专利名称：一种从威灵仙中提取总皂苷的方法
技术领域：
本发明属于天然药物分离领域，特别是涉及一种从威灵仙中提取总皂苷的方法。
背景技术：
威灵仙，为双子叶植物毛茛科Ranunculaceae威灵仙Clematis chinensis Osbeck、棉团铁线莲(山蓼)C. hexapetala Pall.或东北铁线莲(黑薇)C manshurica Rupr.的干燥根及根茎。传统中医认为威灵仙性味辛、咸，温，归膀胱经，具有祛风除湿，通络止痛作用，用于风湿痹痛、肢体麻木、筋脉拘挛、屈伸不利、骨硬咽喉。现代医学研究表明威灵仙药材中含有威灵仙的根含皂甙、内酯、酚类、氨基酸、多糖等成分，其皂苷类成分为主要成分，多以齐墩果酸苷元为化学结构通式的三萜类皂苷，具有明显的抗炎、抗肿瘤以及提高人体免疫力的药理活性。赵英等发表的“威灵仙总皂苷抗肿瘤作用及其对癌细胞增殖周期的影响”以及夏伦祝等发表的“威灵仙总皂苷对小鼠免疫功能的影响”都通过实验证明威灵仙皂苷的作用。现有从威灵仙中提取总皂苷的方法，多为大孔树脂法。如夏伦祝等发表的“大孔吸附树脂分离纯化威灵仙总皂苷的工艺研究”公开的方法为威灵仙用70%乙醇回流提取后，上大孔树脂，水洗后分别用30%、50%、70%乙醇洗脱。专利(CN2005100408M. 2 ) “威灵仙总皂苷提取物、其制备方法及其在制备药物中的用途”，该专利公开的方法为取威灵仙药材，用20-60%浓度的乙醇液回流提取，提取液浓缩，过滤或离心，滤液或上清液上大孔树脂，依次用20-50%的碱水、水、20-30%乙醇液、50-70%乙醇液，洗脱至流出液无色，收集 50-70%乙醇洗脱液，减压蒸干，即得威灵仙总皂苷。还有专利(CN200510094339. 3) “威灵仙总皂苷及其对类风湿性关节炎的治疗作用”也是采用大孔树脂纯化得到总皂苷。此类方法存在能耗高，污染严重等技术缺点。
发明内容
本发明要解决的技术问题是克服现有提取技术的缺陷，提供一种从威灵仙中提取总皂苷的方法，该方法能耗低，污染小。为了解决上述技术问题，本发明采用以下技术方案来实现的
一种从威灵仙中提取总皂苷的方法，其特征在于取威灵仙药材粉碎，加4-8倍量 40-70%乙醇超声提取30-90分钟，提取2-3次，提取液滤过，加入超滤膜系统超滤，透过液再加入纳滤膜系统纳滤，浓缩液加入活性炭回流脱色，脱色液浓缩至无醇，加入水饱和正丁醇萃取，萃取液减压浓缩，干燥即得产品。所述的超声提取频率为20-40KHZ。所述的超滤膜为截留分子量3000-10000的中空纤维素膜，纳滤膜为截留分子量不大于800的中空纤维素膜。所述的活性炭为药用活性炭，用量为液体的1_3%。本发明的积极效果在于
31)采用超声提取，提取效率高，能耗低，溶出杂质少，利于后续纯化；
2)采用膜分离是物理除杂，不对产品造成破坏，又有浓缩作用，也解决了皂苷在水溶液中浓缩难的问题，能耗较低，废液产生较少；
3)整个工艺操作简单，所得产品含量高，生产成本低，易于工业化生产。下面将结合具体实施方式
进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
具体实施例方式实施例1
威灵仙药材粉碎20目，取^g，加入40L 40%乙醇超声提取(频率为20KHz)90分钟，滤出液体，再加20L40%乙醇溶液超声提取30分钟，滤出液体，再加20L40%乙醇溶液超声提取 30分钟，合并提取液滤过，加入截留分子量3000的中空纤维素超滤膜系统超滤，室温进行， 进口压力控制0. 5-0. 8MPa，透过液再加入截留分子量800的中空纤维素纳滤膜系统浓缩， 室温进行，进口压力控制0. 6-lMPa，浓缩液加1%量的药用活性炭回流脱色1小时，脱色液滤出活性炭，浓缩至无醇，加入等体积的水饱和正丁醇萃取3次，萃取液减压浓缩，真空干燥得白色威灵仙总皂苷，含量91. 5% (UV法)，收率81. 4%。实施例2
威灵仙药材粉碎40目，取^g，加入30L 70%乙醇超声提取(频率为40KHz)30分钟，提取3次，合并提取液滤过，加入截留分子量10000的中空纤维素超滤膜系统超滤，室温进行， 进口压力控制0. 4-0. 6MPa，透过液再加入截留分子量600的中空纤维素纳滤膜系统浓缩， 室温进行，进口压力控制0. 8-1.2MPa，浓缩液加3%量的药用活性炭回流脱色1小时，脱色液滤出活性炭，浓缩至无醇，加入2倍体积的水饱和正丁醇萃取2次，萃取液减压浓缩，真空干燥得白色威灵仙总皂苷，含量90. 1% (UV法)，收率86. 3%。实施例3:
威灵仙药材粉碎40目，取10kg，加入80L60%乙醇超声提取(频率为40KHz)30分钟，提取2次，合并提取液滤过，加入截留分子量3000的中空纤维素超滤膜系统超滤，室温进行， 进口压力控制0. 6-0. 8MPa，透过液再加入截留分子量800的中空纤维素纳滤膜系统浓缩， 室温进行，进口压力控制0. 8-1. OMPa，浓缩液加洲量的药用活性炭回流脱色1小时，脱色液滤出活性炭，浓缩至无醇，加入等体积的水饱和正丁醇萃取3次，萃取液减压浓缩，真空干燥得白色威灵仙总皂苷，含量94. 1% (UV法)，收率78. 3%。实施例4:
威灵仙药材粉碎20目，取20kg，加入160L60%乙醇超声提取(频率为40KHz) 30分钟， 提取2次，合并提取液滤过，加入截留分子量6000的中空纤维素超滤膜系统超滤，室温进行，进口压力控制0. 6-0. 8MPa，透过液再加入截留分子量800的中空纤维素纳滤膜系统浓缩，室温进行，进口压力控制0. 8-1. OMPa，浓缩液加3%量的药用活性炭回流脱色1小时，脱色液滤出活性炭，浓缩至无醇，加入等体积的水饱和正丁醇萃取2次，萃取液减压浓缩，真空干燥得白色威灵仙总皂苷，含量91. 3% (UV法)，收率76. H实施例5:
威灵仙药材粉碎40目，取20kg，加入120L50%乙醇超声提取(频率为40KHz) 30分钟，提取3次，合并提取液滤过，加入截留分子量6000的中空纤维素超滤膜系统超滤，室温进行，进口压力控制0. 6-0. 8MPa，透过液再加入截留分子量800的中空纤维素纳滤膜系统浓缩，室温进行，进口压力控制0. 8-1. OMPa，浓缩液加洲量的药用活性炭回流脱色1小时，脱色液滤出活性炭，浓缩至无醇，加入等体积的水饱和正丁醇萃取2次，萃取液减压浓缩，真空干燥得白色威灵仙总皂苷，含量90. 7% (UV法)，收率75. 3%。
权利要求
1.一种从威灵仙中提取总皂苷的方法，其特征在于取威灵仙药材粉碎，加4-8倍量 40-70%乙醇超声提取30-90分钟，提取2-3次，提取液滤过，加入超滤膜系统超滤，透过液再加入纳滤膜系统纳滤，浓缩液加入活性炭回流脱色，脱色液浓缩至无醇，加入水饱和正丁醇萃取，萃取液减压浓缩，干燥即得产品。
2.根据权利要求1所述从威灵仙中提取总皂苷的方法，其特征在于所述的超声提取频率为 20-40KHz。
3.根据权利要求1所述从威灵仙中提取总皂苷的方法，其特征在于所述的超滤膜为截留分子量3000-10000的中空纤维素膜，纳滤膜为截留分子量不大于800的中空纤维素膜。
4.根据权利要求1所述从威灵仙中提取总皂苷的方法，其特征在于所述的活性炭为药用活性炭，用量为液体的1_3%。
全文摘要
本发明涉及一种从威灵仙中提取总皂苷的方法，方法是将威灵仙药材粉碎，加4-8倍量40-70%乙醇超声提取30-90分钟，提取2-3次，提取液滤过，加入超滤膜系统超滤，透过液再加入纳滤膜系统纳滤，浓缩液加入活性炭回流脱色，脱色液浓缩至无醇，加入水饱和正丁醇萃取，萃取液减压浓缩，干燥即得产品。本方法运用超声提取和膜分离等技术，有着提取效率高、能耗低、污染少和适合工业化生产的优势。
文档编号A61P37/04GK102327335SQ20111021062
公开日2012年1月25日 申请日期2011年7月26日 优先权日2011年7月26日
发明者刘东锋, 李法庆 申请人:苏州宝泽堂医药科技有限公司