专利名称：一种灯盏花素针剂所用的高纯度灯盏花素原料的制备方法
技术领域：
本发明涉及一种灯盏花素的精致方法，具体地说，涉及一种由从灯盏花素中提取的灯盏乙素提取物，以及该提取物的制备方法，属于中药制剂领域。
背景技术：
灯盏花素是从菊科短葶飞蓬植物灯盏花，又名灯盏细辛的干燥全草中提取的总黄酮类物质，其主要成分为黄酮苷类化合物灯盏甲素、灯盏乙素等，其中灯盏乙素是其主要活性成分。灯盏乙素(又名灯盏花乙素，野黄芩苷)化学名为4'、5、6_三羟基黄酮-7-0-葡萄糖醛酸甙，在水中不溶，在甲醇、乙醇、丙酮的溶解度也很小，酸性条件下难溶于水，能和氢氧化钠、碳酸盐、磷酸盐等无机碱或柠檬酸盐、葡甲胺等有机碱形成盐类在碱性环境下溶于水。缺血性脑病，如脑梗塞患者，由于供应大脑或脑干的血管突然阻塞，血流中断，造成脑组织缺血、缺氧，使脑组织失去功能，故病人在数分钟或数小时内出现一侧瘫痪、或失语，严重者可出现昏迷甚至死亡。灯盏花素具有扩张脑血管的作用。能降低血管阻力，增加脑血流量，改善微循环， 并有对抗血小板聚集作用。适用于治疗缺血性脑血管疾病，如脑梗塞、脑出血后遗症所致的偏瘫；冠心病、心绞痛、心肌梗塞及高粘血症等；和其它缺血性及伴有微循环障碍性疾病。灯盏花素粗品从检查项下用分光光度法的测定可以看出，灯盏花乙素的重量百分含量仅在90%左右。主要由于灯盏花素粗品的提取步骤简单，导致有关物质较高，所以在临床上出现使用后，偶见全身发痒、胸闷、乏力、皮疹、心悸等现象。经分析是由于纯度不高引起的。因此，有必要寻找一种精致效果更好，纯度和安全性更高的灯盏花素制备方法。
发明内容
本发明的目的在于提供一种灯盏花素针剂所用的高纯度灯盏花素原料的制备方法。本发明高纯度灯盏花素是以灯盏花素粗品为原料制备而成的。上述的灯盏花素粗品中灯盏花乙素的含量在90%左右。本发明所述的高纯度灯盏花素的制备方法，经过高效液相色谱法检测干燥品含量可达98%以上，使灯盏花素粗品的纯度有所提高，相关物质含量降低，灯盏花素注射剂如灯盏花素氯化钠或灯盏花素葡萄糖的安全性也有所提高，疗效增强。本发明所述的高纯度灯盏花素的制备方法，其中PH调节剂优选为Na2HPO4,PH范围优选为6 7。本发明所述高纯度灯盏花素的制备方法，其中使用的超滤膜优选为截留分子量为 3万的超滤膜。本发明所述的高纯度灯盏花素的制备方法，其特征在于，所述的制备方法可制备成小容量注射液、冻干粉针剂、大容量注射剂等不同剂型，如制备灯盏花素氯化钠注射液或灯盏花素葡萄糖注射液。本发明可通过以下方式得以实现取灯盏花素粗品用适量的水充分溶解，溶解调PH值4 8，使其全部溶解，然后加入乙醇溶液，使乙醇浓度达到50 % 70%，静置过夜后析出沉淀过滤，再用乙醇溶液溶解， 使乙醇浓度达到20% 40%，调PH值1 4，充分搅拌析出沉淀，静置后沉淀析出，过滤，沉淀物用纯化水流洗到中性，然后用截留分子量1 3万的超滤膜超滤，将超滤液减压浓缩， 真空干燥，得到高纯度灯盏花素。更具体的方法可通过以下方式得以实现取灯盏花素粗品用适量的水充分溶解，溶解调PH值5 7，使其全部溶解，然后加入乙醇溶液，使乙醇浓度达到55 % 65%，静置过夜后析出沉淀过滤，再用乙醇溶液溶解， 使乙醇的浓度达到25% 35%，调PH值1 3，充分搅拌析出沉淀，静置后沉淀析出，过滤， 沉淀物用纯化水流洗到中性，然后用截留分子量1 3万的超滤膜超滤，将超滤液减压浓缩，真空干燥，得到高纯度灯盏花素。由本发明制备得到的高纯度灯盏花素原料可与葡萄糖或氯化钠配伍，制得灯盏花素葡萄糖注射液和灯盏花素氯化钠注射液。规格均为anl、10ml，每ml均含灯盏花素2. 5mg、 4mg。临床应用肌肉注射，一次5mg(灯盏花素)，一日2次；静脉滴注，一次10 20mg(灯盏花素)，一日1次。灯盏花素葡萄糖注射液和灯盏花素氯化钠注射液均有活血化瘀、通络止痛之功效。用于中风后遗症，冠心病，心绞痛。
具体实施例方式实施例1取灯盏花素粗品用适量的水充分溶解，溶解调PH值4，使其全部溶解，然后加入乙醇溶液，使乙醇浓度达到50 %，静置过夜后析出沉淀过滤，再用乙醇溶液溶解，使乙醇的浓度达到20 %，调PH值1，充分搅拌析出沉淀，静置后沉淀析出，过滤，沉淀物用纯化水流洗到中性，然后用截留分子量1万的超滤膜超滤，将超滤液减压浓缩，真空干燥，得到高纯度灯盏花素。高纯度灯盏花素原料与葡萄糖或氯化钠配伍，制得灯盏花素葡萄糖注射液和灯盏花素氯化钠注射液。规格均为aiil、10ml，每ml均含灯盏花素2. 5mg,4mgo临床应用肌肉注射，一次5mg(灯盏花素)，一日2次；静脉滴注，一次10 20mg(灯盏花素)，一日1次。实施例2取灯盏花素粗品用适量的水充分溶解，溶解调PH值5，使其全部溶解，然后加入乙醇溶液，使乙醇浓度达到阳%，静置过夜后析出沉淀过滤，再用乙醇溶液溶解，使乙醇的浓度达到25%，调PH值1 3，充分搅拌析出沉淀，静置后沉淀析出，过滤，沉淀物用纯化水流洗到中性，然后用截留分子量2万的超滤膜超滤，将超滤液减压浓缩，真空干燥，得到高纯度灯盏花素。
高纯度灯盏花素原料与葡萄糖或氯化钠配伍，制得灯盏花素葡萄糖注射液和灯盏花素氯化钠注射液。规格均为aiil、10ml，每ml均含灯盏花素2. 5mg,4mgo临床应用肌肉注射，一次5mg(灯盏花素)，一日2次；静脉滴注，一次10 20mg(灯盏花素)，一日1次。实施例3取灯盏花素粗品用适量的水充分溶解，溶解调PH值6，使其全部溶解，然后加入乙醇溶液，使乙醇浓度达到60 %，静置过夜后析出沉淀过滤，再用乙醇溶液溶解，使乙醇的浓度达到30%，调PH值2，充分搅拌析出沉淀，静置后沉淀析出，过滤，沉淀物用纯化水流洗到中性，然后用截留分子量3万的超滤膜超滤，将超滤液减压浓缩，真空干燥，得到高纯度灯盏花素。高纯度灯盏花素原料与葡萄糖或氯化钠配伍，制得灯盏花素葡萄糖注射液和灯盏花素氯化钠注射液。规格均为aiil、10ml，每ml均含灯盏花素2. 5mg,4mgo临床应用肌肉注射，一次5mg(灯盏花素)，一日2次；静脉滴注，一次10 20mg(灯盏花素)，一日1次。实施例4取4盏花素粗品用适量的水充分溶解，溶解调PH值7，使其全部溶解，然后加入乙醇溶液，使乙醇浓度达到65%，静置过夜后析出沉淀过滤，再用乙醇溶液溶解，使乙醇的浓度达到35%，调PH值3，充分搅拌析出沉淀，静置后沉淀析出，过滤，沉淀物用纯化水流洗到中性，然后用截留分子量3万的超滤膜超滤，将超滤液减压浓缩，真空干燥，得到高纯度灯盏花素。高纯度灯盏花素原料与葡萄糖或氯化钠配伍，制得灯盏花素葡萄糖注射液和灯盏花素氯化钠注射液。规格均为aiil、10ml，每ml均含灯盏花素2. 5mg,4mgo临床应用肌肉注射，一次5mg(灯盏花素)，一日2次；静脉滴注，一次10 20mg(灯盏花素)，一日1次。实施例5取灯盏花素粗品用适量的水充分溶解，溶解调PH值8，使其全部溶解，然后加入乙醇溶液，使乙醇浓度达到70 %，静置过夜后析出沉淀过滤，再用乙醇溶液溶解，使乙醇的浓度达到40%，调PH值4，充分搅拌析出沉淀，静置后沉淀析出，过滤，沉淀物用纯化水流洗到中性，然后用截留分子量3万的超滤膜超滤，将超滤液减压浓缩，真空干燥，得到高纯度灯盏花素。高纯度灯盏花素原料与葡萄糖或氯化钠配伍，制得灯盏花素葡萄糖注射液和灯盏花素氯化钠注射液。规格均为aiil、10ml，每ml均含灯盏花素2. 5mg,4mgo临床应用肌肉注射，一次5mg(灯盏花素)，一日2次；静脉滴注，一次10 20mg(灯盏花素)，一日1次。实验例1本实验例为本发明最优选制备方法所得的高纯度灯盏花素原料性状、热原、过敏反应及降压物质项目的测定。性状本品为淡黄色至黄色粉末，有一定吸湿性；无臭，无味或味微咸。热原取本品，按IOOmg加碳酸氢钠溶液2. 3ml的比例加入碳酸氢钠无热原溶液，在50°C水浴振摇使溶解，再加氯化钠注射液制成每Iml含2. 5mg的溶液，依法(附录XIII A)检查，剂量按家兔体重每Ikg注射lml，应符合规定(供注射用)。过敏反应取本品，按IOOmg加碳酸氢钠溶液2. 3ml的比例加入碳酸氢钠无菌溶液，在50°C水浴振摇使溶解，再加氯化钠注射液制成每Iml含3mg的溶液，依法(附录XIII G)检查，符合规定(供注射用)。降压物质取本品，按IOOmgJn 碳酸氢钠溶液2. 3ml的比例加入碳酸氢钠无菌溶液，在50°C水浴振摇使溶解，再加氯化钠注射液制成每Iml含IOmg的溶液，依法(附录XIII F)检查，剂量按每Ikg注射O.aiil，符合规定(供注射用)。以上检测证明该高纯度灯盏花素原料能够满足注射剂标准。实验例2本实验例为本发明最优选制备方法所得的高纯度灯盏花素原料异常毒性、溶血与凝聚项目的测定。异常毒性取本品，按IOOmgJn 碳酸氢钠溶液2. 3ml的比例加入碳酸氢钠无菌溶液，在50°C水浴振摇使溶解，再加氯化钠注射液制成每Iml含12mg的溶液，依法(附录XIII E)检查，按静脉注射法给药，符合规定(供注射用)。溶血与凝聚2%红细胞混悬液的制备取家兔心脏血，置有玻璃珠的容器内，振摇数分钟，出去纤维蛋白原使成脱纤血。加入0.9%氯化钠溶液约10倍量，摇勻，每分钟 1000 1500转离心15分钟，倾去上清液，沉淀的红细胞再用0. 9%氯化钠溶液按上述方法洗涤3 4次，至上清液不显红色，将所得红细胞用0. 9%氯化钠溶液制成2%的混悬液。溶液的制备取本品，按每25mg加10%精氨酸溶液0. Iml溶解，加氯化钠注射液稀释制成每Iml含Img的溶液。试验方法取洁净试管5支，1、2、5号管中各加供试品溶液2. 5ml，第3管加0. 9% 氯化钠溶液2. 5ml作为阴性对照管，第4管加蒸馏水2. 5ml作为阳性对照管，然后1 4号管分别加2%红细胞混悬液2. 5ml，第5管加0. 9%氯化钠溶液2. 5ml作为供试品对照，摇勻，立即置恒温箱内，保持37°C 士0. 5°C，在3小时内没有溶血现象和凝聚现象。表 权利要求
1.一种灯盏花素针剂所用的高纯度灯盏花素原料的制备方法，其特征在于取灯盏花素粗品用适量的水充分溶解，溶解调PH值4 8，使其全部溶解，然后加入乙醇溶液，使乙醇浓度达到50% 70%，静置过夜后析出沉淀过滤，再用乙醇溶液溶解，使乙醇浓度达到20 % 40 %，调PH值1 4，充分搅拌析出沉淀，静置后沉淀析出，过滤，沉淀物用纯化水流洗到中性，然后用截留分子量1 3万的超滤膜超滤，将超滤液减压浓缩，真空干燥，得到高纯度灯盏花素。
2.一种灯盏花素针剂所用的高纯度灯盏花素原料的制备，其特征在于其方法是取灯盏花素粗品用适量的水充分溶解，溶解调PH值5 7，使其全部溶解，然后加入乙醇溶液，使乙醇浓度达到55% 65%，静置过夜后析出沉淀过滤，再用乙醇溶液溶解，使乙醇的浓度达到25% 35%，调PH值1 3，充分搅拌析出沉淀，静置后沉淀析出，过滤，沉淀物用纯化水流洗到中性，然后用截留分子量1 3万的超滤膜超滤，将超滤液减压浓缩，真空干燥，得到高纯度灯盏花素。
3.根据权利1 2所述高纯度灯盏花素的制备方法，经过高效液相色谱法检测干燥品含量可达98%以上，可用于灯盏花素注射剂的制备。
4.根据权利1 2所述高纯度灯盏花素的制备方法，其中PH调节剂优选为Na2HPO4,PH 范围优选为6 7。
5.根据权利1 2所述高纯度灯盏花素的制备方法，其中使用的超滤膜优选为截留分子量为3万的超滤膜。
6.根据权利1 2任意一种所述的高纯度灯盏花素的制备方法，其特征在于，所述的制备方法可制备成小容量注射液、冻干粉针剂、大容量注射剂等不同剂型，如制备灯盏花素氯化钠注射液或灯盏花素葡萄糖注射液。
全文摘要
本发明提供了一种灯盏花素针剂所用的高纯度灯盏花素原料的制备方法，其制备过程包括将灯盏花素粗品经过溶解、醇沉、酸沉、超滤等步骤使得到高纯度灯盏花素原料。该高纯度灯盏花素原料经高效液相色谱法检测纯度可达到98％以上，可用于制备大容量注射剂如灯盏花素氯化钠注射液或灯盏花素葡萄糖注射液。
文档编号A61P9/10GK102188440SQ201010125000
公开日2011年9月21日 申请日期2010年3月16日 优先权日2010年3月16日
发明者时敬文 申请人:万生联合制药有限公司