羔羊胃提取物维B₁₂制剂组方的制作方法

专利名称：：羔羊胃提取物维B₁₂制剂组方的制作方法
技术领域：
：本发明涉及羔羊胃提取物维B,2制剂组方
背景技术：
已有的胃药组方中，只有少量的生物原药，但由于无维生素Bn，对苯基丁氨酮所致的溃疡没有保护作用，因此，有些胃药不适用于既能治疗萎缩性胃炎、浅表性胃炎，又能治疗糜烂性胃炎。
发明内容本发明的目的在于提供一种既能治疗萎縮性胃炎、浅表性胃炎，又能治疗糜烂性胃炎，同时也对十二指肠溃疡等有显著疗效，尤其对三羧酸引起的糜烂性胃炎有很好的促进治疗作用。本制剂组方工艺简单，治疗效果好。为达到上述目的本发明采用以下技术方案羔羊胃提取物维B,2制剂组方，其特征在于所使用的羔羊胃提取物原料系羔羊第四胃经提取制得总提取物，原料中凝乳活力与胃蛋白酶活力的比值为2.0-4.1，组方中羔羊胃提取物与维生素B,2的重量比为20000:l5。所述的制剂组方，其特征在于它采用以下工艺步骤(1)、原料处理选取羔羊第4胃，去除脂肪及结缔组织，冲洗，冷库保存；(2)、破壁、自溶将置于冷库的胃块破碎，破壁后在-10。C一l(TC库房内自溶，成为胃浆；(3)、提取在0—l(TC温度下，以NaCl溶液多次提取，过滤，合并滤液，弃渣；(4)、沉淀、离心调滤液的pH值至1.54.0，在015。C温度下搅拌加入沉淀剂，静置，离心得沉淀物。(5)、活化将上清液在5(TC温度以下，减压浓縮后沸腾干燥得干品，与后面的冻干粉混合制剂；将离心后的沉淀固形物倒入活化锅内升温至3(TC4(TC进行激活，活性检测，活化液的凝乳'活性达到80Ru/ml以上，终止活化；进行包合；(6)、冷冻干燥冷冻干燥得冻干品；(7)、混合、储存；(8)、配料得制剂；(9)、包装，入库。所述的NaCl溶液的浓度在0.5%2.0%之间，溶液的重量是胃浆重量的5倍，时间4小时，用振荡筛过滤，再加入2倍量的0.5X2.0NaCl溶液，时间2小时。所述的沉淀剂为羧甲基纤维素钠，静置24h后3000r/min离心得沉淀物。所述的活化后用1%的B-环糊精进行包合，时间1小时。所述的冷冻干燥箱体温度预冻至-4(TC(板层温度)后再迅速将已活化好的固形物倒入盘中1200ml/盘，进入厢体开始冷冻干燥28h，得很松散的具有骨架的冻干品，颜色呈灰黄白色。所述的冷库的温度为-2(TC;调滤液的pH值采用浓度为2mol/LHCl溶液；所述的冻干粉是储存在0"C—8"C库内。本发明的制剂组方可治疗非甾体类抗炎药相关的胃炎；用于返流性胃炎的维持治疗；预防非甾体类抗炎药物引起的胃糜烂或消化不良症状；胃下垂所引起的腹胀、嗳气、恶心、呕吐、腹痛和发射性腰胀痛、便秘等症状；胃大部切除后所引起的胃潴留、机械性胃梗阻、胃动力不足的治疗。用于胃切除后消化障碍的改善作用；用于胃大部切除后所致的上腹部不适、胀满、食欲不振、消瘦、贫血，治疗消化不良性腹泻，用于婴儿吐奶。尤其对治疗三羧酸引起的糜烂性胃炎有很好的促进治疗作用。同时也对十二指肠溃疡等有显著疗效，且服用安全，无任何毒副作用的药物处方。无维生素B,2对苯基丁氨酮所致的溃疡没有保护作用，羔羊胃提取物维B12胶囊中与维生素Bl2的配比关系，所起到的最佳治疗效果是间接通过增加维生素B^的吸收，刺激营养来达到治疗作用的。患者体重显著增加，从而改善胃切除后的消化障碍。羔羊胃提取物维B,2胶囊在食物团的作用下，使血清胃泌素水平升高，对胃部有刺激作用，形成肿胀，增强了胃贲门部位肌肉的强直性，防止食管炎及疝气中发生的食管回流。有研究报道，胃液的pH在治疗后仍保持稳定，在治疗过程中不会导致胃酸含量降低，致使胃肠中正常细菌数量增加，而导致胃肠道感染(如沙门氏菌和弯曲杆菌)。本发明优点1、使用本组方生产出的制剂临床疗效显著，经国家不良反应监测中心检测无不良反应发生2、本组方的质量标准具有可控性；3、本组方所使用的工艺生产设备先进，工艺简单易行。所以我们规定了凝乳酶与胃蛋白酶的比值应控制在2.04.1之间，使胃蛋白酶能够保持较低水平，也就避免由于胃蛋白酶过高所引起的禁忌症，还可治疗小儿溢奶呕吐、腹泻、食欲不振。图1:本发明制剂的工艺框1中，原料羔羊第4胃以下列工艺顺序进行原料处理、破壁自溶、提取、过滤，将滤液沉淀、离心，其上清液经减压浓縮、沸腾干燥得到产品。而上述的经沉淀、离心得到的沉淀固形物经活化、包合、冷冻干燥得到产品。将上述的沸腾干燥得到的产品和冷冻干燥得到的产品混合、储存，再经配料得到制剂，经包装，入库。具体实施方式实施例羔绵羊第四胃的上部从第三胃的末端切取，下部从十二指肠的上部切断后，将原料用流水清洗除去胃内容物，剥去脂肪及结缔组织，在-2(TC冷冻，低温绞碎后，再放置-l(TCl(TC库房内破壁、自溶。后加0.5%2.0的NaCL溶液5倍，搅拌提取4h后用振荡筛过滤，残渣再加入2倍量的0.52.0%的NaCL溶液搅拌提取2h后，合并滤液，渣弃之。滤液用2mol/LHCl搅拌调PH1.5~4.0，在015。C温度下搅拌加入1%的沉淀剂，静置24h后3000r/tnin离心得沉淀物。取上清液，在温度5(TC以下真空浓縮后进行沸腾干燥得干品。沉淀物进入活化锅内升温3(TC开始激活进行活性检测，待活化液的凝乳活力达80Ru/ml以上时加入1%的B-环糊精进行包合lh，然后按1200ml/盘的量进入真空冷冻干燥厢干燥28h后得羔羊胃提取物冻干采用上述工艺均可生产出合格的羔羊胃(第4胃)提取物原料。这是经采用上述工艺均可生产出合格的羔羊胃(第4胃)提取物原料，并生产出可供临床使用的治疗胃病新剂型——羔羊胃提取物维B,2胶囊。以羔羊胃提取物200克加维生素B,2l0mg、适量辅料，制成1000粒胶囊。其中；每颗凝乳酶活力不少于40单位，胃蛋白酶活力不少于15单位，凝乳酶活力与胃蛋白酶活力的比值应为2.5-3.5。羔羊胃提取物胶囊急性毒性试验(中国药科大学生化教研室)1.材料与方法1.1动物健康小白鼠，体重18-20g，共50只分为5组，每组10只。1.2样品羔羊胃提取物胶囊原药，批号8308171.3给药方法和剂量5组小白鼠分别编号为1、2、3、4、5组。小鼠体重均按20g计。以第一组给药20g/Kg体重为最高用药剂量，以下四组按第一组70%剂量递减，各组每只小鼠实际用药量分别为0，4g、0.28g、0.196g、0.137g、0.095g各以生理盐水配成l.Oml糊状物，一次经口灌入。1.4观察项目及方法正常饲养，观察10天死亡数及不良反应。2.结果讨论<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>给药后观察10天未出现小白鼠死亡及任何不良反应，对于最高剂量组，20g/Kg体重用药量已完全达到饱食量尚无死亡与不良反应。因此，不能反映出LDso用药量。根据最高剂量组推算，成人体重按50Kg计，每天服用成药3g，含原药0.6g，即12mg/kg体重。因此按每千克体重计，小鼠给药量是成人每日剂量的167倍。根据急性毒性试验结果，说明本品无毒性。羔羊胃提取物胶囊亚急性毒性试验(中国药科大学生化教研室)l.材料与方法1.1动物健康大白鼠30只(自动物房领取后再喂养一星期始用于实验)体重115g-195g。共分三组，每组10只。1.2样品羔羊胃提取物胶囊原药批号840510，840516，8405311.3方法三组动物分为对照组，低剂量组及高剂量组。对照组每R经口灌入1.5ml生理盐水，共30天。低剂量组每日按500mg/Kg体重灌药30天，样品用生理盐水配成1.5ml混悬液。高剂量组每F1按1500mg/Kg体重灌药30天，样品以生理盐水配成1.5ml混悬液。1.4观察项目给药前及给药30天后，分别测定动物血清谷-丙转氨酶(SGPT)性及血清中非蛋白氮含量，及给药30天后动物肝、脾、心、肾、肺、小肠、胃等器官的生理切片检査，以观察药物对肝、肾功能的影响及动物各器官的病理变化。2.血清谷-丙转氨酶(SGPT)活力测定'"。血清谷-丙在肝细胞中含量最高，当某些药物造成肝损害或处于病毒性肝炎急性阶段时，肝细胞损坏，该酶逸入血液，可使血清谷丙转氨酶活性明显升高，因此，血清谷一丙转氨酶活力变化可作为药物亚急性中毒及肝脏病变的重要指标之一。2.1试剂2.U丙酮酸标准溶液23.5mg丙酮酸钠，用0.1MpH7.4磷酸缓冲液溶解并定容至100ml。2.1.2底物溶液a—酮戊二酸87.6mg及dl—丙氨酸5.34g先以90ml0.1MpH7.4磷酸缓冲液溶解，以20%氢氧化钠溶液调pH7.4,再以上述磷酸缓冲液稀释至300ml，冰箱保存，可使用一周。2丄32，4—二硝基苯肼溶液19.8mg2，4二硝基苯肼，用8.0ml浓盐酸溶解，转移至100ml容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度。2丄40.4MNaOH溶液。2丄50.1MpH7.4磷酸缓冲液:2.69gKH2P04及13.97gK2HP04，加水溶解后，转移至1000ml容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度。2.2标准曲线的制备取干燥洁净试管6支，编号0、1、2、3、4、5、6向各管中依次加入丙酮标准溶液0、0.05、0.10、0.15、0.20、0.25ml再依次向各管中加入O.IM，pH7.4磷酸缓沖液0.25、0.20、0.15、0.10、0.05、Oml，然后向各管分别加入SGPT底物溶液0.25ml及2，4—二硝基苯肼溶液0.5ml混匀，37'C水浴保温20分钟，各管均分别加入0.4MNaOH溶液5.0ml混匀，室温放置10分钟后，以蒸馏水调零点，在750分光光度计上，用200ul微量池，于520nm波长处测定光吸收以各管与"O"号管光密度差值为纵坐标，相应丙酮酸yg数为横坐标，描绘标准曲线。2.3SGPT活力测定动物血清制备大鼠断尾取血0.5—1.0ml，凝血3000rpm离心IO分钟，取血清备用。取干燥洁净试管若干支，其中一支为对照管。其余为测定管，用微量注射器向各管加入相应血清0.02ml向测定管加入SGPT底物溶液O.lOml，混匀，3"TC水浴保温30分钟，向各管中加入2.4—二硝基苯肼溶液O.lOml同时向对照管中加入SGPT底物溶液O.lOml，混匀，37。C水浴保温20分钟，然后向各管加入0.4MNaOH溶液1.0ml，混匀，室温放置10分钟，以蒸馏水调零点，于520nm波长处测光吸收，由标准曲线上查得丙酮酸"g数，依下列公式计算SGPT活力。测定管"g数-对照管"g数SGPT活力-(单位/ml血清)2.5X0.1单位定义在37'C条件下，l毫升血清与底物作用30分钟。每产生2.5ug丙酮酸者为1个SGPT单位正常人SGPT值在2-40单位之间。3.血清非蛋白氮含量测定(2)(3'血清中非蛋白氮为尿素、尿酸、氨基酸，氨及胆红素等物质中氮的总称，主要是尿素氮。当血清中非蛋白氮有明显高升，表明肾脏受损害。故测定血清非蛋白氮含量可用于估计药物亚急性中毒对肾脏的影响及肾脏病变的程度。3.1测定方法3丄1试齐U:3丄1.110%钨酸钠溶液3.1.1.22/3MH2S04溶液3丄1.31:1硫酸3丄1.4奈氏试剂:在500ml烧瓶中，加22.5g碘，30gKI及水20ml使溶解，加纯汞30g，充分摇荡，用自来水间歇冲冷，摇荡至上清液的黄色消失为止。上清液倾入200ml容量瓶中，稀释至刻度。混匀，加入到975ml2.5MNaOH溶液中，混匀，贮于棕色瓶中，澄清后备用。3.1.1.5标准硫酸铵溶液(每毫升含氮0.06mg):将纯硫酸铵置干燥器内数円，取0.2834g于1000ml容量瓶中，加水使溶，加浓硫酸数滴，稀释至刻度，混匀(用时取此原液稀释1倍即成每毫升0.03mg氮的应用液)3.2测定3.2.1无蛋白滤液制备向5ml干燥洁净小离心管中加入水0.7ml，血清O.lml10%钨酸钠O.lml，混匀，再加入2/3MH2S04，混匀，放置10分钟，以3000r/pm离心10分钟，取上清液备用。3.2.2取硬质试管三支，一支为测定管，一支为标准管，一支为空白管。向测定管内加入上述无蛋白滤液0.5ml，1:lH2SO40.1ml,混匀，于酒精灯上小火消化至无色，冷却，定容至5.0ml，向标准管中加入标准硫酸铵应用液0.5ml及1:1H2S04O.lml蒸馏水4.4ml。空白管中加5.0ml蒸馏水。上述三管分别加入1.5ml奈氏试剂，混匀，以空白管调零点于420Mm波长处测定吸收，并依下式计算每100ml血清中非蛋白氮含量。样品管光吸收<formula>formulaseeoriginaldocumentpage10</formula>标准管光吸收正常人100ml血中非蛋白氮含量为2142.5mg。4.结果讨论表1给予1.5ml生理盐水前后，对照组SGPT活力及NPN含量<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>[注]中途一只老鼠灌胃时死亡表2低剂量(500mg原药/Kg体重)组SGPT活力及MPM含量比较<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>表3高剂量(1500mg原药/Kg体重)组SGPT活力及MPM含量比较<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>[注]中途两只大鼠因灌药死亡表4各组数<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>由结果可知，与正常人相比，在给药前，30只大鼠中有两只SGPT活力大于40单位，有10只大鼠NPN含量超过42.5mg%,但给药后，所有大鼠SGPT活力都在40单位以下。至于NPN含量，给药后，除对照组两只大鼠在42.5mgc/。以上外，其余所有大鼠的血清NPN含量均在正常范围。说明羔羊胃提取物胶囊原药对大白鼠肝、肾无损害。5.病理切片观察给药30天后，将大鼠处死，立即取出肝、肺、心、脾、肾、胃及小肠一段，于10%甲醛溶液中固定，经切片观察，对照组与给药组无明显差异，详细资料见南京市鼓楼医院病理科主任张道中的有关总结。综上所述，说明羔羊胃提取物胶囊原药无毒性。羔羊胃提取物维B,J交囊对各型胃炎的疗效观察(羔羊胃提取物维B,2胶囊临床协作组)恙羊胃提取物维B。胶囊是以绵羔羊第四胃为原料试制的助消化的新药，经南京药学院生化教研室进行生物活性检验和毒性试验，确认其酶活性可靠，没有任何毒性。自2005年3月份起，自治区六个医院消化科组成的羔羊胃提取物维B,2胶囊协作组丌始对该药进行系统的临床疗效观察，现己治疗病人316例。初歩认为羔羊胃提取物维B,2胶囊对各型胃炎疗效较好，副作用很少。现将观察结果小结如下一、一般资料本组共观察病人316例，其中羔羊胃提取物维Bi2胶囊治疗组110例，均为住院病人，进行了比较周密的临床观察，同时按随机抽样的原则，用"含糖胃酶"作对照药，住院观察86例，为保证病人的可比性，两组均采用完成相同的条件，另外有133例为门诊病人，重点观察用药后症状的改善情况。在316例中男性213例，女性103例。男女=2:1。其年龄分布以30-39和40-49岁两个年龄组最多，占所有观察病人的60%以上，其中汉族病人217例，维吾尔族病人38例，哈族4例，回族和蒙古族各l例。二、治疗和观察的方法治疗对象以最近经胃镜和X线钡餐检査确诊为各型胃炎及胃大部分切除术后残胃炎或胆汁返流性胃炎的病人。在完成治疗前的各项检査以后，随机分为治疗组和对照组丌始服用羔羊胃提取物维B,2胶囊或"含糖胃酶"。两药的颜色完全相同，用了同样的胶囊，每R三次，每次lg，饭后服用，服药时忌用过热的丌水，不宜和奶制品同时服用，以免减弱药物疗效。每个疗程3—4周，在治疗期间不用其它药物，待疗程结束后再复査有关的观察指标。疗效观察的标准以症状观察为主要指标，辅以胃镜检验和活检病理检査。用药后症状完全消失，食欲增加，仍有些上腹不适，偶有上腹胀闷者为好转。用药后症状无改善者为无效，症状较用药前明显加重者为恶化。三、治疗结果(见下表)表一羔羊胃提取物维B^胶囊总的疗效<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>表二"羔羊胃提取物维B,2胶囊"治疗组和对照组的效果比较<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>表三羔羊胃提取物维B,2胶囊对各型胃炎的疗效比较<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>表四羔羊胃提取物维B,2胶囊治疗后各单项症沃、体征的疗效<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>表六治疗前后胃镜和病理检査的变化<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>注胃镜检査和病理检査好转者系指经治疗后各型胃炎由重度一"^中度轻度者，或由浅表胃炎——""H常，或萎缩性胃炎--"浅表者，以及胃镜和病理检査的其它表现好转者，恶化则反之。表七羔羊胃提取物维B^胶囊和对照组治疗后的副作用和不良反应组别总例数腹痛加重产生恶心呕吐心悸治疗组110200对照组86301四、讨论1、"羔羊胃提取物维Bu胶囊"总的疗效本组用羔羊胃提取物维Bu胶囊治疗的病例共256例，其中显效者89,显效率35，好转者129，总有效率达85%，在助消化药中药效是比较好的，Fl本在60年代就制成和羔羊胃提取物维Bu胶囊相似的药物，经临床广泛应用，其有效率在80%以上，和本组所报告的疗效接近。经对比观察，恙羊胃提取物维812胶囊治疗组的有效率为88%，而用"含糖胃酶"的对照组有效率为62%，经统计学处理P〈0.05,说明羔羊胃提取物维B,2胶囊的疗效优于"含糖胃酶"。"胃酶"是疗效肯定的助消化药，为临床广泛应用，且常供不应求，而新药羔羊胃提取物维B。胶囊比"胃酶"的疗效又略胜一筹，值得推崇。2.典型病例例一张XX、女、50岁、编号03。反复上腹部胀满不适两年，胃病及病理诊断慢性蒌缩性胃炎伴肠化。用各种中西药治疗无效，经羔羊胃提取物维B^胶囊治疗一周即感到腹胀明显减轻，三月后症状完全消失，胃镜复査为慢性浅表性胃炎。例二武XX、男、48岁、编号07。反复上胃部胀满隐痛5年，胃镜及活检诊断慢性萎縮性胃炎伴轻度不典型增生。长期使用中西药无效，改用羔羊胃提取物维B,2胶囊一疗程症状消失，胃镜复查为慢性浅表性胃炎。注"羔羊胃提取物维Bn胶囊"协作组山新疆医学院一附院消化科新疆医学院二附院消化科新疆军区总医院消化科新疆铁路局医院消化科自治区人民医院消化科乌市友谊医院消化科材料整理者新疆医学院附院消化科桂郁馥。"羔羊胃提取物维B,J交蠹"疗小儿溢奶呕吐、腹泻、食欲不振66例临床观察小结(乌鲁木齐市第一人民医院陈明德)我院儿科自2005年两个月使用新疆生化药业有限公司的"羔羊胃提取物维B。胶囊"口服治疗小儿溢奶、呕吐、腹泻、食欲不振66例，有效率达96.5%，显效达87.9%，无副作用及不良反应是一种治疗小儿溢奶和呕吐的安全有效药物。(一)病例选择1、小儿溢奶(漾奶)2、饮食不当而致呕吐3、小儿腹泻伴呕吐4、上感、肺炎等伴呕吐以上病例均经常规治疗无效而改用和加用"羔羊胃提取物维B^胶囊"，有脱水者，可根据脱水程序给予补液，所有病例均不使用其他消化药及止吐药。(二)治疗方法"恙羊胃提取物维Bu胶囊"应于每次给喂奶后(或断奶)小儿用温开水(水温不超过3(TC)喂下，不能用牛奶及饮料冲服。(三)疗效判断显效用药后溢奶、呕吐消失。有效用药后溢奶、呕吐减少至每日2—3次。无效治疗一周每日溢奶、呕吐仍在三次以上。(四)临床资料共治疗观察57例，其中小儿溢奶及饮食不当而致呕吐32例，小儿腹泻伴呕吐17例，上感肺炎伴呕吐6例。乳幼儿肝炎综合症伴呕吐2例。性别男33例，女24例。族别汉族47例，维族5例，回族3例，塔塔尔族1例，哈族1例。年龄分组:<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>治疗后三天内显效达75.5%，七天内显效达87.9%，有5例好转(有效)，总有效率达96.5%，无效2例占3.5%，用药后对患儿精神食欲均有一定程度改善。"羔羊胃提取物维Bu胶囊"治疗腹泻不伴呕吐8例，其中6例于用药后2—3天内显效，2例无效。l例长期食欲不振的患儿，用药后2天食欲丌始增加。(六)副作用所有病例无不良反应及副作用。(七)小结通过对57例小儿溢奶及呕吐治疗观察，有效率达96.5%,显效达87.9%,对小儿腹泻亦有一定疗效，目前未发现有何副作用，是值得儿科临床进一步推广使用。注新疆医学院第五附属医院(原铁路医院)提供2例材料例l:陶宏，男，42天，牛奶喂养，近一个月喂奶后2小时内常有吐奶，每天约4-5次，精神、食欲良好，大便正常，曾服用助消化药、维生素B6、非那更、吗叮啉等无效，服用"羔羊胃提取物维B。胶囊"治疗后次Fi呕吐即止，继续服药观察一周无吐奶。例2:陈建国，男，20天，牛奶喂养，自出生喂奶后常有呕吐5-6次，大便2-3次/闩，性质正常，服用"羔羊胃提取物维B!2胶囊"后第二天呕吐止，第三天开始大便减为l-2次/R，继续服药观察一周无吐奶。羔羊胃提取物质量标准中规定1、凝乳效价测定凝乳酶底物溶液的制备取全脂奶粉12g，加氯化钙溶液(取醋酸钠2.05g，氯化钙l.llg，加水使溶解成1000ml，调节pH值至6.3±0.1)适量，研磨均匀，置100ml量瓶中，加氯化钙溶液至刻度，摇匀。本液应临用新配。标准品溶液的制备取凝乳酶标准品适量，精密称定，先加少量P恥.3磷酸盐缓冲液(取磷酸二氢钠7.8g，磷酸氢二钠2.7g，加水使溶解成1000ml，调节pH值至6.3土0.05)使分散均匀，再加上述缓冲液稀释成每lml中约含1个活力单位(约在240秒内凝结)溶液。此溶液应保持在20'C以下，并在配制后2小时内使用。供试品溶液的制备取本品适量，精密称定，照标准品溶液制备项下配制即得。测定法精密量取底物溶液10ml，置20ml圆底试管中，在30°C±0.5。C恒温水浴中保温10分钟，精密加入标准品溶液lml，摇匀并立即计时，用玻璃棒不断蘸取溶液沿管壁流下，使成均匀薄层，当薄层出现片状凝结时，准确记录自标准品溶液加入后至出现凝结现象的时间。重复测定三次，三次测定值的相对标准偏差不得大于5%。取三次的平均值作为标准品溶液的凝结时间。取供试品溶液lml，依法操作，按下式计算。TsXWsXn每lmg含凝乳酶活力单位数=SX~~7TT^-式中s-----标准品的活力，u/mg;TS——标准品溶液的平均凝结时间，秒；T——供试品溶液的平均凝结时间，秒；Ws——标准品溶液每lml中含凝乳酶标准品的量，g;W——供试品取样量，g;N——供试品稀释倍数。注凝结时间在180240秒时重现性最好。否则供试品浓度应加以调整。胃蛋白酶供试品溶液的制备取本品O.lg，精密称定，加盐酸溶液(取lmol/L盐酸溶液65ml，加水至1000ml)研磨使分散均匀，置100ml量瓶中，加上述盐酸溶液稀释至刻度，摇匀。测定法照胃蛋白酶活力测定项下的方法(中国药典2005年版二部390页)测定。2、胃蛋白酶活力测定-胃蛋白酶供试品溶液的制备取本品0.1克。测定法照胃蛋白酶活力测定项下的方法(中国药典2000年版二部466页)测定。权利要求1.一种羔羊胃提取物维B12制剂组方，其特征在于所使用的羔羊胃提取物原料系羔羊第四胃经提取制得总提取物，原料中凝乳活力与胃蛋白酶活力的比值为2.0-4.1，组方中羔羊胃提取物与维生素B12的重量比为20000∶1～5。2、根据权利要求1所述的制剂组方，其特征在于组方中羔羊胃提取物与维生素B,2的重量比为20000:1。3、根据权利要求1或2所述的制剂组方，其特征在于所述的羔羊胃提取物采用以下工艺步骤(1)、原料处理选取羔羊第4胃，去除脂肪及结缔组织，冲洗，冷库保存；(2)、破壁、自溶将置于冷库的胃块破碎，破壁后在-l(TCl(TC库房内自溶，成为胃浆；(3)、提取在01(TC温度下，以NaCl溶液多次提取，过滤，合并滤液，弃渣；(4)、沉淀、离心调滤液的pH值至1.54.0，在015"C温度下搅拌加入沉淀剂，静置，离心得沉淀物；(5)、活化将上清液在5(TC温度以下，减压浓縮后沸腾干燥得干品，与后面的冻干粉混合制剂；将离心后的沉淀固形物倒入活化锅内升温至30。C4(TC进行激活，活性检测，活化液的凝乳活性达到80Ru/ml以上，终止活化；进行包合；(6)、冷冻干燥冷冻干燥得冻干品；(7)、混合、储存；(8)、配料得制剂；(9)、包装，入库。4、根据权利要求3所述的制剂组方，其特征在于所述的NaCl溶液的浓度在0.5%2.0%之间，溶液的重量是胃浆重量5倍，时间4小时，用振荡筛过滤，再加入2倍量的0.5%2.0NaCl溶液，时间2小时。5、根据权利要求3所述的制剂组方，其特征在于所述的沉淀剂为羧甲基纤维素钠，静置24h后3000r/min离心得沉淀物。6、根据权利要求3所述的制剂组方，其特征在于所述的活化后用1%的P-环糊精进行包合，时间1小时。7、根据权利要求3所述的制剂组方，其特征在于所述的冷冻干燥箱体温度预冻至-4(TC(板层温度)后再迅速将已活化好的固形物倒入盘中1200ml/盘，进入厢体开始冷冻干燥28h，得很松散的具有骨架的冻干品，颜色呈灰黄白色。8、根据权利要求3所述的制剂组方，其特征在于所述的原料处理后在冷库保存的温度为-2(TC;调滤液的pH值采用浓度为2mol/LHC1溶液;所述的冻干粉是储存在0"C8t:库内。全文摘要本发明提供一种羔羊胃提取物维B₁₂制剂组方，本发明所使用的羔羊胃提取物原料系羔羊第四胃经提取制得总提取物。以干燥品计，每1克凝乳酶活力不得少于800单位；胃蛋白酶活力不得少于230单位，凝乳活力与胃蛋白酶活力的比值为2.0-4.1。这种比值的存在，临床中避免了由于胃蛋白酶活力过高所引起的副作用，可用于胃炎伴糜烂、充血、溃疡等病人，还可治疗小儿溢奶呕吐、腹泻、食欲不振。制造工艺简单，不使用有机溶剂。文档编号A61K31/7135GK101264105SQ20071008704公开日2008年9月17日申请日期2007年3月15日优先权日2007年3月15日发明者赵新民申请人:赵新民