一种用于治疗抑郁症的中药组合物的制作方法

专利名称：：一种用于治疗抑郁症的中药组合物的制作方法
技术领域：
：本发明涉及一种中药组合物，特别是涉及一种用于治疗抑郁症的中药组合物。
背景技术：
：抑郁症是一种常见病多发病，主要表现为情绪低沉、精力减退、悲观失望，轻度抑郁症只是自己感到心情低落、委屈、无兴趣、食欲下降和失眠，不愿活动，脑力迟钝，外表大多看不到明显异常。由于这种情绪低沉与一般人在遇到不良心理刺激后出现的短期消沉郁闷表面上没有什么区别，容易让许多人对抑郁症产生一时"想不开或小心眼"的错觉。实际上，只要一个有抑郁情绪持续两周或两周以上，同时伴有下述九项症状中的任何四项，并且抑郁情绪不是由其它疾病引起的，就是典型的抑郁症。九项症状为l.兴趣丧失或无愉快感；2.精力减退或持续疲乏；3.活动减少或动作迟滞；4.过分的自责或内疚；5.联想困难或注意力不能集中；6.反复轻生的想法或行为；7.失眠或早醒；8.体重降低或食欲下降；9.性欲下降。具WHO统计，抑郁症发病率为3-5%，部分地区高达10%以上。另外，许多人不去医院就诊，因此，实际发病率可能更高。据统计自杀者中70%系抑郁症引起，在美国因抑郁自杀列死亡原因第10位。随着社会变革的不断加剧，竞争更加激烈，抑郁症将越来越受人门重视。据1996年在香港召开的"情感疾病会议"预测21世纪将是"抑郁症世纪"。因此，良好的抗抑郁药物将具有广阔的巿场前景。我国抗抑郁药的市场也是巨大的，按保守估计有4-5千万患者，且患病人群近年有加速上升之势，目前临床上该病的治疗主要用氟西汀和氯米帕明等西药，尚无较为理想的治疗该病的中成药。4国外抗抑郁症药发展一般分为1、中枢兴奋药，如希丙胺。2、单胺氧化酶抑制剂，如吗氯贝胺。3、二环类，如吉密利定。4、三环类，如丙咪嗪。5、新三环类，如氯丙咪嗪。6、四环类，如麦普替林。从50年代起，三环类抗抑郁药的应用，取得了良好的功效，但显著的副反应，使其受到限制。近年来随着对抑郁症发病机理的不断了解，研究的重点转向1、选择性5-HT重吸收抑制剂，如氟西汀。2、可逆性单胺氧化酶二型选择抑制剂，如吗氯贝胺。有关中药复方治疗抑郁症的报道较多，如柴胡加龙骨牡蛎汤、消郁神安汤、五花芍草汤、百合地黄汤、甘麦大枣汤、二仙汤、大承气汤、小柴胡汤等。但疗效甚微。而目前临床上使用的西药，多服用周期长，副作用大，如性功能障碍、窦性心律过速、视力模糊等，且价格昂贵，患者负担过重。
发明内容本发明的目的是提供一种具有舒肝健脾、涤痰解郁之功效的用于抑郁症的中医辩证为肝郁脾虛型的患者的中药组合物。本发明进一步提供了其临床应用的中药制剂及其制备方法。本品即可以与西药合用也能单独使用，为抑郁症的治疗提供了一个新的选择。为达到上述目的，本发明的技术方案提供一种用于治疗抑郁症的中药组合物，其原料药的重量份为白芍500-2500份；石菖蒲50-250份；白术:125-625份;当归125-625份；白芥子75-375份;茯苳125-625份;郁金25-125份;远志25-125份。本发明的中药组合物，其原料药的重量份优选为白芍1000-2000份;石菖蒲100-200份;白术:250-500份;当归:250-500份；白芥子150-300份；茯荟250-500份；郁金50-100份；远志50-100份。本发明的中药组合物，其原料药的重量份最优选为白芍1500份；石菖蒲150份；白术375份；当归375份；白芥子225份;茯苓375份；郁金75份；远志75份。其中所述的重量份可以是g、kg等医药领域公知的计量单位。本发明的中药组合物可按传统单方抓取，水煎服用；也可制备成各种中成药剂型，方便临床使用。进一步地，本发明提供一种用于治疗抑郁症的中药制剂，其是由上述的中药组合物和药学上可接受的载体和/或赋形剂制成临床可接受的剂型。所述临床可接受的剂型可为片剂、丸剂、胶囊剂、颗粒剂、冲剂或口服液等。优选颗粒剂。上述中药制剂的制备方法，其中一种为，将石菖蒲、白术、当归、白芥子、茯苓、郁金和远志七味药材加水蒸馏提取挥发油，并得到药液和药渣，所述药渣再加水煎煮后得药液，其与前述药液合并后加入乙醇静置，得醇沉液；将白芍切片后多次加水煎煮，合并药液后离心取上清液；所述上清液过吸附树脂除杂后与上述醇沉液合并后回收乙醇，得药液，最后加入药学上可接受的载体和/或赋形剂，再喷入挥发油，制成临床可接受的剂型。其具体包括以下步骤①按照用量称取原料中药材；②石菖蒲、白术、当归、白芥子、茯苓、郁金和远志七味药材加6-10倍量(优选8倍量)的水，用蒸馏法提取挥发油3-7h(优选5h)，所得挥发油及药液备用；③上述提取过挥发油的药渣再加水4-8倍量(优选6倍量)煎煮0.5-2h(优选lh)，合并药液，滤过，滤液减压浓缩至8(TC相对密度为U2-1.20,冷却，加入95%乙醇使药液含醇量达75%以上，静置后滤过，得醇沉液；④另取白芍切片，加6-10倍量(优选8倍量)的水，煎煮2-4次(优选3次)，每次0.5-l小时，合并药液，滤过，滤液减压浓缩至l:l(每lmL药液中含l克药材)，离心，取上清液；⑤上述上清液过大孔吸附树脂，用蒸馏水洗去杂质后用60%乙醇洗脱，收集洗脱液与上述醇沉液合并，回收乙醇至无醇味，收集药液;⑥上述药液喷雾干燥，加入药学上可接受的载体和/或赋形剂，再喷入挥发油，制成临床可接受的剂型。上述制备方法，其中所述步骤⑤为上清液过ZTC-1大孔吸附树脂，用蒸馏水1500mL洗去杂质，而后用3000mL60。/。乙醇洗脱，洗脱速度为2.4BV(树脂量)/小时，收集洗脱液与上述醇沉液合并，回收乙醇至无醇味，收集药液。祖国传统医学认为郁证是一类因情志不舒，气机郁滞所引起的神志失常疾病。中医学认为郁证的发生，因郁怒、思虑、悲哀，忧愁七情所伤，导致肝失疏泄，脾失运化，脑神失常，脏腑阴阳气血失调而成。郁怒不畅，使肝调达，气失疏滞，以致肝气郁结。故中医认为"郁症未有不伤肝者也......"。若肝郁及脾，致脾失健运，又可蕴湿生痰而成痰郁。若痰郁化热，则可发展为湿郁、食郁、热郁诸证。中医历代医家大多主张"治郁先治气，调气先治肝"。此因肝为风木之脏而贮存血液，内寄相火，性喜疏泄条达，多动多变，以升为顺，是一身气相之枢纽，人身脏腑气血的调和，经脉运行循环，营卫的和谐，表里上下的畅达，均与肝气的疏泄条达有关。中医学还认为"久病必虛"，郁证时日一久必致肝虛。故养肝解郁，健脾化痰，为郁证标本同治之妙法。本发明提供的中药组合物是纯中药制剂，以祖国传统医学为治疗原则，在现代药学基础上进行了中药药材的合理配伍与中药有效成份的分离提纯，提高了药物的治疗效果，本品具有舒肝健脾、涤痰解郁之功效，可用于抑郁症中医辩证为肝郁脾虛型的患者。本品即可以与西药合用也能单独使用。本发明提供的中药制剂的制备方法，特别采用了大孔吸附树脂提取白芍中的有效成份，使其提取更佳充分且去除了杂分子干扰，使本品的药效升高，临床用量可适当减少。具体实施例方式下面结合实施例，对本发明的具体实施方式作进一步详细描述。以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。实施例l:一种用于治疗抑郁症的胶囊剂及其制备方法(1)称取下述重量配比的原料药白芍500g、石菖蒲250g、白术625g、当归125g、白芥子375g、茯苓125g、郁金25g、远志125g。(2)其中石菖蒲、白术、当归、白芥子、茯苓、郁金、远志等七味药材加10倍量的水，用蒸馏法提取挥发油7h，挥发油及药液备用。(3)上述提取过挥发油之后的药渣再加水4倍量煎煮2h,合并药液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.12-1.20(80。C测)，冷却，加入95%乙醇使药液含醇量达75%,静置24h，滤过，得醇沉液。(4)另取白芍切片，力口6倍量的水，煎煮3次，每次0.5小时，合并药液，滤过，滤液减压浓缩至l:l，离心，取上清液。(5)上述上清液过ZTC-1大孔吸附树脂，先用蒸馏水1500mL洗去杂质，而后用3000mL60。/。乙醇洗脱，洗脱速度为2.4BV(树脂量)/小时，收集洗脱液与上述醇沉液合并，回收乙醇至无醇味，收集药液。(6)上述药液喷雾干燥，加入淀粉、糊精适量，混匀，用5。/。PVP溶液制成颗粒，喷入挥发油，装入胶囊，即得。实施例2:—种用于治疗抑郁症的片剂及其制备方法(1)称取的重量配比为白芍1000g、石菖蒲200g、白术500g、当归250g、白芥子300g、茯苓250g、郁金100g、远志50g。(2)其中石菖蒲、白术、当归、白芥子、茯荟、郁金、远志等七味药材加6倍量的水，用蒸馏法提取挥发油4h，挥发油及药液备用。(3)上述药渣再加水8倍量煎煮lh，合并药液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.12-1.20(80。C测)，冷却，加入95%乙醇使药液含醇量达75%，静置24h，滤过，得醇沉液。(4)另取白芍切片，加10倍量的水，煎煮3次，每次1小时，合并药液，滤过，滤液减压浓缩至l:l,离心，取上清液。(5)上述上清液过ZTC-1大孔吸附树脂，先用蒸馏水1500mL洗去杂质，而后用3000mL60。/。乙醇洗脱，洗脱速度为2.4BV(树脂量)/小时，收集洗脱液与上述醇沉液合并，回收乙醇至无醇味，收集药液。(6)上述药液喷雾干燥，加入淀粉、糊精适量，混匀，用5。/。PVP溶液制成颗粒，喷入挥发油，压片，即得。实施例3:—种用于治疗抑郁症的颗粒剂及其制备方法(1)称取的重量配比为白芍1500g、石菖蒲150g、白术375g、当归375g、白芥子225g、茯苓375g、郁金75g、远志75g。(2)其中石菖蒲、白术、当归、白芥子、茯荟、郁金、远志等七味药材加8倍量的水，用蒸馏法提取挥发油5h，挥发油及药液备用。(3)上述药渣再加水6倍量煎煮lh,合并药液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.12-1.20(801:测)，冷却，加入95%乙醇使药液含醇量达75%，静置24h，滤过，得醇沉液。(4)另取白芍切片，力口8倍量的水，煎煮3次，每次0.5小时，合并药液，滤过，滤液减压浓缩至l:l，离心，取上清液。(5)上述上清液过ZTC-1大孔吸附树脂，先用蒸馏水1500mL洗去杂质，而后用3000mL60。/。乙醇洗脱，洗脱速度为2.4BV(树脂量)/小时，收集洗脱液与上述醇沉液合并，回收乙醇至无醇味，收集药液。(6)上述药液喷雾干燥，甜菊苷及糊精乳糖(2:1)适量，混匀，用85%乙醇制成颗粒，喷入挥发油，分装，即得。实施例4:除原料药重量配比不同外，其余均与实施例3相同白芍2500g、石菖蒲50g、白术125g、当归625g、白芥子75g、茯苓625g、郁金125g、远志25g。实施例5:除原料药重量配比不同外，其余均与实施例3相同白芍2000g、石菖蒲100g、白术250g、当归500g、白芥子150g、茯苓500g、郁金50g、远志100g。试验例实施例3的颗粒剂(暂定名为白芍解郁颗粒)的药理毒理学试验一、主要药效学试验1、对小鼠悬尾不动时间的影响试验目的观察白芍解郁颗粒对"行为绝望"抑郁模型的影响。试验方法参照文献方法，选取昆明小鼠50只，随机分成5组，按表l剂量连续给药7天，未次给药后30min时测量，将其尾部2cm处的部分贴在一水平木棍上，使动物成倒挂状态，其头部离台面约5cm,悬挂两侧用板隔开动物视线，观察记录给药组及对照组在6min内的不动时间。结果见表1。表l白芍-牟郁颗粒对小鼠强迫悬尾不动时间的影响<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>注与生理盐水组相比较"PO.Ol。试验结果从表l可知，白芍解郁颗粒给予小鼠后，与氯米帕明一样均可缩短小鼠强迫悬尾不动时间，经统计分析中、高剂量组与生理盐水组相比较具有显著差异(P<0.01),低剂量组悬尾不动时间虽然有所缩短，但与生理盐水比较差异无显著意义(P>0.05)，说明白芍解郁颗粒可以对抗小鼠因强迫悬尾造成的抑郁症状。2、对小鼠强迫游泳不动时间的影响试验目的观察白芍解郁颗粒对"行为绝望"抑郁模型的影响。试验方法参照文献方法，将昆明小鼠50只，随机分成5组，按表2剂量连续给药7天，未次给药30min后，放入水缸(2000mL烧杯，高20cm,直径14cm，水深10cm,置于水浴锅内)中，调节水温23-25°C,每缸一只，置水中观察6min，记录小鼠后4min内累计不动时间。结果见表2。表2白芍解郁颗粒对小鼠强迫游泳不动时间的影响组另'J动物数(只)剂量游泳不动时间(x士s)生理盐水组100.1mL/10g114.3±34.6氯米帕明组1020mg/kg24.1±32.9"白芍解郁低剂量组109.0g/kg70.2±43.5'白芍解郁中剂量组1013.5g/kg68.1±25.3**白芍解郁高剂量组1018.0g/kg64.3士32.广注与生理盐水组相比较*P<0.05,"PO.Ol。试验结果从表2可知，白芍解郁颗粒给予小鼠后，与氯米帕明一样均可缩短小鼠强迫游泳不动时间，经统计分析，低、中、高剂量组与生理盐水组相比较具有显著差异(P<0.05-0.01)，但无明显量效关系，说明白芍解郁颗粒可以对抗小鼠因强迫游泳造成的抑郁症状。113、对小鼠因利血平引起的眼睑下垂度影响试验目的观察白芍解郁颗粒对药物造成的抑郁模型的影响。试验方法参照文献方法，将昆明小鼠60只，随机分成6组，按表3剂量连续给药7d，未次给药30min后，每只小鼠按2.5mg/kg腹腔注射利血平(0.1mL/10g)，观察小鼠眼睑下垂情况，准确记录lh时的眼睑下垂度和体温，观察自发活动、耳尾颜色及腹泻等情况。按Rubin分级标准，判断下垂度。结果见表3。o度正常开目l度眼睑下垂1/42度眼睑下垂1/23度眼睑下垂3/44度眼睑完全闭合表3白芍解郁对利血平引起小鼠抑郁模型的影响(n=10,X±s)组另'J剂量眼睑下垂度(。)体温rc)生理盐水组O.lmL/kg037.0±0.79利血平组2.5mg/kg3.20±0.79AA35.4±1.00AA氯米帕明组20mg/kg1.40±1.30**36.5±0.53**白芍解郁低剂量组9.0g/kg1.90士1.37'36.0±0.98白芍解郁中剂量组13.5g/kg1.80±1.1436.3±0.5r白芍解郁高剂量组18.0g/kg1.70±1.16**36.2±0.67*注与生理盐水组相比较AAp<0.01;与利血平组相比较*P<0.05,**P<0.01。试验结果经实验，小鼠给予利血平(2.5mg/kg)后，出现了明显的上睑下垂、运动不能和体温下降症状，与正常小鼠比较具有极显著差异(P<0.01)，说明给正常小鼠腹腔注射利血平后，可以造成抑郁动物模型。我们用抗抑郁新药白芍解郁和氯米帕明给抑郁模型动物进行治疗，结果模型动物的抑郁症状得到明显改善，眼睑下垂程度和体温下降程度降低。白芍解郁低、中、高剂量组动物的眼睑下垂度与生理盐水组相比较具有较显著差异(PO.05-0.01)，白芍解郁中、高剂量组动物的体温下降与生理盐水组相比较具有显著差异(P<0.05)，说明白芍解郁颗粒可以对抗小鼠因利血平引起的抑郁症状。4、对小鼠因戊巴比妥钠引起的死亡率影响试验目的测试白芍解郁颗粒的抗抑郁作用。试验方法参照文献方法，将昆明小鼠50只，随机分成5组，各组动物按表4剂量给药6d，第7天给药后30min,每只小鼠腹腔注射5mg/mL的戊巴比妥钠0.3mL/10g(即150mg/kg)，观察24h内各组小鼠的死亡率。结果见表4。表4白芍解郁颗粒对戊巴比妥钠引起的小鼠死亡率影响组别动物数(只)剂量死亡数(只)死亡率(％)生理盐水组100.1mL/10g10100氯米帕明组1020mg/kg330白芍解郁低剂量组109.0g/kg5*50白芍解郁中剂量组1013.5g/kg5*50白芍解郁高剂量组1018.0g/kg4*40注与生理盐水组相比较*P<0.05,"PO.Ol。试验结果由表4结果可见，正常小鼠腹腔注射戊巴比妥钠中毒剂量(即150mg/kg)后，死亡率为100%，服用抗抑郁新药白芍解郁和氯米帕明后可降低动物的死亡率，白芍解郁低、中、高剂量组动物的死亡率分别为50%、50%、40%，经统计分析与生理盐水相比较有显著差异(P<0.05)，说明抗抑郁新药白芍解郁具有一定的兴奋作用，能够降低因戊巴比妥钠引起的小鼠死亡率。5、对抑郁大鼠模型的影响试验目的观察白芍解郁颗粒对应激造成的抑郁大鼠模型体重、行为、糖水消耗量及单胺类神经递质的影响。试验方法动物分组及模型的制备参照文献方法，选用Open-Field法评分相近的大鼠48只，随机分为6组，即生理盐水组，模型组，氯米帕明组，白芍解郁低、中、高剂量组，除生理盐水组外，各组共接受21天各种不同的应激，包括电击足底(36V交流电，每隔l分钟刺激l次，每次刺激10秒，共30次)、冰水游泳(4。C,5分钟)、热应激(45'C，5分钟)、摇晃(l速率次/秒，15分钟)、夹尾(l分钟)、禁水(24小时)、禁食(48小时)和昼夜颠倒等刺激，平均每种刺激各2次，按上述次序连续刺激2轮，第一轮刺激结東开始给药，白芍解郁低、中、高剂量组分别给予白芍解郁颗粒lmL/100g(5、10、15g/kg),氯米帕明组给予氯米帕明溶液lmL/100g(20mg/kg),生理盐水组及模型组分别给予等量的生理盐水。(1)对抑郁模型大鼠体重的影响试验方法体重的测量分别在实验的第l、7、14和21天测定动物的体重变化(结果见表5)。表5白芍解郁颗粒对抑郁大鼠体重变化的影响(g,x±s,n-8)组另J第7天第14天第21天生理盐水组18.5±9.738.3±21.950.4±25.9模型组11.6±6.517.0±7.4A20.0±7.3AA氯米帕明组14.0±12.620.6±15.1A#21.6±16.0AA#白芍解郁低剂量组10.8±7.517.0±U.0A#28.4±15.0AA#白芍解郁中剂量13.4±12.720.1±12.7A#16.3±7.7AA#白芍解郁高剂量组12.4±8.618.1±7.7A#20.3±6.1AA#注与生理盐水组比较AP<0.05,△AP<0.01;与模型组比较#P>0.0514试验结果从表5可见，通过21天各种不同方法的应激，与生理盐水组相比较，在第7天动物体重的增加已降低，第14天(PO.05)、21天(PO.01)体重变化具有显著和极显著意义，说明应激可使动物体重的增加发生明显变化。服用白芍解郁颗粒和氯米帕明后，对动物因应激造成的体重增加降低无明显的改善作用。(2)对抑郁模型大鼠行为学的影响试验方法行为学测定分别在实验第7、14和21天测定动物的行为变化。Open-Field法测定行为。本实验所用敞箱为圆柱形，高40ctn，直径80cm,周壁为黑色，底面按扇形分成面积相等的25块。以动物穿越底面块数为水平活动(crossing)得分，动物一般靠边行走，穿越1格为1次，如动物按直径方向行走，一般以每10cm为l次；以直立次数为垂直活动(rearing)得分，动物双足离开底面为垂直活动，无论动物站立多长时间直至动物双足放下为1次活动。每只动物每次仅进行一次测定，每次测定时间为3分钟(结果见表6)。表6白芍解郁颗粒对抑郁大鼠行为的影响(x士s,n-8)组别第7天第14天第21天水平运动(次)生理盐水组105.2±35.565.6±24.058.1±17.5模型组71.0±41.436.9±25.6A24.9±12.4AA氯米帕明组89.3±31.357.3±36.047.9士22.5'白芍解郁低剂量组56.4±28.728.3±27.2A44.0±25.4白芍解郁中剂量组65.4±43.736.4±34.8A48.3±23.0*白芍解郁高剂量组78.8±33.156.0±34.646.3士13.广垂直运动(次)生理盐水组12.5±4.08.4±4.06.8±4.2模型组8.1±4.43.8±2.8A2.0±1.9A氯米帕明组11.8±4.35.0±3.77.9±2.4**白芍解郁低剂量组9.4±6.333±3.4A6.0±3.7白芍解郁中剂量组7.8±4.74.0±3.6A7.3±6.2*白芍解郁高剂量组9.0±4.45.5±3.06.1±4.6*注与生理盐水组比较AP<0.05,△△PO.01;与模型组比较><0.05,"PO.01;动物从第12天开始给药，第14天时动物给药仅3天。试验结果从表6可见，经过21天各种不同方法的应激后，我们通过Open-Field法测定动物行为的水平活动(crossing)得分和垂直活动(rearing)得分，与生理盐水组相比较，在第7天动物两种活动次数已减少，第14天两种活动均P<0.05，第21天水平活动次数PO.Ol、垂直活动次数P〈0.05,说明应激可使动物的活动明显减少，产生抑郁症状。我们用白芍解郁颗粒和氯米帕明对抑郁动物进行治疗，结果在第21时，白芍解郁中剂量和大剂量组能增加抑郁动物的活动次数(P<0.05~P<0.01)，与氯米帕明具有同等的药理作用。(3)对抑郁模型大鼠糖水消耗量的影响试验方法糖水消耗量实验第22天测定糖水消耗量，在进行糖水消耗实验时所有动物均单笼饲养，每只动物加1%蔗糖溶液130mL，同时所有动物进行禁食，计算动物24小时饮用1%蔗糖溶液的量(结果见表7)。表7白芍解郁颗粒对抑郁大鼠糖水消耗量的影响(x土s，ii-8)组另'Jr/。糖水消耗量(mL)生理盐水组51.0±9.9模型组20.9±13.6AA氯米帕明组42.1±7.8"白芍解郁低剂量组39.9±8.6A**白芍解郁中剂量组38.9±12.4*白芍解郁高剂量组34.5±9.4A*注与生理盐水组比较AAP0.01;与模型组比较*P<0.05,"PO.01试验结果从表7可见，通过各种不同方法的应激后，与生理盐水组相比较，模型组动物的糖水消耗量明显降低(PO.Ol)。服用白芍解郁颗粒和氯米帕明后，可明显增加因应激造成的动物糖水消耗量的下降，白芍解郁低、中、高剂量组与模型组比较分别为P<0.01、P<0.05、P<0.05，但无明显的量效关系，氯米帕明组与模型组相比较PO.Ol。(4)对单胺类神经递质的影响试验方法单胺类神经递质的测定第23天测定中枢神经递质含量。动物连续给药12天，于末次给药30-60分钟后，断头处死大鼠，去颅骨，完全暴露脑组织，在枕骨大孔处迅速剪断延髓，取出大脑组织，除去大脑皮层，放于硫酸纸上称重。迅速将脑组织放入装有3mL预冷的酸性正丁醇溶液中，退除纸重，求出脑组织净重。按l:30左右比例补充酸性正丁醇至7mL，制备组织匀浆。将组织匀浆倒入带塞离心管中，振荡5min,在3000r/min下离心10min,取适量的酸性正丁醇上清液按文献方法进行提取和测定，NE测定时的激发波长为290nm，发射波长为374nm,DA测定时的激发波长为326nm，发射波长为381nm，5-HT及5-HTAA测定时的激发波长为360nm，发射波长为500nm,计算出各组动物中枢单胺神经递质的含量(结果见表8)。表8白芍解郁颗粒对抑郁大鼠神经递质含量的影响(ng/g，x±s，n=8)组另'JNEDA5-HT5-HIAA生理盐水组231.2±87.4443.8±62,9312.6±24.0365.5±72.5模型组124.0±44.1AA338.6±66.3AA205.1±34.4AA198.9±85.6AA氯米帕明组195.4±59.7*417.1±101.7#292.9士20.2"358.8士99.5"白芍解郁低剂量组172.8±43.3'402.9±77.3#286.7±66.4**330.2士101.0'白芍解郁中剂量组176.3±46.3*371.6±86.0#294,9士59.8"317.1±57.8*'白芍解郁高剂.量组196.0±65.3'395.1±99.9#279.4±43.8**349.3士66.(T注与生理盐水组比较Ap〈0.05,AAp〈0.01;与模型组比较*P<0.05,PO.01,#P>0.05试验结果经过21天各种不同方法的应激后，我们用荧光光度计法测定动物中枢神经递质的含量，与生理盐水组相比较，结果模型组动物大脑中枢中NE、DA、5-HT、5-HIAA的含量均明显降低(PO.01),说明应激已造成动物中枢神经递质含量的变化，差异具有显著意义。动物服用白芍解郁颗粒和氯米帕明后，可使模型动物中枢中NE的含量明显升高(P<0.05),5-HT、5-HIAA的含量也明显升高(P<0.05~P<0.01),DA的含量有升高趋势，但无显著差异(P>0.05)，白芍解郁颗粒与氯米帕明相比具有同等的药理作用，但无明显的量效关系。结论我们综合应激和分养两种经典动物模型，利用长期不可预见性的中等强度应激，造成分养动物抑郁状态，抑郁动物在行为上表现为在规定时间内的水平活动和垂直活动次数减少，体重增加减轻，糖水消耗量降低。水平活动反映动物的活动度，垂直活动反映动物对新鲜环境的好奇程度，糖水消耗量反映动物的奖赏反应程度。本模型动物表现出的抑郁状态、兴趣丧失、快感缺乏与抑郁症临床诊断中的精神运动改变、兴趣或快感的丧失有一定程度的相似性。同时，通过对动物中枢神经递质含量的测定，发现抑郁动物中枢神经递质NE、5-HT、5-HIAA含量降低，与文献报道相一致，实验发现白芍解郁颗粒能改善抑郁模型动物的消极行为症状，表现为水平活动和垂直活动次数增加、糖水消耗量增加，并且能对抗因应激所造成的抑郁模型大鼠的中枢神经递质NE、DA和5-HT、5-HIAA的含量下降。二、急性毒性试验试验目的测试白芍解郁颗粒的急性毒性。实验方法18取小鼠40只，分笼词养2天，禁食(自由饮水)12h后，每鼠ig给予白芍解郁0.8mL/20g，24h内以同等剂量重复给药3次，对照组给予等体积的生理盐水，饲养观察7天。结果1.动物毒性反应情况给药组小鼠在每次给药后活动相对减少，精神欠佳，饮食减少，l小时后出现稀便，次数增加，3-4小时后恢复。给药组动物在第一次给药后毛发有轻度污染，其它各项指标与对照组相比无明显差异，所有指标在给药24小时后均恢复正常。此后动物在行为活动，精神状态等方面与对照组比较无明显变化。2.灌胃前后体重变化灌胃前后体重无明显变化，详见表9。表9灌胃前后小鼠体重情况(g)给药组对照组观察曰期雌性雄性雌性雄性灌胃前l天20.9±1.121.6士1.021.3±1.221.6±1.2灌胃当天21.7±1.322.0±1.222.2±1.022.4±1.5灌胃第2天22.4±1.422.3±1.623.4±1.222.8±1.5灌胃第3天23.4±1.523.2±1.724.0±1.523.4±1.8灌胃第4天24,0±1.923.6±1.524.8±1.524.1±1.9灌胃第5天25.3±1.724.6±1.626.1±2.024.9±2.0灌胃第6天26.7±2.025.9±2.127.3±2.426.2±2.1灌胃第7天27.7±2.526.5±2.328.2±2.427.2±2.3P〉0.05,n=103.灌胃前后饲料消耗量给药组动物在灌胃当天进食量较对照组减少，其余灌胃前后小鼠每天食量与对照组相比无明显变化，详见表IO。表10灌胃前后平均每-只小鼠饲料消耗量(g)给药组对照组观察曰期雌性雄性雌性雄性灌胃前l天6.86.46.76.5灌胃当天6.06.26.96.7灌胃第2天7.06.27.16.4灌胃第3天6.56.36.86.5灌胃第4天6.36.06.76.2灌胃第5天6.46.37.06.3灌胃第6天6.96.56.66.3灌胃第7天6.86.36.86.44.死亡情况给药后连续观察7天，无一只动物死亡。结论我们用昆明种小鼠进行最大给药量试验，所观察各项指标均正常，未见l只动物死亡。表明白芍解郁颗粒无明显急性毒性作用，本品小鼠口服最大给药量(MTD)为720g/kg，相当于临床拟用量的720倍。三、长期毒性试验试验目的测试白芍解郁颗粒的长期毒性作用。试验方法给药途径口服(灌胃)，每日上午8~11时灌胃给药。每周连续给药6天，周日停药一天。给药剂量高剂量为100g/kg,中剂量为50g/kg，低剂量为25g/kg,组间等级系数为2。对照组给予等体积生理盐水。给药体积1.4mL/100g鼠。预试验时剂量和毒性反应结果小鼠一日口服最大给药量为720g/kg，按体表面积折算为大鼠360g/kg。100g/kg剂量为该剂量的2027.8%(100/360)。药效学试验大鼠有效剂量为5g/kg。该方临床拟用量为1.0g/kg，高剂量组100g/kg为临床拟用量的IOO倍，中剂量组50g/kg为临床拟用量的50倍，低剂量组25g/kg为临床拟用量的25倍。试验周期26周，共180天。给药前观察l周，给药卯天后每组先处死16只，提交3个月的长期毒性试验报告，其余继续给药，180天后每组再处死16只，下剩停药后可逆性观察2周。末次给药后次曰，用乙醚麻醉动物，由腹主动脉采血，进行血象和生化指标检测，分离脏器并计算脏器系数，最后送病理学检查。统计分析分别计算各组的均数和标准差，给药组与对照组进行t检验，并将结果列表表示。观察指标1.一般表现大鼠的进食量、胃肠反应、体重、外观体征和行为活动、粪便性状等。每周称体重一次，并根据体重增长情况调整药量一次。血常规红细胞(RBC)、血小板(PLT)、白细胞(WBC)计数。血红蛋白(HGB)、凝血时间(BT)、出血时间(CT)、白细胞分类(淋巴细胞LYM、嗜中性白细胞GRA、单核细胞MID)。2.肝肾功能参见生化。3.血液生化天门冬氨酸转换酶(AST)、丙氨酸氨基转换酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、尿素氮(BUN)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、血糖(GLU)、总胆红素(T-BIL)、直接胆红素(D-BIL)、肌酐(GRE)、总胆固醇(T-CHO)、甘油三酯(TG)。4.系统尸解和病理组织学检查分别于给药3个月和6个月后，每组处死16只大鼠，做尸解和组织学检查。余下的做可逆性观察14天。脏器称重和脏器系数心、肝、脾、肺、肾、脑、肾上腺、甲状腺、胸腺、睾丸、卵巢。组织学检查心、肝、脾、肺、肾、脑、肾上腺、甲状腺、胸腺、睾丸、卵巢、胃、小肠。停药2周观察恢复期变化，做相关检查。结果一般表现整个给药过程中，各给药组和对照组大鼠在体征外观、行为活动及饮食等方面无明显异常。给药高、中剂量组自灌胃后第三天起活动稍少，粪便变稀软，毛发和尾部有轻度污染。给药第三周后，给药组动物的体重增长比对照组减慢，但无统计学意义，以后并一直维持在这一水平。给药第二周时动物进食量随着给药浓度增加而降低，以后差别逐渐减小，但仍维持在一定水平(见表11、12)。血常规检查:用AC-卯O全自动血球仪对各组动物的血常规进行检查，结果高剂量组动物的血小板和白细胞计数与生理盐水组相比较PO.05;中剂量组动物的血小板计数与生理盐水组相比较P〈0.01;但这二指标仍属于正常范围。其余指标各组间差异无统计学意义(见表13、14)。说明白芍解郁颗粒对大鼠血象无明显影响。血液生化学检查用梅里埃-150型全自动生化分析仪对各组动物的血液生化指标进行检查，结果各组间生化数值无统计学差异性(见表15、16)。提示所用剂量的白芍解郁颗粒长期给予大鼠，对动物的肝肾功能无明显影响。血糖和血脂检查用梅里埃-150型全自动生化分析仪对各组动物的血糖和血脂检查，结果给药组的血糖值与对照组相比有显著性意义(P<0.05),但所有血糖值均在正常范围内。其余各组间数值无统计学差异(见表16)。脏器系数采血致死后大鼠进行解剖，肉眼观察后，取主要脏器称湿重，计算脏器系数(脏器重量/100g体重)。由表17、18可见，所测脏器系数给药组与对照组间差异无统计学意义。组织学检查对每组每只动物的各脏器组织进行病理观察，重点观察了各脏器组织是否有充血、变性、坏死、炎症等病理变化。结果显示对照组中有4只鼠肝脏有轻度水肿变性，2只鼠肺脏支气管壁有小灶性淋巴细胞浸润；低剂量组中有3只鼠肝脏有轻度水肿变性，l只鼠肝脏有小灶性坏死及轻度炎症，1只鼠肺脏支气管壁有小灶性淋巴细胞浸润；中剂量组有2只鼠肝脏轻度充血，l只肺脏轻度充血，2只鼠肺脏支气管壁有小灶性淋巴细胞浸润；高剂量组中有1只鼠肝脏有小灶性坏死及轻度炎症，l只鼠肝脏轻度充血，l只鼠肝脏轻度水肿变性，1只鼠肾脏小灶性出血。其余动物脏器组织未见明显病理变化。综合观察结果，白芍解郁颗粒给予大鼠三个月后动物脏器组织未见明显病理变化；在各剂量组之间病理变化无明显差异；提示白芍解郁颗粒对实验动物无明显药物所致毒性病理作用。结论白芍解郁颗粒高剂量为100g/kg,相当于临床拟用量的ioo倍。大鼠连续服药13周，在第二周时食量随着给药浓度增加而降低，以后差别逐渐减小，但仍维持在一定水平，体重变化无明显差异。给药组与对照组比较血常规，血液生化指标，肝肾功能无明显变化。组织学检查无明显病变，无明显中毒靶器官。_表ll大鼠休重变化(x士s)_时间_体重变化值(g)_(周)对照组低剂量中剂量高剂量分组后给药前给药后2144.2±5.6144.1±7.3176.6±9.7165.2±8.2197.4±13.0177.3±9.7145.5±5.3144.5±4.7175.3±12.0164.2±6.4201.5±18.8181.4±6.6146.3±7.7141.7±7.2176.3±15.6165.0±9.4199.5±23.5179.8±10.8146.1±5.9143.0±4.9175.2士13.:161.2±5.3196.8±14.9匿2±7.62c225.0±19.6221.5±22.7221.3±22.7225.5±22.3$191.0±9.1188.9±7.8188.0±10.0189.8±10.23d255.8±24.5245.6±30.1251.9±26.6251.6±25.9$203.2±11.4203.0±10.1204.9±12.4203.3±10,9273.9±25.1267.3±31.3269.8±26.9269.2±25.0210.7±9.4206.3±12.1209.0±16.1209.2±11.0305.6±24.8286.8±33.8297.3±26.2291.6±25.5222.0±12.0219.4±14.3218.8±14.6217.8±12.7321.5±27.0302.6±37.2310.0±28.1306.2±25.7228.5±11.9225.8±14.4222.0±16.3224.4±12.0325.8±20.1310.7±38.5330.2±28.7313.1±25.0230.9±11.6226.7±13.7227.9±17,3229.9±12.4347.9±23.5335.9±37.6348.4±27.2334.5±25.9236.8±12.1233.4±14.7236.4±19.1236.3±15.0362.8±20.9346.9±36.3357.6±28.7348.9±28.5240.3±13.6237.6±18.9236.5±20.6237.8±14,7赠374.5±21.1364.1±37.6367.5±29.7358.2±33.1248.6±13.9245.4±18.3240.8±21.1246.3±15.1378.5±23.4366.9±36.3371.6±21.2364.9±24.0$251.7±13.5250.6±19.6248.8±21.6248.0±13.912^381.9±22.4377.3±39.6383.2±30.1367.0±31.4248.8±14.1255.7±20.0249.5±21.6247.7±15.0384.6±21.1376.3±44.5386.9±29.4370.3±39.5250.9±15.4257.3±22.7251.5±21.8256.9±15.6P〉0.05;n=22~23;表12大鼠24h进食量(X±S)时间食量(g/每只24h)(周)对照组_低剂量_中剂量_高剂量给药前320.318.419.019.4$14.214.515.013.5给药后Id18.518.418.717.4$17.418.219.318.427.623.920.422.1$17.815.013.611.43d26.521.720.922.1$21.918.218.916.726.126.025323.819.720.519.919.729.527.029.724.8$21.821.520.819.134.529.030.028.6$22.523.522.022.232.528.328.627.0$21.024.620.922.037.733.930.628.3$23.525.323.122.034.232.229.327.523.324.122.621.831.229.227.827.720.323.422.222.331.931.228.826.320.424.120.520.612^30.328.927.925.722.722.618.818.630.328.628.830.321.522.020.523.8n=22~23表13大鼠血常规部分指标(X±S)红细胞血红蛋白血小板凝血时间出血时间分组(RBC)(HGB)(PLT)(BT)(CT)xl012/Lg/Lxl09/L秒秒给药后13周对照组7.56±1.72126.1±25.6840.4±272.239.4±10.836.9±10.07綠1.44130.1±23.1567.1±311.840.0±7.638.1±8.0低剂量6.22±1.04125.0±12.9753.6±303.433.8±8.331.3±7.46.81±1.70138.0±24.7764.8±411,840.6±5.038.8±5.2中剂量7.36±1.49135.8±24.9823.6±286.734.4±8.633.1±8.07.48±1.28138.0±18.1929.8±116.5**37.5±9.335.6±10.2高剂量6.23±0.70137.6±30.9552.4±277.6*43.8±6.440.6±5.06.25±1.37135.5±31.5695.8±283.443.8±3.639.4±5.0注:与对照组比较*P<0.05**P<0.01;n=8表14大鼠白细胞及分类(X±S)分类(％)分组白细胞给药后对照组低剂量中剂量高剂量xl09/L淋巴细胞(LYM)嗜中性白细胞(GRA)单核细胞(MID)11.4±5.183.4±13.013.6±12.43.0±2.47,6±4.779.8±19.618.4±19.31.9±1.67.6±3.880.4±26.519.3±25.81.1±2.19.9±3.681.5±11.516.5±10,52.0±2.09.3±2.880.4±16.018.5±15.5l.l士l.O9.8±3.576.9±14.321.6±13.61.5±1.426<table>tableseeoriginaldocumentpage27</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage28</column></row><table>$0.59±0.08低剂量c0.44±0.06$0.61±0.06中剂量(0.39±0.04$0.63±0.04高剂量c0.43±0.05$0.61±0.060.023±0.0030.024±0.0080.078±0.0170.053±0.0120.013±0.0040.022±0.0060.056±0.0160.96±0.110.026±0.0050.026±0.0090.091±0.0290.058±0.0160.012±0.0020.018±0.0060.053±0.0150.87±0.100.025±0.0030.019±0.0070.095±0.0260.049±0.0140.012±0.0040.016±0.0030.056±0.0100.94±0.110.025±0.0040.022±0.0070.082±0.0260.046±0.009P>0.05;n=8从以上试验例可以得出，本发明提供的中药组合物及中药制剂可以有效地缓解抑郁症状，并且临床应用安全。其中优选的白芍解郁颗粒的人体推荐用量为每次10g,每日两次，疗程为30天。以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本
技术领域：
的普通技术人员来说，在不脱离本发明技术原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围i。权利要求1、一种用于治疗抑郁症的中药组合物，其特征在于，其原料药的重量份为白芍500-2500份；石菖蒲50-250份；白术125-625份；当归125-625份；白芥子75-375份；茯苓125-625份；郁金25-125份；远志25-125份。2、如权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，其原料药的重量份为白芍:1000-2000份;石菖蒲100-200份;白术250-500份；当归:250-500份;白芥子:150-300份;茯荅250-500份；郁金50-100份；远志50-100份。3、如权利要求2所述的中药组合物，其特征在于，其原料药的重量份为白芍1500份；石菖蒲150份；白术375份；当归375份；白芥子225份；茯茶375份；郁金75份；远志75份。4、一种用于治疗抑郁症的中药制剂，其特征在于，其是由权利要求1-3任一项所述的中药组合物和药学上可接受的载体和/或赋形剂制成临床可接受的剂型。5、如权利要求4所述的中药制剂，其特征在于，所述临床可接受的剂型为片剂、丸剂、胶囊剂、颗粒剂、冲剂或口服液。6、权利要求4所述的中药制剂的制备方法，其特征在于，将石菖蒲、白术、当归、白芥子、茯苓、郁金和远志七味药材加水蒸馏提取挥发油，并得到药液和药渣，所述药渣再加水煎煮后得药液，其与前述药液合并后加入乙醇静置，得醇沉液；将白芍加水煎煮，合并药液后离心取上清液；所述上清液过吸附树脂除杂后与上述醇沉液合并后回收乙醇，得药液，最后加入药学上可接受的载体和/或赋形剂，再喷入挥发油，制成临床可接受的剂型。7、如权利要求6所述的制备方法，其特征在于，包括以下步骤①按照用量称取原料中药材；②石菖蒲、白术、当归、白芥子、茯荟、郁金和远志七味药材加6-10倍量的水，用蒸馏法提取挥发油3-7h,所得挥发油及药液备用；③上述提取过挥发油的药渣再加水4-8倍量煎煮0，5-2h,合并药液，滤过，滤液减压浓缩至8(TC相对密度为1.12-1.20,冷却，加入95%乙醇使药液含醇量达75%以上，静置后滤过，得醇沉液；④另取白芍切片，加6-10倍量的水，煎煮2-4次，每次0.5-l小时，合并药液，滤过，滤液减压浓缩至l:l，离心，取上清液；⑤上述上清液过大孔吸附树脂，用蒸馏水洗去杂质后用60%乙醇洗脱，收集洗脱液与上述醇沉液合并，回收乙醇至无醇味，收集药液；⑥上述药液喷雾干燥，加入药学上可接受的载体和/或赋形剂，再喷入挥发油，制成临床可接受的剂型。8、如权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述步骤⑤为上清液过ZTC-1大孔吸附树脂，用蒸馏水1500mL洗去杂质，而后用3000mL60%乙醇洗脱，洗脱速度为2.4BV/小时，收集洗脱液与上述醇沉液合并，回收乙醇至无醇味，收集药液。9、权利要求l-3任一项所述的中药组合物在制备治疗抑郁症的药物上的应用。全文摘要本发明公开了一种用于治疗抑郁症的中药组合物，其原料药和重量份为白芍500-2500份；石菖蒲50-250份；白术125-625份；当归125-625份；白芥子75-375份；茯苓125-625份；郁金25-125份；远志25-125份。本发明具有舒肝健脾、涤痰解郁之功效，可用于抑郁症中医辩证为肝郁脾虚型的患者。本品既可以与西药合用也能单独使用。文档编号A61K36/9066GK101670075SQ200910236328公开日2010年3月17日申请日期2009年10月16日优先权日2009年10月16日发明者鹏孙,鑫屈,李士桥,汪洪湖,珺王申请人:蚌埠丰原涂山制药有限公司