专利名称：一种中华独尾草根提取物及其制备方法
技术领域：
本发明涉及ー种植物根茎提取物及其制备方法，具体涉及ー种具有抗氧化、抗肿瘤活性的中华独尾草根提取物及其制备方法。
背景技术：
中华独尾草(五rewtfr^s chinensis Fedtsch.)属百合科独尾草属多年生草本植物，又名石參，石蒜苔、崖參，为中国特有品种，主要分布在西部地区，据调查，其在陕西的分布仅见于略阳县境内西淮坝乡的西淮坝村、张家山等几个狭窄地帯，目前野生中华独尾草已非常少见。其根肉质，柔软，黄色或深褐色，为其食用部分，干制加工产品呈金黄色，味甘甜，气味甘香，性温和，具有悠久的民间食用历史，古代曾作贡品进献帝王。《本草纲目》记载中华独尾草根温补肾阳、滋阴、清肝去湿，对失眠、多梦有一定疗效。研究表明，中华独尾草含有丰富的蛋白质纤维素及微量元素，蛋白质几乎接近于大米中的含量，并含有较多的多糖、黄酮等活性物质。目前，中华独尾草根主要用于鲜食及简单加工，对其进行的深入研究较少。中华独尾草属于中国特有资源，对其根中活性物质进行提取，井深入研究其功能活性，可拓宽中华独尾草的应用范围及产品类型，提高其附加值，增加收入，具有十分重要的意义和潜在的市场前景。
发明内容
本发明的目的在于提供一种中华独尾草根提取物及其制备方法，其解决了背景技术中对中华独尾草根深入研究匮乏的技术问题。本发明的技术解决方案是
ー种中华独尾草根提取物，其特殊之处在于该提取物包括酚类及黄酮类化合物，其中酚类含量为18. 25 23. 26 mg/g、黄酮类化合物含量为16. 24 20. 15mg/g。上述提取物中酚类含量为19. 46 21. 52 mg/g、黄酮类化合物含量为17. 56 19.22mg/g0上述提取物中酚类含量为20. 52mg/g、黄酮类化合物含量为18. 13mg/g。上述提取物中酚类为大黄酚及其他酚类。ー种上述中华独尾草根提取物的制备方法，其特殊之处在于，该方法包括
1)取新鲜中华独尾草根，去除杂物，水洗清洁干净，在30 50°C烘干，再粉碎后过30 60目筛，得均勻的粉碎物；
2)将步骤1)所得粉碎物经体积百分比为60 80%乙醇按料液比1:5 1 :20g/ml室温浸泡2 证，然后超声辅助提取2 4次，每次1 池，超声功率为50 200W，提取温度为35 50°C，将提取液在4000rpm条件下离心15min，取上清液；
3)将步骤2)所得上清液减压浓缩至原体积的1/5，浓缩条件为温度40 50°C，真空度为0. 1 0. 2mbar，然后加入2 4倍体积的无水乙醇沉淀多糖，搅拌均勻，4°C静置1 4h，在4000rpm条件下离心15min，取上清液；4)将步骤3)所得上清液在40 50°C、0.1 0. 2mbar条件下减压浓缩至无乙醇流出， 得到乙醇提取膏状物；
5)将步骤4)所得乙醇提取膏状物在-45°C -20°C、0.35 0. 7mbar下真空冷冻干燥 24 72h，即得浅褐色的中华独尾草根提取物。上述步骤2)中粉碎物经体积百分比为75%乙醇按料液比1 :8 1 :15g/ml室温浸泡。上述步骤2)中粉碎物经体积百分比为75%乙醇按料液比1 :10g/ml室温浸泡。上述步骤3)中加入3倍体积的无水乙醇沉淀多糖。上述步骤1)中粉碎后过40 50目筛，得均勻的粉碎物。上述步骤中超声辅助提取的超声功率为100W，提取温度为40°C。本发明的优点在干提供了一种系统科学的中华独尾草根提取物的制备方法，所得中华独尾草根提取物具有抗氧化和抗肿瘤活性，拓宽了中华独尾草的应用范围及产品类型，提高其附加值，增加收入，具有十分重要的意义和潜在的市场前景。
图1中华独尾草根提取物对ABTS自由基的清除能力； 图2中华独尾草根提取物对DPPH自由基的清除能力；
图3中华独尾草根提取物金属螯合能力；
图4中华独尾草根提取物铁还原能力；
图5中华独尾草根提取物对人肝癌HepG2細胞活力的影响。
具体实施例方式本发明的エ艺流程可归纳为
中华独尾草根烘干、粉碎ヰ乙醇提取ヰ离心取上清液ヰ减压浓缩ヰ乙醇沉淀多糖ヰ离心取上清液ヰ减压浓缩ヰ冷冻干燥，即得提取物。具体是
1)取新鲜中华独尾草根，挑去杂物，水洗，30 50°C烘干，粉碎后过30 60目筛，得到均勻的粉碎物；
2)将步骤1)所得粉碎物经60 80%乙醇按料液比1:5 1 :20 (g/ml)室温浸泡 2 证，然后超声辅助提取2 4次，每次1 池，超声功率为50 200W，提取温度为35 500C，提取液4000rpm离心15min，取上清液；
3)将步骤2)所得上清液减压浓缩至原体积的1/5，浓缩条件为温度40 50°C，真空度为0. 1 0. 2mbar，然后加入2 4倍体积的无水乙醇沉淀多糖，搅拌，4°C静置1 4h， 4000rpm离心15min离心取上清液；
4)将步骤3)所得上清液在40 50°C、0.1 0. 2mbar条件下减压浓缩至无乙醇流出， 得到乙醇提取膏状物；
5)将步骤4)所得乙醇提取膏状物在 45°C、0.35 0. 7mbar下真空冷冻干燥M 72h，即得浅褐色的中华独尾草根提取物；
6)将步骤5)所得中华独尾草根提取物检测其抗氧化能力，当提取物浓度为ang/ml吋，CN 102526439 A
对ABTS自由基的清除率达97. 82%，參见图1 ；当提取物浓度为％ig/ml时，对DPPH自由基的清除率达84. 21%，參见图2 ；当提取物浓度为lmg/ml吋，其金属螯合能力为79. 67%，參见图 3 ；当提取物浓度为lmg/ml吋，其铁还原カ为1. 13 (593nm下吸光度)，參见图4。用DMEM1640培养基分别配制成0. 01,0. 1,0. 5、l、2mg/ml的溶液，MTT法测定其对人肝癌HepG2細胞活力的影响。中华独尾草提取物可抑制人肝癌HepG2細胞的増殖并呈现剂量和时间依赖关系，当提取物浓度为2mg/ml，作用时间Mh吋，細胞活力仅为54. 34%，參见图5。7)经測定，该提取物中的酚类、黄酮类化合物的含量分别为20. 52mg/g、18. 13mg/ go LC MS分析中华独尾草提取物中化学成分包括大黄酚及其他酚类、黄酮类化合物。
权利要求
1.一种中华独尾草根提取物，其特征在于该提取物包括酚类及黄酮类化合物，其中酚类含量为18. 25 23. 26 mg/g、黄酮类化合物含量为16. 24 20. 15mg/g。
2.根据权利要求1所述中华独尾草根提取物，其特征在于所述提取物中酚类含量为19.46 21. 52 mg/g、黄酮类化合物含量为17. 56 19. 22mg/g。
3.根据权利要求2所述中华独尾草根提取物，其特征在于所述提取物中酚类含量为20.52mg/g、黄酮类化合物含量为18. 13mg/g。
4.根据权利要求3所述中华独尾草根提取物，其特征在于所述提取物中酚类为大黄酚及其他酚类。
5.一种权利要求1所述中华独尾草根提取物的制备方法，其特征在于，该方法包括1)取新鲜中华独尾草根，去除杂物，水洗清洁干净，在30 50°C烘干，再粉碎后过30 60目筛，得均勻的粉碎物；2)将步骤1)所得粉碎物经体积百分比为60 80%乙醇按料液比1:5 1 :20g/ml室温浸泡2 证，然后超声辅助提取2 4次，每次1 池，超声功率为50 200W，提取温度为35 50°C，将提取液在4000rpm条件下离心15min，取上清液；3)将步骤2)所得上清液减压浓缩至原体积的1/5，浓缩条件为温度40 50°C，真空度为0. 1 0. 2mbar，然后加入2 4倍体积的无水乙醇沉淀多糖，搅拌均勻，4°C静置1 4h，在4000rpm条件下离心15min，取上清液；4)将步骤3)所得上清液在40 50°C、0.1 0. 2mbar条件下减压浓缩至无乙醇流出， 得到乙醇提取膏状物；5)将步骤4)所得乙醇提取膏状物在-45°C -20°C、0.35 0. 7mbar下真空冷冻干燥 24 72h，即得浅褐色的中华独尾草根提取物。
6.根据权利要求5所述中华独尾草根提取物的制备方法，其特征在于所述步骤2)中粉碎物经体积百分比为75%乙醇按料液比1 :8 1 :15g/ml室温浸泡。
7.根据权利要求6所述中华独尾草根提取物的制备方法，其特征在于所述步骤2)中粉碎物经体积百分比为75%乙醇按料液比1 :10g/ml室温浸泡。
8.根据权利要求5所述中华独尾草根提取物的制备方法，其特征在于所述步骤3)中加入3倍体积的无水乙醇沉淀多糖。
9.根据权利要求5所述中华独尾草根提取物的制备方法，其特征在于所述步骤1)中粉碎后过40 50目筛，得均勻的粉碎物。
10.根据权利要求5所述中华独尾草根提取物的制备方法，其特征在于所述步骤中超声辅助提取的超声功率为100W，提取温度为40°C。
全文摘要
一种中华独尾草根提取物，包括酚类及黄酮类化合物，其中酚类含量为18.25～23.26mg/g、黄酮类化合物含量为16.24～20.15mg/g。一种中华独尾草根提取物本制备方法为中华独尾草根烘干、粉碎→乙醇提取→离心取上清液→减压浓缩→乙醇沉淀多糖→离心取上清液→减压浓缩→冷冻干燥，即得提取物。本发明提供了一种系统科学的中华独尾草根提取物的制备方法，所得中华独尾草根提取物具有抗氧化和抗肿瘤活性，拓宽了中华独尾草的应用范围及产品类型，提高其附加值，增加收入，具有十分重要的意义和潜在的市场前景。
文档编号A61K125/00GK102526439SQ20121005470
公开日2012年7月4日 申请日期2012年3月5日 优先权日2012年3月5日
发明者刘学波, 肖海芳 申请人:西北农林科技大学