专利名称：菊花茎叶提取物及其制备方法和用途的制作方法
技术领域：
本发明属于天然抗氧化剂提取技术领域，具体涉及一种从中药材菊花 茎、叶得到提取物的方法及用途。
背景技术：
菊花(Chrysanthemum morifolium Ramat)为菊科植物菊的干燥头状花 序，是我国传统常用中药材，主要功效有散风清热，平肝明目，解毒，降压等，主治风热感冒， 头痛眩晕，目赤肿痛，明目昏花，味甘、苦，性凉。《中华人民共和国药典》2005年版一部载有 贡菊(Gongju)、滁菊(Chuju)、亳菊(Boju)和杭菊(Hangju) 4种主要的药用菊花，并称为中 国的四大药用菊花；如今，杭菊、亳菊、贡菊、滁菊、祁菊、怀菊、济菊、黄菊为我国药用菊花的 八大主流商品。但其茎叶的应用研究较少，文献记载菊叶具有治疗疮、痈疽、头风、目眩的功 效。对菊花茎叶综合利用的研究较少，林小华、邱玉琪采用超临界技术提取菊花茎叶有效成 分(菊花根茎叶有效成份的萃取方法，申请号01132299. 3)；卫强、汪庆健采用乙醇水溶液 提取滁菊茎叶总黄酮类物质，但其停留在实验室水平，而且乙醇水溶液作为提取剂成本较 高，同时未研究滁菊茎叶总黄酮类物质的用途(滁菊茎、叶中总黄酮的提取工艺研究，中兽 医医药杂志.2009. 1)。目前，尚未有工业化制备菊花茎叶提取物的报道。发明内容本发明需要解决的问题是1、提供一种可大量从菊花茎叶中制备提取物 的简单易行的可用于工业化生产的提取方法。2、提供利用上述方法获得菊花茎叶提取物。 3、提供该菊花茎叶提取物作为天然抗氧化剂用于食品、药品和化妆品用途。所述菊花茎叶 为杭菊、亳菊、贡菊、滁菊、祁菊、怀菊、济菊、黄菊等菊花采收后剩余的茎叶，所述菊花茎叶 提取物为菊花茎叶初提物或菊花茎叶总黄酮提取物。本发明的技术方案(1)将菊花茎叶干燥，粉碎，加8-100倍菊花茎叶重量的水性溶剂，提取；(2)过滤或离心去除不溶物得到提取液，干燥，得到菊花茎叶初提物；(3)将菊花茎叶初提物或提取液通过吸附树脂层析，用体积百分比10% -95%的 乙醇水溶液洗脱，洗脱液干燥，得到菊花茎叶总黄酮提取物。步骤(1)所述的水性溶剂是纯水或质量百分比为0. 01% -0. 4%的焦亚硫酸钠溶液。步骤(1)所述的提取是冷浸提取、渗漏提取、索氏提取、热回流提取、微波辅助提 取或超声波辅助提取等提取方式的一种。步骤⑴所述的提取的提取温度为20°c-100°c，分1次-6次进行，每次提取用时 10min-5h，然后合并提取液。步骤(3)所采用的吸附树脂是聚酰胺或各种型号的大孔吸附树脂。步骤(2)、步骤(3)和步骤(4)所述的干燥，为减压干燥或喷雾干燥。菊花茎叶提取物具有很强的抗氧化能力，添加0. 的菊花茎叶初提物，其抑制冷 藏熟肉糜脂质氧化率为93. 5%，添加0. 02%的菊花茎叶总黄酮提取物，其抑制冷藏熟肉糜 脂质氧化率为92. 3%;质量百分浓度为0. 的菊花茎叶初提物溶液清除DPPH自由基的效 率为67. 2%，质量百分浓度为0. 02%的菊花茎叶总黄酮提取物清除DPPH自由基的效率为 89. 26% ； 10mg/mL的菊花茎叶初提物、菊花茎叶总黄酮提取物的总抗氧化能力相当于8. 65和11. 36mmol/LFeS04o菊花茎叶提取物可以作为天然抗氧化剂用于食品、药品和化妆品中。本发明具有以下优点本发明采用水性溶剂进行提取，无须溶剂回收，成本低；提 取方式简单，易于操作，与超临界萃取方式相比，设备低廉；菊花茎叶提取物具有很强的抗 氧化性，可以作为天然抗氧化剂使用；对菊花茎叶进行提取，实现综合利用，有利于增加农 民收入，加快菊花产业化进程。
具体实施例方式实施例1(1)将2Kg干燥菊花茎叶粉碎，用12倍菊花茎叶重量的水微波辅助提取2次，功率 500W，每次lOmin，提取温度60°C，合并提取液；(2)过滤去除不溶物，减压干燥，得到菊花茎叶初提物330g ；(3)取菊花茎叶初提物300g进行大孔树脂开放性层析，用体积百分比10%的乙醇 水溶液洗脱，洗脱液干燥，得到菊花茎叶总黄酮提取物190g。实施例2(1)将2Kg干燥菊花茎叶粉碎，用9倍菊花茎叶重量的水超声波辅助提取2次，功 率1000W，每次25min，提取温度35°C，合并提取液；(2)过滤去除不溶物，减压干燥，得到菊花茎叶初提物370g ；(3)取菊花茎叶初提物300g进行聚酰胺开放性层析，用体积百分比30%的乙醇水 溶液洗脱，洗脱液干燥，得到菊花茎叶总黄酮提取物210g。实施例3(1)将2Kg干燥菊花茎叶粉碎，用9倍菊花茎叶重量的0. 1 %焦亚硫酸钠溶液渗漏 提取2次，每次4h，提取温度50°C，合并提取液；(2)过滤去除不溶物，减压干燥，得到菊花茎叶初提物300g ；(3)取菊花茎叶初提物280g进行大孔树脂开放性层析，用体积百分比50%的乙醇 水溶液洗脱，洗脱液干燥，得到菊花茎叶总黄酮提取物220g。实施例4(1)将2Kg干燥菊花茎叶粉碎，用9倍菊花茎叶重量的冷浸提取3次，每次5h，提 取温度25 °C，合并提取液；(2)过滤去除不溶物，减压干燥，得到菊花茎叶初提物290g ；(3)取菊花茎叶初提物240g进行大孔树脂开放性层析，用体积百分比80%的乙醇 水溶液洗脱，洗脱液干燥，得到菊花茎叶总黄酮提取物190g。实施例5(1)将2Kg干燥菊花茎叶粉碎，用9倍菊花茎叶重量的热回流提取提取2次，每次 3h，提取温度60°C，合并提取液；(2)过滤去除不溶物，减压干燥，得到菊花茎叶初提物320g ；(3)取菊花茎叶初提物300g进行聚酰胺开放性层析，用体积百分比90%的乙醇水 溶液洗脱，洗脱液干燥，得到菊花茎叶总黄酮提取物260g。如上描述了本发明所公开的菊花茎叶提取物的制备方法，但需理解其中包含了本 领域技术人员理解的变化和改变，这些变化和改变也包含权利要求所限定的本发明的范围内。实施例6—、本发明的菊花茎叶提取物的抑制冷藏熟肉糜脂质氧化实验取新鲜瘦猪肉，切成2cm左右的方块，肉中加入2% NaCl、一定量的实例1菊花茎 叶提取物，放入多功能搅拌器中搅拌5min成肉糜，50g/份装入烧杯中，烧杯用聚乙烯膜封 口。90°C水浴至烧杯中心温度达到80°C，维持lOmin。取出用自来水冷却至室温，放入4°C 冰箱贮藏72h后取出，放入多功能搅拌器中粉碎3次，每次10s。取粉碎后的肉样0. 5g，加 入0. 02%的Vc溶液10ml，放入超声洗涤槽中强档超声5min，5000rpm离心lOmin，取上清， 固定Δ λ为70nm，激发狭缝lOnm，发射狭缝lOnm，测定同步荧光光谱。每个样品测定三次， 取均值。按下式计算脂质氧化抑制率抑制率=(Int0-Ints)/(IntO-Intf)X 100%式中=Intci，未加抗氧化剂时熟肉糜4°C贮藏72h后在326nm处的同步荧光强度；Intf，未加抗氧化剂时鲜肉在326nm处的同步荧光强度；Ints，加抗氧化剂时熟肉糜4°C贮藏3天后在326nm处的同步荧光强度。结果表明，添加0. 的实施例1得到的菊花茎叶初提物抑制冷藏熟肉糜脂质氧 化率为93. 5%，添加0. 02%的实施例1得到的菊花茎叶总黄酮提取物抑制冷藏熟肉糜脂质 氧化率为92. 3%，因此，菊花茎叶提取物有很好的抑制冷藏熟肉糜脂质氧化能力，可作为抗 氧化剂用于肉制品中。二、本发明的菊花茎叶提取物清除DPPH自由基实验配制6. 5X 10_5mOl/L的DPPH甲醇溶液避光保存。取ImL实例3菊花茎叶提取物 溶液加入5mLDPPH溶液反应25min后，在517nm处测定吸光A”以相同体积的蒸馏水代替 菊花茎叶提取物溶液作为空白对照。每个试样作3个平行样，取其平均值。清除DPPH自由 基活性的计算公式P = (Ao-Ai+Aj) /A0 X 100%式中，Ai为试样的吸光度，Aj为样品液在517nm下的吸光度，Atl空白的吸光度。结果表明，质量百分浓度为0. 的实施例3得到的菊花茎叶初提物溶液清除 DPPH自由基的效率为67. 2%，质量百分浓度为0. 02%的实施例3得到的菊花茎叶总黄酮提 取物清除DPPH自由基的效率为89. 26% ；这说明菊花茎叶提取物有很强清除DPPH自由基 作用，可以作为抗氧化剂使用。三、本发明的菊花茎叶提取物的总抗氧化能力参照FRAP法(Benzie IFF, Strain JJ. The ferric reducing ability of plasma as a measure of"antioxidantpower，，:the FRAP assay [J]. Anal Biochem，1996，239 :70 76.)，并有所改进。该法原理为在较低pH值环境下，Fe3+-三吡啶三吖嗪(TPTZ)可被抗氧 化物中还原性物质还原为二价铁形式，呈现出明显的蓝色，并于593nm处具有最大光吸收， 根据吸光度的大小计算试样抗氧化活性的强弱。0. Iml实例5菊花茎叶提取物溶液+0. 3ml 水+3ml 预热至 37°C 的 FRAP 工作液(10mmol/LTPTZ、20mmol/LFeCl3、0. 3mmol/L 醋酸钠缓冲 液以1 1 10的比例混合)，摇勻后37°C水浴lOmin，然后立即冰浴1分钟，于593nm测 其吸光值；另以0. 5mmol/L 2. 0mmol/L FeSO4的标准溶液代替菊花茎叶提取物溶液作标 准曲线，得到回归方程y = 0.6869X+0.0715，相关系数R2 = 0.9996。样品的总抗氧化能力以mmol/L FeSO4表示。每份试样重复测定3次。 结果表明，lOmg/mL的BHT、实施例5得到的菊花茎叶初提物、实施例5得到的菊花 茎叶总黄酮提取物的总抗氧化能力相当于12. 77,8. 65、11. 36mmol/LFeS04，说明菊花茎叶 总黄酮提取物抗氧化能力比菊花茎叶初提物的高，这也说明它们具有很强的供质子能力， 可作为抗氧化剂使用。
权利要求
1.一种菊花茎叶提取物，其特征在于为菊花茎叶初提物或菊花茎叶总黄酮提取物。
2.如权利要求1所述的菊花茎叶，其特征在于为杭菊、亳菊、贡菊、滁菊、祁菊、怀菊、 济菊、黄菊等菊花采收后剩余的茎叶。
3.如权利要求1所述的菊花茎叶提取物，其特征在于由下述制备方法得到(1)将菊花茎叶干燥，粉碎，加8-100倍菊花茎叶重量的水性溶剂，提取；(2)过滤或离心去除不溶物得到提取液，干燥，得到菊花茎叶初提物；(3)将菊花茎叶初提物或提取液通过吸附树脂层析，用体积百分比10%-95%的乙醇 水溶液洗脱，洗脱液干燥，得到菊花茎叶总黄酮提取物。
4.根据权利要求3所述的菊花茎叶提取物的制备方法，其特征在于步骤(1)所述的 水性溶剂是纯水或质量百分比为0. 01% -0. 4%的焦亚硫酸钠溶液。
5.根据权利要求3所述的菊花茎叶提取物的制备方法，其特征在于步骤(1)所述的 提取是冷浸提取、渗漏提取、索氏提取、热回流提取、微波辅助提取或超声波辅助提取等提 取方式的一种。
6.根据权利要求3所述的菊花茎叶提取物的制备方法，其特征在于步骤(1)所述的 提取的提取温度为20°C -100°C，分1-6次进行，每次提取用时10min-5h，然后合并提取液。
7.根据权利要求3所述的菊花茎叶提取物的制备方法，其特征在于步骤(3)所采用 的吸附树脂是聚酰胺或各种型号的大孔吸附树脂。
8.根据权利要求3所述的菊花茎叶提取物的制备方法，其特征在于步骤(2)、步骤 (3)和步骤(4)所述的干燥，为减压干燥或喷雾干燥。
9.权利要求1所述的菊花茎叶提取物的应用，其特征在于用作天然抗氧化剂，应用于 食品、化妆品和药品中。
全文摘要
菊花茎叶提取物及其制备方法和用途，属于天然抗氧化剂提取技术领域。本发明涉及菊花茎叶提取物作为天然抗氧化剂用途及其制备方法。菊花茎叶提取物制备方法的步骤是将菊花茎叶粉碎，加水性溶剂提取，过滤或离心取液，提取液干燥得到菊花茎叶初提物，提取液或菊花茎叶初提物经吸附树脂层析，乙醇水溶液洗脱，洗脱液干燥后，得到菊花茎叶总黄酮提取物。本方法具有简便，成本低，适用于工业化生产等特点。菊花茎叶提取物具有显著的抗氧化活性，可作为天然抗氧化剂应用于食品、药物和化妆品中。
文档编号A61P39/06GK101991090SQ20091018471
公开日2011年3月30日 申请日期2009年8月20日 优先权日2009年8月20日
发明者孙艳辉, 龚建国 申请人:滁州学院