专利名称：一种用深海鳕鱼皮萃取螺旋胶原冻干粉的制备方法
技术领域：
本发明涉及深海鳕鱼的深加工，具体地说是一种用深海鳕鱼皮萃取螺 旋胶原的方法。
背景技术：
鳕鱼皮是加工鳕鱼片过程中剔出的16。％ 20%余料成为废弃物，鳕鱼 皮中含有较高的螺旋胶原，而且这种胶原的活性及可溶性很强。具有促进 人体细胞组织代谢生长，富于结缔组织营养，增强肌肤弹性、保持水份、 减少皱痕。并能承载无机质输送到人体各器官，增强细胞和骨髓生理功能。 目前，国际有关科研部门为了得到更安全的胶原材料，更加重视从鱼皮和 其它海洋物质中萃取胶原和活性物质。经研究，采用海洋生物技术从鳕鱼 皮中萃取螺旋胶原是一种新的生物资源利用，为胶原材料生产提供新的途 径。发明内容本发明的目的是提供从深海鳕鱼皮中萃取螺旋胶原冻干粉的制备方 法，使废弃的鳕鱼皮中的活性物质得到更广泛的应用。为实现上述目的，本发明采用的技术方案为 一种用深海鳕鱼皮萃取螺旋胶原冻干粉的制备方法 1.深海鳕鱼皮的预处理1.1深海鳕鱼皮的选择在对鳕鱼加工时，收集新鲜的鳕鱼皮在0°C -IS'C条件贮存；1.2将新鲜或冰冻的鳕鱼皮，用2'C 8"C食用水浸泡8 18小时，铺在 冰块上剔除鱼皮下组织，清洗干净；再将鳕鱼皮置于不锈钢槽内，加入鱼 皮重量的3 5倍纯净水，水温控制在2t: 8。C，并向水中充入压縮空气， 压力控制在0.1 0.4Mpa，在小槽内产生气泡，维持4 10小时，捞出鳕鱼 皮淋干；1.3将清洗淋干的鳕鱼皮，置于真空的不锈钢生化罐内，加入0.8% 1.8 XCa(0H)2溶液；鱼皮与Ca(OH)2溶液的重量比例为1:6 12，温度控制在2。C 8。C，真 空度为100pa 200pa，时间为24 48小时；然后在循环中向罐内加入纯净 水冲洗，直到PH值7左右；1.4冰冻处理将真空浸渍的鳕鱼皮巻成直径8 10cm，长30cm的鳕
鱼皮巻，置于一18'C 一3(TC的速冻室内冰冻，冻透后取出，采用电动刨 肉机将鳕鱼皮巻均匀的刨成0.5 5.0mm的薄片，溶于纯净水中。鳕鱼皮片 与纯净水的重量比例为1:3 6，搅拌均匀后，加入胶体磨中打成浆状备用。2. 生物酶解2.1复合酶解将预处理后的鳕鱼皮浆，置于真空生物反应釜内，控制 温度为8。C 18'C， PH值为6 8，每千克鳕鱼皮体加2 4g的复合蛋白酶 (丹麦诺维信功能食品工业生产Protamex)， 2 3gl398中性蛋白酶，2 3gl203脂肪酶，2 4g乙酸盐，2 4g的Vc作为酶激活剂；真空度控制在 100 300pa，搅拌下酶解反应12 20小时，然后用100 300目的双联过 滤器分离出杂质；在复合酶解反应下，使鳕鱼皮组织细胞被降解，三螺旋 胶原分子链被酶切下来，得复合胶原酶解液；2.2生物酶修饰经酶降解液体内胶原分子与蛋白酶形成复合体，为使 三螺旋结构的胶原从蛋白酶中分离得到降酶。将复合胶原酶解液用压縮空 气输送至生物酶修饰反应釜中，调整PH值为6 8，温度为8"C 18t:，.加 入鳕鱼皮质量0.3 1.8g/Kg的复合风味蛋白酶(丹麦诺维信功能食品工业 生产的Flavourzyme)， 0.2 1.2g/Kg的磷脂酯酰基水解酶(俗称磷脂酶A)， 真空度控制在200pa 600pa，搅拌酶修饰反应8h 20h，得三螺旋胶原酶解 液；2.3灭酶三螺旋胶原酶解液在高温区不稳定，为此不能采用高温灭酶。 将三螺旋胶原酶解液通过紫外线灭酶，温度控制在8。C 18。C，时间为20 30min，灭酶。3. 螺旋胶原分离纯化3.1离心分离采用高速蝶式离心机将灭酶后的螺旋胶原液以10000 30000r/min的速度分离5 15min，将上层液和中层液合并输入稀释罐内， 即得螺旋胶原液，下层液被分离出去；3.2稀释将分离螺旋胶原液按1:3重量比例加入蒸馏水或纯净水，在 真空度100pa 300pa搅拌成稀释液；3.3超微膜纯化将螺旋胶原液用循环泵在0.3Mpa 0.8Mpa压力下通 过0.4um 1.0um的微滤和100000道尔顿的超微膜纯化，获得分子量小于 等于100000道尔顿的螺旋胶原液；3.4反渗透膜浓縮将螺旋胶原纯化液，通过1000道尔顿的反渗透膜进 行浓縮，除去总重量70%或70%以上的水分子，获得30%或30%以下的螺 旋胶原浓縮液。4. 冷冻干燥4.1将螺旋胶原浓縮液，置于不锈钢盘中，厚度为10mm 50mm。在_ 35。C中冷冻成固态，加热器温度控制在60°C 90°C，冷阱一35。C，真空 100pa 200pa中升华干燥18 24小时，获得深海鳕鱼皮萃取的螺旋胶原冻 干粉。 4.2将螺旋胶原冻干粉采用自动胶囊机制成200 300mg的硬胶囊，然 后泡罩成prc和铝箔复合板，每板12粒，可制成螺旋胶原冻干粉胶囊成品。 本发明的积极效果为1. 采用深海鳕鱼皮作原料，经低温复合酶降解成三螺旋胶原，为胶原 开辟新的材料途径。2. 采用低温复合酶修饰，使三螺旋胶原分子链与蛋白酶体分离，稳定 三螺旋态胶原分子。3 .采用微膜、超微膜和反渗透膜纯化，浓縮螺旋胶原分子量，增加螺 旋胶原纯度，使产品具有稳定性好、纯度高、节能环保，防止胶原体变性 等优点。4. 采用紫外线灭酶，保持了螺旋胶原分子链的稳定性和生物活性，防 止胶原的变性和分子链的分散。5. 采用FD航天冷冻干燥技术，干燥螺旋胶原形成的冻干粉，具有活 性强、抗氧化、抗复聚、抗潮结、易保存的优点，用途更广泛。6 .采用生物技术使鳕鱼皮提高了生物活性和食用价值、药用价值，并 能广泛使用在化妆品、保健品领域，成为高附值、高纯度、高效益、高科 技、高利用率的新螺旋胶原体。7.采用海洋生物技术从鳕鱼皮中萃取螺旋胶原，提高了鳕鱼加工率的 20%,再生资源得到利用。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一歩详细说明。 实施例1取新鲜的鳕鱼皮200Kg除去杂质，放入5000L的流动式浸泡槽内，加 入食用水3000L，水温控制在8X:，浸泡28小时后，捞出。铺在冰块上面 用小刀剔除鳕鱼皮下的鱼肉，刮去鳕鱼皮表面的附着物，用清水冲洗干净。 再将200Kg鳕鱼皮置于3000L的气水混合不锈钢槽内，加入1000L的纯净 水，启动空气压縮机，在0.2Mpa的压力下向槽内充气并产生大量气泡，使 纯净水与鳕鱼皮均匀的渗透，并能清除异味和泡沫。水温控制在8。C，维持 18小时，捞出鳕鱼皮放在筛网上淋干。将清理淋干的鳕鱼皮200Kg，分别放 入1000L的真空生化罐内，分批操作每批100Kg共两批。其中每罐100Kg 鳕鱼皮，加入800L的1.8XCa(OH)2溶液，启动真空泵，控制真空度100pa， 用冰水循环控制生化罐内温度为8°C;启动溶液循环泵，使生化罐内的 Ca(0H)2溶液流动，48小时后抽出Ca(OH)2溶液，用循环泵向罐内加入纯 净水进行冲洗，直到PH值7时停止，除去真空，打开罐盖，取出鳕鱼皮， 人工巻成直径10cm，长30cm的鳕鱼皮巻，摆放在速冻盘中，送入速冻间 内，控制温度一35。C， 2小时后将冻透的鳕鱼皮巻用电动刨肉机刨成l.Omm
的薄片。将100Kg的鳕鱼皮薄片放入500L的不锈钢配料罐内，加入300L的纯 净水，搅拌均匀，再通过20um间隙的胶体磨均桨，获得鳕鱼皮均浆体400Kg。将400Kg鳕鱼皮均浆体放入500L生物酶反应釜内，控制温度为18°C， PH值调整为7，启动搅拌器，依次加入200g复合蛋白酶Protame、 300gl398 中性蛋白酶、200gl203脂肪酶、400g乙酸盐、200gVc，然后密封反应釜盖， 启动真空泵，控制真空度100pa，酶解20小时，除去真空度。启动输料泵 通过100 300目的双联过滤器，分离出杂质，获得鳕鱼皮胶原酶解液 400Kg。启动压縮空气泵在0.2Mpa的压力下将胶原酶解液输送至生物酶修 饰反应釜中，调整PH为7，控制温度18"C，启动搅拌器，依次加入180g 复合风味蛋白酶(Flavourzyme)， 20g磷脂酯酰基水解酶，密封反应釜盖， 启动真空泵，控制真空度为600pa，酶修饰反应8小时，获得三螺旋胶原酶 解液400Kg。启动输料泵，将三螺旋胶原酶解液输入紫外线灭酶罐内，控 制温度18°C，启动液体流动器进行紫外线灭酶20min。启动高速蝶式离心 机，调整转数为30000r/min，加入灭酶的三螺旋胶原酶解液400Kg，收集上 层和中层液380Kg，下层液20Kg返回酶解反应釜继续酶解。将380Kg分离液用供料泵输入3000L的稀释罐，加入1140Kg的蒸馏 水，启动真空泵，控制真空度300pa，搅拌稀释液体，获得稀释液1520Kg。 启动超微膜循环泵在0.2Mpa的压力下将1520Kg的螺旋胶原稀释液先通过 一组0.4um 1.0um的微滤器进行微滤，再通过100000道尔顿的60m2的平 板式超微膜纯化，经反复循环纯化获得小于等于100000道尔顿的螺旋胶原 液1500Kg。启动反渗透膜，通过1000道尔顿的反渗透膜除去80。％的水分 子，经反复渗透膜处理，获得300Kg螺旋胶原浓縮液。将300Kg螺旋胶原浓縮液，用量桶加入不锈钢冻干盘中，厚度为50mm， 装冻干仓内。启动预冻器，控制温度为一35'C，预冻3小时，然后升温， 控制加热器温度为6(TC逐渐升至9(TC，冷阱器温度控制在一35t:，真空度 为200pa，升华干燥24小时后除去真空，停止加热和冷阱器，取出冻干盘， 获得15Kg鳕鱼皮螺旋胶原冻干粉。再采用自动胶囊填充机组制成300mg 的胶囊，用prc和铝箔泡罩成每板12粒的胶囊复合板，装入包装盒内，可 获得4116盒螺旋胶原冻干粉胶囊成品。实施例2与实施例l不同之处在于，取冰冻的鳕鱼皮200Kg，用2"C的食用水解 冻并浸泡18小时后，用刮皮机剔除鳕鱼皮的鱼肉，用清水反复清洗干净。 再放入气水混合槽内，加入2'C的冰水，在0.4Mpa的气水压力下维持10 小时后捞出淋千。在真空条件下加入0.3XMgCO3溶液，控制温度为2'C， 真空度为200pa，循环24小时，再用食用水冲洗浸泡，直到PH值7为止。 捞出用绞肉机将鳕鱼皮绞成沫，加入1000升2"C的纯净水用胶体磨打成浆 状。在反应釜内，控制温度为8°C， PH值为7，搅拌时加入复合蛋白酶Protame800g， 1398中性蛋白400g， 1203脂肪酶600g，乙酸盐400g， Vc800g。 在真空度300pa，搅拌酶解12小时，经过滤后，获得鳕鱼皮胶原酶解液 1200Kg。用压縮空气在0.2Mpa的压力下，将1200L鳕鱼皮胶原酶解液输入酶修 饰反应釜内，控制温度8°C， PH值为7，在搅拌时加入复合风味蛋白酶 Flavourzyme60g，磷脂酯酰基水解酶240g，真空度为200pa，酶修饰反应 20小时，可获得1200L三螺旋胶原酶解液，用紫外线灭酶30min。启动高 速蝶式离心机，调整转数为10000r/min，分离15min，获得分离液1176Kg， 加入一倍的纯净水稀释成2352Kg的螺旋胶原稀释液。在0.8Mpa的压力下， 通过0.4um 1.0um的微滤器进行微滤和100000道尔顿超微膜纯化，再经 反渗透膜浓縮成470Kg的螺旋胶原浓縮液，装入冻干盘中，厚度10mm; 启动预冻器，控制温度为一35。C，预冻1小时，然后升温，控制加热器温 度为6(TC逐渐升至9(TC，冷阱器温度控制在一35"C，真空度为100pa，升 华冻干18小时，可获得鳕鱼皮螺旋胶原冻干粉30Kg。再制成每粒200mg 的螺旋胶原冻干粉胶囊，每板12粒，每盒2板，可制成成品螺旋胶原冻干 粉胶囊6250盒。
权利要求
1. 一种用深海鳕鱼皮萃取螺旋胶原冻干粉的制备方法，其特征在于1)深海鳕鱼皮的预处理新鲜或冰冻的鳕鱼皮浸泡后，组织分解成浆料备用；2)生物酶解2. 1)复合酶解将预处理后的鳕鱼皮浆料，置于真空生物反应釜内，控制温度为8℃～18℃，PH值为6～8，每千克鳕鱼皮体加2～4g的复合蛋白酶、2～3g1398中性蛋白酶、2～3g1203脂肪酶，2～4g乙酸盐，2～4g的Vc作为酶激活剂；真空度控制在100～300pa，搅拌下酶解反应12～20小时，然后用100～300目的双联过滤器分离出杂质；在复合酶解反应下，使鳕鱼皮组织细胞被降解，三螺旋胶原分子链被酶切下来，得复合胶原酶解液；2. 2)生物酶修饰经酶降解液体内胶原分子与蛋白酶形成复合体，为使三螺旋结构的胶原从蛋白酶中分离得到降酶。将复合胶原酶解液输送至生物酶修饰反应釜中，调整PH值为6～8，温度为8℃～18℃，加入鳕鱼皮质量0.3～1.8g/Kg的复合风味蛋白酶，0.2～1.2g/Kg的磷脂酯酰基水解酶，真空度控制在200pa～600pa，搅拌酶修饰反应8h～20h，得三螺旋胶原酶解液；2. 3)灭酶将三螺旋胶原酶解液通过紫外线灭酶，温度控制在8℃～18℃，时间为20～30min，灭酶；3)螺旋胶原分离纯化3. 1)离心分离采用离心机将灭酶后的螺旋胶原液以10000～30000r/min的速度分离5～15min，将上层液和中层液合并输入稀释罐内，即得螺旋胶原液，下层液被分离出去；3. 2)稀释将分离的螺旋胶原液按1∶2-3重量比例加入蒸馏水或纯净水，在真空度100pa～300pa搅拌成稀释液；3. 3)超微膜纯化将稀释后的螺旋胶原液用循环泵在0.3Mpa～0.8Mpa压力下通过0.4um～1.0um的微滤器进行微滤和100000道尔顿的超微膜纯化，获得分子量小于等于100000道尔顿的螺旋胶原液；3. 4)反渗透膜浓缩将螺旋胶原纯化液，通过1000道尔顿的反渗透膜进行浓缩，获得螺旋胶原浓缩液；4)冷冻干燥。
2. 按照权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述步骤1)深海鳕鱼皮的预处理过程中，冰冻的鳕鱼皮原料是在 (TC —18 °C条件下贮存的鳕鱼皮。
3. 按照权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述步骤l)深海鳕鱼皮的预处理过程中，新鲜鳕鱼皮采用三次浸泡，第一次用2。C 8。C的食用水，浸泡18 28h，并在冰块上剔除鱼皮下组织；第二次用鱼皮重量比为3 5倍的纯净水，充入压縮空气，压力为 0.1Mpa 0.4Mpa，在2。C 8t:条件下，循环浸泡10 18h;第三次用重量浓度0.8 % 1.8 % Ca(OH)2或0.3 % 1.3 % MgC03溶液， 相当于鱼皮重量的6 12倍；在真空条件下，控制真空度为100pa 200pa， 温度控制在2。C 8"C，循环浸泡24 48h。
4. 按照权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述步骤l)深海鳕鱼皮的预处理过程中，将浸泡后的新鲜鳕鱼皮巻 成皮巻后速冻，然后进行二次组织分解；A鳕鱼皮分解切片将冷冻的鳕鱼皮巻用刨肉机刨成0.5mm 5.0mm 的薄片；B鳕鱼皮分解成浆料将鳕鱼皮薄片溶于3 6倍的纯净水，搅拌均匀 后，加入胶体磨中分解成浆状备用。
5. 按照权利要求1所述的制备方法，其特征在于 所述步骤4)冷冻干燥过程为，1)将螺旋胶原浓縮液在一35i:中冷冻成固态，加热器温度控制在 60。C 90。C，冷阱—35°C，真空100pa 200pa中升华干燥18 24小时，获 得深海鳕鱼皮萃取的螺旋胶原冻干粉。
全文摘要
本发明涉及深海鳕鱼的深加工，具体地说是一种用深海鳕鱼皮萃取螺旋胶原冻干粉的制备方法，采用加工鳕鱼片过程中剔出的鳕鱼皮做原料，经a.深海鳕鱼皮的预处理；b.生物酶解；c.螺旋胶原分离纯化；d.冷冻干燥，制备成鳕鱼皮螺旋胶原冻干粉。本发明的优点为为胶原开辟新的材料途径，提高了生物活性、食用价值、药用价值，并能广泛使用在保健品、化妆品生产领域。成为高附加值、高科技、高效益、高利用率的新螺旋胶原体材料。
文档编号A61K35/56GK101396374SQ20071015721
公开日2009年4月1日 申请日期2007年9月29日 优先权日2007年9月29日
发明者毅 冷, 李丹丹, 李小龙, 李长青, 红 王 申请人:丹东科健食品有限公司