一种齐墩果酸皂苷类成分的制备方法及其用途的制作方法

文档序号:863535研发日期:2011年阅读:326来源:国知局
技术简介:
本发明发现白头翁乙醇提取物中3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)[β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷含量较低,通过碱水解和梯度洗脱纯化显著提升其含量,并验证其抗多种肿瘤活性。解决思路为:采用碱水解处理白头翁提取物,结合大孔树脂和ODS柱分离纯化,最终获得高纯度目标皂苷,证实其在抗肺癌、肝癌等肿瘤药物中的应用价值。
关键词:齐墩果酸皂苷,白头翁提取物,抗肿瘤药物
专利名称:一种齐墩果酸皂苷类成分的制备方法及其用途的制作方法
技术领域
本发明属于医药、兽药技术领域,涉及一种齐墩果酸皂苷类成分3-0-α -L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) [ β-D-卩比喃葡萄糖-(1 — 4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷的制备方法及其该成分抗肿瘤的用途,如用于肺癌、肝癌、胃癌、结肠癌、胶质瘤、乳腺癌、宫颈癌、 白血病、淋巴癌等。本发明还涉及来自白头翁(Pulsatilla chinensis (Bunge) Regel)根茎的含有该化合物的提取物作为抗上述肿瘤的用途。
背景技术
白头翁药材取自毛茛科白头翁属植物白头翁的干燥根,味苦,性寒。归胃、大肠经, 具清热解毒,凉血止痢之功。用于热毒血痢,阴痒带下,阿米巴痢。据文献报道,白头翁中含原白头翁素(Protoanemonin)、白头翁素(Anemonin)、白头翁灵(Okinalin,C32H4602)、白头翁英(0kinalein,C4H602)等,近年来国内外学者从白头翁属植物中分离鉴定出几十种五环三萜皂苷成分,这些皂苷主要为齐墩果烷型和羽扇豆烷型两种。白头翁属植物具有广泛的药理及生物活性,主要表现在抗肿瘤、抗炎抗菌、抗病毒、细胞凋亡、抗生物酶、杀虫、杀精等作用。经过反复研究发现,白头翁的水提液、醇提液及其碱水解产物均具有抗肿瘤活性, 尤其是碱水解产物,活性更强,经过进一步成分分析研究,发现其中均含有一系列的齐墩果酸皂苷类成分。

发明内容
本发明利用现代分离技术及鉴定手段对白头翁进行系统的化学成分分离,从中分离得到一种齐墩果酸皂苷类成分3-0-α -L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) [ β -D-吡喃葡萄糖-(1 — 4)]-α -L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷,通过体外抗肿瘤活性筛选研究,发现该化合物具有显著的抗肿瘤作用,然而,该成分在白头翁药材中的含量不高;同时研究发现, 白头翁的水提物和醇提物均具有一定的抗肿瘤作用,而其碱水解产物的活性明显强于水解前,成分分析发现,碱水解后产物中3-0-α-L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) [ β-D-吡喃葡萄糖-(1 —4)]-a_L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷的含量较水解前大大提高。白头翁药材资源丰富,水解产物活性明确,制备工艺简单易行,适合工业化大量生产,可作为制备抗肿瘤药物,具有广阔的市场前景和开发价值。本发明的技术方案如下
1、3-0-α -L-吡喃鼠李糖- α — 2) [ β -D-吡喃葡萄糖_(1 — 4)]-α -L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷在制备抗肿瘤药物中的应用。2、含有3-0-α-L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) [ β _D_吡喃葡萄糖-(1 — 4) ] - α-L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷的白头翁提取物在制备抗肿瘤药物中的应用。3,3-0-α-L-吡喃鼠李糖_(1 — 2) [ β -D-吡喃葡萄糖_(1 — 4)]-α -L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷在制备抗肺癌、肝癌、胃癌、结肠癌、胶质瘤、乳腺癌、宫颈癌、白血病、淋巴癌药物中的应用。4、含有3-0-α-L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) [ β _D_吡喃葡萄糖-(1 — 4) ] - α-L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷的白头翁提取物在制备抗肺癌、肝癌、胃癌、结肠癌、胶质瘤、乳腺癌、宫颈癌、白血病、淋巴癌药物中的应用。5,3-0-α -L-吡喃鼠李糖_(1 — 2) [ β -D-吡喃葡萄糖_(1 — 4)]-α -L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷的制备方法,包括以下步骤
第一步,将白头翁药材粉碎成粗粉,用水或0. 1-95%乙醇浸泡0. 5-池,6-12倍量加热回流提取2-3次,每次l-3h,过滤,合并滤液。上述滤液于50-70°C减压浓缩至0. 5-1. Og生药材/mL,无醇味,0-4°C冷藏过夜,析胶,滤过,即得白头翁提取物。第二步,白头翁提取物水溶液中加入氢氧化钠溶液调到PH10-13,加热沸腾4-10 小时,每30-60分钟测PH,保持在PH10-13,放冷,加盐酸溶液,调PH 3-7,离心,去沉淀,即得白头翁提取物水解液
第三步,白头翁提取物水解液,经过DlOl或AB-8或ADS-17大孔树脂吸附,依次用水、 30-40%乙醇、50-80%乙醇、95%乙醇洗脱,收集50-80%乙醇洗脱部分,即得BTW58组分。经抗肿瘤药理实验,证明BTW58组分为白头翁抗肿瘤有效部位。第四步、白头翁抗肿瘤有效部位经ODS反相硅胶柱,用甲醇和水(6:4-9:1)的混合液进行梯度洗脱,梯度洗脱液依次有五组,其体积配比分别为
第一组甲醇6份水4份; 第二组甲醇7份水3份; 第三组甲醇8份水2份; 第四组甲醇85份水15份; 第五组甲醇9份水1份;
第五步、收集甲醇85份水15份的洗脱部分,经kphadex LH-20柱甲醇-水7 :3洗脱, 得到化合物I,经对照品比较及LC/MS/MS测试,该化合物为3-0- α -L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) [β-D-吡喃葡萄糖-(1 — 4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷。本发明所述的齐墩果酸皂苷类成分是单一成分的化合物,其化学名称为 3-0- α -L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) [ β -D-吡喃葡萄糖-(1 — 4) ] - α -L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷。


图1是3-0- α -L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) [ β -D-吡喃葡萄糖-(1 — 4) ] - α -L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷的分子结构式; 图2是BTW58组分的HPLC分析图3是3-0- α -L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) [ β -D-吡喃葡萄糖-(1 — 4) ] - α -L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷的核磁共振氢谱图4是3-0- α -L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) [ β -D-吡喃葡萄糖-(1 — 4) ] - α -L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷的核磁共振碳谱图; 具体实施例
3-0- α -L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) [ β -D-吡喃葡萄糖-(1 — 4) ] - α -L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷的制备方法为实施案例1
第一步,将白头翁药材粉碎成粗粉,用水浸泡0. 5-2h,6-12倍量加热回流提取2-3次, 每次l_3h,过滤,合并滤液。上述滤液于50-70°C减压浓缩至0. 5-1. Og生药材/mL,0_4°C冷藏过夜,析胶,滤过,即得白头翁提取物。第二步,白头翁提取物水溶液中加入氢氧化钠溶液调到PH10-13,加热沸腾4-10 小时,每30-60分钟测PH,保持在PH10-13,放冷,加盐酸溶液,调PH 3-7,离心,去沉淀,即得白头翁提取物水解液
第三步,白头翁提取物水解液,经过DlOl或AB-8或ADS-17大孔树脂吸附,依次用水、 30-40%乙醇、50-80%乙醇、95%乙醇洗脱,收集50-80%乙醇洗脱部分,即得BTW58组分。经抗肿瘤药理实验,证明BTW58组分为白头翁抗肿瘤有效部位。第四步、白头翁抗肿瘤有效部位经ODS反相硅胶柱,用甲醇和水(64-9:1)的混合液进行梯度洗脱,梯度洗脱液依次有五组,其体积配比分别为
第一组甲醇6份水4份; 第二组甲醇7份水3份; 第三组甲醇8份水2份; 第四组甲醇85份水15份; 第五组甲醇9份水1份;
第五步、收集甲醇85份水15份的洗脱部分,经kphadex LH-20柱甲醇-水7 :3洗脱, 得到化合物I,经对照品比较及LC/MS/MS测试,该化合物为3-0-α -L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) [β-D-吡喃葡萄糖-(1 — 4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷。实施案例2
第一步,将白头翁药材粉碎成粗粉,用10%乙醇浸泡0. 5-2h,6-12倍量加热回流提取 2-3次,每次l-3h,过滤,合并滤液。上述滤液于50-70°C减压浓缩至0. 5-1. Og生药材/mL, 无醇味,0-4°C冷藏过夜,析胶,滤过,即得白头翁提取物。第二步,白头翁提取物水溶液中加入氢氧化钠溶液调到PH10-13,加热沸腾4-10 小时,每30-60分钟测PH,保持在PH10-13,放冷,加盐酸溶液,调PH 3-7,离心,去沉淀,即得白头翁提取物水解液
第三步,白头翁提取物水解液,经过DlOl或AB-8或ADS-17大孔树脂吸附,依次用水、 30-40%乙醇、50-80%乙醇、95%乙醇洗脱,收集50-80%乙醇洗脱部分,即得BTW58组分。经抗肿瘤药理实验,证明BTW58组分为白头翁抗肿瘤有效部位。第四步、白头翁抗肿瘤有效部位经ODS反相硅胶柱,用甲醇和水(6:4-9:1)的混合液进行梯度洗脱,梯度洗脱液依次有五组,其体积配比分别为
第一组甲醇6份水4份; 第二组甲醇7份水3份; 第三组甲醇8份水2份; 第四组甲醇85份水15份; 第五组甲醇9份水1份;
第五步、收集甲醇85份水15份的洗脱部分,经kphadex LH-20柱甲醇-水7 :3洗脱, 得到化合物I,经对照品比较及LC/MS/MS测试,该化合物为3-0-α -L-吡喃鼠李糖-(1 — 2)[β-D-吡喃葡萄糖-(1 — 4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷。实施案例3
第一步,将白头翁药材粉碎成粗粉,用20%乙醇浸泡0. 5-2h,6-12倍量加热回流提取 2-3次,每次l-3h,过滤,合并滤液。上述滤液于50-70°C减压浓缩至0. 5-1. Og生药材/mL, 无醇味,0-4°C冷藏过夜,析胶,滤过,即得白头翁提取物。第二步,白头翁提取物水溶液中加入氢氧化钠溶液调到PH10-13,加热沸腾4-10 小时,每30-60分钟测PH,保持在PH10-13,放冷,加盐酸溶液,调PH 3-7,离心,去沉淀,即得白头翁提取物水解液
第三步,白头翁提取物水解液,经过DlOl或AB-8或ADS-17大孔树脂吸附,依次用水、 30-40%乙醇、50-80%乙醇、95%乙醇洗脱,收集50-80%乙醇洗脱部分,即得BTW58组分。经抗肿瘤药理实验,证明BTW58组分为白头翁抗肿瘤有效部位。 第四步、白头翁抗肿瘤有效部位经ODS反相硅胶柱,用甲醇和水(64-9:1)的混合液进行梯度洗脱,梯度洗脱液依次有五组,其体积配比分别为第一组甲醇6份水4份; 第二组甲醇7份水3份; 第三组甲醇8份水2份; 第四组甲醇85份水15份; 第五组甲醇9份水1份;
第五步、收集甲醇85份水15份的洗脱部分,经kphadex LH-20柱甲醇-水7 :3洗脱, 得到化合物I,经对照品比较及LC/MS/MS测试,该化合物为3-0- α -L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) [β-D-吡喃葡萄糖-(1 — 4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷。实施例4、
第一步,将白头翁药材粉碎成粗粉,用40%乙醇浸泡0. 5-2h,6-12倍量加热回流提取 2-3次,每次l-3h,过滤,合并滤液。上述滤液于50-70°C减压浓缩至0. 5-1. Og生药材/mL, 无醇味,0-4°C冷藏过夜,析胶,滤过,即得白头翁提取物。第二步,白头翁提取物水溶液中加入氢氧化钠溶液调到PH10-13,加热沸腾4-10 小时,每30-60分钟测PH,保持在PH10-13,放冷,加盐酸溶液,调PH 3-7,离心,去沉淀,即得白头翁提取物水解液
第三步,白头翁提取物水解液,经过DlOl或AB-8或ADS-17大孔树脂吸附,依次用水、 30-40%乙醇、50-80%乙醇、95%乙醇洗脱,收集50-80%乙醇洗脱部分,即得BTW58组分。经抗肿瘤药理实验,证明BTW58组分为白头翁抗肿瘤有效部位。第四步、白头翁抗肿瘤有效部位经ODS反相硅胶柱,用甲醇和水(64-9:1)的混合液进行梯度洗脱,梯度洗脱液依次有五组,其体积配比分别为
第一组甲醇6份水4份; 第二组甲醇7份水3份; 第三组甲醇8份水2份; 第四组甲醇85份水15份; 第五组甲醇9份水1份;
第五步、收集甲醇85份水15份的洗脱部分,经kphadex LH-20柱甲醇-水7 :3洗脱,得到化合物I,经对照品比较及LC/MS/MS测试,该化合物为3-0-α -L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) [β-D-吡喃葡萄糖-(1 — 4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷。实施例5、
第一步,将白头翁药材粉碎成粗粉,用60%乙醇浸泡0. 5-2h,6-12倍量加热回流提取 2-3次,每次l-3h,过滤,合并滤液。上述滤液于50-70°C减压浓缩至0. 5-1. Og生药材/mL, 无醇味,0-4°C冷藏过夜,析胶,滤过,即得白头翁提取物。第二步,白头翁提取物水溶液中加入氢氧化钠溶液调到PH10-13,加热沸腾4-10 小时,每30-60分钟测PH,保持在PH10-13,放冷,加盐酸溶液,调PH 3-7,离心,去沉淀,即得白头翁提取物水解液
第三步,白头翁提取物水解液,经过DlOl或AB-8或ADS-17大孔树脂吸附,依次用水、 30-40%乙醇、50-80%乙醇、95%乙醇洗脱,收集50-80%乙醇洗脱部分,即得BTW58组分。经抗肿瘤药理实验,证明BTW58组分为白头翁抗肿瘤有效部位。第四步、白头翁抗肿瘤有效部位经ODS反相硅胶柱,用甲醇和水(6:4-9:1)的混合液进行梯度洗脱,梯度洗脱液依次有五组,其体积配比分别为
第一组甲醇6份水4份; 第二组甲醇7份水3份; 第三组甲醇8份水2份; 第四组甲醇85份水15份; 第五组甲醇9份水1份;
第五步、收集甲醇85份水15份的洗脱部分,经kphadex LH-20柱甲醇-水7 :3洗脱, 得到化合物I,经对照品比较及LC/MS/MS测试,该化合物为3-0- α -L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) [β-D-吡喃葡萄糖-(1 — 4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷。实施例6、
第一步,将白头翁药材粉碎成粗粉,用70%乙醇浸泡0. 5-2h,6-12倍量加热回流提取 2-3次,每次l-3h,过滤,合并滤液。上述滤液于50-70°C减压浓缩至0. 5-1. Og生药材/mL, 无醇味,0-4°C冷藏过夜,析胶,滤过,即得白头翁提取物。第二步,白头翁提取物水溶液中加入氢氧化钠溶液调到PH10-13,加热沸腾4-10 小时,每30-60分钟测PH,保持在PH10-13,放冷,加盐酸溶液,调PH 3-7,离心,去沉淀,即得白头翁提取物水解液
第三步,白头翁提取物水解液,经过DlOl或AB-8或ADS-17大孔树脂吸附,依次用水、 30-40%乙醇、50-80%乙醇、95%乙醇洗脱,收集50-80%乙醇洗脱部分,即得BTW58组分。经抗肿瘤药理实验,证明BTW58组分为白头翁抗肿瘤有效部位。第四步、白头翁抗肿瘤有效部位经ODS反相硅胶柱,用甲醇和水(64-9:1)的混合液进行梯度洗脱,梯度洗脱液依次有五组,其体积配比分别为
第一组甲醇6份水4份; 第二组甲醇7份水3份; 第三组甲醇8份水2份; 第四组甲醇85份水15份; 第五组甲醇9份水1份;第五步、收集甲醇85份水15份的洗脱部分,经kphadex LH-20柱甲醇-水7 :3洗脱, 得到化合物I,经对照品比较及LC/MS/MS测试,该化合物为3-0- α -L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) [β-D-吡喃葡萄糖-(1 — 4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷。实施例7、
第一步,将白头翁药材粉碎成粗粉,用95%乙醇浸泡0. 5-2h,6-12倍量加热回流提取 2-3次,每次l-3h,过滤,合并滤液。上述滤液于50-70°C减压浓缩至0. 5-1. Og生药材/mL, 无醇味,0-4°C冷藏过夜,析胶,滤过,即得白头翁提取物。第二步,白头翁提取物水溶液中加入氢氧化钠溶液调到PH10-13,加热沸腾4-10 小时,每30-60分钟测PH,保持在PH10-13,放冷,加盐酸溶液,调PH 3-7,离心,去沉淀,即得白头翁提取物水解液
第三步,白头翁提取物水解液,经过DlOl或AB-8或ADS-17大孔树脂吸附,依次用水、 30-40%乙醇、50-80%乙醇、95%乙醇洗脱,收集50-80%乙醇洗脱部分,即得BTW58组分。经抗肿瘤药理实验,证明BTW58组分为白头翁抗肿瘤有效部位。第四步、白头翁抗肿瘤有效部位经ODS反相硅胶柱,用甲醇和水(6:4-9:1)的混合液进行梯度洗脱,梯度洗脱液依次有五组,其体积配比分别为
第一组甲醇6份水4份; 第二组甲醇7份水3份; 第三组甲醇8份水2份; 第四组甲醇85份水15份; 第五组甲醇9份水1份;
第五步、收集甲醇85份水15份的洗脱部分,经kphadex LH-20柱甲醇-水7 :3洗脱, 得到化合物I,经对照品比较及LC/MS/MS测试,该化合物为3-0- α -L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) [β-D-吡喃葡萄糖-(1 — 4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷。
研究发现,在白头翁的乙醇提取物中,含有3-0- α -L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) [ β-D-吡喃葡萄糖-(1 — 4)]_α -L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷,但含量明显低于经碱水解后的 BTW58组分。BTW58 组分 HPLC 分析
色谱柱,未加预柱,压力偏大=Kromasil (C18, 250*4. 6mm,5um);流速:lml/min ;柱温 350C ;进样量20ul ;洗脱系统甲醇-水系统
ELSD :SHIMADZU ELSD-LT II ;柱温40°C ;Press :350Kpa
梯度条件时间(min)甲醇(%)
0.0165
1070
3070
50100
55100 55.01 STOP
化合物I结构解析白色无定形粉末,硫酸乙醇显紫红色斑点,醋酐-浓硫酸反应阳性,Molish反应阳性, 提示该化合物可能为皂苷类化合物。化合物I用2N TFA完全酸水解得到齐墩果酸皂苷元和单糖,糖经衍生化后进行GC分析,检测到L-阿拉伯糖、L-鼠李糖和D-葡萄糖的存在。13C NMR谱共显示47个碳信号,包括30个苷元碳信号。其中苷元碳信号与齐墩果酸苷元基本一致。3位碳向低场位移至δ 88. 9,观位羰基碳信号在δ 180. 4,说明该化合物的糖是连在苷元的3位上。13C NMR谱中出现了 3个糖信号,结合NMR数据和水解衍生化后的GC分析结果,证明其分别为L-阿拉伯糖、L-鼠李糖和D-葡萄糖。另外,13C NMR谱中显示,在δ 106. 5,105. 1和101. 9位置出现3个糖对应的端基碳信号。经过上述分析,并禾口公开的文献[Opinya A. Ekabo, Norman R. Farnsworth, Henderson Τ. , et al. J Nat Prod, 1996,59:431-435]中的数据进行比较,证明化合物I的结构为3_0_ α -L-吡喃鼠李糖-(1 —2)[ β-D-吡喃葡萄糖-(1— 4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷。13C NMR 谱数据归属见表1。表1 化合物I的碳谱数据(Pyridine-(I6)
权利要求
1.3-0- α -L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) [ β -D-吡喃葡萄糖-(1 — 4) ] - α -L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷在制备抗肿瘤药物中的应用。
2.含有3-0-α -L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) [ β -D-吡喃葡萄糖-(1 — 4) ] - α -L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷的白头翁提取物在制备抗肿瘤药物中的应用。
3.3-0- α -L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) [ β -D-吡喃葡萄糖-(1 — 4) ] - α -L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷在制备抗肺癌、肝癌、胃癌、结肠癌、胶质瘤、乳腺癌、宫颈癌、白血病、淋巴癌药物中的应用。
4.含有3-0-α -L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) [ β -D-吡喃葡萄糖-(1 — 4) ] - α -L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷的白头翁提取物在制备抗肺癌、肝癌、胃癌、结肠癌、胶质瘤、乳腺癌、 宫颈癌、白血病、淋巴癌药物中的应用。
5.3-0- α -L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) [ β -D-吡喃葡萄糖-(1 — 4) ] - α -L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷的制备方法,其特征在于包括以下步骤第一步,将白头翁药材粉碎成粗粉,用水或0. 1-95%乙醇浸泡0. 5-池,6-12倍量加热回流提取2-3次,每次l_3h,过滤,合并滤液;上述滤液于50-70°C减压浓缩至0. 5-1. Og生药材/mL,无醇味,0-4°C冷藏过夜,析胶,滤过,即得白头翁提取物;第二步,白头翁提取物水溶液中加入氢氧化钠溶液调到PH10-13,加热沸腾4-10小时, 每30-60分钟测PH,保持在PH10-13,放冷,加盐酸溶液,调PH 3_7,离心,去沉淀,即得白头翁提取物水解液;第三步,白头翁提取物水解液,经过DlOl或AB-8或ADS-17大孔树脂吸附,依次用水、 30-40%乙醇、50-80%乙醇、95%乙醇洗脱,收集50-80%乙醇洗脱部分,即得BTW58组分;经抗肿瘤药理实验,证明BTW58组分为白头翁抗肿瘤有效部位;第四步、白头翁抗肿瘤有效部位经ODS反相硅胶柱,用甲醇和水(37-100)的混合液进行梯度洗脱,梯度洗脱液依次有五组,其体积配比分别为第一组甲醇5份水5份; 第二组甲醇6份水4份; 第三组甲醇7份水3份; 第四组甲醇8份水2份; 第五组甲醇9份水1份;第五步、收集甲醇8份冰2份的洗脱部分,经kphadex LH-20柱甲醇-水7 3洗脱, 得到化合物I,经对照品比较及LC/MS/MS测试,该化合物为3-0- α -L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) [β -D-吡喃葡萄糖-(1 — 4)]-α -L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷。
6.根据权利要求2的用途,其中通过用乙醇水溶液提取白头翁,获得的含3-0-α -L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) [ β-D-吡喃葡萄糖-(1 — 4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷的白头翁提取物,以及通过用乙醇水溶液提取白头翁,并且通过碱水解反应获得而获得的含 3-0- α -L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) [ β -D-吡喃葡萄糖-(1 — 4) ] - α -L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷的白头翁提取物。
全文摘要
本发明涉及一种齐墩果酸皂苷类成分3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)[β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷的制备方法及其该成分抗肿瘤的用途。本发明还涉及来自白头翁(Pulsatillachinensis(Bunge)Regel)根茎的含有该化合物的提取物作为抗上述肿瘤的用途。上述肿瘤包括肺癌、肝癌、胃癌、结肠癌、胶质瘤、乳腺癌、宫颈癌、白血病、淋巴癌等。
文档编号A61K31/704GK102247393SQ201110142210
公开日2011年11月23日 申请日期2011年5月30日 优先权日2011年5月30日
发明者冯育林, 刘艳丽, 李俊, 杨世林, 简晖, 罗晓健, 罗颖颖, 许琼明, 陈兰英 申请人:江西本草天工科技有限责任公司
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