烷基可被杂原子如N、O或S取代，或被碳环、杂环、芳基或杂芳基取代基取代。
具有式(8)的化合物及该化合物的合成方法描述于WO 04/093817和2004年10月28日提交的美国专利申请序列号10/977,221中，所述各文献通过引用纳入本文。
可用于实践本发明方法的其它CXCR4抑制剂包括但不限于CTCF-0214；CTCF-9908；CP-1221(线性肽、环肽、天然氨基酸、非天然氨基酸、以及肽模拟化合物)；T140及类似物；4F-苯甲酰基-TN24003；KRH-1120；KRH-1636；KRH-2731；鲎肽(polyphemusin)类似物；ALX40-4C；或者WO 01/85 196、WO 99/50461、WO01/94420、WO 03/090512中描述的那些，所有这些文献通过引用纳入本文。
可以单独使用或者与上述CXCR4抑制剂组合使用的其它试剂包括以下这些环磷酰胺；吉西他滨；环孢菌素；Rituxan；沙利度胺；Clofarabine；Velcade；Antegren；Ontak；Revlimid(沙利度胺类似物)；Prochymal；Genasense/Oblimersen；Gleevec；Glivec(伊马替尼)；他米巴罗汀(Tamibarotene)；奈拉滨(Nelarabine)；galium nitrate；PT-100；Bexxar Zevalin；Pixantrone；Onco-TCS；拓扑异构酶(topoisomerate)抑制剂；重组G-CSF(非格司亭；来格司亭；ETRX101；和TLK199/Telintra)；重组GM-CSF(沙格司亭，莫拉司亭)；重组SCF(安西司亭(ancestim))；重组G-CSF的共价偶联物(peffilgrastim)等。
特别优选的式(1)的化合物的实施方案包括2，2’-bicyclam；6，6’-bicyclam；美国专利Nos.5021409和6001826中列出的实施方案，尤其是美国专利No.5,583,131中列出的1，1’-[1，4-亚苯基-双(亚甲基)]-双-1，4，8，11-四氮杂环十四烷，这里称为AMD3100。同样优选的是WO 03/055876中描述的N’-(1H-苯并咪唑-2-基甲基)-N’-(5，6，7，8-四氢喹啉-8-基)-丁烷-1，4-二胺。对本发明方法有用的化合物的其它合成方法描述于上述美国专利和申请以及美国专利6,489,472和2004年3月14日提交的临时申请60/553,589中。
本发明的化合物可被制成前药形式，即受到保护的形式，它可在给予对象后释放出本发明的化合物。通常，保护基在体液(如血液)中被水解从而释放出活性化合物或在体内被氧化或还原以释放出活性化合物。关于前药的讨论可在Smith和Williams的《药物设计原则介绍》(Introduction to the Principles of Drug Design)，Smith，H.J.；Wright，第二版，伦敦(1988)中找到。
当式(1)的化合物是多胺时，可以将其制成酸加成盐或金属络合物的形式给予。合适的酸加成盐包括适合生物的无机酸，包括HCl、HBr、硫酸、磷酸等，以及有机酸如乙酸、丙酸、丁酸等，以及含有一个以上羧基的酸如草酸、戊二酸、己二酸等的盐。通常，在生理pH下，本发明的化合物可以呈酸加成盐形式。特别优选的是盐酸盐。此外，当制成纯化形式时，所述化合物也可被结晶为水合物。那些含有手性中心的式(1)的化合物的形式可以是纯的或者可含有立体异构体的混合物，包括外消旋混合物或者各种光学纯度的混合物。
如上所述，式(1)的化合物与GROβ(包括其修饰形式)组合使用。“GROβ的修饰形式”包括其截短形式，如美国专利6447766；6399053；6080398；PCT公开99/26645；PCT公开WO 97/15595；PCT公开WO 02/02132；PCT公开WO 97/15594；和PCT公开WO 94/29341中所述的那些。“GROβ的修饰形式”还包括其多聚形式。因此，“修饰形式”包括那些在成熟蛋白质的氨基末端截短了2-约8个氨基酸的形式、在成熟蛋白质的羧基末端截短了2-约10个氨基酸的形式、修饰的和/或截短的蛋白质的多聚形式，例如二聚体、三聚体、四聚体和其它聚集形式。特别优选GROβ的截短形式，尤其是由氨基酸5-73构成的SB251353以及它的氨基酸69被脱酰氨基的形式。
CXCR4抑制剂(包括其混合物)与趋化因子GROβ和/或其修饰形式组合给予。也可采用对治疗或营养有用的其它活性成分，如抗生素、维生素、草本提取物、抗炎药、葡萄糖、解热药、镇痛药、环磷酰胺、重组G-CSF(非格司亭(Neupogen)、格拉诺赛特(Granocyte)/Neutrogin和Stemgen)、重组G-CSF的共价偶联物(Neulasta)、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)(如Leukine和Luecomax)、ETRX-101、TLK199/TILENTRATM、CTCE-0214(SFD-1的截短的SDF-1α肽类似物)、VLA-4抑制剂、白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-3(IL-3)、白细胞介素-8(IL-8)、PIXY-321(GM-CSF/IL-3融合蛋白)、巨噬细胞炎性蛋白、干细胞因子、血小板生成素、GRO家族的其它成员、或者化疗等。这些可与干细胞表达系统或者医疗装置套件(如Replicell、Allogen以及TransStem Device TransCord Device ACE System)一起使用。
可用此领域熟知的常规加工技术将本发明的化合物制成用于动物对象的给药制剂。适合于于式(1)表示的那些化合物的特定给药方式的制剂可在《雷明顿药物科学》(Remington’s Pharmaceutical Sciences)(最新版本，Mack Publishing Company，Easton，PA)中找到；类似地，给予多肽(如GROβ及其修饰形式代表的多肽)的方法也可在其中找到。
优选地，所述化合物是通过注射给予的，更优选通过静脉注射给予，但也可以通过皮下注射或腹膜内注射等方法给予。其它肠道外给药途径包括肌肉内注射和关节内注射。对于静脉内或肠道用药，所述化合物可以根据需要和赋形剂一起被制成合适的液体形式。所述组合物可包含脂质体或其它合适的载体。对于静脉内注射，可用标准制剂如Hank溶液使所述溶液等渗。
除注射外，也可采用其它给药途径。所述化合物可被制成片剂、胶囊剂、糖浆剂、粉末剂或其它适合口服给药的形式。通过使用合适的赋形剂，也可利用栓剂或鼻内喷雾通过粘膜给予这些化合物。使用合适的渗透剂并控制释放速度透皮给药也是有效的。
所选制剂和给药途径应根据各个对象、将被治疗的对象的症状、通常还要根据主治医生的判断而确定。
CXCR4抑制剂的合适的剂量范围应根据这些情况变化，但通常，所给予的化合物约为每千克体重0.1μg-5mg；优选约为每千克体重1μg-300μg；更优选约为每千克体重10μg-100μg。因此，对于通常为70千克的人类对象，剂量范围约为0.7μg-350mg；优选约为700μg-21mg；更优选约为700μg-7mg。与静脉内给药相比，当通过口服或透皮给予化合物时，剂量可以较高。由于本发明的方法涉及至少一种式(1)的化合物与GROβ相关趋化因子的组合，因此采用较低剂量是有利的，通常低2倍，更优选低4倍。至少一种CXCR4抑制剂和GROβ组分的组合可以在一种制剂中一起给予、在单独的制剂中通过相同或不同途径同时给予、或者在不同时刻也是通过相同或不同途径给予。就特定对象的给药方案最佳化是本领域的一般技术人员熟知的。
当静脉内给药或透皮给药时，CXCR4抑制剂和GROβ趋化因子可以一次推注剂量给予、一段时间给予一次，或以多剂量给予。
除了直接给予对象外，本发明的组合物还可用于离体处理过程以制造细胞培养物，这种细胞培养物然后被用来补充对象的血细胞。离体处理可在获自外周血或骨髓的自体同源细胞或来自相匹配供体的同种异体移植物上进行。所述单独的或与GROβ组分组合的抑制CXCR4的化合物的浓度也是优化给药途径时要考虑的因素。
对本发明的方法反应良好的对象包括医学对象和动物对象，通常包括人类患者。对本发明的方法有效的其它对象有猫类、狗类、大型动物、鸟类如鸡类等。通常，任何对象都可从祖细胞和/或干细胞增加中受益，或者，其祖细胞和/或干细胞将进行干细胞移植的对象也适合本发明的方法。
用本发明的方法将改善或从中受益的症状通常包括造血疾病，如化学治疗或放射治疗导致的再生障碍性贫血、白血病、药物诱导性贫血和造血不足，包括中性粒细胞减少和血小板减少。本发明的方法也可用于提高免疫抑制治疗中以及这以后的移植的成功率，且对伤口愈合和处理细菌性炎症更加有效。本发明的方法还可用于治疗免疫妥协的患者或免疫系统被削弱的患者。典型的症状，用本发明的方法可减轻或从中受益，包括受到逆转录病毒感染的对象，更特别的是受到人免疫缺陷病毒(HIV)感染的对象。因此，本发明的方法可广泛用于这些症状，这些症状中，对象祖细胞和/或干细胞增加是有益的，或者，收获祖细胞和/或干细胞以随后进行干细胞移植是有益的。还可给予本发明的化合物以通过激活骨髓干细胞而使心肌再生。
现在已经大致描述了本发明，应该理解，通过参考以下实施例将更容易理解本发明，这些实施例是以例举方式提出的，除非特别指出，它不是要限制本发明的范围。
实施例1制备1，1’-[1，4-亚苯基双(亚甲基)]双1，4，8，11-四氮杂环十四烷将1，1’-[1，4-亚苯基双(亚甲基)]-双-三-(三氟乙酰基)-1，4，8，11-氮杂十四烷(3.30g，3.05mmol)溶于MeOH(6.0mL)。一次性加入K2CO3(1.27g，9.1mmol)。将此悬浮液加热回流3小时。然后在冷却的混合物中加入甲苯(30mL)。通过与甲苯形成共沸物除去MeOH。除去所有MeOH后将悬浮有无机盐的热甲苯溶液过滤并浓缩以得到不含碱的AMD3100(1.32g，86％)，其为白色固体。该产品的所有特征与按照报道的方法制备的可靠样品良好吻合。
实施例2制备N’-(1H-苯并咪唑-2-基甲基VN’-(5，6，7，8-四氢喹啉-8-基)-丁烷-1，4-二胺 在(1-叔-丁氧羰基-1H-苯并咪唑-2-基甲基)-(5，6，7，8-四氢-喹啉-8-基)-胺(0.169g，0.451mmol)的CH3CN(5mL)溶液中加入二异丙基乙胺(0.25mL，1.44mmol)，然后加入4-溴代丁腈(0.10mL，1.01mmol)。所得混合物在80℃加热5天，然后冷却至室温。浓缩混合物，残余物在CH2Cl2(20mL)和盐水(10mL)之间分配。将各相分离，水相用CH2Cl2萃取(3×10mL)。将合并的有机提取物干燥(Na2SO4)并浓缩。通过硅胶柱层析(30∶1∶1 CH2Cl2-CH3OH-NH4OH)纯化粗物质，得到108mg(54％)黄色泡沫。
将上面得到的中间体(108mg，0.24mmol)溶于NH3饱和的甲醇(4mL)，用拉尼镍(100mg)处理，并在50psi H2下在Parr振荡器上放置24小时。混合物通过Celite过滤，滤饼用甲醇洗涤。减压浓缩洗脱液。通过硅胶径向层析(1mm板，20∶1∶1CH2Cl2-CH3OH-NH4OH)纯化得到33mg(39％)不含碱的标题化合物，其为白色泡沫。
将此白色泡沫(33mg)转化成氢溴酸盐，然后从甲醇/醚重新沉淀中间固体物质，得到所需化合物(40mg)，其为白色固体。1H NMR(D2O)δ1.52(br s，4H)，1.74-1.88(m，1H)，1.95-2.08(m，1H)，2.15-2.21(m，1H)，2.34-2.39(m，1H)，2.50-2.61(m，1H)，2.79-2.86(m，3H)，2.99-3.02(m，2H)，4.38(d，1H，J＝16.8Hz)，4.47-4.56(m，2H)，7.58-7.63(m，2H)，7.76-7.88(m，3H)，8.34(d，1H，J＝7.8Hz)，8.62(d，1H，J＝5.7Hz)；13C NMR(D2O)δ20.42(2碳)，25.03，25.42，27.64，39.50，48.20，51.71，60.64，114.26，125.93，126.93，131.05，139.32，140.62，148.09，150.31，151.82；ES-MS m/z 350(M+H)。C21H27N5·2.9HBr·2.2H2O的计算值C，40.44；H，5.54；N，11.23；Br，37.15。实测值C，40.38；H，5.42；N，10.85；Br，37.42。
实施例3制备N’-(1H-苯并咪唑-2-基甲基)-N’-(S)-5，，6，7，8-四氢-喹啉-8-基-丁烷-1，4-二胺(盐酸盐) 制备4-邻苯二甲酰亚氨基-丁醛将4-氨基-1-丁醇(5.0g，56mmol)和邻苯二甲酸酐(8.3g，56mmol)在20％MeOH/CHCl3(140mL)中的溶液搅拌回流66小时。将混合物冷却至室温并依次用水(3×75mL)和1NNaOH洗涤(3×50mL)。将分离的有机层干燥(MgSO4)，浓缩，并通过快速层析(内径5cm，120g硅胶，用2％MeOH/CH2Cl2洗脱)纯化以得到所需的醇，其为白色固体(4.21g，34％)。
在30分钟内，在TPAP(340mg，0.96mmol)、NMO(3.4g，29mmol)和3分子筛(10g)的CH2Cl2(100mL)浆液中边搅拌边逐滴加入上面得到的醇(4.2g，19mmol)的CH2Cl2(50mL)溶液。加入之后将黑色浆液在氮气下搅拌30分钟，真空浓缩，并通过快速层析纯化(内径5cm，80g硅胶，用EtOAc洗脱)以得到纯的标题化合物，其为灰色固体(3.30g，80％)。1H NMR(CDCl3)δ1.97-2.07(m，2H)，2.54(t，2H，J＝7.2Hz)，3.74(t，2H，J＝6.8Hz)，7.71-7.75(m，2H)，7.82-7.88(m，2H)，9.77(s，1H)。
采用通用方法B在二氯甲烷(150mL)中使上面得到的4-邻苯二甲酰亚氨基-丁醛(3.21g，14.8mmol)与S-(5，6，7，8-四氢-喹啉-8-基)-胺(2.40g，16.3mmol)和NaBH(OAc)3(9.54g，45.0mmol)反应。通过快速层析(内径5cm，200g硅胶，用5％MeOH/CH2Cl2洗脱)得到纯的2°胺(2°amine)，其为白色泡沫状固体(2.48g，48％)。
在上面得到的胺(2.5g，7.1mmol)的乙腈(70mL)溶液中加入二异丙基乙胺(1.9mL，10.7mmol)、1-叔丁氧羰基-2-氯甲基苯并咪唑(2.3g，8.6mmol)和碘化钾(115mg，0.70mmol)。混合物在氮气下于60℃搅拌15小时，冷却至室温并真空浓缩。残余物在氯仿(150mL)和水(100mL)之间分配。将分离的有机层干燥(MgSO4)，浓缩，并通过快速层析(内径5cm，120g硅胶，用CH2Cl2洗脱以除去未反应的氯化物，然后用2％MeOH/CH2Cl2洗脱以除去不需要的产物)纯化以得到所需的胺，其为淡黄色泡沫状固体(3.50g，85％)。
用一水合肼(1.80g，36mmol)处理上面得到的胺(3.33g，5.7mmol)的乙醇(30mL)溶液，搅拌3小时。然后真空浓缩混合物并通过快速层析(内径5cm，80g硅胶，用5％MeOH/CH2Cl2洗脱)纯化以得到未保护的胺，其为淡黄色泡沫状固体(1.70g，86％)。
将上面得到的胺(1.70g，4.86mmol)溶于冰醋酸(5mL)并用HCl饱和的醋酸(5mL)处理。溶液然后室温搅拌5分钟，然后边剧烈搅拌并将其缓慢滴入二乙醚(400mL)。所得浆液通过烧结玻璃漏斗抽滤，滤饼用二乙醚洗涤(3×100mL)并在40℃的真空炉中干燥16小时以得到所需化合物，其为白色固体(2.34g，94％)。1H NMR(D2O)δ1.46-1.63(m，4H)，1.70-1.87(m，1H)，1.97-2.07(m，1H)，2.10-2.21(m，1H)，2.28-2.38(m，1H)，2.55-2.65(m，1H)，2.81-2.90(m，3H)，2.91-3.00(m，2H)，4.30(d，1H，J＝16.3Hz)，4.41(d，1H，J＝16.3Hz)，4.42-4.48(m，1H)，7.48-7.51(m，2H)，7.70-7.75(m，3H)，8.20(d，1H，J＝8.2Hz)，8.53(d，1H，J＝4.5Hz)；13C NMR(D2O)δ20.36，20.43，21.67，24.99，25.24，27.60，39.51，48.29，51.78，60.54，114.46(2碳)，125.63，126.10(2碳)，132.53，139.58，140.16，147.34，151.41，151.81。ES-MS m/z 350(M+H)。C21H27N5·2.5HCl·2.0H2O·0.6CH3COOH的计算值C，52.01；H，7.06；N，13.66；Cl，17.29。实测值C，52.15；H，7.09；N，13.40；Cl，17.56。
通过手性HPLC采用以下条件测得该化合物的对映体纯度为96.7％设备HewlettPackard 1100 HPLC(VWD1)；柱Chiralpak OD，0.46cm×25cm；流动相A90∶10己烷/异丙醇，含0.1％DEA，B异丙醇；等度洗脱90％A，10％B；总运行时间20分钟；流速0.5毫升/分钟；温度10℃；检测器UV@270nm；进样体积20μL。
S对映体的保留时间＝16.3分钟，R对映体的保留时间＝21.9分钟。
实施例4试验过程如之前的描述(Pelus，L.M.等，Blood(2001)971534-1542；Blood(2004)103110-119)。AMD3100是1，1’-[1，4-亚苯基-双(亚甲基)]-双-1，4，8，11-四氮杂环十四烷。
与单独使用的AMD3100或GROβ相比，AMD3100和GROβ的组合对外周血的活化作用活化作用(mobilization)试验在BALB/c小鼠(每组3只小鼠)中进行。就单独使用AMD3100或GROβ进行活化而言，在之前的试验中，PBSC活化作用是在任何一种试剂的活化作用峰值处测量(quantify)的。因此，PBSC活化作用是在皮下注射2.5mg/kg GROβ15分钟后以及皮下注射5mg/kg AMD3100 1小时后测量的。
在组合物试验中，PBSC活化作用是在皮下注射一次2.5mg/kg GROβ(R & DSystems)(用盐水配制)和5mg/kg AMD3100后5、15、30、60和150分钟时测量的。在不同的皮下位置分别并同时注射化合物。注射是预定的，因此在每次试验中可同时评价对照小鼠和活化了的小鼠。用CO2窒息杀死小鼠并用涂有EDTA(乙二胺四乙酸)的注射器通过心脏穿刺获得血液。在Lympholyte-M(Cedarlane Labs，Hornby，ON，加拿大)上分离外周血(0.4mL)以获得PBMC。在Hemavet Mascot(CDC Technologies，Oxford，CT)上进行全血细胞计数(CBC)。在Wright-Giemsa染色的(Hema-Tek 1000，Bayer，Elkhart，IN)血涂片或脾和骨髓细胞离心涂片(cytospin)标本(Shandon，Pittsburgh，PA)上进行手工区分。
CFU-GM测定在含有15％热灭活胎牛血清(Hyclone Sterile Systems，Logan，UT)和0.3％琼脂(Difco Laboratories，Detroit，MI)的McCoy 5A培养基中对PBMC进行的CFU-GM测定。将PBMC培养到2×105/mL。用10ng/mL重组鼠GM-CSF(rmGM-CSF)、10ng/mLrmIL-1α和50ng/mL干细胞因子(SCF)刺激CFU-GM。将来自各动物的一式三份培养物在37℃、5％CO2、5％O2的空气中培育7天。将CFU频率乘以每毫升血液的PBMC(按Lympholyte-M分离后白细胞(WBC)的回收率校正)得到测定每毫升血液中的总CFU-GM。
表1

表2外周血区分总结

如表1和2所示，与单独使用AMD3100和GROβ相比，它们的组合以协同方式活化祖细胞、中性白细胞和所有的白细胞；且反应更加迅速。
应该理解，上面的详细描述和有关实施例只是为了例证而不是要限制本发明的范围。精通本领域的技术人员显然可对所述实施方案作出各种变化和修饰而不背离本发明的精神和范围。这里提及的美国专利和公开通过引用纳入本文。
权利要求
1.一种升高外周血或骨髓中祖细胞和/或干细胞数目的方法，所述方法包括用CXCR4拮抗剂和GROβ蛋白处理所述外周血或骨髓；其用量可有效升高所述外周血或骨髓中的所述祖细胞和/或干细胞数目。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述GROβ蛋白是GROβ蛋白的修饰形式。
3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述修饰形式是SB-251353。
4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述CXCR4拮抗剂具有下式Z-连接基-Z1(1)或其药学上可接受的盐或前药形式其中，Z是含有9-32个环成员的环状多胺，其中有2-8个是氮原子，所述氮原子被至少2个碳原子相互分隔，且其中所述杂环可任意含有氮原子以外的其它杂原子和/或可以和其它的环系统稠合；或Z具有式 其中，A包含含有至少一个N的单环或双环稠环系统，且B是H或有1-20个原子的有机部分，Z’可以按上面Z定义的形式，或者可具有式-N(R)-(CR2)n-X其中，各R独立为H或直链、支链或环状烷基(1-6C)，n是1或2，X是芳环，包括杂芳环，或是硫醇；或其中，Z’可以是含氮杂环或NR2，其中各R如上面的定义；“连接基”代表键、亚烷基(1-6C)或者可包括芳基、稠芳基、和/或包含在亚烷基链中的氧原子，和/或可包括酮基和/或氮原子或硫原子；或其前药或盐。
5.如权利要求4所述的方法，其特征在于，至少Z和Z’之一是环状多胺。
6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，Z和Z’是相同的。
7.如权利要求6所述的方法，其特征在于，所述(1)的化合物是1，1’-[1，4-亚苯基-双-(亚甲基)-双-1，4，8，11-四氮杂环十四烷或其前药或盐。
8.如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述化合物是N-[1，4，8，11-四氮杂环十四烷基-1，4-亚苯基双(亚甲基)]-2-(氨基-甲基)吡啶；N-[1，4，8，11-四氮杂环十四烷基-1，4-亚苯基双(亚甲基)]-N-甲基-2-(氨基甲基)吡啶；N-[1，4，8，11-四氮杂环十四烷基-1，4-亚苯基双(亚甲基)]-4-(氨基-甲基)吡啶；N-[1，4，8，11-四氮杂环十四烷基-1，4-亚苯基双(亚甲基)]-3-(氨基-甲基)吡啶；N-[1，4，8，11-四氮杂环十四烷基-1，4-亚苯基双(亚甲基)]-(2-氨基-甲基-5-甲基)吡嗪；和N-[1，4，8，11-四氮杂环十四烷基-1，4-亚苯基双(亚甲基)]-2-(氨基-乙基)吡啶；或其前药或盐。
9.如权利要求4所述的方法，其特征在于，或Z具有式 其中，A包含含有至少一个N的单环或双环稠环系统，且B是H或有1-20个原子的有机部分。
10.如权利要求9所述的方法，其特征在于，所述式(1)的化合物是N’-(1H-苯并咪唑-2-基甲基)-N’-(5，6，7，8-四氢喹啉-8-基)-丁烷-1，4-二胺，或其前药或盐。
11.如权利要求4所述的方法，其特征在于，式(1)为其酸加成盐的形式。
12.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述外周血细胞或骨髓含在活的对象中。
13.如权利要求12所述的方法，其特征在于，所述对象由于化疗或放疗而出现造血不足。
14.如权利要求12所述的方法，其特征在于，所述对象具有选自再生障碍性贫血、白血病、药物诱导性贫血、嗜中性白血球减少症和血小板减少症的症状。
15.如权利要求12所述的方法，其特征在于，所述对象是移植术接受者或是健康的干细胞供体。
16.如权利要求12所述的方法，其特征在于，所述祖细胞和/或干细胞加快伤口愈合、或者改善细菌性炎症、或者恢复受损的心脏组织或其它器官组织。
17.如权利要求16所述的方法，其特征在于，所述祖细胞和/或干细胞恢复受损的心脏组织。
18.如权利要求12所述的方法，其特征在于，所述CXCR4拮抗剂或GROβ蛋白通过静脉内或皮下途径给予所述对象。
19.如权利要求12所述的方法，其特征在于，所述CXCR4拮抗剂和GROβ蛋白是同时给予的。
20.如权利要求12所述的方法，其特征在于，所述CXCR4拮抗剂和所述GROβ蛋白是先后给予的。
21.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述外周血或骨髓维持在离体培养物中。
22.一种含有CXCR4拮抗剂和GROβ蛋白的组合产品。
23.如权利要求22所述的组合产品，其特征在于，所述组合能够升高外周血或骨髓中的祖细胞和/或干细胞数目。
24.一种药物组合物，其含有权利要求22所述的组合产品和药学上可接受的赋形剂。
25.一种药物组合物，其含有有效量的CXCR4拮抗剂和GROβ蛋白。
26.如权利要求25所述的药物组合物，用于升高外周血或骨髓中的祖细胞和/或干细胞数目。
全文摘要
公开了用与趋化因子受体CXCR4结合的化合物和CXCR2趋化因子GROβ(包括其修饰形式)升高动物对象中祖细胞和干细胞数的方法。
文档编号A61K38/16GK101094684SQ200580032332
公开日2007年12月26日 申请日期2005年8月11日 优先权日2004年8月13日
发明者G·J·布里杰, L·M·佩鲁斯 申请人:阿诺麦德股份有限公司