在第59位置处具有氨基酸替换的胰岛素样生长因子-1(igf-1)类似物的制作方法

专利名称：在第59位置处具有氨基酸替换的胰岛素样生长因子-1(igf-1)类似物的制作方法
技术领域：
本发明涉及胰岛素样生长因子-1 (IGF-I)的新类似物、含有所述类似物的药物组合物和所述类似物用于治疗IGF-I受体介导的病状如身材矮小症、糖尿病治疗、神经变性病治疗和软骨修复的用途。更具体地，本发明涉及IGF-I的新类似物，其具有在第59位置处的氨基酸替换，例如(Asn59)hIGF-l (1_70)-0H，和如本文定义的其他替换。
背景技术：
IGF-I是一种具有胰岛素样和促有丝分裂生长的生物学活性的70个氨基酸的多肽激素。这种激素增强多种组织中细胞的生长，所述组织包括骨骼肌系统、肝、肾、肠、神经系统组织、心脏和肺。野生型IGF-I具有带三个链内二硫键的其中残基对A6和A48、A47和A52、以及Aw和 A61的侧链各自形成二硫键的以下氨基酸序列(SEQ ID NO 50)Gly-Pro-Glu-Thr-Leu-Cys-Gly-Ala-Glu-Leu-Val-Asp-Ala-Leu-Gln-Phe-Val-C
YS-151015Gly-Asp-Arg-Gly-Phe-Tyr-Phe-Asn-Lys-Pro-Thr-Gly-Tyr-Gly-Ser-Ser-Ser-A rg-20253035Arg-Ala-Pro-Gln-Thr-Gly-Ile-Val-Asp-Glu-Cys-Cys-Phe-Arg-Ser-Cys-Asp-L eu-404550Arg-Arg-Leu-Glu-Met-Tyr-Cys-Ala-Pro-Leu-Lys-Pro-Ala-Lys-Ser-Ala55606570尽管IGF-I存在于多种身体组织中，不过它通常以其中它与IGF结合蛋白(IGFBP) 结合的非活性形式存在。6种相关的IGFBP是已知的，并且已经命名为IGFBP1-IGFBP6。 见，例如，Holly和Martin，“胰岛素样生长因子结合蛋白其纯化、分析和调节作用的方法学综述(Insulin-like Growth Factor Binding Proteins :A Review of Methodological Aspects of Their Purification, Analysis and Regulation)，，，Growth Regul. , 4 (Suppl 1) :20-30 (1994)。IGFBI3s在IGF-I调节作用中通过对IGF-I作用产生抑制性和/或刺激性效应而发挥重要作用。例如，约90%的循环型IGF-I存在于含有IGFBP-3和酸不稳定亚基的三分子复合物中。此类复合物内部的IGF-I不能与表面受体结合，并且因此是生物学无活性的。存在于三分子复合物内部的IGF-I还比未复合的IGF-I具有明显更长的半寿期。IGF-I作用的破坏可以导致众多生理性病症，包括神经变性病如运动神经元疾病 (即，肌萎缩侧索硬化(ALS))、肌营养不良和多发性硬化、软骨病症如骨关节炎、骨病如骨质疏松症、炎性病症如类风湿性关节炎、器官如心脏、脑或肝脏等的局部缺血性损伤。
如本领域技术人员所熟知，IGF-I的已知和潜在用途是多种多样的。例如，许多研究报道了 IGF-I作为潜在治疗剂用于治疗神经变性病的用途。见，例如，Kanje等人，Brain Res.，486 :396-398(1989) ；Hantai 等人，Neurol. Sci.，129 :122-126(1995)； Contreras ^A, Pharmac. Exp. Therap. ,274 :1443-1499(1995) ；Di Giulio ^A, Society for Neuroscience, 22 1960 (1996) ；Di Giulio 等人’ Society for Neuroscience, 23 :894(1997) ；Hsu 等人，Biochem. Mol. Med.，60 ) :142-148(1997) ； Gorio 等人， Neuroscience,82 1029-1037 (1998)。已经在众多神经病状中展示了 IGF-I疗法，所述神经病状包括ALS、中风、癫痫、帕金森病、阿尔茨海默病、急性创伤性损伤和与创伤、老化、疾病或损伤有关的其他病症。见，例如，美国专利号5，093，137 ；5, 652，214 ；5, 703，045 ；国际公开号 WO 90/1483 和 WO 98/07409。已经在许多出版物中提及IGF-I疗法用于多种其他病状的用途。见，例如，Schalch 等人，"Modern Concepts of Insulin-Like Growth Factors,，，Spencer 编著(Elsevier, New York)，第 705—714 页(1991) ；Clemmons 禾口 Underwood，J. Clin. Endocrinol. Metab.， 79(1) :4-6(1994)；和 Langford 等人，Eur. J. Clin. Invest. ,23(9) :503-516 (1993)(例如， 提到胰岛素耐受状态和糖尿病)；以及0，Shea等人，Am. J.Physiol.，264 :F917_F922 (1993) (例如，提到降低的肾功能)。还见美国专利号7，258，864(提到身材矮小症)；美国专利号5，110，604和5，427，778(例如，提到伤口愈合)；美国专利号5，126，324 (例如，提到心脏疾病和生长迟滞)；美国专利号5，368，858(例如，提到软骨缺陷或损害)；美国专利号 5, 543, 441和5，550，188 (例如，提到组织增进)；美国专利号5，686，425 (例如，提到瘢痕组织、局部肌功能障碍和尿失禁)；和美国专利号5，656，598(例如，提到骨生长)。还见国际公开号WO 91/12018(例如，提到肠疾病)；WO 92/09301和WO 92/14480 (例如，提到伤口愈合)；WO 93/08828(例如，提到与局部缺血、缺氧或神经变性相关的神经元损伤)；WO 94/16722(例如，提到胰岛素抵抗)；WO 96/02565A1 (例如，提到用于促进骨形成和用于调节骨重建的IGF/IGFBP复合物)；美国专利申请公开号2003/0100505(例如，提到骨质疏松症)；和美国专利申请公开号2005/0043M0(提到肥胖症)。虽然IGF-I疗法已经用于许多生理适应症，但是结果有时是不可预测的。短期有益作用有时不持久(见，例如，Miller等人，Kidney International,46 :201-207(1994))并且不希望的副作用可以尤其因高剂量施用和/或长期施用而产生(见，例如，Jabri等人， Diabetes，43 :369-374(1994) ；Wilton, Acta Paediatr.，393 137-141 (1992))。另外，已经报道高水平的IGF-I增加前列腺癌的风险(Chan等人，Science, 278 :563-566 (1998))。因此，本领域需要治疗下述病状的更好方式，所述病状应答于IGF-I和/或与胰岛素样生长因子结合蛋白结合的其他蛋白质。本发明满足这些需要并且还提供其他相关的优点ο发明概述如本发明的发明人所发现，通过将野生型IGF-I中化学上不稳定并且可能容易氧化的第59位置处的甲硫氨酸残基替换为如本文所述的其他氨基酸例如(Asn59) hIGF-l(l-70)-0H，所产生的IGF-I类似物在化学上更稳定并且从而在生产、纯化、贮存等期间较不易氧化。在一个方面，本发明涉及下式(I)的IGF-I的肽变体(即，类似物)
H-A^I-AI-A2-A3-A4-A5-A6-A7-A8-A9-AI0-AII-AI2-AI3-AI4-AI5-A16-A17-A18-A19-A20-A21-A22
A47_A48_A49_A50_A51_A52_A53_A54_A55_A56_A57_A58_A59_A60_A61_A62_A63_A64_A65_A66_A67_A68_A69_A70_A
71-R1，(I)其中A"1 是 Met、Ser 或被缺失；A1 是 Gly、Ala、Asn, Asp、Gin、Glu 或被缺失；A2 是 Pro、Ala、Arg、Asp、Gin、Glu、Lys 或被缺失；A3 是 Glu、Ala、Asp、Gln 或被缺失；A4 是 Thr> Ala、Asn、Asp、Gin、Glu、Ser ；A5 是 Leu、Acc、Ala、lie 或 Val ;A6 是 Cys、D-Cys,hCys、D_hCys、β -Me-Cys,D- β -Me-Cys,N-Me-Cys,D-N-Me-Cys> Ala、Pen或D-Pen ；A7 是 Gly、Ala、Asn、Asp、Gln 或 Glu ；A8 是 Ala、Arg、Asn、Asp、Gin、Glu 或 Lys ；A9 是 Glu、Ala、Asp 或 Gln ；A1 是 Leu、Acc、Ala、lie 或 Val ；A11 是 Val、Ala、I Ie 或 Leu;A12 是 Asp、Ala、Arg、Asn、Gin、Glu 或 Lys ；A13 是 Ala、Asn、Asp、Gin、Glu、lie、Leu 或 Val ；Aw 是 Leu、Acc、Ala、lie 或 Val ；A15 是 Gin、Ala、Asn、Asp 或 Glu ；A16 是 Phe、Ala、Asn、Asp、Gin、Glu、Trp 或 Tyr ；A17 是 Val、Ala、I Ie 或 Leu;A18 是 Cys、D-Cys,hCys、D_hCys、β -Me-Cys,D- β -Me-Cys,N-Me-Cys,D-N-Me-Cys>
Ala、Pen或 D-Pen ；
A19是Gly、Ala、Asn、Asp、Gln 或 Glu ；
A20是Asp、Ala、Asn、Gln 或 Glu ；
A21是Arg、Ala、Asn、Asp、Gin、Glu 或 Lys ；
A22是Gly、Ala、Asn、Asp、Gln 或 Glu ；
A23是Phe、Ala、Trp 或 Tyr ；
A24是Tyr、Ala、Phe 或 Trp ；
A25是Phe、Ala、Trp 或 Tyr ；
A26是Asn、Ala、Asp、Gin、Glu、Ser 或 Thr ；
A27是Lys、Ala、Arg、Asn、Asp、Gin、Glu 或 Pro
A28是Pro、Ala、Arg 或 Lys ；
A29是Thr、Ala、Asn、Asp、Gin、Glu 或 Ser ；
A30是Gly、Ala、Asn、Asp、Gln 或 Glu ；
A31 是 Tyr、Ala、Phe 或 Trp ；A32 是 Gly、Ala、Asn、Asp、Gln 或 Glu ；A33 是 Ser、Ala、Thr 或 Val ；A34 是 kr、Ala、Asn、Asp、Gin、Glu 或 Thr ；A35 是 kr、Ala、Asn、Asp、Gin、Glu 或 Thr ；A36 是 Arg、Ala、Asn、Asp、Gin、Glu 或 Lys ；A37 是 Arg、Ala、Asn、Asp、Gin、Glu 或 Lys ；是 Ala、Asn、Asp、Gln 或 Glu ；As3 是 Pro、Ala、Arg 或 Glu ；A40 是 Gin、Ala、Asn、Asp 或 Glu ；A41 是 Thr> Ala、Asn、Asp、Gin、Glu 或 Ser ；A42 是 Gly、Ala、Arg、Asn、Asp、Gin、Glu 或 Lys ；A43 是 lie、Ala、Arg、Asn、Asp、Gin、Glu 或 Lys ；A44 是 Val、Ala、Arg、Asn、Asp、Gin、Glu、lie、Leu 或 Lys ；A45 是 Asp、Ala、Arg、Asn、Gin、Glu 或 Lys ；A46 是 Glu、Ala、Arg、Asn、Asp、Gln 或 Lys ；A47 是 Cys、D-Cys、hCys、D_hCys、β -Me-Cys > D- β -Me-Cys > N-Me-Cys > D-N-Me-Cys > Ala、Pen 或 D-Pen ；A48 是 Cys、D-Cys>hCys、D_hCys、β -Me-Cys>D- β -Me-Cys>N-Me-Cys>D-N-Me-Cys> Ala、Pen 或 D-Pen ；A49 是 Phe、Ala、Arg、lie、Leu、Lys, Ser, Thr, Trp, Tyr 或 Val ；A50 是 Arg、Ala、Lys、Ser 或 Thr ；A51 是 Ser、Aib、Ala、Arg、Lys 或 Thr ；A52 是 Cys、D-Cys>hCys、D_hCys、β -Me-Cys>D- β -Me-Cys>N-Me-Cys>D-N-Me-Cys> Ala、Pen 或 D-Pen ；A53 是 Asp、Ala、Arg、Asn、Gin、Glu、Lys、Ser 或 Thr ；A54 是 Leu、Acc、Ala、lie 或 Val ；A55 是 Arg、Ala、lie、Leu、Lys、Phe、Trp、Tyr 或 Val ；A56 是 Arg、Ala、Asn、Asp、Gin、Glu 或 Lys ；A57 是 Leu、Acc、Ala、lie 或 Val ；A58 是 Glu、Acc、Ala、Arg、Asn、Asp、Gln 或 Lys ；A59 是 Acc、Ala、Arg、Asn、Asp、Gin、Glu、lie、Leu、Lys、Nle、Ser、D_Ser、Thr> Trp、 Tyr 或 Val ；A60 是 Tyr、Ala、Phe 或 Trp ；A61 是 Cys、D-Cys > hCys、D_hCys、β -Me-Cys > D- β -Me-Cys > N-Me-Cys > D-N-Me-Cys > Ala、Pen 或 D-Pen ；A62 是 Ala、Asn、Asp、Gin、Glu、lie、Leu 或 Val ；A63 是 Pro、D-Pro, Ala、Ser> Thr 或被缺失；A64 是 Leu, D-Leu, des_Leu、Ala、lie、Val 或被缺失；
A65 是 Lys> D-Lys> des-Lys、Ala、Arg、lie、Leu、Val 或被缺失；A66 是 Pro、D-Pro、Ala 或被缺失；
A67 是 Ala、D-Ala、Aib 或被缺失；A68 是 Lys、D_Lys、Ala、Arg、lie、Leu、Val 或被缺失；A69 是 kr、D-Ser, Aib、Ala、Thr 或被缺失；A70 是 Ala、D-Ala, Asn、Asp、Gin、Glu 或被缺失；A71 是 Asn、Ala、Asp、Gln、Glu、Lys、kr、Thr 或被缺失；并且R1 是 OH 或 NH2 ；条件是残基对A6和A48、A47和A52、以及Aw和A61的侧链各自形成ニ硫键；并且进ー步地条件是当A59是Leu、lie、Nle、Thr或Val时，则所述类似物含有如本文 定义的至少ー个额外氨基酸替换或添加。在式(I)中，优选的氨基酸替换和添加定义如下A"1 是 Met、Ser 或被缺失；A1是Gly或被缺失；A2 是 Pro、Lys 或被缺失；A3是Glu或被缺失；A4 是 Thr;A5 是 Leu;A6 是 Cys、hCys、3 -Me-Cys, N-Me-Cys 或 Pen ；A7 是 Gly;A8 是 Ala;A9 是 Glu;A10 是 Leu;A11 是 Val;A12 是 Asp;A13 是 Ala;Aw 是 Leu;A15 是 Gin;A16 是 Phe;A17 是 Val;A18 是 Cys、hCys、卩-Me-Cys, N-Me-Cys 或 Pen ；A19 是 Gly;A20 是 Asp;A21 是 Arg;A^iGly;A23 是 Phe;A24 是 Tyr;Am 是 Phe;A26 是 Asn;〔0127〕八27 I 1又8、八 @ 卩！“0 ；
〔0128〕八28是？『0或[忭；
〔0129〕八29 是 了虹；
〔0130〕八30是叫；
0131〕八31 是 1，；
〔0132〕八32 是 61又；
〔0133〕八33 是 361”；
〔0134〕八34 是 361”；
〔0135〕八35 是 361”；
〔0136〕八36是八『8 ；
〔0137〕八37是八印；
0138〕八38是八1已；
〔0139〕八39 是？『0；
〔0140〕八40是版；
〔0141〕六41 是 1111”；
〔0142〕八42 是 61又；
0143〕八43 是 116 ；
〔0144〕八 44是似1；
0145〕八45是六印；
〔0146〕八46 是以11；
〔01 47〕八47 是(忭、11(^8、卩“16-078 ^ -16-0又8 或？611 ；
〔01 48〕八48 是(忭、、旦“16-078 ^ -姑一-匸忭或？611 ；
〔0149〕八49 是？116、八『8611 或 1111”；
0150〕八50是八或361”；
〔0151〕八51是361"、八让、八『8或让『；
〔0152〕八52是(忭、“(忭、旦-16-078 ^ -姑一-匸忭或？611 ；
〔0153〕八53 是八8口、八 或 361”；
〔0154〕八54是611或六6。；
〔0155〕八55是八或了又！"；
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01571八57 是 1611 ；
〔0158〕八58是6111或八『8 ；
〔0159〕八59 是八6(3、八『8、八311、八8口、6111、6111、116、1611、816、361”、0—361”、了！“口 或了；
^0160^八6。是了或？仏；
〔0161〕是(作、!^^、0-16-。78、 -16-078 或？611 ；
0162八62是八1 &或八811 ；
㈣63]八63是？『0、！)- !"。、1111-或被缺失；
〔0164〕^64 是611、0-1611 ^ (！68-。!!或被缺失；
〔0165〕八65是78、0-178、(！一^-!^^、八『8或被缺失；
A66 是 Pro、D-Pro 或被缺失；A67 是 Ala、D-Ala, Aib 或被缺失；A68 是 Lys、D-Lys, Arg 或被缺失；A69 是 kr、D-Ser, Aib、Thr 或被缺失；A7ci 是 Ala、D-Ala、Glu 或被缺失；并且A71 是 Asp、Glu、Lys、Ser 或被缺失。由式⑴涵盖的化合物的一个亚类包括其中A59是Asn的化合物。由式(I)涵盖的化合物的另一个亚类包括其中A59是Leu的化合物，其中所述化合物含有选自以下的至少一个额外氨基酸替换或添加Arg27、Arg65、Arg68、Leu49、β -Me-Cys47, β -Me-Cys52、Thr51, Thr69、Asp71、Glu71, Lys71 和 kr71。由式(I)涵盖的化合物的又一个亚类包括其中A59是Nle的化合物，其中所述化合物含有选自以下的至少一个额外氨基酸替换Aib51、Aib67, Aib69, A6c54、N-Me-Cys47, N-Me-Cys48、Pen52 和 Pen61。由式(I)涵盖的化合物的又一个亚类包括其中A59是Ile的化合物，其中所述化合物含有选自以下的至少一个额外氨基酸替换Arg58、Arg49, Arg51和Arg53。由式(I)涵盖的化合物的又一个亚类包括其中459是六印、六印、六6(、6111、6111、％1·、 Trp或Tyr的化合物。式⑴的优选化合物是实施例 1:(Asn59)hIGF-l(l-70)-OH；(SEQ ID NO:1)
实施例 2:(Asn59)hIGF-l(l-62)-OH；(SEQ ID NO:2)
实施例 3:(Asn59)hIGF-l(4-70)-OH；(SEQ ID NO:3)
实施例 4:(Pro27, Lys28, Asn59)hIGF-l(l-70)-OH； (SEQ ID NO:4)
实施例 5:(Pro27, Lys28, Asn59)hIGF-l(l-62)-OH; (SEQ ID NO:5)
实施例6:(Ser53, Asn59)hIGF-l(l-70)-OH；(SEQ ID NO:6)
实施例 7:(Ser-Gly1, Asn59)hIGF-l(l-70)-OH； (SEQ ID NO:7)
实施例 8:(Asn59, Thr63, des-Leu64, des-Lys65, Glu70)hIGF-l(l-70)-OH； (SEQ ID NO:8)
实施例 9:(Tyr55, Asn59)hIGF-l(l-70)-OH; (SEQ ID NO:9)
实施例 10:(Thr49，Asn59)hIGF-l(l-70)-OH； (SEQIDNOrlO)
实施例 11:(Asn59' 62)hIGF-l(l-70)-OH；(SEQ ID NO:ll)
实施例 12:(Asn59, Phe60)hIGF-l(l-70)-OH; (SEQ ID NO:12)
实施例 13:(Ser50, Asn59)hIGF-l(l-70)-OH; (SEQIDNO:13)
实施例 14:(Gin56, Asn59)hIGF-l(l-70)-OH; (SEQ ID NO: 14)
实施例 15:(Asn59, D-Pro63)hIGF-l(l-70)-OH；
实施例 16:(Asn59, D-Leu64)hIGF-l(l-70)-OH；
实施例 17:(Asn59, D-Lys65)hIGF-l(l-70)-OH；实施侈18(Asn59,D-Pro66)hIGF-l(l-70)-OH;实施侈19(Asn59,D-Ala67)hIGF-l(l-70)-OH；实施隹20(Asn59,D-Lys68)hIGF-l(l-70)-OH;实施侈21(Asn59,D-Ser69)hIGF-l(l-70)-OH；实施移22(Asn59,D-Ala70)hIGF-l(l-70)-OH;实施侈23(Arg27-65 68, Leu59)hIGF-l(l-70)-OH；(SEQ ID NO:15)实施侈24(Leu59,Arg65' 68)hIGF-l(l-70)-OH；(SEQ ID NO: 16)实施侈25(Leu49"59)hIGF-l(l-70)-OH；(SEQ ID NO:17)实施侈26(β-Me-Cys52, Leu59)hIGF-l(l-70)-OH;(SEQ ID NO:18)实施侈27(β-Me-Cys47, Leu59)hIGF-l(l-70)-OH;(SEQ ID NO:19)实施隹28(Leu59,Glu71)hIGF-l(l-71)-OH；(SEQ ID N0:20)实施侈29(Leu59,Asp71)hIGF-l(l-71)-OH；(SEQ ID NO:21)实施隹30(Leu59,Lys71)hIGF-l(l-71)-OH;(SEQ ID NO:22)实施侈31(Leu59,Ser71)hIGF-l(l-71)-OH；(SEQ ID NO:23)实施侈32(Leu59,Thr69)hIGF-l(l-70)-OH;(SEQ ID NO:24)实施侈33(Thr51’Leu59)hIGF-l(l-70)-OH;(SEQ ID NO:25)实施侈34(N-Me-Cys47, Nle59)hIGF-l(l-70)-OH；(SEQ ID NO:26)实施隹35(Nle59,Aib69)hIGF-l(l-70)-OH;(SEQ ID NO:27)实施侈36(N-Me-Cys48, Nle59)hIGF-l(l-70)-OH；(SEQ ID NO:28)实施侈37(Nle59,Aib67)hIGF-l(l-70)-OH；(SEQ ID NO:29)实施合38(hCys52，Nle59)hIGF-l(l-70)-OH;(SEQ ID N0:30)实施侈39(Aib51’Nle59)hIGF-l(l-70)-OH；(SEQ ID NO:31)实施侈40(Pen52,Nle59)hIGF-l(l-70)-OH；(SEQ ID NO:32)实施侈41(Nle59,Pen61)hIGF-l(l-70)-OH；(SEQ ID NO:33)实施侈42(A6c54，Nle59)hIGF-l(l-70)-OH；(SEQ ID NO:34)实施合43(Arg53，Ile59)hIGF-l(l-70)-OH;(SEQ ID NO:35)实施侈44(Arg49,Ile59)hIGF-l(l-70)-OH;(SEQ ID NO:36)实施介45(Arg51,Ile59)hIGF-l(l-70)-OH;(SEQ ID NO:37)实施例 46:(Arg58，Ile59)hIGF-l(l-70)-OH; (SEQ ID NO:38)
实施例 47:(A6c59)hIGF-l(l-70)-OH;(SEQ ID NO:39)
实施例 48:(Asp59)hIGF-l(l-70)-OH；(SEQ ID N0:40)
实施例 49:(Trp59)hIGF-l(l-70)-OH;(SEQ ID NO:41)
实施例 50:(Ser59)hIGF-l(l-70)-OH;(SEQ ID NO:42)
实施例 51:(Tyr59)hIGF-l(l-70)-OH;(SEQ ID NO:43)
实施例 52:(Glu59)hIGF-l(l-70)-OH;(SEQ ID NO:44)
实施例 53:(Gln59)hIGF-l(l-70)-OH;(SEQ ID NO:45)
实施例 54:(Arg59)hIGF-l(l-70)-OH；(SEQ ID NO:46)和
实施例 55: (Met-Gly1, Asn59)hIGF-l(l-70)-OH (SEQ ID NO:47)。发明详述本申请采用以下通常理解的缩写
Acc:环(C3-C9)烷基象酸
Acc包括
A3c:环丙烷羧酸
A4c:环丁烷羧酸
A5c:环戊烷羧酸
A6c:环己烷羧酸
Aib:a-l基异丁酸
Ala或A: 丙氨酸 Arg或R: 精氛酸 Asn或N: 天冬酰胺 Asp或D: 天冬氧酸 Cys或C: 半胱氛酸 胱氨酸 半胱氨酸的二疏化二聚体 hCys:高半胱I酸
P-Me-Cys: P-甲基-半胱氨酸，即，(2S, 3S)-2-氣基-3-巯基丁酸N-Me-Cys:N-曱基-半胱氨酸Gln 或 Q:谷氧酰胺Glu 或 E:谷氛酸Gly 或 G:甘氨酸Ile 或 I:异亮氨酸Leu 或 L:亮氨酸des-Leu:缺失的LeuLys 或 K:赖氨酸des-Lys:缺失的LysMet 或 Μ:曱硫氨酸Nle:正亮氨酸Pen:青霉胺Phe 或 F:苯丙氨酸Pro 或 P:脯氨酸Ser 或 S:丝氨酸Thr 或 T:苏氨酸Trp 或 W:色氨酸Tyr 或 Y:酪氨酸Val 或 V:缬氨酸 本公开中氨基酸的全部缩写(例如Ala)代表-NR-CR' (R〃)_C0_结构，其中R' 和R"各自独立地是氢或氨基酸的侧链(例如对于丙氨酸，R' =H并且R" =CH3)并且其
中R = H或CH3，脯氨酸即，
除夕卜。 本发明的肽在此还由另一种形式代表，例如(Asn59) hIGF-1 (1-70) -OH ； (SEQ ID N0:1)，其中替换了天然序列的氨基酸位于括号内(即，Asn替换了野生型IGF-I 第59位置处的Met)。括号内部存在的范围指存在于类似物中的那些氨基酸。例如， “IGF-I (4-68)-OH" (SEQ ID NO 48)表示该类似物包含对应于野生型IGF-I的肽序列的第 4至68位氨基酸。“IGF-I (1-70)-NH2" (SEQ ID NO 49)中的"NH2”表示该肽的C末端被酰胺化。“IGF-l(l-70)” 或 “IGF-l(l-70)-0H” 表示 C-末端是游离酸(SEQ ID NO :50)。
本文所用的某些其他缩写定义如下
Act:乙腈
Boc:叔丁氧 HS^
BSA:牛血清白蛋白
DCM:二氯曱烷
DIPEA:二异丙基乙腰
DMEM:Dulbecco改良的Eagle培养基
DMF:二曱基曱酰胺
DTT:二疏苏糖醇
ESI:电喷雾电离
FCS:胎牛血清
Fmoc:9-芴甲 IU^
HBTU:2-(1 H-苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲六氟磷酸盐
HOBt:N-羟基苯并三唑
HPLC 高效液相色谱
LC-MS 液相色谱质谱法
MPAA:4-巯基苯乙酸
NMP:N-甲基吡略烷酮
OiBu:O-叔丁基酯
Pbf:2，2，4，6，7-五曱基二氢苯并呋喃-5-横醜基
QC:质量控制
/Bu:叔丁基
TCA:三氯乙酸
TCEP三(2-欺乙基)膦TIS:三异丙基桂燒
TFA:三氟乙酸
Tris:羟曱基)-1,3-丙二醇
Trt:三笨曱基
UV光谱术紫外光谱术“烷基”指含有一个或多个碳原子的烃基，其中如果存在多个碳原子，则多个碳原子以单键连接。其实例包括但不限于甲基、乙基、丙基和丁基。烷基烃基可以是直链或含有一个或多个分枝或环状基团，其实例包括但不限于异丙基和叔丁基。“取代的烷基”指烃基中的一个或多个氢原子由一个或多个取代基替换的烷基，其中所述取代基选自卤素、OH、CN、SH、NH2、NHCH3、N02、以1至6个卤素取代的(Ci_2)烷基、CF3、 0CH3、0CF3* (CH2)q_4-C00H。在不同的实施方案中，存在1、2、3或4个取代基。“芳基”指任选取代的芳基，其中至少一个环具有共轭π -电子系统，含有多达三个共轭或稠合环系统。芳基包括碳环芳基、杂环芳基和联芳基。优选地，芳基是5或6 元环。杂环芳基的优选原子是一个或多个硫、氧和/或氮。芳基的实例包括苯基、ι-萘基、2-萘基、吲哚、喹啉、2-咪唑和9-蒽。芳基取代基选自C1,烷基、-C1J烷氧基、卤素、-OH、-CN、-SH、-NH2, -NO2,卤素取代的-(V2tl 烷基、-CF3、-OCF3 和-(CH2) Q_2Q-C00H。在不同的实施方案中，芳基含有0、1、2、3或4个取代基。“烷基-芳基”指与“芳基”连接的“烷基”。合成方法通过第一步骤肽片段合成；第二步骤连接；和第三步骤折叠制备所例举的本发明IGF-I类似物。以下合成方法阐明了熟练化学家怎样能够制备任何一种所例举的本发明IGF-I类似物。A) (GlnM, Asn-) h!GF~l (48~70)-QH,即 Cys-Phe-Arg-Ser-Cys-Asp-Leu-Arg-Gln-Leu-Glu-Asn-Tyr-Cys-Ala-Pro-Leu-Lys-Pro-Ala-Lys-Ser-Ala-OH(SEQ ID NO 51)的肽片段合成在Liberty肽合成仪(CEM ；Matthews, NC, USA)上使用微波辅助，基于Fmoc的固相肽合成法用来装配标题肽片段。使用Fmoc-Ala-Wang树脂(0. 72meq/g)，以1. O毫摩尔规模合成头14个残基的片段，即，hIGF-Ι第57-70残基或C-端酸性肽。为延伸和区分，将所得到的肽片段随后分成4个0. 25毫摩尔批次。将1. 36g树脂样品连同15ml的DMF和DCM 1 1溶液一起置于50mL锥形管中，其中将所述锥形管在合成仪装载到位。树脂随后经合成仪的自动化过程转移至反应容器。使用1.0毫摩尔规模合成的标准Liberty操作方案。 该操作方案包括通过用20mL在DMF中含有0. IM HOBt的20%哌啶处理移去N端Fmoc保护基。微波功率(45瓦特，最高温度75°C)和氮鼓泡(开启3秒，关闭7秒)的初始去保护步骤持续30秒。将反应容器排干并且用DMF彻底洗涤树脂几次。随后添加(15mL，3当量)待添加至正在生长的肽(Fmoder (tBu)-0H)的下一个氨基酸(循环1)，其中所述氨基酸被制备为DMF中的0. 2M母液。添加6. OmL在DMF中的0. 45M(3当量)HBTU，随后添加3. OmL在NMP中的2M(6当量)DIPEA。使用微波功率QO瓦特，最高温度75°C )，伴以速率如去保护步骤中那样相同的氮鼓泡过程，偶联步骤进行5分钟时间。随后将反应容器排干以废弃并且重复偶联步骤。Fmoc-Cys(Trt)-OH的偶联操作方案是标准操作方案的略微修改形式。对于Cys 残基，头两分钟不施加微波功率。随后是一个4分钟时段的微波功率(20瓦特，最高温度 50°C)。在整个顺序中自始至终使用双偶联策略，类似地导入全部氨基酸。所述标题肽片段在首个Ser之后的合成循环如下循环2，Fmoc-Lys (Boc) -OH ；循环3，Fmoc-Ala-OH ；循环 4，Fmoc-Pro-OH ；循环 5，Fmoc-Lys (Boc) -OH ；循环 6，Fmoc-Leu-OH ；循环 7，Fmoc-Pro-OH ； 循环 8，Fmoc-Ala-OH ；循环 9，Fmoc-Cys (Trt) -OH ；循环 10，Rnoc-Tyr (tBu)-OH ；循环 11， Fmoc-Asn (Trt) -OH ；循环 12，Fmoc-Glu (OtBu) -OH ；和循环 13，Fmoc-Leu-OH。一旦初始肽片段完成，使用DMF作为溶剂，将树脂转返至50-mL锥形管。将该树脂人工地平均分成放入4支50-mL锥形管的4份样品，其中所述锥形管随后放回至合成仪中。 标题肽的剩余部分以0. 25毫摩尔规模合成。所用的操作方案与用于更大规模合成的操作方案相同，然而使用较少量的试剂。移去N端Fmoc保护基由采用含有IOmL在DMF中20% 哌啶和0. IM HOBt的溶液处理组成。微波功率G5瓦特，最高温度75°C )伴随氮鼓泡(开启3秒，关闭7秒)的初始去保护步骤持续30秒。随后将反应容器排干并且用DMF彻底洗涤树脂几次。随后将被制备为DMF中0. 2M母液的下一个氨基酸(循环14)导入(5mL，4当量)至正在生长的肽(Fmoc-Gln (tBu)-0H)。然后添加2. OmL的在DMF中的0. 45M(4当量) HBTU溶液，随后添加1. OmL的在NMP中的2M(8当量)DIPEA溶液。Fmoc-Cys (Trt) -OH和Fmoc-Arg (Pbf) -OH的偶联操作方案是标准操作方案的略微修改形式。为偶联Cys残基，起初在头2分钟关闭微波功率，随后开启4分钟(20瓦特，最高温度50°C)。为偶联Arg残基，在第一偶联中不使用微波功率，然而，需要第二标准偶联步骤。循环14、16和21使用偶联步骤后立即进行加帽方法，所述加帽方法包括添加均在NMP 中的7mL含有0. 015M HOBt的0. 5M乙酸酐和2mL的2M DIPEA，同时使用一个多步骤微波操作方案(50瓦特30秒，最高温度65°C，随后停止功率30秒；50瓦特30秒，最高温度65°C，随后停止功率30秒)。标题肽片段在Gln之后的合成循环如下循环15，Fmoc-Arg (Pbf) -OH ； 循环 16，Leu-OH ；循环 17，Fmoc-Asp (OtBu) -OH ；循环 18，Fmoc-Cys (Trt) -OH ；循环 19， Fmoc-Ser (tBu) -OH ；循环 20，Fmoc-Arg (Pbf) -OH ；循环 21，Fmoc-Phe-OH ；和循环 22， Fmoc-Cys(Trt)-OH0在肽主链完成后，移去N端Fmoc保护基并且用DMF再次洗涤树脂。随后使用DMF 作为转移溶剂，将树脂转移返回至50-mL锥形管。树脂用烧结玻璃器(sintered glass frit)转移至反应容器中。移去DMF并且用 DCM充分洗涤树脂。通过用以下试剂处理，将肽片段切割并去保护5% TIS 5%水90% TFA。允许反应在室温继续进行3小时，伴以恒定振摇。随后将溶液过滤至50mL锥形管中。 通过氮气流蒸发减少TFA。通过添加40mL冷乙醚随后在冷冻离心机(Sorvall Legend RT; Thermo Fisher, San Jose, CA, USA)内在4°C以3000转/分钟离心30分钟，使肽片段沉淀。 所得到的沉淀物溶解于0. TFA水中，随后使用50分钟0-60%乙腈(0. TFA)的梯度， 流速IOmL/分钟，通过配备C18反相柱(Luna, 10 μ m, 250 χ 21. 2mm柱)的制备性HPCL纯化。通过具有30分钟的流速ImL/分钟的5-80%乙腈(0. 08% TFA)梯度的HPLC (Luna C18，3ym,4. 6 X IOOmm 柱)并且通过质谱法(LCQ Advantage ；Thermo Fisher, San Jose, CA, USA)分析所纯化的肽片段。随后将肽片段冻干并且贮藏在-50°C待进一步使用。B)hIGF-l (1-47)-硫酯，BP, Gly-Pro-Glu-Thr-Leu-Cys-Gly-Ala-Glu-Leu-Val-A sp-Ala-Leu-Gln-Phe-Val-Cys-Gly-Asp-Arg-Gly-Phe-Tyr-Phe-Asn-LyS-Pro-Thr-Gly-Ty r-Gly-Ser-Ser-Ser-Arg-Arg-Ala-Pro-Gln-Thr-Gly-I Ie-Val-Asp-Glu-Cys-硫酉旨-丙酰基-Leu-NH2 (SEQ ID NO 52)的肽片段合成使用基于Boc化学的固相肽合成法，装配N端肽片段，S卩，hIGF-Ι的第1_47残基。将调节成运行标准I^astBoc操作方案的ABI 433A肽合成仪(Applied Biosystems ； Foster City, CA, USA)用于 0. 5 毫摩尔规模合成。将含有 0. 645mg 的 0. 77meq/g 的 Tampal 树脂的反应容器安置于该合成仪上。为使树脂溶胀，导入DMF。使用ABI FastBoc 0.5 操作方案来产生所述片段。每个循环由用纯TFA去除封闭N端Boc保护基随后用DMF 充分洗涤组成。将预装填的2. O毫摩尔G当量)小柱的每种氨基酸随后溶解于0.40M HBTU和DMF中。在完全溶解每种氨基酸后，将溶液自动转移至活化容器。将DIPEA溶液(纯的)导入该活化容器并且暴露于所述树脂持续延长的时间段。将反应容器排空并且用DMF洗涤树脂。对于Arg/Asn小柱，要求延长的活化时间以确保溶解度。此外， 在解封闭操作方案之前和之后，用DCM洗去偶联Gln残基后立即添加的任何氨基酸。偶联时间是30分钟。以下氨基酸用于标题肽片段=Boc-ArgCTos)-OH、Boc-Asp (cHex)-0H, Boc-Glu (cHex)-OH、Boc-Asn(Xan)-OH, Boc-Cys (4Me_Bz 1)-OH、Boc-Lys (ClZ)-OH、 Boc-Gln-OH、Boc-Ser (OBzl) -OH、Boc-Thr (OBzl) -OH 和 Boc-Tyr (BrZ) _0H。在最末偶联循环后，树脂用DCM洗涤并且干燥。将肽片段去保护并且利用IOmL氟化氢和苯甲醚处理，从树脂切下。允许该反应继续进行70分钟，在此刻用氮气流吹去氟化氢。残余物用醚洗涤并且随后将肽溶解于10-15ml的TFA中。通过滤过TFA至40mL冷乙醚中，随后在冷冻离心机(Sorvall Legend RT ；Thermo Fisher, San Jose，CA，USA)内在 4°C 以3000转/分钟离心30分钟，使肽片段沉淀。所得到的沉淀物溶解于0. 1 % TFA水中，并且使用120分钟的20-40%乙腈(0. 1% TFA)的梯度，流速IOmL/分钟，通过配备C18反相柱(Luna，10ym，250 χ 21. 2mm柱)的制备性HPCL纯化。通过30分钟伴以流速ImL/分钟的 5-80% 乙腈(0. 08% TFA)梯度的 HPLC (Luna C18,3ym,4. 6 χ IOOmm 柱)并且通过质谱法(LCQ Advantage ；Thermo Fisher, San Jose, CA, USA)分析所纯化的肽片段。随后将肽片段冻干并且贮藏在-50°C待进一步使用。C)总体连接方法通过化学连接方法构建天然存在于N端硫酯片段例如hIGF-1 (1-47) _S_ (CH2) 2C (0 )-Leu-NH2 (SEQ ID NO :52)和在其N末端含有半胱氨酸残基的C端片段例如(Gln56，Asn59) hIGF-1 (48-70)-OH(SEQ ID NO :51)之间的全长 hIGF-1 类似物。为开始用于标题肽的过程，将5. 5mg的C端hIGF-Ι片段溶解于1. 5_mL eppendorf 管中的0. 5mL连接缓冲液QOOmM磷酸钠，pH 8.5，6M盐酸胍)内。向该溶液添加IOOyL 的TCEP溶液GOmg/mL)，并且涡旋混合该混合物。将所述混合物转移至含有6. 5mg的N端 hIGF-Ι硫酯片段的第二印pendorf管。将反应物彻底地混合。取出少量样品(5 μ L)并且通过 LC-MS (LCQ Deca XP ；Thermo Fisher, San Jose, CA, USA)进行分析。向反应混合物添加100 μ L的MPAA溶液(20mg/mL)，随后混合。定期吸取样品(5 μ L)以使用LC-MS跟踪反应的进程。在大约3. 5小时后反应接近完成时，通过添加9. 5mL的0. 1 % TFA水使混合物猝灭并且稀释。通过采用40分钟的流速5mL/分钟的5-80%乙腈(0. 1 % TFA)梯度的 SemiPr印-HPLC(Vydac 218TP101510，C18，10-15 μ m，10X 250mm)纯化连接产物。将产物峰冻干并且贮藏在_50°C。通过物理测量测定未折叠的连接产物的质量。P)用于实施例 14, g卩(GlnM, Asn52)hIGF-1 (1-70)-OH (SEQ ID NO :14)的总体折叠方法(谷胱甘肽氧化还原对)将通过如上文所述的步骤C)的连接过程所制备的蛋白质溶解于连接缓冲液 QOOmM磷酸钠，pH 8. 5，6M盐酸胍)中至浓度lmg/mL。随后添加折叠缓冲液(IOOmM Tris, PH 8. 5，ImM氧化型谷胱甘肽，IOmM还原型谷胱甘肽)以使得最终蛋白质浓度至0. 25mg/mL。 允许该折叠过程发生超过3小时。此后，通过逐滴添加TFA直至反应混合物达到pH彡3而使反应猝灭。随后通过采用40分钟的流速5mL/分钟的5-60%乙腈(0. 1% TFA)梯度的 SemiPrep-HPLC(Vydac 218TP101510, C18，10-15 μ m，10X 250mm 柱)纯化产物。将产物冻干。通过使产物再溶解于0. TFA水中，随后在^Onm测量吸光度(NanoDrop ND1000分光光度计)来确定蛋白质含量。随后分析该蛋白质用于质量控制。 E)用于从实施例 7:gP, (Ser-Gly1, AsnM)hIGF~l (1~70)-0H (SEQ ID NO :7)形成 (乙酵酰-Gly1, AsnM)hIGF-l (1-70)-OH(SEQ ID NO :53)的氧化方法通过0. 1 % TFA水中在^Onm的吸光度(NanoDrop ND1000分光光度计)来确定折叠的hIGF-Ι类似物的质量。将通过如上文所述的步骤D)的折叠过程所制备的蛋白质重溶解于50mM咪唑缓冲液(pH 7. 0)中至终浓度aiig/mL(2. 66 χ I(T4M)。添加溶解于咪唑缓冲液中的高碘酸钠(NaIO4) (4当量)并且轻轻地混合所得到的溶液。允许反应在室温进行， 而不进一步搅拌。5分钟后，通过添加10当量的乙二醇使反应猝灭。允许该混合物在室温静置15分钟。混合物用0.1% TFA水稀释至终体积10mL。随后通过持续40分钟伴以流速 5mL/ 分钟的 5-60% 乙腈(0. 1% TFA)梯度的 SemiPrep-HPLC (Vydac 218TP101510, C18, 10-15 μ m，10X 250mm柱)纯化产物。随后将产物冻干并且贮藏在_50°C直至需要。F)用于实施例 27，即，(β-Me-Cys47，Leu59)hIGF-1 (1-70)-OH(SEQ ID NO :19)的合成方法使用hIGF (1-46)-硫代-丙酰基-Leu-NH2 (SEQ ID NO 54)和 C 端片段，即 (β -Me-Cys47, Leu59) hIGF-1 (47-70) (SEQ ID NO :55)，通过天然化学连接作用装配标题蛋白质。将所述蛋白质硫酯(7. 4mg, 1. 45微摩尔)和C端片段(3. 8mg, 1. 38微摩尔)溶解于连接缓冲液(200mM 磷酸钠中的 6M 盐酸胍，pH 8. 5，400 μ L)和 TCEP (80 μ L，40mg/mL, pH 7) 中。添加MPAA催化剂(80 μ L，20mg/mL, pH 7)。采用30分钟的5-80 %乙腈(0. 1 % TFA)梯度，在具有 Luna C18(2)柱(5μπι，4· 6 χ 100mm)的 LCQ Deca XP LC-MS (Thermo Finnigan) 上监测反应进程。用dH20，0.1% TFA(ν/ν)使反应猝灭至稀释度1 10。将粗制混合物离心并且经过1. 0- μ m玻璃滤器以除去任何MPAA沉淀物。以流速5mL/分钟使用5_60 % B线性梯度40分钟在Vydac C18 (10 μ m，10X 250mm)上纯化全长蛋白质。将蛋白质通过UV光谱法(NanoDrop ND1000分光光度计)定量并且冻干待将来使用。将贮藏的蛋白质(1.811^，235纳摩尔)溶解于具有pH 8. 5的200mM H2PO4", 6M HCl 胍溶液中至浓度1. 0mg/mL。添加折叠缓冲液(IOOmM Tris，IOmM谷胱甘肽，ImM氧化型谷胱甘肽，PH 8. 5)至该溶液直至实现最终蛋白质浓度250 μ g/mL。允许该混合物在室温孵育15分钟，同时通过HPLC监测。一旦达到平衡(通过平稳的HPLC曲线所示)，通过在乙酸或 TFA中搅拌或使该溶液至pH3，使反应猝灭。首先使用1.0-μ m玻璃滤器并且随后使用半制备性柱，将溶液纯化。以流速5mL/分钟使用5_60% B线性梯度持续40分钟纯化折叠的蛋白质。将蛋白质通过UV(NanoDrop ND1000分光光度计)定量并且冻干。获得大约92 μ g纯化的产物，代表5%产率。通过Finnigan LCQ Advantage MAX MS验证蛋白质的质量。G)用于实施例 36, BP, (N-Me-Cysis, Nle52)hIGF-1 (1-70)-OH(SEQ ID NO :28)的合成方法使用hIGF(l-47)_ 硫代-丙酰基-Leu-NH2 (SEQ ID NO 52)和 C 端片段，即 (N-Me-Cys48, Nle59)hIGF-1 (48-70) (SEQ ID NO :56)，利用天然化学连接作用装配标题蛋白质。将所述蛋白质硫酯(4.;3mg，8M纳摩尔)和C端片段(2. lmg，790纳摩尔)溶解于连接缓冲液(400 μ L，200mM 磷酸钠中的 6M 盐酸胍，pH 8. 5)和 TCEP (80 μ L，40mg/mL, pH 7)中。 添加 MPAA 催化剂(80μ L，20mg/mL，pH 7)。使用具备 Luna C18(2)柱(5 μ m，4.6 χ 100mm) 的Finnigan LCQ Deca XP LC-MS监测反应进程，所述的Luna C18(2)柱具有30分钟的 5-80%乙腈(0. 1% TFA)梯度。用dH20，0· 1% TFA (ν/ν)使反应猝灭至稀释度1 10。将粗制混合物离心并且经过1. 0 μ m玻璃滤器以除去任何MPAA沉淀物。使用40分钟的流速 5mL/分钟的5-60% B线性梯度的Vydac C18 (10 μ m，10X 250mm)，纯化全长蛋白质。将蛋白质通过UV(NanoDrop ND1000分光光度计)定量并且冻干待将来使用。使用200mM H2PO4", 6M HCl胍溶液(pH 8.幻，溶解贮藏的蛋白质直至实现1. Omg/ HiL浓度。添加折叠缓冲液(IOOmM Tris，IOmM谷胱甘肽，ImM氧化型谷胱甘肽，pH 8.5)至该溶液直至实现最终蛋白质浓度250 μ g/mL。允许该混合物在室温孵育，同时通过HPLC监测。一旦达到平衡(通过平稳的HPLC曲线所示)，反应用乙酸或TFA酸化至pH 3而猝灭。 首先使用1. O-μ m玻璃滤器并且随后使用半制备性柱，将溶液纯化。以流速5mL/分钟使用5_60% B线性梯度持续40分钟纯化折叠的蛋白质。将蛋白质通过UV(NanoDrop ND1000分光光度计)定量并且冻干。获得大约0. 415mg纯化的产物， 代表10. 6%产率。通过Finnigan LCQ Advantage MAX MS验证蛋白质的质量。本发明的其他肽可以由本领域技术人员使用类似于前述实施例中所公开的那些合成方法制备。表1中给出本文例举的化合物的物理数据。表 权利要求
1.式⑴的IGF-I类似物，H-A"1--A1-A2-Ai'-A4-A5--A6-A7-Aib-a9-A10-A11-A12--A13--A14--A15--A16--A17--A18--A19--A20--A21--A22-A24-_A25_A26.-A27-A28--A29--A30--A31-A32--A33--A34--A35--A36--A37--A38--A39--A40--A41--A42--A43--A44--A45--A46--A'A48-R1，-A49-A50--A51-A52--A53--A54--A57--A58--A59--A60--A61--A62--A63--A64--A65--A66--A67--A68--A69--A70--A'(I)其中A—1是Met、Ser或被缺失；A1 是 Gly、Ala、Asn、Asp、Gin、Glu 或被缺失；A2 是 Pro、Ala、Arg、Asp、Gin、Glu、Lys 或被缺失；A3 是 Glu、Ala、Asp、Gln 或被缺失；A4 是 Thr> Ala、Asn、Asp、Gin、Glu、Ser ；A5 是 Leu、Acc、Ala、lie 或 Val ；A6 是 Cys、D-Cys、hCys、D_hCys、β -Me-Cys,D- β -Me-Cys,N-Me-Cys,D-N-Me-Cys, Ala, Pen 或 D-Pen ；A7 是 Gly、Ala、Asn、Asp、Gln 或 Glu ；A8 是 Ala、Arg、Asn、Asp、Gin、Glu 或 Lys ；A9 是 Glu、Ala、Asp 或 Gln ；A10 是 Leu、Acc、Ala、lie 或 Val ；A11 是 Val、Ala、lie 或 Leu ；A12 是 Asp、Ala、Arg、Asn、Gin、Glu 或 Lys ；A13 是 Ala、Asn、Asp、Gin、Glu、lie、Leu 或 Val ；A14 是 Leu、Acc、Ala、lie 或 Val ；A15 是 Gin、Ala、Asn、Asp 或 Glu ；A16 是 Phe> Ala、Asn、Asp、Gin、Glu、Trp 或 Tyr ；A17 是 Val、Ala、lie 或 Leu ；A18 是 Cys、D-Cys、hCys、D_hCys、β -Me_Cys、D-β -Me-Cys、N-Me-Cys、D-N-Me_Cys、Ala、 Pen 或 D-Pen ；A19 是 Gly、Ala、Asn、Asp、Gln 或 Glu ； A20 是 Asp、Ala、Asn、Gln 或 Glu ； A21 是 Arg、Ala、Asn、Asp、Gin、Glu 或 Lys ； A22 是 Gly、Ala、Asn、Asp、Gln 或 Glu ； Am 是 Phe、Ala、iTrp 或 Tyr ； Am 是了71·、Ala、Phe 或 Trp ； Am 是 PhedlaJrp 或 Tyr ； A26 是 Asn、Ala、Asp、Gin、Glu、Ser 或 Thr ； A27 是 Lys> Ala、Arg、Asn、Asp、Gin、Glu 或 Pro ； A28 是 Pro、Ala、Arg 或 Lys ； A29 是 Thr、Ala、Asn、Asp、Gin、Glu 或 Ser ；A30 是 Gly、Ala、Asn、Asp、Gln 或 Glu ；A31 是 Tyr、Ala、Phe 或 Trp ；A32 是 Gly、Ala、Asn、Asp、Gln 或 Glu ；A33 是义！·、Ala、Thr 或 Val ；A34 是 Ser、Ala、Asn、Asp、Gin、Glu 或 Thr ；A35 是 Ser、Ala、Asn、Asp、Gin、Glu 或 Thr ；A36 是 Arg、Ala、Asn、Asp、Gin、Glu 或 Lys ；A37 是 Arg、Ala、Asn、Asp、Gin、Glu 或 Lys ；A38 是 Ala、Asn、Asp、Gln 或 Glu ；A39 是 Pro、Ala、Arg 或 Glu ；A40 是 Gin、Ala、Asn、Asp 或 Glu ；A41 是 Thr、Ala、Asn、Asp、Gin、Glu 或 Ser ；A42 是 Gly、Ala、Arg、Asn、Asp、Gin、Glu 或 Lys ；A43 是 lie、Ala、Arg、Asn、Asp、Gin、Glu 或 Lys ；A44 是 Val、Ala、Arg、Asn、Asp、Gln、Glu、lie、Leu 或 Lys ；A45 是 Asp、Ala、Arg、Asn、Gin、Glu 或 Lys ；A46 是 Glu、Ala、Arg、Asn、Asp、Gln 或 Lys ；A47 是 Cys、D-Cys、hCys、D_hCys、β -Me_Cys、D-β -Me-Cys、N-Me-Cys、D-N-Me_Cys、Ala、 Pen 或 D-Pen ；A48 是 Cys、D-Cys、hCys、D_hCys、β -Me_Cys、D-β -Me-Cys、N-Me-Cys、D-N-Me_Cys、Ala、 Pen 或 D-Pen ；A49 是 Phe> Ala、Arg、lie、Leu、Lys> Ser> Thr> Trp> Tyr 或 Val ；A50 是 Arg、Ala、Lys, Ser 或 Thr ；A51 是 kr、Aib、Ala、Arg、Lys 或 Thr ；A52 是 Cys、D-Cys、hCys、D_hCys、β -Me_Cys、D-β -Me-Cys、N-Me-Cys、D-N-Me_Cys、Ala、 Pen 或 D-Pen ；A53是 Asp、Ala、Arg、Asn、Gin、Glu、Lys> Ser 或 Thr ；A54是 Leu、Acc、Ala、lie 或 Val ；A55是 Arg、Ala、lie、Leu、Lys、Phe、Trp、Tyr 或 Val ；A56是 Arg、Ala、Asn、Asp、Gin、Glu 或 Lys ；A57是 Leu、Acc、Ala、Ile 或 Val ；A58是 Glu、Acc、Ala、Arg、Asn、Asp、Gln 或 Lys ；A59是 Acc、Ala、Arg、Asn、Asp、Gin、Glu、lie、Leu、Lys> Nle、Ser> D-Ser> Thr> Trp> Tyr或 Val ；A60 是 Tyr、Ala、Phe 或 Trp ；A61 是 Cys、D-Cys、hCys、D_hCys、β -Me_Cys、D-β -Me-Cys、N-Me-Cys、D-N-Me_Cys、Ala、 Pen 或 D-Pen ；A62 是 Ala、Asn、Asp、Gin、Glu、lie、Leu 或 Val ； A63 是 Pro、D-Pro、Ala、Ser, Thr 或被缺失；A64 是 Leu、D-Leu> des-Leu、Ala、lie、Val 或被缺失；A65 是 Lys> D-Lys> des-Lys、Ala、Arg、lie、Leu、Val 或被缺失；A66 是 ftx)、D-Pro、Ala 或被缺失；A67 是 Ala、D-Ala, Aib 或被缺失；八68是1^8、0-1^8、六1&、六『8、116、1^11、￥31 或被缺失；A69 是 Ser、D-Ser, Aib、Ala、Thr 或被缺失；A70 是 Ala、D-Ala, Asn、Asp、Gin、Glu 或被缺失；八71是六811、六1&、六8 、6111、6111、1^8、^51·、！!^ 或被缺失；并且R1 是 OH 或 Ml2 ；条件是残基对A6和A48、A47和A52、以及A18和A61的侧链各自形成二硫键；并且进一步地条件是当A59是Leu、lie、Nle、Thr或Val时，则所述类似物含有至少一个额外的氨基酸替换或添加； 或其可药用盐。
2.根据权利要求1所述的IGF-I类似物，其中A—1是Met、Ser或被缺失；A1是Gly或被缺失；A2是ftx)、Lys或被缺失；A3是Glu或被缺失；A4 是 Thr ；A5 是 Leu ；A6 是 Cys、hCys、β -Me-Cys, N-Me-Cys 或 Pen ；A7 是 Gly ；A8 是 Ala ；A9 是 Glu ；A10 是 Leu ；A11 是 Val ；A12 是 Asp ；A13 是 Ala ；A14 是 Leu ；A15 是 Gln ；A16 是 Wie ；A17 是 Val ；A18 是 Cys、hCys、β -Me-Cys, N-Me-Cys 或 Pen ；A19 是 Gly ；A20 是 Asp ；A21 是 Arg ；￥2是617 ；A23 是 Wie ；A24 是 Tyr ；A25 是 Wie ； A26 是 Asn ；A27 是 Lys、Arg 或 Pro ； A28 是 Pro 或 Lys ； A29 是 Thr A30 是 Gly A31 是 TyrA33 是 kr A34 是 kr A35 是 Ser A36 是 Arg A37 是 Arg V8 是 Ala A39 是 ftx) A40 是 Gln A41 是 Thr A42 是 Gly A43 是 Ile A44 是 Val A45 是 Asp A46 是 GluA47 是 Cys、hCys、β -Me-Cys, N-Me-Cys 或 Pen ； A48 是 Cys、hCys、β -Me-Cys, N-Me-Cys 或 Pen ； A49 是 Phe、Arg、Leu 或 Thr ； A50 是 Arg 或 Ser ； A51 是&1·、Aib、Arg 或 Thr ； A52 是 Cys、hCys、β -Me-Cys, N-Me-Cys 或 Pen ； A53 是 Asp、Arg 或 Ser ； A54 是 Leu 或 A6c A55 是 Arg 或 Tyr A56 是 Arg 或 Gln A57 是 Leu ； A58 是 Glu 或 Arg ；A59 是 A6c、Arg、Asn、Asp、Gln、Glu、lie、Leu、Nle、Ser、D-Ser、Trp 或 Tyr A60 是 Tyr 或 Phe ；A61 是 Cys、hCys、β -Me-Cys, N-Me-Cys 或 Pen ；A62 是 Ala 或 Asn ；A63 是 Pro、D-Pro, Thr 或被缺失；A64 是 Leu、D-Leu、des-Leu 或被缺失；A65 是 Lys、D-Lys、des-Lys、Arg 或被缺失；A66是ft·。、D-Pro或被缺失；A67 是 Ala、D-Ala, Aib 或被缺失；A68 是 Lys、D-Lys、Arg 或被缺失；A69 是 Ser、D-Ser, Aib、Thr 或被缺失；A70是Ala、D-Ala, Glu或被缺失；并且A71 是 Asp、Glu、Lys, Ser 或被缺失；或其可药用盐。
3.根据权利要求2所述的IGF-I类似物，其中所述类似物是(Asn59)hIGF-l(l-70)-OH;(SEQ ID ΝΟ:1)(Asn59)hIGF-l(l-62)-OH;(SEQ ID NO:2)(Asn59)hIGF-l(4-70)-OH；(SEQ ID NO:3) (Pro27, Lys28, Asn59)hIGF-l(l-70)-OH； (SEQ ID NO:4) (Pro27，Lys28, Asn59)hIGF-l(l-62)-OH; (SEQ ID NO:5)(Ser53, Asn59)hIGF-l(l-70)-OH;(SEQ ID NO:の(Ser-Gly1, Asn59)hIGF-l(l-70)-OH；(SEQ ID NO:7) (Asn59, Thr63, des-Leu64, des-Lys65, Glu70)hIGF-l(l-70)-OH; (SEQ ID NO:8)(Tyr55, Asn59)hIGF-l(l-70)-OH；(SEQ ID NO:9)(Thr49，Asn59)hIGF-l(l-70)-OH；(SEQ ID NOrlO)(Asn59 62)hIGF-l(l-70)-OH;(SEQ ID NO:ll)(Asn59, Phe60)hIGF-l(l-70)-OH;(SEQ ID NO:12)(Ser50, Asn59)hIGF-l(l-70)-OH；(SEQ ID NO:13)(Gin56, Asn59)hIGF-l(l-70)-OH;(SEQ ID NO:14) (Asn59, D-Pro63)hIGF-l(l-70)-OH； (Asn59, D-Leu64)hIGF-l(l-70)-OH； (Asn59, D-Lys65)hIGF-l(l-70)-OH； (Asn59, D-Pro66)hIGF-l(l-70)-OH； (Asn59, D-Ala67)hIGF-l(l-70)-OH； (Asn59, D-Lys68)hIGF-l(l-70)-OH； (Asn59, D-Ser69)hIGF-l(l-70)-OH; (Asn59, D-Ala70)hIGF-l(l-70)-OH；(Arg27 65 68，Leu59)hIGF-l(l-70)-OH;(SEQ ID NO: 15)(Leu59, Arg65 68)hIGF-l(l-70)-OH；(SEQ ID NO: 16)(Leu49' 59)hIGF-l(l-70)-OH；(SEQ ID NO: 17)(P-Me-Cys52, Leu59)hIGF-l(l-70)-OH；(SEQ ID NO:18)(P-Me-Cys47, Leu59)hIGF-l(l-70)-OH；(SEQ ID NO:19)(Leu59, Glu71)hIGF-l(l-71)-OH；(SEQ ID N0:20)(Leu59, Asp71)hIGF-l(l-71)-OH；(SEQ ID NO:21)(Leu59, Lys71)hIGF-l(l-71)-OH；(SEQ ID NO:22)(Leu59, Ser71)hIGF-l(l-71)-OH；(SEQ ID NO:23)(Leu59, Thr69)hIGF-l(l-70)-OH;(SEQ ID NO:24)(Thr51, Leu59)hIGF-l(l-70)-OH;(SEQ ID NO:25)(N-Me-Cys475 Nle59)hIGF-l(l-70)-OH；(SEQ ID NO:26)(Nle59，Aib69)hIGF-l(l-70)-OH；(SEQ ID NO:27)(N-Me-Cys48, Nle59)hIGF-l(l-70)-OH;(SEQ ID NO:28)(Nle59, Aib67)hIGF-l(l-70)-OH;(SEQ ID NO:29)(hCys52, Nle59)hIGF-l(l-70)-OH;(SEQ ID N0:30)(Aib51’ Nle59)hIGF-l(l-70)-OH;(SEQ ID NO:31)(Pen52, Nle59)hIGF-l(l-70)-OH；(SEQ ID NO:32)(Nle59, Pen61)hIGF-l(l-70)-OH；(SEQ ID NO:33)(A6c54’ Nle59)hIGF-l(l-70)-OH;(SEQ ID NO:34)(Arg53, Ile59)hIGF-l(l-70)-OH；(SEQ ID NO:35)(Arg49，Ile59)hIGF-l(l-70)-OH；(SEQ ID NO:36)(Arg51，Ile59)hIGF-l(l-70)-OH；(SEQ ID NO:37)(Arg58, Ile59)hIGF-l(l-70)-OH;(SEQ ID NO:38)(A6c59)hIGF-l(l-70)-OH；(SEQ ID NO:39)(Asp59)hIGF-l(l-70)-OH;(SEQ ID N0:40)(Trp59)hIGF-l(l-70)-OH;(SEQ ID NO:41)(Ser59)hIGF-l(l-70)-OH;(SEQ ID NO:42)(Tyr59)hIGF-l(l-70)-OH;(SEQ ID NO:43)(Glu59)hIGF-l(l-70)-OH；(SEQ ID NO:44)(Gln59)hIGF-l(l-70)-OH；(SEQ ID NO:45)(Arg59)hIGF-l(l-70)-OH;或(SEQ ID NO:46)(Met-Gly1，Asn59)hIGF-l(l-70)-OH; (SEQ ID NO:47)或其可药用盐。
4.根据权利要求2所述的IGF-I类似物，其中A59是Asn；或其可药用盐。
5.根据权利要求4所述的IGF-I类似物，其中所述类似物是 (Asn59)hIGF-l(l-70)-OH;(SEQ ID NO:1)(Asn59)hIGF-l(l-62)-OH;(SEQ ID NO:2)(Asn59)hIGF-l(4-70)-OH;(SEQ ID NO:3)(Pro27, Lys28, Asn59)hIGF-l (1-70)-OH；(SEQ ID NO:4)(Pro27, Lys28, Asn59)hIGF-l(l-62)-OH；(SEQ ID NO:5)(Ser53, Asn59)hIGF-l(l-70)-OH；(SEQ ID NO:6)(Ser-Gly1，Asn59)hIGF-l(l-70)-OH； (SEQ ID NO:7)(Asn59, Thr63, des-Leu64, des-Lys65, Glu70)hIGF-l(l-70)-OH；(SEQ ID NO:8)(Tyr55, Asn59)hIGF-l(l-70)-OH；(SEQ ID NO:9)(Thr49，Asn59)hIGF-l(l-70)-OH;(SEQ ID N0:10)(Asn59' 62)hIGF-l(l-70)-OH；(SEQ ID NO:ll)(Asn59, Phe60)hIGF-l(l-70)-OH；(SEQ ID NO: 12)(Ser50, Asn59)hIGF-l(l-70)-OH;(SEQ ID NO:13)(Gin56, Asn59)hIGF-l(l-70)-OH；(SEQ ID NO:14)(Asn59, D-Pro63)hIGF-l(l-70)-OH； (Asn59, D-Leu64)hIGF-l(l-70)-OH； (Asn59, D-Lys65)hIGF-l(l-70)-OH； (Asn59, D-Pro66)hIGF-l(l-70)-OH； (Asn59, D-Ala67)hIGF-l(l-70)-OH; (Asn59, D-Lys68)hIGF-l(l-70)-OH； (Asn59, D-Ser69)hIGF-l(l-70)-OH； (Asn59, D-Ala70)hIGF-l(l-70)-OH；或 (Met-Gly1, Asn59)hIGF-l(l-70)-OH;(SEQ ID NO:47)或其可药用盐。
6.根据权利要求2所述的IGF-I类似物，其中A59是Leu；或其可药用盐。
7.根据权利要求6所述的IGF-I类似物，其中所述至少一个更多的氨基酸替换或添加选自 Arg27, Arg65, Arg68, Leu49、β -Me-Cys47, β -Me-Cys52, Thr51, Thr69, Asp71、Glu71, Lys71 和 Ser71 ；或其可药用盐。
8.根据权利要求6或权利要求7所述的IGF-I类似物，其中所述类似物是 (Arg27 65 68, Leu59)hIGF-l(l-70)-OH；(Leu59, Arg65 68)hIGF-l(l-70)-OH；(Leu49 59)hIGF-l(l-70)-OH；(β-Me-Cys52, Leu59)hIGF-l(l-70)-OH;(β-Me-Cys47, Leu59)hIGF-l(l-70)-OH；Glu71)hIGF-l(l-71)-OH;Asp71)hIGF-l(l-71)-OH;Lys71)hIGF-l(l-71)-OH；Ser71)hIGF-l(l-71)-OH；Thr69)hIGF-l(l-70)-OH;Leu59)hIGF-l(l-70)-OH；(Leu59, (Leu59, (Leu59, (Leu59 (Leu59(Thr51或其可药用盐。
9.根据权利要求2所述的IGF-I类似物，其中A59是Nle；或其可药用盐。
10.根据权利要求9所述的IGF-I类似物，其中所述至少一个更多的氨基酸替换选自 Aib51, Aib67, Aib69, Pen52、Pen61、A6c54、N-Me-Cys47 和 N-Me-Cys48 ；或其可药用盐。
11.根据权利要求9或权利要求10所述的IGF-I类似物，其中所述类似物是(SEQ ID NO: 15) (SEQ ID NO:16) (SEQ ID NO: 17) (SEQ ID NO: 18) (SEQ ID NO:19) (SEQ ID N0:20) (SEQ ID NO:21) (SEQ ID NO:22) (SEQ ID NO:23) (SEQ ID NO:24)或 (SEQ ID NO:25)(N-Me-Cys47, Nle59)hIGF-l(l-70)-OH; (Nle59，Aib69)hIGF-l(l-70)-OH;(N-Me-Cys48, Nler^hIGF-I(UO)-OH; (Nle59, Aib67)hIGF-l(l-70)-OH； (hCys52, Nle59)hIGF-l(l-70)-OH; (Aib51，Nle59)hIGF-l(l-70)-OH; (Pen52, Nle59)hIGF-l(l-70)-OH； (Nle59, Pen61)hIGF-l(l-70)-OH；或 (A6c54, Nle59)hIGF-l(l-70)-OH;59(SEQ ID NO:26) (SEQ ID NO:27)(SEQ ID NO:28) (SEQ ID NO:29)(SEQ ID N0:30) (SEQ ID NO:31) (SEQ ID NO:32)(SEQ ID NO:33) (SEQ ID NO:34)或其可药用盐。
12.根据权利要求2所述的IGF-I类似物，其中A59是Ile；或其可药用盐。
13.根据权利要求12所述的IGF-I类似物，其中所述至少一个更多的氨基酸替换选自 Arg49, Arg51, Arg53 和 Arg58 ；或其可药用盐。
14.根据权利要求12或权利要求13所述的IGF-I类似物，其中所述类似物是 (Arg53，lie59) hIGF-1 (1-70)-OH; (SEQ ID NO :35)(Arg49, Ile59)hIGF-l (1-70)-OH ； (SEQ ID NO :36) (Arg51, Ile59)hIGF-l(l-70)-0H ；或(SEQ ID NO :37) (Arg58, Ile59)hIGF-l (1-70)-OH ； (SEQ ID NO :38) 或其可药用盐。
15.根据权利要求2所述的IGF-I类似物，其中A59是Arg、ASp、A6C、Gln、Glu、kr、Trp 或Tyr ；或其可药用盐。
16.根据权利要求15所述的IGF-I类似物，其中所述类似物是 (A6c59)hIGF-l(l-70)-OH；(SEQ ID NO:39)(Asp59)hIGF-l(l-70)-OH; (Trp59)hIGF-l(l-70)-OH；(Ser59)hIGF-l(l-70)-OH; (Tyr59)hIGF-l(l-70)-OH; (Glu59)hIGF-l(l-70)-OH; (Gln59)hIGF-l(l-70)-OH；或 (Arg59)hIGF-l(l-70)-OH;(SEQ ID N0:40) (SEQ ID NO:41)(SEQ ID NO:42) (SEQ ID NO:43) (SEQ ID NO:44) (SEQ ID NO:45) (SEQ ID NO:46)或其可药用盐。
17.药物组合物，其包含有效量的根据权利要求1-16任一项所述的类似物。
18.根据权利要求17所述的药物组合物，还包含可药用载体。
19.一种在有需求的受试者中从IGF-I受体激发激动剂效应的方法，所述方法包括施用治疗有效量的根据权利要求1-16任一项所述的类似物或根据权利要求17或权利要求18 所述的药物组合物至所述受试者。
20.一种用于治疗由IGF-I受体结合介导的病状或疾病的方法，包括步骤施用治疗有效量的根据权利要求1-16任一项所述的类似物或根据权利要求17或权利要求18所述的药物组合物至有需求的受试者。
21.一种用于治疗由胰岛素受体结合介导的病状或疾病的方法，包括步骤施用治疗有效量的根据权利要求1-16任一项所述的类似物或根据权利要求17或权利要求18所述的药物组合物至有需求的受试者。
22.一种用于治疗由抑制胰岛素样生长因子与一种或多种胰岛素样生长因子结合蛋白的结合作用所介导的病状或疾病的方法，包括步骤施用治疗有效量的根据权利要求1-16任一项所述的类似物或根据权利要求17或权利要求18所述的药物组合物至有需求的受试者ο
23.根据权利要求20-22中任一项所述的方法，其中所述病状或疾病选自身材矮小症、 肥胖症、体重减轻、恶病质、厌食、神经变性病、纤维化相关病状、软骨病症、骨病、炎性病症、 肠疾病、胰岛素抵抗、糖尿病、糖尿病酮酸中毒、Rabson-Mendenhall综合征、视网膜病、肢端肥大症、纤维肌性增生和心脏疾病。
24.权利要求23所述的方法，其中需要治疗身材矮小症的所述受试者是患有胰岛素样生长因子-1缺乏症(IGFD)的人类儿科受试者，其中所述施用有效治疗人类儿科受试者中的 IGFD。
25.权利要求M所述的方法，其中所述的人类儿科受试者表征如下在用根据权利要求1-16任一项所述的类似物或根据权利要求17或权利要求18所述的药物组合物治疗时或用其起始治疗之前，所述受试者已有或曾有低于相同年龄和性别的受试者的正常平均身高至少约2.0标准偏差(SD)的身高，并且在用根据权利要求1-16任一项所述的类似物或根据权利要求17或权利要求18所述的药物组合物治疗时或用其起始治疗之前，所述受试者已有或曾有低于相同年龄和性别的人类儿科受试者的正常平均水平至少约-ISD的IGF-I血液水平。
26.一种用于治疗患有特发性身材矮小症(ISQ的受试者的方法，包括步骤施用有效促进所述受试者中生长的量的根据权利要求1-16任一项所述的类似物或根据权利要求17 或权利要求18所述的药物组合物至患有以部分内源性生长激素活性或信号传导为特征的 ISS的人类儿科受试者，其中所述受试者进一步表征如下在用根据权利要求1-16任一项所述的类似物或根据权利要求17或权利要求18所述的药物组合物治疗时或用其起始治疗之前，所述受试者已有或曾有低于相同年龄和性别的受试者的正常平均身高至少约2.0标准偏差(SD)的身高，并且在用根据权利要求1-16任一项所述的类似物或根据权利要求17或权利要求18所述的药物组合物治疗时或用其起始治疗之前，所述受试者具有对于相同年龄和性别的受试者至少为正常的GH和IGF-I血液水平。
27.权利要求23所述的方法，其中所述神经变性病选自ALS、多发性硬化、肌营养不良、 糖尿病性神经病、脱髓鞘性周围神经病、帕金森病、阿尔茨海默病和创伤性脊髓损害后遗症。
28.权利要求23所述的方法，其中所述软骨病症是骨关节炎。
29.权利要求23所述的方法，其中所述骨病是骨质疏松症。
30.权利要求23所述的方法，其中所述炎性病症是类风湿性关节炎。
31.权利要求23所述的方法，其中所述糖尿病是I型或II型糖尿病。
32.权利要求23所述的方法，其中所述心脏疾病是动脉粥样硬化。
33.权利要求23所述的方法，其中所述纤维化相关病状是肝硬化、全身性硬化症或甲状腺眼病。
全文摘要
本发明涉及胰岛素样生长因子-1(IGF-1)的新类似物、含有所述类似物的药物组合物和所述类似物用于治疗IGF-1受体介导的病状如身材矮小症、糖尿病治疗、神经变性病治疗和软骨修复的用途。更具体地，本发明涉及IGF-1的新类似物，其具有在第59位置处的氨基酸替换，例如(Asn59)hIGF-1(1-70)-OH(SEQ ID NO1)，和如本文定义的其他替换。
文档编号A61K38/30GK102510757SQ201080041981
公开日2012年6月20日 申请日期2010年7月22日 优先权日2009年7月22日
发明者D·罗特曼, J·M·科姆斯托克, M·L·乌弗莱特, N·C·普莱利, 张俊东, 董正欣 申请人:益普生制药股份有限公司