专利名称：一种具有降血糖活性的傣药提取物、制法、组合物与用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及从傣药猫须草Clerodendranthus spicatus (Thunb. ) C. Y. Wu ex H. W. Li中提取能够降血糖的提取物，这种提取物的制备方法，含有猫须草 Clerodendranthus spicatus (Thunb. )C. Y. Wu ex H. W. Li 提取物的药物组合物，以及 H^M· Clerodendranthus spicatus (Thunb. ) C. Y. Wu ex H. W. Li 提取物和其药物组合物作为治疗和预防糖尿病及其并发症等相关的代谢性疾病的药物和保健品。
背景技术：
糖尿病是一种全身慢性进行性疾病。由于胰岛细胞不能正常分泌胰岛素，因而胰岛素相对或绝对不足，以及靶细胞对胰岛素敏感性的降低，而引起糖、蛋白、脂肪和水、电解质代谢紊乱，使肝糖原和肌糖原不能合成。临床表现为血糖升高、尿糖阳性、糖耐量降低等， 长期患病会相继伴有一系列并发症，由于人们生活水平升高，生活习惯改变，我国糖尿病患者人数不断增加，成为仅次于印度世界上第二大国家。目前针对糖尿病的治疗药物，禁忌及不良反应较多，长期服用，容易导致肝毒性及消化道副作用问题。因此从传统药材中寻找活性强、副作用低有效药物成为解决该问题的新途径。傣药中肾茶是傣医常用的解药品种，经书记载可单用煎汤或开水浸泡当茶饮，具有清热解毒，利水消肿，利尿化石，养肾保肾，凉血止血等功能，现代研究表明肾茶中化学成分主要包括黄酮类(Tezuka et al. , 2000，Stampoulis et al. , 1999，Awale et al., 2001)、蔽类(Tezuka et al. , 2000，Stampoulis et al. , 1999，Awale et al. , 2001)、 酚酸类(Tezuka et al. , 2000, Akowuah et al. , 2005)、氨基酸类(张平，2000)、维生素、矿物质及挥发油类(Hossain et al. , 2008)。药理学研究表明，肾茶提取物具有利尿(Beaux et al. , 1999, Yuliana et al. , 2009, Adam et al. , 2009, Ting et al., 2009，Arafat et al. , 2008，Du Dat et al. , 1992)、排石(蔡华芳 et al. , 2008)、 改善慢性肾衰(张少贵，2008，蒋维晟，2009)、降血糖血脂(Sriplang et al. , 2007， Mohamed et al. , 2011)、抗炎(高南南 et al. , 1996，Yam et al. , 2010)、抗氧化 (MATK0WSKI, 2008，Akowuah et al. , 2004)、清除自由基(Akowuah et al. , 2005)、保肝 (Mohammed, 2011，Maheswari et al. , 2008)、提高机体免疫力(岑小波 and 王瑞淑， 1997)等药理活性，其中亲水性活性成分为酚酸类(李月婷，2003，林志民，2009)，亲脂性活性成分为橙黄酮、佩兰素、及3’ -羟基-5，6，7，4’ -四甲氧基黄酮(Akommh et al.， 2004)，针对猫须草及其提取物的研究开发，具有广阔的市场前景。
发明内容
本发明的目的在于从猫须草C/eroifefli/rafliAiAs■spicatos (Thunb. )C. Y. Wu ex H. W. Li中提取一种提取物。本发明的另一目的在于提供制备这种提取物的方法。本发明的又一目的在于提供药物组合物，包括猫须草Clerodendran thusspicatus (Thunb. ) C. Y. Wu ex H. W. Li提取物和制药领域中常用的载体如片剂、胶囊剂、颗粒剂等。本发明的又一目的在于提供猫须草^/评^而/？办浙沩狀即/⑵如·^ (Thunb. )C. Y. Wu ex H. W. Li 提取物和 / 或猫须草C/eroi/efli/ra/ ^^ spicatus (Thunb. )C. Y. Wu ex H. W. Li提取物的组合物在治疗和预防糖尿病及其并发症药物中的应用。本发明的又一目的在于提供猫须草^/日^而/？办浙沩狀即/⑵如·^ (Thunb. )C. Y. Wu ex H. W. Li 提取物和 / 或猫须草C/eroi/efli/ra/ ^^ spicatus (Thunb. )C. Y. Wu ex H. W. Li提取物的组合物在治疗和预防糖尿病及其并发症保健品中的应用。本发明的又一目的在于提供猫须草^/日^而/？办浙沩狀即/⑵如·^ (Thunb. )C. Y. Wu ex H. W. Li 提取物和 / 或猫须草C/eroi/efli/ra/ ^^ spicatus (Thunb. )C. Y. Wu ex H. W. Li提取物的组合物在治疗和预防糖尿病相关代谢类疾病药物中的应用。本发明的又一目的在于提供猫须草Clerodendranthus spicatus (Thunb. )C. Y. Wu ex H. W. Li 提取物和 / 或猫须草C/eroi/efli/ra/ ^^ spicatus (Thunb. )C. Y. Wu ex H. W. Li提取物的组合物在治疗和预防糖尿病相关代谢类疾病保健品中的应用。为完成本发明的目的，本发明实施以下技术方案 猫须草提取物提取工艺
(1)取收集后的猫须草药材，阴干，为提高提取率，将药材粉碎，粒度最高过200目筛。(2)取(1)中得到的药材粉末，加水为药材质量的10-30倍，于35-60°C进行回流提取，提取次数为1-3次。(3)取(2)中提取得到的药液，于旋转蒸发仪中进行浓缩，浓缩水浴温度不超过 60°C，最终得到相对密度为1. 15-1. 5的浸膏。(4)取(3)中得到的浸膏质量为20-50倍质量的树脂进行装柱，加入浸膏，用20-40 倍树脂柱体积的水进行洗脱，然后用20-40倍树脂柱体积的50-80%的乙醇进行洗脱，收集洗脱液。(5)取(4)中收集的洗脱液，于旋转蒸发仪中进行浓缩，浓缩水浴温度不超过 60°C，最终得到相对密度为1. 15-1. 5的浸膏。(6)取(5)中得到的浸膏，于真空干燥箱中进行减压干燥，加热温度不超过60°C， 干燥后最终得到猫须草提取物。得到的提取物可进行各种制剂成型。本发明还涉及含有作为活性成分的本发明提取物和常规药物赋形剂或辅剂的药物组合物。通常本发明药物组合物含有0. 1-95%重量的本发明提取物。本发明的提取物的药物组合物可根据本领域公职的方法制备。用于此目的时，如果需要，可将本发明提取物与一种或多种固体或液体药物赋形剂和/或辅剂结合，制成可作为药品或保健品的适当的施用形式或剂量形式。
具体实施例方式
通过以下实施例和试验例对本发明做进一步详细说明，但这并不是对本发明的具体限制。以下实施例有关的材料、设备等作说明如下
(Clerodendran thus spica tus (Thunb. ) C. Y. Wu ex H. W. Li) 实施例1 (肾茶提取物的制备)(1)取收集后的猫须草药材，阴干，为提高提取率，将药材粉碎，粒度80目筛。(2)取(1)中得到的药材粉末，加水为药材质量的20倍，于45°C进行回流提取，提取次数为2次。(3)取(2)中提取得到的药液，于旋转蒸发仪中进行浓缩，浓缩水浴温度为50°C， 最终得到相对密度约为1. 28的浸膏。(4)取(3)中得到的浸膏质量为30倍质量的树脂进行装柱，加入浸膏，用40倍树脂柱体积的水进行洗脱，然后用40倍树脂柱体积的80%的乙醇进行洗脱，收集洗脱液。(5)取(4)中收集的洗脱液，于旋转蒸发仪中进行浓缩，浓缩水浴温度为50°C，最终得到相对密度约为1. 28的浸膏。(6)取(5)中得到的浸膏，于真空干燥箱中进行减压干燥，加热温度为60°C，干燥后最终得到猫须草提取物。得到的提取物可进行各种制剂成型。实施例2 (猫须草玉米须颗粒制备)
(1)取收集后的猫须草药材，阴干，为提高提取率，将药材粉碎，粒度80目筛。(2)取(1)中得到的药材粉末，加水为药材质量的20倍，于45°C进行回流提取，提取次数为2次。(3)取(2)中提取得到的药液，于旋转蒸发仪中进行浓缩，浓缩水浴温度为50°C， 最终得到相对密度约为1. 28的浸膏。(4)取(3)中得到的浸膏质量为30倍质量的树脂进行装柱，加入浸膏，用40倍树脂柱体积的水进行洗脱，然后用40倍树脂柱体积的80%的乙醇进行洗脱，收集洗脱液。(5)取(4)中收集的洗脱液，于旋转蒸发仪中进行浓缩，浓缩水浴温度为50°C，最终得到相对密度约为1. 28的浸膏。(6)取玉米须，研碎，用去离子水加热回流提取3次，合并提取液，滤过。(7)取(6)中水提取物滤液减压浓缩至5倍，加95%乙醇使醇浓度70%_80%，静置过夜，离心沉淀，除蛋白，真空干燥备用。(8)取3倍量(5)及1倍量(7)中制备的浸膏，加总浸膏量的3倍量的乳糖及1倍量的糊精，用70%的乙醇制作软材，挤压式制粒，减压干燥，整粒最终得到猫须草玉米须颗粒。实施案例3 (猫须草提取物降血糖功能研究) 1、提取物制备
按照实施方案1中制备方法进行制备。2、动物灌胃
取小白鼠40只，体重20士2g，雌雄各半，分开喂养，空腹24h后，腹腔注射四嘧啶 200mg/kg，造成实验性糖尿病模型，48h.后，分为四组，每组10只，雌雄各半，并进行灌胃， 连续灌胃5天。灌胃剂量如下 第一组空白对照组，不灌胃第二组阳性对照组，灌胃降糖灵150mg/kg · d 第三组猫须草提取物低浓度组，灌胃100mg/kg · d 第四组猫须草提取物高浓度组，灌胃250mg/kg · d 3、取血第5次灌胃后18h.，按每次六只(每组各1只)进行摘眼球取血(0. 3mL/只)，并在每只试管中预先添加抗凝血剂柠檬酸三钠0. Igo摇勻后加6mol/L硫酸5mL和10%钨酸钠0. 7mL, 摇勻处理lOmin，后以3500r/min离心15min，得上清液即为血清。4、测量血糖含量
采用邻甲苯胺法进行测定(徐淑云，1991)。5、结果
通过比较可知，猫须草提取物高剂量组能够明显降低由四氧嘧啶引起的糖尿病模型的小白鼠血糖浓度，具体影响结果见表1。表1猫须草提取物对实验性高血糖小白鼠的血糖影响结果
权利要求
1.一种傣药猫须草 C/eroifefli/rafliAiAs spicatus (Thunb. )C. Y. Wu ex H. W. Li 提取物的制备方法，其特征在于，原药材猫须草，经干燥、粉碎，水提后，浓缩，经大孔树脂进行柱层析，得到提取物。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的粉碎所得的粒度大小从全草到过200目筛。
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的提取方法为提取温度为 35-60°C，提取次数为1-3次，所用水的体积为药材质量的10-30倍，得到提取液进行减压浓缩，得到相对密度为1. 15-1. 5的浸膏。
4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的柱层析方法为将20-50倍于权利要求3中得到浸膏质量的大孔树脂进行装柱，首先用20-40倍树脂柱体积的水进行洗脱，然后用20-40倍树脂柱体积的50-80%乙醇进行洗脱，收集洗脱液，进行浓缩。
5.一种如权利要求1所述的方法提取得到的傣药猫须草C/eroife/^ra/^Am spicatus (Thunb. ) C. Y. Wu ex H. W. Li 的提取物。
6.一种药物组合，其特征在于，包括药物有效剂量的，作为活性成分的如权利要求1所述的方法提取得到的猫须草^/eroofeeiZrafliAiAs spicatus (Thunb. )C. Y. Wu ex H. W. Li 提取物或/和猫须草原药材及药学上可接受的载体。
7.根据权利要求6中所述的药物组合制成制剂，其特征在于，该制剂为片剂、胶囊剂、 颗粒剂或丸剂。
8.如权利要求1所述方法提取的傣药猫须草spicatus(Thunb.) C. Y. Wu ex H. W. Li提取物在制备治疗和预防糖尿病及其并发症药物或保健品中的应用。
9.如权利要求1所述方法提取的傣药猫须草spicatus(Thunb.) C. Y. Wu ex H. W. Li提取物在制备治疗和预防糖尿病及相关代谢性疾病的药物或保健品中的应用。
全文摘要
本发明公开了从傣药猫须草(Clerodendranthusspicatus(Thunb.)C.Y.WuexH.W.Li)中提取的降血糖活性提取物，这种提取物的制备方法，含有猫须草(Clerodendranthusspicatus(Thunb.)C.Y.WuexH.W.Li)提取物的药物组合，以及猫须草提取物和其药物组合作为药物和保健品的应用，尤其是可用于制备治疗和预防糖尿病及其并发症等相关的代谢性疾病的药物和保健品。
文档编号A61P3/10GK102302545SQ20111018599
公开日2012年1月4日 申请日期2011年7月5日 优先权日2011年7月5日
发明者李光, 李学兰, 陈曦 申请人:中国医学科学院药用植物研究所云南分所