专利名称：防治后发障的眼内植入剂及其制备方法
技术领域：
本发明属于医药技术领域，涉及一种防治晶状体后囊混浊(后发障)发生 的眼内植入剂及其制备方法，以及多西他赛在制备防治晶状体后囊混浊药物中 的应用。
背景技术：
白内障是人类首位致盲性眼病，全球约有4000万 4500万盲人，其中因白 内障致盲者占46%。白内障囊外摘除术是国内目前应用最广泛的手术方法，而 后房人工晶体植入术则是无晶状体眼屈光矫正最有效的方法，己得到广泛应用。
但是白内障囊外摘除术后，可发生后囊混浊(Posterior capsule opacification (PCOp，又名为继发性白内障或后发障，这是一种人工晶状体术后常见的并发 症。PCO可再次引起患者的视力下降，甚至失明。后囊混浊发生的主要原因为 晶体前囊膜的上皮细胞沿着后囊膜的表面增生。晶体上皮细胞是晶体中保持增 殖与分化能力的成分。白内障囊外摘除术实际上相当于一种创伤，必然引发修 复机制，表现为上皮细胞移行、增殖和向成纤维细胞转化。与此同时，晶体上 皮细胞还能合成a-、 P-和Y-晶体蛋白以及III型胶原等细胞外基质，产生晶体 囊膜样物质。这些物质可粘附细胞、色素和蛋白颗粒，并构成上皮细胞和成纤 维细胞的支架，使之紧密相连，在后囊形成纤维化组织后而使后囊变为混浊。 残留的皮质或术后存在的炎症，都有可能造成纤维组织沿着后囊膜增生。目前，用于治疗PCO的常规方法是Nd:YAG激光切开术，该手术费用偏高、再次手术 影响患者生活。
虽然目前已发现一些可以抑制晶状体上皮细胞生长的药物，但基本都为外用的 眼用制剂，由于常规的滴眼剂等外用制剂难以让药物透入眼内，而且药物毒性 较大，对角膜损害严重，因此难于在临床上推广。
本发明针对目前防治后发障药物药效低、给药剂型的在病变部位药物浓度 低、持续时间短等不足进行了研究，筛选防治后发rf的有效药物、设计能提高 病变部位药物浓度和持续时间的制剂。所涉及的制剂可在进行白内障囊外摘除 术时/后，将其放入晶状体囊袋内，操作简便，患者顺应好。
发明内容
本发明的目的在于提供一种能有效提高晶状体囊袋内药物浓度和持续时 间，降低药物毒性的防治后囊混浊的眼内植入剂，以及该眼内植入剂的制备方 法。本发明的目的还包括多西他赛在制备防治后发障药物中的应用。
多西他赛为紫杉醇类抗肿瘤药，适用于先期化疗失败的晚期或转移性乳腺 癌的治疗，也适用于以顺铂为主的化疗失败的晚期或转移性非小细胞肺癌的治 疗。发明人经大量试验研究发现，多西他赛具有晶状体上皮细胞抑制作用，同 时，本发明为了降低多西他赛对正常组织或器官的毒副作用，设计了含有多西 他赛的局部眼用制剂如晶状体囊袋内植入剂，旨在提高多西他赛在囊袋内浓度 和时间，从而降低药物毒性；该制剂还适应于局部慢性疾病。由于后囊混浊是 一种慢性手术并发症，采用缓释植入剂进行防治是一种理想的方式。
本发明的目的是这样实现的 1.防治后发障的眼内植入剂包含多西他赛及至少一种聚合物载体，其中多西他赛在制剂中的含量为0.01% 20%，其中优选含量为0.01% 10%。聚合物 载体与药物配比为5:1 10000丄
聚合物包含以下至少一种聚甲基丙烯酸甲酯(pMMA)、聚甲基丙烯酸羟 乙酯(pHEMA)、聚甲基丙烯酸羟丙酯(pHEPA)、聚乳酸(PLA)、聚乳酸/乙醇酸 共聚物(PLGA)、聚合(乙烯基甲基醚/马来酸酐)(PVM/MA)、聚丙烯酸 (polyacrylicacid， PAA)、聚丙烯酸树脂或其共聚物。
眼内植入剂可以包含以下一种或多种与多西他赛组成复方制剂的药物抗 代谢药、酶类物质、抑制纤维及胶原合成药物、抗炎药、维甲酸类，累计含量 为0.01% 腦。
其中，抗代谢药可以是以下一种或多种紫杉醇、IO-DAB、三尖杉宁碱、 高三尖杉酯碱、5-氟尿嘧啶、丝裂霉素C、秋水仙碱、阿霉素、柔红霉素、骆驼 蓬总碱。酶类物质可以是以下一种或多种EDTA、 Dispase (中性蛋白酶)。抑 制纤维及胶原合成药物可以是以下一种或多种肝素、组织型纤维酶原激活剂 (r-tPA)、长压定。抗炎药可以是以下一种或多种地塞米松、双氯灭痛、消炎 痛。维甲酸类药物是全反式维一酸。
防治后发障眼内植入剂的制备方法包括多西他赛与聚合物载体单体按
1:10000 1:5比例混合均匀，加入起动物和/或交联剂，通入氮气保护，在模具 中于50-10(TC反应至成形，灭菌。
本发明所涉及的多西他赛为新发现的对晶状体上皮细胞有抑制作用的药 物，其有效浓度在lpg/ml以上，最佳浓度范围为lpg/ml 10u g/ml。
本发明涉及的植入剂用于防治白内障术后并发症后囊混浊的发生，通过在 白内障囊外摘除术的同时将其植入到晶状体囊袋的空腔内，发挥长期抑制晶状 体上皮细胞增殖的作用。现以实施例来具体阐述本发明。本发明举例是为了说明木发明而不是对本发明的限制。
图1多西他赛对人晶状体上皮细胞的作用
图2.多西他赛对人晶状体上皮细胞细胞周期的影响
图3.多西他赛植入剂体外释药实验
图4.多西他赛植入剂在细胞培养液中的释药曲线
具体实施例方式
试验例1.多西他赛对人晶状体上皮细胞的作用
实验细胞人晶状体上皮细胞，购自北京协和细胞中心。
测定方法取处于对数增长期的人晶状体上皮细胞，接种于96孔板，24
小时后，配制多西他赛浓度为6.565pg/ml, 26.23pg/ml, 104.92pg/ml, 419.97pg/ml, 1.68ng/ml, 6.74ng/ml, 26.95ng/ml, 107.5ng/ml, 430ng/ml的培养液，每孔换为200 lU的药液，培养48小时后，用MTT法，于490nm下检测，计算细胞的存活率， 结果见图l，结果表明，多西他赛对人晶状体上皮细胞有抑制作用。
试验例2.多西他赛对人晶状体上皮细胞细胞周期的影响
测定方法取处于对数增长期的人晶状体上皮细胞，接种于.6孔板，24小 时后，配制多西他赛浓度为107.5ng/ml的培养液，给药48h后收集细胞用流式 细胞仪进行细胞周期的测定，结果见图2，结果表明，多西他赛有促进人晶状体 上皮细胞凋亡的作用，且能将人晶状体上皮细胞的细胞周期抑制于G2/M期。试验例3.多西他赛植入剂体外释药实验
测定方法取多西他赛植入剂，MMA与HEMA的比例为10: 90、 20: 80、 30: 70，以lml的pH=7.2的磷酸盐缓冲溶液为介质，每1天、2天、3天、 、
14天、16天、……、30天为时间点取样，取样时，将介质全部取出并同时换新 的lml的pH=7.2的磷酸盐缓冲溶液。测定结果见图3，结果表明，该制剂可持 续释药一个月以上。
试验例4.聚合物材料的生物相容性实验
实验细胞L-929细胞，购自中山大学动物实验中心。 供试液HEMA-MMA共聚物的浸提液。 阳性对照6.3%苯酚。
阴性对照培养液。
测定方法取处于对数增长期的L-929细胞于培养瓶内，待孵育长成单层 细胞后进行实验，将供试液、阳性对照和阴性对照液分别加入生长旺盛的L-929 细胞培养瓶中，37'C继续培养。分别于2d、 4d计数并观察细胞形态，计算相对 增殖度。结果表明，生长旺盛L-929细胞与供试样品液混合培养，2天和4天后， 观察其形态和细胞生长贴壁情况，根据各试验组的细胞浓度计算相对增殖度 (RGR)分别为99%和90%，供试液组分级为0级和1级。提示供试样品对L-929 细胞无毒性作用。
试验例5.多西他赛植入剂对人晶状体上皮细胞的作用
测定方法取处于对数增长期的人晶状体上皮细胞，接种于24孔板，24小 时后，将多西他赛植入剂(MMA与HEMA的比例为10: 90)放入到培养液中，隔天取样，测定其释药，并观察其对细胞的作用。测定结果见图4，结果表明， 该制剂在培养液也可以持续释药，并在显微镜下观察发现与空白组相比，其对 细胞的生长有明显的抑制作用。
通过上述试验可得如下结论多西他赛对晶状体上皮细胞有抑制作用，本发 明中所包含的多西他赛的植入剂则可以有效释放达一个月以上，延长了药物的 作用时间，它对晶状体上皮细胞的生长也起到明显的抑制作用。
下面通过实施例进一步说明本发明。应该理解的是，本发明的实施例是用于 说明本发明而不是对本发明的限制。根据本发明的实质对本发明进行的简单改 进都属于本发明要求保护的范围。
实施例1.
多西他赛与MMA (甲基丙烯酸甲酯)、HEMA(甲基丙烯酸羟乙酯)交联共聚 物重量比为1: 50
MMA与HEMA的比例为20: 80 交联剂EDGMA为15tU
制备步骤
称取多西他赛100mg，取lml MMA和4ml HEMA，加入交联剂EDGMA 15 yl和引发剂AIBN19mg，超声至所有固体全部溶解后，通入氮气保护，倒入模 具中，于60'C反应4天，取出，灭菌。以pl^7.4的磷酸盐缓冲为介质，测定该 制剂的体外释药情况，结果见图3。
实施例2.
多西他赛与辅料比重为1:50，缓释聚合物MMA与HEMA的比例为10: 90，加入交联剂15ul和引发剂19mg，制备步骤如实施例1，制得多西他赛眼内缓 释植入剂。以pl^7.4的磷酸盐缓冲为介质，测定该制剂的体外释药情况，结果 见图3。
实施例3.
多西他赛与辅料比重为1:50，缓释聚合物MMA与HEMA的比例为30: 70， 加入交联剂15Pl和引发剂19mg，制备步骤如实施例1，制得多西他赛眼内缓 释植入剂。以pl^7.4的磷酸盐缓冲为介质，测定该制剂的体外释药情况，结果 见图3。
实施例4.
多西他赛与辅料比重为1:25，缓释聚合物MMA与HEMA的比例为10: 90， 加入交联剂15ul和引发剂19mg，制备步骤如实施例1，制得多西他赛眼内缓 释植入剂。
实施例5.
多西他赛与辅料比重为1:20，缓释聚合物MMA与HEMA的比例为20: 80， 加入交联剂15ul和引发剂19mg，制备步骤如实施例1，制得多西他赛眼内缓 释植入剂。
实施例6.
多西他赛与辅料比重为1:25，缓释聚合物MMA与HEMA的比例为30: 70， 加入交联剂15ul和引发剂19mg，制备步骤如实施例l，制得多西他赛眼内缓释植入剂。 实施例7.
多西他赛与辅料比重为1:50，缓释聚合物MMA与HEMA的比例为10: 90， 加入交联剂30ul和引发剂19mg，制备步骤如实施例l，制得多西他赛眼内缓 释植入剂。
实施例8.
多西他赛与辅料比重为1:50,缓释聚合物MMA与HEMA的比例为20: 80， 加入交联剂30ul和引发剂19mg，制备步骤如实施例1，制得多西他赛眼内缓 释植入剂。
实施例9.
多西他赛与辅料比重为1:50，缓释聚合物MMA与HEMA的比例为30: 70， 加入交联剂30ul和引发剂19mg，制备步骤如实施例1，制得多西他赛眼内缓 释植入剂。
实施例10.
多西他赛和紫杉醇(1:100)与辅料比重为1:100，缓释聚合物MMA与HEMA 的比例为30: 70，加入交联剂40ul和引发剂25mg，制备步骤如实施例1，制 得多西他赛眼内缓释植入剂。
实施例11.多西他赛和5-氟尿嘧啶(1:1 )与辅料比重为1:10，缓释聚合物MMA与HEMA 的比例为20: 80，加入交联剂20nl和引发剂20mg，制备步骤如实施例1，制 得多西他赛眼内缓释植入剂。
实施例12.
多西他赛和柔红霉素(1:10)与辅料比重为1:9，缓释聚合物MMA与HEMA 的比例为10: 90，加入交联剂20yl和引发剂20mg，制备步骤如实施例1，制 得多西他赛眼内缓释植入剂。
实施例13.
多西他赛和10-DAB(10:l)与辅料比重为1:1000，缓释聚合物MMA与HEMA 的比例为30: 70，加入交联剂30ul和引发剂20mg，制备步骤如实施例1，制 得多西他赛眼内缓释植入剂。
实施例14.
多西他赛和秋水仙碱(1: 3)与PVM/MA以1: 15的比例混合制成眼内插 入剂，得到复方多西他赛秋水仙碱的植入剂，用于防治后囊混浊的发生。
实施例15.
多西他赛和地塞米松(1: 1)与聚合(2-甲基丙稀酸羟丙酯)(pHEPA)以 h IO的比例混合制成片，得到多西他赛眼内植入剂，可持续释药。
实施例16.
12多西他赛和组织型纤维酶原激活剂(r-tPA) (2: 1)与辅料比重为1:50，缓 释聚合物MMA与HEMA的比例为30: 70，加入交联剂30 u 1和引发剂19mg， 制得多西他赛眼内缓释植入剂。
实施例17.
多西他赛和EDTA (2: 1)与辅料比重为1:50，缓释聚合物MMA与HEMA 的比例为30: 70，加入交联剂30ul和引发剂19mg，制得多西他赛眼内缓释植 入剂。
实施例18.
多西他赛和共聚物PLGA比重为1:5，溶于二氯甲烷，真空挥干溶剂，将所 得固型物压制成环状(C=lcm±0.3cm)，灭菌，制得多西他赛眼内缓释植入剂。
实施例19.
多西他赛与MMA、 HEMA交联共聚物重量比为1: 500。 MMA与HEMA 的比例为20: 80，交联剂EDGMA为150ul。制备步骤称取多西他赛10mg， 取10ml MMA和40ml HEMA，加入150 u 1交联剂EDGMA，和引发剂AIBN 190mg,使全部溶解后，通入氮气保护，成形，于8(TC中反应2.5天，取出即得。
实施例20.
多西他赛和全反式维甲酸(10: 1)与MMA重量比为1:4，加入交联剂30 u 1和引发剂19mg，制得多西他赛眼内缓释植入剂。实施例21.
多西他赛与PLA重量比为1:5，制成眼内插入剂，制得多西他赛眼内缓释 植入剂。
实施例22.
多西他赛与HEMA交联聚物重量比为1: 10。交联剂EDGMA为15lU。制 备步骤称取多西他赛500mg， 5mlHEMA，加入15 u 1交联剂EDGMA，和引 发剂AIBN19mg，使全部溶解后，通入氮气保护，成具有开口的圆环形，于60 'C中反应4天，取出，灭菌。
临床有效的防治后囊混浊的制剂，必须可达到足够的药物浓度，并且对眼 内其他组织如角膜内皮细胞、虹膜都无或仅有可耐受的毒副作用。本发明制剂 植入晶状体囊袋后可直接与晶状体赤道部相接触，该部位是晶状体上皮细胞的 发生部位，因此可使药物直接与晶状体皮细胞作用，降低对其他组织的毒副作 用。尤其是囊袋张力环状的多西他赛植入剂更适合进行局部缓释预防后囊混浊 的发生。
权利要求
1、一种防治后发障的眼内植入剂，包含多西他赛及至少一种聚合物载体，其中多西他赛在制剂中的含量为0.01％～20％；聚合物载体与药物配比为5∶1～10000∶1。
2、 根据权利要求l所述的眼内植入剂，其特征在于多西他赛在制剂中的含 量为0.01% 10%。
3、 根据权利要求1或2所述的眼内植入剂，其特征在于聚合物包含以下至 少一种聚甲基丙烯酸甲酯、聚甲基丙烯酸羟乙酯、聚甲基丙烯酸羟丙酯、聚 乳酸、聚乳酸/乙醇酸共聚物、聚合乙烯基甲基醚/马来酸酐、聚丙烯酸、聚丙烯 酸树脂或其共聚物。
4、 根据权利要求1或2所述的眼内植入剂，其特征在于它还包含以下一种或多种与多西他赛组成复方制剂的药物抗代谢药、酶类物质、抑制纤维及胶原合成药物、抗炎药、维甲酸类，累计含量为0.01% 10%。
5、 根据权利要求4所述的眼内植入剂，其特征在于抗代谢药是以下一种或 多种紫杉醇、IO-DAB、三尖杉宁碱、高三尖杉酯碱、5-氟尿嘧啶、丝裂霉素 C、秋水仙碱、阿霉素、柔红霉素、骆驼蓬总碱。
6、 根据权利要求4所述的眼内植入剂，其特征在于酶类物质是以下一种或 多种EDTA、中性蛋白酶。
7、 根据权利要求4所述的的眼内植入剂，其特征在于抑制纤维及胶原合成 药物是以下一种或多种肝素、组织型纤维酶原激活剂r-tPA、长压定。
8、 根据权利要求4所述的眼内植入剂，其特征在于抗炎药是以下一种或多 种地塞米松、双氯灭痛、消炎痛。
9、 根据权利要求4所述的眼内植入剂，其特征在于维甲酸类药物是全反式维甲酸。
10、 一种防治后发障眼内植入剂的制备方法，包括多西他赛与聚合物载体单体按1:10000 1:5比例混合均匀，加入起动物和/或交联剂，通入氮气保护， 在模具中于50-100'C反应至成形，灭菌。
11、 多西他赛在制备防治后发障药物中的应用。
12、 根据权利要求ll所述多西他赛的应用，其特征在于有效抑制晶状体上 皮细胞增殖的浓度为lpg/ml以上，在防治后发障药物中的用量为0.01% 20%。
13、 根据权利要求11所述的多西他赛有效抑制晶状体上皮细胞增殖的浓度 范围为lpg/ml 10ug/ml，在防治后发障药物中的用量为0.010% 10%。
全文摘要
本发明涉及一种防治晶状体后囊混浊(后发障)发生的眼内植入剂及其制备方法，以及多西他赛在制备防治晶状体后囊混浊药物中的应用。植入剂包含多西他赛及至少一种聚合物载体，其中多西他赛在制剂中的含量为0.01％～20％；聚合物载体与药物配比为5∶1～10000∶1。其制备方法包括将多西他赛与聚合物载体单体按比例混合均匀，加入起动物和/或交联剂，通入氮气保护，在模具中于50-100℃反应至成形，灭菌。将药物与聚合物载体制成囊袋内植入剂，将该制剂在白内障囊外摘除术后植入到晶状体囊袋的空腔内，发挥长期抑制晶状体上皮细增殖的作用。
文档编号A61K31/337GK101524347SQ20081002655
公开日2009年9月9日 申请日期2008年3月3日 优先权日2008年3月3日
发明者易少凌, 赵春顺 申请人:中山大学