专利名称：含有黄酮类的组合物的制备和使用方法
技术领域：
本发明涉及黄酮类的新颖的微颗粒和可溶的形式及其合成。本发明还包括这种黄酮类的新颖的制剂和生产该黄酮类制剂的新颖的方法。本发明还涉及该黄酮类制剂的各种应用。
背景技术：
黄酮类被认为可提供防癌作用的原理性植物衍生剂是黄酮类和膳食纤维(Patel，D, et al·，Apigenin and cancer chemoprevention:Progress，potential，and promise, Intl. J 0ncology2007Jan; 30 (I) :233-45)。化学预防是肿瘤学的 一个方面,其专注于通过自然存在的或合成的试剂来预防癌症。黄酮类已被证实可充当自由基清除剂、抗氧化剂、超氧阴离子、UV吸收剂和脂质过氧自由基。黄酮类化合物也已知能有效地强化胶原蛋白结构。此外，黄酮类已被证明可展示出抗诱变、抗炎和抗病毒的作用。所有黄酮类具有相同的基本化学结构，即三环分子。同族群中的各个黄酮类在取代基(羟基、甲氧基或糖类基团)的数量和位置方面各不相同。黄酮类具有如下通式(式I):
八jO
ry；黄酮类包括大约5000种自然存在的化合物。可发生大量的其他取代，产生了多种类型的黄酮类。皮肤癌皮肤癌的发展是一项主要的全球性公众健康威胁。紫外线如太阳紫外线B(UVB) 和太阳紫外线A(UVA)的辐射是皮肤癌的主要诱因。尽管具有高SPF成分的防晒霜的出现和使用，基底细胞癌、鳞状细胞癌和黑色素瘤的发病率仍持续上升。早期检测和治疗对于提高存活率是必要的，然而皮肤癌很大程度上是可预防的癌症。当前的防晒霜制剂已证明了不足以使人体完全免受UV辐射的DNA损害作用。当个体过度暴露于阳光下时，防晒霜的使用可能有时会造成安全的错觉。研究表明，黄酮具有抗氧化、抗诱变、抗癌、抗炎症、抗增殖和抗恶化的特性 (Patel, D, et al. , Apigenin and cancer chemoprevention:Progress, potential, and promise, Intl. J Oncology 2007Jan; 30 (I) : 233-45)。此外，Birt 及其团队用活体小鼠模型证明了在UVB照射前外用涂敷芹菜素可将皮肤癌的发病率显著地减少90%(Birt et al. , Anti-mutagenesis and anti-promotion by apigenin, robinetin and indole-3—car binol, Carcinogenesis, June 1986 ；7:959-963) 其他课题组已证明了芳:菜素的保护老鼠免受结肠癌的能力(Wang et al,Cell cycle arrest at G2/M and growth inhibition by apigenin in human cell colon carcinoma cell lines, Molecular Carcinogenesis, 28:
102-110(2000))o研究者已发现，芹菜素在细胞周期的Gl和G2/M阶段可诱导可逆的细胞周期阻滞。 还发现了芹菜素通过多种机制在细胞周期中介导抑制，包括对有丝分裂激酶P34cdc2的直接和间接的抑制，以及以依赖于P53的方式对细胞周期抑制剂p21WAFl的诱导(I^pley DM, et al. , The chemopreventative flavonoid apigenin induces G2/M arrest in keratin ocytes, Carcinogenesis, 17, 2367-75 (1996))。Gl/S和/或G2/M细胞周期检查点调控的丧失导致了转化和癌症发展。细胞周期的开始和发展主要受促使细胞增殖的原癌基因和用于减缓或中断细胞生长的抑癌基因的控制。原癌基因和/或抑癌基因中的突变会通过缩短花费在Gl或G2/M上的时间长度而使细胞易产生受损的G1/S检查点。
其他皮肤病Kang、Ecklund、Liu 和 Datta (Arthritis Research&Therapy 2009, Vol. 11)教导了增加诸如芹菜素等源于食用植物的C0X-2和NF- K B抑制剂的生物利用率可对抑制狼疮中的发炎和诸如银屑病等的其他Thl7介导的疾病很有意义。作为非诱变性食用黄酮类，芹菜素通过抑制针对自身反应性的Thl和Thl7细胞的扩张的自身抗原表达而抑制了狼疮。二甲基亚砜(DMSO)已被广泛用于活体研究中，作为包括芹菜素等的许多不溶于水的黄酮类的溶剂。然而，出于毒性的考虑，当考虑用于人类的外用制剂时，不推荐用二甲基亚砜作为溶剂。几乎所有的致力于抗皮肤癌外用治疗的芹菜素研究都用二甲基亚砜 (DMSO)来作为选择的溶剂,这是因为芹菜素在水(小于0. 005毫克/毫升(mg/ml))和其他水性溶剂中的溶解性较差(Li et al, Evaluation of Apigenin and[G-3H], Apigenin and analytical method development, J. of Pharmaceutical Sciences. Vol. 86, No.6, June 1997)。此外，许多黄酮类几乎不溶水和大致所有适用于药物、化妆品和食品添加剂的溶剂中，从而阻碍了其直接用作外用组合物的组分。因此，需要提供一些方法，通过利用可用于外用的、药物的、腹膜的、保健品和医疗食品应用的可接受成分来增强包括黄酮的这些黄酮类的生物利用率。其他疾病作为酚类化合物的典型特征，黄酮类可充当有效的抗氧化剂和金属螯合剂。它们也在很久之前就已被公认为具有抗炎、抗诱变、保肝、抗血栓、抗病毒和抗癌的活性。黄酮和儿茶酚是用于保护人体不受活性氧(ROS)侵害的非常有效的黄酮类。人体细胞和组织不断地受到由自由基和ROS引起的伤害的威胁，所述自由基和ROS在正常的氧代谢中产生，或者由外源损害所诱发。黄酮类在许多动物模型中的抗炎活性已被报导。 黄酮/黄酮类如芹菜素、木犀草素、山萘酚、槲皮素、杨梅酮、非瑟酮已被报导具有脂加氧酶 (LO)和环加氧酶(COX)的抑制活性(Jachak SM. Natural products:Potential source ofCOXinhibitors. CRIPS 2001;2 (I):12-15)。形成纳米颗粒的方法Petersen的美国专利申请US2010/0047297公开了用于外用化妆品制剂的化合物如芹菜素的纳米晶体。Liversidge等人的美国专利5145684公开了通过产生剪切、冲击、气蚀和磨耗力的机械手段来形成药物的纳米晶体的方法。Bosch等人的美国专利5510118类似地公开了通过产生剪切、冲击、气蚀和磨耗力的机械手段来形成药物的纳米晶体的方法。Muller等人的美国专利5510118公开了用于形成纳米颗粒悬浮液的高压均质化
方法。 美国专利4826689描述了固体的无定形颗粒的制备方法，其中在温度和注入速率的受控条件下向有机液体中的该固体的溶液中注入水性沉淀液，由此控制颗粒尺寸。固体材料的水性悬浮液可通过机械碎裂来制备,例如通过碾磨。美国专利5145684 描述了难溶化合物在水介质中的悬浮液的湿磨法。在本领域中已经知道，由沉淀直接得到的晶体分散体系会受到溶液搅动的影响。本领域公知各种搅动方法，例如机械混合、振动、微波处理和声波法(例如见于 W001/92293)。搅动可通过包括超声波搅动等的多种技术来实现。得到的晶体通常具有1_6 微米的质量中位直径。US 5314506描述了一种结晶化方法，其中将含有物质的溶液的喷射流与含有该物质的抗溶剂的另一喷射流相互撞击。相比于常规的缓慢结晶化方法，由撞击的喷射流产生的快速混合导致了所形成的晶体的缩小。所公开的最小晶体是大约3微米，而大多数在3 到20微米的范围内。EP 275607描述了一种方法，其中将超声波能量应用在液相中的晶体的悬浮液中， 并使用超声波来使预成型晶体碎裂。在通常情况下，所得晶体的体积平均直径为10到40 微米。WO 03/059319描述了小颗粒的形成，其中通过向模板水包油乳状液中加入溶解在与水不相溶的有机溶剂中的药物溶液，然后将该与水不相溶的有机溶剂蒸发掉。然后例如用喷雾干燥法除去水，获得粉末。美国专利6197349描述了一种形成无定形颗粒的方法，其中通过将结晶化合物熔融并将其与例如为磷脂的稳定剂混合，然后用高压均质化法在升高的温度下将该混合物分散至水中，之后降低温度。Doseff的PCT/US2006/020905公开了用芹菜素或其衍生物来治疗炎症的方法。Hammerstone的美国专利申请US 2008/0227829公开了用包括芹菜素的神经性化合物来治疗患者的方法。Park等人的美国专利申请US2007/0154540公开了使用芹菜素作为软骨再生剂来治疗骨关节炎。Bing-Hua等人的美国专利申请US2007/0189680公开了芹菜素与治疗剂相结合以用于化学预防和化学治疗。Lintnera等人的美国专利申请US2006/0067905公开了使用芹菜素作为血管扩张剂以用于治疗脱发。透明质酸(HA)透明质酸是广泛遍 布于结缔组织、上皮组织和神经组织中的带负电荷的、非硫酸化的糖胺聚糖。它在糖胺聚糖类中是独特的，因为它是非硫酸化的，在质膜中而不是在高尔基体中形成，并且它可以非常大，分子量通常可达到数百万。作为细胞外基质的主要成分中的一种，透明质酸可显著地促进细胞增殖和迁移。诸如HA的多糖是相对复杂的糖类。多糖是由许多单糖通过糖苷键结合起来而构成的聚合体。因此，糖苷键是较大的、通常为分枝状的大分子。多糖在化妆品和医药应用中很有用处。例如，HA在皮肤应用中被用作结构稳定化填充剂。Gervasio-Nugent等人的美国专利申请2005/0271692公开了含有黄酮类和透明质酸的外用化妆品组合物。Morariu的美国专利申请2006/021625公开了用于改善老化皮肤的外观的外用制剂及其使用方法。优选的组分包括例如芹菜素的黄酮类和透明质酸。表面活性剂聚山梨醇酯(商业上也称为吐温类)是衍生于聚乙氧基山梨聚糖和脂肪酸的非离子表面活性剂和乳化剂。它们通常用于食品和化妆品中，以使精油在水基产品中增溶。聚山梨醇酯是粘性的、水溶性的淡黄色液体。聚山梨醇酯还可通过减少待乳化物质的表面张力来有助于形成乳状液。聚山梨醇酯被公认具有这样的能力，即有助于一些成分溶解在它们通常情况下不能溶解的溶剂中。聚山梨醇酯用于分散水包油而不是油包水。通过将多元醇、山梨醇和环氧乙烷反应来制备聚山梨醇酯。聚氧乙烯山梨聚糖随后与从例如硬脂酸、月桂酸和油酸等的植物油脂中获得的脂肪酸进行反应。作为单纯(非聚乙二醇化的)山梨聚糖和脂肪酸的酯的表面活性剂通常称为司盘。Gupta的美国专利7329797公开了抗衰老化妆品输送系统，包括使用如芹菜素等黄酮类作为抗炎剂和使用聚山梨醇酯表面活性剂作为乳化剂的应用。Higuchi等人的美国专利申请2006/0229262公开了用于治疗具有耐药菌的传染病的药物组合物，包括作为活性成分的诸如芹菜素的黄酮类和作为乳化剂的聚山梨醇酯。研究已经证实，芹菜素在减缓哮喘发病的过程中起关键的作用。近来的流行病学研究报道了在黄酮类高摄入的人群中，明显观察到哮喘的低发病率。鉴于以上所述情况，非常希望将黄酮类、例如芹菜素和木犀草素等黄酮作为外用制剂的一部分以帮助预防和/或治疗由阳光暴晒作用导致的皮肤损害或皮肤癌，并且还提供可用于治疗各种皮肤病症状的皮肤治疗组合物。
发明内容
本发明涉及一种包含水合的微颗粒黄酮类和载体的组合物。通常情况下，该黄酮类在水中的溶解度小于lmg/ml,或小于O. lmg/mlo该微颗粒黄酮类的平均尺寸为200-500 纳米，或者有利的是平均尺寸为250纳米。在一个优选的实施方案中，该组合物是药物组合物，而所述载体是药学上可接受的载体。该组合物可包括透明质酸，而载体典型地包括可防止或减少微粒聚集的化合物、分散剂或促渗剂。在一个实施方案中，该组合物是胶体、纳米悬浮液或乳状液的形式。该组合物可以是营养食品、膳食补充剂、食品补充剂或者医疗食品O本发明的另一个实施方案涉及一种包含黄酮类和例如为表面活性剂的热稳定的黄酮类增溶化合物的组合物，其中所述组合物通过将该黄酮类和该化合物混合至使所述黄酮类溶解在所述化合物中的温度来形成。通常情况下，该组合物进一步包含选自乙醇、异丙醇和苯甲醇、乙氧基二甘醇和二甲基异山梨醇中的醇。在一个优选的实施方案中，该组合物是药物组合物，所述载体是药学上可接受的载体。该组合物可包含透明质酸和/或促渗剂。 在一个实施方案中，该组合物是乳状液或微乳状液的形式。该组合物可以是营养食品、膳食补充剂、食品补充剂或者医疗食品。本发明的另一个实施方案是用于透皮式施加黄酮类的膏药，该膏药由具有两个面的基片组成，第一面具有本发明的组合物和粘合剂，而另一面带有不能渗透到第一面上的组合物和粘合剂的材料。本发明的另一个实施方案是制备水合黄酮类的方法，包括将黄酮类与碱金属的氢氧化物混合，以形成碱金属黄酮类盐的水溶液；用酸性剂将碱金属黄酮类盐的水溶液酸化至pH值低于7，以形成水合黄酮类沉淀物，其中，酸化步骤通常在产生具有50-1000纳米、 更有利的是200-500纳米的平均尺寸且长宽比测得为大于20的纳米纤维的条件下进行。在酸化步骤之后可以是调节PH值至小于7和过滤沉淀物的步骤。然后可将沉淀物洗涤并干燥。本发明的另一个实施方案是制备水合黄酮类的方法，包括将黄酮类溶解在非毒性的有机溶剂中，以形成混合物；以及向混合物中添加水以形成水合黄酮类沉淀物，其中， 添加水的步骤在产生具有50-1000纳米、更有利的是200-500纳米的平均尺寸且长宽比测得为大于20的纳米纤维的条件下进行。通常情况下，溶解步骤在比有机溶剂的沸点低约 20°C的温度下进行。有机溶剂可选自二甲基异山梨醇、乙氧基二甘醇和二甲基亚砜。本发明的另一个实施方案是形成水合黄酮类的外用制剂的方法，包括将黄酮类与碱金属的氢氧化物在水中混合，以形成碱金属黄酮类盐溶液；将碱金属黄酮类盐溶液加入到皮肤病学上可接受的载体中；以及将该制剂的pH值调节至皮肤病学上可接受的pH值 (例如4-8)，其中，pH值调节步骤在产生具有50-1000纳米的平均尺寸的黄酮类纳米纤维的条件下进行。本发明的另一个实施方案是制备水合黄酮类的外用制剂的方法，包括将黄酮类溶解在醇中；将醇溶解的黄酮类加入到皮肤病学上可接受的载体中；调节该制剂的PH值至皮肤病学上可接受的pH值(例如4-8)，其中，调节pH步骤在产生具有50-1000纳米的平均尺寸的黄酮类纳米纤维的条件下进行。一种制备黄酮类外用制剂的方法，包括将黄酮类加入到乳状液载体中，以形成混合物；加热(例如至大约120° F-170° F)该混合物，直到其具有与水近似的粘度(或者是可以获得分散体系的粘度)；在混合物中形成微粒的分散体系。通常情况下，该乳状液是水包油或者油包水的乳状液，并且该乳状液含有稳定剂、分散剂或表面活性剂，或者另外的稳定齐U，以抑制微粒的聚集。在一个实施方案中，形成分散体系的步骤通过超声处理或高压均质化来完成。
本发明的另外一个实施方案是制备增溶的黄酮类组合物的方法，包括将黄酮类颗粒与诸如表面活性剂的热稳定的黄酮类增溶化合物混合，以形成混合物；加热该混合物至使黄酮类颗粒溶解的温度；以及冷却溶液。在一个优选的实施方案中，热稳定的黄酮类增溶化合物是非离子表面活性剂。通常情况下，在加热混合物的时候进行搅拌，并且添加多达 10wt%的黄酮类化合物。在一个优选的实施方案中，表面活性剂是聚山梨醇酯。在加热或冷却步骤之后是将溶液加入到皮肤病学的、口服的、可注射的、皮肤膏药或者气雾剂载体中的步骤。通常情况下，向溶液中加入小支链的醇以形成粘度减小的溶液，该醇选自乙醇、异丙醇、苯甲醇、乙氧基二甘醇和二甲基异山梨醇。本发明还涉及一种减少和/或防止阳光暴晒后果的方法，包括涂敷治疗有效量的防晒霜制剂于皮肤上，该防晒霜包含水合的或增溶的黄酮类，以及可使黄酮类传输至云角质和上皮的载体。在另一个实施方案中，该制剂还含有矿物氧化物，以提供额外的紫外线阳光暴晒保护。在另一个实施方案中，本发明涉及治疗阳 光暴晒后果的方法，包括在阳光损害的皮肤上涂敷治疗有效量的制剂，该制剂含有水合的或增溶的黄酮类，以及可使黄酮类输送至云角质和上皮的载体。在另一个实施方案中，本发明涉及减少哺乳动物患癌症的可能性或治疗哺乳动物的癌症的方法，包括对需要这种治疗的哺乳动物给予预防性剂量或治疗有效量的本发明的制剂。在另一个实施方案中，本发明涉及治疗哺乳动物的炎症的方法，包括对需要这种治疗的哺乳动物给予治疗有效量的本发明的制剂。在另一个实施方案中，本发明涉及治疗哺乳动物的诸如痤疮、脱发、皮肤致敏和过敏、干燥皮肤(干燥病、鱼鳞癣)、真菌感染和酒渣鼻、接触性皮肤病等的皮肤疾病或皮肤不适的方法，包括对需要这种治疗的哺乳动物给予治疗有效量的本发明的制剂。在另一个实施方案中，本发明涉及治疗哺乳动物的诸如银屑病、狼疮、关节炎等的自身免疫疾病的方法，包括对需要这种治疗的哺乳动物给予治疗有效量的本发明的制剂。在另一个实施方案中，本发明涉及一种治疗变应性疾病过敏症、哮喘、过敏性皮炎 /湿疹的方法，包括对需要这种治疗的哺乳动物给予治疗有效量的本发明的制剂。在另一个实施方案中，本发明涉及治疗哺乳动物中的TNFa相关疾病或者减少其可能性的方法，包括对需要这种治疗的哺乳动物给予治疗有效量或预防性量的本发明的黄酮类制剂。在另一个实施方案中，本发明涉及治疗哺乳动物中的IL-I β相关疾病或者减少其可能性的方法，包括对需要这种治疗的哺乳动物给予治疗有效量或预防性量的本发明的黄酮类制剂。本发明的另一个实施方案是形成维生素黄酮的均质固体混合物的方法，包括将维生素加热至熔化，其中维生素是选自维生素Β3、维生素Β5以及包含至少一种前述维生素的结合物；将黄酮溶解在熔化的维生素中，以形成维生素黄酮液体混合物；以及冷却该维生素黄酮液体混合物，以形成均质的固体混合物。
图I是在10，000Χ的放大倍率下放大显示了未加工的芹菜素粉末的晶体形状的典型的扫描电子显微镜(SEM)图。
图2显示了未加工的芹菜素粉末的典型的“体积频率”颗粒分布图。图3显示了未加工的芹菜素的典型的“累积细化体积”颗粒分布图。图4是水合芹菜素样品的典型的扫描电子显微镜(SEM)图。该典型的水合芹菜素样品展示出来的形态和如图I所示的未加工样品所展示出来的形态有很大差异。图5和图6是来自3批分别生产的“水相乳液”的颗粒尺寸分布图。几乎所有的芹菜素颗粒都小于I微米。图7是在水相乳液中含有12.5%黄酮类浓度的疗菜素、木犀草素、芸香苷和槲皮素的“累积颗粒尺寸分布”图。图8显示了在水中的I. 25%的未加工槲皮素相比于通过实施例2中所述方法制备的、包含在水相乳液中的I. 25%的“水合芹菜素”的颗粒尺寸分布的比较。 图9是表明了在未加工的聚山梨醇酯80对照样品和热处理的聚山梨醇酯80样品之间的微小化学组成差异的质谱图。图10是显示了对于含有I. 5%芹菜素浓度的几种所施加的外用制剂来说，沉积在人体组织的表皮、真皮和接收液区域的芹菜素含量的图示。图11是显示了对于含有I. 5%芹菜素浓度的几种所施加的外用制剂来说，沉积在鼠科动物组织的表皮、真皮和接收液区域的芹菜素含量的图示。
具体实施例方式本发明涉及黄酮类、制剂、食品补充剂和药物组合物的新形式及其制备和使用方法。I 一本发明的化合物一些常见的植物黄酮类的化学结构列于表I中。表I 一些常见的植物黄酮类化合物的化学结构结构—代表性的黄酮类—I
Ir:
黃綱RjRi^H, R2—Ο.Η:芹菓素j
IL JC.Rl=RZ=OH:木犀草素丨
Oi
IP
黄酮醇『.炎.1:·^.-"·-,R2.=OH. K i二Κ3=ΙΙ:山萘驗
iI" Jl 丨 KI=H=OH, R3 = H:槲皮素
ro^pTpT —.ri=r2=k3=ok::杨梅酮 !'O· O
^ 异黃酮KJ=H..大豆甙元
κ 1 ^om 染料木黄酮‘_
黄坑醇RjRl= H2=0H. R3=H-儿茶酴
JT------JO!OOl 1:没食子儿茶素
R1
I
%#π
二氢黄酮^R I r I-1, R 2-011:槲皮素
jjfR 〗=K 2=0Hf:圣草歡
R I-OH* R2^0C；'I13:橘皮苷
B、I
花色素I cmRl=H, R2=H:花塞音；
f=|fWRbOH, R+2=H:花青色素
:^ftsKI=R2-OU:
' U I JRI=C 0'13, R.2=C:,H.:杂牟氙音|
X 一—，__&锦葵色素__黄酮类包括黄酮(例如芹菜素、木犀草素)、黄酮醇(例如槲皮素、杨梅酮)、二氢黄酮(例如柚皮素、橘皮苷)、黄烷醇(或儿茶酚)(例如表儿茶素、没食子儿茶素)、花色素(例如花青色素、花葵素)，以及异黄酮(例如染料木黄酮、大豆甙元)。芹菜素是黄酮结构种类中的一员，化学上称为4’，5，7-三羟基黄酮。芹菜素具有如下的结构式(式II):
II
^γΟΗ H。Nv-if^svXO vy^SSi5x^
W
DH O
木犀草素也是黄酮结构种类中的一员，化学上称为3’，4’，5，7-四羟基黄酮。木犀草素具有如下的结构式(式III):
权利要求
1.一种组合物，包括 水合微颗粒黄酮类，和 载体。
2.如权利要求I所述的组合物，其特征在于，黄酮类在水中的溶解度小于lmg/ml。
3.如权利要求I所述的组合物，其特征在于，黄酮类选自黄酮、黄酮醇、二氢黄酮、黄酮醇(或」L茶酚)、花色素和异黄酮。
4.如权利要求I所述的组合物，其特征在于，黄酮类是选自芹菜素和木犀草素的黄酮。
5.如权利要求I所述的组合物，其特征在于，微颗粒黄酮类具有50-1000纳米的平均尺等。
6.如权利要求I所述的组合物，其特征在于，所述组合物还包含透明质酸。
7.如权利要求I所述的组合物，其特征在于，载体包括防止或减少水合微颗粒黄酮类的聚集的化合物。
8.如权利要求I所述的组合物，其特征在于，组合物的形式为保健品、膳食补充剂、食品补充剂或医疗食品。
9.一种组合物,包括 黄酮类，和 热稳定的黄酮类增溶化合物， 其中，所述组合物通过将黄酮类和所述热稳定的黄酮类增溶化合物混合至所述黄酮类溶解于所述表面活性剂中的温度来形成。
10.如权利要求9所述的组合物，其特征在于，黄酮类是芹菜素，而所述热稳定的黄酮类增溶化合物是非离子表面活性剂。
11.如权利要求9所述的组合物，其特征在于，所述组合物还包括醇。
12.如权利要求9所述的组合物，其特征在于，其中组合物的形式为保健品、膳食补充齐U、食品补充剂或医疗食品。
13.一种用于透皮式施用黄酮类的膏药，包括具有两个面的基片，第一面具有根据权利要求I或9所述的组合物和粘合剂，而第二面带有不能渗透到第一面上的组合物和粘合剂中的材料。
14.一种生产水合黄酮类的方法，包括 将黄酮与碱金属氢氧化物混合，以形成碱金属黄酮盐的水溶液； 用酸性剂将碱金属黄酮类盐的水溶液酸化至小于7. 0的pH水平，以形成水合黄酮类沉淀物； 其中，酸化步骤是在产生具有50-1000纳米的平均尺寸的黄酮类纳米纤维的条件下进行。
15.如权利要求14所述的方法，其特征在于，在酸化步骤之后是过滤沉淀物的步骤。
16.如权利要求15所述的方法，其特征在于，过滤步骤包括将酸化步骤的产物调节至PH值小于7，以及用大于2微米的过滤器将材料过滤。
17.—种生产水合黄酮类的方法，包括 将黄酮类溶解在无毒有机溶剂中，以形成混合物；和 向所述混合物中加入水，以形成水合黄酮类沉淀物；其中，加水步骤在产生具有50-1000纳米的平均尺寸的黄酮类纳米纤维的条件下进行。
18.如权利要求17所述的方法，其特征在于，溶解步骤在低于有机溶剂的沸点大约20°C的温度下进行。
19.如权利要求17所述的方法,其特征在于,水合黄酮选自水合疗菜素和水合木犀草素。
20.一种形成水合黄酮类的外用制剂的方法，包括 将黄酮类在水中与碱金属氢氧化物混合，以形成碱金属黄酮类盐溶液； 将所述碱金属黄酮类盐溶液加入到皮肤病学上可接受的载体中； 调节制剂的PH至皮肤病学上可接受的pH ； 其中，调节PH步骤在产生具有50-1000纳米的平均尺寸的黄酮类纳米纤维的条件下进行。
21.如权利要求20所述的方法，其特征在于，将制剂的pH值调节至4到8。
22.—种制备水合黄酮类的外用制剂的方法，包括 将黄酮类溶解在醇中； 将醇溶解的黄酮类加入到皮肤病学上可接受的载体中； 调节制剂的PH值至皮肤病学上可接受的pH值； 其中，调节PH步骤是在产生具有50-1000纳米的平均尺寸的黄酮类纳米纤维的条件下进行。
23.如权利要求22所述的方法，其特征在于，将制剂的pH值调节至4到8。
24.一种制备黄酮类的外用制剂的方法，包括 将黄酮类加入到乳状液载体中，以形成混合物； 加热所述混合物，直至其具有与水近似的粘度；和 利用气蚀作用力来形成混合物中的微颗粒的分散体系。
25.如权利要求24所述的方法，其特征在于，乳状液是水包油或油包水乳状液。
26.如权利要求24所述的方法，其特征在于，形成分散体系的步骤利用超声处理或高压均质化来完成。
27.如权利要求24所述的方法，其特征在于，将混合物加热至大约120°F-170。F。
28.如权利要求24所述的方法，其特征在于，乳状液包括抑制微颗粒聚集的试剂。
29.—种制备增溶的黄酮类组合物的方法，包括 将黄酮类颗粒与热稳定的黄酮类增溶化合物混合，以形成混合物； 加热所述混合物至黄酮类颗粒被增溶的温度，以形成溶液；和 冷却所述溶液。
30.如权利要求29所述的方法，其特征在于，热稳定的黄酮类增溶化合物是非离子表面活性剂。
31.如权利要求30所述的方法，其特征在于，非离子表面活性剂是聚山梨醇酯，而黄酮类是芹菜素。
32.如权利要求29所述的方法，其特征在于，所述方法进一步包括向溶液中加入小链醇以形成粘度减小的溶液。
33.一种减少和/或预防阳光暴晒后果的方法，包括在皮肤上涂敷治疗有效量的包括如权利要求I或9所述组合物的防晒霜制剂。
34.一种治疗阳光暴晒后果的方法，包括在阳光损伤的皮肤上涂敷治疗有效量的包括如权利要求I或9所述组合物的制剂。
35.一种治疗哺乳动物中的癌症的方法，包括对需要这种治疗的哺乳动物给予治疗有效量的包括如权利要求I或9所述组合物的制剂。
36.一种减小在哺乳动物中发生癌症的可能性的方法，包括对哺乳动物给予预防性量的包括如权利要求I或9所述组合物的制剂。
37.一种治疗哺乳动物中的痤疮、脱发、皮肤致敏和过敏、干燥皮肤(干燥病、鱼鳞癣)、真菌感染和酒渣鼻、接触性皮肤病的方法，包括对需要这种治疗的哺乳动物给予治疗有效量的包括如权利要求I或9所述组合物的制剂。
38.一种治疗哺乳动物中的自身免疫性疾病的方法，包括对需要这种治疗的哺乳动物给予治疗有效量的包括如权利要求I或9所述组合物的制剂。
39.如权利要求38所述的方法，其特征在于，自身免疫性疾病选自银屑病、狼疮和关节炎。
40.一种治疗在哺乳动物中的TNFa相关疾病的方法，包括对需要这种治疗的哺乳动物给予治疗有效量的包括如权利要求I或9所述组合物的黄酮类制剂。
41.一种减小发生在哺乳动物中的TNFa相关疾病的可能性的方法，包括对哺乳动物给予预防性量的如权利要求I或9所述组合物的黄酮类制剂。
42.一种治疗哺乳动物中的IL-I P相关疾病的方法，包括对需要这种治疗的哺乳动物给予治疗有效量的包括如权利要求I或9所述组合物的黄酮类制剂。
43.一种减小发生在哺乳动物中的IL-I 3相关疾病的可能性的方法，包括对哺乳动物给予预防性量的如权利要求I或9所述组合物的黄酮类制剂。
全文摘要
本发明涉及新颖的微粒和可溶形式的黄酮类及其合成。本发明还包括这些黄酮类的新颖的制剂。进一步地，本发明包括制造该黄酮类制剂的新颖的方法。本发明还涉及该黄酮类制剂的广泛应用。
文档编号A61K31/00GK102711743SQ201080058485
公开日2012年10月3日 申请日期2010年10月22日 优先权日2009年10月22日
发明者菲利普·J·比尔巴拉 申请人:Api起源有限责任公司