专利名称：：一种环磷腺苷葡胺微球及其制法的制作方法
技术领域：
：本发明涉及一种新型药物制剂，特别涉及一种环磷腺苷葡胺微球冻干制剂及其制备方法。
背景技术：
：环磷腺苷微溶于水，加入葡甲胺可增加其溶解性，然而，在环磷腺苷葡胺溶液中，随着保存时间的延长，环磷腺苷会逐渐析出，使药液发生变质、浑浊，从而影响药品的疗效，同时影响用药的安全性，环磷腺苷葡胺溶液在溶液状态保存过程中，易遇光发生变化，使药物降解，引起临床过敏反应增加疗效下降，并且环磷腺苷葡胺溶液易受环境因素的影响氧化、聚合而使药品结构发生变化。CN1459288A提供了一种环磷腺苷葡胺的大输液，由环磷腺苷葡胺、葡萄糖、柠檬酸加蒸馏水制备而成，缺点在于放置和储存稳定性差，运输不便。CN1579413A提供了一种注射用环磷腺苷葡胺，其直接将环磷腺苷、葡甲胺及赋形剂制成普通冻干制剂，缺点是冻干粉塌陷不疏松，容易发生粘连，不易水化。以上工艺均是采用环磷腺苷葡胺作为原料，也进一步增加了其生产成本。微球是由生物可降解的高分子材料组成的封闭性小球状体，是当今靶向给药系统的一种新剂型。微球进入人体后主要被网状内皮系统吞噬，使药物蓄积在肝、脾和骨髓等巨噬细胞丰富的组织器官中，增加了局部药物浓度，提高药物疗效，同时减少药物在全身的分布，降低药物毒副作用。CN1533765A提供了一种抗癌药秋水仙碱微球的冻干制剂，其制备方法在此引入作为参考。本发明人通过长期创造性的研究发现，选用一定赋形剂制成的磷腺苷葡胺微球冻干制剂，不仅大大地提高了环磷腺苷葡胺的储存稳定性，而且还利于提高其药物浓度，增加药物疗效和用药安全，是一种新的制备方法，国内尚未见到类似报道。
发明内容本发明的目的在于提供一种环磷腺苷葡胺微球冻干制剂及其制备方法。本发明提供了一种环磷腺苷葡胺微球冻干制剂剂，其特征在于该制剂主要是由环磷腺苷、葡甲胺、聚己内酯、聚乙烯醇、表面活性剂、渗透调节剂、冻干支持剂制成。所述的环磷腺苷葡胺微球冻干制剂各组分重量份计为:环磷腺苷葡甲胺聚己内酯聚乙烯醇表面活性剂渗透调节剂冻干支持剂1.763份L037份5.4100份L810份2.5~10份1100份10300份其中表面活性剂选自聚山梨酯80、聚山梨酯20、波洛沙姆188、脱氧胆酸钠、十二烷基硫酸钠、十二垸基磺酸钠、司盘80、司盘20、卵磷脂系列中的一种或多种；渗透调节剂为氯化钠。所述的冻干支持剂选自甘露醇、乳糖、葡萄糖、山梨醇、蔗糖、麦芽糖、氨基乙酸、甘氨酸、水解明胶中的一种或多种。一种环磷腺苷葡胺微球冻干制剂的制备方法，其特征在于将聚乙烯醇、渗透调节剂和表面活性剂溶解于蒸馏水中，得水相；将环磷腺苷、葡甲胺与聚己内酯溶于有机溶剂中，得油相；将油相缓慢注入到水相中，加热，搅拌，再加入冻干支持剂，进行冷冻干燥，得到白色疏松块状物。一种环磷腺苷葡胺微球冻干制剂的制备方法，其特征在于包括以下步骤(1)将聚乙烯醇先用蒸馏水溶解，再加入表面活性剂和氯化钠，搅拌溶解完全，得到与血浆等渗的水溶液，为水相；(2)将环磷腺苷、葡甲胺和聚己内酯共溶于有机溶剂中，搅拌均匀；(3)将油相缓慢加入水相中，并持续搅拌，溶液温度维持在506(TC，油相迅速扩散到水相，形成0/W或W/O型乳剂；(4)将得到的乳剂在磁力搅拌下加热，除去有机溶剂，得混悬液，离心，用蒸馏水洗涤有机溶剂和表面活性剂残留，得微球沉淀物；(5)将得到的微球固体沉淀物用0.9%生理盐水溶解，加入冻干支持剂，搅拌1030分钟，真空冷冻干燥，得白色疏松块状物。以上制备步骤中所述有机溶剂优选自氯仿、二氯甲垸、乙醇、丙酮、甲醇、正己烷或任意两种混合物。表面活性剂优选自聚山梨酯80或波洛沙姆188。冻干支持剂优选自甘露醇或氨基乙酸。本发明的有益效果是用上述方法制备的环磷腺苷葡胺微球冻干制剂用0.9%生理盐水溶解，则立即分散成均匀的环磷腺苷葡胺微球水溶液，其有效成分为其中的环磷腺苷葡胺微球，扫描电镜测得水合后脂质体的平均粒径小于lum，80n/。粒子粒径在200300nm之间。由于本发明的环磷腺苷葡胺微球冻干制剂水合后，环磷腺苷葡胺微球的粒径小，可以在生物体内兼容。由微球为载体的药物在生物体内可降解、无毒性，具有能识别变异细胞的特点。环磷腺苷葡胺的粒径小，对肝、脾组织有天然的靶向性，因此提高了环磷腺苷葡胺在肝组织中的积累，提高了环磷腺苷葡胺的治疗作用。本实验进行了样品的安全性考察，包括剌激性试验和溶血性试验，试验结果表明，试验动物均未见有刺激性异常反应，环磷腺苷葡胺微球冻干制剂安全可靠，无刺激性，并且没有溶血反应。本发明生产的环磷腺苷葡胺微球冻干制剂的方法工艺简单，无需特殊设备，因而生产成本低，适合于大规模的工业化生产。具体实施例方式实施例1环磷腺苷葡胺微球冻干剂的制备环磷腺苷30g葡甲胺17.8g聚己内酯95.6g聚乙烯醇31.8g聚山梨酯8045g氯化钠18g甘露醇180g乙醇500ml蒸馏水2000ml制备工艺(1)称取31.8g聚乙烯醇先用500ml蒸馏水溶解，再加入45g聚山梨酯80和18g氯化钠，搅拌溶解完全，得到与血浆等渗的水溶液，为水相；(2)称取30g环磷腺苷、17.8g葡甲胺和95.6g聚己内酯共溶于500ml乙醇中，搅拌均匀；(3)将油相缓慢加入水相中，并持续搅拌，溶液温度维持在55'C，油相迅速扩散到水相，形成O/W或W/O型乳剂；(4)将得到的乳剂在磁力搅拌下加热，除去乙醇，得混悬液，离心，用蒸馏水洗漆有机溶剂和表面活性剂残留，得微球沉淀物；(5)将得到的微球固体沉淀物用0.9%生理盐水溶解，加入180g甘露醇，搅拌30分钟，真空冷冻干燥，得白色疏松块状物。实施例2环磷腺苷葡胺微球冻干剂的制备环磷腺苷60g葡甲胺35.6g聚己内酯95.6g聚乙烯醇9.56g司盘809.56g氯化钠27g乳糖285g氯仿700ml蒸馏水3000ml制备工艺同实施例l，制得白色疏松块状物。实施例3环磷腺苷葡胺微球冻干剂的制备环磷腺苷90g葡甲胺53.4g聚己内酯"5.1g聚乙烯醇43g波洛沙姆188107.5g氯化钠36g氨基乙酸430g丙酮1000ml蒸馏水4000ml制备工艺同实施例l，制得白色疏松块状物。实施例4环磷腺苷葡胺微球冻干制剂的粒径测定取实施例1-3制备的环磷腺苷葡胺微球，双蒸水溶解，用电位粒径仪察。电位粒径仪测定本发明环磷腺苷葡胺微球水合后脂质体的平均粒径小于lum，80%的粒子粒径在200300nm之间。实施例5环磷腺苷葡胺微球冻干制剂的稳定性研究对各实施例所制备的环磷腺苷葡胺微球冻干制剂进行质量检测和稳定性研究，同时将其与CN1459288实施例1的输液(产品A)和CN1579413A实施例1的冻干粉(产品B)的比较。将以上产品分别在高温40°C、相对湿度75%±5%条件下6个月，进行加速试验考察；在高温25°C、相对湿度60%±10%条件下18个月，进行长期试验考察，检测各项质量指标的变化，所得数据如表1-3所示表10天质量检测结果样品性状酸度澄明度有关物质(％)含量(％)产品A无色澄明液体6.2符合规定0.6699.8产品B白色疏松块状物6.3符合规定0.71100.6实施例1白色疏松块状物6.4符合规定0.63102.2实施例2白色疏松块状物6.3符合规定0.6699.9实施例3白色疏松块状物6.4符合规定0.64100.4表2加速试验结果时间样品性状酸度澄明度有关物质賴(%)(%)产品A无色澄明液体6.0符合规定0.7499.7产品B白色疏松块状物6.2符合规定0.75跳41月实施例1白色疏松块状物6.4符合规定0.64102.1实施例2白色疏松块状物6.3符合规定0.6699.9实施例3白色疏松块状物6.3符合规定0.65100.311<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>表3长期试验结果<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>实施例2白色疏松块状物6,3符合规定0.6799.6实施例3白色疏松块状物6.3符合规定0.66100.0产品A微黄色液体5.5不符合规定0.8698.9产品B白色疏松块状物5.9不符合规定0.7999.712月实施例1白色疏松块状物6.2符合规定O《"7v*u/101.8实施例2白色疏松块状物6.2符合规定0.6899.5实施例3白色疏松块状物6,3符合规定0.6699.9产品A微黄色液体5.4不符合规定0.8998.4产品B白色疏松块状物5.8不符合规定0.8099.318月实施例1白色疏松块状物6.3符合规定0.68101.7实施例2白色疏松块状物6.2符合规定0,6999.4实施例3白色疏松块状物6.2符合规定0.6899.8结论由以上数据结果可以看出，本发明制得的样品质量符合标准要求，经加速6月和长期18月的实验之后，各项质量指标无明显变化，均符合质量标准。而且同现有技术的产品相比较，明显看出本发明的产品大大提高了存储稳定性。实施例6环磷腺苷葡胺微球冻干制剂的刺激性试验1、小白鼠静脉注射法试验方法选择健康小白鼠10只，体重21.025.0g，随机分成两组。采用实施例2制得的环磷腺苷葡胺微球冻干制。一组5只小白鼠，尾静脉注射0.4ml环磷腺苷葡胺微球冻干制剂注射液，对照组5只小白鼠，尾静脉注射同剂量0.9%生理盐水。给药后一小时内，观察到给药小鼠无任何异常行为，无刺激性反应，小鼠活动和饮食不受影响，所注射的环磷腺苷葡胺微球冻干制剂注射液对血管无刺激性；给小鼠尾静脉注射后，对小鼠血管静脉组织无剌激损伤作用。2、小白鼠腹腔注射法试验方法选择健康小白鼠10只，体重21.025.0g，随机分成两组。采用实施例2制得的环磷腺苷葡胺微球冻干制。一组5只小白鼠，腹腔注射0.2ml环磷腺苷葡胺微球冻干制剂注射液，对照组5只小白鼠，腹腔注射同剂量0.9%生理盐水。给药后一小时内，观察到给药小鼠无任何异常行为，无刺激性反应，小鼠活动和饮食不受影响，所注射的环磷腺苷葡胺微球冻干制剂注射液对无刺激性。同时本实验对所制备样品进行了安全性考察，包括刺激性试验和溶血性试验，结果表明环磷腺苷葡胺微球冻干制剂安全、可靠，无刺激性，并且没有溶血反应。在上述各实验中，试验动物均未见有刺激性异常反应。试验结果表明，环磷腺苷葡胺微球冻干制剂安全可靠。权利要求1、一种环磷腺苷葡胺微球冻干制剂，其特征在于该制剂主要是由环磷腺苷、葡甲胺、聚己内酯、聚乙烯醇、表面活性剂、渗透调节剂、冻干支持剂制成。2、权利要求1所述的环磷腺苷葡胺微球冻干制剂，其特征在于各组分按重量份计为:环磷腺苷葡甲胺聚己内酯聚乙烯醇表面活性剂渗透调节剂冻干支持剂1.763份1.0~37份5.4100份1.8~10份2.5~10份1100份10~300份。3、权利要求l-2所述的环磷腺苷葡胺微球冻干制剂，其特征在于所述表面活性剂选自聚山梨酯80、聚山梨酯20、波洛沙姆188、脱氧胆酸钠、十二烷基硫酸钠、十二垸基磺酸钠、司盘80、司盘20、卵磷脂中的一种或多种。4、权利要求l-2所述的环磷腺苷葡胺微球冻干制剂，其特征在于渗透调节剂为氯化钠。5、权利要求l-2所述的环磷腺苷葡胺微球冻干制剂，其特征在于冻干支持剂选自甘露醇、乳糖、葡萄糖、山梨醇、蔗糖、麦芽糖、氨基乙酸、甘氨酸、水解明胶中的一种或多种。6、权利要求1-5任一项所述的环磷腺苷葡胺微球冻干制剂的制备方法，其特征在于将聚乙烯醇、渗透调节剂和表面活性剂溶解于蒸馏水中，得水相；将环磷腺苷、葡甲胺与聚己内酯溶于有机溶剂中，得油相；将油相缓慢注入到水相中，加热，搅拌，再加入冻干支持剂，进行冷冻干燥，得到白色疏松块状物。7、权利要求6所述的环磷腺苷葡胺微球冻干制剂的制备方法，其特征在于包括以下步骤(1)将聚乙烯醇先用蒸馏水溶解，再加入表面活性剂和氯化钠，搅拌溶解完全，得到与血浆等渗的水溶液，为水相；(2)将环磷腺苷、葡甲胺和聚己内酯共溶于有机溶剂中，搅拌均匀；(3)将油相缓慢加入水相中，并持续搅拌，溶液温度维持在50~60°C，油相迅速扩散到水相，形成0/W或W/0型乳剂；(4)将得到的乳剂在磁力搅拌下加热，除去有机溶剂，得混悬液，离心，用蒸馏水洗涤有机溶剂和表面活性剂残留，得微球沉淀物；(5)将得到的微球固体沉淀物用0.9%生理盐水溶解，加入冻干支持剂，搅拌10~30分钟，真空冷冻干燥，得白色疏松块状物。8、权利要求6~7所述的环磷腺苷葡胺微球冻干制剂的制备方法，其特征在于所述有机溶剂选自氯仿、二氯甲烷、乙醇、丙酮、甲醇、正己烷或任意两种混合物。9、按权利要求68所述的环磷腺苷葡胺微球冻干制剂的制备方法，其特征在于表面活性剂选自聚山梨酯80或波洛沙姆188。10、按权利要求6~9所述的环磷腺苷葡胺微球冻干制剂剂的制备方法，其特征在于冻干支持剂选自甘露醇或氨基乙酸。全文摘要一种环磷腺苷葡胺微球冻干制剂，其特征在于该制剂主要是由环磷腺苷、葡甲胺、聚己内酯、聚乙烯醇、表面活性剂、渗透调节剂、冻干支持剂制成。文档编号A61K9/16GK101491500SQ20091001425公开日2009年7月29日申请日期2009年2月19日优先权日2009年2月19日发明者陶灵刚申请人:陶灵刚