专利名称：：灵芝破壁孢子粉、灵芝孢子油在治疗妇女乳腺增生病中的应用的制作方法
技术领域：
：本发明涉及灵芝破壁孢子粉、灵芝孢子油的医药新用途，特别在治疗妇女乳腺增生病中的应用。
背景技术：
：乳腺增生病，是指妇女乳腺组织导管和乳腺小叶在结构上的退行性病变、及进行性结缔组织生长的乳腺实质增生性病变，惯称乳腺纤维囊性增生病，国外学者称之为纤维囊性乳腺病，中医称"乳癖"，世界卫生组织(WHO)统称"良性乳腺结构不良"。为妇女常见乳腺疾病，多发生在30—50岁的妇女，在育龄妇女中患病率高达38.8%49.3%，占全部乳腺疾病的75%以上，近年来乳腺增生发病平均年龄有逐渐年轻化趋势，为危害育龄妇女身心健康常见多发主要疾病，严重影响育龄妇女的身心健康。乳腺增生病是一种既非炎症、又非肿瘤的疾病，它是以乳腺纤维组织及上皮增生伴囊肿形成的一种乳腺结构紊乱疾病，该病首先由AsdeyCooper于1829年描述，病理特征由腺上皮增生开始，逐渐出现纤维组织增生、纤维囊性增生和纤维腺瘤形成等一系列组织形态病理改变。患者以乳房疼痛和肿块(可为单一或多个)为主要特征，起初为涨痛或触痛，随月经周期发作，经后疼痛减轻或消失，严重者可呈持续性疼痛，甚至走路、活动时亦疼痛，可向肩、背部、腋窝、上肢放射。按临床表现分为乳痛症，临床表现为腺管周围纤维组织增生，腺小叶发育不规则，腺泡或腺管上皮轻度增生，细胞常见脱落充填腺腔。乳腺小叶增生，临床表现为明显的腺上皮增生表现，经前期乳房胀痛、不适，痛剧时可延及肩背与腋下，乳房局部常可扪及大小不等的结节或片状组织增厚。乳腺纤维腺病，包括纤维腺瘤或乳头状瘤病，以腺上皮及纤维组织增生为主，可由此衍化为纤维腺瘤，若导管上皮呈乳头状增生，可发展为乳头状瘤，临床表现为整个乳腺常有不均匀增厚，个别区域可以扪及边界清晰的小结节或纤维腺瘤，可呈多发性细小病变，但无压痛，月经过后并不消失。乳腺纤维硬化病，为弥漫性乳腺慢性增生与囊性变化的结果，临床表现为整个乳房坚实、增厚，或呈扁平块状，表面光滑或呈结节状，无压痛，经前、经后无症状与体征的改变，囊肿形成后则表现为乳房内有散在、多发、大小不等的结节，部分患者可以出现浆液性或浆液血性的乳头溢液，少数患者可同时有腋淋巴结肿大，甚至可发生癌变。乳腺增生病是一种进展性疾病，一旦形成囊肿病变，乳房疼痛反而减轻或消失，易造成错觉，并有1%3%的患者会发生癌变而摘除乳房，因此如不及时进行干预、治疗，对育龄妇女的身体和心理危害极大。目前虽然有众多治疗乳腺增生病的药物，疗效偏饫，而且这些药大部分具有一定毒性，难以长期服用。灵芝又称为瑞草、灵芝草，是担子菌纲多孔菌科(polypromceae)灵芝属(ganoderma)真菌赤芝G丄ucidumKarst.和紫芝G.Japonicum的总称。灵芝孢子中含有蛋白质和氨基酸类、糖肽类、维生素类、胡萝卜素、甾醇类、三萜类、生物碱类、脂肪酸类、内酯和无机离子类等。公知的医药用途为扶正固本、滋补强壮、免疫调节的功效，临床上应用报道表现有抗肿瘤、抗癌(抑制作用)、白细胞减少症、再生障碍性贫血、免疫调节等功能，与其他药物配合使用发挥作用。例如作为治疗肿瘤类药物，作为其中一味，与其他药物共同发挥作用，如中国专利97100182.0、99100041.2、01123736.8、03150213.X、200410090281.0、20G510008991.9等所述。虽然有灵芝用于治疗乳腺增生病的专利报导，如中国专利200610041818.3，但它仍然仅是作为其中一味添加药物，并且报导灵芝在该组合药物中作用为安神、健胃、止咳平峭。可见至目前为止，人们均未发现灵芝破壁孢子粉、灵芝孢子油单独用于治疗妇女乳腺增生病的疗效及应用。
发明内容本发明的目的在于提供灵芝破壁孢子粉、灵芝孢子油的医药新用途，将其作为单一药物在治疗妇女乳腺增生病中的应用。本发明还涉及将灵芝破壁孢子粉、灵芝孢子油加入食品中制成保健食品，用于治疗妇女乳腺增生病中的应用。本发明所述灵芝破壁孢子粉，指灵芝孢子的破壁细粉，为服用方便可以灌装胶襄；灵芝孢子油，是从破壁的灵芝孢子中萃取(例如用C02超临界萃取或有机溶媒萃取等)得到的油状物，为服用方便可以制成软胶襄。为充分展现本发明用途效果，以下将通过灵芝破壁孢子粉、灵芝孢子油的药理试验及临床应用结果，说明作为单一药物在治疗乳腺增生病中的效果及应用。一、药理试验目的检验灵芝破壁孢子粉、灵芝孢子油对大鼠乳腺增生的影响1、药品和试剂灵芝破壁孢子粉深棕褐色粉末，破壁率>98%;灵芝孢子油黄卵圆形胶囊，内装淡黄色由C02超临界提取的油状物；乳癖消片辽宁好护士药业(集团)有限责任公司生产；苯甲酸雌二醇注射液(2mg/ml):上海通用药业股份有限公司生产；黄体酮注射液(20mg/ml):浙江仙琚制药股份有限公司生产；雌二醇放射免疫分析药盒北京北方生物技术研究所生产；孕酮放射免疫分析药盒北京北方生物技术研究所生产。2、仪器DFM-96型16管放射免疫Y计数器，生产厂家合肥众成机电公司。3、实验动物SD大鼠，雌性，180220g。4、实验方法和结果取雌性未孕SD大鼠72只，正常饲养l周后，将大鼠随机分为9组，每组8只，分别定为正常对照组、模型对照组、阳性药组(乳癖消片)、灵芝破壁孢子粉高、中、低剂量组和灵芝孢子油高、中、低剂量组。除正常对照组外，其余各组每鼠肌肉注射苯甲酸雌二醇0.5mg/kg,每日1次，连续25d，继而改用肌肉注射黄体酮4mg/kg,每日1次，连续5d，此时大鼠乳头出现红肿和增大，并有部分乳晕出现，大鼠乳腺增生模型形成。模型建立的同时开始给药，每日一次，给药容积为0.5ml/100g，连续30天。正常对照组给予等体积的0.5%CMC-Na;模型组给予等体积的0.5%CMC-Na;阳性药组乳癖消片(603mg/kg);灵芝破壁孢子粉高(300mg/kg)、中(150mg/kg)、低(75mg/kg);灵芝孢子油高(264mg/kg)、中(132mg/kg)、低(66mg/kg)。末次给药后lh，取血分离血清测定雌激素(E2)、孕酮(P)浓度(结果见表2)，油标卡尺测量第一对乳头高度，取下第一对完整乳房组织，10%甲醛溶液固定，观察乳腺组织的病理学变化结果(见表l)。表l灵芝破壁孢子粉、灵芝孢子油对大鼠乳腺增生模型乳腺高度的影响<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>注(x±s)(n=8)，高度单位mm，承表示统计学P值，承表示P0.05,"表示PO.Ol，为与模型对照组比较由表1结果说明:与正常对照组相比，乳腺增生模型组大鼠第一对乳腺高度极显著升高(PO.01)，表明模型制备成功。与模型对照组相比，灵芝破壁孢子粉中、低剂量能明显抑制大鼠乳腺肿胀(P<0.05);灵芝孢子油高、低剂量组显著抑制大鼠乳腺肿胀(P<0.05)，中剂量组极显著抑制大鼠乳腺肿胀(P<0.01)。药理试验表明灵芝破壁孢子粉、灵芝孢子油均对消解大鼠乳腺肿胀有效，且与剂量有依从性。表2灵芝破壁孢子粉、灵芝孢子油对大鼠乳腺增生模型雌二醇、孕酮浓度影响<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>注:(x士s)(n喝，"^表示统计学P值，^表示P0.05，"表示PO.Ol,为与模型对照组比较表2结果表明与正常对照组相比，乳腺增生模型组大鼠血清雌二醇浓度极显著升高(PO.01)，孕酮浓度极显著降低(PO.01)，表明模型制备成功。与模型对照组相比，灵芝孢子油高、中剂量能明显降低大鼠血清雌二醇浓度(PO.05);灵芝孢子油高剂量组极显著升高大鼠血清孕酮浓度(PO.01)，与抑制乳腺增生具有相一致效果；中剂量组显著升高大鼠血清孕酮浓度(PO.05)，对抑制乳腺增生具有同样一致效果。上述SD大鼠乳腺病理试验检测结果表明与模型对照组相比，灵芝破壁孢子粉和灵芝孢子油各剂量组对大鼠乳腺肿胀形态均有所改善，其中灵芝孢子油各剂量组对形态改善要好于灵芝破壁孢子粉各剂量组，表明灵芝孢子油对乳腺肿胀消解较灵芝破壁孢子粉有更好的疗效。同时对用药后的大鼠雌二醇、孕酮浓度测定，结果与对乳腺肿胀形态影响，具有趋势一致性。表明灵芝破壁孢子粉和灵芝孢子油对于治疗、消解乳腺肿胀具有相当疗效。附图给出了各试验组大鼠乳房组织病理切片。乳腺正常组乳腺小叶结构清楚，腺泡及导管排列紧密，腺泡上皮无明显增生，腺腔及导管无明显扩张，间质未见炎细胞浸润。乳腺模型组乳腺小叶结构清楚，腺泡及导管排列紧密，腺泡数目明显增多，腺泡上皮层次增多，细胞数目明显增生，腺腔及导管无明显扩张，间质未见炎细胞浸润。乳腺阳性药组乳腺小叶结构清楚，腺泡及导管排列紧密，腺泡数目明显增多、腺泡上皮层次增多和细胞数目明显增生现象较模型组明显改善，腺腔及导管无明显扩张，间质未见炎细胞浸润。灵芝破壁孢子粉高剂量组乳腺小叶结构清楚，腺泡及导管排列紧密，腺泡数目明显增多、腺泡上皮层次增多和细胞数目明显增生现象较模型组有所改善，腺腔及导管无明显扩张，间质未见炎细胞浸润。灵芝破壁孢子粉中剂量组乳腺小叶结构清楚，腺泡及导管排列紧密，仍可见腺泡数目明显增多、腺泡上皮层次增多和细胞数目明显增生，腺腔及导管无明显扩张，间质未见炎细胞浸润。灵芝破壁孢子粉低剂量组乳腺小叶结构清楚，腺泡及导管排列紧密，仍可见腺泡数目明显增多、腺泡上皮层次增多和细胞数目明显增生，腺腔及导管无明显扩张，间质未见炎细胞浸润。灵芝孢子油高剂量组乳腺小叶结构清楚，腺泡及导管排列紧密，腺泡数目明显增多、腺泡上皮层次增多和细胞数目明显增生的现象较模型组有所改善，腺腔及导管无明显扩张，间质未见炎细胞浸润，形态接近阳性药组。灵芝孢子油中剂量组乳腺小叶结构清楚，腺泡及导管排列紧密，腺泡数目明显增多、腺泡上皮层次增多和细胞数目明显增生现象较模型组有所改善，腺腔及导管无明显扩张，间质未见炎细胞浸润。灵芝孢子油低剂量组乳腺小叶结构清楚，腺泡及导管排列紧密，腺泡数目明显增多、腺泡上皮层次增多和细胞数目明显增生现象较模型组有所改善，腺腔及导管无明显扩张，间质未见炎细胞浸润。结论与模型组相比，灵芝破壁孢子粉各剂量组、灵芝孢子油各剂量组形态有所改善，其中孢子油各剂量形态好于孢子粉各剂量组，孢子油高剂量组形态与阳性药组基本接近。二、临床治疗结果1、病例选择选取乳腺增生女性患者120例，年龄2055岁，平均38岁，病程最短3个月，最长12年。随机分为治疗组和对照组，各60例。全部病人均有不同程度乳房胀痛、刺痛或触痛，触之有大小不等的肿块，经前肿块变硬。最后经B超和红外热图像检査确定诊断。2、治疗方法治疗组口服灵芝孢子油胶囊，每日3次，每次l粒(0.4g)，3个月一疗程。如肿块没有完全消退则继续服用1个疗程。对照组口服乳癖消片，每日3次，每次3片，3个月一疗程，经期停服。如肿块没有完全消退则继续服用1个疗程。3、疗效标准治愈肿块消失；显效肿块縮小1/2以上；有效肿块縮小1/2以下；无效肿块无变化。4、结果经过二个疗程治疗，治疗组60例，治愈38例，治愈率63%;显效12例，总显效率83%;有效8例，总有效率97%;无效3例，无效率5%。对照组60例，治愈25例，治愈率42%;显效15伊l，总显效率67%;有效12例，总有效率87%;无效8例，无效率13%。治疗组优于对照组，并与前述病理学结果相吻合，两组治愈率、总显效率，经统计学处理P<0.01，P<0.05，差异有显著性意义，表明灵芝孢子油对治疗妇女乳腺增生病有显著作用。三、典型病例钱XX，1954年生，2000年上半发现乳房肿痛，医院检查为乳房小叶增生，下半年体检査出左乳房有一个lXlcm纤维瘤。经服用灵芝破壁孢子粉，每日2克(10粒胶襄)，分早、晚各一次服用，连续服用半年，自感肿痛消除，B超检査纤维瘤消失。钱XX，1962年生，98年因乳房肿痛，医院检査出右乳有2个2X2cm纤维瘤。经服用灵芝破壁孢子粉，每日2克(10粒胶襄)，分早、晚各一次服用，连续服用半年，自感肿痛消除，B超检查纤维瘤消失。陆XX，1973年生，04年发觉月经前后乳房肿痛，医院检查为小叶增生。经服用灵芝破壁孢子粉，每日2克(10粒胶襄)，分早、晚各一次服用，连续服用一个月，乳房肿痛缓解，继续服用6个月，症状全部消失。蒋XX，1965年生，05年因乳房肿痛，医院检查为小叶增生。经服用灵芝破壁孢子粉，每日2克(10粒胶襄)，分早、晚各一次服用，连续服用二个月，不觉疼痛，继续服用6个月，症状全部消失。钱XX，1972年生，06年初因乳房疼痛，不能触摸，医院检査为小叶增生。经服用灵芝破壁孢子粉，每日2克(10粒胶襄)，分早、晚各一次服用，连续服用三个月，疼痛缓解，继续服用6个月，症状全部消失。以上SD大鼠药理试验表明，灵芝破壁孢子粉、灵芝孢子油，对抑制、消解大鼠乳腺肿胀，降低大鼠血清雌二醇浓度、升高孕酮浓度，具有显著效果；临床试验也证实了灵芝破壁孢子粉、灵芝孢子油对妇女乳腺增生病(包括乳痛症、乳腺小叶增生、乳腺纤维腺病、乳腺纤维硬化病等)，有显著的抑制和治疗作用，药理作用强，从而能有效抑制恶性病变，预示着很好的药用前景。从而为有效治疗妇女乳腺增生，防止恶变找到了一种新的有效治疗药物，同时也开拓了灵芝破壁孢子粉、灵芝孢子油的新应用领域及医药用途。灵芝破壁孢子粉、灵芝孢子油，安全无毒，按大鼠试验最高剂量放大50倍未发现毒副作用，表明其毒性极低，服用剂量范围较宽，可以按上述临床使用剂量加大服用。并且可以长期服用，无毒副作用，还有利于体质增强。本发明药物制备工艺简单，可以做成使用简单的口服制剂，例如胶襄。同样，本发明还可以将灵芝破壁孢子粉、灵芝孢子油加入食品，制成治疗性保健食品，用于妇女乳腺增生病的治疗，也可以达到同样药理效果。权利要求1、灵芝破壁孢子粉、灵芝孢子油作为药物在治疗妇女乳腺增生病中的应用。2、根据权利要求1所述灵芝破壁孢子粉、灵芝孢子油作为药物在治疗妇女乳腺增生病中的应用，还包括加入食品制成保健食品中的应用。全文摘要本发明涉及灵芝破壁孢子粉、灵芝孢子油在制药领域中的新用途，即作为治疗妇女乳腺增生病药物应用。用于治疗妇女乳腺增生病，对抑制、消解具有显著效果，而且无毒副作用，可以长期服用，能有效抑制恶性病变。本发明药物制备工艺简单，不仅可以做成使用简单的口服制剂，而且可以做成保健食品，同样具有治疗效果。文档编号A61K36/074GK101167761SQ20061009718公开日2008年4月30日申请日期2006年10月29日优先权日2006年10月29日发明者张国清申请人:宜兴市鹏鹞天然保健营养素有限公司