专利名称：北豆根有效成分的判定方法
技术领域：
本发明涉及一种中药原料中有效成分的测定方法，具体地说，是一种北豆根有效 成分的判定方法。
背景技术：
北豆根为防己科植物蝙蝠葛(Menispermum dauricum DC.)的干燥根茎。性寒，味 苦，具有清热解毒，祛风止痛的功效，用于咽喉肿痛、肠炎痢疾、风湿痹痛等症状。北豆根主 要化学成分为生物碱类，包括北豆根碱、去甲北豆根碱、异去甲北豆根碱等。现在药材市场 上流通的北豆根伪品极多，例如华东木蓝、二色胡枝子、百两金、陕甘木蓝等，为保证用药 安全、有效，保证成方制剂的稳定、可控，需要对对北豆根进行初步鉴别。现有技术中多采用薄层色谱法对北豆根进行初步鉴别，样品处理常规方法为加 入有机溶剂后再加少量碱，加热回流、过滤、将滤液蒸干，再用一定量溶剂溶解后，作为样品 溶液。这种薄层鉴别北豆根样品的典型处理方法为首先，取样品粗粉2g，加氨试液1. 5ml 及苯15ml，摇勻，浸泡过夜，用棉花滤过；然后，滤液用0. 5%重量浓度的硫酸溶液16ml分4 次提取，合并酸液，用浓氨水碱化，再以氯仿20ml分4次提取。合并氯仿液，加无水硫酸钠 少许，放置1小时后，滤过，蒸除氯仿至体积约0. 8ml，作为供试品溶液。另有一种05版药典样品的处理方法，其步骤为取样品0. 5g，加乙酸乙酯15ml及 浓氨0. 5ml，加热回流0. 5小时，滤过，滤液蒸干，残渣加乙酸乙酯Iml溶解作为供试品溶液。上述两种现有的处理方式，其操作工序繁琐，不仅耗费时间，浪费资源，而且大量 有机溶剂的挥发会造成空气污染、危害人体身心健康。
发明内容
本发明要解决的技术问题，是提供一种北豆根有效成分的判定方法，克服了常规 方法存在的不足，具有操作简单，易于控制，检测快速，结果精确度高的特点。为解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案是一种北豆根有效成分的判定方法，按照如下步骤顺序进行a.样品制备取北豆根药材粉末，加入乙酸乙酯，混勻，然后进行超声处理，所得 溶液直接作为样品溶液；b.对照品样品制备取已知合格的北豆根药材，按上述步骤a中所述样品处理方 法进行处理；c.点样将样品溶液和对照药材样品溶液点于同一硅胶G薄层板上；d.展开将点了样的硅胶G薄层板放在盛有展开剂的展开槽中进行展开；e.检视喷碘化铋钾试液后，日光下检视，在供试品色谱中，与对照药材色谱相应 位置上，显现相同的四个橘红色斑点。作为本发明的优化，所述展开剂为三氯甲烷、甲醇和浓氨试液的混合液，其中，三 氯甲烷、甲醇、浓氨试液的体积比为9 1 1。
本方法检视的是生物碱类成分，加入浓氨试液是为了保证所检成分全部以游离形 式存在，保证展开结果的稳定；以三氯甲烷、甲醇按上述的体积比与液氨混合目的在于调和 展开剂的极性，保证展开结果最佳。作为本发明的另一种或进一步优化，在步骤a中所取样品的质量与加入乙酸乙酯 的体积之比为Ig 0. 5 4ml，超声时间5 30min。步骤a中乙酸乙酯的相对体积少至一定程度时加入的乙酸乙酯就会无法完全淹 没样品，这样就会导致提取不完全，而相对体积太大，所检测成分的浓度太低可能会导致检 测不出来而造成误判，因此给定了有效的比值范围；超声时间太长对所检成分会破坏，而且 太长也不符合本发明快速判定的初衷，实验证明控制在30分钟内是稳定的，而超声时间太 短会导致提取不完全，影响判定结果的准确性，因此超声时间限定为5 30min为佳。本发明区别于现有技术的特别之处在于对样品、对照药材样品北豆根，采用了超 声提取法来浸提北豆根中的有效成分，是利用超声波的空化作用，破坏植物药材的细胞，使 溶剂易于渗入细胞内，同时超声波的机械运动、乳化、扩散、击碎、化学效应等也能加速细胞 内有效成分的扩散、释放和溶解，促进提取的快速进行。由于采用了上述的技术方案，本发明与现有技术相比，所取得的技术进步在于(1)节省时间本发明采用超声提取法处理样品，最短仅需5分钟，节省时间，提高 检测效率；(2)结果准确本方法操作简单，避免繁琐的样品提取过程，减少每步提取工艺损 失，确保检测结果准确可靠。(3)节能减排该方法避免传统工艺采用的加热回流法，节省水、电等资源与能 源，还可节约有机溶剂等原料，降低生产和环保成本。本发明适用于对中药原料北豆根的有效成分进行判定，具有操作简单，易于控制， 检测快速，结果精确度高的特点本发明下面将结合具体实施例作进一步详细说明。
具体实施例方式实施例1 一种北豆根有效成分的判定方法B1.样品制备取北豆根药材粉末0. 5g，加入乙酸乙酯2ml，混勻，然后进行超声处 理15min，其中超声波频率为25KHZ，功率为300W，所得溶液直接作为样品溶液；b”对照药材样品制备取合格的北豆根药材，按步骤 处理，得对照药材样品溶 液；C1.点样将样品溶液和对照药材样品溶液点于同一硅胶G薄层板上；Cl1.展开将点了样的硅胶G薄层板放在盛有展开剂的展开槽中进行展开，展开剂 为三氯甲烷、甲醇、浓氨试液以体积比9 1 1配成的混合液；θι.检视喷碘化铋钾试液后，日光下检视，在供试品色谱中，与对照药材色谱相应 位置上，显现相同的四个橘红色斑点。实施例2 —种北豆根有效成分的判定方法本实施例与实施例1的区别，只在于样品溶液制备是按照下列方法进行的取北 豆根药材粉末2g，加入乙酸乙酯2ml，混勻，然后超声处理lOmin，所得溶液直接作为样品溶
4液。本实施例与实施例1的其它步骤相同。实施例3 —种北豆根有效成分的判定方法本实施例与实施例1的区别，只在于样品溶液制备是按照下列方法进行的取北豆根药材粉末2g，加入乙酸乙酯1ml，混勻，然后超声处理5min，所得溶液直 接作为样品溶液。本实施例与实施例1的其它步骤相同。实施例4 一种北豆根有效成分的判定方法本实施例与实施例1的区别，只在于样品溶液制备是按照下列方法进行的实施例1所述的相同步骤重复进行，但是样品溶液制备取北豆根药材粉末lg，加 入乙酸乙酯3ml，混勻，然后超声处理20min，所得溶液直接作为样品溶液。本实施例与实施例1的其它步骤相同。实施例5 —种北豆根有效成分的判定方法本实施例与实施例1的区别，只在于样品溶液制备是按照下列方法进行的取北豆根药材粉末2g，加入乙酸乙酯4ml，混勻，然后超声处理15min，所得溶液直 接作为样品溶液。本实施例与实施例1的其它步骤相同。
权利要求
一种北豆根有效成分的判定方法，其特征在于该判定方法按照如下步骤顺序进行a.样品制备取北豆根药材粉末，加入乙酸乙酯，混匀，然后进行超声处理，所得溶液直接作为样品溶液；b.对照品样品制备取已知合格的北豆根药材，按上述步骤a中所述样品处理方法进行处理；c.点样将样品溶液和对照药材样品溶液点于同一硅胶G薄层板上；d.展开将点了样的硅胶G薄层板放在盛有展开剂的展开槽中进行展开；e.检视喷碘化铋钾试液后，日光下检视，在供试品色谱中，与对照药材色谱相应位置上，显现相同的四个橘红色斑点。
2.根据权利要求1所述的北豆根有效成分的判定方法，其特征在于所述展开剂为三 氯甲烷、甲醇和浓氨试液的混合液；其中，三氯甲烷、甲醇、浓氨试液的体积比为9 1 1。
3.根据权利要求1或2所述的北豆根有效成分的判定方法，其特征在于所述步骤a中 所取样品的质量与加入乙酸乙酯的体积之比为Ig 0. 5 4ml，超声时间5 30min。
全文摘要
本发明涉及一种北豆根有效成分的判定方法，包括超声浸提样品与对照品样品、点样、展开、检视等步骤。该方法节省时间，提高检测效率；操作简单，易于控制，避免繁琐的样品提取过程，减少每步提取工艺损失，确保检测结果准确可靠；节省水、电等资源与能源，还可节约有机溶剂等原料，可降低生产和环保成本。本发明适用于对中药原料北豆根的有效成分进行判定。
文档编号A61P29/00GK101966229SQ20101029773
公开日2011年2月9日 申请日期2010年9月30日 优先权日2010年9月30日
发明者武路刚, 牛志勇, 王志香, 赵素娟, 郭艳玉, 陈淑芳, 魏桂香 申请人:河北科星药业有限公司