专利名称：：治疗活性化合物的葡聚糖和阿拉伯半乳聚糖结合物的制作方法
技术领域：
：本发明涉及治疗活性化合物与多糖的结合物。
背景技术：
：对于表现出有限的溶解度和稳定性或者具有高毒性的生物活性试剂，可通过与亲水性聚合物如多糖相结合而进行化学修饰，以此作为克服所述生物活性试剂的这些局限性和降低其毒性的手段。其他方法涉及配制制备以毒性较小形式存在的生物活性药物。一个这样的例子是多烯抗生素两性霉素B(AmB)，其目前以毒性较小的脱氧胆酸钠-AmB胶束形式(Fungizone),作为脂质体制剂(AmBisome)、作为胶质分散剂(Amphotec⑧)和作为脂质复合物(Abelcet⑧)提供。虽然所述胶束形式表现出整体减小的毒性，但是对肾、中枢神经系统和肝的某些毒性以及治疗局限性如低容忍剂量等依然存在。正致力于研发水溶性聚合物-药物结合物作为实现由不同器官分布所致的靶向药物输送和较低药物毒性以及在肝和肾中的较低累积的方法。本申请的发明人的美国专利5,567,685和6,011,008公开了氧化敏感性生物活性物质的水溶性多糖结合物，所述生物活性物质均含有一定程度的游离醛基和能赋予所希望的治疗作用的活性部分。本发明人最近认识到，虽然所述结合物具有疗效，但是仍保留有一定程度的毒性。已知带有醛基的小分子往往具有毒性。该毒性通常归因于醛基倾向于与胺发生反应，并因此干扰蛋白质和核酸的结构。但是，也有在本领域中已知具有生物相容性的含醛基分子。醛致毒性的降低可通过将所述醛部分转化为毒性明显较小的基团来实现。然而，在如AmB等如此的化学修饰也可能影响所述生物活性部分的分子中，也观察到治疗作用的减小。需要在降低由所述醛部分引起的毒性和保持治疗作用之间取得平衡显然已成为进一步发展此类化合物的阻碍。
发明内容因此，本发明的目的是提供聚合物和治疗活性化合物(下文中称之为药物)构成的经修饰的聚合物结合物，所述结合物相对于未经修饰的母体化合物具有降低的毒性，同时保持了与所述未经修饰的母体化合物基本相同程度的治疗活性。本发明的结合物通常由合适的前体制备，如在本发明的发明人的美国专利5,567,685和6,011,008中公开的所述含醛结合物。正如将进一步公开的，在有选择的条件下对这些具有多个醛基的前体结合物(此处称作"母体结合物"或"未修饰的结合物")进行化学修饰，从而将所述醛基各自化学转变为不同于-CH20H的基团。所述不同于-CH20H的基团以非限制性方式选自如以下所公开的醚、酯、胺、亚胺、酰胺、縮醛或半縮醛。因此，美国专利5,567,685和6,011,008的经还原而不含有醛的结合物由此排除在本发明的范围之外。本发明的结合物的特征如下1.所述治疗活性药物与所述聚合物骨架通过C聚合物-O药物或Cs糊-N药物键相结合；2.所述结合物基本不含有醛基；3.与未修饰的所述结合物相比，所述结合物具有降低的毒性；4.所述结合物保留了与所述未修饰的结合物相关的生物和/或治疗活性；5.所述结合物保留了与所述聚合物相结合的所述药物的结构；和6.所述结合物保留了大部分物理和化学特性，使得其可以以类似于所述未修饰的结合物的使用的方式使用。此处使用的术语"结合物"指含有聚合物(优选为多糖)以及与所述聚合物化学键合(即结合)的药物的化合物。所述化学键优选为共价键，最优选为通过所述药物分子的N或O原子与所述聚合物的C原子进行化学键合，所述N或O原子为所述药物的结构的固有部分或者为经化学修饰后附加其上的N或O原子。在本发明的范围内，术语"聚合物"指具有至少一种重复单体的化合物，分子量为至少1,000道尔顿，优选为至少10,000道尔顿，并更优选为5，00075,000道尔顿。所采用的聚合物可以是直链的或者支化的。在所述聚合物由至少两种重复单体构成的情况下，所述聚合物可以是有序的，例如具有所述至少两种单体分别交替的序列，或者可以以随机无序方式构建。因此，所述术语"聚合物"也包括均聚物、共聚物、三聚物和更高级的聚合物。如下文所示，本发明的结合物通过部分地对聚合物进行氧化以提供具有多个氧化单体的部分氧化聚合物而制备。所述聚合物的氧化单体随后根据本发明进行修饰以提供具有三种不同单体的聚合物(i)保持其初始结构的未氧化单体，(ii)带有药物的不含醛单体，和(iii)不含有药物和醛的单体。在一个优选的实施方式中，所述聚合物是具有重复单糖单元的多糖，所述重复单糖单体可以是相同的(诸如在葡聚糖的情况下)或者可以是不同的(诸如在阿拉伯半乳聚糖的情况下)，所述多糖可以是天然的或者合成的，并可以是支化链的或者是直链的。所述多糖也可以是经合成修饰的天然多糖。优选所述多糖选自水溶性或水分散性多糖。多糖的非限制性实例有淀粉(由多糖直链淀粉和支链淀粉的组合构成)、糖原(由重复葡萄糖单体构成的支链多糖)、纤维素(由通过卩键键合在一起的重复葡萄糖单元构成)、葡聚糖(由重复葡萄糖单元构成的直链多糖)、普鲁兰(pullulan，由重复麦芽三糖单体构成)、壳聚糖(由分布的|3-(1-4)-连接的D-葡糖胺和N-乙酰-D-葡糖胺单元构成)、阿拉伯半乳聚糖(AG，由以6个半乳糖单元对1个阿拉伯糖单元的比例连接在一起的半乳糖单元和阿拉伯糖单元构成的支链天然多糖)、半乳聚糖(由重复的半乳糖单体构成)、半乳甘露聚糖(由甘露糖单体与半乳糖侧基构成)和瓜尔胶(由(3-D-甘露糖单体与链中具有与之相连的cc-D-半乳糖残基的所有其他单体构成)。此处使用的术语"药物"指治疗活性化合物，优选为氧化敏感性的治疗活性化合物。由于所述药物需要优选通过共价键连接至所述聚合物，所述药物优选选自羟基化(或硫醇化)和胺化的活性化合物。通过所述羟基化化合物的O(或S)原子或所述胺化化合物的N原子能实现与所述聚合物的连接，所述原子可以是所述药物固有的，或者可以是通过化学修饰加在所述药物上以促进所述连接的原子。因此，优选所述药物选自多烯抗生素，分子量低于约2,000道尔顿的低分子量药物、分子量为约2,000道尔顿6，000道尔顿的高分子量药物、胺药物衍生物、肽或多肽及其类似物。羟基化药物的非限制性实例有地塞米松、柔红霉素、阿糖胞苷、水杨酸、檀香醇和普萘洛尔。多烯抗生素的非限制性实例有制霉菌素和两性霉素B(AmB)。低分子量药物的非限制性实例有5-氨基水杨酸、氨基葡糖苷抗生素、多烯抗生素、氟胞嘧啶、乙胺嘧啶、磺胺嘧啶、氨苯砜、甲氧苄啶、丝裂霉素、甲氨蝶呤、阿霉素、柔红霉素、多粘菌素B，普萘洛尔、阿糖胞苷和檀香醇。术语"胺药物衍生物"指含有羟基的药物的寡肽酯，其具有伯胺或者经化学修饰而具有伯胺。此处所使用的术语"寡肽"通常指含有20个或更少的氨基酸的肽链，所述氨基酸可以相同或不同。如此的衍生物的实例包括但不局限于丙氨酰-紫杉醇、三甘氨酰-紫杉醇、丙氨酰-甘氨酰-地塞米松、甘氨酰-地塞米松和丙氨酰-地塞米松。所述多肽是分子量少于约6,000道尔顿的多肽，优选具有一个或多个可氧化的氨基酸如半胱氨酸、甲硫氨酸、酪氨酸、组氨酸和色氨酸。如此的多肽的实例包括但不局限于促黄体激素释放激素(LHRH)、缓激肽、加压素、催产素、生长抑素、促甲状腺素释放因子(TRF)、促性腺激素释放激素(GnRH)、胰岛素和降钙素。术语"多肽类似物"指经过化学修饰的生物活性多肽，包括环衍生物、N-烃基衍生物、其中脂肪酸连接到氨基酸端基上或者连接在肽链上的衍生物和反式氨基酸衍生物。如此处所使用的表达式"C聚合物-N药物"指所述聚合物的C原子和所述药物分子上的N原子之间的键，而表达式"C粋物-O药物"指所述聚合物的C原子和所述药物分子的O原子之间的键。所述药物分子的N原子可例如为胺基(伯胺基或仲胺基，带电荷的或者中性的)、酰胺基或者杂环体系的一部分(带电荷的或者中性的)，而所述药物的O原子可以是羟基(或羟基化物)或羧酸(羧化物-O-C(O)-)。在一个实施方式中，在所述聚合物的C原子和所述药物的N原子之间形成的C-N键是单键，此处称为"胺键"。在另一实施方式中，所述C-N键是双键，此处称为"亚胺键"。如果本发明的结合物中每10个单体或单糖中最多有一个醛基(-C(O)H)(其能够使所述聚合物具有毒性)，优选为每20个单糖中有1个醛基，最优选为每100个单糖中有1个醛基，则称之为基本不含有醛基。所述醛基的丰度测试可选自本领域技术人员所熟知的多种分析方法。下文中公开的一种示例性测试采用盐酸羟胺的定量滴定。在本发明的另一优选实施方式中，本发明的结合物含有以下单体的组合(a)所述聚合物的至少一种单体，例如多糖的单糖；(b)所述单体((a)的)的至少一^中氧化形式，所述氧化形式基本不含有醛基；和(c)至少一种所述氧化形式((b)的)，其与药物相结合并基本不含有醛基；其中，所述组合提供了基本不含有醛基的水溶性或水分散性多糖。在一个实施方式中，所述聚合物是多糖，而本发明的结合物含有以下单糖的组合(a)多糖的至少一种单糖，所述多糖例如为葡聚糖，所述单糖是葡萄糖；(b)葡萄糖的至少一种氧化开环形式，该氧化开环形式基本不含有醛基；和(C)葡萄糖的至少一种氧化开环形式，该氧化开环形式与药物相结合并基本不含有醛基；其中，所述组合提供了基本不含有醛基的水溶性或水分散性葡聚糖。优选的是，本发明的结合物含有单糖(a)(c)中每一种的至少一个。在一个实施方式中，所述单糖(a)占所述结合物重量的约10%98%，所述氧化形式(b)占所述结合物重量的约10%60%。在又一个实施方式中，所述药物结合物(c)占所述结合物重量的约1°/。50%。以上基团(a)的术语"单体"在本发明的范围里指构成所述聚合物的嵌段的单体，或者优选为构成多糖的单糖。所述单糖的非限制性实例有吡喃型葡萄糖(淀粉中的重复单元)、葡萄糖(糖原、葡聚糖和纤维素中的重复单元)、麦芽三糖(普鲁兰中的重复单元)、p-(l-4)-连接的D-葡糖胺和N-乙酰-D-葡糖胺(壳聚糖中的重复单元)、阿拉伯糖和半乳糖(阿拉伯半乳聚糖AG中的重复单元)和半乳糖(半乳聚糖中的重复单元)。所述单糖的氧化形式(以上基团(b))是由所述多糖链的单糖单元的氧化形成的开环二醛形式。为形成基本不含有醛的氧化形式，通过使所述游离醛基与对所述游离醛基具有反应性的试剂反应，形成选自醚、酯、胺、亚胺、酰胺、縮醛或半縮醛的基团，从而对所述开环二醛进行化学修饰。所述糖的与药物相结合的至少一种氧化形式(以上基团(c))具有通式I。应当注意的是，所示结构是开环单糖的通用表达式，对于不同的多糖或聚合物，该通用表达式可以不同。因此，所述通用结构还涵盖不同大小的环、立体异构体、不同的取代基和分子量。在所述通式I中<formula>formulaseeoriginaldocumentpage13</formula>R,不存在或者选自H、OH和-O-烃基;R2是通过N或O原子与所述单体结合的药物(如前文所定义)，通过N原子的所述结合可通过d-N单键或双键实现；当所述结合通过Q-N双键实现时，R不存在而所述N原子可以进一步质子化或者没有进一步质子化；当所述结合通过CrN单键实现时，R,是H，而所述N原子可以被一个或两个氢原子所质子化；R3不存在或者选自H、OH、-O-烃基、-N-烃基、氨基酸、脂质、糖脂、肽、寡肽、多肽、蛋白质、糖蛋白、糖和寡糖；R4不存在或者选自药物、-O-烃基、-N-烃基、氨基酸、脂质、糖脂、肽、寡肽、多肽、蛋白质、糖蛋白、糖和寡糖；和当R3和R4的每一个相互独立地为O-烃基或N-烃基时，所述烃基与其所相连的O或N原子以及所示C2原子可一起形成杂环体系。R2的药物可以与R4的药物相同或不同。正如本领域技术人员所知，术语"氨基酸"指同时含有氨基和羧基的有机分子，包括a-氨基酸和(3-氨基酸。术语"肽"指通过肽键以特定序列连接在一起的氨基酸的短链。术语"多肽"指由多个氨基酸构成的直链聚合物。该术语也涵盖蛋白质。正如本领域技术人员所知，术语"脂质"指不溶于水但易于溶解在非极性有机溶剂中的有机分子。此类也包括磷脂。术语"糖脂"指如所述定义的带有与极性头基相连的糖残基或寡糖的脂质分子。术语"糖"指带有通式为(CH20)n的单体的短碳水化合物。非限制性实例有单糖(葡萄糖、果糖和甘露糖)和二糖(蔗糖)。术语"寡糖"指共价相连的糖的短直链或短支化链。术语"糖蛋白"指具有与氨基酸侧链共价相连的一个或多个寡糖链的任何蛋白质。在通式I中，R4可以不存在，而所述药物的与C1相连的N原子也可以通过C-N单键或双键与C2相连而形成环结构。在所述通式I的一个实施方式中，与所述多糖相连的所述药物选自于AmB、多柔比星、丝裂霉素C、多粘菌素B、紫杉醇、庆大霉素、地塞米松、5-氨基水杨酸和生长抑素。优选所述药物是AmB。在另一实施方式中，所述单糖选启葡萄糖、》葡糖胺、阿拉伯糖和半乳糖或其衍生物。在另一实施方式中，所述聚合物是同多糖，由相同单糖的未氧化单体、氧化单体和结合单体构成。在另一实施方式中，所述多糖是混合的或者共聚的多糖，由至少两种不同的单糖的未氧化单体、氧化单体和结合单体构成。在一个优选的实施方式中，R3是OH而R4是0-烃基，其中所述烃基是低级烃基，即具有19个碳原子的烃基，如乙基，或高级烃基，即具有至少10个碳原子的烃基，如胆固醇。在另一优选的实施方式中，113是OH而R4是通过胺键与C2键合的N-烃基。在另一优选的实施方式中，R3不存在而R4是通过亚胺键与C2键合的N-烃基。在又一优选的实施方式中，R3是H而R4是0-烃基。在另一优选的实施方式中，R3是OH而R4是0-烃基。在另一优选的实施方式中，R3和R4中的每一个相互独立地为O-烃基。在另一优选的实施方式中，R3是通过胺键与C2键合的N-烃基，而R4是0-烃基。在又一优选的实施方式中，R3是H而&是通过胺键与C2键合的N-烃基。在另一优选的实施方式中，R3和R4中的每一个相互独立地为通过胺键与C2键合的N-烃基。在另一实施方式中，R3不存在而R4是通过亚胺键与C2键合的氨基酸，所述氨基酸优选为赖氨酸。在另一实施方式中，R3是H而R4是氨基酸，优选为赖氨酸。在另一实施方式中，R3不存在而R4是二NCH2CH20H，其中N原子可以为中性或者带电的。在另一实施方式中，R3是H而R4是-NZCH2CH20H，其中Z可以是H或以上所定义的取代基，而所述N原子可以为中性或带电的。在另一实施方式中，R3是OH而R4是-OCH2CH3。在另一实施方式中，所述聚合物是葡聚糖、壳聚糖或阿拉伯半乳聚糖，所述药物是AmB，而R4是-NCH2CH20H、"NZCH2CH20H(其中Z是H或烃基)或-0012013。此处所采用的术语"烃基"泛指150个碳原子的碳链。所述碳链可具有取代基或者没有取代基，直链的或支化链的，环状的或芳香环状的。所述烃基的取代基可以是一个或多个基团或原子，如卤素(I、Br、Cl和F)、杂原子(如N、O、S、P)、-OH、-N02、-丽2-芳基、-S(=0)-、-S(=0)20-、-(:(=0)皿2-等。该术语也指具有150个碳原子的内链烯基，并指通过C-C双键或三键或芳香部分而部分地或者全部地结合的碳链。术语"低级烃基"指具有19个碳原子的烃基，而术语"高级烃基"指具有10个以上碳原子的烃基。所述烃基的非限制性实例有甲基、乙基、丙基、异丙基、异丁基、正丁基、仲丁基、叔丁基、异己基、烯丙基(丙烯基)、炔丙基(丙炔基)、苑基、苯基和萘基。术语"-N-烃基"指通过N原子与所述聚合物相连的烃基，所述N原子可以是仲、叔或季胺或亚胺，可以是质子化的、烃基化的、中性的或带电荷的N原子。术语"-O-烃基"指通过O原子与所述聚合物键合的烃基。R3或R4的具有取代基或者不具有取代基的-N-烃基或-O-烃基、氨基酸、脂质、糖脂、肽、寡肽、多肽、蛋白质、糖蛋白、糖和寡糖可选自(i)对所述未修饰的结合物的生物/治疗活性、特异性、化学和/或物理性质基本没有影响的部分和(ii)使所述经修饰的结合物具有至少一种选自以下的额外特性的部分疏水性、亲水性、酸性、溶解性、分散性、化学反应性、对靶组织的特异性、经修饰的治疗活性和对某种受体或生物活性位点的亲合性。对所述结合物基本没有影响的部分的非限制性实例衍生自乙醇胺、羟胺、丙二醇、甘油和乙醇。能使所述结合物具有额外特性的部分的非限制性实例有(l)胆固醇及其衍生物，其可使所述结合物具有疏水性并有助于亲水性药物越过疏水性屏障；(2)葡糖胺，其可以提高所述结合物的亲水性；(3)氨基酸，如甘氨酸，丙氨酸、苯丙氨酸、谷氨酸、天冬氨酸或它们的短链寡肽，其可用于提高所述结合物的酸性;(4)氨基酸，如赖氨酸、鸟氨酸(ornythine)或它们的寡肽，其可用于降低所述结合物的酸性；(5)双官能分子，如赖氨酸、精胺、亚精胺和其他非毒性二胺，其可用于所述结合物的交联或支链化；和(6)疏水性分子，如脂肪酰胺硬脂胺、油胺和棕榈酰胺(palmitoylamine),其可用于提高所述结合物的亲脂性。在一个实施方式中，所述部分能使所述结合物具有所需的疏水性，因此使本发明所得的经修饰的结合物变得不溶于水，从而适用于纳米颗粒、脂质体、胶束分散体和胶质分散体的制备。在另一实施方式中，所述经修饰的结合物用于覆盖亲脂性表面。在本发明的另一方面，提供了本发明的任一种结合物在组合物制备中的应用。优选所述组合物用于药用用途。在一个实施方式中，提供了本发明结合物在制备可有效作为抗生素的药物组合物中的应用。在另一实施方式中，提供了本发明结合物在制备可有效作为抗寄生虫药的药物组合物中的应用。在另一实施方式中，提供了本发明结合物在制备可有效作为抗癌药的药物组合物中的应用。在本发明的另一方面，提供了含有至少一种本发明结合物的组合物。优选所述组合物还含有载体或非活性成分。更优选所述组合物是药物组合物而所述载体是药用载体。所述药用载体可例如选自赋形用载体(vehicle)、佐剂、赋形剂(excipient)或稀释剂，如本领域技术人员所熟知。优选所述药用载体是对药物和作为一个整体的结合物而言是化学惰性的载体和在使用条件下没有有害的副作用或毒性的载体。载体的选择部分地决定于具体的结合物以及具体的应用。本发明的结合物或含有该结合物的任何组合物可制成用于口服、喷雾、肠胃外、皮下、静脉内、肌肉内、腹膜间、直肠和阴道施用的制剂。此外，本发明的结合物也可制成水凝胶，优选为生物降解性水凝胶并因此配制用于注射、涂覆在支架上或者原位植入。本发明的结合物也可制成纳米颗粒、胶束分散体、脂质体和利用所述结合物的各种药物释放特性的经修饰的释放制剂。本发明的药物组合物可用于能被此处所定义的所述结合物中所采用的任何一种药物治疗的任何一种疾病或失调的治疗。例如，所述结合物可在需要治疗的受试对象(人类或非人类)的治疗中用作抗生素、抗寄生虫药或抗癌药。在此方面中，术语"治疗"或其任何语言上的变化形式指施用能有效改善与疾病相关的不良症状的治疗量的本发明组合物，以在所述症状发生前阻止其表现、延缓疾病进程、延缓症状恶化、促进缓解期开始、减缓在所述疾病的进行性慢性阶段导致的不可逆损伤、延迟所述进行性阶段的发作、减轻所述疾病的严重性或治愈所述疾病、提高存活率或更快地恢复、或者预防疾病形式的发生、或者上述两种以上效果的组合。本发明的组合物可以以任何合适的制剂单独地或者与其他己知的治疗(即化学疗法)组合而进行施用。在本发明的另一方面，提供了用于制备本发明的结合物的方法，所述方法包括(a)提供聚合物即多糖和药物的未经修饰的水溶性结合物，所述多糖具有至少一个醛基，所述药物通过选自亚胺键(-Cs^-Ni^-)、胺键(-C聚合物-N药物R-)、酰胺键(-C聚合物-N,C(=0)-)、醚键(-C聚合物-0药物-)和羧基键(-Cjg^-O,-C(O)-)中的键与所述多糖结合；和(b)将所述未修饰的结合物与对醛基具有反应性(如以上所公开)而对所述药物或所述键基本没有反应性或具有低反应性的试剂反应；所述试剂优选具有低于500道尔顿的分子量，更优选为低于200道尔顿；由此得到基本不含有醛基的结合物。可选的是，所述方法进一步包括还原所述药物和所述多糖间的亚胺键的步骤。在一个实施方式中，步骤(a)和步骤(b)依次进行。在另一实施方式中，所述方法采用如有机合成领域的技术人员已知的一锅式反应。在一个优选的实施方式中，所得的基本不含有醛基的结合物相对于上述步骤(a)的未修饰的结合物而言具有降低的毒性。在另一实施方式中，方法步骤(a)的未修饰的结合物选自在美国专利5，567，685和6，011，008中公开的结合物。应当理解本发明的结合物可含有手性中心。这些手性中心可以是(R)构型或(S)构型，或者其混合物。因此，此处提供的结合物可以是对映异构纯的，或者是立体异构或者非对映异构的混合物。在氨基酸残基的情况下，这些残基可以是L-型或者D-型。应当理解所述结合物的手性中心在一定条件下可发生差向异构化。在本发明的再一个方面中，提供了通过本发明的制备方法获得的结在另一方面，提供了可通过本发明的制备方法获得的结合物。在另一方面，提供了通过使具有多个醛基的未修饰的结合物与能将所述多个醛基中的每一个化学转化为胺、亚胺、酰胺、縮醛、半縮醛、醚和酯的试剂(正如本领域技术人员所知)进行反应而制备的结合物。对于醛基转化，参见例如ComprehensiveOrganicTransformations:AGuidetoFunctionalGroupPreparations(R.CLarock,Wiley陽VCH;第2版，1999)。在本发明的另一方面，提供了减小与所述未修饰的结合物如在美国专利5，567，685和6,011,008中公开的那些结合物相关的毒性的方法，所述方法包括将所述未修饰的结合物的多个醛基转化为多个选自縮醛、半縮醛、胺和亚胺中的基团。在本方面的一个实施方式中，所述未修饰的结合物与聚胺反应的方式为所述未修饰的结合物的所述醛基与所述聚胺的胺基反应，因而使所述结合物和所述聚胺交联并生成水凝胶。优选所述水凝胶基本不含有醛基。为理解本发明并知道如何付诸实践，现在将参考附图，仅通过非限制性实施例的方式描述优选的实施方式，在所述附图中图1描述了葡聚糖多醛的细胞毒性。采用在鼠的RAW264.7细胞中的SH-胸苷掺入法，通过应用具有不同氧化程度的葡聚糖(40kDa)进行细胞毒性测试。每个测试分三组，每组进行两次。列出了平均数和标准偏差。所述醛浓度计算如下[2(剂量重量，g)x(氧化程度。/。)/(糖单元重量，160g/mol)mL]。图2描述了本发明的经修饰的葡聚糖多醛的细胞毒性。采用在鼠的RAW264.7细胞中的SH-胸苷掺入法，通过应用葡聚糖(40kDa)进行细胞毒性测试。每个测试分三组，每组进行两次。图3描述了葡聚糖-AmB(亚胺)结合物和葡聚糖-AmB-乙醇胺结合物的体外细胞毒性。通过在鼠的RAW264.7细胞中的311-胸苷掺入法进行细胞毒性测试。施用含同量的药物的结合物。每个试验分三组，每组进行两次。图4显示在37。C的溶液中AmB从葡聚糖-AmB结合物中的释放。通过HPLC评价AmB的释放。每个数据点是两次不同批次的平均。具体实施例方式本领域技术人员应认识到，此处提供的实施例以本发明的非限制性实施方式提供。此处所示的具有式I的通用结构的单糖的反应图式和开环结构旨在作为多糖或单糖的通用表达式，而不应作为要求保护的单体结构或视作叙述优选的实施方式。式I的该通用结构或者在反应图式中所示的任何所述结构可具有取代基或者具有不同的环大小(取代基或环尺寸可以是其他聚合物或多糖的特征)。因此，本领域技术人员应知晓可在采用必要的修饰方法的条件下将这种多糖替换为另一种多糖。实施例实施例l:葡聚糖多醛的合成用不同量的高碘酸盐氧化MW大于40,000的葡聚糖，以形成一定范围内的具有不同醛含量的氧化葡聚糖(反应图式1)。通过加入可控量的高碘酸钾(分别为0.0836g、0.2875g、0.46g、0.8625g、1.4375g和2.875g)到1g葡聚糖中并在室温下在避光容器中搅拌6小时，从而在水性溶液中制得氧化程度为1.5%50%(1.5%、5%、8%、15%、25%和50%)的葡聚糖多醛。通过Dowex-l阴离子交换色谱(乙酸盐形式，pH7)从碘酸盐和未反应的高碘酸根离子中纯化所得多醛。Dowex乙酸盐通过用1M乙酸水溶液对市售阴离子交换剂进行预处理而得到。在4'C，通过3500分子量截止透析管(MembraneFiltrationProductsInc.,SanAntonio,TX)相对于双蒸水(DDW)(5L，交换4次)对经纯化的氧化葡聚糖溶液进行48小时的透析，然后冻干24小时至干燥。氧化程度的测定如下进行将氧化葡聚糖(0.1g，0.625mmol)溶解在25mL的0.25M盐酸羟胺溶液(pH4.0)中。在室温下将所述溶液搅拌3小时，然后用O.lMNaOH标准溶液进行滴定。从描述每体积中的pH变化(dpH/dV)相对于滴定体积(V)的图表中计算滴定终点。通过GPC(凝胶渗透色谱法)测定分子量。对于浓度为10mg/mL的样品，用在DDW中的0.05M硝酸钠通过Shodex(KB-803)柱子以1mL/mm的流速进行样品洗脱。通过使用5,000Da110，000Da范围内的普鲁兰标准样(PSS，Mainz，Germany)估测所洗脱的样品的分子质量。结果在用于氧化的高碘酸钾的量和所述氧化葡聚糖的醛含量之间存在线性相关。在用不同摩尔比例的高碘酸盐(l:1、1:2、1:3、1:5、1:10和1:33的高碘酸盐:糖单元)进行反应后，葡聚糖的氧化程度和所述氧化葡聚糖的分子量总结在表l中。<table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table>表1一在用不同摩尔比例的KI04氧化后的葡聚糖的特性。在表1中a氧化程度由盐酸羟胺法测定。氧化百分数是经氧化生成每单元两个醛的糖单元的百分比；b分子量由凝胶渗透色谱法测定。所有氧化葡聚糖具有相似的约32,000的平均MW和约1.6的多分散度。高度氧化的葡聚糖的多分散度有所增加(P=2.39)，这与用于氧化的高碘酸盐的大量过量有关。实施例2:经修饰的葡聚糖的合成还原葡聚糖一将氧化葡聚糖(1g，50%氧化)溶解在100mL的DDW中。加入NaBH4(lg)并搅拌所述反应混合物24小时。所述溶液通过透析纯化并冻干(如以上实施例1所述)。葡聚糖縮醛一将氧化葡聚糖(1g，50%氧化)溶解在100mL的乙醇中并搅拌24小时。葡聚糖縮醛在DDW中沉淀并冻干(如以上实施例1所述)。葡聚糖-乙醇胺亚胺/胺一将葡聚糖(2g，50%氧化)溶解在200mL的硼酸缓冲液(pHll)中，加入0.41mL(1.1摩尔当量)乙醇胺。将所述反应混合物搅拌24小时，此后移取100mL样品，通过透析纯化，并冻干至干燥(如以上实施例l所述)，从而得到亚胺形式。为得到胺形式，加入lgNaBH4到余下的100mL反应溶液中。将所述反应混合物搅拌24小时，通过透析纯化并冻干(反应图式1)。实施例3:葡聚糖-两性霉素B(AmB)亚胺/胺结合物在第一步骤中，制备氧化葡聚糖(50%氧化)，随后为第二步骤，即氧化葡聚糖与AmB的结合(参见反应图式2)。在典型试验中，将1g糖单元的氧化程度为50%的氧化葡聚糖溶解在100mL的硼酸缓冲液(pH4l)中。加入AmB粉末(0.25g)，所述混合物在室温下在避光容器中搅拌48小时。所得反应混合物的pH在反应中保持在11。得到亚胺结合物的透明橙黄色溶液，通过透析纯化并冻干24小时(如实施例1所述)。通过向所述亚胺结合物反应混合物中加入NaBH4并持续反应过夜，得到胺结合物。在反应过程中，观察到颜色由橙黄色变为淡黄色。所述胺结合物通过透析纯化并冻干(如实施例1所述)。如反应图式2所示，通过加入(l.l摩尔当量的醛含量)的乙醇胺到亚胺结合物混合物中并持续反应过夜，制得葡聚糖-AmB-乙醇胺(亚胺)结合物。所述反应的pH保持在11。所述葡聚糖-AmB-乙醇胺结合物通过透析纯化并冻干至干燥(如实施例1中所述)。实施例4:结合物中AmB含量的测量使用含有已知量的药物的葡聚糖-AmB结合物作为标准，通过410nm处的UV吸光度测定本发明结合物中的AmB含量。通过HPLC在C18反相柱上(LichroCart250-4，Lichrospher100，5nm)测定所述结合物的纯度。流速为1.8mL/min(毫升/分钟)的70%乙腈/27%水/3%乙酸的混合物用作洗脱液。UV检测在410nm进行。对于两项测试，结合物样品均以在DDW中0.3mg/mL的浓度进行制备。实施例5:阿拉伯半乳聚糖(AG)-赖氨酸结合物的制备将具有20,000Da平均分子量的AG(lg，0.006mol)溶解在20ml的双蒸水(DDW)中，随后加入高碘酸钾(1.4g，0.006mol)，所述反应混合物在室温下搅拌4小时以完全溶解所述氧化剂。将如此得到的氧化AG在填有乙酸盐形式的Dowex-l的柱子中与过量的高碘酸盐和反应副产物相分离。然后，在4'C，通过透析管(12，000Da分子量截止值)相对于DDW(5Lx4次)对经纯化的氧化AG溶液进行48小时的透析并冻干至干燥。作为另外一种选择，使用5,000分子量截止过滤器通过超滤对所述结合物进行纯化直至得到纯的结合物。通过将所述结合物与盐酸羟胺反应并用NaOH溶液滴定所形成的游离HC1至酚酞终点来测定氧化程度。将具有每1g多糖0.005mol醛的氧化程度的AG溶解在0.1M碳酸盐缓冲液(pH8.5，10ml)中，随后加入盐酸赖氨酸(1%w/w,10mg)，所述反应混合物在37。C振摇24小时。将所述亚胺结合物凝胶一分为二将其中一份与过量的乙醇胺反应以封闭多余的醛基。在5小时后分离所述凝胶，并仔细清洗以去除未反应的乙醇胺和其他小分子。室温下，用12小时通过向所述反应混合物加入硼氢化钠(1.1摩尔NaBPV每摩尔在AG中的糖单元)，将另一半原始凝胶部分和一半所述乙醇胺衍生物部分还原为胺形式，随后在真空下干燥。实施例6:葡聚糖多醛的体外毒性在RPMI1640生长培养基中制备具有不同氧化程度(1.5n/。50。/。氧化)的葡聚糖的系列稀释液。在所述测试中的最终醛浓度为0.01pmol/mL34lamol/mL。将氧化葡聚糖毒性与谷氨酸多醛毒性进行比较，其中谷氨酸多醛以1.5nmol/mL4.12pmol/mL醛基的浓度加入。在鼠的RAW264.7细胞(国际公认的用于药效测试的细胞系)中评价葡聚糖衍生物的细胞毒性。通过311-胸苷掺入法估测生长抑制。在37°C，在平底培养瓶中培养细胞。在每次试验前，清洗所述细胞并用胰蛋白酶处理而移取或从瓶底刮下所述细胞，用适当量进行离心、重新悬浮并稀释在生长培养基中至所希望的细胞浓度。所述生长培养基由RPMI1640和10。/。胎牛血清(FCS)组成。通过使用自动分配器，将200pL的细胞悬浮液加入到微滴定板的每个孔中。在过夜温育之后，将合适的药物浓度(分三组)加入到测试孔中。不含有药物的培养基用作对照。在次日添加SH-胸苷(0.5pCi)(20^L培养基中)，再过24小时之后，收获所述板并用液体闪烁计数器(LKB，芬兰)读数。由受试药物所得的细胞生长抑制百分数计算为[IOO-(药物计数/对照计数)x100]。药物的ICso(定义为抑制50%时的掺入浓度)可从图中由掺入曲线的抑制量来确定。结果通过将所述细胞与相同量的氧化葡聚糖温育进行细胞毒性试验。发现在氧化葡聚糖中的醛含量和细胞生长抑制之间具有相关性(图1)。醛基的存在导致细胞毒性，IC5。为3)Limol/mL。细胞与高于7)timol/mL的醛浓度相接触导致完全抑制。实施例7:经修饰的葡聚糖多醛的细胞毒性评价该试验的目的在于确认之前描述的细胞生长抑制仅由所述醛基所致。因此，将所述醛基经化学转化为非毒性基团如羟基(乙醇胺的端基)或脂肪族基团(在与乙醇反应后的端基)。所有修饰均对具有最高氧化程度(50%)的葡聚糖多醛进行(反应图式1)。氧化葡聚糖和经修饰的葡聚糖的系列稀释液在RPMI1640肉汤培养基中制备。测试中的最终葡聚糖浓度为44ng/mL5555pg/mL。为确证所述醛基是引起细胞毒性的主要原因，对天然葡聚糖和完全除去醛基(通过还原为羟基)的葡聚糖进行评价。具有50%氧化的葡聚糖作为阳性毒性对照。药效和IC5。如上述所定义(实施例6)。结果在实施例6中所公开的细胞体系中评价所述经修饰的葡聚糖的毒性。氧化葡聚糖在最低测试浓度(130pg/mL)下导致几乎完全的生长抑制。用乙醇修饰而形成半縮醛时，显著降低了所述聚合物的毒性，因为葡聚糖半縮醛在高于1800pg/mL的浓度下才观察到完全生长抑制。相对于未修饰的葡聚糖的毒性，用乙醇胺修饰(亚胺形式)时，毒性降低16倍，经另外的还原步骤形成葡聚糖-乙醇胺(胺)时，进一步降低了毒性。从表2中可以看到，由葡聚糖和乙醇胺构成的结合物(根据以上实施例2进行制备)表现出毒性的显著降低，其IC5。从130pg/mL升至2000(ig/mL。此外，亚胺键还原为胺键后，进一步将毒性降低至IC5。=4500pg/mL(35倍)。通过例如将氧化葡聚糖的醛基还原而完全消除醛(在表2中称为还原葡聚糖)时，完全消除了测试剂量范围内的毒性。在天然葡聚糖中也观察到相似的效果。为更加容易地对结果进行比较，根据图表对ICso值进行估测(如图2所示)并总结在表2中。_<table>tableseeoriginaldocumentpage25</column></row><table>表2—与氧化葡聚糖(50%)和戊二醛相比较的经修饰的葡聚糖的体外细胞毒性。aiCso值由体外细胞毒性试验进行测定。对于葡聚糖40kDa的经不同修饰物的细胞毒性试验通过RAW264.7细胞中的SH-胸苷掺入测量来进行。将所述细胞毒性与天然葡聚糖和氧化葡聚糖的作用进行比较。实施例8:葡聚糖-AmB结合物的体外毒性在与之前描述的相同的细胞体系(实施例7)中进行所述结合物的细胞毒性测试。在所述氧化葡聚糖表现出细胞毒性的浓度范围内制备结合物。结果在合成后，如实施例4中所描述通过HPLC评价所述结合物的纯度。所述HPLC显示完全结合的药物结合物的存在。没有检测到游离的药物。因此可以推断毒性来自于结合物本身，而不是来自于游离的未结合的药物分子。通过与葡聚糖-AmB亚胺结合物(在上述提到的美国专利5,567,685中已有描述)比较来评价毒性。所有结合物中的AmB浓度相似，以消除药物对结合物毒性的影响。将含有或者不含有乙醇胺的AmB-葡聚糖亚胺结合物与所述AmB葡聚糖胺结合物进行比较(均含有等当量的AmB)，以评价残余醛基对结合物毒性的贡献(图3)。药效和ICso如之前所定义。ICs。值总结在表3中。游离AmB对寄生虫和细胞均具有极大的毒性。可以看到，所述胺结合物和亚胺结合物与游离AmB相比毒性具有实质性的降低，但仍保持了一定程度的毒性，据认为该毒性源自于残留的醛基。AmB的胺结合物对寄生虫和细胞的毒性最小。不希望束缚于理论，所描述的细胞毒性和抗寄生虫活性的差异似乎源自于在所述亚胺键的水解后可能从所述亚胺结合物中释放出的AmB。在相同条件下药物似乎不大可能从所述胺结合物中释放。用乙醇胺对所述亚胺或者胺结合物进行修饰从而得到基本上不含有醛的结合物，在保持所述结合物活性的同时进一步降低了所述结合物的毒性。<table>tableseeoriginaldocumentpage26</column></row><table>表3—结合物的抗杜氏利什曼原虫(Leishmaniadonovani)的体外活性、细胞毒性和溶血作用。aiC5o值来自于AmB和不同的葡聚糖-AmB结合物抗杜氏利什曼原虫的活性测试。釆用SH-胸苷掺入法估测寄生虫生长抑制。blC5o值来自于AmB和不同的葡聚糖AmB结合物抗鼠的RAW264.7细胞系的细胞毒性测试。采用311-胸苷掺入法估测细胞生长抑制。e溶血作用在37。C与绵羊红细胞温育1小时之后进行肉眼观察评价。实施例9:抗杜氏利什曼原虫的体外活性对抗杜氏利什曼原虫IS前鞭毛体的体外抗寄生虫活性进行了评价。该株系分离自苏丹的一个病人，从耶路撒冷的希伯莱大学(HebrewUniversityofJerusalem)的InternationalReferenceCenteroftheKuvinCenterforInfectiousDiseases获得。在RPMI1640生长培养基中制备受试试剂的系列稀释液。测试中的最终AmB浓度为0.2ng/mL6|ig/mL。盛有不含药物的培养基的孔作为对照。采用3&胸苷掺入法估测生长抑制。简言之，在200pL培养基中按60,000前鞭毛体/孔对96孔板进行接种，并在3小时后加入测试溶液。在24小时温育后，加入0.5pCi/孔的3H-胸苷(在10%FCS培养基中)。再过24小时之后收获所述培养物。在试验中，细胞在25"C下在空气中温育。所述结合物的药效和IC5。如以上所描述(实施例7)进行估测。结果相对于所述胺结合物，亚胺结合物(即不含乙醇胺或者没有结合乙醇胺)表现出较高的抗杜氏利什曼原虫寄生虫的活性，ICso约为0.3jig/mL(相比于1.2pg/mL)(表3)。不希望束缚于理论，该结果似乎进一步支持以上所讨论的所述亚胺键的可能的水解性降解。实施例10:多柔比星-葡聚糖乙醇胺亚胺结合物多柔比星(DOX，也称为亚德里亚霉素)在各种反应条件下与氧化葡聚糖结合。在一个典型试验中，20.0毫升的纯化DAD溶液(25mg/ml，MW^9,000)与等体积的0.2M硼酸盐缓冲液(pH9.1)相混合，并向所述聚合物溶液中加入200.0mg的DOX(10mg/ml)。在37。C下，所述混合物的pH保持在pH8.9土0.1下16小时。在16小时后，加入过量的乙醇胺并在相似条件下反应5小时以封闭残余的醛键。在4°C，使用MW截止值为12,000的分子多孔膜管相对于DDW对所述粗制结合物进行30小时的透析，随后在2,000rpm下离心10分钟并冻干。经480nm处的UV吸光度测定，冻干的浅黄色产物(605mg，85%产率)含有约20%的DOX。所冻干的淡黄色产物保存在与空气隔绝的避光玻璃容器中。用10,000截止孔径的透析管测定从所述结合物中释放的DOX。在30小时后释放出大约10%的药物。进行体外细胞培养以测定所述结合物的活性。DOX的亚胺衍生物具有与游离药物相同量级的有效性。实施例11:丝裂霉素C-阿拉伯半乳聚糖葡糖胺亚胺结合物将1g阿拉伯半乳聚糖(AG，分子量28，000)溶解在含有0.3g高碘酸钾的50ml溶液中。所述溶液在室温下混合3小时。然后将所述溶液流过Dowex柱子并透析和冻干得到不含有氧化剂的白色粉末。纯双醛AG(200mg)溶解在10ml硼酸缓冲液(pH8.9)中并与在5ml的水中的20mg的丝裂霉素C相混合。所述溶液混合24小时。接着加入过量葡糖胺并再继续反应5小时，然后通过超滤而对产物进行纯化以除去水，并冻干得到席夫碱。根据280nm处的UV吸光度测定，结合药物量为8重量％。所述冻干产物的分子量为26,000道尔顿。如以上实施例7所描述测量释放进入溶液的丝裂霉素和毒性。37。C下，在缓冲溶液(pH7.4)中48小时后在溶液中发现的药物量为总剂量的约10%。与游离药物的活性相比，所述结合物显示出类似的抗癌活性。用葡糖胺修饰的结合物对细胞的毒性与相同的未经修饰的结合物相比而言小很多。实施例12:多粘菌素B-阿拉伯半乳聚糖结合物如上所述制备纯的氧化AG。将纯二醛AG(200mg)溶解在10ml硼酸钠缓冲液(pH8.9)中，并与5ml水中的20mg多粘菌素B相混合。所述溶液混合24小时。用水对该溶液进行透析，并冻干以获得席夫碱。通过使所述席夫碱与诸如葡糖胺和乙醇胺反应等试剂反应，制备AG和多粘菌素B的经修饰的结合物。实施例13:紫杉醇-阿拉伯半乳聚糖半缩醛结合物使紫杉醇与纯氧化AG进行反应，其中紫杉醇:所述聚合物样品中的醛基为1:4的摩尔比例。室温下，在pH8.5的DMSO:水溶液为1:9的混合物中进行反应。几乎透明的溶液用过量的丙二醇处理并静置反应5小时，随后离心除去不溶性颗粒并冻干，获得灰白色粉末。所述半縮醛粉末可溶于盐水并经H-NMR测定含有约8重量％的药物。实施例14:庆大霉素-阿拉伯半乳聚糖结合物氨基葡糖苷抗生素即庆大霉素(具有五个氨基的水溶性分子)采用与两性霉素B所描述的相似过程通过席夫碱与AG相结合。该结合物的目的在于降低所述药物对器官所具有的显著毒性，因为虽然其具有广谱抗菌活性，但所述毒性限制了其应用。这些结合物的抗微生物活性测定如下等当量的游离形式的药物或亚胺AG结合物的盐水溶液吸附在圆形滤纸上(6mm直径)并放置在带有金黄色葡萄球菌(105/ml)和大肠杆菌的布种琼脂板上，在37"温育24小时。两份样品均显示出抑制区域。游离药物显示出较大抑制区域(〉20mm)，而所述结合物显示出有限的区域(5mm)。所述差异的原因可以解释为所述结合物受尺寸限制而在琼脂培养基中具有有限的扩散。所述结合物抗对细胞的体外毒性与游离药物的毒性相比显著降低。通过观察注射后7天杀死的小鼠的肾脏来确定在小鼠体内的毒性。用所述结合物处理的小鼠的肾脏没有像用游离药物注射的对照组的情况那样表现出药物所赋予的毒性的症候。实施例15:地塞米松-阿拉伯半乳聚糖半縮醛结合物在室温下，使地塞米松(IOmg)(溶解性较差的抗炎药物)与纯的32%氧化的阿拉伯半乳聚糖(IOOmg)在硼酸盐缓冲液(pH8.9)中反应24小时。向所述混合物中加入丙二醇并继续反应5小时，此时，将溶液冻干，获得由H-NMR确认的半縮醛结合物。实施例16:5-氨基水杨酸-阿拉伯半乳聚糖甘氨酸结合物在室温下，通过将100mg的5-氨基水杨酸与300mg32%氧化AG(MW^9，000)在硼酸盐缓冲液(pH8.9)中反应24小时，使5-氨基水杨酸与氧化AG相结合。将甘氨酸加入所述溶液并继续反应10小时，之后通过超滤进行纯化。以良好产率获得亚胺衍生物。根据透析管法，所述结合药物在磷酸盐缓冲液(pH7.4)中的体外释放显示，在37。C下8小时之后有约10%的释放。与游离药物相比，所述结合物对细胞的毒性低很多。实施例17:生长抑素-阿拉伯半乳聚糖乙醇胺结合物将生长抑素(水溶性肽药物)与氧化AG通过胺键如下结合向纯的32%氧化的AG溶液(IOOmg在10ml硼酸盐缓冲液(pH8.9)中)中加入20mg生长抑素并在4。C将该混合物搅拌过夜。所述透明溶液与过量乙醇胺反应IO小时，随后用10,000MW截止值的超滤进行纯化，并用水洗涤除去盐和未结合的药物。之后，冻干所述溶液，获得115mg的白色固体(对应于约70%的结合)。通过产物的氮分析确认所述结合产率。在37i:在pH7.4的缓冲液中，有约10%的结合药物在12小时后释放。所释放出的药物显示出与原始药物相似的UV谱，通过HPLC分析(C18，乙腈:水为l:l，lml/min，保留时间=5.2分钟)，其具有相同的保留时间。-o、<HOHo、KI04OH0/~ftT,6hA:还原葡聚糖NaBH4，室温(RT)，24h(小时)B:葡聚糖-半縮醛CH3CH3OH，室温，24hC:葡聚糖-乙醇胺(亚胺)NH2CH3CH3OH硼酸盐缓冲液pH=ll，室温，24hD:葡聚糖-乙醇胺(胺)NH2CH3CH3OH硼酸盐缓冲液pH=ll，室温，24hNaBH4，室温，24h外OHi^O、OHOHOHCHpHO、反应图式1<formula>formulaseeoriginaldocumentpage31</formula>反应图式权利要求1.聚合物和药物的结合物，所述结合物包含以下组合(a)所述聚合物的至少一种单体；(b)所述单体的至少一种氧化形式，所述氧化形式基本不含有醛基；和(c)所述氧化形式与药物的至少一种结合物，其中所述结合物具有通式I，其中R1不存在或者选自H、OH和-O-烃基；R2是通过N或O原子与所述单体结合的药物(如前文所定义)，所述通过N原子的结合可以是通过C1-N单键或双键的结合；当所述结合通过C1-N双键实现时，R1不存在而所述N原子可进一步质子化或者未进一步质子化；当所述结合通过C1-N单键实现时，R1是H，而所述N原子可以被一个或两个氢原子所质子化；R3不存在或者选自H、OH、-O-烃基、-N-烃基、氨基酸、脂质、糖脂、肽、寡肽、多肽、蛋白质、糖蛋白、糖和寡糖；R4不存在或者选自药物、-O-烃基、-N-烃基、氨基酸、脂质、糖脂、肽、寡肽、多肽、蛋白质、糖蛋白、糖和寡糖；当R3和R4的每一个相互独立地为O-烃基或N-烃基时，所述烃基、与该烃基相连的O或N原子以及所示C2原子可一起形成杂环体系，以及其中所述组合提供基本不含有醛基的水溶性或水分散性聚合物。2.如权利要求1所述的结合物，所述结合物含有单体(a)(c)中的每一种的至少一个。3.如权利要求1所述的结合物，其中所述单体(a)占所述结合物的重量的约10%98%。4.如权利要求1所述的结合物，其中所述氧化形式(b)占所述结合物的重量的约10%60%。5.如权利要求1所述的结合物，其中所述药物结合物(c)占所述结合物的重量的约1%50%。6.如权利要求1所述的结合物，其中所述聚合物是多糖，而所述单体是单糖。7.如权利要求6所述的结合物，其中所述多糖选自淀粉、糖原、葡聚糖、纤维素、普鲁兰、壳聚糖、阿拉伯半乳聚糖、半乳聚糖、半乳甘露聚糖和瓜尔胶。8.如权利要求1所述的结合物，其中所述氧化形式(b)为开环形式，该开环形式通过对所述单体进行氧化然后将经氧化的单体修饰为基本不含有醛的单体来制得。9.如权利要求1所述的结合物，其中所述药物是治疗活性化合物。10.如权利要求9所述的结合物，其中所述活性化合物对氧化敏感。11.如权利要求10所述的结合物，其中所述药物选自羟基化药物和胺化药物。12.如权利要求ll所述的结合物，其中所述药物选自多烯抗生素、低分子量药物、高分子量药物、胺药物衍生物、肽、多肽或其类似物。13.如权利要求12所述的结合物，其中所述低分子量药物具有少于约2,000道尔顿的分子量。14.如权利要求12所述的结合物，其中所述高分子量药物具有约2,000约6,000道尔顿的分子量。15.如权利要求11所述的结合物，其中所述羟基化药物选自地塞米松、柔红霉素、阿糖胞苷、水杨酸、檀香醇和普萘洛尔。16.如权利要求12所述的结合物，其中所述多烯抗生素选自制霉菌素和两性霉素B(AmB)。17.如权利要求13所述的结合物，其中所述低分子量药物选自5-氨基水杨酸、氨基葡糖苷抗生素、多烯抗生素、氟胞嘧啶、乙胺嘧啶、磺胺嘧啶、氨苯砜、甲氧苄啶、丝裂霉素、甲氨蝶呤、多柔比星、柔红霉素、多粘菌素B、普萘洛尔、阿糖胞苷和檀香醇。18.如权利要求12所述的结合物，其中所述胺药物衍生物选自丙氨酰-紫杉醇、三甘氨酰-紫杉醇、丙氨酰-甘氨酰-地塞米松、甘氨酰-地塞米松和丙氨酰-地塞米松。19.如权利要求12所述的结合物，其中所述多肽选自促黄体激素释放激素(LHRH)、缓激肽、加压素、催产素、生长抑素、促甲状腺素释放因子(TRF)、促性腺激素释放激素(GnRH)、胰岛素和降钙素。20.如权利要求1所述的结合物，其中所述R4不存在或者是H，而且所述药物的与d键合的N原子也通过C-N单键或双键与C2键合而形成环结构。21.如权利要求1所述的结合物，其中与所述聚合物键合的所述药物选自两性霉素B、多柔比星、丝裂霉素C、多粘菌素B、紫杉醇、庆大霉素、地塞米松、5-氨基水杨酸和生长抑素。22.如权利要求21所述的结合物，其中所述药物是两性霉素B而所述键是亚胺键或胺键。23.如权利要求1所述的结合物，其中所述R3是OH而R4是0-烃基。24.如权利要求1所述的结合物，其中所述R3是OH而R4是通过胺键与C2键合的N-烃基。25.如权利要求1所述的结合物，其中所述R3不存在而R4是通过亚胺键与C2键合的N-烃基。26.如权利要求1所述的结合物，其中所述R3是H而R4是O-烃基。27.如权利要求1所述的结合物，其中所述R3是OH而R4是0-烃基。28.如权利要求1所述的结合物，其中所述R3和R4中的每一个相互独立地为O-烃基。29.如权利要求1所述的结合物，其中所述R3是通过胺键与(22键合的N-烃基，而R4是0-烃基。30.如权利要求1所述的结合物，其中所述R3是H而R4是通过胺键与C2键合的N-烃基。31.如权利要求1所述的结合物，其中所述R3和R4中的每一个相互独立地为通过胺键与C2键合的N-烃基。32.如权利要求1所述的结合物，其中所述R3不存在而R4是通过亚胺键与C2键合的氨基酸。33.如权利要求1所述的结合物，其中所述R3是H而R4是通过胺键与C2键合的氨基酸。34.如权利要求32或33所述的结合物，其中所述氨基酸是赖氨酸。35.如权利要求1所述的结合物，其中所述R3不存在而R4是=NCH2CH2OH。36.如权利要求1所述的结合物，其中所述R3是H而&是-NZCH2CH2OH，其中Z是H或烃基。37.如权利要求1所述的结合物，其中所述R3是OH而&是-OCH2CH3。38.如权利要求1所述的结合物，其中所述R3和R4中的每一个相互独立地是使所述结合物具有至少一种以下特性的基团疏水性、亲水性、酸性、溶解性、分散性、化学反应性、对靶组织的特异性、经修饰的治疗活性和对特定受体或生物活性位点的亲合性。39.如权利要求38所述的结合物，其中所述基团选自(l)胆固醇及其衍生物；(2)葡糖胺；(3廣基酸；(4)双官能分子；和(5)疏水基团。40.如权利要求1所述的结合物，其中所述聚合物是葡聚糖，所述药物是两性霉素B而R4是NCH2CH20H。41.如权利要求1所述的结合物，其中所述聚合物是葡聚糖，所述药物是两性霉素B，而R4是-NZCH2CH20H，且Z是H或烃基。42.如权利要求1所述的结合物，其中所述聚合物是葡聚糖，所述药物是两性霉素B，而R4是-OCH2CH3。43.如权利要求l所述的结合物，其中所述聚合物是壳聚糖，所述药物是两性霉素B，而&是=NCH2CH2OH。44.如权利要求1所述的结合物，其中所述聚合物是壳聚糖，所述药物是两性霉素B，而R4是-NZCH2CH20H，且Z是H或烃基。45.如权利要求1所述的结合物，其中所述聚合物是壳聚糖，所述药物是两性霉素B，而&是-OCH2CH3。46.如权利要求1所述的结合物，其中所述聚合物是阿拉伯半乳聚糖，所述药物是两性霉素B，而R4是-NCH2CH20H。47.如权利要求1所述的结合物，其中所述聚合物是阿拉伯半乳聚糖，所述药物是两性霉素B，而&是-NZCH2CH20H，且Z是H或烃基。48.如权利要求1所述的结合物，其中所述聚合物是阿拉伯半乳聚糖，所述药物是两性霉素B，而R4是-OCH2CH3。49.一种制备权利要求1所述的结合物的方法，所述方法包括(a)提供聚合物和药物的未经修饰的水溶性结合物，所述聚合物具有至少一个醛基，所述药物通过选自亚胺键、胺键、酰胺键、醚键和羧基键中的键与所述聚合物结合；和(b)将所述未修饰的结合物与对醛基具有反应性而对所述药物或所述键基本没有反应性或具有低反应性的试剂反应；由此得到基本不含有醛基的结合物。50.如权利要求49所述的方法，其中所述试剂具有小于500道尔顿的分子量。51.如权利要求49所述的方法，所述方法进一步包括还原所述药物和所述聚合物之间的所述亚胺键的步骤。52.如权利要求49所述的方法，其中所述聚合物是多糖。53.如权利要求49所述的方法，其中所述基本不含有醛基的结合物的毒性相对于步骤(a)的所述未修饰的结合物而言得到降低。54.通过权利要求4953中任一项所述的方法得到的结合物。55.可以通过权利要求4953中任一项所述的方法得到的结合物。56.通过将具有多个醛基的未修饰的结合物与能将所述多个醛基中的每一个化学转化为选自胺基、亚胺基、酰胺基、縮醛基、半縮醛基、醚基和酯基中的基团的试剂反应而制得的结合物。57.权利要求148中任一项所述的结合物在组合物的制备中的应用。58.如权利要求57所述的应用，其中所述组合物是药物组合物。59.如权利要求58所述的应用，其中所述组合物是抗生素。60.如权利要求58所述的应用，其中所述组合物是抗寄生虫药。61.如权利要求58所述的应用，其中所述组合物是抗癌药。62.含有权利要求148中任一项所述的结合物的组合物。63.如权利要求62所述的组合物，所述组合物为药物组合物。64.如权利要求62或63所述的组合物，所述组合物进一步含有载体。65.如权利要求63所述的组合物，所述组合物为抗生素组合物。66.如权利要求63所述的组合物，所述组合物为抗寄生虫药组合物。67.如权利要求63所述的组合物，所述组合物为抗癌药组合物。68.含有权利要求1所述的聚合物和药物的结合物的药物组合物，所述组合物用于治疗能由所述药物治疗的疾病或失调。69.如权利要求6269中任一项所述的组合物，所述组合物为经修饰的释放制剂。70.权利要求148中任一项所述的结合物与聚胺形成的水凝胶。71.如权利要求148中任一项所述的结合物，所述结合物为从纳米颗粒、胶束分散体和脂质体中选择的形式。全文摘要本发明公开了聚合物和药物的经修饰的聚合物结合物，所述结合物在基本保持了与未修饰的母体化合物相同程度的治疗活性的同时，其毒性相对于所述未修饰的母体化合物而言得到降低。文档编号A61K47/48GK101443044SQ200680040507公开日2009年5月27日申请日期2006年9月25日优先权日2005年9月22日发明者亚伯拉罕·J·多姆,伊扎克·波拉切克,玛丽娜·索斯考尔尼,雅各布·戈连斯尔申请人:哈达斯特医学研究服务与开发有限公司;伊萨姆研发公司