专利名称：：一种治疗心脑血管疾病的药物组合物的制作方法
技术领域：
：本发明为一种治疗心脑血管疾病的药物组合物，由人参皂苷和红花黄色素制成，属于药品的
技术领域：
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背景技术：
：脑血栓、脑动脉硬化、冠心病、心绞痛等心脑血管疾病严重威胁人类的生命和健康，据流行病学调査得知，近50年来不论在农村或城市，心脑血管疾病的发病率和死亡率均呈上升趋势，全世界范围内心脑血管疾病的发病率为140200/10万人口，其平均死亡率为100/10万人口，在我国心脑血管病的死亡率已跃居各种疾病之首。所以进行治疗药物的研究非常必要，也是国内外研究的热点。传统的中药复方存在有效成分不清楚，药理作用不明确，质量难控，疗效不稳的缺点。在心脑血管疾病的治疗药物中，中西药的应用各有侧重，中药以其副作用小而占据较大的市场份额，但是由于其疗效不够迅速、有效成分不明确、服用剂量大使得在市场上应用有一定的局限性因此，研制和开发出新型、有效的预防和治疗心脑血管疾病的药物是目前亟待解决的问题，有着广阔的市场前景。红花为一种传统的活血化瘀中药的代表药，常被应用于冠心病、脑血栓等多种血液循环障碍性疾病。其提取物中的红花黄色素为它的主要水溶性有效成份具有扩张冠状动脉、降压、抗血栓、耐缺氧、免疫抑制等多种药理学作用。现代药理研宄证明其羟基红花黄色素A具有抗局部脑缺血损伤，增加脑血流量，可抑制血小板激活因子诱发的血小板聚集，消除自由基、抑制脂质过氧化反应，保护细胞膜，同时可竞争性的抑制血小板激活因子与血小板受体的结合。人参皂苷Rd是一个特异性的受体操纵Ca2+通道阻断药，它能抑制激动血管平滑肌a-受体，5-羟色胺受体及血管紧张素II受体引起Ca2+内流所致的收縮反应及胞浆细胞内钙浓度升高反应，但对Ca2+释放无影响。对高K+去极化引起的收縮反应与细胞内钙浓度升高及电压依赖性C电流均无作用。对腺苷三磷酸引起脑血管平滑肌细胞细胞内钙浓度升高，人参皂苷Rd呈浓度依赖性地抑制。人参皂苷Rd对cc-受体的亲和力及配基结合数并无影响，也不影响细胞胞膜的Ca2+转运动功能。人参皂苷Rd抑制血小板聚集及降低及血小板胞外Ca"内流，抑制ConA引起的T淋巴细胞的增殖及T淋巴细胞细胞内钙浓度升高。明显减少脑组织的梗塞区面积，明显减轻由于脑组织坏死出现的行为障碍，改善脑电图；病理切片检査发现人参皂苷Rd能明显减少神经细胞的损伤与坏死。减轻脑细胞水肿及Ca2+超负荷的程度以及抗自由基。人参皂苷Rd作为活血化瘀药的有效单体，具有很好的治疗脑缺血/再灌注损伤与坏死作用。现有的研究表明，心脑血管疾病是一个复杂的、动态的、连续的过程，是一个多环节、多层次、多因素、多途径、多位点的过程，如仅仅对某一个环节进行治疗，很难取得理想的疗效。就理论而言，最理想的治疗应该是多种作用，不同病理环节的药物联合应用，而中医学以整体观念和辨证施治为主要特征，恰恰吻合了这种思路。
发明内容本发明的目的在于将两个作用于不同靶点且均能明显减少脑组织的梗塞区面积，明显减轻由于脑组织坏死出现的行为障碍的药物进行组合，由于药物相互作用是协同性相互作用，且更强于单独药物的加合效应；解决了药物使用剂量大不安全的问题；使药物疗效更快、更强。本发明的目的是针对上述现有技术的不足，而向人们提供一种治疗缺血性脑血管疾病的药物组合物，主要是为了解决单独使用人参皂苷或红花黄色素作为治疗缺血性脑血管疾病时各种问题，将特异性的受体操纵Ca2+通道阻断药人参皂苷Rd与血小板激活因子受体拮抗剂红花黄色素联合使用。由于人参皂苷Rd和红花黄色素协同作用，并能够降低两者的用药剂量并能明显减少脑组织的梗塞区面积，明显减轻由于脑组织坏死出现的行为障碍。为实现上述目的，本发明采用下述技术方案一种治疗缺血性脑血管疾病的药物组合物，含有人参皂苷和红花黄色素。该药物组合物主要用于制备缺血性脑血管疾病的制剂，用于可以使用人参皂苷或红花黄色素的疾病场合，通过人参皂苷或红花黄色素的协同作用，降低了人参皂苷或红花黄色素用药剂量以达到改善单独使用任一种药物可能导致副作用的目的并提高对减少脑组织的梗塞区面积，明显减轻由于脑组织坏死出现的行为障碍的作用。基于所述发明，人参皂苷包含药理学上有效量的人参皂苷-Rd、人参皂苷-Rgl、人参皂苷-Rg2、人参皂苷-Rg3、人参皂苷-RM、人参皂甙-Rh、人参皂甙-Re或其药学上可接受的盐或水合物中的一种或一种以上的混合物；最好选用药理学上有效量的人参皂苷-Rd或其药学上可接受的盐或水合物。基于所述发明，红花黄色素包含药理学上有效量的红花黄色素A或红花黄色素B或其药学上可接受的盐或水合物；最好选用药理学上有效量的红花黄色素A或其药学上可接受的盐或水合物。基于所述发明，在药物组合物中，包含药理学上有效量的人参皂苷和红花黄色素总和中含有重量份10%90%的人参皂苷和90%10%的红花黄色素；其中最佳药物组合物为药理学上有效量的人参皂苷Rd和红花黄色素A总和中含有重量份60%的人参皂苷和40%的红花黄色素。基于所述发明，该药物组合物可以制成任何医学上允许的制剂，包括口服制剂、或注射制剂或外用制剂。基于所述发明，该药物组合物在制造药物中的应用，主要包含治疗或预防心脑血管疾病，如脑供血不足、脑血栓形成、脑栓塞、脑血管痉孪、脑功能不全、老年性痴呆、帕金森氏综合症、脑中风、高血压、高血脂、动脉硬化、冠心病、心纹痛、心肌梗塞等疾病以及上述疾病所致后遗症瘫痪病人。本发明解决了单独使用一种药物，作用靶点少，药物通过一个耙点达到治疗目的，使用药物剂量大的问题，本发明根据殊途同归的原理，将两种作用于不同靶点的药物组合，药物产生协同性相互作用，且更强于单独药物实体的加合效应，从而减少脑组织的梗塞区面积，改善缺血脑组织的局部脑血流量和显著降低中性粒细胞髓过氧化物酶的活性而达到治疗或预防心脑血管疾病的目的。本发明中所称的常规制备方法或者现有技术以及药用辅料和矫味剂等是指已经公开的教科书或国家标准、地方标准等公开的方法和技术。本发明药物的疗效由以下药效学实验证明实验实例1本发明组合物合并用药药效研究1.1.试验动物Wistar大鼠，雄性，体重180220g，110只随机分为11组。L2.供试品:人参皂苷组人参皂苷注射液，自制;红花黄色素组红花黄色素注射液，自制;组合物注射液人参皂苷Rd与红花黄色素A，分为高、中、低三个剂量组，自制。1.3.试验方法将实验动物随机分为11组生理盐水对照组；模型组；红花黄色素A注射液；人参皂苷注射液；组合物各配比注射液组如表一所示，各药物均以生理盐水稀释至所需要浓度，尾静脉折射给药。1.4大鼠实验性心肌梗死模型用戊巴比妥纳过量麻醉固定，气管插管，在胸骨左侧做2cm的纵切口，近胸骨侧剪断第3、4根软骨，打开胸腔后，连接人工呼吸机(通气量2ml/100g，50次/min)，剪开心包膜，暴露心脏，冠状动脉左前降支根部穿线，以备结扎，记录标准II导联心电图，稳定10分钟，结扎冠状动脉左前降支，关闭胸腔。用针筒吸出大鼠喉咙分泌物，使大鼠恢复自主呼吸。结扎冠状动脉15min后，静脉给药。结扎冠状动脉4小时后，摘取心脏，在结扎线以下橫切5片，进行氯化硝基四氮唑染色，计算心肌梗死区面积占心室及心脏面积的百分比，并进行统计学的处理，结果见表四。表l组合物对大鼠实验性心肌梗死范围的影响(x土s)<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>注药物组合物为红花黄色素A+人参皂苷Rd.1.5实验结果及结论模型组与生理盐水组相比有显著差异，说明造模成功(p<0.05)。各组给药都明显的抗心肌缺血作用(p<0.05和p<0.01)。其中人参皂苷Rd与红花黄色素A的各个配比组合用药作用优于单独用药人参皂苷Rd与红花素A，提示两药配伍有协同增效的作用。实验实例2本发明组合物合对对脑梗塞面积的影响试验动物:Wistar大鼠，雄性，体重180220g，110只随机分为11组。供试品:葛根素组人参皂苷注射液，自制；红花素组红花黄色素注射液，自制；组合物注射液人参皂苷Rd与红花黄色素A，分为高、中、低三个剂量组，自制1.试验方法将实验动物随机分为假手术组，模型组，阳性药尼莫地平组，本发明药物组合物高剂量8mg/kg(即人参皂苷Rd、红花黄色素A各占一份)组、中剂量4mg/kg(同上)组，低剂量2mg/kg(同上)组，各组动物于缺血即刻于舌下静脉给药，6小时后再腹腔给药一次。假手术组与模型组给予等量的生理盐水。2、模型建立大鼠麻醉后，仰卧固定，分离右侧颈总动脉(CCA)、颈内动脉(ICA)及颈外动脉(ECA)，结扎ECA与CCA，用动脉夹夹闭ICA远心端后，迅速于距ECA与ICA分叉处约0.5cm的颈总动脉处作一切口，插入一端涂有石蜡的尼龙线(直径为0.28mm)，插入深度为18.5±0.5ram，实现大脑中动脉阻塞导致脑缺血。结扎入口处，尼龙线外留约lcm，缝合皮肤。3小时后轻轻向外提拉所留线头至略有阻力以实现大脑中动脉再灌注。在缺血3小时和再灌注0.5小时内用电热毯维持大鼠肛温在36.537.5°C。假手术与其他模型鼠一样分离颈总动脉、颈内动脉及颈外动脉，但只结扎CCA。3、脑梗塞范围测定动物于缺血3小时再灌注21小时末次行为评分后断头，迅速置于冰盘上取脑，去掉嗅球、小脑和低位脑干，将大脑均匀切成6片置于TTC染液中(每5ml染液中含4%TTC1.5ml，lmol/L0.lml),37。C孵箱孵育30min，孵育后将其转入10%甲醛溶液固定。脑缺血经TTC染色后的结果为非缺血区呈玫瑰红色，缺血部分呈白色。脑组织固定后仔细将白色组织挖出并称重，按以下公式确定脑梗塞范围脑梗塞百分比=缺血部分重量/全脑重量，缺血部分重量占全脑重量的百分比作为脑梗塞范围。5、结果大鼠缺血3小时再灌注21小时后，模型组大鼠出现明显梗塞灶，其梗塞范围占全脑的14.88%，与假手术组比较差异显著，说明造模成功。高剂量组、中剂量组、尼莫地平能明显减少模型大鼠脑梗塞范围，与模型组比较有显著差异，分别为P〈0.05，P<0.05，P<0.01。结果见表l。表2脑梗塞范围测定组别剂量样本3小时21小时梗塞范围(mg/kg)n%假手术组—120±0**0±0承求0±0*模型组—132.92±0.642.77±0.8314.88±3.87尼莫地平组0.02122.50±0.801.83±1.03*11.47±4.22*高剂量组8132.54±0.781.69±0.85c**10.48±3.00**中剂量组.4122.67±0.792.08±0.79*11.40±3.46*低剂量组2122.58±0.792.42±0.6713.26±4.0293.讨论本实验采用栓线法造成大脑缺血再灌注脑损伤模型观察本发明的药物组合物的保护作用。实验结果显示，大鼠缺血3小时后出现明显的神经症状，再灌注21小时后，模型组大鼠行为学评分及脑梗塞体积与假手术组比较有显著差异，这表明大鼠右侧大脑中动脉被阻断后，局部脑组织缺血后出现梗死，对侧肢体运动功能发生明显障碍。给予高剂量、中剂量组大鼠其肢体运动功能得到明显改善，行为学评分与模型组大鼠比较有明显改善，脑梗塞体积也有明显减轻。这些结果提示本发明药物组合物对实验性大脑缺血再灌注脑损伤大鼠具有保护作用。实施实例3组合物对大鼠实验性心肌梗塞范围的影响2.1材料2丄1实验动物Wistar清洁型大鼠80只，体重220280g(由贵州信邦远东制药有限公司动物房提供)，自然喂养。2丄2器沐ES-1000SPM多普勒超声血流探测仪，压力换能器，泰盟BL-420型信号采集系统。2丄3药品及试剂戊巴比妥纳，肝素生理盐水，人参皂苷Rd注射液，红花黄色素A注射液。2.2试验方法大鼠大脑中动脉结扎所致脑缺血模型实验，大鼠60只，随机分十组，每组六只，静脉注射过量戊巴比妥纳麻醉，分离左侧颈总动脉，插入适当聚乙烯管(内充满肝素生理盐水)，连接压力换能器测定外周血压(AP)，股静脉插管结输液器以备给药，同时测定心电图(Eccn)，打开胸骨，使去全心完全暴露，打开心包，做心包吊篮，插入适当聚乙烯管(内充满肝素生理盐水)，连接压力换能器测定左室内压(LVP)，左心室舒张末期(LVEDP)及左心室内压上升最大速率(LV+dp/dt)和最大下降速率(LV-dp/dt);分离深主动脉根部，用多普勒超声血流探测仪测定主动脉血流速度(用于折算心输出量CO)。除以上参数外，按公式1计算，间接测定心肌耗氧量。以上指标均同步记录于泰盟BL-420型生物机能信号系统上，等各项指标稳定后，经静脉按2ml/kg恒定滴注药物，注射前和注射后15min两个时间点，均记录上述参数各一次。然后于左冠状动脉前降支(LADl/3处，供应心室前壁及心尖部的第一级血管分支起始部)双层结扎后3小时，取静脉血测定乳酸脱氢酶(LDH)和磷酸肌酸激酶(CPK)含量，然后迅速放血取其心脏，NBT染色法称重并计算心室梗塞范围，用配对T检验对模型组给药前后差异进行显著性比较，用组间T检验对各实验组间LAD增减比率(按公式2计算)进行显著性比较，结果见表3。公式l左心室心肌耗氧量雨02=1.43+K"BPsXHR)+K2(0.8BPs+0.2BPD)XHRXSV+BWK产4.08X10-4,K2=3.25Xl(T4，BPs-收縮压(mmHh),BPd-舒张压(mmHh)HR-心率(bats/min)，SV-每搏输出量(ml/beat)，BW-体重(kg)公式2结扎LAD增减比率结扎LAD增减比率-(给药后数值-给药前数值)/给药前数值表3对麻醉大鼠LAD心肌缺血酶学指标及左心室梗塞范围的影响组别LAD(U/L)CPK(U/L)左心室_结扎前结扎后结扎前结扎后梗塞范围(％)生理盐水组74.88±18.72287.94±107.8681.04±18.20297.88±89.8715.21±2.15人参皂苷:红64.85±7.74196.14±25.4471.84±19.04184.78±55.47*17.74±2.48*花黄色素(5:1)人参皂苷Rd:红62.10i7.87164.80±26.08*71.68±23.76190.58±44.75*12.68±2.14*芪苷IV(10:0)人参皂苷Rd:红65.69i4.94108.63±15.72**66.18±21.48228.24±96.75**11.24±2.18**花黄色素(5:1)人参皂苷Rd:红62.74士10.18103.07士36.18**67.64士15.96145.88±90.82**10.22±1.18**花黄色素(3:2)人参皂苷Rd:红64.21±11.04137.84±73.96*84.76±10.82168.54±48.6213.48±2.82*花黄色素(1:5)人参皂苷Rd:红70.68土10.24186.28±37.7267.46±22.67205.48±48.62*13.11±2.34*花黄色素(O:IO)人参皂苷:红61.84±15.84214.82±56.72*81.82±13.05217.68±18.6915.88±2.12*花黄色對1:5)注各给药组与对照组比较，*P<0.05，**P<0.01由表3的结果可见,各给药组均可使左心室梗塞范围明显縮小(PO.05)，显著和明显降低模型动物的LDH和CPK(P<0.01和PO.05)，其中以人参皂苷Rd:红花黄色素A=(3:2)为效果最好的配比，同时人参皂苷Rd与红花黄色素A配比使用比单用人参皂苷Rd或单用红花黄色素A或其总皂苷的效果好。具体实施例方式实施例1注射液的制备1、处方人参皂甙-Rd6g红花黄色素A4g氯化钠9g1，2-丙二醇100ml注射用水约900ml制成1000ml2、制备取人参皂甙-Rd、红花黄色素A、氯化钠、1，2-丙二醇；氯化钠溶解至200/0丙二醇水溶液500ml，加入人参皂甙-Rd、红花黄色素A，于607(TC水浴上搅拌至全溶，冷却至室温，加入余量的注射用水至IOOOml，混匀后用0.22ym滤膜过滤。滤液分瓶灌装，封口，灭菌，即得。实施例2滴丸的制备1、处方人参皂甙-Rd10g红花黄色素A20g聚乙二醇600037g制成1000粒2、制备取聚乙二醇6000，置于容器中，加热至70—8(TC，待全部熔融，温度降到5(TC左右时，加入人参皂甙-Rd、红花黄色素A、使熔融，温度控制在40—50°C，倒入滴丸机中滴制，滴入二甲基硅油中，制成滴丸，即得。实施例3舌下含片的制备1、处方:人参皂甙-Rd20g红花黄色素A10g羟丙基甲基纤维素(E-50)80g羟丙基甲基纤维素(E-4M)50g羟丙基纤维素20g微粉硅胶3g硬脂酸镁7g制成1000片2、取人参皂甙-Rd、红花黄色素A、羟丙基甲基纤维素(E-50)、羟丙基甲基纤维素(E-4M)、羟丙基纤维素、匀，直接压制成舌下含片，即得。实施例4软胶囊剂的制备1、处方人参皂甙-Rd红花黄色素A明胶甘油大豆油卵磷脂微粉硅胶、硬脂酸镁以等量递加法混合均2g10g勤g40g60g6g4g制成1000粒2、制备取明胶加入反应罐中，在搅拌状态下加入适量水，密闭，待明胶完全溶解后，再加入甘油，搅拌均匀，抽真空脱气2小时，放入保温桶中，保温静置过夜，待用。取大豆油、卵磷脂、蜂蜡混合均匀，称取人参皂甙-Rd、红花黄色素A加入，搅拌均匀，胶体磨研磨至胶体状，室温静置。将药液倒入软胶囊机中，压制软胶囊，干燥，即得。实施例5冻干制剂的制备1、处方人参皂甙-Rd5g红花黄色素Alg甘露醇30g_乳糖__制成1000瓶2、制备取人参皂甙-Rd、红花黄色素A加适量乙醇溶解，补充注射用水至3000ml，用碳酸钠溶液调节PH值至6.08.0，加入甘露醇、乳糖使完全溶解，按注射剂的要求进行高压消毒灭菌，采用微孔滤膜过滤，滤液按每瓶3ml进行分装，冷冻干燥，封口，即得。权利要求1、一种治疗心脑血管疾病的药物组合物，其特征在于该药物组合物由人参皂苷和红花黄色素与适宜辅料制成。2、根据权利要求l所述的药物组合物，其特征在于人参皂苷包含人参皂苷-Kd、人参皂苷-Rgl、人参皂苷-Rg2、人参皂苷-Rg3、人参皂苷-Rbl、人参皂甙-Rh、人参皂甙-Re。3、根据权利要求2所述的药物组合物，其特征在于人参皂苷优选人参皂苷Rd。4、根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于红花黄色素包含红花黄色素A，红花黄色素B。.5、根据权利要求4所述的药物组合物，其特征在于红花黄色素优选红花黄色素A。6、根据权利要求1-5所述的药物组合物，其特征在于该药物组合物包含药理学上有效量的人参皂苷与红花黄色素的比例为1:99:1。7、根据权利要求6所述的药物组合物，其特征在于该药物组合物优选药理学上有效量的人参皂苷Rd与红花黄色素A比例为3:2。8、根据权利要求1所述的一种用于心脑血管疾病的的药物组合物，其特征在于该组合物与适宜辅料，按常规制剂工艺制成药物学意义上的各种剂型。9、根据权利要求8所述的用于心脑血管疾病的的药物组合物的制备方法，其特征在于所述药物学意义上的各种剂型包括口服制剂、注射制剂或外用制剂。全文摘要本发明属于医药
技术领域：
，公开了一种治疗心脑血管疾病的药物组合物，它是由人参皂苷和红花黄色素为主要成分制成，可制成临床上或药学上可接受的剂型。该药物组合物具有扩张脑血管的作用，能降低脑血管阻力，增加脑血流量，能明显减少脑组织的梗塞区面积，明显减轻由于脑组织坏死出现的行为障碍等作用，可用于制备治疗脑供血不足、脑血栓形成、脑栓塞、脑血管痉孪、脑功能不全、老年性痴呆、帕金森氏综合症、脑中风、高血压、高血脂、动脉硬化、冠心病、心纹痛、心肌梗塞等疾病的药物。文档编号A61K31/7028GK101474195SQ20081006906公开日2009年7月8日申请日期2008年12月24日优先权日2008年12月24日发明者张观福,健杜申请人:贵州信邦远东药业有限公司