专利名称：格列本脲固体分散物、口服单方复方制剂及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种溶剂法制备的格列本脲固体分散物及其制备方法，同时涉及采用该分散物制备的固体口服片剂、胶囊剂；以及含有格列本脲固体分散物和盐酸二甲双胍的药物组合物。
背景技术：
格列本脲是第二代磺酰脲类口服降血糖药物，也称为优降糖，化学名称为N-[2-[4-[[[(环己氨基)羰基]氨基]磺酰基]苯基]乙基]-2-甲氧基-5-氯苯甲酰胺。它通过刺激胰岛素释放可强烈地降低血糖，其效果基于使胰岛的β细胞发挥其功能。格列本脲于70年代中期在我国上市。近30年中格列本脲已成为广大糖尿病患者不可缺少的药品，特别是中低收入患者首选药物，临床疗效确定、安全。目前市售格列本脲普通制剂的规格为2.5mg/片。
格列本脲在水介质中溶解度很小，在胃肠道不易被吸收，为了提高格列本脲的生物利用度，传统制剂工艺通常采用加入亲水性辅料(如微精纤维素、羧甲基淀粉钠、表面活性剂十二烷基硫酸钠等)、微粉化、包合等技术手段。据文献[复方格列本脲片的试制深圳市制药厂中国新药杂志2002；11(6)464-466]报道，在处方中加入崩解剂或表面活性剂对格列本脲的溶出度有较大影响。该试验数据仅限于体外溶出度，未涉及人体体内生物利用度。
另据文献[微粉化及包和技术对格列本脲溶出度的影响罗昕，平其能等.中国药学杂志.2003，38(3)193-196]报道，格列本脲微粉化和用β-环糊精包合对其溶出度有提高作用。同样的，该试验结果也仅限于体外溶出度，并未涉及人体体内生物利用度。
长期以来格列本脲制剂新剂型研究落后，90年代后期批准进口的“微粒化格列本脲片”规格为3.5mg/片。国产的“微粒化格列本脲片”，规格为3.5mg/片，该微粒化的技术是将格列本脲制成小于2μm的微粒。
在授权公告号CN1146427C专利中，涉及含有二甲双胍和格列本脲联合的固体口服剂型，规定了格列本脲的颗粒大小，能够使格列本脲生物利用度相当于分开服用二甲双胍和格列本脲所获得的格列本脲生物利用度。该专利技术并没有提高格列本脲的生物利用度。
在美国国家食品药品监督管理局(FDA)的网上公告[EB/OL].http://fda.gov/cder/foi/label/2000/21178Ibl.pdf.7/31/00.中涉及美国施贵宝公司开发的格列本脲和盐酸二甲双胍复合片。在该品的生物利用度研究中，2.5mg/500mg和5mg/500mg两个规格的格列本脲的平均血浆浓度-时间曲线下面积(AUC)分别比与二甲双胍同时给药的格列本脲单方制剂的AUC高18％和7％。
申请号为200410065993.7的中国发明专利涉及一种格列本脲(Glibenclamide)固体分散体，同时涉及该分散体的口服药物组合物，以及该分散体的制备方法。该专利涉及的格列本脲固体分散体的制备方法为研磨、熔融法或喷雾干燥法，并未涉及溶剂法。且该专利公开说明书的实验例中给出了生物利用度实验结果，结果表明两种药物成分和两种参比片等剂量给药时是生物等效的。从数据上证明该专利技术没有提高格列本脲的生物利用度，只是与普通片等效。
发明内容
本发明的一个目的在于，提供一种采用溶剂法制备具有高稳定性，高生物利用度的格列本脲固体分散物。
本发明的另一个目的在于，提供一种采用溶剂法制备格列本脲固体分散物的方法，其所制备格列本脲固体分散物的生物利用度为普通制剂的241.5％～313.2％。
本发明的再一个目的在于，公开一种采用格列本脲固体分散物制备的单方片剂或胶囊剂，其中每片中含有1.0mg格列本脲固体分散物与2.5mg普通片剂的生物利用度等效；每粒胶囊中含有1.0mg格列本脲固体分散物与普通2.5mg胶囊的生物利用度等效。
本发明还一个目的在于提供一种药物组合物，该组合物含有0.399mg-0.518mg优选0.5mg的格列本脲固体分散物或含有0.798mg-1.035mg优选1.0mg的格列本脲固体分散物分别和250mg盐酸二甲双胍及一种或多种药学上可接受的载体。
本发明进一步公开了含有格列本脲固体分散物和盐酸二甲双胍的组合物制备的片剂或胶囊剂。
本发明的技术方案通过以下内容予以实现一种格列本脲固体分散物，其特征在于该固体分散物的成分为格列本脲2-14份，载体4-28份，有机溶剂100-900份。采用溶剂法制备的格列本脲的固体分散物，理论上格列本脲生物利用度应得到提高。通过药动学实验确定生物利用度提高的水平，实验结果超出预期想象，通过多次药代动力学比较实验最终确定给药剂量既制剂规格。由其制备的单位剂量为1.0mg制剂的生物利用度与2.5mg普通制剂生物等效；单位剂量为0.5mg制剂的生物利用度与1.25mg普通制剂生物等效；且达峰时间与人体餐后降糖需求同步。
本发明所述的格列本脲固体分散物的制备方法将格列本脲与载体共同溶于一种有机溶剂中，超声使溶解澄清，40℃-60℃水浴，优选的温度为55±5℃，使用旋转蒸发仪减压蒸去有机溶剂，得到白色或类白色固体分散物，粉碎；也可以旋转蒸发呈粘液态后置干燥箱中干燥，再粉碎。粉碎后过150目、200目或250目筛，优选200目筛，置鼓风干燥箱中40-60℃，优选40℃，干燥24小时以上，优选48小时以上。
本发明所述的载体至少为聚乙二醇类，例如聚乙二醇2000、聚乙二醇4000、聚乙二醇6000，优选聚乙二醇4000；聚维酮类，例如聚维酮K25、聚维酮K30、聚维酮K90，优选聚维酮K25、聚维酮K30，更为优选为聚维酮K30；乙基纤维素类，例如乙基纤维素7cp、乙基纤维素10cp、乙基纤维素20cp、乙基纤维素45cp，优选乙基纤维素10cp、乙基纤维素20cp；表面活性剂类，例如泊洛沙姆124、泊洛沙姆188、泊洛沙姆237，优选泊洛沙姆188。
所用格列本脲与载体的成分为格列本脲2-14份、载体4-28份，优选为格列本脲6-12份、载体14-22份，更为优选格列本脲8-10份、载体16-20份。
本发明所述的有机溶剂包括乙醇、二氯甲烷、乙酸乙酯、丙酮、二甲亚砜。上述溶剂中优选为乙醇、二氯甲烷、乙酸乙酯，更为优选为二氯甲烷。所用的溶剂量以能将格列本脲和载体溶解完全的最低量为宜。通常载体与有机溶剂的成分为载体4-28份、有机溶剂100-900份，优选为载体14-22份、有机溶剂350-750份，更为优选载体16-20份、有机溶剂450-650份。
为了保障产品质量，本发明严格控制格列本脲固体分散物的质量，对其进行残留溶媒、有关物质项检查。残留溶媒测定符合人用药品注册技术要求国际协调会(ICH)关于残留溶剂浓度限度的标准。
有关物质检查符合《中华人民共和国药典2005版二部》关于格列本脲有关物质检查的要求。经上述检查合格的格列本脲固体分散物才允许使用。使用检查合格的格列本脲固体分散物可制备口服复方、单方制剂。
本发明所述的药物组合物，含有治疗有效量的格列本脲固体分散物和盐酸二甲双胍，其中将所述的组合物口服给药后，对于1.0mg/250mg格列本脲/盐酸二甲双胍，格列本脲的Cmax为115ng/mL～220.2ng/mL，更为具体的是复方片剂为(183.4±36.8)ng/mL、复方胶囊剂为(146±31)ng/mL；格列本脲的AUC值为384ng·h/mL～740.4ng·h/mL，更为具体的是复方片剂为(599.2±141.2)ng·h/mL、复方胶囊剂为(458±74)ng·h/mL。对于0.5mg/250mg格列本脲/盐酸二甲双胍，格列本脲的Cmax为60ng/mL～164.4ng/mL，更为具体的是复方片剂为(129.0±35.4)ng/mL、复方胶囊剂为(80±20)ng/mL；格列本脲的AUC值为189ng·h/mL～786.9ng·h/mL，更为具体的是复方片剂为(626.8±160.1)ng·h/mL、复方胶囊剂为(245±56)ng·h/mL。
特别是该组合物含有0.399mg-0.518mg或0.798mg-1.035mg的格列本脲固体分散物和250mg盐酸二甲双胍及一种或多种药学上可接受的载体。可将该组合物制成片剂，优选每片中含有格列本脲/盐酸二甲双胍1.0mg/250mg或0.5mg/250mg。
表1中给出了优选的口服复方片剂组分，提供的是组分范围表1由格列本脲固体分散物制备的口服复方片剂组分范围
下列是特别优选的口服复方片剂组合物表2由格列本脲固体分散物制备的口服复方片剂优选组分
本发明的复方片剂可以通过下列步骤获得，其包括分别将盐酸二甲双胍、辅料粉碎过筛；把固体分散体、盐酸二甲双胍、辅料混合用干制粒法制成颗粒；压片助剂与颗粒混合；把这样得到的混合物压制成片。
有益的是用来形成颗粒的过程采用干法制粒，避免了固体分散体与水接触的可能，可以保证固体分散体的稳定。压片步骤后用亲水的纤维素聚合物包衣。亲水的纤维素聚合物可以是羟丙基甲基纤维素。
本发明所述的格列本脲固体分散物的制剂，含有0.399mg-0.518mg或0.798mg-1.035mg的格列本脲固体分散物和250mg盐酸二甲双胍及一种或多种药学上可接受的载体。可将该组合物制成胶囊剂，优选每粒胶囊中含有格列本脲/盐酸二甲双胍1.0mg/250mg或0.5mg/250mg。
下表中给出了优选的口服复方胶囊剂组分，提供的是组分范围表3 由格列本脲固体分散物制备的口服复方胶囊剂组分范围
下列是特别优选的口服复方胶囊剂组合物表4 由格列本脲固体分散物制备的口服复方胶囊剂优选组分
本发明的复方胶囊剂可以通过下列步骤获得，其包括分别将盐酸二甲双胍、辅料粉碎过筛；固体分散体、盐酸二甲双胍、辅料混合；把这样得到的混合物状入胶囊中。
本发明所述的单方制剂，含有治疗有效量的格列本脲固体分散物，将所述的单方制剂口服给药后，对于2.5mg格列本脲单方片剂，格列本脲的Cmax为(155.7±28.6)ng/mL，AUC值为(596.2±97.5)ng·h/mL；对于2.5mg格列本脲单方胶囊剂，格列本脲的Cmax为(164.5±34.4)ng/mL，AUC值为(520.8±107.2)ng·h/mL。
特别是该单方制剂含有0.798mg-1.035mg的格列本脲固体分散物及一种或多种药学上可接受的载体。可制成单方片剂，优选每片中含有格列本脲1.0mg。
下表中给出了口服单方片剂组分表5由格列本脲固体分散物制备的口服单方片剂组分
本发明的单方片剂可以通过下列步骤获得，其包括别将辅料粉碎过筛；把固体分散体、辅料混合用干制粒法制成颗粒；压片助剂与颗粒混合；把这样得到的混合物压制成片。有益的是用来形成颗粒的过程采用干法制粒，避免了固体分散体与水接触的可能，可以保证固体分散体的稳定。
特别是该单方制剂含有0.798mg-1.035mg的格列本脲固体分散物及一种或多种药学上可接受的载体。可制成单方胶囊剂，优选每粒中含有格列本脲1.0mg。
下表中给出了口服单方胶囊剂组分表6由格列本脲固体分散物制备的口服单方胶囊剂组分
本发明的单方胶囊剂可以通过下列步骤获得，其包括分别将辅料粉碎过筛；把固体分散体和辅料混合；把这样得到的混合物状入胶囊中。
上述10种规格的样品均进行药学质量研究及稳定性研究试验。质量研究内容包括性状、鉴别、有关物质、含量均匀度、溶出度、含量测定。稳定性研究包括影响因素试验、加速试验、自然留样。上述10种规格的样品影响因素(光照、温度40℃、温度60℃、湿度75％、湿度90％)5天、10天；加速试验(温度40℃且湿度75％)1、2、3、6个月、自然留样(室温温度20～30℃且湿度50～80％)3、6、9、12、24、36个月观察，其性状、干燥失重、含量、溶出度、有关物质均符合规定，说明稳定性良好。
为了确证本发明中格列本脲固体分散物的相对生物利用度，先后进行了4次共24条Beagle犬的生物利用度试验，6次共118例的人体生物利用度试验。试验中使用的参比品为天津药物研究院药业有限责任公司生产的格列本脲片(2.5mg/片)和中美上海施贵宝制药有限公司生产的盐酸二甲双胍片(500mg/片)。
口服复方片剂生物利用度试验情况如下第一次试验由20位健康男性受试者按双交叉试验口服二甲双胍格列本脲试验品(1.25mg/250mg，2片/人)；参比品(盐酸二甲双胍500mg/片，格列本脲2.5mg/片，各1片/人)。结果表明，在复方片中，等剂量的二甲双胍生物利用度与普通制剂生物等效，药代数据无明显改变；等剂量的格列本脲生物利用度为普通制剂的2.4倍，且达峰时间缩短，这超出了预期想象。由AUC为基础估计0.8mg试验品的格列本脲相当于2.5mg市售品的格列本脲。二甲双胍格列本脲片中两个活性成分同时给药，二甲双胍药代参数不受格列本脲的影响。市售格列本脲片的药代参数与文献报导一致，二甲双胍格列本脲片中两个活性成分同时给药，格列本脲的药代参数也不受二甲双胍的影响。
参照第一次人体生物利用度预试验结果，调整格列本脲剂量，使用规格为格列本脲/盐酸二甲双胍0.5mg/250mg的样品，用六只吡格狗进行生物利用度试验。
Beagle犬6只按双交叉试验口服试验片T(0.5mg/250mg，2片/只)；参比片(盐酸二甲双胍500mg/片，格列本脲2.5mg/片，各1片/只)。结果表明，在复方片中，二甲双胍部分与参比片为生物等效制剂，药代数据无明显改变；格列本脲部分生物利用度高于参比制剂。由AUC为基础估计0.8mg试验品的格列本脲相当于2.5mg市售品的格列本脲。二甲双胍格列本脲片中两个活性成分同时给药，二甲双胍药代参数不受格列本脲的影响。市售格列本脲片的药代参数与文献报导一致，二甲双胍格列本脲片中两个活性成分同时给药，格列本脲的药代参数也不受二甲双胍的影响。
参照Beagle犬生物利用度研究结果，调整格列本脲剂量，使用规格为格列本脲/盐酸二甲双胍0.4mg/250mg的样品，进行第二次人体生物利用度试验。
由24位健康男性受试者按双交叉试验口服试验品T(0.4mg/250mg，2片/人)；参比品(盐酸二甲双胍500mg/片，格列本脲2.5mg/片，各1片/人)。结果表明，在复方片中，等剂量的二甲双胍生物利用度与普通制剂生物等效，药代数据无明显改变；0.8mg的格列本脲的生物利用度为2.5mg普通制剂的73.9％，且达峰时间缩短。二甲双胍格列本脲片中两个活性成分同时给药，其二甲双胍药代参数不受格列本脲的影响。市售格列本脲片的药代参数与文献报导一致，二甲双胍格列本脲片中两个活性成分同时给药，格列本脲的药代参数也不受二甲双胍的影响。
参照第二次人体生物利用度试验研究结果，调整格列本脲剂量，使用规格为格列本脲/盐酸二甲双胍1.0mg/250mg的样品，进行第三次人体生物利用度试验。
由22位健康男性受试者按双交叉试验口服试验品T(1.0mg/250mg，2片/人)；参比品(盐酸二甲双胍500mg/片，1片/人，格列本脲2.5mg/片，2片/人)。结果表明，在复方片中，等剂量的二甲双胍生物利用度与普通制剂生物等效，药代数据无明显改变；1.0mg的格列本脲的生物利用度与2.5mg普通制剂的生物等效，且达峰时间缩短。二甲双胍格列本脲片中两个活性成分同时给药，二甲双胍药代参数不受格列本脲的影响。市售格列本脲片的药代参数与文献报导一致，二甲双胍格列本脲片中两个活性成分同时给药，格列本脲的药代参数也不受二甲双胍的影响。
综合以上生物利用度试验结果复方制剂试验品中二甲双胍的相对生物利用度不因另一成分含量的变化而变化，与等剂量格华止市售片生物利用度等效。格列本脲的药代参数也不受二甲双胍的影响，其给药剂量1.0mg、2.0mg试验片分别与2.5mg、5.0mg参比片生物利用度等效。最终确定单方制剂格列本脲片规格为1.0mg/片；复方制剂二甲双胍格列本脲片(III)规格为0.5mg格列本脲/250mg二甲双胍/片；二甲双胍格列本脲片(IV)规格为1.0mg格列本脲/250mg二甲双胍/片，计量确定依据充分，上市用于患者替代服用单方二甲双胍片、格列本脲片安全、可行。
口服复方胶囊剂生物利用度试验情况如下第一次生物利用度试验由6名健康男性受试者按单剂量、三周期三交叉给药试验品(1.25mg/250mg，2粒/人)；参比品R1(盐酸二甲双胍500mg/片，1片/人；格列本脲2.5mg/片，1片/人)；参比品R2(盐酸二甲双胍500mg/片，1片/人；格列本脲2.5mg/片，2片/人)。结果表明，在复方胶囊中，等剂量的二甲双胍生物利用度比普通制剂略低，有待确证；等剂量的格列本脲生物利用度为普通制剂的3倍，且达峰时间缩短。由AUC为基础估计0.8mg试验品的格列本脲相当于2.5mg市售品的格列本脲。二甲双胍格列本脲胶囊中两个活性成分同时给药，二甲双胍药代参数不受格列本脲的影响。市售格列本脲片的药代参数与文献报导一致，二甲双胍格列本脲胶囊中两个活性成分同时给药，格列本脲的药代参数也不受二甲双胍的影响。
参照第一次人体生物利用度预试验结果，调整格列本脲剂量，使用规格为格列本脲/盐酸二甲双胍0.4mg/250mg的样品，用六条吡格狗进行生物利用度试验。
由6条Beagle犬按单剂量、双周期、双交叉给药口服试验品(0.4mg/250mg，格列本脲，2粒/条)；参比品(盐酸二甲双胍500mg/片，格列本脲2.5mg/片，各1片/条)。结果表明，在复方胶囊中，二甲双胍部分与等剂量的参比品为生物等效制剂，药代数据无明显改变；格列本脲部分的生物利用度略低于参比品，由AUC为基础估计1.0mg试验品的格列本脲相当于2.5mg市售品的格列本脲。二甲双胍格列本脲胶囊中两个活性成分同时给药，二甲双胍药代参数不受格列本脲的影响。市售格列本脲片的药代参数与文献报导一致，二甲双胍格列本脲胶囊中两个活性成分同时给药，格列本脲的药代参数也不受二甲双胍的影响。
参照Beagle犬生物利用度研究结果，调整格列本脲剂量，使用规格为格列本脲/盐酸二甲双胍0.5mg/250mg的样品，进行第二次人体生物利用度试验。
由22位健康男性受试者按单剂量、双周期、双交叉给药口服试验品(0.5mg/250mg，2粒/人)；参比品R(盐酸二甲双胍500mg/片，格列本脲2.5mg/片，各1片/人)。结果表明，经双向单侧t检验分析，试验品中等剂量的二甲双胍(500mg/人)与参比品生物等效，药代数据无明显改变；试验品中1.0mg的格列本脲与2.5mg参比品生物等效，且达峰时间缩短。二甲双胍格列本脲胶囊中两个活性成分同时给药，二甲双胍药代参数不受格列本脲的影响。市售格列本脲片的药代参数与文献报导一致，二甲双胍格列本脲胶囊中两个活性成分同时给药，格列本脲的药代参数也不受二甲双胍的影响。
参照第二次人体生物利用度试验研究结果，调整格列本脲剂量，使用规格为格列本脲/盐酸二甲双胍1.0mg/250mg的样品，进行第三次人体生物利用度试验。
由24位健康男性受试者按双交叉试验口服试验品(1.0mg/250mg，2粒/人)；参比品(盐酸二甲双胍500mg/片，1片/人；格列本脲2.5mg/片，2片/人)。结果表明，经双向单侧t检验分析，试验品中等剂量的二甲双胍(500mg/人)与参比品生物等效，药代数据无明显改变；试验品中2.0mg的格列本脲与5.0mg参比品生物等效，且达峰时间缩短。二甲双胍格列本脲胶囊中两个活性成分同时给药，二甲双胍药代参数不受格列本脲的影响。市售格列本脲片的药代参数与文献报导一致，二甲双胍格列本脲胶囊中两个活性成分同时给药，格列本脲的药代参数也不受二甲双胍的影响。
综合以上生物利用度研究结果，复方胶囊剂试验品中二甲双胍的相对生物利用度不因另一成分含量的变化而变化，与等剂量格华止市售片生物利用度等效。格列本脲的药代参数也不受二甲双胍的影响，其给药剂量1.0mg、2.0mg试验品分别与2.5mg、5.0mg参比品生物利用度等效。最终确定单方制剂格列本脲胶囊规格为1.0mg/粒；复方制剂二甲双胍格列本脲胶囊(III)规格为0.5mg格列本脲/250mg二甲双胍/粒，二甲双胍格列本脲胶囊(IV)规格为1.0mg格列本脲/250mg二甲双胍/粒，计量确定依据充分，上市用于患者替代服用单方二甲双胍片、格列本脲片安全、可行。
口服单方片剂生物利用度试验情况如下采用高效液相色谱紫外检测法对由固体分散物制备的1.0mg的格列本脲片(简称试验片T)与国产市售格列本脲片(简称参比片R)进行单剂量、双交叉给药的相对生物利用度研究，验证试验片与参比片的生物等效性。Beagle犬6只按双交叉试验口服试验片T(每片含格列本脲1.0mg，1片/只)；参比片R(每片含格列本脲2.5mg，1片/只)。结果表明，1.0mg的试验品格列本脲与2.5mg的市售品格列本脲生物等效。
口服单方胶囊剂生物利用度试验情况如下采用高效液相色谱紫外检测法对由固体分散物制备的1.0mg的格列本脲胶囊(简称试验片T)与国产市售格列本脲片(简称参比片R)进行单剂量、双交叉给药的相对生物利用度研究，验证试验片与参比片的生物等效性。Beagle犬6只按双交叉试验口服试验胶囊T(每粒含格列本脲1.0mg，1粒/只)；参比片R(每片含格列本脲2.5mg，1片/只)。结果表明，1.0mg的试验品格列本脲与2.5mg的市售品格列本脲生物等效。
本发明与现有的格列本脲固体口服单方、复方制剂相比具有以下的积极效果(1)溶剂法制备的格列本脲固体分散物，其药代动力学实验数据得到了预想不到的结果，生物利用度提高到普通制剂的241.5％～313.2％。这样，给药剂量可降低至普通制剂的31.9％～41.4％。最终确定了四种新制剂的规格分别为片剂单方格列本脲片1.0mg/片，复方制剂二甲双胍格列本脲片(III)0.5mg格列本脲/250mg二甲双胍/片；二甲双胍格列本脲片(IV)1.0mg格列本脲/250mg二甲双胍/片；胶囊剂单方格列本脲胶囊1.0mg/粒，复方制剂二甲双胍格列本脲胶囊(III)0.5mg格列本脲/250mg二甲双胍/粒；二甲双胍格列本脲胶囊(IV)1.0mg格列本脲/250mg二甲双胍/粒。
(2)给药剂量的降低减少了药物的毒副作用，降低不良反应的发生率，更好的保障患者用药的安全性。
(3)药代动力学实验数据还表明，格列本脲固体分散物的达峰时间比普通制剂短。由于人体餐后血糖升高，糖尿病患者需要控制餐后血糖。格列本脲要求餐时服药，较短的达峰时间与人体降糖需求同步，使用药更加合理化。
图1为试验例5所得二甲双胍格列本脲片中格列本脲的平均药物浓度-时间曲线图。
图2为试验例6所得二甲双胍格列本脲片中格列本脲的平均药物浓度-时间曲线图。
图3为试验例7所得二甲双胍格列本脲片中格列本脲的平均药物浓度-时间曲线图。
图4为试验例8所得二甲双胍格列本脲片中格列本脲的平均药物浓度-时间曲线图。
图5为试验例9所得二甲双胍格列本脲片中格列本脲的平均药物浓度-时间曲线图。
图6为试验例10所得二甲双胍格列本脲片中格列本脲的平均药物浓度-时间曲线图。
图7为试验例11所得二甲双胍格列本脲片中格列本脲的平均药物浓度-时间曲线图。
图8为试验例12所得二甲双胍格列本脲片中格列本脲的平均药物浓度-时间曲线图。
具体实施例方式为了更充分了解本发明，下面给出一些示范性实施例，当然应该明了，本发明不局限于这些实施例。
实施例1称取格列本脲10g、聚维酮K3020g，加入二氯甲烷625ml，超声溶解澄清，55℃水浴，旋转蒸发，减压蒸干溶媒至白色固体分散物析出，将固体分散物粉碎，过200目筛，置鼓风干燥箱中40℃干燥48小时以上。
实施例2称取格列本脲14g、聚乙二醇4000 14g，加入乙酸乙酯330ml，超声溶解澄清，45℃水浴，旋转蒸发，减压蒸干溶媒至白色固体分散物析出，将固体分散物粉碎，过200目筛，置鼓风干燥箱中50℃干燥48小时以上。
实施例3称取格列本脲2g、乙基纤维素20cp 28g，加入丙酮900ml，超声溶解澄清，40℃水浴，旋转蒸发，减压蒸干溶媒至白色固体分散物析出，将固体分散物粉碎，过150目筛，置鼓风干燥箱中50℃干燥24小时以上。
实施例4称取格列本脲8g、泊洛沙姆188 4g，加入乙醇100ml，超声溶解澄清，50℃水浴，旋转蒸发，减压蒸干溶媒至白色固体分散物析出，将固体分散物粉碎，过250目筛，置鼓风干燥箱中60℃干燥36小时以上。
实施例5成分 用量(mg/片)实施例1中固体分散物 3.0乳糖 50.0预胶化淀粉20.0低取代羟丙基甲基纤维素20.0糊精 10.0微晶纤维素40.0硬脂酸镁 0.8
滑石粉1.5制备方法先将处方辅料分别粉碎过筛，混合均匀。再用梯度稀释法将实施例1中固体分散体与处方混合辅料混合均匀。用干式制粒机制粒，干式整粒机整粒。加入处方量硬脂酸镁、滑石粉，混合均匀，压片。
实施例6成分用量(mg/片)实施例1中固体分散物 3.0乳糖100.0滑石粉 1.0制备方法先将处方辅料分别粉碎过筛，混合均匀。再用梯度稀释法将试验例1中固体分散体与处方混合辅料混合均匀。然后将混合物填充到硬胶囊。
实施例7成分用量(mg/片)0.4/250 0.5/2501.0/2501.25/250实施例1中固体分散物 1.2 1.5 3.0 3.75盐酸二甲双胍250 250 250 250乳糖10.010.010.0 10.0预胶化淀粉 20.020.020.0 20.0低取代羟丙基甲基纤维素 20.020.020.0 20.0糊精10.010.010.0 10.0微晶纤维素 40.040.040.0 40.0硬脂酸镁1.8 1.8 1.8 1.8滑石粉 3.6 3.6 3.6 3.6制备方法先将盐酸二甲双胍粉碎过筛。再用梯度稀释法将试验例1中固体分散物与盐酸二甲双胍、辅料混合均匀。干式制粒机制粒，干式整粒机整粒。加入处方量硬脂酸镁，混合均匀，压片，用薄膜包衣剂包衣。
实施例8
成分用量(mg/粒)0.4/2500.5/2501.0/2501.25/250实施例1中固体分散物 1.21.53.03.75盐酸二甲双胍250250250250乳糖40.0 40.0 40.0 40.0滑石粉 3.03.03.03.0制备方法先分别将盐酸二甲双胍、辅料粉碎过筛。再用梯度稀释法将试验例1中固体分散物与盐酸二甲双胍、辅料混合均匀。然后将混合物填充到硬胶囊。
试验例1格列本脲固体分散物残留溶媒测定方法取格列本脲共沉淀物适量，精密称定，加水制成每1ml中约含10mg的溶液，作为供试品溶液；另取二氯甲烷适量，精密称定，加水制成每1ml中约含60μg的溶液，作为对照品溶液。照残留溶媒测定法(中国药典2005年版二部附录VIIIP第三法)，色谱柱为高分子多孔小球(GDX-301)填充柱；柱温120℃；采用氢火焰离子化检测器(FID)。精密量取供试品与对照品溶液各2μl，分别注入气相色谱仪，记录色谱图。按外标法以峰面积计算，均应符合中国药典2005年版二部附录VIIIP的规定，二氯甲烷残留溶剂的限度为0.06％。实施例1中格列本脲共沉淀物测定结果符合规定。
试验例2格列本脲有关物质测定方法照高效液相色谱法(中国药典2005年版二部附录VD)测定。
色谱条件与系统适应性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-磷酸二氢胺溶液(取磷酸二氢胺1.725g，加水300ml溶解，用磷酸调节pH值至3.5±0.05)(5∶3)为流动相；检测波长为300nm，理论板数按格列本脲计算应不低于5000，格列本脲、杂质峰1、杂质峰2的分离应符合要求。
测定法 取本品研细粉适量(约相当于格列本脲5mg)置10ml量瓶中，加甲醇适量，超声使格列本脲溶解并稀释至刻度，摇匀静置，取上清液，滤过，取续滤液作为供试品溶液；精密称取4-[2-(5-氯-2-甲氧基苯甲酰胺)-乙基]-苯磺酰胺对照品(杂质1)与4-[2-(5-氯-2-甲氧基苯甲酰胺)-乙基]-苯磺酰氨基-甲酸乙酯对照品(杂质2)适量，用甲醇溶解并稀释成每1ml中含0.3mg的溶液，作为对照品溶液，分别精密量取对照品溶液(1)、(2)及供试品溶液各1ml，分别置100ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液(1)、(2)、自身对照溶液(3)。精密量取对照溶液(2)20ul注入液相色谱仪，调节灵敏度，使对照品溶液(2)的峰高为满量程的10％～15％，再精密量取对照溶液(1)、自身对照溶液(3)与供试品溶液各20ul，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，供试品溶液的色谱图记录至主成分峰保留时间2倍，如有保留时间与对照溶液(1)、(2)相应的杂质峰，按外标法计算，杂质1与杂质2的含量之和不得大于1.2％，扣除保留时间小于对照液(1)的峰，其他单一杂质的峰面积不得大于自身对照溶液(3)峰面积的1/2(0.5％)，杂质总量不得过1.7％。实施例1中格列本脲共沉淀物测定结果符合规定。
试验例3格列本脲溶出度测定方法取本品照溶出度测定法(中国药典2005年版附录XC第二法)，以0.02％三羟甲基氨基甲烷溶液500ml为溶剂，转速为每分钟75转，依法操作，经20分钟取样，滤过，取续滤液作为供试品溶液；另取格列本脲对照品20mg置50ml量瓶中加甲醇适量，超声处理使溶解，加甲醇稀释至刻度，准确移取5ml置100ml量瓶中，加0.02％三羟甲基氨基甲烷稀释至刻度，再准确移取5ml置量瓶中(单位计量为0.5mg的制剂置100ml量瓶中；单位计量为1.0mg的制剂置50ml量瓶中)，加0.02％三羟甲基氨基甲烷稀释至刻度，作为对照品溶液。取上述两种溶液照含量测定项下的方法，检测波长为300nm依法测定，分别进样(单位计量为0.5mg的制剂进样量200ul；单位计量为1.0mg的制剂进样量100ul)，计算出格列本脲的溶出量限度为标示量的80％，应符合规定。实施例5、6、7、8中样品测定结果均符合规定。
试验例4格列本脲含量测定方法照高效液相色谱法(中国药典2005年版二部附录VD)测定。
色谱条件与系统适应性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-磷酸二氢胺溶液(取磷酸二氢胺1.725g，加水300ml溶解，用磷酸调节pH值至3.5±0.05)(7∶3)为流动相；检测波长为274nm，理论板数按格列本脲计算应不低于5000。
测定法取除去包衣细粉适量(约相当于格列本脲3.2mg)，精密称定，置50ml量瓶中，加甲醇适量，超声处理使溶解，并用甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；精密称取格列本脲对照品适量，加甲醇溶解并稀释制成每1ml中约含64ug的溶液，作为对照品溶液。分别取供试品溶液、对照品溶液各20ul，注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，即得。
测定结果实施例5、6、7、8中样品均符合规定。
试验例5口服复方片剂第一次人体生物利用度试验采用高效液相色谱紫外检测法对实施例5中制备的规格为1.25mg/250mg二甲双胍格列本脲片(简称试验品T)与国产市售格华止片、格列本脲片(简称参比品R)进行单剂量、双周期、双交叉给药的相对生物利用度比较研究。
由20位健康男性受试者按双交叉试验口服试验品T(每片含二甲双胍250mg，格列本脲1.25mg，2片/人)；参比品R(二甲双胍500mg/片，格列本脲2.5mg/片，各1片/人)。
试验片和参比片中盐酸二甲双胍的主要药代动力学参数见表7。
表7第一次人体生物利用度预试验结果盐酸二甲双胍主要药代动力学参数
二甲双胍的相对生物利用度为97.2％。
试验片和参比片中格列本脲的主要药代动力学参数见表8。
表8第一次人体生物利用度预试验结果格列本脲主要药代动力学参数
格列本脲的相对生物利用度为241.5％。
试验例6口服复方片剂Beagle犬生物利用度研究试验采用高效液相色谱紫外检测法对实施例5中制备的规格为0.5mg/250mg二甲双胍格列本脲片(简称试验片T)与国产市售格华止片、格列本脲片(简称参比片R)进行单剂量、双周期、双交叉给药的相对生物利用度研究，验证试验片与参比片的生物等效性。
Beagle犬6只按双交叉试验口服试验片T(每片含二甲双胍250mg+格列本脲0.5mg，2片/只)；参比片R(二甲双胍500mg/片，格列本脲2.5mg/片，各1片/只)。试验片和参比片中盐酸二甲双胍的主要药代动力学参数见表9。
表9Beagle犬生物利用度研究结果盐酸二甲双胍主要药代动力学参数
试验片与参比片中二甲双胍的相对生物利用度为93.1％。
试验片和参比片中格列本脲的主要药代动力学参数见表10。
表10Beagle犬6只生物利用度研究结果格列本脲主要药代动力学参数
试验片与参比片中格列本脲的相对生物利用度137.2％。
试验例7口服复方片剂第二次人体生物利用度试验采用高效液相色谱紫外检测法对实施例5中制备的规格为0.4mg/250mg二甲双胍格列本脲片(简称试验片T)与国产市售格华止片、格列本脲片(简称参比片R)进行单剂量、双周期、双交叉给药的相对生物利用度研究，验证试验片与参比片的生物等效性。由24位健康男性受试者按双交叉试验口服试验品T(每片含二甲双胍250mg，格列本脲0.4mg，2片/人)；参比品R(二甲双胍500mg/片，格列本脲2.5mg/片，各1片/人)。盐酸二甲双胍的主要药代动力学参数见表11。
表11第二次人体生物利用度研究结果盐酸二甲双胍主要药代动力学参数
二甲双胍的相对生物利用度为93.6％。
格列本脲的主要药代动力学参数见表12。
表12第二次人体生物利用度研究结果格列本脲主要药代动力学参数
格列本脲的相对生物利用度为73.9％。
试验例8口服复方片剂第三次人体生物利用度试验采用高效液相色谱紫外检测法对实施例5中制备的规格为1.0mg/250mg二甲双胍格列本脲片(简称试验片T)与国产市售格华止片、格列本脲片(简称参比片R)进行单剂量、双周期、双交叉给药的相对生物利用度研究。
由22位健康男性受试者按双交叉试验口服试验品T(每片含二甲双胍250mg+格列本脲1.0mg，2片/人)；参比品R(二甲双胍500mg/片，1片/人，格列本脲2.5mg/片，2片/人)。盐酸二甲双胍主要药代动力学参数见表13。
表13第三次人体生物利用度研究结果盐酸二甲双胍主要药代动力学参数
二甲双胍的相对生物利用度为96.4％。
格列本脲主要药代动力学参数见表14。
表14第三次人体生物利用度研究结果格列本脲主要药代动力学参数
格列本脲的生物利用度为94.6％。
试验例9口服复方胶囊剂第一次人体生物利用度预试验采用高效液相色谱紫外检测法对实施例6中制备的规格为1.25mg/250mg二甲双胍格列本脲胶囊(简称试验品T)与市售格华止片(盐酸二甲双胍片)、格列本脲片(简称参比品)进行6人单剂量、三周期三交叉给药的相对生物利用度比较研究。
由6名健康男性受试者按三交叉试验口服试验品T(每粒含二甲双胍250mg，格列本脲1.25mg，2粒/人)；参比品R1(二甲双胍500mg/片，1片/人；格列本脲2.5mg/片，1片/人)；参比品R2(二甲双胍500mg/片，1片/人；格列本脲2.5mg/片，2片/人)。盐酸二甲双胍主要药代动力学参数见表15。
表15第一次人体生物利用度预试验结果盐酸二甲双胍主要药代动力学参数
等剂量的二甲双胍的相对生物利用度分别为70.7％和76.5％。
格列本脲主要药代动力学参数见表16。
表16第一次人体生物利用度预试验结果格列本脲主要药代动力学参数
等剂量的格列本脲(以2.5mg计)的相对生物利用度分别为313.2％和300.1％。
试验例10口服复方胶囊剂Beagle犬生物利用度比较试验采用高效液相色谱紫外检测法对实施例6中制备的规格为0.4mg/250mg二甲双胍格列本脲胶囊(简称试验品T)与国产市售格华止片、格列本脲片(简称参比品R)进行单剂量、双周期、双交叉给药的相对生物利用度研究，验证试验品与参比品的生物等效性。
由6条Beagle犬按双交叉试验口服试验品(每粒含二甲双胍250mg，格列本脲0.4mg，2粒/条)；参比品(二甲双胍500mg/片，格列本脲2.5mg/片，各1片/条)。盐酸二甲双胍主要药代动力学参数见表17。
表17犬生物利用度比较试验研究结果盐酸二甲双胍主要药代动力学参数
试验品中二甲双胍与等剂量的参比品相对生物利用度为107.8％。
格列本脲主要药代动力学参数见表18。
表18犬生物利用度研究结果格列本脲主要药代动力学参数
试验品中格列本脲(以0.8mg计)与参比品(以2.5mg计)的相对生物利用度为92.5％。
试验例11口服复方胶囊剂第二次人体生物利用度试验采用高效液相色谱紫外检测法对实施例6中制备的规格为0.5mg/250mg二甲双胍格列本脲胶囊(简称试验品T)与国产市售格华止片、格列本脲片(简称参比品R)进行单剂量、双周期、双交叉给药的相对生物利用度研究，验证试验品与参比品的生物等效性。
由22位健康男性受试者按双交叉试验口服试验品T(每粒含二甲双胍250mg，格列本脲0.5mg，2粒/人)；参比品R(二甲双胍500mg/片，格列本脲2.5mg/片，各1片/人)。
盐酸二甲双胍主要药代动力学参数见表19。
表19人体生物利用度预试验研究结果盐酸二甲双胍主要药代动力学参数
试验品中二甲双胍的相对生物利用度为101.2％。
格列本脲主要药代动力学参数见表20。
表20第一次人体生物利用度研究结果格列本脲主要药代动力学参数
试验品中格列本脲的相对生物利用度为98.5％。
试验例12口服复方胶囊剂第三次人体生物利用度试验采用高效液相色谱紫外检测法对实施例6中制备的规格为1.0mg/250mg二甲双胍格列本脲胶囊(简称试验品T)与国产市售格华止片、格列本脲片(简称参比品R)进行单剂量、双周期、双交叉给药的相对生物利用度研究，验证试验品与参比品的生物等效性。
由24位健康男性受试者按双交叉试验口服试验品T(每粒含二甲双胍250mg，格列本脲1.0mg，2粒/人)；参比品R(二甲双胍500mg/片，1片/人；格列本脲2.5mg/片，2片/人)。盐酸二甲双胍主要药代动力学参数见表21。
表21人体生物利用度预试验研究结果盐酸二甲双胍主要药代动力学参数
试验品中二甲双胍的相对生物利用度为100.7％。
格列本脲主要药代动力学参数见表22。
表22第二次人体生物利用度研究结果格列本脲主要药代动力学参数
试验品中格列本脲的相对生物利用度为94.2％。
试验例13口服单方片剂Beagle犬生物利用度比较试验采用高效液相色谱紫外检测法对该实施例7中制备的格列本脲片(简称试验片T)与国产市售格列本脲片(简称参比片R)进行单剂量、双交叉给药的相对生物利用度研究，验证试验片与参比片的生物等效性。
Beagle犬6只按双交叉试验口服试验片T(每片含格列本脲1.0mg，1片/只)；参比片R(每片含格列本脲2.5mg，1片/只)。
格列本脲主要药代动力学参数见表23。
表23Beagle犬生物利用度比较试验研究结果格列本脲主要药代动力学参数
格列本脲的相对生物利用度为108.6％。
试验例14口服单方胶囊剂Beagle犬生物利用度比较试验采用高效液相色谱紫外检测法对该实施例8中制备的格列本脲片(简称试验片T)与国产市售格列本脲片(简称参比片R)进行单剂量、双交叉给药的相对生物利用度研究，验证试验片与参比片的生物等效性。
Beagle犬6只按双交叉试验口服试验片T(每片含格列本脲1.0mg，1片/只)；参比片R(每片含格列本脲2.5mg，1片/只)。
格列本脲主要药代动力学参数见表24。
表24Beagle犬生物利用度比较试验研究结果格列本脲主要药代动力学参数
格列本脲的相对生物利用度为92.5％。
权利要求
1.一种格列本脲固体分散物，其特征在于该固体分散物的成分和配比为格列本脲2-14份，载体4-28份，有机溶剂100-900份；所述固体分散物采用溶剂法制备，其生物利用度为普通制剂的241.5％-313.2％；由其制备单位剂量为1.0mg的制剂与2.5mg普通制剂生物利用度等效；单位剂量为0.5mg制剂与1.25mg普通制剂生物利用度等效；且达峰时间与人体餐后降糖需求同步。
2.权利要求1所定义的格列本脲固体分散物的制备方法，其特征在于将格列本脲与载体共同溶于一种有机溶剂中，超声使溶解澄清，40℃-70℃水浴减压蒸去有机溶剂，得到白色或类白色固体分散物，将固体分散物粉碎，过150-250目筛，置鼓风干燥箱中40℃-60℃干燥24小时以上。
3.如权利要求1或2所述的固体分散物，其特征在于所述载体至少为聚乙二醇类、聚维酮类、乙基纤维素类或表面活性剂类之一。
4.如权利要求1或2所述的固体分散物，其中所述有机溶剂为乙醇、二氯甲烷、乙酸乙酯、丙酮或二甲亚砜之一。
5.权利要求1所述的格列本脲固体分散物的单方制剂，其特征在于每片中含有1.0mg格列本脲固体分散物与2.5mg普通片剂的生物利用度等效；每粒胶囊中含有1.0mg格列本脲固体分散物与普通2.5mg胶囊的生物利用度等效。
6.一种药物组合物，该组合物含有治疗有效量的格列本脲固体分散物和盐酸二甲双胍，其中将所述的组合物口服后，对于1.0mg/250mg格列本脲/盐酸二甲双胍，格列本脲的Cmax和AUC值分别为115ng/mL-220.2ng/mL和384ng·h/mL-740.4ng·h/mL；0.5mg/250mg格列本脲/盐酸二甲双胍，格列本脲的Cmax和AUC值分别为60ng/mL-164.4ng/mL和189ng·h/mL-786.9ng·h/mL。
7.如权利要求6所述的组合物，其特征在于该组合物含有0.399mg-1.035mg权利要求1所定义的格列本脲固体分散物和250mg盐酸二甲双胍及一种或多种药学上可接受的载体。
8.如权利要求6所述的组合物，其特征在于，每片中含有格列本脲/盐酸二甲双胍1.0mg/250mg或0.5mg/250mg。
9.如权利要求6所述的组合物，其特征在于，每粒胶囊中含有格列本脲/盐酸二甲双胍1.0mg/250mg或0.5mg/250mg。
全文摘要
本发明涉及一种溶剂法制备的格列本脲固体分散物，其成分配比为格列本脲2－14份，载体4－28份，有机溶剂100－900份。采用该固体分散物制备的单位剂量为0.5mg或1.0mg制剂与1.25mg或2.5mg普通制剂的生物利用度等效；且达峰时间与人体餐后降糖需求同步。本发明的复方制剂中含有0.399mg－1.035mg格列本脲固体分散物和250mg盐酸二甲双胍及一种或多种药学上可接受的载体。本发明的格列本脲固体分散物，生物利用度提高到普通制剂的241.5％～313.2％，因而给药剂量降低，减少药物毒副作用，降低不良反应的发生率，更好的保障了患者用药的安全性。
文档编号A61K9/20GK1839812SQ20061001307
公开日2006年10月4日 申请日期2006年1月20日 优先权日2006年1月20日
发明者苏慕君, 臧可昕, 吴赟, 张胜利 申请人:天津药物研究院