专利名称：巴西革耳化合物及其制备方法与应用的制作方法
技术领域：
本发明具体涉及一种食药用大型真菌巴西革耳化合物及其制备方法与应用。食药用大型真菌是生物活性化合物的重要资源如从杯伞属分离到的化合物 illudin M、diatretyne 2、muscarine和clitocypin分别具有抗生素、乙酰胆碱作用类 似物和半胱氨酸蛋白激酶抑制剂的活性；从木层孔菌属分离到的化合物cyclophellitol、 phellinsin A、hispidin和phelligridimer A分别具有β-葡糖苷酶抑制剂、抗真 菌、β-分泌酶抑制剂和抗氧化的活性；从奥德蘑属分离到的化合物mucidin、oudenone 和oudemansin X分别具有抗真菌、抑制酪氨酸羟化酶和抗真菌的活性；从田蘑属分离 到的化合物agrocybolacton具有抗革兰氏阳性细菌的活性；从牛舌菌分离到的化合 物cirmatriacetins A、B具有抗细菌活性；从香菇属分离到的化合物Ientinacin具有 降血压和胆固醇的活性；从长裙竹荪分离到的化合物dictyophorines A和B具有促进 神经生长因子合成的作用；从猴头菌分离到的化合物erinacine E、erinapyrorneA, B 和hericenoneC-H分别具有K亚型阿片受体拮抗剂、抗癌、促进神经生长因子合成，抗 Alzhimers型老年性痴呆症的活性；从嗜球果伞分离到的化合物strobilurins分别具有抗 真菌活性等。因此，食药用菌不但化合物类型丰富，而且生物活性多样。
发明内容
本发明的目的在于提供一种巴西革耳化合物及其制备方法与应用，通过巴西革耳 菌种的培养，粗提，精致，制备得到的巴西革耳化合物具有抗肿瘤活性。本发明是通过如下技术方案实施的
一种巴西革耳化合物来源于食药用大型真菌巴西革耳次生代谢产物，该化合物的结构
为
权利要求
1. 一种巴西革耳化合物，其特征在于所述化合物来源于食药用大型真菌巴西革耳次 生代谢产物，该化合物的结构为一种如权利要求1所述的巴西革耳化合物的制备方法，其特征在于所述制备方法的 具体步骤为(1)制备巴西革耳(Lentinusstriguellus)固体种菌株的斜面与培养皿培养马铃薯去皮、切成小块，加水煮沸，纱布过滤，滤液中加葡 萄糖和琼脂，用水定容，灭菌，制成试管斜面和培养皿平板培养基，挑取菌种接入斜面活化 培养，再从活化的斜面接入培养皿平板培养基上，得固体种；(2)巴西革耳(Lentinusstriguellus)固体发酵马铃薯去皮、切成小块，加水煮沸，纱布过滤，滤液中加葡萄糖和琼脂，用水定容， 灭菌，制成固体发酵培养基，用培养皿培养，将平板培养的固体种切成菌种小块，接入到 固体发酵培养基上培养；⑶巴西革耳化合物的提取将固体发酵培养好的培养基与菌丝体一起用有机溶剂浸提，减压浓缩得浸膏；浸膏再 用有机溶剂萃取，合并有机相减压浓缩得有机粗提物； (4)巴西革耳化合物的精制将有机粗提物经反相硅胶柱层析，洗脱液为有机溶剂，减压浓缩得到组分A，组分A 用凝胶柱层析，有机溶剂洗脱后，合并洗脱液减压浓缩后经硅胶柱层析，用氯仿/甲醇 (100-1) 1梯度洗脱，获得目标化合物。
2.根据权利要求2所述的一种巴西革耳化合物的制备方法，其特征在于所述步骤 (1)和⑵中马铃薯滤液中加葡萄糖比例为每升马铃薯滤液加5-30g葡萄糖；每升马铃薯滤 液加10-20g琼脂，马铃薯的添加质量为150g-250g。
3.根据权利要求2所述的一种巴西革耳化合物的制备方法，其特征在于所述步骤⑵ 中巴西革耳化合物的固体发酵培养温度为20-35 °C，培养时间为10-25 d。
4.根据权利要求2所述的一种巴西革耳化合物的制备方法，其特征在于所述步骤(3)中巴西革耳化合物的提取所用的有机溶剂，首次提取选乙酸乙酯/甲醇/乙酸，其体积 比为70-90/5-25/1-10，浸膏的提取选用乙酸乙酯/水，其体积比为1-2:1:2。
5.根据权利要求2所述的一种巴西革耳化合物的制备方法，其特征在于所述步骤⑷ 中巴西革耳化合物的精制过程中，有机浸膏经反相硅胶柱层析，洗脱流动相使用体积浓度 为10 - 50%甲醇水溶液。
6.根据权利要求2所述的一种巴西革耳化合物的制备方法，其特征在于所述步骤(4)中巴西革耳化合物的精制过程中，凝胶柱层析时以甲醇为洗脱剂。
7.—种如权利要求1或2所述的巴西革耳化合物的应用，其特征在于该化合物可应 用在制备抗肿瘤的药物中。HO Η
全文摘要
本发明涉及一种巴西革耳化合物及其制备方法与应用，通过巴西革耳菌种的培养，粗提，精致，制备得到的巴西革耳化合物无色油状物，具有抗肿瘤活性。
文档编号A61P35/00GK102060683SQ201010584738
公开日2011年5月18日 申请日期2010年12月13日 优先权日2010年12月13日
发明者林戎斌, 林新坚, 林陈强, 沈月毛, 苏文金, 郑忠辉, 郑永标, 陈济琛 申请人:福建省农业科学院土壤肥料研究所