专利名称：一种粒毛盘菌多糖新的医药用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种生物活性物质粒毛盘菌多糖在制药领域中的应用，具体地说是粒 毛盘菌多糖在制备抗疲劳药物中的应用。
背景技术：
疲劳是极其复杂的生理状态，一般指机体生理过程不能持续其功能在特定水平上 或不能维持预定的运动强度致使身体和精神状态的下降，从而导致工作能力和工作效率的 衰退。因此，消除疲劳，提高机体的潜在机能和生命力是医学工作者的主要任务之一。目前在临床上用于治疗运动性疲劳的药物包括化学药品、生物制品和中药等。其 中化学药品和生物制品在提高运动能力、延缓疲劳发生和消除疲劳方面确有较好的效果， 但是由于某些这类药物含有兴奋剂等可能给机体造成危害的成分而使其应用受到了很大 的限制。在寻找更安全和有效的抗疲劳药物的研究中，真菌多糖由于其副作用少，不含对人 体有害的兴奋剂成分而成为近年来抗疲劳药物研究的热点。真菌多糖是一类重要的生物活性物质，是目前公认的有较高疗效的免疫增强剂， 研究发现其还具有明显的抗衰老、消除人体过剩的自由基，抗肿瘤等药理功能，在食品加 工、医药、日用化工等领域具有重要的应用。粒毛盘菌属(Lachnum Retz.)是世界性分布的 一类重要真菌资源，在深层培养条件下能产生多种生物活性物质，也是近几年来发现的具 有重要经济价值的一类真菌。粒毛盘菌多糖的制备多有研究，如浙江大学学报于2009年公开了一种粒毛盘 菌多糖的提取方法，并对提取的多糖进行了初步的纯化。申请人也就粒毛盘菌和萼状 粒毛盘菌多糖提取工艺进行了深入的研究，并就多糖的纯化分级方法申请了发明专利 (CN101649338A)。
发明内容
本发明的目的在于提供一种新的抗疲劳药物以满足人们对该类药物的需要，所要 解决的技术问题是确立粒毛盘菌多糖抗疲劳的药理作用。本发明的技术方案是粒毛盘菌多糖的制备，多糖水溶液的配制并通过小鼠抗疲劳 作用的药理实验，以确立粒毛盘菌多糖的抗疲劳的作用。本发明所称的粒毛盘菌多糖新的医药用途就是经纯化的粒毛盘菌多糖在制备抗 疲劳药物中的应用。所述的纯化是指粒毛盘菌液态发酵后分离得到的发酵液依次经浓缩、95%乙醇醇 析沉淀、洗涤、蒸馏水复溶后再脱蛋白、脱色和蒸馏水透析处理。最后真空干燥得到的多糖 粉末称纯化的粒毛盘菌多糖。本发明的粒毛盘菌多糖可以按药剂学的常规制备方法加工成口服或注射的抗疲 劳药物制剂，即将有效量的粒毛盘菌多糖与药用辅料制备成各种剂型供临床用，如片剂、胶 囊、颗粒剂、混悬剂、糖浆剂等。
本纯化的粒毛盘菌多糖经药效学实验表明可显著延长小鼠负重游泳时间，明显提 高小鼠肝糖元和肌糖元的含量，提高血清乳酸脱氢酶活力，显著降低小鼠剧烈运动后血尿 素氮含量，具有增强运动耐力、缓解体力疲劳的作用。
具体实施例方式(一)粒毛盘菌多糖制备采用5L自控发酵罐液态深层发酵，培养基采用发酵培养基，发酵培养基为马铃薯 浸汁20%、葡萄糖20g/L、酵母膏5g/L、硫酸锰0. 075g/L，大豆油5g/L，装料系数为0. 7，接 种量为15%，培养温度为25°C，通气量为l.OL/min，搅拌转速为180r/min，发酵时间为7 天。将发酵液抽滤得发酵液。所述的马铃薯浸汁是200g马铃薯破碎后加入IOOOmL水，沸 腾15分钟后冷却、分离得到的马铃薯汁液。将发酵液浓缩到原来体积的1/3，加3倍体积95%的乙醇于4°C醇析Mh，醇析液 5000r/min离心lOmin，去上清，沉淀用无水乙醇、丙酮洗涤2 3遍，然后用蒸馏水溶解， Sevage法脱蛋白，30% H2O2脱色，对流水、蒸馏水透析48h，真空干燥得纯化的多糖粉末。( 二)粒毛盘菌多糖溶液的制备粒毛盘菌多糖粉末用0. 9%生理盐水配制成5mg/mL、10mg/mL、20mg/mL的水溶液， 给药体积为20mL/kg。(三)粒毛盘菌多糖对小鼠抗疲劳的作用动物昆明小鼠，雌雄各半，体重22 士 2g，随机分组。试剂盒肌糖元及肝糖元测定试剂盒、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH) 测试盒、血尿素氮测(ureanitrogen，BUN)试盒南京建成生物工程研究所。方法小鼠于实验环境下适应3d后随机分成4组，每组15只。正常对照组每天灌 胃0. 9%生理盐水，其余各组连续灌胃5mg/mL、10mg/mL、20mg/mL的多糖水溶液，灌胃体积 为0. ImL/(IOg W)。按照小鼠体重给予不同体积的受试物，自由摄食和饮水，连续灌喂21d。相关指标测定(1)负重游泳实验及力竭游泳时间的测定小鼠连续灌喂21d，末次灌喂30min后，每组机抽取10只，尾部负重5%体重的铅 丝，置于游泳箱中游泳，水温(25士 1) °C记录开始游泳至力竭沉入水面下8s不能浮出面为 止的时间，即为小鼠的力竭游泳时间。(2)肝糖元及肌糖元测定每组随机选取10只小鼠，末次灌胃前空腹12h，灌胃30min后，置于游泳箱中游泳， 水温30°C，20min后颈椎脱臼处死，解剖取肝脏和小鼠后腿肌肉，生理盐水漂洗，滤纸吸干， 称重，然后进行肌糖元及肝糖元测定。具体操作按肌糖元及肝糖元测定试剂盒说明书。(3)乳酸脱氢酶(LDH)测定末次灌胃前空腹12h，灌胃30min后，置小鼠在游泳箱中游泳20min，眼眶采血，于 40C 6000r/min离心IOmin分离出血清，冰箱保存)、备测。具休操作按乳酸脱氢酶测 定试剂盒说明书。(4)血尿素氮(BUN)测定取血步骤同(3)，具体操作按照血尿素氮测定试剂盒说明。
(四)结果灌胃处理后，各组小鼠游泳时间和肝糖元、肌糖原、血尿素氮(BUN)、乳酸脱氢酶 (LDH)等生化指标测定结果见表1。由表1可以看出，各粒毛盘菌多糖组小鼠负重游泳时间、 糖元储备量、血清乳酪脱氢酶活力均高于正常对照组，血尿素氮含量则低于正常对照组。表1粒毛盘菌多糖抗疲劳实验结果(n = 10)
权利要求
1.一种粒毛盘菌多糖新的医药用途，其特征在于经纯化的粒毛盘菌多糖在制备抗疲 劳药物中的应用。
2.根据权利要求1所述的粒毛盘菌多糖新的医药用途，其特征在于所制备的抗疲劳 药物为按药剂学的常规制备方法，以纯化的粒毛盘菌多糖为活性物质制备的抗疲劳口服制 剂。
全文摘要
本发明公开了一种粒毛盘菌新的医药用途，即粒毛盘菌多糖在制备抗疲劳药物中的应用。药效学证明，经纯化的粒毛盘菌多糖可显著延长小鼠负重游泳时间，明显提高小鼠肝糖元和肌糖元的含量，提高血清乳酸脱氢酶活力，显著降低小鼠剧烈运动后血尿素氮含量，具有增强运动耐力、缓解体力疲劳的作用。因此它能用于制备抗疲劳药物。粒毛盘菌多糖无毒副作用，可根据需要制成各类剂型，服用方便。
文档编号A61P39/00GK102058615SQ201010582408
公开日2011年5月18日 申请日期2010年12月10日 优先权日2010年12月10日
发明者叶明 , 陈吴西 申请人:合肥工业大学