甲硝唑和取代水杨酸的复合物及其制法与用途的制作方法

专利名称：甲硝唑和取代水杨酸的复合物及其制法与用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及甲硝唑枝接取代水杨酸及其制备方法与用途。
背景技术：
尿素酶是一种人和动物胃肠道及泌尿道细菌感染中常见的酶，它既是人和动物中某 些致病菌的致病因子之一，又是某些氮源性腐败物转化所必须具备的酶之一。它是人类 首次获得晶体并发现含有Ni离子的金属酶。幽门螺旋杆菌尿素酶除有尿素酶的一般理 化性状外，还有其独特性.幽门螺旋杆菌尿素酶分子量为550KDa左右，直径13nm，等电 点5.99土0. 03，最适温度45。C，最适pH8. 2. Km值0. 3ramol/L±0. 1画1/L，在饱和条件 下纯化的尿素酶活性为每毫克蛋白质每分钟水解1100nmol土200umo1尿素，较低Km 值有助于幽门螺旋杆菌的尿素酶在尿素浓度较低的人胃环境中始终处于饱和状态而发 挥最大的功能。幽门螺旋杆菌尿素酶单体由A, B两个亚单位组成，而其他菌属所含尿 素酶则有三个亚单位组成.幽门螺旋杆菌的尿素酶量很大，占全菌蛋白的5% 10%。
尿素酶是尿道和消化道中病原菌重要的致病因子，与消化道和尿道疾病的预防、
诊断和治疗密切相关。尿素酶抑制剂的研究，在药物研发历史有重要地位。许多尿素酶 抑制剂己经上市，并用于治疗系列疾病。尿素酶抑制剂已经广泛被认为是治疗胃溃疡的 耙点药物。
根据文献报道，硝基咪唑的衍生物有很好的生物活性，包括抗菌，抗结核和尿素酶 抑制剂等。甲硝唑(1-[2-羟乙基]-2-甲基-5-硝基咪唑)是一种重要的硝基咪唑衍生物， 有数十年临床应用历史。近年来又有很多关于甲硝唑临床应用新进展的报道，它可以用 于治疗消化性溃疡、呼吸系统疾病、高脂血症和妇科疾病等。本发明基于已经报道的硝 基咪唑类化合物的幽门螺旋杆菌尿素酶抑制剂活性，在甲硝唑的基础上枝接具有很好生 物活性的取代水杨酸，得到一类新的化合物。因此，甲硝唑和取代水杨酸成功地结合而 形成的复合物，具有很好的抗尿素酶的生物活性，而且毒性非常小，将会成为市场上最 有潜力的一类新药的之一。

发明内容
本发明的目的在于提供一类新型甲硝唑枝接取代水杨酸的化合物以及它们的制备 方法与用途。
本发明的技术方案如下
一类甲硝唑和取代水杨酸的复合物，其特征是它有如下通式 A系列
R3
式中RI=H、 N02、 CH3或齒素；R2=H、 N02、 CH3或齒素；R3=H、 NH3或CH3;
或B系列
R4 R5
02N
式中R^H或CH3; R5=H、 CH3或齒素；R6=-H、 CH3、 S03H或卣素。
一种上述的A^列的甲硝唑和取代水杨酸的复合物的制法，它由下列步骤组成
步骤1.将每lOmmol对甲苯磺酰氯和等物质的量的甲硝唑溶于无水CH2C12中，CHbCl2的用量为lOOml，加入5ml三乙胺，冰浴搅拌，反应4-5小时后，'将反应混合物 过滤后，滤液倒入100ml冰水中，分离出有机相，水相加乙酸乙酯萃取，合并有机相。 用饱和碳酸氢钠和水分别洗涤有机相，用无水NaS04干燥有机相，减压蒸去溶剂，得到 淡黄色晶状固体，淡黄色晶体为甲硝唑的羟基被对甲苯磺酰基取代的产物。
步骤2.将步骤l中得到的淡黄色晶状固体与等物质的量的取代水杨酸溶于N,N-二 甲基甲酰胺中，每毫摩尔的取代水杨酸用N,N-二甲基甲酰胺10ml，加入无水碳酸钾， 每毫摩尔的取代水杨酸用无水碳酸钾0.5克，8(TC搅拌20小时，减压蒸去溶剂，层析得 本发明的A系列甲硝唑和取代水杨酸的复合物。
一种上述的B系列的甲硝唑和取代水杨酸的复合物的制法，它由下列步骤组成
步骤1.将每lOmmol对甲苯磺酰氯和等物质的量的甲硝唑溶于无水CH2C12中， CH2Cl2的用量为lOOml，加入5ml三乙胺，冰浴搅拌，反应4-5小时后，将反应混合物 过滤后，滤液倒入100ml冰水中，分离出有机相，水相加乙酸乙酯萃取，合并有机相。 用饱和碳酸氢钠和水分别洗涤有机相，用无水NaS04干燥有机相，减压蒸去溶剂，得到 淡黄色晶状固体，淡黄色晶体为甲硝唑的羟基被对甲苯磺酰基取代的产物。
步骤2.将步骤l中得到的淡黄色晶状固体与取代水杨酸溶于N,N-二甲基甲酰胺中， 淡黄色晶状固体与取代水杨酸的物质的量之比为2比1，每毫摩尔的取代水杨酸用N,N-二甲基甲酰胺10ml，加入无水碳酸钾，每毫摩尔的取代水杨酸用无水碳酸钾0.5克，110 'C搅拌30小时，减压蒸去溶剂，层析得本发明的A系列甲硝唑和取代水杨酸的复合物。
上述制法中，步骤2中所述层析，是采用200-300目硅胶柱，洗脱液为无水乙酸乙酯。
本发明的甲硝唑和取代水杨酸的复合物，对幽门螺旋杆菌尿素酶有明显抑制作用。 可以用于制备抗幽门螺旋杆菌的药物。
具体实施例方式
实施例一2-(2-(2-甲基-5-硝基-l-咪唑)乙氧基)-3,5-二硝基苯甲酸(化合物l)的制备<formula>formula see original document page 7</formula>将对甲苯磺酰氯(10mmol)和甲硝唑(10mmol)溶于无水100mlCH2Cl2中，加入5ml三 乙胺，冰浴搅拌，反应4-5小时后，将反应混合物过滤后，滤液倒入100ml冰水中，分 离出有机相，水相加乙酸乙酯萃取，合并有机相。用饱和碳酸氢钠和水分别洗涤有机相， 用无水Na2S04干燥有机相，减压蒸去溶剂，得到淡黄色晶状固体。
取上述淡黄色晶状固体(0.65g,2mmol)与3,5-二硝基水杨酸(2mmol)溶于20mlDMF 中，加入lg无水碳酸钾，8(TC搅拌20小时，减压蒸去溶剂，柱层析(200-300目硅胶 柱，洗脱液为无水乙酸乙酯)，乙酸乙酯中结晶得目标产物。产率85%.目标产物为黄色 粉末状固体。Mp 155-156°C. ^-NMR (300MHz, DMSO隱4 5ppm): 2.50(s, 3H); 4.51 (t, J =4.80 Hz, 2H); 4.61 (t， J = 4.80 Hz, 2H); 8.02 (s， 1H); 8.30 (d, J = 3.45Hz， 1H); 8.48 (d， J = 3.45Hz, 1H). MS (ESI): 381.06 ([M+H]+). Anal. calc. forCi3HuN509: C， 40.95; H， 2>91; N, 18.37; found: C 40.98, H 2.96, N 18.30 %.
实施例二 2-(2-(2-甲基-5-硝基-l-咪唑)乙氧萄-4-氨基苯甲酸(化合物2)的制备
<formula>formula see original document page 7</formula>
制备方法同实施例一。4-氨基水杨酸代替3,5-二硝基水杨酸，得到深褐色粉末状目 标化合物。产率78。/。。Mpl88-189。C. iH-NMR (300MHz, DMSO-^， Sppm): 2.49(s, 3H); 4.58 (t， J =4.95 Hz, 2H);4.70 (t， J = 4.95 Hz， 2H); 5.98(s， IH); 6.10(s, J=8.76Hz, IH); 6.20 (s,2H); 728 (d, J =8.76Hz， IH); 7.98 (s， IH); 10.51(s， IH).MS (ESI): 306.18 ([M+H]+). Anal. calc. for C13H14N405: C, 50.98; H, 4.61; N, 18.29%; found: C 50.84， H 4.69, N 18.40%,
实施例三2-(2-(2-甲基-5-硝基-l-咪唑)乙氧萄-4-甲基苯甲酸(化合物3)的制备制备方法同实施例一。4-甲基水杨酸代替3,5-二硝基水杨酸，得到白色粉末状目标 化合物。产率48。/。。Mp 143隱144。C. iH-NMR(300MHz, DMSO-c 6， Sppm): 2.29(s, 3H,) 2.46(s, 3H); 4.65 (t， J =4.77 Hz, 2H); 4.72 (t, J = 4.77 Hz, 2H); 6.77 (m， 2H); 7.49 (d, J = 8.04Hz, 1H); 8.00 (s, 1H); 10.25(s, 1H). MS (ESI): 305.12 ([M+H〗+). Anal. calc. for C14H15N305: C, 55.08; H， 4.95; N， 13.76%; found: C 55.30， H 4.94; N， 13.83%.
实施例四2-(2-(2-甲基-5-硝基-l-咪唑)乙氧基)-3，5-二碘苯甲酸(化合物4)的制备
HOOC
制备方法同实施例一。以3， 5-二碘水杨酸代替3,5-二硝基水杨酸，得到灰色粉末 状目标化合物。产率70%。 Mp 175-176°C。 'H-NMR(300MHz, DMSO-^， Sppm): 'HNMR (DMSO-d6): 2.55(s, 3H); 4.18 (t， J =4.89 Hz, 2H); 4.76 (t, J = 4.89 Hz, 2H); 7.80 (s， 1H);8.05 (s, 1H);8.11 (s, IH).MS (ESI): 542.98([M+H]+). Anal. calc. for C13HuI2N3Os: C， 28.75; H, 2.04; N, 7.74%; found: C, 28.73; H， 2.11;N, 7.72%.
实施例五2-(2-(2-甲基-5-硝基-l-咪唑)乙氧基)-3,5-二溴苯甲酸(化合物5)的制备
HOOC
制备方法同实施例一。以3， 5-二溴水杨酸代替3,5-二硝基水杨酸，得到黄色粉末状 目标化合物。产率57%。 Mpl66-168。C。 ！H-NMR (500MHz, DMSO-^， 5ppm): 2111 NMR (DMSO-d6): 2.53(s, 3H); 4.19 (t， J =4.86 Hz, 2H); 4.76 (t， J = 4細z, 2H); 7.64 (s, 1H); 8.01 (s, 1H); 8.07 (s, 1H). MS (ESI): 448.9 ([M+H] +). Anal. calc. for C13HuBr2N305: C, 34.77; H,2.47; N, 9.36; %; found: C 34.59， H 2.44; N 9.38%.
实施例六2-(2-(2-甲基-5-硝基-l-咪唾)乙氧基)-3，5-二氯苯甲酸(化合物6)的制备
制备方法同实施例一。以3， 5-二氯水杨酸代替3，5-二硝基水杨酸，得到灰白色粉 末状目标化合物。产率56%。 Mpl59-160。C。 ^-NMR (300MHz, DMSO-^， Sppm): & NMR (DMSO-d6): 2.51(s, 3H); 4.16 (t, J =4.89 Hz， 2H); 4.73 (t, J = 4.89 Hz, 2H); 7.56 (s, 1H); 7.94 (s, 1H); 8.01 (s， 1H).MS (ESI): 359.06 ([M+H]+). Anal, calc. for CuHnCbNsOs: C: 43.35; H， 3.08; N， 11.67%; found: C, 43.41; H, 3.10; N， 11.64%.
实施例七2-(2-(2-甲基-5-硝基-l-咪唑)乙氧基)-3-甲基苯甲酸(化合物7)的制备
制备方法同实施例一。3-甲基水杨酸代替3，5-二硝基水杨酸，得到白色粉末状目标 化合物。产率52。/。。Mp 157-159°C. 'H-NMR (300MHz, DMSO陽^， Sppm): 2.28(s， 3H) 2.51(s: 3H); 4.62 (t， J =4.77 Hz， 2H); 4.75 (t, J = 4.77 Hz, 2H); 7.09 (d， J = 7.68Hz， 1H); 7.42 (m， 2H); 8,03 (s, 1H); 10.21(s， 1H). MS (ESI): 305.12 ([M+H] +). Anal, calc. for C14H15N305: C， 55.08; H, 4.95; N, 13.76%; found: C 55.21, H 4.92, andN 13.73%.
实施例八2-(2-(2-甲基-5-硝基-l-咪唑)乙氧基)-5-甲基苯甲酸(化合物8)的制备制备方法同实施例一。5-甲基水杨酸代替3,5-二硝基水杨酸，得到灰白色粉末状目 标化合物。产率48%。 Mp 154-155°C. iH-NMR (300MHz, DMSO-d6， Sppm): 2.31(s， 3H) 2.53(s, 3H); 4.57 (t, J =4.77 Hz， 2H); 4.68 (t, J = 4.77 Hz, 2H); 7.36 (d， J = 8.85Hz, lH);7.58(s, 1H);7.65(d, J = 8.85Hz, 1H); 8.03 (s, IH); 10.19(s, 1H). MS (ESI): 305.12 ([M+H] +). Anal. calc. for C14H15N305: C， 55.08; H, 4.95; N, 13.76%; found: C 55.26, H 4.89, N 13.72%.
实施例九2-(2-(2-甲基-5-硝基-l-咪唑)乙氧基)-5-氯苯甲酸(化合物9)的制备
HOOC
CI
制备方法同实施例一。5-氯水杨酸代替3,5-二硝基水杨酸，得到浅灰色粉末状目丰示 化合物。产率48%。 Mp 144-145°C. ^-NMR (300MHz, DMSO-c/6， 5ppm): 2.51(s, 3H); 4.47 (t， J =4.74 Hz, 2H); 4.59 (t， J = 4.74 Hz, 2H); 7.18(d, J = 8.97Hz， 1H);7.48(d, J - 2.52Hz， IH); 7.53 (dd, = 8.97Hz,J2，=2.52Hz,lH);8.00(s, IH); 10.21(s， IH). MS (ESI): 325.12 ([M+H]+). Anal. calc. for C13Hi3ClN305: C， 47.94; H， 3.71; N， 12.90 %; found: C， 47.86， H, 3.72, N, 12.79%.
实施例十2-(2-(2-甲基-5-硝基-l-咪唑)乙氧基)-5-溴苯甲酸(化合物10)的制备
HOOC
Br
制备方法同实施例一。4-漠，JC杨酸代替3,5-二硝基水杨酸，得到灰色粉末状目标4t 合物。产率61%。 Mp 148-149°C. !H隱NMR (300MHz, DMSO-cf6, Sppm): 2.51(s, 3H); 4.44 (tJ =4.74 Hz, 2H); 4.58 (t, J = 4.74 Hz， 2H); 7.1 l(d, J - 8.97Hz， 1H); 7.59(s, 1H); 7.64(d, J = 8.97Hz, 1H); 8.03 (s, 1H). 10.19(s, 1H). MS (ESI): 369.34 ([M+H] +). Anal. calc. for C13H12BrN305: C， 42.18; H, 3.27; N, 11.35%; found: C, 42.17， H,3.23，N, 11.39%.
实施例十一2-(2-(2-甲基-5-硝基-l -咪唑)乙氧基)-4-甲基苯甲酸2-(2-甲基-5-硝基-l -咪 唑)乙酯(化合物ll)的制备
将对甲苯黄酰氯(10mmol)和甲硝唑(10mmol)溶于无水100mlCH2CI2中，加入5ml三 乙胺，冰浴搅拌，反应4-5小时后，将反应混合物过滤后，滤液倒入100ml冰水中，分 离出有机相，水相加乙酸乙酯萃取，合并有机相。用饱和碳酸氢钠和水分别洗涤有机相， 用无水NaS04干燥有机相，减压蒸去溶剂，得到淡黄色晶状固体。
取上述淡黄色晶状固体(1.34g，4mmol)与4-甲基水杨酸(2mmol)溶于20mlDMF中，力口 入lg无水碳酸钾，110'C搅拌30小时，减压蒸去溶剂，柱层析(200-300目硅胶柱，洗脱 液为无水乙酸乙酯)，乙酸乙酯中结晶得目标产物。产率55%.目标产物为黄色粉末状固 体。Mp 159-160。C. !H-NMR(300MHz, DMSO-c 6, Sppm): 2.28(s, 3H); 2.38(s, 3H);2.47(s, 3H); 4.36(t, J =4.71 Hz, 2H);4.50(t, J =4.77 Hz, 2H);4.65 (m, 4H); 6.82 (d, J = 7.86Hz, 1H);6.98 (s, 1H);7.39 (d， J = 7.86Hz， 1H); 8.01 (s， 1H); 8.03 (s， IH).. MS (ESI): 458.06 ([M+H] +). Anal. calc. forC20H22N6O7: C， 52.40; H, 4.84; N, 18.33%; found: C 52.42, H4.87, N, 18.30%.
实施例十二 2-(2-(2-甲基-5-硝基-l -咪唑)乙氧基)-5-溴苯甲酸2-(2-甲基-5-硝基-1 -咪唑) 乙酯(化合物12)的制备02N
制备方法同实施例十一。以5-溴水杨酸代替4-甲基水杨酸，得到浅褐色粉末状目木示 化合物。产率74%。 Mpl59誦160。C。 ！H-NMR (300MHz, DMSO-c/6， Sppm): 2.26(s, 3H); 2.39(s， 3H); 4.39(t， J =4.74 Hz， 2H);4.52(t, J =4.77 Hz, 2H);4.65 (m, 4H );7.13 (d, J = 8.97Hz， lH);7.59(s, 1H);7.66(d， J = 8.97Hz, 1H); 8.00 (s, 1H); 8.03 (s, 1H). MS (ESI): 552.11 ([M+H〗 +). Anal, calc. for Ci9Hi9BrN607: C， 43.61; H, 3.66; N, 16.06%; found: C， 43.55; H， 3.62; N, 16.16%.
实施例十三2-(2-(2-甲基-5-硝基-l -咪唑)乙氧基)-5-碘苯甲酸2-(2-甲基-5-硝基-1 -咪唑) 乙酯(化合物13)的制备
02N
制备方法同实施例十一。以5-碘水杨酸代替4-甲基水杨酸，得到褐色粉末状目标4七 合物。产率81%。 Mp 166-148°CLH-NMR (300MHz， DMS0-4,5ppm): 2.42(s, 3H); 4.37(t, J =4.74 Hz, 2H);4.49(t， J =4.92Hz, 2H);4.65 (m, 4H );6.98 (d， J = 8.76Hz, 1H);7.71(d, J -2.01Hz, 1H);7.78(dd, = 8.76Hz,J2,=2.01Hz,lH); 7.98 (s, 1H); 8.01 (s, 1H)。
MS (ESI): 570.1 ([M+H] +). Anal, calc. for C19H19IN607: C, 40.01; H， 3.36; N， 14.74%; found: C, 40.05; H，3.38;N, 14.76%.实施例十四2-(2-(2-甲基-5-硝基-l -咪唑)乙氧基)-5-碘苯甲酸2-(2-甲基-5-硝基-1 -咪唑) 乙酯(化合物14)的制备
制备方法同实施例十一。以5-璜基水杨酸代替4-甲基水杨酸，得到浅黄色粉末状目 标化合物。产率43%。 Mp 140-141。C 。 ！H-NMR (300MHz, DMSO-^， Sppm): 2.73(s, 3H ); 2.89(s, 3H); 4.29(t, J =4.774 Hz, 2H);4.52(t， J =4.89Hz， 2H);4.70 (m, 4H );7.39 (d, J = 8.82Hz, lH);7.57(s, 1H);7.68(d, J = 8.82Hz, 1H); 7.99 (s， 1H); 8.03 (s， 1H). MS (ESI): 524.21 ([M+H] +). Anal, calc. for C19H20N6O10S: C， 43.51; H, 3.84; N, 16.02%; found: C, 43.57 H，3.85;N, 16.11%.
实施例十五2-(2-(2-甲基-5-硝基-l -咪唑)乙氧基)-5-甲基苯甲酸2-(2-甲基-5-硝基-1 -咪 唑)乙酯(化合物15)的制备
制备方法同实施例十一。以5-甲基水杨酸代替4-甲基水杨酸，得到淡灰色晶状目标 化合物。产率43%。 Mpl56-158。C。 'H-NMR (300MHz, DMSO陽^， Sppm): 2.73(s， 3H ); 2.89(s， 3H); 4.29(t, J ，774 Hz,.2H);4.52(t， J =4.89Hz， 2H);4.70 (m, 4H );7.39 (d， J =8.82Hz， 1H);7.57(s， 1H);7.68(d, J = 8.82Hz, 1H); 7.99 (s, 1H); 8.03 (s, 1H). MS (ESI): 458.21 ([M+H〗+). Anal, calc. for C20H22N6O7: C， 52.40; H, 4.84; N， 18.33%; found: C, 52,41; H, 4.84; N, 18.35%.
实施例十六2-(2-(2-甲基-5-硝基-l -咪唑)乙氧基)-3-甲基苯甲酸2-(2-甲基-5-硝基-1 -咪 唑)乙酯(化合物16)的制备
02N
制备方法同实施例十一。以3-甲基水杨酸代替4-甲基水杨酸，得到灰白色粉末状目 标化合物。产率66%。 Mpl44-147。C。 'H-NMR (300MHz, DMSO-^,Sppm): 1.99(s, 3H ); 2.40(s， 3H);2.50(s， 3H); 4.08(t， J =4.95 Hz, 2H);4.51(t, J =4.95 Hz, 2H);4.68(m, 4H); 7.10(d， J = 7.68Hz， 1H); 7.40 (m, 2H); 8.03 (s, 1H); 8.07(s, 1H). MS (ESI): 458.31([M+H] +). Anal, calc. for C20H22N6O7: C, 52.40; H, 4.84; N， 18.33%; found: C， 52.46; H， 4.86; N, 18.30%.
实施例十七2-(2-(2-甲基-5-硝基-l -咪唑)乙氧基)-5-氯苯甲酸2-(2-甲基-5-硝基-1 -咪唑) 乙酯(化合物17)的制备
02N制备方法同实施例十一。以5-氯水杨酸代替4-甲基水杨酸，得到灰褐色粉末状目标 化合物。产率56%。 Mp 150-151°C 。 ^-NMR (300MHz, DMSO-^， Sppm): 2.39(s, 3H); 2.44(s， 3H); 4.39(t, J =4.74 Hz， 2H);4.52(t， J =4.92Hz， 2H);4.66 (m, 4H );7.20(d， J = 9.00Hz， 1H);7.47(d， J = 2.55Hz, 1H); 7.58 (dd， ^ = 9.00Hz,J2，=2.55Hz,lH);8.00(s, 1H); 8.03(s, 1H). MS (ESI): 478.31([M+H〗+). Anal. calc. for C19H19C1N607: C， 47.66; H, 4.00; N, 17.55%; found: C, 47.59; H, 4.02; N, 17.51%.
实施例十八2-(2-(2-甲基-5-硝基-l -咪唑)乙氧基)-4-氯苯甲酸2-(2-甲基-5-硝基-1 -咪唑) 乙酯(化合物18)的制备
制备方法同实施例十一。以5-氯水杨酸代替4-甲基水杨酸，得到黄褐色粉末状目 标化合物。产率56%。 Mp 101-103 °C 。 'H-NMR (300MHz, DMSO-^, Sppm): 2.36(s, 3H ); 2.45(s, 3H); 4.44(t， J =2.94 Hz， 2H);4.52(t， J =2.942Hz， 2H);4.66 (m, 4H );7.i0(d, J = 5.10Hz, 1H);7.29(s， 1H); 7.49 (d, J=5.10Hz，lH);8.00(s， 1H); 8.03(s， 1H).MS (ESI): 478.11([M+H]+). Anal. calc. for Ci9H19QN607: C, 47.66; H, 4.00; N， 17.55%; found: C, 47.69; H, 3.98; N， 17.54%.
实施例十九2-(2-(2-甲基-5-硝基-l -咪唑)乙氧基)-5-氟苯甲酸2-(2-甲基-5-硝基-1 -咪唑) 乙酯(化合物19)的制备02N
制备方法同实施例十一。以5-氟水杨酸代替4-甲基水杨酸，得到白色粉末状目标化 合物。产率46。/。。Mp 153-155°C 。 ^-NMR (300MHz， DMSO-d6， 5ppm): 2.41(s, 3H ) ; 2.47(s, 3H); 4.49(t, J =4.74 Hz, 2H);4.57(t, J =4.92Hz, 2H);4.68 (m, 4H );7.25(d, J = 8.97Hz, 1H);7.49(d， J = 2.58Hz, 1H); 7.62 (dd, h = 8.97Hz，J2,=2.58Hz,lH);8.01(s, 1H); 8.03(s, 1H). MS (ESI): 462.10([M+H〗+). Anal. calc. for Ci9H19FN607: C, 49.35; H, 4.14; N, 18.18%; found: C, 49.31; H, 4.12; N, 18.21%.
实施例二十2-(2-(2-甲基-5-硝基-l -咪唑)乙氧基)-4-溴苯甲酸2-(2-甲基-5-硝基-1 -咪唑) 乙酯(化合物20)的制备
Br
02N
制备方法同实施例十一。以4-溴水杨酸代替4-甲基水杨酸，得到浅褐色粉末状目标 化合物。产率61%。 Mp 163-164。C。 ^-NMR (300MHz， DMS0-4, S卯m): 2.39(s, 3H); 2.47(s, 3H); 4.42(t, J =2.94 Hz， 2H);4.49(t, J =2.94Hz, 2H);4.67 (m, 4H );7.09(d， J = 5.10Hz, lH);7.23(s, 1H); 7.41 (d， J=5.10Hz,lH);8.01(s， 1H); 8'04(s， IH).MS (ESI): 552.27 ([M+H〗+). Anal. calc. for C19H19BrN607: C， 43.61; H， 3.66; N， 16.06%; found: C, 43.63; H， 3.69; N,16.07%.
实施例二H^— 2-(2-(2-甲基-5-硝基-l -咪唑)乙氧基)-4-碘苯甲酸2-(2-甲基-5-硝基-1 -咪 唑)乙酯(化合物21)的制备
制备方法同实施例十一。以4-碘水杨酸代替4-甲基水杨酸，得到黄褐色粉末状目标 化合物。产率49%。 Mp 169層170。C 。 ^-NMR (300MHz, DMSO-^， Sppm): 2.32(s， 3H ); 2.51(s, 3H); 4.37(t, J =2.91 Hz, 2H);4.45(t， J =2.91Hz, 2H);4.51 (m, 4H );7.00(d, J = 5.13Hz， lH);7.16(s, 1H); 7.46 (d, J=5.13Hz，lH);8.01(s， 1H); 8.05(s， 1H) .MS (ESI): 570.17 ([M+H〗、 Anal, calc. for C19H19IN607: C， 40.01; H， 3.36; N, 14.74%; found: C， 39.96; H, 3.35; N,
实施例二十五甲硝唑枝接取代水杨酸的一类化令物体外抗尿素酶活性研究
抑制尿素酶(Urease)活性实验幽门螺旋杆菌尿素酶购自Sigma-Aldrich公司(St.
Louis, Mo, USA)，用DMSO和水(v/v， l:l)的混合溶剂配制各种浓度的待测化合物。，将
含有幽门螺旋杆菌尿素酶(25 nL， 10 kU七")和各种浓度的待测化合物(25 pL)的混合溶
液放置在化验盘(96-well)中，37 °C下预培养1 h。再加入含有尿素酶(500mM)的Hepes
缓冲溶液(0.2ml， lOOmM; pH = 6.8)和浓度为0.002%的酚红指示剂，并在37 °C下进
行培养。反应时间通过微盘读卡器(570nm)来测量，这需要形成充足的碳酸铵，使Hepes
缓冲溶液的pH值从6.8提高到7.7，测试终点依据酚红指示剂的颜色变化。
半数抑制浓度(IC5o)定义为当抑制率为50%时的药物浓度。 测得的ICw见表l所示
14.78%.表1本发明所列甲硝唑和取代水杨酸的复合物的幽门螺旋杆菌尿素酶的抑制ic50 值(〃M)
IC5。值(/M)
化合物
I 3 5 7 9
II 13 15 17 19 21
甲硝唑
阳性对照AHA(乙酰氧 肟酸)
46.3±0.45 293. 6±0.81
73. 7±0.37 123. 5±0.63
63±0.21 132. 11士0.54
15. 1±0.33
26. 34±0.21 33. 04±0.17
27. 32±0.35 21.69±0.16
化合物 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20
27. 55±0.31 17.67±0.15
ICs。值(/M) 49. 2±0.32 19. 4±0.12 54. 22±0.41 89±0.77 76±0.36 6. 5±0.02 23. 69±0.21 29. 54±0.39 21. 40±0.26 44. 32±0.1权利要求
1.一类甲硝唑和取代水杨酸的复合物，其特征是它有如下通式A系列式中R1＝H、NO2、CH3或卤素；R2＝H、NO2、CH3或卤素；R3＝H、NH3或CH3；或B系列式中R4＝H或CH3；R5＝H、CH3或卤素；R6＝-H、CH3、SO3H或卤素。
2. —种权利要求1所述的A系列的甲硝唑和取代水杨酸的复合物的制法，其特征是它由下列步骤组成步骤1.将每lOmmol对甲苯磺酰氯和等物质的量的甲硝唑溶于无水CH2C12中， CH2Cl2的用量为lOOml，加入5ml三乙胺，冰浴搅拌，反应4-5小时后，将反应混合物过滤后，滤液倒入100ml冰水中，分离出有机相，水相加乙酸乙酯萃取，合并有机相。 用饱和碳酸氢钠和水分别洗涤有机相，用无水NaS04干燥有机相，减压蒸去溶剂，得到 淡黄色晶状固体，黄色晶体为甲硝唑的羟基被氯取代的产物，步骤2.将步骤l中得到的淡黄色晶状固体与等物质的量的取代水杨酸溶于N,N-二 甲基甲酰胺中，每毫摩尔的取代水杨酸用N,N-二甲基甲酰胺10ml，加入无水碳酸钾， 每毫摩尔的取代水杨酸用无水碳酸钾0.5克，8(TC搅拌20小时，减压蒸去溶剂，层析得 本发明的A系列甲硝唑和取代水杨酸的复合物。
3. —种权利要求1所述的B系列的甲硝唑和取代水杨酸的复合物的制法，它由下 列步骤组成步骤1.将每lOmmol对甲苯磺酰氯和等物质的量的甲硝唑溶于无水CH2Cl2中， CH2Cl2的用量为100ml，加入5ml三乙胺，冰浴搅拌，反应4-5小时后，将反应混合物 过滤后，滤液倒入100ml冰水中，分离出有机相，水相加乙酸乙酯萃取，合并有机相。 用饱和碳酸氢钠和水分别洗涤有机相，用无水NaS04干燥有机相，减压蒸去溶剂，得到 淡黄色晶状固体，黄色晶体为甲硝唑的羟基被氯取代的产物，步骤2.将步骤l中得到的淡黄色晶状固体与取代水杨酸溶于N，N-二甲基甲酰胺中， 淡黄色晶状固体与取代水杨酸的物质的量之比为2比1，每毫摩尔的取代水杨酸用N，N-二甲基甲酰胺10ml，加入无水碳酸钾，每毫摩尔的取代水杨酸用无水碳酸钾0.5克，110 'C搅拌30小时，减压蒸去溶剂，层析得本发明的A系列甲硝唑和取代水杨酸的复合4勿。
4. 根据权利要求2或3所述制法，其特征是步骤2中所述层析，是采用200-300 目硅胶柱，洗脱液为无水乙酸乙酯。
5. 权利要求1所述的甲硝唑和取代水杨酸的复合物在制备抗幽门螺旋杆菌的药物 中的应用。
全文摘要
一类甲硝唑和取代水杨酸的复合物，它有如下通式A系列，式中R¹＝H、NO₂、CH₃或卤素；R²＝H、NO₂、CH₃或卤素；R³＝H、NH₃或CH₃；B系列，式中R⁴＝H或CH₃；R⁵＝H、CH₃或卤素；R⁶＝H、CH₃、SO₃H或卤素。本发明的甲硝唑和取代水杨酸的复合物对幽门螺旋杆菌尿素酶有明显的抑制作用。本发明公开了其制法。
文档编号A61P31/04GK101560189SQ20091002777
公开日2009年10月21日 申请日期2009年5月20日 优先权日2009年5月20日
发明者吕鹏程, 朱海亮, 毛文君 申请人:南京大学