专利名称：一种三七皂苷及三七总氨酸的提取方法
技术领域：
本发明属于天然产物提取分离领域，特别是涉及一种以三七为原料制备三七皂苷及三七总氨酸的方法。
背景技术：
三七Panax notoginseng(Burk. )F. H. Chen,又名参三七、田七、山漆、金不换，五加科人参属植物，性温，味甘、微苦。功能主治散瘀止血，消肿定痛。用于各种内、外出血，胸腹刺痛，跌扑肿痛。《本草纲目》记载三七“颇似人参之味”，“止血散血定痛”能治一切血症。三七的有效成分包括三七皂苷、三七素、黄酮、挥发油等，其中三七不同生长部位含有的二十多种皂苷成分(三七皂苷)，现代药理研究表明，具有增加冠脉血流量，保护脑组织、扩血管和降压等作用；三七水溶性部位(主要成分为三七素)，现代药理研究表明，具有非常好的止血效果，是三七的主要止血成分。三七皂苷淡黄色无定形粉末，味苦，微甘。易溶于甲醇，乙醇和水，难溶于丙酮、乙醚和苯，易吸潮。三七总氨酸，主要成分为三七素(田七氨酸)，易溶于水，不溶于甲醇、乙醇、丙醇、丙酮等有机溶剂。三七皂苷是三七的主要有效成分，具有扩张血管，降低心肌耗氧量，抑制血小板凝集，降血脂，清除自由基，抗炎，抗氧化等作用。近年来，随着人们的生活水平不断提高，饮食结构及生活方式的变化，罹患心脑血管疾病的患者逐年增加。而三七皂苷对心脑血管方面疾病具有良好的药理作用，因此它的应用前景极为广阔。目前同时提取这两种物质的方法较少，大多是对某种物质的单一提取，造成三七药材的浪费。三七皂苷常用的提取方法有水煎醇沉法、乙醇回流法和渗漉法。水煎醇沉法醇沉后由于沉淀的吸附作用皂苷损失较大，因而提取率很低；乙醇回流法方法简便，工艺条件易于控制，但提取率较低；渗漉法提取率较高，操作简单，提取液杂质少，但是溶剂消耗过大，提取周期较长。对三七总氨酸的提取分离方法多是采用水或醇提取，Sephadex LH-20和CMSephadex C_25树脂柱分离，成本高，且分离量少。谭朝阳等发表的文献“三七有效成分的分离纯化研究”，该文献采用DlOl大孔树脂分离纯化三七总皂苷，采用732强酸型阳离子交换树脂和CM Sephadex C_25分离三七素。但该方法制备的三七皂苷与三七素含量均较低。
发明内容
本发明的目的是提供一种同时制备三七皂苷和三七总氨酸的方法。采用该方法能提高原料利用率，产品纯度较高。本发明是通过以下技术方案实现的一种三七皂苷及三七总氨酸的提取方法，其特征在于包含以下步骤I)提取将三七粉碎，加水提取2 4次，过滤，合并提取液；、
2)阳离子树脂柱分离将上述提取液调酸后上阳离子树脂柱吸附，先用少量去离子水洗，再用碱性溶液洗脱，分别收集下柱液、水洗液(I)和茚三酮反应阳性部分碱洗液;3)大孔树脂柱分离将上述下柱液和水洗液⑴合并，上大孔树脂柱吸附，先用3 7BV去离子水洗，再用5 8BV40 70%乙醇溶液洗脱，分别收集茚三酮反应阳性部分水洗液(III)和醇洗液(IV);4)三七总氨酸的纯化合并上述碱洗液(II)和水洗液(III)，加酸调节至中性，上 阴离子树脂柱脱色，先用中性去离子水或醇溶液洗脱，再用PHl 3的酸性溶液洗脱，收集洗脱液加有机溶剂沉淀I 3次得到三七总氨酸。5)三七皂苷的纯化向上述醇洗液(IV)中加入氧化镁,加热回流脱色,过滤,滤液浓缩干燥得到三七皂苷。所述步骤2)中阳离子树脂可选用强酸性阳离子树脂或弱酸性阳离子树脂。所述步骤2)中的碱性洗脱液可选用pH8 11的氢氧化钠、氢氧化钾、氨水溶液。所述步骤4)中的酸可选用盐酸、硫酸或磷酸。所述步骤4)中的有机溶剂可以选用甲醇、乙醇或丙酮，用量是洗脱液的I 3倍量。所述步骤5)中的氧化镁的用量是2 6 100(w/v)。综上所述，本发明具有以下优点I.本发明采用阴离子树脂脱色技术对三七总氨酸进一步纯化，使三七总氨酸吸附于阴离子树脂，用水和醇液分别清洗后，再用酸液洗脱，相当于一次浓缩的过程，此法具有路线短，操作简单，低能耗的优点；2.本发明采用氧化镁对三七皂苷进行脱色处理，脱色过程成本低，对环境无污染，设备要求低。下面将结合具体实施方式
进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
具体实施例方式实施例I :将三七粉碎取lKg，加IOL水回流提取2次，过滤，合并提取液，加盐酸调节至酸性，取600g001 X 7型强酸性阳离子树脂装柱，将酸性提取液注入吸附，先用500ml去离子水洗，再用2LpH8的氢氧化钠溶液洗脱，分别收集下柱液、水洗液(I)和茚三酮反应阳性部分碱洗液(II);将上述下柱液和水洗液(I)合并，上HPD450大孔树脂柱吸附，先用3BV去离子水洗，再用5BV40%乙醇溶液洗脱，分别收集茚三酮反应阳性部分水洗液(III)和醇洗液(IV)；三七总氨酸的纯化合并碱洗液(II)和水洗液(III)，加盐酸调节至中性，上D301大孔弱碱性阴离子树脂柱脱色，吸附流速为2. 5ml/min，吸附结束后，先用中性去离子水洗去杂质，再用PHl的盐酸洗脱，收集洗脱液加等量乙醇沉淀得到三七总氨酸7. 9g，三七素含量 92%。三七阜苷的纯化向上述醇洗液(IV)中加入50g氧化镁,加热回流脱色Ih,过滤，滤液浓缩干燥得到三七皂苷93. 8g，含量94%。实施例2 将三七粉碎取lKg，加8L水回流提取4次，过滤，合并提取液，加硫酸调节至酸性，取800gD151型弱酸性阳离子树脂装柱，将酸性提取液注入吸附，先用600ml去离子水洗，再用2. 5LpHll的氢氧化钾溶液洗脱，分别收集下柱液、水洗液(I)和茚三酮反应阳性部分碱洗液(II);将上述下柱液和水洗液(I)合并，上HPD600大孔树脂柱吸附，先用7BV去离子水洗，再用8BV70%こ醇溶液洗脱，分别收集茚三酮反应阳性部分水洗液(III)和醇洗液(IV)；三七总氨酸的纯化合并碱洗液(II)和水洗液(III)，加硫酸调节至中性，上D293 大孔强碱性阴离子树脂柱脱色，吸附流速为2. 5ml/min，吸附结束后，先用30%こ醇洗去杂质，再用PH3的盐酸洗脱，收集洗脱液加等量甲醇沉淀，滤出沉淀加水溶解，再加入甲醇沉淀2次，得到三七总氨酸8. 2g，三七素含量89 %。三七皂苷的纯化向上述醇洗液(IV)中加入70g氧化镁，加热回流脱色2h，过滤，滤液浓缩干燥得到三七皂苷89. 3g，含量96%。实施例3 将三七粉碎取2Kg，加15L水回流提取3次，过滤，合并提取液，加盐酸调节至酸性，取lKg001X7型强酸性阳离子树脂装柱，将酸性提取液注入吸附，先用I. 5L去离子水洗，再用5LpH9的氨水溶液洗脱，分别收集下柱液、水洗液(I)和茚三酮反应阳性部分碱洗液
(II);将上述下柱液和水洗液(I)合并，上HPD500大孔树脂柱吸附，先用4BV去离子水洗，再用6BV50%こ醇溶液洗脱，分别收集茚三酮反应阳性部分水洗液(III)和醇洗液(IV)；三七总氨酸的纯化合并碱洗液(II)和水洗液(III)，加磷酸调节至中性，上D215大孔强碱性阴离子树脂柱脱色，吸附流速为2. 5ml/min，吸附结束后，先用中性去离子水洗去杂质，再用PH2的磷酸洗脱，收集洗脱液加两倍量丙酮沉淀，滤出沉淀加水溶解，再加入丙酮沉淀I次得到三七总氨酸14. lg，三七素含量91 %。三七皂苷的纯化向上述醇洗液(IV)中加入150g氧化镁，加热回流脱色I. 5h，过滤，滤液浓缩干燥得到三七皂苷191. 4g，含量93%。实施例4 将三七粉碎取10Kg，加90L水回流提取2次，过滤，合并提取液，加硫酸调节至酸性，取5Kg001 X 7型强酸性阳离子树脂装柱，将酸性提取液注入吸附，先用6L去离子水洗，再用22LpH10的氢氧化钠溶液洗脱，分别收集下柱液、水洗液(I)和茚三酮反应阳性部分碱洗液(II);将上述下柱液和水洗液(I)合并，上HPD450大孔树脂柱吸附，先用5BV去离子水洗，再用7BV55%こ醇溶液洗脱，分别收集茚三酮反应阳性部分水洗液(III)和醇洗液(IV)；三七总氨酸的纯化合并碱洗液(II)和水洗液(III)，加硫酸调节至中性，上D392大孔强碱性阴离子树脂脱色，吸附流速为2. 5ml/min，吸附结束后，先用40%こ醇洗去杂质，再用pH2的盐酸洗脱，收集洗脱液加等量こ醇沉淀得到三七总氨酸73. 9g，三七素含量90%。三七皂苷的纯化向上述醇洗液(IV)中加入50g氧化镁，加热回流脱色lh，过滤，滤液浓缩干燥得到三七皂苷869g，含量91 %。
权利要求
1.一种三七皂苷及三七总氨酸的提取方法，其特征在于包含以下步骤 1)提取将三七粉碎，加水提取2 4次，过滤，合并提取液； 2)阳离子树脂柱分离将上述提取液调酸后上阳离子树脂柱吸附，先用少量去离子水洗，再用碱性溶液洗脱，分别收集下柱液、水洗液(I)和茚三酮反应阳性部分碱洗液(II)； 3)大孔树脂柱分离将上述下柱液和水洗液(I)合并，上大孔树脂柱吸附，先用3 7BV去离子水洗，再用5 8BV40 70%こ醇溶液洗脱，分别收集茚三酮反应阳性部分水洗液(III)和醇洗液(IV); 4)三七总氨酸的纯化合并上述碱洗液(II)和水洗液(III)，加酸调节至中性，上阴离子树脂柱脱色，先用中性去离子水或醇溶液洗脱，再用PHl 3的酸性溶液洗脱，收集洗脱液加有机溶剂沉淀I 3次得到三七总氨酸。
5)三七皂苷的纯化向上述醇洗液(IV)中加入氧化镁,加热回流脱色I 2h，过滤，滤液浓缩干燥得到三七皂苷。
2.如权利要求I所述的ー种三七皂苷及三七总氨酸的提取方法，其特征在于所述步骤2)中阳离子树脂可选用强酸性阳离子树脂或弱酸性阳离子树脂。
3.如权利要求I所述的ー种三七皂苷及三七总氨酸的提取方法，其特征在于所述步骤2)中的碱性洗脱液可选用pH8 11的氢氧化钠、氢氧化钾、氨水溶液。
4.如权利要求I所述的ー种三七皂苷及三七总氨酸的提取方法，其特征在于所述步骤4)中的酸可选用盐酸、硫酸或磷酸。
5.如权利要求I所述的ー种三七皂苷及三七总氨酸的提取方法，其特征在于所述步骤4)中的有机溶剂可以选用甲醇、こ醇或丙酮中的ー种，用量是洗脱液的I 3倍量。
6.如权利要求I所述的ー种三七皂苷及三七总氨酸的提取方法，其特征在于所述步骤5)中的氧化镁的用量是2 6 100 (w/v) 0
全文摘要
本发明提供一种三七皂苷及三七总氨酸的提取方法。方法步骤包括将三七粉碎，加水提取2～4次，过滤，合并提取液，过阳离子树脂柱层析，收集下柱液、水洗液(I)和碱洗液(II)，合并下柱液和水洗液(I)，上大孔树脂柱层析，收集水洗液(III)，醇洗液(IV)，合并洗脱液(II)和(III)，上阴离子树脂柱脱色，脱色液浓缩至小体积，加有机溶剂沉淀1～3次得到三七总氨酸；醇洗液(IV)中加入氧化镁回流脱色，滤除氧化镁，浓缩干燥得三七皂苷。本发明同时制得三七皂苷和三七总氨酸，原料利用率高，且操作简单，易于工业化放大生产。
文档编号A61P7/04GK102648926SQ20111004530
公开日2012年8月29日 申请日期2011年2月25日 优先权日2011年2月25日
发明者刘东锋, 李法庆 申请人:苏州宝泽堂医药科技有限公司