专利名称：一种防治动脉硬化的植物提取物组合物及其制备方法
技术领域：
本发明涉及中药提取物组合物，具体涉及一种防治动脉硬化的植物提取物组合物及其制备方法。
背景技术：
动脉硬化是中老年常见多发病。动脉粥样硬化(Atherosclerosis，AS)是动脉硬化中最常见而重要的类型，其特点是受累动脉的内膜有类脂质的沉着，复合糖类的积聚，继而纤维组织增生和钙沉着，并有动脉中层的病变。本病主要累及大型及中型的肌弹力型动脉， 以主动脉、冠状动脉及脑动脉为多见，常导致管腔闭塞或管壁破裂出血等严重后果，为心肌梗塞和脑梗塞的主要病因。它影响大、中动脉，可引起相当严重的后果。冠状动脉粥样硬化时，可造成心肌供血不足，引起心绞痛乃至心肌梗死；脑动脉硬化可引起脑供血不足、眩晕、 头痛。后期脑萎缩时，可有精神变态、痴呆等，脑动脉内血栓形成或因动脉粥样硬化引起的小动脉瘤破裂出血引起的脑卒中(中风)，可造成意识丧失、偏瘫、失语等严重后果；肾动脉硬化可引起顽固性高血压；肠动脉硬化可引起消化不良、便秘、腹泻；下肢动脉粥样硬化可引起间歇跛行，严重时发生肢端缺血坏死。本病常伴有高血压、高胆固醇血症或糖尿病等。脑力劳动者较多见，男性较女性多，近年来本病在我国逐渐增多，对人民健康危害甚大，成为老年人主要病死原因之
ο由于经济社会的发展，工作生活的压力加大，饮食习惯和生活方式的变化等因素导致高脂血症和动脉粥样硬化发病率大增，成为当代社会人类健康的重大威胁，已经引起了 WHO和各国政府的高度重视，是医药科研的热点。但迄今对动脉粥样硬化的发病机制还没有完全阐明，临床治疗动脉粥样硬化还没有理想的办法。动脉粥样硬化的病因虽未完全明了，但已知与下述因子(易患因子)有密切关系①高血压，②高血脂症，③吸烟，④糖尿病，⑤肥胖。动脉粥样硬化的发病机理学说甚多，如脂质浸润学说、血栓源学说、血液动力学学说、中层平滑肌细胞增生学说、动脉内膜损伤学说、受体学说等，现逐渐明确动脉粥样硬化的发病机理是复杂的、综合性的长期过程。新近研究表明，脂质过氧化在动脉粥样硬化发生中起重要作用。虽然用于降低血脂或调节血液流变学有不少化学药物，但其防治动脉粥样硬化的综合疗效并不理想。尤其因为动脉粥样硬化病因复杂，常与脂代谢紊乱相伴发生，并且血流变学异常和高血脂往往互相影响，而化学药物通常都是针对脂代谢的特别靶点，药理作用比较单一，改善血液流变性和调脂不能兼顾，因此成分单一的化学药难以满足多系统多环节病理改变的复杂疾病动脉粥样硬化需要多靶点药理作用的要求，给化学药防疗动脉粥样硬化性疾病带来了困难。此外，化学药物还有不良反应和用药的费用较高等问题，也成为化学药品的弊端。临床实践表明，中医药在防治动脉粥样硬化和心脑血管病等方面，因为中医临床的整体观点和辩证论治，中药成分多，可以多靶点、多层次的发挥药效，所以临床疗效确切，具有安全有效的优势。“复方贞术调脂方”(FTZ)，是一种中药组合物，用于治疗高脂血症，取得理想疗效， 临床总有效率达91%。全方由女贞子、白术、佛手、杜仲、大蓟、丹参、黄连、三七8味中药组成。该组方FTZ已获国家发明专利授权，专利号200410051250.4。虽然已有不少中药复方有良好的血脂调节和抗动脉硬化功能和临床疗效，但是由于是中药复方制剂，还有许多不足之处(1)其成分较复杂，其有效成分还不清楚，不易量化，最终将影响产品的临床疗效的稳定性，(2)相对简单的制备工艺，方中有效成分得不到应有的纯化，杂质成分多，服用剂量大，病人服用顺应性不够理想，(3)由于方剂提取物量大，应用范围受到各种限制。
发明内容
本发明的目的在于克服已有技术的不足，提供一种疗效更显著确切，有效成份含量高，易于量化，质量易于控制的防治动脉硬化的植物提取物组合物。本发明的另一目的是提供一种工艺稳定，重现性好的上述防治动脉硬化的植物提取物组合物的制备方法。本发明的又一目的是提供上述防治动脉硬化的植物提取物组合物在制备预防或治疗动脉硬化相关疾病药物和或保健食品中应用。本发明通过以下技术方案实现上述目的
一种防治动脉硬化的植物提取物组合物，包括三七总皂苷提取物与黄连总生物碱提取物。三七总皂苷提取物与黄连总生物碱提取物的重量百分比优选为1 9:1 3。一种防治动脉硬化的植物提取物组合物的制备方法，步骤如下
(ι)三七总皂苷提取物的制备将原料药物三七经过CV3醇提后，合并总提取物，浓缩总提取物得到浓缩液，除去浓缩液中非皂苷类成分，得到三七总皂苷提取物；
(2)黄连总生物碱提取物的制备将原料药物黄连加CV3醇回流提取，回收CV3醇，浓缩，再以酸溶解碱沉淀重结晶析出黄连总生物碱提取物；
(3)将三七总皂苷提取物与黄连总生物碱提取物混合，得到防治动脉硬化的植物提取物组合物。上述制备方法步骤(1) Ch醇提是用30 95体积％的C^3醇提取1 5次，优选用65 75体积％的乙醇提取2 3次，，每次提取的Cp3醇体积为药材质量的1 15倍， 优选为5 10倍，每次提取时间为5分钟以上，优选为6(Γ120分钟；所述Cu醇为甲醇、乙醇或丙醇，优选为乙醇，因为乙醇安全性比甲醇更高，也更易获得，提取效果也比丙醇好。步骤(1)中除去浓缩液中非皂苷类成分采用大孔树脂，大孔树脂与浓缩液的用量比是Ikg树脂加浓缩液0. 5飞L，优选为广1. 5L。用大孔树脂柱吸附后洗脱用5(Γ95体积％ 乙醇，优选为75 85体积％乙醇，用量为每Ikg大孔树脂用;Γ20 L乙醇，优选4飞L乙醇， 以广20 ml/min，优选5 12 ml/min流速洗脱、洗脱至无色；所述大孔树脂为聚酰胺型树脂或聚苯乙烯弱碱性阴离子交换树脂。步骤(2) CV3醇回流提取是用50 95体积％，优选为65 75体积％ C1^3醇提取1 5次，优选为2 3次，每次提取的C"醇体积为药材质量的1 15倍，优选为5 10倍， 每次提取时间为5分钟以上，优选为6(Γ120分钟。所述CV3醇为甲醇、乙醇或丙醇，优选为乙醇，因为乙醇安全性比甲醇更高，也更易获得，提取效果也比丙醇好。酸溶解是用醋酸溶解，醋酸用量为Cu醇提物的3 10倍，优选为3 5倍；加 Γ30质量％，优选为10质量％HC1调pH为0. 2 4，优选pH为1. 5 2. 5。加入NaCl重结晶， 溶液NaCl浓度约为5 12质量％，优选为6 8质量％ ；碱沉淀是用广30质量％，优选为 10质量％NaOH溶液，pH为纩13，优选pH为1广12. 5，重结晶体积为黄连重量的广5倍，优选为2 3倍。本发明的防治动脉硬化的植物提取物组合物有效成分为三七皂苷R1、人参皂苷 Rbl、人参皂苷Rd、人参皂苷Re、人参皂苷Rgl、小檗碱、黄连碱、表小檗碱、巴马汀。其中重量比例比为三七皂苷Rl 人参皂苷Rbl 人参皂苷Rd 人参皂苷Re 人参皂苷Rgl 小檗碱黄连碱表小檗碱巴马汀等于1 4 :1 8 :1 3 :1 2 :1 11 :1 10 :1 3 :1 2 1 3。当三七总皂苷提取物和黄总生物碱提取物的配比为7 3时，防治动脉硬化的植物提取物组合物有效成分及重量百分含量比分别为三七皂苷Rl 人参皂苷Rgl 人参皂苷 Re 人参皂苷Rbl 人参皂苷Rd 小檗碱黄连碱表小檗碱巴马汀等于2. 3 2. 8 :10 12 0. 95 1. 1 7. 6 9. 0 :1. 6 1. 9 :9. 5 11. 5 :2. 4 2. 8 :1. 1 1. 3 :2. 1 2. 4。防治动脉硬化的植物提取物组合物在制备预防或治疗动脉硬化相关疾病药物或保健品中的应用。所述药物为将本发明防治动脉硬化的植物提取物组合物按照药剂学上可以接受的载体和/或辅料，使用一般制剂方法，加工成为口服制剂或注射制剂等形式。常规辅料有润滑剂、填充剂、粘合剂、崩解剂等。口服制剂有片剂、胶囊、散剂、丸剂、粉末、颗粒、晶体、溶液、浸出物、悬剂、汤、糖浆、酏剂、茶、油等形式。与现有技术相比，本发明具有如下有益效果
本发明的防治动脉硬化的植物提取物组合物是在中国发明专利ZL200410051250. 4基础上，选取其中的两味中药三七和黄连，用其提取物组成的组合物，该组合物是在进行活性成分群(有效部位)及其组分配伍的活性筛选而获得的最佳配伍。通过本发明制备方法，可以去除复方中药中大量无效的化学成分，得到更有效的中药有效提取部位，既保留了中药特色，又使传统中药中的有效成分含量大大提高，减少了无效成分对产品加工和制剂质量及安全性的影响，使该复方中药有效成分明确，制备工艺稳定，产品质量可控，有利于大量生产。本发明进一步拓展了上述植物提取物组合物的应用范围，为预防和/或治疗动脉硬化相关疾病提供了一种新产品。本发明与同类防治动脉硬化相关疾病的药物相比，其疗效确切，安全无毒副作用，单独使用或者与其他药物复配都有良好的应用前景。本发明的防治动脉硬化的植物提取物组合物与复方贞术调脂方(原方FTZ)相比较
(1)服用量由原来的6g提取物缩减为600mg，缩减为原来的1/10；
(2)药物有效成分的含量提高约10倍；
(3)动物体内试验表明，该植物提取物组合物可以更有效降低血清总胆固醇，低密度脂蛋白胆固醇含量，降低胆固醇在组织里(如肝脏和心脏)的含量，降低血清甘油三酸脂水平， 同时也抑制血小板凝集结。另外，本发明产品还能抑制平滑肌的增殖，防止内膜变厚及内皮炎症损害，防止血栓形成，抑制并扭转动脉硬化的损害和进而增进人体的总体健康水平，并且没有观察到明显副作用，增加了用药的安全性。该植物提取物组合物部分指标优于原方， 达到了减少服用量而不降低药效的目的。
图1 实施例1防治动脉硬化的植物提取物组合物的制备(6)片剂的制备项下防治动脉硬化的植物提取物组合物经HPLC分析得到的指纹图谱中三七总皂苷成分的色谱峰图。图2 实施例1防治动脉硬化的植物提取物组合物的制备(6)片剂的制备项下防治动脉硬化的植物提取物组合物经HPLC分析得到的指纹图谱中黄连总生物碱成分的色谱峰图。
具体实施例方式实施例1防治动脉硬化的植物提取物组合物的制备一、三七总皂苷提取物的制备
(1)三七总皂苷提取物
称取10 kg三七药材，粉碎，以药材量的8倍、8倍和6倍的75体积％乙醇分别回流提取3次，每次池，合并提取液用200目滤布过滤，合并滤液。回收乙醇并使醇提部分浓度为 Iml相当于Ig生药的浓缩液(1. 9 L);上大孔树脂柱吸附，大孔树脂为聚苯乙烯弱碱性阴离子交换树脂系列的HPD-100，按1 kg树脂加浓缩液1.5L上大孔树脂柱吸附，用水洗至洗脱液近无色，然后用85体积％乙醇4. 5 L以10 ml/min流速洗脱、洗脱至流出液无色、合并洗脱液，真空减压回收乙醇并浓缩至为Iml约相当于2 g生药浓缩液(相对密度为1. 08 1. 10，60°C )，600C以下干燥得总皂苷提取物0. 65 kg。干燥的方法很多，可用减压干燥，也可用薄膜蒸发干燥等。本发明优选采用喷雾干燥法，其进风口温度80 108°C，出口温度55 60°C，风速5 10m/s，压力0. 02 0. IkPa, 1 2次干燥。三七总皂苷提取物用HPLC方法测定含总皂含量为73. 8%，人参皂苷Rbl、人参皂苷Rd、人参皂苷Re、人参皂苷Rgl、三七皂苷Rl的含量分别为提取物总重量的25. 6%、5. 2%、 3. 1%、32· 1%、7· 5%ο(2)三七总皂苷提取物
称取10 kg三七药材，粉碎，以药材量的8倍、7倍和5倍的65体积％甲醇分别回流提取3次，每次池，合并提取液用200目滤布过滤，合并滤液。回收甲醇并使醇提部分浓度为 Iml相当于Ig生药的浓缩液(2. O L);上大孔树脂柱吸附，大孔树脂为聚苯乙烯弱碱性阴离子交换树脂系列的HPD-600，按1 kg树脂加浓缩液1.2 L上大孔树脂柱吸附，用水洗至洗脱液近无色，然后用90体积％乙醇3. 5 L以10 ml/min流速洗脱、洗脱至流出液无色、合并洗脱液，真空减压回收乙醇并浓缩至为Iml约相当于2 g生药浓缩液(相对密度为1. 08 1. 10,600C )，60°C以下减压干燥得总皂苷提取物0. 64 kg。三七总皂苷提取物用HPLC方法测定含三七总皂苷含量为75. 2%，人参皂苷Rbl、人参皂苷Rd、人参皂苷Re、人参皂苷Rgl、三七皂苷Rl的含量分别为提取物总重量的26. 1%、 5. 3%、3· 2%, 32. 8%、7· 6%。
(3)三七总皂苷提取物
称取10 kg三七药材，粉碎，以药材量的8倍、7倍的70体积％正丙醇分别回流提取2 次，每次池，合并提取液用200目滤布过滤，合并滤液。回收正丙醇并使醇提部分浓度为Iml 相当于Ig生药的浓缩液(1.7 L);上大孔树脂柱吸附，大孔树脂优选为聚酰胺型AB-8。按 1 kg树脂加浓缩液1.3L上大孔树脂柱吸附，用水洗至洗脱液近无色，后用80%乙醇6 L以 9 ml/min流速洗脱、洗脱至流出液无色、合并洗脱液，真空减压回收乙醇并浓缩至为Iml约相当于2 g生药浓缩液(相对密度为1.08 1. 10，60°C)，60°C以下减压干燥得总皂苷提取物 0.62 kg。三七总皂苷提取物用HPLC方法测定含三七总皂苷含量为72. 2%，人参皂苷Rbl、人参皂苷Rd、人参皂苷Re、人参皂苷Rgl、三七皂苷Rl的含量分别为提取物总重量的25. 3%、 5. 0%、3· 2%, 31. 3%、7· 2%。 表1不同制备工艺三七总皂苷提取物得率及HPLC含量测定结果(％)
权利要求
1.一种防治动脉硬化的植物提取物组合物，包括三七总皂苷提取物与黄连总生物碱提取物。
2.根据权利要求1所述的防治动脉硬化的植物提取物组合物，其特征在于所述三七总皂苷提取物与黄连总生物碱提取物的重量比为广9:广3。
3.权利要求1或2所述防治动脉硬化的植物提取物组合物的制备方法，步骤如下(ι)三七总皂苷提取物的制备将原料药物三七经过(V3醇提后，合并总提取物，浓缩总提取物后得到浓缩液，除去浓缩液中非皂苷类成分，得到三七总皂苷提取物；(2)黄连总生物碱提取物的制备将原料药物黄连加Ci_3醇回流提取，回收CV3醇，浓缩得浓缩液，再以酸溶解碱沉淀重结晶析出黄连总生物碱提取物；(3)将三七总皂苷提取物与黄连总生物碱提取物混合，得到防治动脉硬化的植物提取物组合物。
4.根据权利要求3所述防治动脉硬化的植物提取物组合物的制备方法，其特征在于步骤(1) C1^3醇提是用30 95体积％的Cp3醇提取1 5次，每次提取的Cp3醇体积为药材质量的1 15倍，每次提取时间为5分钟以上；所述CV3醇为甲醇、乙醇或丙醇。
5.根据权利要求3所述防治动脉硬化的植物提取物组合物的制备方法，其特征在于步骤(1)中除去浓缩液中非皂苷类成分采用大孔树脂，大孔树脂与浓缩液的用量比是Ikg大孔树脂加浓缩液广5L。
6.根据权利要求4所述防治动脉硬化的植物提取物组合物的制备方法，其特征在于大孔树脂柱吸附后洗脱用5(Γ95体积％乙醇，用量为每Ikg大孔树脂用5 20 L乙醇，以广20 ml/min流速洗脱，洗脱至无色；所述大孔树脂为聚酰胺型树脂或聚苯乙烯弱碱性阴离子交换树脂。
7.根据权利要求3所述防治动脉硬化的植物提取物组合物的制备方法，其特征在于步骤(2) C1^3醇回流提取是用5(Γ70体积％(V3醇提取1 5次，每次提取的乙醇体积为药材质量的1 15倍，每次提取时间为5分钟以上。
8.根据权利要求3所述防治动脉硬化的植物提取物组合物的制备方法，其特征在于步骤(2)所述酸溶解是用醋酸溶解，用广30质量％HC1调pH为0.广5。
9.根据权利要求3所述防治动脉硬化的植物提取物组合物的制备方法，其特征在于步骤(2)所述碱沉淀是用广30%质量NaOH溶液，pH为9 13，重结晶体积为黄连重量的广5倍。
10.权利要求1或2所述防治动脉硬化的植物提取物组合物在制备预防或治疗动脉硬化相关疾病药物或保健品中的应用。
全文摘要
本发明公开了一种防治动脉硬化的植物提取物组合物，包括三七总皂苷提取物与黄连总生物碱提取物。本发明还公开了上述组合物的制备方法，是将三七经过C1-3醇提后，合并总提取物，浓缩再除去总提取物中非皂苷类成分，得三七总皂苷提取物；将黄连加C1-3醇回流提取，回收C1-3醇，浓缩后以酸溶解碱沉淀重结晶析出总生物碱提取物，两者混合后得到防治动脉硬化的植物提取物组合物。本发明去除了原复方中药中大量无效的化学成分，有效成分含量大大提高，减少了无效成分对产品加工和制剂质量及安全性的影响，使有效成分明确，制备工艺稳定，产品质量可控，有利于工业化生产，并显著提高抗动脉硬化药效，防治动脉硬化疗效更稳定更好。
文档编号A61K36/718GK102160876SQ20111002690
公开日2011年8月24日 申请日期2011年1月25日 优先权日2011年1月25日
发明者郭姣 申请人:广州中医药大学